CONCENTRACIN DE MICROORGANISMOS

1. RESUMEN

El peligro ms comn con relacin al agua de consumo humano es el de su

contaminacin, ya sea de manera directa o indirecta, debido a la accin de aguas
residuales, excretas de hombres y animales, adems de factores fisicoqumicos y
ambientales. Este trabajo tuvo como objetivo darnos a conocer las diferentes maneras
de determinar la concentracin de microorganismos y su propia interpretacin en el
mbito sanitario

2. INTRODUCCION

El trabajo actual se desarroll con la finalidad de entender mucho mejor la importancia

de la calidad del agua mediante la determinacin de la concentracin de
microorganismos en el estanque de arquitectura de la Universidad Nacional de
Ingeniera, se observarn mtodos de los cuales el alumno juzgar por el de mayor
precisin para las posteriores conclusiones.

Objetivos

Conocer los diferentes mtodos para la determinacin de concentracin de

microorganismos. (El mtodo de la franja y el mtodo de la celda SedgwickRafter).

Determinar la concentracin de microorganismos presentes en el estanque de

la facultad de Arquitectura.

Determinar el nmero de campos enfocados en la celda Sedwigth y en el

mtodo de la franja.

Comprender el significado sanitario de la existencia de microorganismos

respecto a su concentracin.

Fundamento Terico
El agua de consumo humano ha sido definida en las Guas de Calidad del Agua de
Bebida de la Organizacin Mundial de la Salud- OMS (OMS, 1985) como adecuada
para consumo humano y para todo uso domstico habitual incluida la higiene
personal. El agua no debe presentar ningn tipo de riesgo que pueda causar

CONCENTRACIN DE MICROORGANISMOS
irritacin qumica, intoxicacin o infeccin microbiolgica que sea perjudicial a la salud
humana. (VARGAS, 1996).
Debido a estas condiciones, en el caso de los microorganismos patgenos no existe
un lmite inferior tolerable; por lo que el agua destinada al consumo, la preparacin de
alimentos y bebidas o la higiene personal no debe contener ningn agente patgeno
para los seres humanos. Esto se puede conseguir seleccionando fuentes de agua de
buena calidad, tratando y descontaminando eficazmente el agua contaminada con
heces de seres humanos o de animales u otras sustancias y protegindola para que
no haya contaminacin durante la distribucin al usuario. . (OMS, 1995).

El agua de calidad apta para consumo humano cuando entra al sistema de

distribucin, puede contaminarse a travs de conexiones cruzadas, retrosifonaje,
rotura de las tuberas del sistema de distribucin, conexiones domiciliarias, cisternas y
reservorios defectuosos, grifos contraincendios daados y durante el tendido de
nuevas tuberas o reparaciones realizadas sin las mnimas medidas de seguridad
(OMS, 1985; OMS, 1995; VARGAS, 1996). Asimismo defectos en la construccin o en
las estructuras de pozos, depsitos, ausencia o irregular mantenimiento de dichas
instalaciones son causas que predisponen el ingreso y proliferacin de
microorganismos desde distintas fuentes (GOYA, 1997). Adems existen factores
secundarios que permiten el crecimiento de microorganismos en el agua dentro de los
sistemas de distribucin y almacenamiento como: cantidad y tipo de nutrientes,
oxgeno, temperatura, pH, concentracin de desinfectante y material de las tuberas
(GALARRAGA, 1984).

Algas
Las algas son un grupo muy diverso. Estos organismos acuticos van desde seres
microscpicos unicelulares hasta organismos multicelulares que forman grandes
colonias muy grandes y vistosas. Las algas realizan una de las mayores aportaciones
de oxgeno al planeta; se estima que participan con cerca del 50% de la fotosntesis
global.
Actualmente el trmino alga se refiere a organismos que tienen clulas con ncleo
(Eucariontes) y se excluyen las algas-verde azules pertenecientes al reino de las
bacterias (Phylum Cyanobacteria) (Woese et al. 1990).
La gran diversidad de algas se rene en un grupo con parentescos diversos
(polifiltico). Los grupos ms importantes y conocidos pertenecen a dos reinos
distintos: las algas verdes (Divisin Chlorophyta) al reino Plantae y las rojas(Phylum
Rhodophyta) y pardas o cafs (Phylum Heterokontophyta) pertenecen al reino de
Protista.

CONCENTRACIN DE MICROORGANISMOS
Las algas difieren de los otros grupos de seres pequeos o microscpicos por poseer
sus pigmento internos llenos de clorofila, que a veces estn ocultos parcialmente o
enmascarados por otros pigmentos, lo que las capacita en presencia de la luz,
combinar agua con anhdrido carbnico para formar almidn o sustancias anlogas y
liberar oxgeno. Las algas tienen la capacidad de modificar el pH, la alcalinidad, el
color y la turbiedad.

Son muchas las razones por la que nos interesan las algas, adems de su papel
principal como productor de oxigeno atmosfrico y su influencia en procesos globales
como el cambio climtico.
El principal uso de las algas es su consumo directo por el ser humano que extrae de
los mares aproximadamente 40,000 toneladas al ao. Una de las cosechas de algas
ms importantes es la Porphyra (nori, en japons), alga con la que se prepara el sushi
en Japn.

Mtodos para la determinacin de la concentracin

de Microorganismos
Mtodo de la franja
Este mtodo es muy prctico; sin embargo debe tenerse cuidado en la medicin ya
que debe realizarse lo ms preciso posible. Consiste en verter una gota de la muestra
en el portaobjeto y cubrirla con el cubreobjeto, contabilizamos el nmero de
microorganismos en cada campo seleccionado y a partir de ello determinamos la
concentracin.

Metodo de conteo Sedgwick-Rafter (S-R):

De acuerdo al propsito del estudio se selecciona el mtodo a seguir. La cmara de
Sedgwick-Rafter es el dispositivo ms comnmente usado para el recuento de
plankton, de fcil manipulacin y proporciona datos razonables cuando se utiliza con
un microscopio calibrado y equipo con un micrmetro ocular Whipple.
El mtodo de Sedgwick Rafter es el mtodo de contaje ms preciso pero se debe
tener cuidado en saber concentrar la muestra. Es desventajoso en la medida de que
tambin se concentra partculas en suspensin y si no se tiene el debido cuidado se
dificulta el reconocimiento de la cmara de conteo Sedgwick- Rafter cuenta las clulas
en una celda de conteo estndar, diseada para contar plancton en un microscopio
compuesto (hasta 200x) o en un microscopio invertido (a mayores aumentos). El
volumen de la celda es exactamente 1.0 ml y consiste en un marco rectangular de
cermica montado en una 1 " x 3 " en la diapositiva de cristal.

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3. METODOLOGIA

Materiales

LMPAR

MICROSCOPIO N 12

MUESTRA DE

PIPETA
VOLUMTRICA

CONTADOR

CONCENTRACIN DE MICROORGANISMOS

Procedimiento

Mtodo de la celda de Sedgwick-Rafter

Volumen:
1mL
Espesor:
1mm
Ancho: 5mm

Con una pipeta de 1ml colocar un volumen de 1ml en la celda S-R.

Girar en sentido anti horario el cubre-objeto de la celda S-R para sellarlo sin
producir burbujas.
Determinar el N de campos en toda la celda S-R.

X =promedio del nmero de microorganismos por campo

N total de microoranismos
X =
N total de campo

Determinar el N de campos a lo largo de la celda.

N de campo alo ancho de la celda 20 mm

N de campo alo largo de la celd a 50 mm

Determinacin del nmero de campos en toda celda.

N total=N de campo a loanchoN de campos a lolargo

Determinacin de la concentracin de microorganismos.

CONCENTRACIN DE MICROORGANISMOS
Concentracin de m. o

o
XN de campos de lacelda
=
( N dem.
)
ml
Volumen de la celda

Mtodo de la Franja

107 gotas en 10ml

Vol 1gota:
0.09345mL

22mm

22mm

Agregar una gota en el portaobjeto.

Determinar el N de campos en todo el cubreobjeto.

N de campos en toto el cubreobjeto=( N de campos en el lado delcubreobjeto)2

Determinar el N de campos en el lado del cubreobjeto.

CONCENTRACIN DE MICROORGANISMOS

X =promedio del N de m. o por campo

X =

N TOTAL DE M .O
N TOTAL DE CAMPOS

Determinar el
campos en
cubreobjeto.

N de
todo el

Determinar la

N de campos en todoel cubreobjeto=( N de campos en el ladodel cubreobjeto)2

concentracin de m.o.

Concentracin de m. o

Concentracin de m. o

de campos en todoel cubreobjeto

( N demlm . o )= XN Volumen(
d e 1 gotaen ml)

N de m . o XN
de campos en todoel cubreojeto
=
ml
X ( volumen de una gota en ml)

CONCENTRACIN DE MICROORGANISMOS

4. RESULTADOS
Mtodo de la celda de Sedgwick-Rafter
Objetivo de 10x

X =promedio del nmero de clulas por campo

CONCENTRACIN DE MICROORGANISMOS
N total de clulas 118
9 clulas
X =
=
=9.076
N total de campo 13
campo

Determinar el N de campos a lo largo de la celda.

13 de campo a lo ancho de lacelda 20 mm

N de campo alo largo de la celda50 mm

N de campos alo largo de la celda=

1350
33 campos .
20

Determinacin del nmero de campos en toda celda.

N total=N de campo a loanchoN de campos a lolargo=1333=429 campos

Determinacin de la concentracin de clulas.

Concentracin de m. o

N dem. o
XN
de campos de la celda 9429
=
=
=3861
ml
Volumen de lacelda
1mlt

CONCENTRACIN DE MICROORGANISMOS
Objetivo 43x

X =promedio del nmero de clulas por campo

N total de clulas 61
2 clulas
X =
= =1.906
N total de campo 32
campo

Determinar el N de campos a lo largo de la celda.

32 de campo a loancho de lacelda 20 mm

N de campo alo largo de la celda50 mm

N de campos alo largo de la celda=

3250
=80 campos
20

Determinacin del nmero de campos en toda celda.

N total=N de campo a lo anchoN de campos a lo largo=3280=2560 campos

Determinacin de la concentracin de clulas.

CONCENTRACIN DE MICROORGANISMOS
Concentracin de m. o

o
XN de campos de lacelda 22560
=
=
=5120 clulas /mlt
( N dem.
)
ml
Volumen de lacelda
1 mlt
107 gotas en 10ml
Vol 1gota:
0.09345mL

Mtodo de la Franja

Numero de campos: 13
Numero de campos en todo el cubre objetos:
= 169
Suma total de M.O. = 22

=
Promedio de algas x campos= X

(sumatotal de M .O .) 22
algas
= =1.70 8
total de campos
13
campos

( X ) ( total de campos )
Concentracion=
=
1 gota

107 gotas en 10ml

Vol 1gota: 0.09345mL

algas
(8 campos
) ( 22 campos ) =1883 algas
0.09343 mL

mL

CONCENTRACIN DE MICROORGANISMOS

Numero de
Numero de
cubre
Suma total de

campos: 24
campos en todo el
objetos: 13^2 = 169
M.O. = 33

= ( sumatotal de M .O .) = 33 =1.4 algas

Promedio de algas x campos= X
total de campos
24
campos

algas
(1.4 campos
)? 3.3 campos
Concentracion=

( X ) (total de campos)
1 gota

5. DISCUCIONES

6. CONCLUSIONES

algas

=49.41
0.0935 mL
mL

CONCENTRACIN DE MICROORGANISMOS

Se pudo conocer y aplicar los dos mtodos del laboratorio para

determinar la cantidad total de microorganismos y la concentracin de
los mismos.

7. RECOMENDACIONES

Anotar la fecha, hora y temperatura en que se realiz el trabajo.

No permitir que se formen burbujas porque esto influye en el volumen.
No se debe tener mucho tiempo la muestra expuesto a la lmpara ya que este
emite calor, que afecta a la muestra.

8.

BIBLIOGRAFIA

https://www.lgsonic.com/es/blogs-es/problemas-con-las-algas/
http://www.biodiversidad.gob.mx/especies/gran_familia/plantas/algas/algas2.ht
ml
Tesis: MICROOORGANISMOS INDICADORES DE LA CALIDAD DEL AGUA
DE CONSUMO HUMANO EN LIMA METROPOLITANA - EDGAR ORLANDO
MARCHAND PAJARES
Mervin C. Palmer - Editorial Interamericana aos 1962 pginas 8 y 9

http://www.cofes.org.ar/descargas/relas/2_jornada/5_Agu
as_CORDOBESAS_Corrientes_2013.pdf

http://www.elpais.com.uy/vida-actual/que-son-cianobacteriasque-hacerle.html

9. ANEXOS

CONCENTRACIN DE MICROORGANISMOS

La OMS publica una revisin de las guas para la calidad del

agua potable con el fin de prevenir brotes epidmicos y
enfermedades relacionados con el agua
Amrica Latina y el Caribe
Slo el 24% de la poblacin urbana de Amrica Latina y el Caribe dispone de algn
tipo de sistema de vigilancia y control de la calidad del agua. En Honduras, Nicaragua,
Hait, Guyana y Bolivia, ms del 50% de la poblacin slo tiene acceso a agua
corriente potable menos del 50% del tiempo. Adems, la poblacin protegida por
sistemas adecuados de vigilancia y de control de la calidad del agua es muy limitada
en las zonas urbanas e insignificante en las zonas rurales. El hecho de que ms de un
tercio de las defunciones de menores de cinco aos en Amrica Latina y el Caribe se
deba a enfermedades contagiosas destaca la importante contribucin potencial del
abastecimiento de agua salubre y fiable a la reduccin de la mortalidad infantil. Se
prev que las nuevas Guas para la calidad del agua potable facilitarn a las
autoridades nacionales y locales su labor de mejora de la calidad del agua a escala
local.

10. CUESTIONARIO
-

Cul de los dos mtodos realizados es ms exacto?

Cuando se realiz el laboratorio, nos indicaron dos mtodos con los cuales
podramos calcular la concentracin de los microorganismos presentes en una
muestra, siendo dicha muestra extrada del estanque de arquitectura.
Tuvimos los mtodos de la celda de Sedgwick-Rafter y el mtodo de Franjas,
se realiz las pruebas y en cada caso se obtuvo resultados diferentes,

Qu problemas ocasionan los microorganismos en los sistemas de

abastecimiento de agua?
Fundamentalmente, los microorganismos presentes en el agua objeto de tratamiento,
pueden ser algas, bacterias, virus y parsitos.

CONCENTRACIN DE MICROORGANISMOS
Las algas en su actividad biolgica, pueden ocasionar problemas de comunicacin de
olores y sabores, al liberar macromolculas orgnicas o toxinas, o bien otras
sustancias del tipo aldehido y alcoholes como la geosmina y el 2, metilisoborneol
(MIB), que en concentraciones de nanogramos, provocan importantes sabores en el
agua. En todos estos casos, se ha comprobado que por la va de la oxidacin con
ozono y adsorcin con carbn, el porcentaje de eliminacin alcanza valores muy
aceptables.
Las cianobacterias o algas verdeazuladas, otra de las sustancias contaminantes del
agua que generan toxinas peligrosas para la salud, como las neurotoxinas y
hepatoxinas.
Las bacterias, virus y parsitos, llegan inicialmente al agua por vertidos de desechos
humanos y animales, siendo el agua el vehculo que los transporta y a veces los
multiplica, hasta llegar a los seres vivos que consumen esta agua, si no es
debidamente tratada.
Las materias en suspensin, constituyen el soporte privilegiado de los
microorganismos y sirven de proteccin a stos, de cara a los factores de eliminacin,
como es principalmente la desinfeccin.
La materia orgnica forma el substrato que permite el desarrollo de la flora bacteriana,
as como las materias nitrogenadas y fosforadas son las responsables de los
fenmenos de crecimiento y desarrollo de algas, es decir, de la eutrofizacin.
Las enfermedades que producen, pueden ser muy diversas, desde simples transtornos
gastrointestinales, vmitos, calambres, etc., hasta llegar a otras complicaciones
sumamente graves. Entre las bacterias de grave incidencia, que pueden estar
presentes en el agua, figuran especies del gnero Shigella, que producen disentera
bacilar, la Salmonella, que produce salmonelosis e incluso fiebre tifoidea, (Salmonella
Typhi), el Vibro Cholerae, que origina el clera, el Escherichia Coli y las toxinas
generadas para las cianobacterias que pueden ocasionar diversos problemas en la
salud como gastroenteriris, alergia e incluso lesiones hepticas, todas ellas con
posibilidad de ser eliminadas por la cloracin u otros sistemas de desinfeccin del
agua.
No todas las bacterias englobadas con el nombre de "coliformes" son patgenas del
hombre, pero su no presencia en el agua garantizaran que no hay otro tipo de
organismo entrico patgeno o no , ya que son menos resistentes en un medio hdrico.
La ausencia de coliformes , es un indicador ( por algunos cuestionado), que avala la
optima calidad bacteriolgica del agua.
En cuanto al control de los organismos hetertrofos, en general se le ha dado hasta
ahora poca trascendencia al recuento de estos en el control de calidad bacteriolgica
del agua potable ya que principalmente se le consideraba como una informacin ms
referida a la calidad tcnica del agua que a la calidad sanitaria, la informacin tcnica
nos indica la calidad del proceso de tratamiento aplicado y tambin el estado de la red
de distribucin, pero actualmente hay una mayor tendencia a considerar que las

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bacterias hetertrofas del agua potable pueden actuar como patgenos oportunistas y
en este caso la informacin sanitaria nos posibilita controlar el riesgo de transmisin
de infecciones.
Entre los virus, cabe destacar el virus de la hepatitis A y otros que causan
diversas gastroenteritis y que son ms resistentes al cloro.
Con el hallazgo de parsitos y virus en el agua, muchos ms resistentes a los
desinfectantes que las bacterias, se consider que era necesario rebajar los lmites
permitidos sobre turbiedad del agua filtrada en las plantas de tratamiento, muy por
debajo de 1.0 UNT, ya que existe correlacin entre el nmero de partculas orgnicas y
el nmero de partculas inorgnicas, por tanto para una eliminacin importante del
contenido de virus y parsitos,se debern reducir la turbiedad del agua filtrada hasta
un orden de 0.3 UNT o menos; lo cual no garantizara an la eliminacin total de estos
patgenos, no olvidando la inactivacin ms amplia de esos microorganismos por
medio de la desinfeccin a pesar de la formacin de otros subproductos no deseables
por el empleo inadecuado de algunos desinfectantes.

Seale los controles que se debe realizar a los

microorganismos, algas, bacterias, virus, hongos, algas,
protozoos.

Los microorganismos ofrecen diversos beneficios a la sociedad en diferentes formas.

En otro aspecto son tambin los microorganismos un vehculo para la produccin de
enfermedades, por la produccin de toxinas propiamente dichas o metabolitos txicos.
Adems de daos en cultivos, descomposicin de alimentos y enfermedades en
animales. Es por esto que el ser humano ha buscado los procedimientos necesarios
para destruir o controlar el crecimiento de los microorganismos perjudiciales.

AGENTES ESTERILIZANTES FISICOS

1.- Altas Temperaturas

La alta temperatura combinada con un alto grado de humedad es uno de los

mtodos ms efectivos para destruir microorganismos. Hay que distinguir
entre calor hmedo y calor seco. El hmedo mata los microorganismos
porque coagula sus protenas siendo ms rpido y efectivo que el calor seco
que los destruye al oxidar sus constituyentes qumicos. La accin letal del
calor es una relacin de temperatura y tiempo afectada por muchas
condiciones. Por ejemplo, las esporas de Clostridium botulinum son
destruidas en 4 a 20 minutos a 120 C en calor hmedo, mientras que se
necesitan alrededor de 2 horas de exposicin al calor seco para obtener los
mismos resultados.

A.- Esterilizacin por calor hmedo: (se utiliza para soluciones acuosas)
Autoclave: El calor en la forma de vapor a saturacin y a presin es el

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agente ms prctico para esterilizar ya que el vapor a presin proporciona
temperaturas superiores a las que se obtienen por ebullicin. El aparato
utilizado se llama autoclave (una olla que regula la presin interna y el
tiempo). Los autoclaves de laboratorio se emplean generalmente a una
presin de vapor de una atmsfera por encima de la presin atmosfrica lo
cual corresponde a una temperatura de 120 C. El tiempo de exposicin
depende del volumen del lquido, de tal manera que para volmenes
pequeos (hasta unos 3 litros) se utilizan 20 minutos a 120 C; si los
volmenes son mayores debe alargarse el tiempo de tratamiento. Algunos
materiales no se deben esterilizar en el autoclave. Sustancias que no se
mezclan con el agua no pueden ser alcanzadas por el vapor sobreviviendo
los microorganismos que contengan. Otras sustancias se alteran o son
destruidas por tratamientos prolongados de calor emplendose en estos
casos otros mtodos de esterilizacin.
Tindalizacin: Se utiliza cuando las sustancias qumicas no pueden
calentarse por encima de 100 C sin que resulten daadas. Consiste en el
calentamiento del material de 80 a 100 C hasta 1 hora durante 3 das con
sucesivos perodos de incubacin. Las esporas resistentes germinarn
durante los perodos de incubacin y en la siguiente exposicin al calor las
clulas vegetativas son destruidas.
Pasteurizacin: La leche, nata y ciertas bebidas alcohlicas (cerveza y vino)
se someten a tratamientos de calor controlado que slo matan a ciertos
tipos de microorganismos pero no a todos. La leche pasteurizada no es
estril. La temperatura seleccionada para la pasteurizacin se basa en el
tiempo trmico mortal de microorganismos patgenos (es el tiempo ms
corto necesario para matar una suspensin de bacterias a una temperatura
determinada). Mycobacterium tuberculosis es de los microorganismos
patgenos ms resistentes al calor que puede transmitirse por la leche
cruda y se destruye en 15 minutos a 60 C. Posteriormente se descubri que
Coxiella burnetti, agente causal de la fiebre Q, se encuentra a veces en la
leche y es ms resistente al calor que Mycobacterium tuberculosis por lo
que la pasteurizacin de la leche se realiza a 62,8 C durante 30 minutos o
a una temperatura ligeramente superior, 71,7 C durante 15 segundos
(Flash-Pasteurizacin).

B.- Esterilizacin por calor seco: (se utiliza para materiales slidos estables
al calor)
Horno Pasteur: El calor seco se utiliza principalmente para esterilizar
material de vidrio y otros materiales slidos estables al calor. El aparato que
se emplea es el horno Pasteur. Para el material de vidrio de laboratorio se
consideran suficientes dos horas de exposicin a 160 C.
Incineracin: La destruccin de los microorganismos por incineracin es una
prctica rutinaria en los laboratorios. Las asas de siembra se calientan a la
llama de mecheros Bunsen. La incineracin tambin se utiliza en la
eliminacin de residuos hospitalarios.

2.- Bajas Temperaturas

En general, el metabolismo de las bacterias est inhibido a temperaturas
por debajo de 0 C. Sin embargo estas temperaturas no matan a los
microorganismos sino que pueden conservarlos durante largos perodos de

CONCENTRACIN DE MICROORGANISMOS
tiempo. Esta circunstancia es aprovechada por los microbilogos para
conservar los microorganismos indefinidamente. Los cultivos de
microorganismos se conservan congelados a -70 C o incluso mejor en
tanques de nitrgeno lquido a -196 C.

3.- Radiaciones
A.- Radiaciones ionizantes
Rayos gamma: Las radiaciones gamma tienen mucha energa y son emitidas
por ciertos istopos radiactivos como es el Co60 pero son difciles de
controlar ya que este istopo emite constantemente los rayos gamma en
todas direcciones. Estos rayos gamma pueden penetrar los materiales por lo
que un producto se puede empaquetar primero y despus esterilizar.
Rayos catdicos (Radiacin con haz de electrones): Se usan para esterilizar
material quirrgico, medicamentos y otros materiales. Una ventaja es que el
material se puede esterilizar despus de empacado (ya que stas
radiaciones penetran las envolturas) y a la temperatura ambiente.

B.- Radiaciones no ionizantes

Luz ultravioleta: La porcin ultravioleta del espectro incluye todas las

radiaciones desde 15 a 390 nm. Las longitudes de onda alrededor de 265

nm son las que tienen mayor eficacia como bactericidas (200 - 295 nm). Se
usan para reducir la poblacin microbiana en quirfanos, cuartos de llenado
aspticos en la industria farmacutica y para tratar superficies
contaminadas en la industria de alimentos y leche. La luz UV tiene poca
capacidad para penetrar la materia por lo que slo los microorganismos que
se encuentran en la superficie de los objetos que se exponen directamente
a la accin de la luz UV son susceptibles de ser destrudos.

4.- Filtracin

Algunos materiales como los lquidos biolgicos (suero de animales,

soluciones de enzimas, algunas vitaminas y antibiticos) son termolbiles.
Otros agentes fsicos como las radiaciones son perjudiciales para estos
materiales e imprcticos para esterilizarlos, por lo que se recurre a la
filtracin a travs de filtros capaces de retener los microorganismos. Los
microorganismos quedan retenidos en parte por el pequeo tamao de los
poros del filtro y en parte por adsorcin a las paredes del poro durante su
paso a travs del filtro debido a la carga elctrica del filtro y de los
microorganismos. Debido al pequeo tamao de los virus, nunca es posible
tener certeza de que, por los mtodos de filtracin que dejan libre de
bacterias una solucin, se van a eliminar tambin los virus.

A.- Filtros de membrana

Los filtros de membranas son discos de steres de celulosa con poros tan
pequeos que previenen el paso de los microorganismos. Existen distintos
tipos de filtro dependiendo del tamao de poro. Estos filtros son
desechables. Adems de utilizarse en la esterilizacin de lquidos se usan en
el anlisis microbiolgico de aguas ya que concentran los microorganismos
existentes en grandes volmenes de agua.

B.- Filtros HEPA

Un filtro HEPA (High Efficiency Particulate Air) est compuesto por pliegues
de acetato de celulosa que retienen las partculas (includos los

CONCENTRACIN DE MICROORGANISMOS
microorganismos) del aire que sale de una campana de flujo laminar.

5.- DesecacinLa desecacin de las clulas vegetativas microbianas paraliza

su actividad metablica. Este proceso fsico se utilizaba ampliamente antes
del desarrollo de la refrigeracin. El tiempo de supervivencia de los
microorganismos despus de desecados depende de muchos factores, entre
ellos la especie microbiana. En general, los cocos Gram (-) son ms
susceptibles a la desecacin que los cocos Gram (+). Las endoesporas
bacterianas son muy resistentes a la desecacin pudiendo permanecer
viables indefinidamente.

6.- AGENTES ESTERILIZANTES QUIMICOS

Oxido de etileno: El requerimiento esencial para un agente qumico
esterilizante es que sea voltil as como txico para los microorganismos, de
manera que pueda ser fcilmente eliminado del objeto esterilizado despus
del tratamiento. Normalmente se utiliza el xido de etileno, un lquido que
hierve a 10,7 C. Se usa en la industria para la esterilizacin de placas Petri,
jeringas y otros objetos de plstico que se funden a temperaturas superiores
a los 100 C. Debido a su alto poder de penetracin estos objetos se
empaquetan primero y despus se esterilizan. El xido de etileno acta
inactivando enzimas y otras protenas que contienen grupos sulfidrilos (RSH) mediante una reaccin llamada alquilacin (R-S-CH2CH2O-H).
Glutaraldehido: Una solucin acuosa al 2% presenta una amplia actividad
antimicrobiana. Es efectivo frente a virus, clulas vegetativas y esporas de
bacterias y hongos. Se usa en medicina para esterilizar instrumentos
urolgicos y pticos.

7.- DESINFECTANTES Y ANTISEPTICOS

Esterilizacin: es el proceso de destruccin de todas las formas de vida
microbiana.
Desinfeccin: es el proceso de destruccin de los agentes infecciosos.
Desinfectantes: son aquellas sustancias qumicas que matan las formas
vegetativas y no necesariamente las formas de resistencia de los
microorganismos patgenos. Se refiere a sustancias empleadas sobre
objetos inanimados.
Antispticos: son aquellas sustancias qumicas que previenen el crecimiento
o accin de los microorganismos ya sea destruyndolos o inhibiendo su
crecimiento y actividad. Se refiere a sustancias que se aplican sobre el
cuerpo.

A.- INORGANICOS
1.- Metales: Los ms efectivos son el mercurio, plata ,cobre y zinc. Actan
inactivando las protenas celulares al combinarse con ellas. Entre los
compuestos de mercurio que se emplean como antispticos en heridas
superficiales de la piel y mucosas estn el mercurocromo (mercromina) y el
mertiolato. Entre los compuestos de plata utilizados como antispticos est

CONCENTRACIN DE MICROORGANISMOS
el nitrato de plata (AgNO3) que en solucin al 1% se ha utilizado para
prevenir infecciones gonoccicas en los ojos de los recin nacidos aunque
actualmente se est reemplazando por antibiticos como la penicilina. Entre
los compuestos de cobre se encuentra el sulfato de cobre (CuSO4) que se
utiliza como algicida en los recipientes abiertos que contienen agua.
Tambin es fungicida por lo que se utiliza para controlar las infecciones
fngicas de plantas (Mezcla Bordolesa). Los compuestos de zinc tambin
son fungicidas por lo que se utilizan para tratar el pi de atleta.
2.- Acidos y lcalis: Actan alterando la permeabilidad y coagulando las
protenas. En general los cidos son ms eficaces que los lcalis. Dentro de
estos compuestos se encuentran
el sulfrico (H2SO4), ntrico (HNO3), hidrxido sdico(NaOH) e hidrxido
potsico (KOH). Tienen aplicacin limitada debido a su naturaleza custica y
corrosiva. An as el NaOH se utiliza en la industria del vino para limpiar las
cubas de madera.
3.- Compuestos inorgnicos oxidantes : actan oxidando los componentes de
la membrana y enzimas. El agua oxigenada (H2O2) al 6% (20 volmenes) se
utiliza como antisptico en pequeas heridas de la piel.
4.- Halgenos: Los halgenos especialmente el cloro y el iodo son
componentes de muchos antimicrobianos. Los halgenos son agentes
fuertemente oxidantes por lo que son altamente reactivos y destructivos
para los componentes vitales de las clulas microbianas.
Cloro: La muerte de los microorganismos por accin del cloro se debe en
parte a la combinacin directa del cloro con las protenas de las membranas
celulares y los enzimas. As mismo en presencia de agua desprende oxgeno
naciente (O) que oxida la materia orgnica:

Cl2 + H2O ----------------> HCl + HClO (cido hipocloroso)

HClO ----------------> HCl + O (oxgeno naciente)
El gas cloro licuificado se utiliza en la desinfeccin del agua de bebida y
piscinas. El hipoclorito sdico (leja) al 1% se puede utilizar como
desinfectante domstico.
Iodo: El mecanismo mediante el cual el iodo ejerce su accin antimicrobiana
es debido a su accin oxidante. Adems la habilidad que tiene el iodo para
combinarse con el aminocido tirosina resulta en la inactivacin de enzimas
y otras protenas. El iodo se puede utilizar como antisptico bajo dos
formas: i) tintura de iodo, es una solucin alcohlica (tintura) de iodo (I2)
ms ioduro potsico (KI) o ioduro sdico (NaI). ii) iodforos, son mezclas de
iodo (I2) con compuestos que actan como agentes transportadores y
solubilizadores del iodo. Por ejemplo, la povidona iodada (Betadine) es un
complejo de iodo y polivinil pirrolidona (PVP). Los iodforos tienen la ventaja
de que no tien la piel. Las preparaciones de iodo se utilizan principalmente
para desinfectar la piel as como en la desinfeccin de pequeas cantidades
de agua. Los vapores de iodo se utilizan a veces para desinfectar el aire.

B.- ORGANICOS
Alcoholes: El alcohol metlico (1C) es menos bactericida que el etlico (2C) y
adems es altamente txico. Hay un aumento en el poder bactericida a
medida que aumenta la longitud de la cadena carbonada; pero como los

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alcoholes con peso molecular superior al del proplico (3C) no se mezclan en
todas las proporciones con el agua, no se suelen utilizar como
desinfectantes. Los alcoholes actan desnaturalizando las protenas,
disolviendo las capas lipdicas y como agentes deshidratantes. El etanol al
96% se usa como antisptico de la piel y como desinfectante en los
termmetros clnicos orales y algunos instrumentos quirrgicos.
Fenol y compuestos fenlicos: Una solucin acuosa al 5% de fenol mata
rpidamente a las clulas vegetativas de los microorganismos. Sin embargo,
las esporas son mucho ms resistentes al fenol. Debido a que el fenol es
txico y tiene un olor desagradable ya casi no se usa como desinfectante o
antisptico, siendo reemplazado por compuestos fenlicos que son
sustancias derivadas del fenol menos txicas y ms activas frente a los
microorganismos. Lysol es una mezcla de compuestos fenlicos que se
utiliza para desinfectar objetos inanimados como los suelos, paredes y
superficies. El fenol y compuestos fenlicos actan alterando la
permeabilidad de la membrana citoplsmica as como desnaturalizando
protenas.

Qu problemas ocasionan las algas cianobacterias en las zonas

de recreacin?

La inquietud de los problemas de salud debidos a cianobacterias txicas en las aguas

recreacionales se basa en varias fuentes de informacin. Son numerosos los casos de
intoxicacin letal de animales terrestres que consumen agua con crecimientos de
masa de cianobacterias. El primer caso documentado de una intoxicacin letal del
ganado causado por agua potable de un lago altamente plagado de cianobacterias se
public en el ltimo siglo y los casos registrados hasta ah incluyen ganado ovino,
bovino, caprino, porcino, perros, peces, roedores, anfibios, aves acuticas,
murcilagos, zebras y el rinoceronte. Los perros han muerto despus de lamer
acumulaciones de cianobacterias de su pelaje, o despus de ingerir natas de
cianobacterias bnticas.

Los casos de defunciones humanas debidas a toxinas cianobacterianas se han

limitado a la exposicin a travs de dilisis renal. Sin embargo, las deficiencias de
salud se conocen a partir de numerosos informes anecdticos de irritaciones de la piel
y/o mucosas, y tambin de casos documentados de enfermedades despus de la
exposicin a travs de agua potable as como la ingestin o aspiracin accidental de
material.
Modos en que las cianobacterias pueden afectarnos
1. Contacto directo de partes expuestas del cuerpo, incluidas reas sensibles como
odos, ojos, boca y garganta, y reas cubiertas por un traje de bao que pueden
recoger el material celular. Los trajes de bao y en particular, los trajes de buceo
tienden a agravar estos efectos al acumular el material de algas e incrementar la
destruccin de las clulas y liberacin del contenido celular.

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2. Ingestin accidental por tragar agua que contiene clulas. Los riesgos de la
ingestin son mayores para nios que juegan en agua de poca profundidad cerca de la
orilla donde las concentraciones de nata tienden a ser las ms altas. Para personas
que ingieren reiteradamente pocos mililitros de agua rica en cianobacterias que
contiene microcistinas (es decir, durante un da feriado donde se practican deportes
acuticos en varios das consecutivos), el dao heptico acumulativo puede presentar
un mayor riesgo que un nico evento de ingestin accidental.
3. Ingestin del agua que contiene clulas mediante la aspiracin (inhalacin). Varios
estudios con hombres y animales indican que la inhalacin a travs de las mucosas
nasales y faringeas pueden presentar un alto riesgo en deportes acuticos que
incluyen la sumersin constante de la cabeza (buceo, competencias de natacin) o
inhalacin de aerosoles (esqu acutico).

Explique los problemas que ocasiona el crecimiento de plantas

acuticas y algas en lagos.

En general, las algas son de poco valor para su estanque o lago- Las formas
filamentosas y plantnicas se pueden reproducir a un ritmo fenomenal, y, repentinas
mortandades pueden producir el agotamiento del oxgeno. Otro tipo de plantas
acuticas de la cuenca de agua, que florecern sin la competencia de las algas
pueden suministrar el oxgeno necesario en los estanques de peces o de los lagos
Los problemas de algas estn producidos normalmente por un exceso de nutrientes
(nitrgeno y fsforo) en el estanque. Desde el momento en que se construye un
estanque, ste se convierte en una cuenca de sedimentacin de nutrientes, lavados
desde el terreno circundante y drenados hasta la cuenca. Cunto ms envejece un
estanque, ms nutrientes se habrn acumulado, y se vuelve ms susceptible a
problemas con las algas. La escorrenta desde campos fertilizados, cspedes y
praderas, instalaciones de engorde de ganado, depsitos spticos y campos de
lixiviados, aceleran la carga de nutrientes y el crecimiento de las algas en el estanque.
El excesivo crecimiento de las algas har pasar hambre o suprimir otras formas de
vida de las plantas acuticas y puede bloquear la luz solar necesaria para su
adecuado crecimiento. Problemas de sabor y olor en el agua potable y, algunas veces,
la muerte de los peces, se asocian con floraciones excesivas de las algas plantnicas.
Las algas filamentosas y las algas macrfitas forman a menudo densos agregados que
hacen que la pesca, la natacin, y otros usos recreativos sean casi imposibles. La
cubierta total puede restringir la penetracin de la luz del sol y limitar la produccin de
oxgeno y alimentos necesarios para el crecimiento de los peces. Cuando la
abundancia de las algas interfiere con el uso pretendido del estanque, debe
empezarse a pensar en un procedimiento de control.

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