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Gnero Streptococcus

Prof. Adjunto Ary Fernandes Jnior


Departamento de Microbiologia e Imunologia
Instituto de Biocincias - UNESP
Distrito de Rubio Jnior s/n

Botucatu/ SP /Brasil
ary@ibb.unesp.br

CLASSIFICAO

Famlia Streptococcaceae
Gnero Streptococcus
111 espcies e 22 subespcies
Importncia: Animais de sangue quente albergam uma microbiota de
estreptococos nas mucosas dos tratos respiratrio superior, genital inferior
e quase em todo o trato digestrio (Enterococos)

http://www.bacterio.cict.fr/s/streptococcus.html

Famlia Streptococcaceae
GRUPO I

GRUPO II

Facultativos

Anaerbios Estritos

Streptococcus

Peptococcus

Enterococcus

Aerococcus, Lactococcus
Leuconostoc, Pediococcus

Gemella, Alloiococcus
Vagococcus,

Tetragenococcus
Globicatella, Helcococcus

Peptostreptococcus
Ruminococcus

Coprococcus
Sarcina

Hibridizao DNA-RNAr e
Sequenciamento de RNAr 16S

Streptococcus

Enterococcus

Lactococcus

Diferentes espcies
(piognicas),
estreptococos do grupo
D no enterococos,
estreptococos viridans,
pneumococo

Antigos
enterococos do
grupo D

Estrepto do Grupo
N (estreptococos
do cido ltico)

(10 - 40oC)

(To tima 30oC)

(25 - 37oC)

E. faecalis
E. faecium

L. lactis, L. cremoris,
L. thermophilus,
L. raffinolactis

CLASSIFICAO
Shotmuller et al. (1903): gar Sangue
Brow (1919): Introduziu os termos Alfa, Beta e Gama hemlise
(1895-1981)

1933 - Rebecca Lancefield

Caractersticas antignicas: Carboidrato C

Grupos sorolgicos de Lancefield


A B C D F G rea mdica
HKLMNOPQRSTUV

Obs - S. pneumoniae e estreptococcus


viridans - No Agrupveis

Classificao de Lancefield e principais espcies de importncia na


rea mdica humana e veterinria
Grupo (hemlise)

Polissacardeo grupoespecfico

Espcie

(-hemlise)

ramnose-Nacetilglicosamina

S. pyogenes

(-hemlise)

ramnose-glicosamina e
galactose

S. agalactiae

(-hemlise)

ramnose-Nacetilgalactosamina

S. equi, S. equisimilis,
S. zooepidemicus,
S. dysgalactiae

(- hemlise, NH)

cido teicico glicerol com


D-alanina e glicose

S. bovis

( ()-hemlise, NH)

glicopiranosil-Nacetilgalactosamina

S. milleri

- Viridans (-hemlise,
NH)

No possui polissacardeo
grupo-especfico

S. mutans, S. sanguis,
S. salivarius, S. mitis

- (-hemlise)

No possui polissacardeo
grupo-especfico

S. pneumoniae

Grupos de espcies de Streptococcus de acordo com sequncia do rRNA 16 S

(Koneman, 2001)

= Grupo S. milleri

Nobbs, et al. ( 2009) (Microbiology and Molecular Biology Reviews, vol. 73, n.03, 407-450, 2009)

Aspectos de estudos dos Streptococcus


Estrutura Antignica = Fatores de virulncia: Antgenos de
Superfcie (Parede, Cpsula), Enzimas e Toxinas (Exotoxinas)
(fatores de difuso da bactria)
Doenas: Cocos piognicos Supurativas
( Auto-imumes em Humanos Febre Reumtica e
Glomerulonefrite)
Diagnstico: Material Clnico: Depende da Doena;
Isolamento: Meios Ricos (Agar Sangue)
Identificao: Testes Bioqumicos (e Sorologia)

Sensibilidade (Antimicrobianos e condies ambientais):


--lactmicos (penicilinas, cefalosporinas), estreptomicina, cloranfenicol, SUT.
Alguns resistentes a amignoglicosdeos, fluoroquinolonas e tetraciclinas.
-Podem sobreviver no ps dessecado por semanas. Sensvel a temperaturas
entre 55 e 60C/30 min. (Pasteurizao do leite importante)

Principais doenas causadas por bactrias

CARACTERSTICAS GERAIS
Fluxograma para identificao dos cocos Gram positivos
Espcies de
Staphylococcus

Positivo

Teste da
coagulase

Positivo
Negativo

Cocos Gram
positivos

Staphylococcus
aureus

Teste da
catalase

Espcies de
Staphylococcus
coagulase
negativo (SCN)

Negativo
Espcies de
Streptococcus

Crescimento em
Agar Sangue

- Hemlise

- Hemlise

Crescimento na presena de
Bacitracina
No
Sensvel

S. pyogenes (estreptococos
do grupo A)

Sim
Resistente

Outro Streptococcus
- Hemoltico

Crescimento na presena
da optoquina
No
Sensvel

Sim
Resistente

S. pneumoniae

Streptococcus
- Hemoltico

CARACTERSTICAS GERAIS
Cocos Gram positivos (0,5 2,0 m), aos pares,
cadeias curtas (espcimes clnicos) ou longas (cultivos
lquidos)

Ary Fernandes Jnior

CARACTERSTICAS GERAIS
Cpsula (cido Hialurnico ou Polissacardica)
Septo

Parede
bacteriana

Cpsula de cido
hialurnico

Imveis
No esporulados

Gnero Streptococcus
Facultativos (Alguns Anaerbios; Capnfilos)
Homo-fermentativos cido ltico
(cuidado no cultivo)

Nutricionalmente exigentes
(Meio de cultura ideal Agar Sangue)
Colnias pequenas (puntiformes) (1,0mm)
Hemlise varivel
(aspecto muito importante para taxonomia)

Padres de Hemlise

-hemlise (completa)

Padres de Hemlise

- hemlise (parcial)

Padres de Hemlise

- hemlise (no hemoltico)

Diagnstico Laboratorial
Cultura:

Isolamento e Identificao
Material Clnico

gar sangue

Gram: CGP

Colnias (hemlise)
Catalase negativa
Identificao

Streptococcus pyogenes
Grupo A de Lancefield
N-acetilglicosamina e ramnose

-hemoltico

Aspectos Gerais
Considerado um dos patgenos mais frequente em humanos

Presena entre 10 e 20% da populao


(Homem o reservatrio natural desta espcie)

Aspectos Gerais
Pode acometer qualquer faixa etria, porm mais
comum em crianas (5 e 15 anos)
(Faringite estreptoccica e Piodermites)
Apresenta quantidade significativa de enzimas e
toxinas Fatores de disseminao da bactria

Expresso dos genes de virulncia depende da


localizao da bactria no hospedeiro
(superficial ou profunda)

CARACTERSTICAS GERAIS
Cocos Gram positivos de 1 a 2 m de dimetro - cadeias

Colnias brancas com -hemlise

Cpsula de cido hialurnico


Cpsula de cido
hialurnico
Septo

Parede bacteriana

FATORES DE VIRULNCIA

Carboidrato Grupo
especfico (RamnoseN-acetilglicosamina)

FATORES DE VIRULNCIA
Protena M (120 tipos de gene emm: 100 sorotipos)
M-like (20 genes)
(Streptococcus pyogenes e S. equi)

Fator antifagoctico
Impede opsonizao
pelo complemento
Aderncia

FATORES DE VIRULNCIA
Membrana da clula
do hospedeiro

Receptor na clula
da mucosa do
hospedeiro
(Fibronectina)
Acido lipoteicico (LTA)
(Proteina M)

Parede Celular

Proteina M + LTA = Fibrila

Membrana plasmtica
do Streptococcus

Modificado de Ofek et al (1982)

FATORES DE VIRULNCIA

FATORES DE VIRULNCIA
Estreptolisina S
No imunognica
Lisa eritrcitos, neutrfilos e plaquetas

Estreptolisina O
Diagnstico de Febre reumtica
Lisa eritrcitos, neutrfilos e plaquetas

FATORES DE VIRULNCIA
Estreptoquinase (= Fibrinolisina)
Plasminognio

Plasmina
Dissolve

Fibrina

FATORES DE VIRULNCIA
DNAase (A a D)

Anticorpos DNAase

Hialuronidase

C5a peptidase
Inativa C5a fator quimiottico para neutrfilos e fagcitos

FATORES DE VIRULNCIA
TOXINAS (originalmente chamada de toxina eritrognica)
Exotoxinas pirognicas estreptoccicas Spe
(cepas lisogenizadas)

SpeA
SpeB
SpeC
SpeF
etc

SUPERANTGENOS

SUPERANTGENOS

Antgenos : 0,01 a 0,1 % clulas T


Superantgenos: 5 a 20% clulas T
Produo
excessiva de
citocinas

Escarlatina
Fascite necrosante
Sndrome do choque txico
estreptoccico

PATOGENICIDADE
Faringoamigdalites
Escolares (5 a 15 anos)
Mais comum no inverno (locais fechados)
Evoluo da doena Sinusite, Otite,
Meningite, Septicemia, Pneumonia.

Dor de garganta, Febre,


Aumento dos linfondos cervicais,
Exsudato purulento, Astenia,
Cefalia

PATOGENICIDADE
Escarlatina
Faringoamigdalite Exotoxina pirognica estreptoccica - Spe

Faringite,
acompanhada de
rash
eritematoso e lngua
em framboesa

PATOGENICIDADE
PIODERMITES
Impetigo

- Mais comum no vero


- Crianas de 2 a 5 anos

PATOGENICIDADE
PIODERMITES
Erisipela no bem conhecido mecanismo de transmisso
(vias areas superiores)

Sinais Sistmicos febre, calafrios, bacteremia

PATOGENICIDADE
PIODERMITES

Celulite

Inflamao local e sinais sistmicos

PATOGENICIDADE
PIODERMITES
Fascite Necrosante (= Gangrena Estreptoccica)

PATOGENICIDADE
PIODERMITES
Fascite Necrosante (designao bactria devoradora de carne)

PATOGENICIDADE
PIODERMITES

Sndrome do Choque Txico Estreptoccico (M1 ou M3)


Infeco de tecidos moles
Toxicidade sistmica (SpeA ou SpeC) Superantgenos

Choque e falncia de mltiplos orgos


Bacteremia e Fascite necrosante

SEQUELAS PS-ESTREPTOCCICAS
Doenas auto-imunes
FEBRE REUMTICA linhagens reumatognicas
Consequncia de faringoamigdalites (Sorotipos M1, M3, M5, M6, M18)

Leses inflamatrias

Corao, articulaes, tecido celular subcutneo e sistema nervoso


central

SEQUELAS PS-ESTREPTOCCICAS
FEBRE REUMTICA

Consequncias: Leso
progressiva de vlvulas
cardacas e artrite
progressiva

Reao cruzada com tropomiosina


cardaca e sarcolema do msculo
cardaco

SEQUELAS PS ESTREPTOCCICA
GLOMERULONEFRITE AGUDA linhagens nefritognicas
Faringoamigdalites (M1, M4, M12, M15)
Piodermites
(M49, M52, M55, M59-M61)

Excesso de complexos Ag-Ac nas


membranas dos glomrulos renais,
ativa o complemento e gera uma
reao inflamatria.

Inflamao aguda do glomrulo renal, com edema, hipertenso,


hemturia, oligria e proteinria

DIAGNSTICO
Bacterioscopia: Mtodo de Gram

Importante - PIODERMITES

DIAGNSTICO
Isolamento: Agar Sangue

DIAGNSTICO
Identificao

Prova de sensibilidade
bacitracina (0,004 U/disco),
em Streptococcus dos grupos
A, B, C e D de Lancefield.

Composto cromognico

PYR Enzima L-Pirrolidonil-arilamidase


(Mais sensvel)

L-Pirrilidonil--naftilamida

PYR:L- Pirrolidonil arilamidase


LAP: Leucina aminopeptidase

DIAGNSTICO
Identificao Sorolgica

DIAGNSTICO
Febre reumtica/Glomerulonefrite

Deteco de Anticorpos Estreptolisina O- ASO

Deteco de Anticorpos DNAase B Infeces cutneas

TRATAMENTO
Penicilina G
Eritromicina

Febre reumtica
Penicilina Benzatina (mensal) medida profiltica

Streptococcus agalactiae
Grupo B de Lancefield
ramnose-glicosamina e galactose

Beta hemoltico

Streptococcus agalactiae
Streptococcus da mastite (1887)

Aspectos Gerais

Indivduos sadios colonizados ( 40%) (trato intestinal


inferior e geniturinrio feminino)

Principal causador de sepsis, pneumonia e meningite em


recm nascidos

Caractersticas Gerais
Cocos gram positivos (0,6 a 1,2 m de ) - cadeias

Cpsula de polissacardeo Nove tipos sorolgicos

(Ia , Ia/c, Ib/c, II, IIc, *III, IV, V, VIII)


* mais frequente em mulheres e mais isolado

Fator Camp Camp teste positivo Identificao

FATORES DE VIRULNCIA
Cpsula de polissacardeo: Resduos de cido silico inibe ligao C3 bloqueando ativao do complemento
-Hemolisina: Citotxica para clulas (epiteliais e
endoteliais inclusive dos pulmes)
C5a peptidase: Inativa o C5a quimiottico para neutrfilos

e fagcitos
Neuraminidase, Hialuronidase, Protease, DNAase: (???)

PATOGENICIDADE
Doena neonatal de incio
precoce
(at 7 dias aps nascimento)

Adquiridas no tero ou
no momento nascimento
Pneumonia,
Meningite

Bacteremia,

Ia (35 a 40%), II (30%) e V


(15%)

PATOGENICIDADE
Doena neonatal de incio
tardio
(do 7o dia ao 3 ms vida)
Fonte exgena
Bacteremia e Meningite

Maioria sorotipo III

PATOGENICIDADE

Infeces em adultos Incidncia menor


Maior
em
gestantes,
trato
urinrio,
endometrite, amnionites, infeces de feridas,
Homens e mulheres - infeces de pele,
tecidos
moles,
bacteremias,
infeces
urinrias, pneumonia.

DIAGNSTICO
Bacterioscopia: Mtodo de Gram
lquor meningite

Secrees do trato respiratrio inferior


Exsudatos de feridas

DIAGNSTICO
Isolamento : Enriquecimento
Gestantes de alto risco
Rastreamento da colonizao em
mulheres entre a 35a e 37a
semana gestacional

Meio Lquido Todd-Hewitt


(gentamicina e cido nalidxico)
(Aumenta em at 50% o
isolamento)

Penicilina G ou
cefazolina 4 horas antes
do parto ou cefazolina
mulheres alrgicas

DIAGNSTICO
Isolamento - gar Sangue

DIAGNSTICO
Identificao: CAMP teste = Christie, Atkins e Munch-Petersen
(1944)

S. agalactiae
(N-acetil-esfingosina)

Hemlise
sinrgica

S. aureus
(Beta toxina)

DIAGNSTICO
Identificao:
Prova do hipurato de sdio pela enzima hipuricase

NIHIDRINA - GLICINA

DIAGNSTICO
Identificao:

TRATAMENTO
Penicilina
Cefalosporina
Eritromicina
Cloranfenicol

Infeces Graves: Penicilina + Aminoglicosdeo

Streptococcus pneumoniae
No agrupvel pela classificao de
Lancefield

Alfa Hemoltico

Streptococcus pneumoniae
(Pneumococo)

Aspectos Gerais
Primeiros relatos pneumonia 1881- Diplococcus
pneumoniae, 1974 S. pneumoniae

Notrio microrganismo
em mbito mundial

Aspectos Gerais
De 5 a 10% dos adultos so portadores no trato respiratrio
superior

Atualmente: considerado reemergente (plasticidade


gentica e resistncia a antimicrobianos)

Gravidade das infeces pneumoccicas: Crianas com


at dois anos e nos adultos em idosos ou no final da meia
idade

Caractersticas Gerais

Cocos de 0,5 a 1,2 m, formato oval agrupado ao pares

doi:10.1038/nrg820

Algumas cepas so capnfilas

Reao de Quellung

Permite diferenciar os 90 sorotipos distintos do polissacardeo


capsular de pneumococo epidemiolgica e diagnstica
(1, 3, 4, 5, 6A, 6B, 9V, 14, 18C, 19A, 19F e 23F)

FATORES DE VIRULNCIA
Citotxica (alvolos e
endoteliais), inflamao
pulmes, diminui
atividade de neutrfilos,
antifagocitrio, inibe
atividade de clulas
ciliadas.

Autolisina
Pneumolisina
Cpsula

CbpA

Protena A ligadora de
colina

IgA1Protease
Hialuronidase
Neuraminidase
NanA e NanB

Protena A da
superfcie do
pneumococo

PATOGENICIDADE
Pneumonia

Fatores de risco
Idade (extremos),
Inverno (ambientes fechados),
Infeces prvias do trato
respiratrio (gripe),
Etilismo,
Tabagismo,
Imunossupresso.

PATOGENICIDADE
Sinusite

Otite Mdia

PATOGENICIDADE
Meningite

15% dos casos de


meningite em crianas

30 a 50% dos casos de


meningite em adultos

DIAGNSTICO
Bacterioscopia: Mtodo de Gram

DIAGNSTICO
Isolamento

DIAGNSTICO
Identificao

Teste da Bile solubilidade

*Optoquina

(*Cloridrato de etil hidrocupreina)

(Desoxicolato de sdio)

DIAGNSTICO
Identificao sorolgica
Pesquisa AC na urina

TRATAMENTO
Penicilina G se sensvel

Cloranfenicol
Eritromicina

Sulfametoxazol-trimetropim
Tetraciclina

CONTROLE

Vacina pneumoccica polissacardica 23-valente: Inclui antgenos


de 23 sorotipos de pneumococos
(1, 2, 3, 4, 5, 6B, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19A, 19F, 20, 22F, 23F e 33F)

No administrada em crianas menores de 2 anos

Vacina Pneumoccica Conjugada 7-Valente (VPC-7- Prevenar) (Sete


sorotipos conjugados com uma mutante da toxina diftrica, a protena
CRM197) (EUA);

Vacina Pneumoccica Conjugada 13valente (VPC-13): VPC 7 + seis outros


antgenos (EUA)

Vacina Pneumoccica Conjugada 10-valente (Synflorix): (VPC 7 + 3


sorotipos conjugada com protena D, de H. influenzae e toxinas tetnicas e
diftricas) (Europa e outros pases)

Streptococcus do grupo
viridans
No agrupvel pela classificao de
Lancefield

Alfa Hemoltico

Aspectos Gerais
Maioria da microbiota do trato respiratrio e trato genital;

Endocardites (S. mitis, S.sanguis, S. salivarius)


(Problemas naturais nas vlvulas e/ou devido prteses
valvulares)

Enzima Glicosiltransferase (sacarose Glicanos insolveis


Adeso superfcies lisas dos dentesPlaca dentria (Cries)

Placa bacteriana

Adesinas

Aglutininas

A superfcie do dente forma uma pelcula (lipdeos e protenas, incluindo aglutininas salivares glicoproticas). Em seguida
colonizada primeiramente por bactrias (Streptococcus oralis, S. mitis, S. gordonii e S. sanguis) que expressam adesinas para
aglutininas. Outras bactrias colonizam segundo distribuio espacial e temporal usando receptores e adesinas formando a
placa dentria.

Estreptococcus viridans
Agentes etiolgicos da crie dental
(S. mutans, S. sanguis, S. salivarius,
S. mitis)

Streptococcus do grupo D
(cido teicico glicerol com D-alanina e glicose)

S. bovis

Endocardites infecciosas

Diagrama esquemtico para diferenciao de Streptococus alfa hemolticos

Alfa hemoltico em agar sangue

Teste da optoquina

Susceptvel
Resistente
S. pneumoniae
Bile esculina

Streptococcus do grupo viridans

PYR: Pirrolidanil arilamidase

Enterococcus

Streptococcus do grupo D

Enterococcus
(E. faecalis e E. faecium)
Grupo D de Lancefield
Acido teicico glicerol com D-alanina e glicose

Alfa Hemoltico ou no
hemoltico

Aspectos Gerais
Microbiota: Tratos gastrointestinal e biliar (vagina
e uretra masculina), Boca, (solo, alimentos, gua,
animais)
E. faecalis = 85 a 90% das doenas por Enterococcus
(menos propenso a resistncia)
E. faecium = 5 a 10% (mais propenso a resistncia).
Resistncia: Intrnseca (ex: AMINO, CEF, CLI,
OXA, LIN ) e aquisio de resistncia por mutao
(proteo ribossomo) ou plasmdios (PBP) e
transposons)
(Patgeno nosocomial da dcada de 90)

Aspectos Gerais
Cocos Gram positivos
Isolados ou cadeias curtas
Catalase negativo,
Anaerbio facultativo,
Imveis,
Menor exigncia nutricional,
Maior resistncia a agentes fsicos
Sensibilidade a PEN (AMP) (Comb. PEN
e Aminoglicosideos),
Preocupao com os VER

Arias & Murray. Nature Reviews Microbiology 10,


266-278 (April 2012)

Os principais fatores de risco para colonizao e infeco hospitalar com enterococos resistentes vancomicina (VRE) incluem
proximidade fsica para pacientes que esto infectados ou colonizados com VRE (ou os quartos destes pacientes); um longo
perodo de internao, internao em longa prazo instalaes, unidades cirrgicas ou unidades de terapia intensiva, a presena
de um cateter urinrio, e da administrao de mltiplos cursos de antibiticos. Muitos antibiticos aumentam a densidade de
organismos VRE no trato gastrointestinal, o qual, por sua vez, facilita a difuso destes organismos atravs de contaminao fecal
do ambiente hospitalar, incluindo objetos inanimados e nas mos dos trabalhadores dos cuidados de sade e visitantes. Os
enterococos podem sobreviver por longos perodos em superfcies ambientais, incluindo equipamento mdico, banheiros, grades
para camas e maanetas, e so tolerantes ao calor e algumas preparaes contendo lcool e cloro, IV, intravenosa.

Arias & Murray. Nature Reviews Microbiology 10, 266-278 (April 2012)

Na ausncia de antibiticos, clulas epiteliais intestinais de rato e clulas Paneth produzem o REGIII (lectina
de tipo C), o qual possui uma atividade antimicrobiana contra bactrias gram-positivas (prpura). A produo
de REGIII desencadeada pela presena de bactrias Gram-negativas (rosa); seus mAmps (microorganismoassociados padres moleculares), tais como o lipopolissacardeo membrana exterior (no lmen intestinal) e
flagelina (em tecidos subepiteliais), so reconhecidos por receptores de reconhecimento de padres, como
Toll-like receptor 4 (TLR4) e TLR5, respectivamente. b | administrao de antibiticos leva a uma reduo nas
bactrias Gram-negativas, que diminui a produo de REGIII por clulas epiteliais intestinais e clulas
Paneth. c | enterococos tirar vantagem desta reduo na secreo de REGIII a tornar-se os membros
dominantes da flora intestinal. IL-22, interleucina-22. Figura modificado, com permisso, de Ref. 144
(2010) American Society for Clinical Investigation.

Diagrama esquemtico para identificao de


estreptococos no hemolticos

No hemlise em agar sangue

Bile esculina

6,5% NaCl

Enterococcus

Estreptococos no hemoltico

Streptococcus do grupo D

Diagrama esquemtico para diferenciao de


Streptococus do grupo D e Enterococcus
Beta, alfa ou no hemoltico em agar sangue

Bile esculina positiva

6,5% NaCl
PYR: Pirrolidanilaril amidase

Enterococcus

Streptococcus do grupo D

Prova da bile esculina

Enterococcus S. bovis

Crescimento em 6,5% de
NaCl

Enterococcus S. bovis

Identificao Bioqumica de Estreptococos frequentes