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RECUENTO
TOTAL DE
HONGOS Y
Microbiologa Agroindustrial
Paulino Ninaquispe
III.
MATERIALES
Lenteja
verde
(Muestra).
Tubos de ensayo.
Placas Petri.
Matraz.
Agar nutritivo.
Pipetas.
Solucin
salina
fisiolgica.
Rejilla.
Oxitetraciclina
(Capsula).
Marcador.
Asa Drigalsky.
Agua destilada.
Mecheros.
Autoclave.
Algodn y pabilo.
Cocina elctrica.
Balanza electrnica.
Estufa.
Microbiologa Agroindustrial
Paulino Ninaquispe
IV.
MTODOS
PRIMERA PARTE.
Preparamos la cantidad de solucin de agar Nutritivo necesaria.
1000 ml65 gr
400 mlx
x=26 gr
Microbiologa Agroindustrial
Paulino Ninaquispe
Solucin de
Agar Nutritivo.
Agregado de Agar
Nutritivo a las Placas
Solucin de
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SEGUNDA PARTE.
En un matraz agregamos 90ml de SSF y 10gr de muestra y
diluimos, esta sera nuestra primera dilucin de 10-1.
Y preparamos 12 tubos de ensayo con 9ml de SSF.
Y agregamos un 1ml de la primera dilucin a 3 tubos de ensayo,
a cada uno respectivamente. Y esta seria nuestra segunda
dilucin de 10-2.
Y luego realizamos el mismo paso para el segundo, tercer y
cuarto trio de tubos de ensayo. Obteniendo as las diluciones de
10-3, 10-4 y 10-5.
Luego de realizar las diluciones, sembramos por superficie con
el asa Drigalsky, en cada siembra introducimos el asa en
alcohol, y finalmente flameamos el asa y la dejamos enfriar, de
esta manera esterilizamos el asa para cada uso.
Las placas sembradas se incuban finalmente a temperatura
ambiente, pero envueltas en papel.
Solucin de la
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Paulino Ninaquispe
Siembra por
superficie con el Asa
Drigalsky.
Incubacin a
Temperatura ambiente y
envueltas en papel.
V. RESULTADOS
RECUENTO DE COLONIAS POR DILUCIONEN PLACAS.
DILUCIONES/RECU
ENTO EN PLACAS
Placa N1
Placa N2
Placa N3
10-2
10-3
10-4
156
10-5
DILUCIONES/RECUEN
TO DE PLACAS
Placa
N1
Placa
N2
Placa
N3
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PROMEDIO
RECUENTO
DE
10-2
400gr/colonias
10-3
3000gr/colonias
10-4
156
533333,33gr/colo
nias
10-5
266666,66gr/colo
nias
VI. DISCUSIN
Segn Bossert y Kosson (1997)
El conteo de poblaciones microbianas por dilucin en placa es un mtodo
simple y rpido para la cuenta viable de clulas microbianas en el suelo. Sin
embargo, la cuenta obtenida es generalmente 10 a 100 veces menos que
aquella determinada por cuenta directa por microscopia.
En la prctica realizada, las razones para esta discrepancia incluyen los
errores ms frecuentes que se cometen, como por ejemplo: que durante la
realizacin de las diluciones no se logre separar perfectamente los
agregados bacterianos y ms de una bacteria forme una colonia, que el
personal que est trabajando no cumpla con los requerimientos necesarios,
que no se aplique una buena esterilizacin, que durante el recuento se
pueden producir dificultades ocasionadas por la carencia de uniformidad en
la extensin de los microorganismos, etc.
Segn Ramrez (1992)
Microbiologa Agroindustrial
Paulino Ninaquispe
VII. CONCLUSIONES
Once de las doce placas Petri cultivadas no se encuentran en el rango
de 30-300 colonias, y el mximo que creci fue de 8 colonias y el
mnimo 1. Excepto la tercera placa con dilucin 10 -4 en la cual
crecieron 156 colonias, lo cual se encuentra en el rango.
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VIII.
REFERENCIA
BIBLIOGRFICA
Bossert I. D. and Kosson D. S. 1997. Measurement of hydrocarbon
degradation in soils. In: Manual of environmental microbiology. C. J. Hurst, G.
R. Knudsen, M. J. McInerney, L. D. Stetzenbach, M. V. Walter (Eds). American
Society for Microbiology Press, pp. 738-752.
Edwards D. Nitroimidazoles. En: Finch RG, Greenwood D, Norrby SR, Whitley
RJ, editors. Antibiotic and chemotherapy. 8th ed. Philadelphia: Churchill
Livingstone, 2003; p. 385-92.
Ramrez (1992) Toxigenic Aspergillus Species. In: Food Microbiology.
Fundamentals and Frontiers. 2nd ed. Doyle M. Beuchat L. & Montville T.
(Eds.) ASM Press. USA. 451-465.
IX. ANEXOS
FORMULAS.
Promedio de colonias=
Microbiologa Agroindustrial
Paulino Ninaquispe
DILUCION 10-2.
PlacaN 1 :8 x 102 = 800
PlacaN 2 : N 1 x 102 = 100
800+100+300
=400 gr /colonias
3
DILUCION 10-3.
PlacaN 1 :4 x 103 = 4000
PlacaN 2 : N 3 x 103 = 3000
4000+3000+2000
=3000 gr /colonias
3
DILUCION 10-4.
PlacaN 1 :2 x 104 = 20000
PlacaN 2 : N 2 x 104 = 20000
DILUCION 10-5.
PlacaN 1 :6 x 105 = 600000
PlacaN 2 : N 1 x 105 = 100000
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Promediodecolonias=
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