Universidad Nacional Autnoma de

Mxico.

Facultad de Qumica.

Laboratorio de Orgnica I.

Informe de Practica
Cromatografa en capa fina.

2016-2

Resumen
La cromatografa en capa fina es un mtodo de separacin muy til, que permite
determinar la pureza de un compuesto, comparar la pureza de otros compuestos y
realizar el seguimiento de una reaccin.
Para esta prctica se realizaron varias cromatografas en capa fina. Se prepararon
las placas cromatogrficas en porta-objetos utilizando slica-gel como soporte en
la fase estacionaria.
Se realizaron pruebas de cromatografa a diversas tabletas cuyo contenido era
paracetamol-cafena, las cuales eran Excedrin y Sedalmerck.
Se realizaron varias pruebas para determinar los efectos de la concentracin y del
eluyente en la cromatografa; tambin se realizaron pruebas de identificacin y de
pureza de las sustancias.
Se determin el Rf de cada componente en cada prueba.
Antecedentes
La cromatografa es una tcnica de separacin extraordinariamente verstil que
presenta distintas variantes. En toda separacin cromatogrfica hay dos fases
(slida, lquida o gas) una mvil y otra estacionaria, que se mueven una con
respecto de la otra manteniendo un contacto ntimo. La muestra se introduce en la
fase mvil y los componentes de la muestra se distribuyen entre la fase
estacionaria y la mvil. Los componentes de la mezcla a separar invierten un
tiempo diferente en recorrer cada una de las fases, con lo que se produce la
separacin. Si un componente est la mayor parte del tiempo en la fase mvil el
producto se mueve rpidamente, mientras que si se encuentra la mayor parte en la
fase estacionaria, el producto queda retenido y su salida es mucho ms lenta.
La cromatografa de capa fina se conoce normalmente por sus siglas en ingls
(TLC, thin layer chromatography). Es una tcnica muy utilizada para la

identificacin y determinacin de pureza de compuestos. Tambin puede

utilizarse como tcnica de separacin (cromatografa de capa fina TLC
preparativa) a muy pequea escala. En esta tcnica la fase estacionaria es una
capa fina de gel de slice u otro soporte con propiedades adsorbentes (en nuestro
caso de 25 mm de espesor) dispuesta sobre un soporte de vidrio o aluminio que
denominaremos placa. El eluyente o fase mvil ser la mezcla de disolventes
adecuada.
La muestra aplicada en la capa es adsorbida en la superficie del material por la
accin de fuerzas electrostticas. Luego, cuando la capa es expuesta a un flujo
por accin capilar, se inicia una competencia de enlaces entre los sitios activos
del adsorbente y la sustancia con el solvente. Los adsorbentes ms utilizados
(soportes) en la cromatografa de capa fina son: slica gel, xido de aluminio,
celulosa, poliamidas.
Los eluyentes ms usados son: acetato de etilo, tolueno, benceno y acetona.
Los reveladores ms usados comnmente son la luz UV, I2, H2SO4, KMnO4 y
vainillina.
Una vez que la placa ha sido revelada nos encontramos con una serie de manchas
circulares. Si la separacin ha sido buena cada una de ellas se corresponder a un
nico compuesto de la mezcla inicial. Es importante tener en cuenta que un
mismo compuesto corre siempre de la misma forma en cromatogramas realizados
en las mismas condiciones (mismo soporte y mismo eluyente). Para describir las
propiedades cromatogrficas de cada compuesto se define el factor de retencin
Rf. El Rf es una relacin de la distancia recorrida por una sustancia en
comparacin con el punto ms lejano alcanzado por el disolvente. En general, el
Rf es inversamente proporcional a la relacin de los tiempos de elucin que se
observa durante la cromatografa.
Los factores que influyen en la separacin de la cromatografa son la polaridad,
eluyente, concentracin y pureza.
Resultados

Esquemas del revelado de las placas cromatogrficas realizadas durante esta

prctica.
Discusin
Para la prueba de concentracin, se observ que el Rf vara de forma
directamente proporcional a la concentracin de la muestra en la placa. Para las
posteriores determinaciones, se decidi trabajar con una concentracin de 3 gotas
para todas las muestras, pues el Rf presenta un valor medio a esa concentracin.
Para las pruebas del efecto del eluyente, se observ una relacin con la polaridad
del disolvente y la polaridad de los componentes de la muestra: el hexano,
sustancia no polar, fue incapaz de desplazar a los componentes de la muestra.
Ambos componentes son sustancias de polaridad media; al ser el hexano una
sustancia no polar, su capacidad de elucin result nula para estos compuestos.
El acetato de etilo, eluyente de polaridad media, mostr una capacidad de elucin
media. El metanol, sustancia polar, mostr una capacidad de elucin alta. Se
determin al acetato de etilo como eluyente ideal, pues los valores de Rf se
mostraron ms cercanos a 0.5 con este eluyente. En ambos eluyentes, la elucin
del paracetamol fue mayor a la de la cafena; esto debido a la polaridad del
soporte. El compuesto con menor polaridad presentar mayor elucin con un
soporte de baja polaridad.
Para la prueba de pureza, utilizando acetato de etilo como eluyente, al comparar
la elucin de excedrin con una muestra de cafena pura, se mostr que el Rf para
la cafena tanto en la de excedrin como en la muestra pura, obtuvo el mismo
valor. Esto implica que la tableta contiene cafena pura en su composicin.
Para las pruebas de identificacin, utilizando acetato de etilo y metanol como
eluyentes, se obtuvieron los mismos resultados para ambas pruebas: la tableta
excedrin, una tableta de Sedalmerck y la muestra de cafena pura. Las pruebas
utilizando Metanol mostraron una elucin mayor por la polaridad del eluyente.
Conclusin
La cromatografa de capa fina es un mtodo de separacin e identificacin parcial
sumamente til. Permite determinar los distintos componentes de una sustancia.

Aunque para conocer totalmente su composicin, hara falta un anlisis por

RMN, infrarrojo o UV.
La concentracin afecta directamente a la elucin en una placa cromatogrfica.
Una concentracin de 3 gotas es considerada como ideal para obtener un Rf
ptimo.
La polaridad del eluyente afecta directamente la elucin de los componentes en la
placa cromatogrfica. Un eluyente de polaridad media es considerado para
obtener un Rf ptimo.
Clculos
=

Distancia que recorrela muestra desde el punto de aplicacion

Distancia que recorre el disolvente hastael final del eluyente

Ejemplo: Rf para la pureza (Rfpara+caf y Rfcaf)

Distancia entre lneas: 3.8cm; distancia lnea-cafeina: 1.2cm; distancia lneapara+caf: 1.6cm
1.2

= 3.81 = 0.315
1.6

+ = 3.81 = 0.421
Bibliografa
- Anderson Guarnizon F, Pedro N. Martinez. Experimentos de qumica orgnica:
con enfoque en ciencias de la vida. Colombia: Elizcom, p.p 101-107.
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/6.-CROMATOGRAFIA_26249.pdf