Universidad de Guadalajara

Centro Universitario de Ciencias de la

Salud
Departamento de Patologa Microbiologa
Academia de Patologa
Patologa
Dr. Francisco Ramos Solano
Preparacin del tejido para estudio
patolgico
Teresa Madeleine Bravo Mata

Las tcnicas utilizadas para preparacin de tejidos para su estudio son muy numerosas, en esta
ocasin nos enfocamos en la tcnica de tincin con hematoxilina y eosina (H-E) de muestras
fijadas en formaldehido, ya que esta ltima es la que ms frecuente se estudia puesto pone
evidencia las caractersticas estructurales histolgicas. En este trmino se presentara en un
contexto general el mtodo de tincin H-E y como es que los datos arrojados nos permiten
comprender mejor el funcionamiento celular y por lo tanto a detectar aspectos patolgicos para
emitir un diagnostico medico confirmatorio.
Primeramente se extrajo la muestra de tejido a estudiar e inmediatamente pas a la fijacin
para conservar la estructura. La fijacin inhabilita el metabolismo celular, impide la autolisis de
las clulas y tejidos, desinfecta de microorganismos patgenos y solidifica los tejidos por la
desnaturalizacin de protenas.
La fijacin se hace con formaldehido al 10% que es el ms utilizado, la cantidad utilizada debe
ser 10 veces el volumen de la muestra como mnimo y el tiempo para la fijacin tambin
depende del tamao de la muestra, afortunadamente esta fijacin se lleva a cavo en el
procesador de tejidos, proporcionando un mtodo automtico donde tambin se incluir en un
cubo de parafina.
Posteriormente este cubo de parafina donde se incluyo la muestra se pasa a cortar en el
micrtomo, creando delgados cortes de 3 a 5 micras que despus se llevaron al bao de
flotacin para poder extender los cortes y colocarlos en el portaobjetos. Despus se tienen que
dejar secar y para acelerar el proceso se utilizo un horno especial.
Al terminar el secado la muestra ya estaba lista para hacer la tincin H-E: se sumergi los
preparados histolgicos en xilol para eliminar los excesos de parafina; luego pasaron por una
serie de alcoholes en forma descendente (100. 95 y 70); se lav en agua para eliminar
exceso de alcohol; se sumergi en hematoxilina por 10 minutos, luego se lav en agua para
eliminar excesos y se pas rpidamente por alcohol cido; se lav nuevamente; se sumergi 30
segundos en eosina; se pas por otra serie de alcoholes, en orden creciente (70, 95 y 100);
finalmente se dej remojar 10 minutos en xilol, antes de realizar el montaje final. Para el
montaje final se coloc una gota de adhesivo y posteriormente el cubreobjetos, al secar ya
estaba listo para su anlisis por microscopio.
En el laboratorio de anatoma patolgica cuenta con la tecnologa de biopsia por congelacin,
sin embargo, en el mbito clnico es comn el desconocimiento de esta herramienta
diagnstica. Esta herramienta de la patologa que consiste en emitir un diagnstico
histopatolgico en tejido fresco congelado en el menor tiempo posible, generalmente estos
procesos se llevan durante el acto quirrgico cuando se carece de un diagnostico preoperatorio
o cuando hay que identificar hallazgos intraoperatorios inesperados. Esta informacin permite
ejecutar modificaciones teraputicas en la operacin as como concluir una modalidad de
tratamiento quirrgico o farmacolgico y, en algunos casos, clasificar una patologa como
neoplasia o inflamatoria.
Los estudios patolgicos y citolgicos tienen una importancia en las ciencias biomdicas, ya
que nos revelan datos importantes sobre la estructura y la funcin celular, se puede detectar si
hay algn trastorno de los tejidos y por lo tanto con el rgano, esto se debe relacionar con los
signos y sntomas por los que se manifiesta la enfermedad el paciente. Desafortunadamente la
seccin de preparacin de tejidos ha quedado casi por completo fuera del programa de los
estudiantes de medicina, pero, favorablemente contamos con el apoyo de especialistas en el
tema que se encuentran en los hospitales y en el centro universitario, en el rea del laboratorio
de anatoma patolgica, quienes concuerdan que estos conocimientos tienen que ser parte de
la formacin de un mdico.