CURSO:

BIOQUIMICA

DOCENTE:

VANESSA GARCIA

TEMA:

TAMPONES FISIOLOGICOS

ALUMNA:

MAMANI DE LA CRUZ, FANNY

RAQUEL

CICLO/SECCIN:

3er C

30 de abril de 2012

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TAMPONES FISIOLOGICOS
Son los sistemas encargados de mantener el pH de los medios biolgicos dentro de los valores
compatibles con la vida. Permitiendo con ello la realizacin de funciones bioqumicas y fisiolgicas de las
clulas, tejidos, rganos, aparatos y sistemas. Segn su naturaleza qumica, los amortiguadores se
clasifican en orgnicos e inorgnicos y, as mismo, atendiendo a su ubicacin, se distribuyen en
plasmticos y tisulares.
SISTEMAS TAMPN EN EL ORGANISMO
Existen tampones de gran importancia en el organismo:
Inorgnicos:
Tampn bicarbonato:

CO2 + H2O

H2CO3

HCO3 - + H+

Tampn fosfato:

H2PO4-

HPO42- + H+
Orgnicos:
Tampn hemoglobina:

HHbO2

HbO2- / HbH

Hb- + H+

Aminocidos y protenas

TAMPONES INORGANICOS
TAMPN BICARBONATO
El tampn bicarbonato est compuesto por cido carbnico (H 2CO3) y bicarbonato (HCO 3-) y el valor de su pKa
es de 6,1. Es el tampn ms importante de la sangre (pH=7,4), representa el 75% de la capacidad buffer total de la
sangre. Tambin est presente en el lquido intersticial. Es un tampn muy eficaz porque la relacin HCO3-/ H 2CO3
es muy alta, lo que supone una alta capacidad para amortiguar los cidos. Supone una ventaja el hecho que se
trata de un sistema abierto ya que el CO 2 puede ser eliminado en la respiracin muy rpidamente, los H+ se
pueden eliminar por va renal y el HCO 3- puede reemplazarse en la orina. En realidad, este tampn est compuesto
por dos equilibrios, pues el cido carbnico forma CO2, generando una molcula de H2O.
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Cuando el pH disminuye, el bicarbonato toma los protones libres. As, el equilibrio se desplaza hacia el H 2CO3, que
a su vez, mediante la reaccin catalizada por la anhidrasa carbnica (glbulos rojos), cede una molcula de H 2O y
se convierte en CO2, el cual se elimina a travs de los pulmones. Por el contrario, si el pH de la sangre aumenta,
se forma HCO3- a partir de H2CO3, lo que conduce a mayor captacin de CO2. Las concentraciones de HCO3- y de
H+ tambin se pueden controlar por mecanismos fisiolgicos a nivel renal. El rin puede eliminar protones
unindolos a amonacos o fosfatos y mantiene la concentracin de bicarbonato mediante reabsorcin o
regeneracin del mismo. La suma de las formas sal y cido se llama reserva alcalina. En condiciones normales,
esta suma tiene el valor 25,2 mEq de CO 2 por litro. Como a pH sanguneo (pH=7,4), la proporcin entre la forma
sal y cido es de 20, resulta que [HCO 3-] es 24 mEq/L y [CO2] es 1,2 mEq/L. As, es importante tener en cuenta que
el cuerpo necesita ms bicarbonato que no cido carbnico porque el metabolismo produce ms cidos que bases.
El sistema del tampn bicarbonato es clave en la regulacin del pH en la sangre humana y puede responder a los
cambios de pH de varias formas:
1.- El ion bicarbonato es realmente la base conjugada del cido carbnico:
H+ + HCO3- [H2CO3] ; pKa = 6,14
[Reaccin cido-base no enzimtica, prcticamene instantnea]
2.- El cido carbnico, sin embargo, es rpidamente convertido en CO2 y agua por la anhidrasa carbnica, lo que
hace de l una especie transitoria:
[H2CO3] CO2 + H2O ; pKa = 6,14
[Reaccin enzimtica con muy alta velocidad]
4.- En relacin a los dos productos de la reaccin de la anhidrasa carbnica, el agua es fcilmente absorbida por el
sistema, mientras que el CO2 se puede eliminar mediante la respiracin. Adems, la tasa de eliminacin del CO2
en la respiracin est controlada a travs de mecanismos neurolgicos.
5.- La [HCO3-] y la [H+] pueden ser controladas (lenta e incompletamente) por mecanismos fisiolgicos a nivel
renal.
*CO2 + *H2O <----> *[H2CO3] <----> *H+ + *HCO3*producido en el metabolismo - *siempre disponible - *en equilibrio con las especies de cada lado - *producido en el
metabolismo - *tampn sanguneo preexistente
CO2: eliminado directamente en los pulmones
H20: controlada en el rin va mecanismos fisiolgicos no relacionados con el pH
H2CO3: convertido en los productos de la izquierda por la anhidrasa carbnica (glbulos rojos)
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H+: control en el rin o reaccin con el bicarbonato para dar los productos de la izquierda.
HC03-: control en el rin o reaccin con los H+ para dar los productos de la izquierda
TAMPN FOSFATO
Se trata de un tampn inorgnico que se encuentra en los lquidos intracelulares y mantiene el pH en torno al
6,86 debido al equilibrio existente entre un cido dbil; el dihidrgeno fosfato (DHP) y su base: el monohidrgeno
fosfato (MHP). Ambos compuestos mantienen un equilibrio entre s, pudiendo el DHP liberar un protn y
transformarse en MHP, (la reaccin se desplaza hacia la derecha), y el MHP puede unirse a un protn para originar
una molcula de DHP, (la reaccin se desplaza hacia la izquierda). H2PO4- HPO4-2 + H+
Es decir, a pH fisiolgico, las especies del fosfato con capacidad de tamponar son
valor de pK es de 6,8.

H2PO4- y HPO4-2 ya que su

As pues, para el tampn fosfato:

pH = 6,8 + log HPO4-2 / H2PO4La concentracin de fosfato en la sangre es baja (2 mEq/L) por lo que tiene escasa capacidad de tamponar si lo
comparamos con otros tampones como el bicarbonato. En cambio, a nivel intracelular, las concentraciones de
fosfato son elevadas lo que le convierte en un tampn eficiente. Las grandes cantidades de fosfato dentro de las
clulas corporales y en el hueso hacen que el fosfato sea un depsito grande y eficaz para amortiguar el pH.

TAMPONES ORGANICOS
Tampn hemoglobina
La hemoglobina es una protena globular multimrica que dispone de cuatro puntos de unin a ligandos cuyas
propiedades de unin estn reguladas alostricamente. La funcin principal de la hemoglobina es el transporte de
oxgeno por la sangre. Referente a su estructura, se trata de un heterotetrmero y consta de dos pares de cadenas
polipeptdicas diferentes. Cada una de las cadenas lleva un hemo como grupo prosttico, donde se unen las
molculas de O2, por lo que una hemoglobina puede unir como mximo cuatro molculas de O 2. La captacin de
O2 se ve afectada, entre otros factores, por los H+ y el CO 2. Algunos factores favorecen el estado T, en el cual la
protena no tiene O2 unidos, y otros favorecen el estado R, en el cual la hemoglobina tiene unidas molculas de O 2.
Este fenmeno se denomina efecto Bohr. Es muy positivo para remarcar la diferencia entre las distintas afinidades
para el O2; la cual es esencial para que cumpla su funcin de transporte.
EFECTO BOHR Consiste en la en disminucin de la afinidad de la hemoglobina por el O2 cuando el pH disminuye
como sucede a nivel tisular Los H+ se asocian a las His de la protena cambiando su estructura tridimensional y la
afinidad por el O2 El efecto inverso se produce al aumentar el pH a nivel pulmonar.
Las caractersticas de la hemoglobina (Hb) como amortiguador estn ntimamente vinculadas a la capacidad de
disociacin del grupo imidazlico del aminocido histidina unido al hierro que contiene el grupo hemo

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El pK de este grupo funcional, que es aproximadamente 7, tiene la especial propiedad de modificarse en funcin
de que la molcula de Hb est unida al oxgeno (HbO 2) o no (Hb). La oxihemoglobina (HbO2) es un cido ms
fuerte que la Hb desoxigenada porque su pK es menor (ver figuras de la tabla )

Hemoglobina desoxigenada

Hemoglobina oxigenada

Esta propiedad le confiere una eficacia amortiguadora excepcional, que se ve favorecida por el hecho de que la
Hb es una protena muy abundante en la sangre (el 15% del total de protena).
Si consideramos que en el eritrocito el pH interno es 7,3 y aplicamos la ecuacin del Henderson-Hasselbalch, se
puede calcular fcilmente que para la HbO2, el 80% de las molculas estn en forma disociada y el 20% est
en la forma cida no disociada (curva de color rojo en la figura inferior).

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En cambio, el 80% de la Hb desoxigenada se encuentra sin disociar, y el 20% est disociada (curva de color azul
en la figura superior). Esta especial propiedad hace de la Hb un amortiguador extraordinariamente eficaz,
puesto que es capaz de modificar su pK liberando O2 y as soportar grandes cambios en la proporcin sal/cido sin
que se produzca cambio alguno en el pH. Veamos un ejemplo.
Supongamos que un eritrocito tiene 100 molculas de HbO2H a pH 7,3 (Figura inferior). En estas condiciones
habr 80 molculas de HbO2- y 20 molculas de HbO2H. Si introducimos 60 molculas de HCl, los H+ son
captados por la forma salina (HbO2-) para originar la forma cida (HbO 2H). Esto origina un cambio en la
proporcin sal/cido de 80/20 a 20/80 que provocar un cambio en el pH de 7,3 a 6,1 (curva roja de la figura
inferior).

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Sin embargo, bastar con que la HbO2H elimine 100 molculas de O2 (flecha verde de la figura superior) para que
se convierta en HbH de modo que la proporcin 20/80 sea compatible con un pH 7,3. En resumen, mediante la
liberacin de su O2, la Hb ha sido capaz de captar un 60% de H+ sin sufrir ningn cambio en el pH.

AMINOCIDOS Y PROTENAS
Los aminocidos tienen carcter anftero, es decir, pueden ceder protones y tambin captarlos. Esto es as gracias
a dos de los radicales comunes en todos los aminocidos: el grupo NH2 y el grupo COOH. Estos radicales, al estar
en contacto con el agua, se presentan ionizados o protonados; actuando los dos como donantes o aceptores de
protones.
En pH cidos:
- El NH2 capta un protn: NH3+ (el pka para este radical es 9)
En pH bsicos:
- El COOH pierde un protn: COO- (el pKa para este radical es 2)
En el punto de pKa del grupo amino existe el 50% de radicales amino protonados (NH3+) y el otro 50% de
radicales amino desprotonados (NH2). En este punto, la variacin de pH, si adicionamos NaOH a la solucin, es
mnima. Por lo tanto, en este punto la capacidad amortiguadora es mxima.
En el punto de pKa para el grupo carboxil existe el 50% de radicales carboxil protonados (COOH) y el otro 50% de
radicales carboxil desprotonados (COO-). En este nivel de pH el aminocido tambin es buen amortiguador.
En el punto isoelctrico de los aminocidos sin cadena radical cida o bsica se encuentra a medio camino entre el
pKa del grupo amino y el pKa del grupo carboxil. Y encontramos el aminocido en su forma zwitterin, com ambos
grupos funcionales ionizados: NH3+ y COO-.
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El punto isoelctrico de los aminocidos con cadenas protonables es diferente ya que existe un tercer pka, que
corresponde al valor de pH en el cual el protn de la cadena lateral se disocia.
As, vemos como esta capacidad para captar y ceder protones convierte a las protenas y aminocidos en
amortiguadores del pH, actuando como cidos si estn protonados, o como bases, si no lo estn.
Muchas protenas tienen grupos protonables en la cadena radical variable, as cada protena o aminocido tiene su
punto isoelctrico y sus pKa caractersticos para cada grupo protonable del radical variable.
Los pKa pueden verse afectados por radicales prximos y as, puede variar calidad amortiguadora de los
aminocidos segn radicales de su entorno. Por ejemplo, la histidina, prxima al grupo hemo en la hemoglobina,
tiene pK muy diferentes segn si est unida al oxgeno o no.

Cuando los aminocidos se unen formando pptidos mediante enlaces entre el grupo COOH de un aminocido y el
grupo NH2 de otro, desaparecen sus propiedades amortiguadoras. Ahora bien, siempre existen los grupos
terminales y tambin los grupos ionizables de las cadenas laterales de los aminocidos: cido asprtico y
glutmico, arginina, lisina, histidina, etc. As, para determinar su capacidad amortiguadora, solamente
observaremos los pK de los terminales y de los laterales ionizables.

CURVAS DE TITULACIN DE LOS AMINOCIDOS

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La representacin grfica de la variacin del pH de una solucin por la adicin de equivalentes de cido o de base
se denomina curva de titulacin. En el caso de los aminocidos, las curvas de titulacin proporcionan la siguiente
informacin (o bien se puede deducir a partir de las mismas):
- Medida del pK de los grupos ionizables: se localizan en el punto medio de la zona tampn.
- Regiones de capacidad tampn: mesetas donde se localizan los pKs; dichas regiones se encuentran en el
intervalo pK 1 unidad de pH.
- pI: se localiza en el intervalo de viraje.
- Formas ionizables del aminocido en cada rango de pH.
- Carga elctrica del aminocido en cada rango del pH
- Solubilidad relativa del aminocido en cada rango de pH.
Curva de titulacin de un aminocido neutro como la glicina
Se pueden realizar las siguientes observaciones:
1. A pH cido la Gly se encuentra como un cido diprtico, ya que tanto el grupo amino como el carboxilo se
encuentran protonados, es decir, a pH = 1, el 100% de las molculas de aminocido se encuentran en forma de
catin.
2. Al ir aadiendo equivalentes de base, el grupo -carboxilo (-COOH) se disocia, cediendo protones al medio y
transformndose en un grupo carboxilato; este equilibrio viene descrito por el pKC. Cuando pH = pKC, la glicina se
encuentra como 50% cation + 50% zwitterion. Por lo tanto, el par -COOH/-COO- puede servir como un tampn
amortiguador en la regin de pH cerca del valor pKC. En cuanto a la carga, cuando pH = pKC, entonces [I] = [II] y
por lo tanto Qneta = 0.5; y cuando pH = pKC - 2; [I] / [II] = 100:1; Q = 1, es decir prcticamente slo existe la forma
I en solucin.
3. En el pI, prcticamente el 100% del aminocido se encuentra como ion dipolar o zwitterion, de forma tal que el
aminocido presenta una carga neta nula (el aminocido es elctricamente neutro).
Nota: tal y como se ha comentado anteriormente, en el pI, la mayora de las molculas del aminocido se
encuentran en forma de ion dipolar, pero tambin existen pequeas cantidades equimolares de aniones y cationes,
adems de una pequea fraccin de aminocido no ionizado.
4. Si se siguen aadiendo equivalentes de base, el grupo amino (-NH3+) se disocia tambin, obtenindose la
forma totalmente desprotonada de la glicina; este equilibrio est definido por el pKN. Cuando pH = pKN, la glicina
se encuentra como 50% zwitterion + 50% anin. Por lo tanto, el par -NH3+/-NH2 puede actuar como un sistema
tampn disolucin amortiguadora en la regin de pH cerca del pK N. En cuanto a la carga, cuando pH = pKN,
entonces [II] = [III] y por lo tanto Q neta = -0.5.
5. A pH muy elevados, el 100% de las molculas de aminocido se encuentran en forma de ion negativo o anin.
Cuando pH = pKN + 2; [III] / [II] = 1:100; Q = -1, es decir prcticamente slo existe la forma III en solucin.
Curva de titulacion de la Gly

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Curva de titulacin de un aminocido bsico como la histidina

Las premisas establecidas para la glicina son igualmente vlidas. Simplemente hay que tener en consideracin el
hecho de que este aminocido presenta tres grupos ionizables: el grupo carboxilo, el grupo imidazol de la cadena
lateral y el grupo -amino.
Por lo tanto, la adicin de equivalentes de base produce la liberacin secuencial de protones al medio, y estos
equilibrios estn determinados por sus correspondientes constantes: el grupo carboxilo (pKC), el grupo imidazol
(pKR) y el grupo amino (pKN). En este caso, existen tres regiones de capacidad tamponante, una de ellas
localizada cerca del pKR = 6, por lo que la histidina acta como tampn a pH fisiolgico. A su vez, el pI se calcula
como el promedio del pKN y del pKR.
En el caso de la histidina, el hecho de que su pKR est muy prximo al pH fisiolgico, implica que este aminocido
puede actuar como cido como base en los medios biolgicos. Por lo tanto, la hemoglobina, que es una protena
rica en histidina, es capaz de tamponar los excesos de cido de base en sangre, constituyendo uno de los
sistemas tampn del organismo (uno de los ms importantes junto al tampn bicarbonato). Adems, la histidina
forma parte del centro activo de muchas enzimas que catalizan reacciones que cursan con transferencia de
protones.

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Curva de titulacin de un aminocido cido como el glutamato

Igualmente, se realiza el mismo anlisis que para la Gly e His. Simplemente hay que tener en consideracin el
hecho de que este aminocido presenta tres grupos ionizables: el grupo - carboxilo, el grupo carboxilo de la
cadena lateral y el grupo -amino.
Por lo tanto, la adicin de equivalentes de base produce la liberacin secuencial de protones al medio, y estos
equilibrios estn determinados por sus correspondientes constantes: el grupo - carboxilo (pKC), el grupo carboxilo
de la cadena lateral (pKR) y el grupo amino (pKN). En este caso, existen tres regiones de capacidad tamponante, y
el pI se calcula como el promedio del pKC y del pKR.

DISOLUCIONES TAMPN A NIVEL BIOLGICO

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Un aspecto fundamental en la fisiologa de todos los organismos es la homeostasis o capacidad para mantener
una situacin de equilibrio dinmico favorable. En este fenmeno tiene gran importancia los sistemas
amortiguadores que equilibran la presencia de sustancias cidas y bsicas para mantener el pH dentro de los
lmites fisiolgicos. En los organismos vivos se estn produciendo continuamente cidos orgnicos que son
productos finales de reacciones metablicas, catabolismo de protenas y otras molculas biolgicamente activas.
Mantener el pH en los fluidos intra y extracelulares es fundamental puesto que ello influye en la actividad biolgica
de las protenas, enzimas, hormonas, la distribucin de iones a travs de membranas, etc.Los tampones
fisiolgicos son la primera lnea de defensa frente a los cambios de pH de los lquidos corporales, entre los que
destacan: el tampn fosfato, el tampn bicarbonato y el tampn hemoglobina.El pH de los medios biolgicos
es una constante fundamental para el mantenimiento de los procesos vitales. La accin enzimtica y las
transformaciones qumicas de las clulas se realizan dentro de unos estrictos mrgenes de pH. En humanos los
valores extremos compatibles con la vida y con el mantenimiento de funciones vitales oscilan entre 6,8 y 7,8;
siendo el estrecho margen de 7,35 a 7,45 el de normalidad. Tambin en el trabajo de laboratorio, es imprescindible
el mantenimiento de un pH para la realizacin de muchas reacciones qumico-biolgicas. Los sistemas encargados
de evitar grandes variaciones del valor de pH son los denominados amortiguadores, buffer, o tampones. Son
por lo general soluciones de cidos dbiles y de sus bases conjugadas o de bases dbiles y sus cidos
conjugados. Los amortiguadores resisten tanto a la adicin de cidos como de bases. Ecuacin de
Henderson-Hasselbalch. Concepto de pK:
La concentracin de H++ est vinculada a la naturaleza del electrolito dbil. Considerando un cido dbil, de modo
genrico como HAc, su equilibrio de disociacin sera:
HAc

Ac- + H+

Aplicando la ley de accin de masas, la constante de equilibrio K ser:

K = ( Ac- ) x ( H+ ) / (HAc )
Despejando ( H+):

K x (HAc ) = ( H+ ) x ( Ac- )

Aplicando logaritmos:
Multiplicando por -1

log ( H+ ) = log K + log (HAc ) - log ( Ac- )

- log (H+ ) = - log K - log (HAc ) + log ( Ac- )

Si hacemos que:
- log ( H+ ) = pH
- log K = pK
Se obtiene la ecuacin de Henderson-Hasselbalch
pH = pK + log ( base ) / ( cido )
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Por tanto, si en la ecuacin la concentracin de cido es igual a la de la base, el cociente es 1, siendo el log de 1 =
0, se tiene que:
pH = pK .Asi se puede definir el pK como el valor de pH de una solucin amortiguadora en el que el cido y la
base se encuentran a concentraciones estequiomtricas iguales o al 50% cada una.

APLICACIONES INDUSTRIALES DE LAS SOLUCIONES TAMPN

Como hemos visto las soluciones tampn son muy tiles para el mantenimiento del pH en sistemas biolgicos,
como por ejemplo el cuerpo humano, pero sus propiedades van mucho ms lejos y son ampliamente usadas en las
industrias actuales.

En la Industria agrcola, las soluciones tampn se usan para la fertirrigacin y la agricultura hidropnica
(cultivar plantas usando soluciones minerales y no suelo agrcola). Todas las plantas tienen un intervalo de
pH en que las races absorben nutrientes de forma idnea. Una variacin del pH puede afectar al proceso
de absorcin de las races: disminuyendo la captacin de minerales y aumentando la permeabilidad a
sustancias txicas como el aluminio. A su vez, una variacin en el pH afecta la solubilidad de la mayora de
minerales. Existe un pH idneo para cada planta dependiendo de su fisiologa i de los minerales que
requiere, pero, como norma general, podemos decir que precisan un pH ligeramente cido (5.5-7) salvo
excepciones como las habas con pH un tanto bsico (7.4-8.1)

En la Industria alimentaria tambin son de gran importancia los parmetros del pH ya que, por ejemplo, nos
indica si la carne es apta para el consumo humano. Si la carne est entre 5.4 i 7.0 de pH, es apta para el
consumo, pero a lo largo del tiempo el pH disminuye, hecho que indica que su consumo no es pertinente.
En la industria vincola, se deben de tener muy en cuenta las variaciones de pH en la elaboracin del vino,
este debe oscilar entre 2.8 i 3.5, puesto que a pH superior a 3.5 determinadas bacterias pueden atacar el
vino y producir variaciones en el sabor.

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