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Jeferson C de Oliveira
MICOLOGIA MDICA
AO MICROSCPIO
CASOS CLNICOS
RESPOSTAS
Volume IV
2015
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Jeferson C de Oliveira
Jeferson C de Oliveira
Introduo
Durante muitos anos, a micologia teve pouca expresso na rea mdica. Com o passar do tempo,
as infeces fngicas vm se tornando cada dia mais frequente e isto se deve a vrios fatores como: a utilizao de terapias imunossupressoras, deixando o organismo mais susceptvel, alm do surgimento da AIDS,
fazendo com que fungos at ento considerados saprbios passem a ser visto como elementos potencialmente
patognicos, capazes de produzir os mais variados processos patolgicos enquadrados no grupo das micoses
oportunistas.
Alm disto, em relao etiologia das micoses, observamos que alguns de seus agentes etiolgicos so limitados a determinadas reas do globo. Havendo casos, no entanto, de agentes que sofrem variao
quanto incidncia com o decorrer do tempo, e, isto se deve a fatores ecolgicos, socioeconmicos, culturais,
teraputicos e, ainda, podem estar relacionados a migraes populacionais e convvio dos indivduos com
animais domsticos.
Como podemos observar existem muitas abordagens possveis a respeito das infeces fngicas e,
nos dias de hoje, as formas de se olhar estas questes tornam o trabalho em micologia apaixonante, despertando a necessidade de discutir diversos aspectos, principalmente aqueles relacionados epidemiologia/ecologia
e descoberta de fungos emergentes relacionados ou no, a uma depresso do organismo, razo pela qual realizamos este trabalho de diagnstico micolgico de modo a atender a demanda de profissionais graduados que
desejam ampliar seus conhecimentos neste campo.
O material utilizado para a realizao desse livro foi o microscpio Olympus BX61VS e a cmera
digital Allied. A tcnica que colaborou com a realizao do livro foi Janana e tambm todo o grupo de tcnicos da Controllab, sem eles esse trabalho no seria possvel.
No diagnstico micolgico o exame direto a lmina mais difcil de visualizar as estruturas fngicas, no escaneamento desde material tambm isto observado, por isso, orientamos que no uso desde material o observador tenha pacincia no diagnstico dos exames diretos.
Observao: Sugerimos que os profissionais que estiverem iniciando no estudo dos fungos utilizem primeiro o livro Caixa Virtual de Lminas de Micologia Mdica (Volume I) e Micologia Mdica (Volume II) para aprenderem a descrever as estruturas observadas nas lminas.
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Apresentao
As lminas utilizadas em microscopia digital foram as mesmas da microscopia optica, que foram
escaneadas em um microscpio acoplado a um sistema computadorizado de fotografia digital que fotografa
cada um dos campos microscpicos e depois junta as imagens por meio de software, obtendo assim uma
imagem da lmina inteira na ampliao escolhida. No momento da exibio da imagem h necessidade de
um software especfico que monta a imagem a partir de diversas pequenas imagens armazenadas no servidor.
Na tela do computador, atravs de um link, aparece a lmina (figura 01) que foi capturada e os elementos contidos na pgina. Na parte superior direita h um pequeno quadrado com a miniatura da imagem da lmina, observa-se ainda um retngulo amarelo, que mostra qual rea est ampliada na poro maior da tela, onde vemos
a lmina em estudo. esquerda uma barra de zoom que permite ampliar (+) e reduzir (-) a imagem e uma barra de ferramentas na qual podemos ajustar o brilho e contraste da imagem, devendo ser sempre utilizada. Essa
ferramenta permite que sejam feitos ajustes similares aos realizados no diafragma e no condensador de um microscpio tico padro. Este recurso deve ser ativado na barra de ferramentas, clicar em aplicar para adequar
s definies ajustadas e reset para voltar definio original. Recomendado para os navegadores Chrome. Esta
imagem pode ser movimentada em qualquer direo, usando-se o cursor do mouse ou setas do teclado, e ampliada de 20 a 40x (representando as objetivas do microscpio barra de zoom ou boto de rolagem do mouse).
Obs.: Usar somente o navegador Gloogle Chrome.
Barra de zoom:
Ferramenta que
possibilita ampliar
(+) e reduzir (-) a
imagem.
Miniatura da
imagem a ser
analisada.
Imagem a ser
analisada.
Apresenta o aumento da
imagem aplicado pelo
usurio
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1. Apresentao Interativa
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Comentrio: Infeces micticas das unhas tem aumentado a frequncia e indicada como maior causa de
doena das unhas. A prevalncia na populao em pases do primeiro mundo de 2% a 13 %. Trs grupos de
fungos so responsveis por infeces das unhas. A maioria causada por dermatfitos, mas atualmente existe
o grupo dos fungos no dermatfitos e leveduras que podem ser responsveis por doena das unhas.
Embora algumas infeces de unha apresentem sinais clnicos caractersticos, o diagnstico definitivo de onicomicose feito por investigaes de laboratrio que envolve visualizao direta dos elementos de fngicos
no material de unha (exame direto), seguido pelo isolamento e identificao especfica do patgeno. Esta informao no s valiosa para o prognstico da infeco, mas tambm para a seleo do esquema teraputico
satisfatrio.
O exame micolgico direto do caso mostrou presena de artrocondios e na cultura em gar Sabouraud foi
isolado colnia leveduriforme pregueada bege e reverso incolor. O exame micolgico deve ser repetido pelo
menos trs vezes para valorizar a presena de fungos no dermatfitos e leveduras. O diagnstico final foi de
Trichosporon sp. (atualmente a espcie T. beigelii foi modificada para T. cutaneum, embora a espcie mais isolada seja T. inkin).
I-02 Diagnstico: Pedra branca ou Trichosporon sp.
Lmina 02:
Exame direto clarificado com soda 10%. Presena de ndulo claro aderido ao pelo formado de artrocondios
e blastocondios. Pedra branca.
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Figura 01:
Colnia de Trichosporon sp. em gar Sabouraud com 15 dias de crescimento. Colnia leveduriforme pregueada
ou cerebriforme, branca ou bege e reverso incolor.
Lmina 03:
Tricosporon sp.. Micromorfologia da colnia com lactofenol azul-algodo, 400X. Presena de hifas septadas
verdadeiras, pseudohifas, artrocondios e blastocondios.
I-03 Diagnstico: Tinea nigra ou tinha negra ou Hortaea werneckii (Exophiala werneckii)
Lmina 04:
Hortaea werneckii. Micromorfologia da colnia clarificada com lactofenol. Hifas septadas castanhas e condios
com um septo (didimosporos).
Comentrio: Foi realizado um estudo retrospectivo vinte e dois casos confirmados de tinea nigra (feohifo-
micose superficial) registrada num servio de dermatologia. O estudo da regio ITS do agente etiolgico deste
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grupo era idntico com a regio ITS da cepa padro de Hortaea werneckii. Doze entre 22 pacientes eram adultos e os restantes eram adolescentes e crianas. A idade mdia total foi de 20,7 anos; idade mdia dos pacientes
adultos foi 27,3 anos, e 11,2 anos para o adolescentes/crianas. Todos os adultos eram agricultores. A maioria
do adolescentes/crianas estava dentro de idade escolar. A maioria dos pacientes era de reas rurais de regies
tropicais e midas caracterizadas por vegetao subtropical e tropical abundante. Vrios deles informaram
ter contato ntimo com plantas. Onze casos eram do litoral onde os pacientes podem ter entrado em contato
com substratos de salinidade alta: a maioria deles viveu perto do mar, mangue ou esturio de rio. Os outros
11 pacientes vieram de regies metropolitanas. Hiperidroses de palma estava presentes em 6/22 casos. Dois
pacientes corriam descalos ao longo da praia. O local clnico das leses era nas palmas na maioria dos casos;
em 17 dos 18 casos a infeco era unilateral e um bilateral. Dos casos localizados nos ps, dois aconteceram
na planta e dois ficavam em espaos interdigitais. Trs pacientes informaram hiperidroses exclusiva; dois deles caminhavam descalos ao longo da praia. O exame direto foi positivo em 21/22 casos. Todos os pacientes
tinham culturas positivas para o agente etiolgico H. werneckii. A bipsia realizada em dois pacientes, devido
a confuso com nevo, evidenciou infiltrado perivascular e pequenos filamentos (hifas septadas castanhas) no
estrato crneo.
Comentrio: O caso clnico apresenta uma micose feohifomicose superficial benigna, Piedra preta, causada
por fungo demcio (demateaceo), a espcie Piedraia hortae, encontrada comumente na regio amaznica, com
clima tropical, considerada regio endmica. O habitat est relacionado microbiota da pele humana, solo,
gua de lagos e animais domsticos. conhecida na regio amaznica como quirana e caruncho no Maranho. Na clnica a Piedra preta so observados ndulos ptreos, castanhos, nos pelos do corpo, de preferncia
no cabelo. O diagnstico laboratorial confirmado pelo exame direto do pelo, onde se observam ndulos ptreos, castanhos e aderidos ao longo dos cabelos com lojas ascgeras. Na cultura em gar Sabouraud a colnia
filamentosa, elevada de cor escura e reverso preto. O tratamento da pedra preta por remoo mxima do pelo
ou cabelo infectado, podem ser utilizados os derivados azis, como Clortrimazol.
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Lmina 08:
Pedra branca. Exame direto do pelo clarificado com lactofenol. Presena de ndulo claro aderido ao pelo formado de artrocondios e blastocondios.
Lmina 09:
Tricosporon sp.. Micromorfologia da colnia com lactofenol azul-algodo, 400X. Presena de hifas septadas
verdadeiras, pseudohifas, artrocondios e blastocondios.
Comentrio: O T. beigelii foi inicialmente descrito por Beigel, em 1865, que o identificou como causador da
piedra branca. O primeiro caso relatado de infeco profunda (tricosporonose) foi descrito em 1970, em uma
mulher de 39 anos que apresentava um abscesso cerebral causado pelo T. beigelii (atualmente T. cutaneum).
O gnero Trichosporon foi originalmente descrito por Behrend e caracteriza-se por artrocondios, blastocondios, hifas verdadeiras e pseudo-hifas. Existem atualmente vrias espcies identificadas: T. ovoides, T. inkin, T.
asahii , T. asteroides, T. cutaneum (antigo T. beigelii), T. mucoides.
O Trichosporon um fungo encontrado naturalmente no solo e suco de frutas e isolado como patgeno de
animais e de microbiota da pele do homem.
As infeces superficiais devidas ao Trichosporon incluem a piedra branca, alguns casos de onicomicoses e otomicoses. A pedra branca uma infeco superficial das hastes pilosas causadas por este gnero, especialmente
nas regies dos pelos gentais de jovens e no cabelo de meninas. Uma pesquisa no publicada no Rio de Janeiro
mostrou a seguinte distribuio de formas clnicas da pedra branca:
Figura 02- Frequncia dos casos de pedra branca diagnosticadas no laboratrio de micologia do servio de
dermatologia da Santa Casa da Misericrdia, RJ.
Obs.: A localizao no couro cabeludo corresponde ao parasitismo dos cabelos de crianas do sexo feminino.
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Comentrio: O eritrasma uma pseudomicose, que ocorre mais na terceira idade em pacientes com dia-
Comentrio: O Trichosporon, com fase sexuada ainda no conhecida, mas provavelmente relacionada aos
Basidiomycetes, uma levedura que se encontra no solo, nos vegetais, nos animais mamferos e, encontrada na
microbiota humana de indivduos sos. Tem pouco poder patgeno, pois relacionado com infeco ocular,
sinusite entre outros, a fungemia esta relacionada com mltiplos fatores: enfermidade de base, desnutrio
grave, intubao traqueal, sondagem vesical, implantao de catteres, nutrio parenteral e tratamento antibitico de amplo espectro. O paciente era portador de catter, apresentava enfermidade de base (fibrose cstica)
e havia recebido tratamento antibitico.
A anfotericina o antifungico de eleio para o tratamento, associada a caspofungina em ocasies. A este paciente se administrou voriconazol, entretanto a fungemia s remitiu aps a retirada do catter, o que confirma
que a retirada do catter decisiva para a resoluo da fungemia e pem em evidncia o poder patgeno de
Trichosporon.
As infeces ocorrem em pacientes com fatores de risco, sobre tudo em portadores de catter. A utilizao de
antifngico nestes pacientes deve associar-se sempre a retirada de catter.
A identificao se baseia na colnia de tipo leveduriforme e aspecto de cera (fase rugosa). Observam-se artrocondios e blastocondios capsulados quando nos pelos parasitados.
Diagnstico - Colnia creme, pregueada, amarelo-acinzentada com o tempo. Hifas hialinas com artrocondios
e blastocondios. No fermenta carboidratos, mas assimila glicose, sacarose, maltose etc. Urease positiva.
Ao exame histopatolgico, so observados artrocondios, hifas verdadeiras, pseudo-hifas e clulas gemulantes.
O gnero Trichosporon possui 6 patgenos para espcie humana.
Pacientes com tricosporonose geralizada possuem antgeno circulante capaz de reagir com partculas de ltex
sensibilizados com anticorpos anti-Cryptococcus neoformans (reao cruzada).
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2. Apresentao Interativa
Diagnsticos e comentrios das lminas numeradas de II-1 a II-22.
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Exerccio interativo II
II-01 Diagnstico: Trichophyton mentagrophytes.
II Lmina 01:
Trichophyton mentagrophytes. Micromorfologia da colnia. Presena de hifas septadas hialinas, microcondios
globosos, hifa em espiral ou gavinha. O macrocondio em lpis caracterstico do gnero Trichophyton no est
presente nesta lmina.
Comentrio: A tinea pedis ou tinha dos ps a mais comum infeco fngica. A cultura positiva pode ser
obtida de raspado de leses sintomticas ou assintomticas dos ps. Embora a infeco mais comum em
adultos, ela pode tambm ocorrer em crianas.
Muitos casos o agente causador Trichophyton rubrum, mas tambm pode ocorrer com T. mentagrophytes e
Epidermophyton floccosum. Trs formas clnicas so observadas: interdigital, mocassim (crnica) e vesiculobolhosa (subaguda). No devem ser esquecidos os casos de dermatoftides (leses alrgicas distancia).
O fungo isolado do caso clnico foi o Trichophyton mentagrophytes, que na micromorfologia da colnia mostrou presena de estruturas caractersticas (fig. 01).
Diagnstico T. mentagrophytes (Trichophyton mentagrophytes; que apresenta duas variedades: Trichophyton
mentagrophytes var. interdigitale e Trichophyton mentagrophytes var mentagrophytes).
II-02 Diagnstico: Tinea incognito ou granuloma de Majocchi. Trichophyton mentagrophytes.
II Lmina 02:
Tinea granulomatosa. Exame histopatolgico corado pelo PAS. Presena de hifas septadas hialinas no tecido
e artrocondios dentro do pelo.
II Lmina 03:
Trichophyton mentagrophytes. Exame micromorfolgico da colnia. Presena de hifas septadas hialinas, microcondios globosos e hifas em espiral ou gavinhas.
II Lmina 04:
Teste de identificao teste de perfurao do pelo. Teste de perfurao do pelo positiva. Presena de perfurao no pelo provocada pelo Trichophyton mentagrophytes. O Trichophyton rubrum no perfura o pelo.
Comentrio: Em 1883, Majocchi descreveu um fenmeno no qual dermatfitos, limitados ao estrato crneo, por ser mais agressivos, invadem a derme superficial. O corpo responde com foliculite granulomatosa e
elementos fungicos (fig. 01 - II lmina 02 - Exame histopatolgico corado pelo PAS) podem ser visualizados.
O fungo mais frequente o Trichophyton rubrum, mas outros organismos podem ser isolados, como T. mentagrophytes, T. violaceum, Microsporum gypseum e M. canis. A doena denomina da de tinea incognito ou
granuloma de Majocchi.
A colnia do fungo isolado foi de fungo filamentoso algodonoso branco e reverso incolor (fig. 02), que para ser
mais bem caracterizado o agente etiolgico, foram necessrios micromorfologia da colnia (fig. 03 II lmina 03) e teste de perfurao positiva (fig. 04 II lmina 04). A identificao final do fungo foi Trichophyton
mentagrophytes var. interdigitale, que tem o habitat antropoflico.
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Figura 01 (II lmina 02) Exame histopatolgico da bipsia de pele corada pelo PAS, 400X. Presena de hifas
septadas no folculo piloso.
Figura 02 Macromorfologia da colnia em gar Sabouraud, aps 15 dias de crescimento. Colnia filamentosa
algodonosa branca e reverso incolor
Figura 03 (II lmina 03) Trichophyton mentagrophytes. Micromorfologia da colnia, 400X. Presena de
hifas septadas, hifas em gavinhas e microcondios globosos.
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Figura 04 (II lmina 04) Teste de identificao. Teste de perfurao do pelo positiva. Presena de perfurao
no pelo provocada pelo Trichophyton mentagrophytes. O Trichophyton rubrum no perfura o pelo.
ton stockdaleae. E. stockdaleae conhecido como no patognico, com habitat relacionado com o solo, enquanto E. floccosum a nica espcie que causa infeces em humanos, apresentando distribuio mundial.
E. floccosum uma das causas comuns de dermatofitoses em indivduos saudveis. Infecta a pele (tinea corporis, tinea cruris e tinea pedis) e as unhas (onicomicoses). A infeco restrita as camadas superficiais da epiderme, no penetrando nos tecidos mais profundos em indivduos imunocompetentes. Infeco disseminada
devido a qualquer dermatfito muito rara devido restrio da infeco aos tecidos queratinizados. Porm,
infeco invasiva pelo E. floccosum foi relatada num paciente imunocomprometido com sndrome de Behcet.
Como com todas as formas de dermatofitoses, infeces pelo Epidermophyton floccosum so comunicveis e
normalmente transmitidas por contato, particularmente em salas de banho e instalaes de ginsio.
Caractersticas macroscpicas
Caractersticas microscpicas
Hifa septada hialina, macrocondios e, ocasionalmente, clamidocondios so visualizados. Microcondios esto ausentes. Os macrocondios (10-40 x 6-12 m) so em forma de clava com 3 a 5 clulas, liso e com extremidade arredondada. Eles so encontrados isoladamente ou agrupados. Clamidocondios e artrocondios so
comuns em culturas mais velhas.
A tinea incgnita uma dermatofitose atpica, causada por uso prolongado de corticosteride tpico ou oral,
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normalmente localizada na virilha. Tinea cruris responde por 7,6% de todas as dermatofitoses em determinados pases e ocorre mais em indivduos com idade entre 20-30 anos. O caso apresentado de um paciente
com tinea incgnita na regio da virilha causada por E. floccosum, aps aplicao de corticosteride tpico,
que uma espcie antropoflica com distribuio mundial, sendo responsvel pela maioria dos casos de tinea
cruris.
Comentrio: A tinea capitis endotrix tem como agente mais comum o Trichophyton tonsurans, um dermatfito antropoflico de fcil transmisso entre crianas.
II-05 Diagnstico: Trichophyton schoenleinii.
II Lmina 07:
Trichophyton schoenleinii. Micromorfologia da colnia. Presena de hifas septadas hialinas e candelabro fvico.
Comentrio: O favo tem como agente etiolgico o Trichophyton schoenleinii. No Brasil, ocasionalmente
visto nas regies Sul e Sudeste. As estruturas fngicas (hifas e artrocondios) so observadas, juntamente com
espaos areos, no interior dos cabelos, os quais sofrem fratura distncia da superfcie cutnea. Crostas
branco-amareladas, cncavas (godet), formadas por exsudado concretado e hifas encontram-se presentes nas
leses. Percebe-se ainda odor caracterstico de ninho de rato. Leva alopecia cicatricial. Aspectos similares
ao favo podem excepcionalmente ser produzidos pelo Microsporum gypseum, tanto no couro cabeludo como
na pele glabra, em hospedeiros imunocomprometidos ou no.
O diagnstico bsico o exame micolgico direto e cultura. Esporadicamente o diagnstico pode ser confirmado atravs de exame histolgico que comprova a invaso do cabelo pelo fungo. A lmpada de Wood pode
demonstrar uma fluorescncia verde palha, segundo o Prof. Sampaio, ou branco-azulada, segundo Prof. Lacaz
(fig. 07).
O exame microscpico direto em soluo hidrxido de potssio 10-20% (KOH), com ou sem dimetilsulfoxido
(DMSO), visualiza elementos de fngicos. Na tinea favosa localizada na cabea, os cabelos devem ser examinado imediatamente depois de acrescentar a soluo de KOH para observar as bolhas de ar entre as hifas (fig. 06).
O organismo causador identificado em cultura, que normalmente realizada em gar de Sabouraud (fig. 05
A) com a adio de cloramfenicol e cicloheximida. Estes antibiticos inibem o crescimento de bactrias e outros fungos; assim, so obtidas colnias puras de dermatfito. Em pacientes que apresentam leses crnicas a
positividade na cultura pode ser difcil de obter.
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A
B
Figura 05- Trichophyton schoenleinii. A - Colnia em gar de Sabouraud aps seis semanas. B- Microcultura de
Trichophyton schoenleinii mostra hifa septada com ramificao dicotmica caracterstica - Candelabro fvico.
Figura 06- Trichophyton schoenleinii no interior do cabelo (200X). Cabelos infetados apresentam bolhas de ar
e hifas septadas.
Coloraes de Hematoxilina e Eosina (HE) no evidenciam com facilidade os elementos fngicos; sendo ento, recomendado colorao com cido peridico-Schiff (PAS). Cortes histolgicos revelam miclio nas esctulas e camada crnea da epiderme que atrofiada, com infiltrado inflamatrio na derme.
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Comentrio: A melanonquia tem importncia por causa de seu relacionamento eventual com melanoma
maligno. A avaliao tem de incluir uma variedade de aspectos: comprometimentos de mltiplos dedos, pigmento pode ser exgeno, h hematoma, h um corpo estranho etc.
Na ausncia de um diagnstico benigno bvio, a bipsia necessria. Melanonquia no polegar ou hlux de um
caucasiano geralmente de alto risco.
No diagnstico a presena de colnia em gar Sabouraud, de colorao escura sugere fungo demaciceo. Condios castanhos curvos, com trs septos, medindo 20-32 x 9-15 m (fragmosporos). Uma das clulas dos
condios geralmente mais escura que as outras. Curvularia sp. Os condios (feofragmosporos) so dispostos
em conidiforos geniculados, de modo simpodial muitosemelhante a Drechslera (atualmente Bipolaris sp.).
os microrganismos, como vrus, bactrias, fungos e parasitas. Apesar de o interesse principal ser as doenas
causadas por estas interaes, tambm deve ser notado que os microrganismos cumprem um papel crtico na
sobrevivncia do homem. A populao comensal normal dos microrganismos participa no metabolismo dos
produtos alimentares, prov fatores essenciais de crescimento, protege contra infeces por microrganismos
altamente virulentos e estimula a resposta imune. Na ausncia destes organismos, a vida como conhecemos
seria impossvel.
A flora microbiana dentro e sobre o corpo humano est num contnuo estado de fluxo, determinado por uma
variedade de fatores, como idade, dieta, estado hormonal, sade e higiene pessoal. Enquanto o feto humano
vive num ambiente protegido e estril, o recm-nascido humano exposto a microrganismos da me e do
ambiente. Entender essa interao importante para o diagnstico, profilaxia e tratamento das enfermidades
provocadas pelos fungos
A exposio de um indivduo a um organismo pode levar a um dentre trs resultados. O organismo pode: (1)
colonizar a pessoa de forma transitria, (2) colonizar a pessoa permanentemente, ou (3) provocar doena.
A identificao do fungo em gnero e espcie traz um melhor conhecimento da patogenia, uma vez que o
Microsporum gypseum (Fig. 08 lmina 24) um dermatfito que possui o seu habitat relacionado com o solo
(geoflico) e assim no muito adaptado ao parasitismo. O Microsporum canis (Fig. 09) possui o habitat relacionado com animais (zooflico), alterando em parte a sua patogenia. A diferena entre as duas espcies pode
ser feita quanto a sua macro e micromorfologia da colnia. Nas figuras 01 e 02 podemos observar que pelo
macrocondio em naveta caracteriza o gnero Microsporum e pela espessura da parede e nmeros de clulas
podemos chegar s espcies.
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Figura 08 II Lmina 24 Microsporum gypseum macrocondio em naveta, parede fina e com menos de
seis clulas.
Figura 09 - Microsporum canis macrocondio em naveta, parede grossa e com mais de seis clulas.
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3. Apresentao Interativa
Diagnsticos e comentrios das lminas numeradas de III-1 a III-26.
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Comentrio: O caso clnico apresenta uma micose que acontece na regio rural e relacionada com contato
(trauma) com restos de vegetais e nas pessoas que trabalham em plantaes de babau. A forma clnica mais
caracterstica a presena de tumores verrucides nos membros inferiores, relacionados aos pequenos traumas por vegetal. O exame micolgico direto e histopatologia mostra a presena de corpos fumagides, sinal
patognomnico da doena cromomicose.
No caso clnico a cultura caracterizou o agente etiolgico demcio (dematiceo) causador da micose. A micromorfologia da colnia diagnosticou presena de reproduo do tipo fialfora (fig. 01), sugerindo o diagnstico
de Phialophora verrucosa.
No Brasil o agente mais isolado nos casos de cromomicose Fonsecaea pedrosoi. No caso clnico o diagnstico
foi Phialophora verrucosa, mas os outros agentes de cromomicose podem tambm provocar a cromomicose,
lembrando que sempre que for possvel caracterizar a espcie esta dever ser considerada. Agentes etiolgicos:
Fonsecaea pedrosoi, Fonsecaea compacta, Phialophora verrucosa, Cladophialophora carrionii e Rhinocladiella
aquaspersa.
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Comentrio: O caso clnico apresentado ocorreu num consultrio dermatolgico no Rio de Janeiro, em
agosto de 2012. O fato de a leso estar prxima da cicatriz vacinal levantou algumas hipteses relacionadas com
origem bacteriana. Foi realizado uma bipsia e o material fragmentado em trs partes, sendo ento enviado
para dermatopatologia e laboratrio de microbiologia, para investigao bacteriolgica e micolgica. Este caso
importante devido necessidade da integrao entre vrias especialidades para a concluso do diagnstico.
Seguindo a sequencia de exames apresentados no caso clnico, foram afastadas outras patologias e o estudo
micolgico ajudou no diagnstico final. Trata-se de micose subcutnea que atualmente est aumentando a incidncia entre humanos e animais domsticos (gatos) no Rio de Janeiro no perodo de 2012. O diagnstico foi
de esporotricose, uma micose subaguda ou crnica que acomete humanos e uma grande variedade de animais,
na qual o exame micolgico geralmente negativo e apresenta um crescimento rpido nos meios tradicionais
usados no isolamento na micologia (gar Sabouraud e Mycosel). O diagnstico definitivo baseia-se no isolamento e identificao do fungo atravs de cultura, sendo considerado o padro-ouro. Qualquer isolamento
sugestivo de infeco por S. schenckii, j que agente raramente encontrado no laboratrio como um contaminante. um mtodo de identificao simples e de baixo custo. Em 89% dos casos, o isolamento ocorre em oito
dias, podendo chegar a quatro semanas. O agente etiolgico um fungo dimrfico o Sporothrix spp.. A biologia
molecular mostrou que S albicans, S. inflata e S. schenckii var. lurei so espcies diferentes de S. schenckii. Os
novos trabalhos propem as novas espcies S. brasiliensis, S. globosa e S. mexicana. No Brasil os casos clnicos
so causados pelo S. brasiliensis.
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Comentrio: O caso clnico apresenta um paciente com ndulo de consistncia mole, no aderido pele,
flutuante e apresentando uma cpsula (cisto). Este pode ulcerar espontaneamente, drenando uma secreo
purulenta rica em hifas demceas septadas. A cultura em gar Sabouraud isolou um fungo demcio e na micromorfologia da colnia pode ser observado hifas castanhas septadas e esporos feodictisporos formando
cadeias caracterizando o gnero Alternaria sp. Estes esporos diferenciam da Curvularia que apresenta esporos
tipo feofragmosporos.
O diagnstico final de feo-hifomicose subcutnea provocada pela implantao traumtica de fungo demceo
Alternaria sp.
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Comentrio: O caso apresenta uma dermatofitose que tem como mais importante a classificao da forma
clnica que deve ser lembrada pela sua importncia e raridade. O agente etiolgico caracterizado pela micromorfologia da colnia quanto ao formato do macrocondio em fuso ou naveta, de parede irregular e presena
de mais de seis clulas no interior, permitindo o diagnstico de Microsporum canis. O habitat do agente est
relacionado aos animais (zooflico) principalmente gatos e coelhos. A patogenia se inicia geralmente pelo contato com estes animais.
A passagem de artrocondios e hifas para o conjuntivo em torno do folculo causa de inflamao supurativa e
granulomatosa, cuja intensidade depende do estado de sensibilizao do hospedeiro. Este tipo de evoluo vai
caracterizar as dermatofitoses ou tinhas profundas, que tm sido descritas como: qurio, favo, granuloma tricoftico de Majocchi, perifoliculite nodular (granuloma perifolicular), sicose tricoftica (parasitria) e foliculite
abscedente de Hoffmann (foliculite dissecante do couro cabeludo). Elas devem ser consideradas como foliculites dermatofticas, tendo em conta a origem de todas na ruptura dos folculos invadidos por dermatfitos. Padilha-Gonalves sugeriu que as leses piogranulomatosas, drmicas e subcutneas, causadas por dermatfitos
deveriam ser agrupadas sob o ttulo nico de dermatofitias granulomatosas.
Em raras ocasies, os dermatfitos invadem as camadas mais profundas, no ceratinizadas, da pele ou, mesmo, a hipoderme, onde despertam uma resposta aguda, com formao de abscessos, que pode dar lugar a
uma inflamao granulomatosa de tipo corpo estranho. Admite-se que a invaso se faa a partir de folculos
infectados, por ruptura da parede folicular. A ruptura ocorreria em virtude da ao de trs fatores: presso
exercida pelo crescimento miceliano dentro do folculo, distendendo a parede folicular; perfurao da parede
por fragmentos de pelos parasitados que sofreram fratura; e reao inflamatria intensa perifolicular, capaz de
destruir o epitlio da parede.
Uma entidade pouco conhecida, devido raridade dos casos, o chamado micetoma ou pseudomicetoma
dermatoftico. Nesse tipo de dermatofitose profunda, tambm de origem folicular, os fungos, ao invadirem
a derme, em vez de conservar a forma de elementos hifais e artrocondios, do origem a massas lobuladas,
constitudas por agregados micelianos, frouxamente entrelaados e envolvidos por matriz homognea e eosinoflica. Alguns autores consideraram esses agregados de hifas como grnulos (gros), semelhantes aos dos
micetomas, e deram infeco o nome de micetoma dermatoftico. Ajello e col., entretanto, so de opinio que
os agregados diferem, em vrios aspectos, dos gros observados nos micetomas verdadeiros, e propuseram
para eles o nome de pseudogrnulos e para a infeco, o de pseudomicetoma dermatoftico.
Cerca de uma dcada depois, Ajello e col referiram que sete espcies de dermatfitos Microsporum audouinii, M. canis, M. ferrugineum, Trichophyton tonsurans, T. mentagrophytes, T. verrucosum e T. violaceum j
haviam sido identificadas como produtoras de gros nos tecidos. Ao todo, eram conhecidos 14 casos, sendo 13
em seres humanos e em um gato (na base da cauda). Alm dos casos da frica ocidental, outros tinham sido
descobertos em pases fora do continente africano, inclusive nos Estados Unidos. Embora aceitassem que os
chamados micetomas dermatofticos, com os seus grnulos, tivessem origem em folculos parasitados, sugeriram Ajello e col que os agregados micelianos formados pelos dermatfitos seriam melhor referidos como pseudogrnulos e que pseudomicetoma deveria ser o termo aplicado a esse tipo de infeco dermatoftica profunda.
Pseudomicetomas dermatofticos, por Microsporum canis, j foram descritos em pacientes sujeitos a terapia
imunossupressiva. Alm do caso de Barson includo na relao de Ajello et al, em mulher sujeita a tratamento
de longa durao para lupus eritematoso sistmico, um outro caso mais recente, foi descrito em paciente transplantado. Nos dois casos, as leses situavam-se nos antebraos. Assinale-se que leses de granuloma tricoftico
de Majocchi, por T. tonsurans, j foram tambm encontrados em pacientes imunodeprimidos um transplantado e outro portador do HIV1.
O diagnstico do caso clnico , portanto, de pseudomicetoma por Microsporum canis.
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Jeferson C de Oliveira
Comentrio: O caso clnico corresponde tambm a uma doena causada por fungos da classe dos Zygomy-
cetes pertencentes a ordem Entomophthorales responsveis por produzirem micoses subcutneas e cutaneomucosas, no relacionada a baixa de resistncia do hospedeiro. A denominao Entomophthorales, deriva
do grego Entomon, que significa insetos, consequentemente os agentes etiolgicos so isolados de insetos
e de fezes de rpteis e anfbios. Nesta ordem destacam-se dois gneros: Basidiobolus ranarum e Conidiobolus
coronatus. A via de inoculao pode ser traumtica, por picada de insetos ou restos de vegetais contaminados.
O gnero Conidiobolus mais frequente em adulto com localizao na face e o gnero Basidiobolus mais
isolado em crianas e jovens de localizao em membros. O exame micolgico do tecido obtido por bipsia se
observa no exame direto clarificado ou histopatolgico presena de hifas largas com septos e reao eosinoflica (reao de Splendore-Hoeppli) ao redor das hifas (lmina 24 e 25). Na colnia obtida por isolamento em
gar Sabouraud ou Mycosel a micromorfologia apresenta hifas largas septadas e condios grandes, piriformes a
esfricos com papilas basais com bordas arredondadas e proeminentes, caracterizando o gnero Conidiobolus
(III lmina 26).
O caso clnico representa uma entomoftoromicose causada por Conidiobolus coronatus.
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Jeferson C de Oliveira
III-20 Diagnstico: Micetoma eumictico. Scedosporium apiospermum (anamorfo assexuada) ou Pseudallescheris boydii (teleomorfo sexuada)
III Lmina 28:
Scedosporium apiospermum. Micromorfologia da colnia corada pelo azul-algodo. Presena de hifas septadas
hialinas e condios piriformes.
Comentrio: O caso clnico apresenta o exame direto de uma lmina escaneada e preparada com material de
bipsia obtida de leso verrucosa. No exame da lmina com aumento de 20 e 40x podemos observar estruturas
arredondadas castanhas com diviso por cissiparidade. Alm dos corpos fumagides pode ser encontrada hifas septadas castanhas, que representam a germinao dos corpos fumagides no tecido. Nesta primeira etapa
temos a confirmao da patologia como cromomicose ou cromoblastomicose.
Na cultura se isola os agentes etiolgicos da cromomicose. No Brasil o fungo demcio mais isolado Fonsecaea
pedrosoi. No caso clnico os agentes etiolgicos relacionados: Fonsecaea sp.; Fonsecaea compacta; e o mais correto seria F. pedrosoi.
A cromomicose tem como agentes etiolgicos os fungos demcios: Rhinocladiella sp. ou Rhinocladiella aquaspersa; Phialophora verrucosa ou Phialophora sp.; Fonsecaea pedrosoi; Fonsecaea compacta ou Fonsecaea sp.;
Cladophialophora carrionii ou Cladophialophora sp.
Jeferson C de Oliveira
Comentrio: O agente etiolgico apresenta como sinonmia os nomes: Glenosporela loboi, Loboa loboi, Pa-
racoccidioides loboi e atualmente Lacazia loboi. Este parasito possui melanina, ao contrrio do P. brasiliensis. O
isolamento do fungo em vrios tipos de meio de cultura tem sido considerado negativo, mas atualmente o Dr.
Claudio Guedes Salgado, Belm, Par, conseguiu isolar o fungo em cultura.
Guedes Salgado, Claudio. Laboratrio de Dermato-Imunologia, Universidade do Estado do Par. Enzymatic
isolation of Lacazia loboi cells from skin lesions of lobomycosis. Medical Mycology, 24 July 2008.
Comentrio: Fungos pertencentes ao gnero Acremonium sp. podem produzir leses gomosas. O hbitat
desses fungos representado pelo reino vegetal, vivendo como saprfitas de plantas e folhas em decomposio.
So numerosos os casos de acremoniose registrados na literatura mdica; devemos, todavia, afirmar que, em
condies normais, esse fungo possui reduzida patogenicidade para o homem.
Na frica, em 1918, Boucher relatou dois casos de acremoniose, sob a forma de abscesso do p e do punho
esquerdo. Foi isolado das leses Acremonium sp., o qual se mostrou patognico para cobaias. Cura com iodeto
de potssio.
Em 1934, Gavio Gonzaga & Ara Leo isolaram o Acremonium potronii de leses ulcero-gomosas de paciente
que apresentava nas pernas, na altura dos joelhos, ndulos ulcerados, ao lado da esplenomegalia, febre, abatimento e emagrecimento. A cura processou-se pelo iodeto de potssio. Fungos pertencentes ao gnero Acremonium so capazes de produzir diversos tipos antomo-clnicos da acremoniose:
Leses mucosas; leses cutneas puras; abscessos; leses de micetoma; leses nodulares; leses ulcerativas;
leses desidrosiformes.
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Jeferson C de Oliveira
Microscopicamente, as culturas de Acremonium so muito tpicas. Os conidiforos apresentam em suas extremidades grupos de condios reunidos em massa, embebidos em substncia mucilaginosa (Lacaz et al., 2002).
Diagnstico: Acremonium sp., Acremonium falciforme, Acremonium recifei
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Jeferson C de Oliveira
4. Apresentao Interativa
Diagnsticos e comentrios das lminas numeradas de IV-1 a IV-14.
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Jeferson C de Oliveira
Exerccio interativo IV
IV-01 Diagnstico: Histoplasmose
IV Lmina 01:
Exame histopatolgico corado pelo Groctt. Numerosas formas leveduriformes pequenas. Diagnstico sugestivo de micose sistmica.
IV Lmina 02:
Histoplasma capsulatum. Micromorfologia da colnia. Presena de hifas septadas hialinas, microcondios e
macrocondios mamilonados.
Jeferson C de Oliveira
Comentrio: A coccidioidomicose no Brasil tem como agente etiolgico o Coccidiodes posadasii que en-
contrado no solo de regies semiridas do Nordesde brasileiro. O Coccidioides um fungo dimrfico na colnia
ele se apresenta como fungo filamentoso produzindo hifas septadas hialinas e artrocondios (aleurocondios).
IV-11Diagnstico: Paracoccidioidomicose
IV Lmina 12:
Paracoccidioidomicose. Paracoccidioides brasiliensis. Exame direto de tecido clarificado com soda. Presena de
estruturas de parede birrefringente e mltigemulao.
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Jeferson C de Oliveira
Figura 01. Exame histopatolgico corado pelo HE, 600x. Estruturas arredondadas pequenas intracelulares,
com halo claro lembrando cpsula.
Comentrio: Forma teleomorfa: Ajelomyces dermatitidis. Forma anamorfa: Blastomyces dermatitidis fungo
dimrfico, crescendo na forma miceliana a 25-30C e na forma leveduriformes a 37C. Habitat solo e ocorre
nos Estados Unidos e Canad, tambm existem relatos na frica. Mecanismo de infeco inalao de condios
e primo infeco pulmonar, disseminao hematognica.
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Jeferson C de Oliveira
5. Apresentao Interativa
Diagnsticos e comentrios das lminas numeradas de V-1 a V-28.
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Jeferson C de Oliveira
Jeferson C de Oliveira
Exerccio interativo V
V-01 Diagnstico: Criptococose
V Lmina 01:
Criptococose. Cryptococcus sp. (Cryptococcus neoformans e C. gattii). Exame histopatolgico corado pelo PAS
e Alcion blue. Presena de estruturas gemulantes com cpsula.
V-02 Diagnstico: Hialohifomicose. Acremonium sp.
V Lmina 02:
Acremonium sp. Hialohifomicose. Micromorfologia da colnia. Hifas septadas hialinas e com condios elpticos ou ovais, hialinos, dispostos no pice dos conidiforos.
Comentrio: O termo genrico hialohifomicose foi criado por Ajello e McGinnis e significa qualquer infec-
o mictica causada por fungos pertencentes s classes Hyfomycetes, Coelomycetes, Ascomycetes e Basidiomycetes, que quando parasitam o tecido apresentam hifas septadas hialinas. Ocorre em pacientes imunodeprimidos. Quando se isola o fungo na cultura, ele utilizado para descrever a doena, por exemplo, pneumonia
causada por aspergilo (Aspergillus).
A hialohifomicose (micose oportunista) est se tornando cada vez mais frequente nas regies tropicais. Neste
grupo esto includas as infeces fngicas, como fusariose, peniciliose, acremoniose etc., destacando-se a
aspergilose.
Os fatores que favorecem a infeco podem depender do indivduo, como a preexistncia de doenas graves,
como diabetes, as que produzem alteraes hematolgicas srias, leucemias, anemia perniciosa, hepatopatias,
estados de carncias srios, sequela de rvore respiratria como tuberculose, abcessos, bronquiectasias, enfisema. Tudo isto agravado, favorecendo a infeco, quando o indivduo est sendo submetido a uma intensa
teraputica antibitica, por cortiscosteride e citostticos.
Em relao ao processo invasivo do tecido pulmonar, muita gente admite necessidade de leso prvia como
pr-requisito da aspergilose. s vezes, o ponto de partida pode ser uma leso mnima, tal como a de um infarto.
Da a dificuldade de julgar se a leso primria ou no.
O Diagnstico realizado aps coleta do material e processado o estudo micolgico:
Exame Direto: O material patolgico pode ser feito de: escarro, cermen do ouvido, exsudato ocular, pus de
leses gomosas. Estes exames revelam apenas presena de hifas septadas hialinas e ramificadas, sem que se possa afirmar o gnero causador da micose. Apenas em alguns casos de expectorao, e quase sempre no cermen
do ouvido, que, alm das hifas, pode aparecer o conidiforo caracterstico do gnero, na maioria das vezes,
Aspergillus, com sua cabea inconfundvel.
Cultura: O cultivo do material, no meio de Sabouraud, revelar no somente o gnero, como quase sempre,
a espcie causadora da infeco. No nos esqueamos de que o A. fumigatus cresce bem em temperaturas superiores a 37C, de modo que alguns tubos devem ser colocados em estufa regulada para 40 C, ou um pouco
mais, que eliminar, desta forma, outros fungos e bactrias que no suportam tais temperaturas.
No nosso caso a colnia de Acremonium sp. que na microscopia apresenta hifas septadas hialinas e conidiforos com condios aglomerados na extremidade. Esta microscopia , em alguns casos, confundida com o Fusarium sp., a diferena poderia se fazer pela presena de macrocondios em meia-lua, que pode no apresentar.
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Jeferson C de Oliveira
Comentrio: O caso apresentado de micotizao da unha por fungo filamentoso que devido ao contato
com o ar pode desenvolver estruturas reprodutivas iguais as da colnia. A presena de hifas septadas hialinas
no tecido sugerem hialohifomicose.
V-05 Diagnstico: Micotizao. Aspergillus sp.
V Lmina 05:
Micotizao da unha. Hialohifomicose. Aspergillus sp. Exame histopatolgico corado pelo HE. Presena de
hifas septadas hialinas e conidiforo com vescula, filide e condios.
Comentrio: O caso apresentado ocorreu em um hospital do Rio de Janeiro, setor DIP e geralmente de ocor-
rncia em paciente com imunodepresso grave. O agente etiolgico causa uma infeco crnica oportunstica
provocando em alguns pacientes formas de localizao extrapulmonar como meningoencefalite e leses cutnea (caso apresentado leses tipo molusco), uma das formas disseminadas. O diagnstico inicial foi de levedurose sem identificao de microrganismos. Quando o material foi enviado ao laboratrio de micologia, no
exame direto, foram encontradas estruturas arredondadas gemulantes com presena de cpsula, evidenciada
pelo nanquim. A cultura em gar Sabouraud permitiu isolar o fungo e o diagnstico inicial foi de Cryptococcus
sp. Este diagnstico deve ser complementado com a caracterizao da espcie quando possvel. Neste caso foi
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Jeferson C de Oliveira
utilizado o gar CGB, que permite a diferenciao das espcies C. neoformans e C. gattii. O meio adquire uma
cor azul cobalto com o crescimento do C. gattii.
Os agentes etiolgicos Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii se apresentam no habitat relacionado s
fezes de pombos e ocos de rvores. O mecanismo de infeco por via inalatria.
Comentrio: O mtodo da infuso, que representa a maneira mais fcil na preparao do ch nosso de cada
dia, revela que, mesmo passando por um processo de fervura (ponto de ebulio), a temperatura no elimina
completamente os fungos toxignicos presentes nesses chs. Nesse estudo, o mtodo da infuso demonstrou
uma diminuio na ocorrncia de fungos em saches, entretanto, no eliminou totalmente a flora mictica dessas amostras.
Nas anlises das amostras comercializadas como saches embalado identificou-se 31 tipos de fungos (fitopatognicos e produtores de micotoxinas), cujas incidncias (%) de ocorrncia foram: Aspergillus spp. (72,0%);
Rhizopus sp. (71,9%); Aspergillus niger (61,4%); Penicillium sp. (55,4%); Aspergillus flavus (40,4%); Chaetomium sp. (29,8%); Sordaria sp. (26,3%); Trichoderma sp. (19,3%); Mucor sp. (15,8%); Cladosporium sp. (14,0%);
Stachybotrys sp. (12,3%); Monilia sp. (10,5%); Fusarium moniliforme (8,8%); Rhizoctonia sp. (8,8%); Aspergillus
alutaceus (7,0%); Curvularia sp. (5,3%); Fusarium sp. (5,3%); Periconia sp. (5,3%); Alternaria alternata (3,5%);
Alternaria sp. (3,5%); Bipolaris sp. (3,5%); Botritys sp. (3,5%); Myrothecium sp. (3,5%); Pestalotiopsis sp. (3,5%);
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Jeferson C de Oliveira
Phoma sp. (3,5%); Ulocladium sp. (3,5%); Aspergillus tamarii (1,8%); Epicoccum sp. (1,8%) e Melanospora sp.
(1,8%). As identificaes desses fungos foram realizadas com base na macro e micromorfologia, utilizando-se
recursos de chaves dicotmicas e literatura especializada (Russomanno, Kruppa, 2009).
Portanto, no existem critrios de qualidade nos processos de secagem e armazenamento das plantas medicinais, condimentares e aromticas comercializadas como chs e condimentos, havendo necessidade de medidas
mais higinicas de manuteno e mtodos mais eficientes de descontaminao dessas plantas (Russomanno,
Kruppa, 2009).
No diagnstico do fungo do caso apresentado devemos levar em considerao as caractersticas macro e microscpicas, indispensveis na identificao dos mucorceos.
Na posio sistemtica temos a seguinte diviso:
A)
Zygomycotina, Zygomycetes, Mucorales
(cinco famlias, segundo Scholler et al., 1993)
1. Mucoraceae
APOPHYSOMYCES
A. elegans
MUCOR
M. circinelloides (Grupo)
M. racemosus
M. indicus
M. ramosissimus
M. amphibiorum
RHIZOPUS
R. oryzae (= R. arrhizus)
R. rhizopodiformis
R. micrasporus
R. oligosporus
R. homothallicus
R. stolonifer (no patgeno)
ABSIDIA
A. corymbifera (A. ramosa)
A. hyalospora
RHIZOMUCOR
Rh. pusillus (= M. pusillus)
Rh. miehei
Rh. tauricus
2. Cunninghamellaceae
Cunninghamella bertholetiae (= C. elegans)
3. Syncephalastraceae
Syncephalastrum racemosum
4. Saksenaeaceae
Saksenaea vasiformis
5. Mortierellaceae
Mortierella wolfii
B)
Zygomycotina, Zygomycetes, Entomophthorales, Entomophtoraceae
1.
Entomophthoraceae (nica famlia)
2. BASIDIOBOLUS
B. ranarum (= B. haptosporus)
CONIDIOBOLUS
C. coranatus (= Entomophthora coranata)
C. incongruus
V- 11 Diagnstico: Criptococose
V Lmina 13:
Criptococose. Cryptococcus sp. Exame histopatolgico corado pelo HE. Presena de numerosas estruturas arredondadas gemulantes com espao claro entre as estruturas, provavelmente devido a cpsula. Diagnstico
sugestivo de criptococose, deve ser indicado colorao especial para visualizao da cpsula (Mucicarmim ou
alcon blue). O estudo da colnia tambm serve para caracterizar a espcie.
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Jeferson C de Oliveira
Comentrio: O caso clinico apresenta um tipo de infeco causada por fungos saprfitas (saprbios) ub-
quos pertencentes classe dos Zygomycetes. A doena classificada como zigomicose ou atualmente mucormicose, associada geralmente a diminuio da resistncia do hospedeiro. Apresenta vrias formas clnicas, destacando-se a zigomicose rinocerebral, doena de evoluo aguda. Os agentes etiolgicos pertencem a ordem
Mucorales, dai a denominao de mucormicose. Os gneros envolvidos so Rhizopus, Mucor, Rhizomucor,
Syncephalastrum etc. O modo de transmisso ocorre atravs da inalao de esporos encontrados no ambiente.
O mecanismo de agresso por trombose dos vasos sanguneos causando necrose dos tecidos. O diagnstico
micolgico se faz pela observao de hifas asseptadas com ramificao em ngulo reto no exame direto clarificado com soda ou potassa e tambm na histopatologia. A identificao do agente etiolgico atravs da cultura em gar Sabouraud pela macroscopia e microscopia da colnia. Na micromorfolgia a observao de hifas
largas asseptadas (cenocticas) e presena de esporangiforos caractersticos de cada gnero. O Rhizopus facilmente diferenciado pelo esporngio volumoso, columela esfrica castanha e grande quantidade de esporangisporos de colorao castanho escura. O Syncephalastrum caracteriza-se pelo esporangiforo com vescula
e numerosas estruturas saculiformes e alongadas, contendo esporos em cadeias (merosporngios) lembrando
um girassol ou cabea aspergilar.
No caso apresentado o agente etiolgico um Syncephalastrum, que deve ser diferenciado de outros zigomicetos. Os participantes que responderam Rhizopus, Mucor, Absidia e Cunnighamella receberam um adequado
pela relao com os agentes etiolgicos de mucormicose.
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Jeferson C de Oliveira
Comentrio: A grande eficcia demonstrada por farmacos utilizados em tratamento da doena de Crohn se
tem visto condicionada pela apario de efeitos adversos derivados do bloqueio das funes no s antinflamatrias sendo tambm imunomoduladoras. Entre os efeitos secundrios destaca-se o incremento no risco de
apresentar infeces, tanto por microrganismos convencionais como por patgenos oportunistas e emergentes, observado no caso. Dentre as infeces oportunistas, muitas do tipo granulomatoso, destacam a tuberculose, as micobacterioses atpicas, as listerioses, a nocardiose, a rhodococoses, as bruceloses, as leishmanioses,
as infeces por fungos leveduriformes, dimrficos e filamentosos.
A identificao de colnia aveludada, colorao branca e branco-acinzentada; reverso com colorao violcea;
Conidiforo de paredes lisas, apresentando em suas extremidades condios hialinos, retos, unicelulares, unidos
por substncia mucilaginosa diagnostica Acremonium. Em gar-fub e gar-batata, os condios podem ser mais
bem evidenciados.
Resposta: Acremonium sp.
V-16 Diagnstico: Hifomicose. Fusariose. Fusarium sp.
V Lmina 20:
Fusarium sp. Hialohifomicose. Micromorfologia da colnia. Presena de hifas septadas hialinas e esporos em
meia lua ou foice com septos transversais (hialofragmosporo).
Jeferson C de Oliveira
Figura 1- Exame histopatolgico do tecido obtido por bipsia corado pelo Grocott (400X)
V Lmina 24:
Syncephalastrum sp. ou S. racemosum. Mucormicose. Micromorfologia da colnia. Presena de hifas asseptadas ou cenocticas e esporangiforos com dilataes globosas em seus pices. Nestas dilataes numerosos
merosporngios cilndricos e esporangiosporos.
Comentrio: A mucormicose ou zigomicose sistmica um termo amplo que inclui todas as micoses micticas causadas por fungos classificados na classe Zigomicetos. Os patgenos humanos dessa classe ainda
podem ser subdivididos em duas ordens: Entomoftorales e Mucorales. O fungo do caso pertence a ordem
Mucorales e a doena recebe o nome de mucormicose.
Como acontece com as outras micoses oportunistas, o nmero de espcies causadoras de mucormicose tem
aumentado, sem dvida devido ao maior grau de suspeita dos mdicos, assim como ao aperfeioamento das
tcnicas diagnsticas em micologia, utilizadas nos laboratrios de microbiologia clnica. Os agentes etiolgicos
so ubquos. Neste tipo de doena interessante a caracterizao de pelo menos o gnero do fungo causador da
enfermidade, assim foi considerado dois adequados para quem conseguiu o diagnstico do gnero. Nas figuras
abaixo (Fig. 02 06) observamos que cada gnero possui uma estrutura reprodutiva diferente, assim a resposta
adequada para este item o gnero Rhizopus sp. (Fig. 05).
Jeferson C de Oliveira
Comentrios: O nmero de casos de micoses oculares descritos na literatura nos ltimos anos tem crescido
de forma significativa. Cunha et al. (1970) registraram, em nosso meio, trs casos de endoftalmite ps-operatria de origem mictica, provocado por fungos. As infeces causadas pelo Trichosporon so classificadas como
superficiais e profundas. A infeco profunda produzida pelo Trichosporon, tricosporonose, uma micose visceral localizada ou disseminada potencialmente fatal, encontrada geralmente em pacientes imunossuprimidos.
O Trichosporon isolado de lquidos orgnicos estreis e tecidos sob a forma de uma levedura urase-positiva e
sem tubo germinativo, porm com artrocondios. No gar de dextrose de Sabouraud, o Trichosporon apresenta-se como um creme de crescimento rpido, formado colnias leveduriformes bege, com sulcos cerebriformes
radiais. As lminas frescas revelam muitas hifas septferas hialinas, que se fragmentam em artrocondios. So
observadas tambm pseudo-hifas e os blastocondios.
Atualmente a espcie T. beigelii denominada T. cutaneum.
V-20 Diagnstico: Tricosporonose. Trichosporon sp.
V Lmina 26:
Trichosporon sp. Tricosporonose. Micromorfologia da colnia com lactofenol azul-algodo, 400X. Presena de
hifas septadas verdadeiras, pseudohifas, artrocondios e blastocondios.
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Jeferson C de Oliveira
V Lmina 28:
Rhizopus sp.; Rhizopus arrhizus; Rhizopus oryzae; Rhizomucor sp. Mucormicose. Micromorfologia da colnia.
Presena de hifa asseptada ou cenoctica e esporngiforos com esporngos grandes globosos acinzentados a
pretos, alguns arrebentados e rizides.
Comentrio: Zigomicose um termo amplo que inclui todas as doenas micticas causadas por fungos
classificados na classe Zigomicetos (Rhizopus sp., Mucor sp., Absidia sp. etc) . As denominaes utilizadas anteriormente so ficomicose e mucormicose.
Em geral, a Zigomicose sistmica uma infeco aguda e rapidamente progressiva encontrada no paciente
debilitado, principalmente portador de diabetes descompensado.
Como acontece com as outras micoses oportunistas, o nmero de espcies causadoras de zigomicose tem aumentado, sem dvida devido ao maior grau de suspeita dos mdicos, assim como ao aperfeioamento das tcnicas diagnsticas em micologia, utilizada nos laboratrios de microbiologia clnica. O fungo encontrado com
maior frequncia na zigomicose humana o Rhizopus arrhizus (sinnimo do R. oryzae). As espcies isoladas
dos pacientes com zigomicose so ubquas, termorresistentes e componentes invariveis de detritos orgnicos
em decomposio.
Em geral, as infeces causadas por zigomicetos possuem duas caractersticas marcantes: a ntida predileo
desses organismos por invadir grandes vasos sanguneos, com isquemia e necrose resultantes dos tecidos adjacentes (infarto); e a produo de pus negro. Das localizaes anatmicas envolvidas a mais importante a
zigomicose ou mucormicose rinocerebral (caso clnico). O diagnstico micolgico se baseia pela observao
no exame direto de hifas contnuas ou cenoctica com ramificao em ngulo reto. A cultura em gar Sabouraud demonstra a colnia tpica de Rhizopus sp. e no estudo da sua microscopia encontramos hifas cenocticas
esporngios globosos e rizides.
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6. Apresentao Interativa
Diagnsticos e comentrios das lminas numeradas de VI-1 a VI-19.
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Comentrio: Prototecose humana uma infeco rara causada por membros do gnero Prototheca. Espcies
Prototheca so algas aclorofiladas, mutantes de algas clorofiladas do gnero Chlorella, e ubquas na natureza.
A ocorrncia de prototecose pode ser local ou disseminada e aguda ou crnica, sendo a ltima mais comum.
Doenas tm sido classificadas como (i) leses cutneas, (ii) bursite do olcrano, ou (iii) manifestaes disseminadas ou sistmica. As infeces podem ocorrer em pacientes tanto imunocompetentes e imunossuprimidos, embora as infeces mais graves e disseminadas tendam a ocorrer em indivduos imunocomprometidos.
Prototheca wickerhamii e Prototheca zopfii tm sido associadas com a doena humana. Normalmente, o tratamento envolve abordagens mdicas e cirrgicas; falha do tratamento no incomum. Antifngicos como o
cetoconazol, itraconazol, fluconazol e anfotericina B so as drogas mais comumente usadas at hoje. Entre eles,
a anfotericina B apresenta a melhor atividade contra Prototheca spp. O diagnstico feito em grande parte mediante a deteco de estruturas caractersticas observados no exame histopatolgico de tecido. No tecido so
observadas estruturas arredondadas com 2 a 20 endsporos. Estas estruturas (esporngios) so encontradas no
exame direto micolgico, na histopatologia (HE, PAS e Grocott) e na microscopia da colnia. As colnias so
leveduriformes em gar Sabouraud, lembrando colnias de Candida.
Comentrio: Adiaspiromicose tem como agente etiolgico dois fungos dimrficos: Emmonsia parva var.
crescens e Emmonsia parva var. parva. A micose tem como porta de entrada o aparelho respiratrio, sendo os
pulmes frequentemente envolvidos, mas pode disseminar para a pele.
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Comentrio: A botriomicose uma infeco bacteriana, geralmente crnica, localizada na pele e em tecido
subcutneo do homem e de outros animais. Representa uma patologia semelhante aos micetomas, a diferena
se faz pelo agente etiolgico pertencer a outros grupos como das bactrias no filamentosas (Eubactrias), forma gros botriomicticos que podem ser confundidos com os gros actinomicticos e eumicticos. As bactrias geralmente so Gram negativas: Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Proteus sp. e Escherichia
coli. Pela hematoxilina-eosina, os gros botriomicticos so indistinguveis dos actinomicticos (ver anexo).
Comentrio: O piolho tambm conhecido como piolho caranguejo, um inseto obrigatoriamente ectoparasita humano e se alimenta exclusivamente de sangue. O piolho caranguejo (fig. 01) geralmente encontrado nos pelos pubianos, embora o piolho no possa saltar, ele tambm pode viver em outras reas do corpo
que so cobertas com pelos grossos, como os clios . O ser humano o nico hospedeiro parasitado pelo
piolho.
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VI Lmina 09:
Doena da Chagas. Trypanosoma cruzi. Exame histopatolgico corado pelo HE. Observam-se formas amastigotas livres no interstcio ou no citoplasma de macrfagos e clula muscular. Ninho de formas amastigotas no
interior da clula.
VI Lmina 10:
Doena da Chagas. Trypanosoma cruzi. Exame histopatolgico corado pelo HE. Observam-se formas amastigotas livres no interstcio ou no citoplasma de macrfagos e clula muscular. Ninho de formas amastigotas no
interior da clula.
Comentrio do caso clnico: A doena de Chagas, que tem o Trypanosoma cruzi como agente etiolgico,
figura entre as mais importantes endemias vigentes no continente americano. Essa infeco parasitria motiva,
muitas vezes, expressivos distrbios orgnicos em seres humanos e, por isso, exige reiterados cuidados sob
o ponto de vista mdico-assistencial. Ao lado desses percalos, vem crescendo nos ltimos anos uma nova
preocupao, representada pela reativao da parasitose, em virtude de imunodepresso, relacionada com tratamentos quimioterpicos de neoplasias ou mesenquimopatias, por exemplo, e transplantes de rgos. Tais
causas de dficit imunolgico tornaram-se bem mais comuns e, associadas elevada prevalncia da doena de
Chagas, fazem prever aumento das consequncias clnico-patolgicas desse binmio, traduzidas por eventos
multiformes, que devem ficar satisfatoriamente conhecidos, a fim de permitir rpidas medidas diagnsticas e
teraputicas.
Para elucidar a natureza das leses, providenciamos bipsia de uma delas e respectivo exame histopatolgico.
Este evidenciou intenso componente inflamatrio no derma, constitudo por linfcitos, plasmcitos e numerosos macrfagos; alm disso, verificou-se disposio difusa em torno de vasos, com extenso ocasional
parede deles. Foram vistas formas amastigotas livres no interstcio ou no citoplasma de macrfagos, mediante
colorao pelos mtodos de Giemsa e da hematoxilina-eosina. Complementarmente, processo imuno-histoqumico, executado com anticorpo policlonal especfico, demonstrou por imunomarcao formas amastigotas
do T. cruzi aparentes como material particulado livre ou no citoplasma dos macrfagos; a propsito, sucedeu
utilizao do mtodo da estreptavidina-biotina, sendo de 1/10.000 o ttulo.
Era provavelmente da forma indeterminada a doena de Chagas na fase crnica, mas no podemos afirmar isso
com segurana por no ter sido realizada anlise radiolgica do esfago e do clon.
VI-07 Diagnstico: Hanseniase
VI Lmina 11:
Hansenase. Exame histopatolgico. Presena de bacilos Mycobacterium leprea. Classificao multibacilar. Observam-se macrfagos carregados de bacilos e globias.
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VI Lmina 12:
Descrio do inseto: Os Cimicidae so heterpteros que possuem o corpo com contorno oval e achatado
em sentido dorsoventral. Os hemilitros so curtos e reduzidos ao aspecto de duas lminas, representantes que
so da parte basal esclerotinizada, enquanto esto ausentes as asas posteriores. A cabea curta e larga, com o
clpeo bem desenvolvido, e amplamente articulada com o protrax. Os olhos so salientes, no se observando
a presena de ocelos, e as antenas so curtas e com quatro segmentos. O rostro tambm curto, tendo aspecto
robusto, trissegmentado e alojando-se em sulco ventral. O protrax expandido em direo lateral, onde se
apresenta com bordas arredondadas, e escavado na margem anterior. Os tarsos, na fase adulta, so dotados de
trs artculos.
Comentrio: Para quem pensa que dorme sozinho ou no mximo com o(a) companheiro(a), est muito
enganado.
Milhares de outros organismos como caros da poeira e at mesmo percevejos de cama podem passar a noite
e se refestelar do nosso sangue ou caspas que caem por todos os lados.
Existe um grupo de insetos que pode tirar nosso sono, os percevejos de cama. Isso mesmo. Aqueles que nossas
avs contavam que habitava os colches de alguns lares e hotis.
O percevejo de cama, gnero Cimex, um inseto hematfago (que se alimenta de sangue) e de hbito noturno.
E apesar deste hbito alimentar, no existe registro de qualquer doena transmitida por esse inseto.
Aparentemente extinto dos lares dos cidados comuns, ultimamente as empresas controladoras de pragas tm
atendido a chamados devido a presena do percevejo de cama.
O colcho serve de habitat adequado para este intruso. Ali ele encontra abrigo, nas frestas do estrado e da cama,
bem como entre as costuras do tecido do colcho. Mas no somente a que ele se abriga. Outras frestas, mveis, papis de parede e tecidos para decorao tambm podem servir de esconderijo.
Durante o dia os insetos ficam escondidos, mas durante a noite saem a procura de um hospedeiro que servir
de refeio.
Sua presena notada quando surgem picadas de insetos pelo corpo, principalmente na regio de pescoo.
Gotas de sangue de cor marrom avermelhada nos lenis tambm devem ser observadas.
VI-09 Diagnstico: Lndea
VI Lmina 13:
Lndea. Ovo de acaro Pediculus humanus. Lndea aderida ao pelo com o embrio no seu interior.
Comentrio: Os ovos do Pediculus so confundidos em alguns casos com ndulos no cabelo de pedra branca.
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Comentrio: As leses causadas pelo Sarcoptes so diagnosticadas em pedido de exame micolgico, deven-
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ANEXO
Texto complementar - Entidades Clnicas semelhantes
A actinomicose basicamente um micetoma causado por bactrias aerbicas filamentosas Gram-positivas,
classificadas na ordem Actinomycetales. Os agentes etiolgicos fazem parte da flora normal da cavidade oral
e esto associados aos dentes e s criptas tonsilares. Aps a leso do tecido, esses actinomicetos anaerbicos
invadem o tecido, ocasionando uma leso localizada e inchada, com formao de abscesso, cavidades sinusais
com drenagem de secreo purulenta e grnulos (grnulos sulfurosos). Na micologia mdica contempornea, a actinomicose no classificada como um micetoma por serem os agentes etiolgicos componentes da
flora endgena. Nos micetomas, os agentes etiolgicos originam-se do ambiente. Alm disso, o tratamento e o
prognstico so significativamente diferentes para a actinomicose em contraste com os micetomas actinomicticos. Est alm do alcance deste texto determinar se estas so distines justificveis. As infeces causadas
por Actinomyces israelli, A. meyeri, A. naeslundi, A. odontolyticus, A. viscosus, Arachnia propionica e Rothiadento cariosa no so consideradas como agentes etiolgicos do micetoma actinomictico.
A botriomicose uma doena granulomatosa supurativa crnica da pele, tecidos moles e vsceras, com agregados de cocos Gram-positivos no ramificados ou bacilos Gram-negativos ocorrendo em focos supurativos.
Por ter a impresso de que esta doena, observada inicialmente em cavalos, era causada por um fungo, Rvolta
denominou-a botriomicose. A doena pode ser causada por vrias bactrias diferentes, incluindo Actinobacillus Iignieresi, Escherichia coli, Neisseria mucosa, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus e outras
espcies classificadas nos gneros Bacteroides, Proteus e Streptococcus. O Staphylococcus aureus a causa- mais
comum da doena. A botriomicose e o micetoma so semelhantes porque a botriomicose caracteriza-se como
um processo de indurao localizada e em disseminao, tendo cavidades sinusides eliminando secrees. O
material purulento que drena dos tratos sinusides contm pequenas colnias bacterianas que so moles, fragmentam-se facilmente, tm cores amarela e branca e at 2 mm de dimetro. Os cocos ou bacilos que compem
as colnias, frequentemente designados como grnulos ou gros, so mantidos juntos por um material amorfo.
Essas estruturas diferem dos grnulos produzidos pelos agentes actinomicticos do micetoma porque eles no
so compostos de filamentos organizados e ramificados. Devido ao fato de que as microcolnias observadas
na botriomicose no so verdadeiros grnulos, esta doena no considerada como um tipo de micetoma. Os
artigos de Hacker e Toth e Kazal devem ser consultados para mais informaes relativamente botriomicose.
Os dermatfitos Microsporum andouinni, M canis, M. ferrugineum, Trichophyton mentagrophytes, T. tonsurans,
T. verrucosum e T. violaceum foram relatados como causando micetomas. Ajello e colaboradores estudaram
cortes histolgicos de vrios casos de rncetoma dermatoftico e propuseram que os agregados de hifas observados nos tecidos deveriam ser chamados de pseudogrnulos e a doena de pseudomicetoma. Seu uso do
tempo pseudomicetoma semelhante ao de Chalmers e Archibald, que definiram o pseudomicetoma como
uma doena que inclui todas as tumoraes clinicamente semelhantes a um micetoma (edema, ulcerao e
secreo), porm desprovidos de grnulos quer na secreo quer no tecido. Eles distinguiram esta doena do
paramicetoma afirmando que no esto presentes fungos no material tecidual e clnico.
No pseudomicetoma conforme usado por Ajello e colaboradores, o dermatfito invade o folculo capilar, onde
existe tanto como hifas quanto como agregados de hifas. Por alguma razo desconhecida, o folculo capilar
rompe-se e lana as hifas e os agrupamentos de hifas em direo derrne circunvizinha. Por ser o
hospedeiro hipersensvel ao fungo, h uma forte reao de Splendore-Hoeppi (antgeno-anticorpo), com depsito de material amorfo em volta do fungo. Alm disso, h uma resposta tecidual granulomatosa. Todo o
processo est estreitamente relacionado ao granuloma tricoftico de Majochi. Esta doena no um micetoma,
pois h uma ausncia geral de ontogenia granular e uma distinta e abundante reao de Splendore-Hoeppli, os
agregados de hifas esto frouxamente entrelaados, o cimento est ausente e o fungo penetra na derme como
um microrganismo endgeno aps a ruptura do epitlio folicular.
Uma bola de fungos, ou fungoma, uma massa micelial que forma colnias numa cavidade. O espectro de fun61
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gos capazes de causar fungomas amplo: Aspergillus flavus, A. fumigatus, A. niger, A. terreus, Bipolaris spicifera (sinnimo, Drechslera spicifera), Cladosporium sp., Coccidioides immitis, Exserohilum rostratum (sinnimo,
Drechslera rostrata), Penicillium sp., Pseudallescheria boydii, Scopulariopsis sp., Sporothtix schenkii, zigomicetos
e outros fungos. O fungoma que foi mais amplamente estudado o aspergiloma, ou seja, uma bola de fungos
causada por uma espcie de Aspergillus. Esta entidade clnica muitas vezes descrita incorretamente como um
micetoma pulmonar.
O fungo cresce numa cavidade tal como um brnquio ectsico, seio nasal, cisto broncognico, reas de antiga
fibrose de radiao ou uma cavidade devida tuberculose, sarcoidose ou histoplasmose. Na cavidade, a massa
de hifas fica livre ou presa parede da cavidade por um exsudato fibrinoso. A bola de fungos
pode ser solitria ou ocorrer com bolas mltiplas na mesma cavidade. Geralmente, ela no enche a cavidade, o
que d espao a que ocorra a produo de condios. As bolas de fungo permanecem na cavidade e no invadem
o tecido adjacente. Os cortes feitos atravs das bolas revelam frequentemente zonas de crescimento do miclio
e camadas de restos de clulas do hospedeiro. A densidade da massa de hifas varia, o que provavelmente decorre dos diversos ritmos de crescimento do fungo. A bola de fungos pode tornar-se irregularmente revestida
por uma camada de material de Splendore-Hoeppli. Por consistir em uma massa de miclio crescendo numa
cavidade e estarem ausentes grnulos e cavidades sinusides eliminando secreo, o fungoma no um micetoma. Assim, o ocasionalmente descrito micetoma pulmonar causado por fungos como Aspergillus no
uma designao correta.
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BIBLIOGRAFIA
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Sidrim JJC, Rocha MFG: Micologia Mdica luz de autores contemporneos.Guanabara Koogan, 2004.
Tortora G.J., Funke B.R., Case C.L. Microbiologia. Artmed Editora, 2005.
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