MICROBIOLOGA AMBIENTAL

INFORME DE LABORATORIO

PRESENTADO POR:
DALIANA CUADROS VERGEL CD. 1064723020
JOS MARA SNCHEZ CD. 77094651
MILENA QUINTERO CD. 1064116387
SANDY MARA BELTRN CD. 1101692413

TUTOR VIRTUAL:
JORGE ALEJANDRO RODRGUEZ

TUTORA DE LABORATORIO:
ALEJANDRA CUELLO SNCHEZ

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD

ESCUELA DE CIENCIAS AGRCOLAS, PECUARIAS Y DE MEDIO AMBIENTE
2015

INTRODUCCION
La microbiologa es la rama de la biologa que estudia los microorganismos o microbios. Estos
son tan abundantes y variados que se calcula que apenas se han estudiado un 1% de los
microorganismos presentes en nuestro planeta.
Realizacin de procesos tanto en sistemas naturales como artificiales. Esta rea de la
microbiologa es especialmente interdisciplinaria (Madsen, 2008).
Todos los seres vivos tienen caractersticas estructurales en comn que permite a los taxnomos
agruparlos y clasificarlos para poder asignarles un nombre cientfico. La sistemtica o filogenia
estudia la clasificacin de las especies considerando su historia evolutiva.
La mayor categora taxonmica que divide a los organismos vivos es el Dominio, propuesta por
el cientfico estadounidense Carl Woese, existen tres dominios: Eukarya, Bacteria y Archaea. En
Eukarya se encuentran los hongos, plantas, animales y protistas. En Bacteria, las procariotas
patgenas y no patgenas presentes en aire, suelo y agua, las procariotas fotoauttrofos. Y por
ltimo en el dominio Arquea se agrupan todas las clulas procariotas que no tienen
peptidoglicano en su pared celular, las cuales en su mayora viven en ambientes extremos o
tienen actividades metablicas poco comunes (Tortora et al. 2007).
La unidad fundamental de la clasificacin es la especie, son el grupo ms estrechamente
relacionado que tiene la capacidad de reproducirse entre s. Las especie pueden agruparse y
formar gneros, los gneros relacionados forman una familia y las familias similares un orden y
el grupo de rdenes constituyen una clase y las clases relacionadas forman un filo y stos un
reino y los reinos relacionados se agrupan en dominios (Tortora et al. 2007).
Los virus no estn considerados como seres vivos por lo tanto no se ubican en ninguno de los
dominios descritos anteriormente.

RESUMEN
Primeramente se realiza la inoculacin de medios de cultivos para la recuperacin,
mantenimiento y/o aislamiento de microorganismos, estas muestras absorbieron un tiempo de
treinta y cuatro (34) das lo cual fue muy favorable para el crecimiento de los microorganismos
sembrados fuera mayor.
Luego se realiz la tincin simple y tincin compuesta de diferentes muestras, arrogando distintas
morfologas observadas atreves del microscopio.
Tambin se logr realizar la observacin microscpica de los hongos, cuando se estudian los
hongos se pudo observar dos grandes grupos, los patgenos (moho) y otros en forma de colonia
hmedas (levaduras).
Por ltimo se menciona los factores fsicos y qumicos, los cuales tienen un efecto notable sobre
la vida de los microorganismos en su medio ambiente natural (control y crecimiento bacteriano).

PRACTICA N. 1
RECONOCIMIENTO DEL LABORATORIO Y MATERIALES DE MICROBIOLOGA
1. Qu caractersticas debe reunir el vidrio utilizado para la fabricacin del material
de cristalera para los laboratorios y por qu?
El Vidrio para la fabricacin de cristalera para laboratorio es un vidrio de borosilicado, ya que
contiene xidos de silicio y boro. Adems del silicio, el carbonato de sodio y el carbonato de
calcio usado tradicionalmente en la fabricacin de vidrio, el boro es usado en la manufactura de
este vidrio. Su uso para laboratorio se debe a que el vidrio de borosilicado tiene un coeficiente de
dilatacin de aproximadamente un tercio del vidrio comn, hacindolo ms resistente que otros
vidrios al choque trmico y tambin le otorga resistencia qumica.
2. Explique brevemente las ventajas y desventajas del uso de materiales de vidrio y de
plstico, respectivamente, en los laboratorios de microbiologa.

Vidrio
Ventajas:

Se caracteriza porque tiene mucha resistencia qumica (frente a cidos, frente a bases...),
tiene mayor resistencia que el plstico, es muy estable, se caracteriza por su transparencia.
Gran resistencia a altas temperaturas.

Desventajas:

No se pueden someter a cambios bruscos de temperatura (se provocan tensiones que

pueden romper el cristal).
No se deben someter a variaciones bruscas de presin.

Plstico
Ventajas:

Durables: Los plsticos pueden resistir el uso y abuso diario sin caerse en pedazos.
Resistentes al medio ambiente: Los plsticos son capaces de resistir distintas condiciones
climticas sin desintegrarse.
Bajo costo.
Fcil maleabilidad.
Buena resistencia mecnica.
Buena resistencia a la corrosin.
Amplia variedad de polmeros con distintas propiedades.

Desventajas:

Baja conductividad elctrica.

Baja resistencia a altas temperaturas.
Inflamables: Si bien es una ventaja que puedan fundirse. Pero Tambin el plstico
ardiendo, puede liberar gases txicos.
baja resistencia a temperaturas.

3. Describa, ilustre y clasifique los siguientes materiales, indicando el uso que se les da
en el laboratorio de microbiologa (Sea breve, se le sugiere elaborar un cuadro):
a) Portaobjetos
b) Cubreobjetos
c) Cajas de Petri
d) Pipetas graduadas (terminales y no terminales)
e) Pipetas Pasteur
f) Tubos de ensayo (tipos)
g) Matraces (tipos)
h) Probetas (tipos)
i) Tubos de Durham
j) Asas de inoculacin (tipos)
k) Mecheros (tipos)
l) Estufas bacteriolgicas (tipos)
m) Bao bacteriolgico
n) Horno Pasteur
o) Autoclave
p) Jarra de anaerobiosis
q) Centrfuga
r) Nefelmetro de Mac Farland

s) Membranas Millipore
t) Cuenta colonias

Material

Descripcin-Usos

Portaobjetos

Es una muy fina placa de vidrio sobre el

cual se disponen muestras para visualizarlas
en el microscopio. Sus dimensiones tpicas
son de 75 mm x 166 mm.

Cubreobjetos

Es una fina hoja de material transparente de

planta cuadrada (normalmente 20mm x
20mm) o rectangular (de 20 mm x 40 mm
habitualmente). Se coloca sobre un objeto
que va a ser observado bajo microscopio, el
cual se suele encontrar sobre un
portaobjetos.
Recipiente redondo, de cristal o plstico, con
una cubierta de la misma forma que la placa,
pero algo ms grande de dimetro, para que
se pueda colocar encima y cerrar el
recipiente. Se utiliza en Microbiologa para
cultivar clulas, observar la germinacin de
las semillas o examinar el comportamiento
de pequeos animales.

Cajas de Petri

Pipetas
graduadas
terminales y no
terminales

Son utensilios que permiten medir

volmenes.
Pipetas graduadas: Es un elemento de vidrio
que sirve para dar volmenes exactos, con
esta pipeta, se pueden medir distintos
volmenes de lquido, ya que lleva una
escala graduada. Existen 2 tipos de pipetas
graduadas:
Terminales: la escala de graduacin
termina en la punta de la pipeta
Subdeterminales: la escala de
graduacin no termina en la punta
de la pipeta.

Ilustracin

Pipetas pasteur Similar

a
un
utensilio
de gotero,
generalmente formada por un tubo
de vidrio con borde cnico. Sirve para hacer
la transferencia de pequeas cantidades de
lquidos.

Tubos
ensayo

de Pequeo tubo cilndrico de vidrio con un

extremo abierto y el otro cerrado y
redondeado, se utiliza para contener
pequeas muestras lquidas o slidas, o
realizar reacciones qumicas en pequea
escala.

Matraz
volumtrico

Matraz baln

Son matraces de vidrio que se utilizan

cuando se preparan soluciones valoradas, los
hay de diversas medidas como: de 50 ml,
100 ml, 200 ml, 250 ml, 500 ml,1 L. etc.

Es un recipiente que permite contener

sustancias.
Es un recipiente que se utiliza para contener

Matraz baln sustancias es una variacin del matraz baln.

de fondo plano
Matraz
Erlenmeyer

Es un recipiente que permite contener

sustancias o calentarlas.

Probeta

Es un utensilio que permite medir

volmenes estn hechas normalmente de
vidrio pero tambin las hay de plstico. As
mismo las hay de diferentes tamaos
(volmenes).

Tubos
Durham

de Los tubos de ensayo Durham se utilizan en

microbiologa para determinar la produccin
de gases de microorganismos. Se colocan
estos tubos con la abertura hacia abajo en
probetas ms grandes.

Asas
de Se emplea para transportar o arrastrar o
trasvasar inculos (pequeo volumen que
inoculacin
contiene microorganismos en
suspensin)
desde la solucin de trabajo tambin llamada
solucin madre al medio de cultivo.

Mechero
bunsen

Es
un instrumento utilizado
en
los
laboratorios cientficos para calentar
o esterilizar muestras o reactivos qumicos.

Estufa
bacteriolgica

Es un equipo indispensable en la seccin de

bacteriologa, se utilizan a una temperatura
de 37C, para realizar cultivos de bacterias,
hongos, a una temperatura igual a la del
cuerpo humano

Bao
bacteriolgico

Es un equipo que se utiliza en el laboratorio

para realizar pruebas serolgicas y
procedimientos de incubacin, aglutinacin,
inactivacin, biomdicos, farmacuticos y
hasta industriales.

Horno Pasteur

Dispositivo
elctrico utilizado
para esterilizacin que
forman
parte
del equipamiento de laboratorio.

Autoclave

Recipiente de presin metlico de

paredes gruesas con un cierre hermtico
que permite trabajar a alta presin para
realizar una reaccin industrial, una
coccin o una esterilizacin con vapor
de agua.

Jarra
de Es un recipiente ideal para realizar
incubaciones en anaerobiosis ya que en su
anaerobiosis
soporte de acero inoxidable se pueden
instalar bolsas de generacin de atmsfera
libre de oxgeno.

Centrifuga

Mquina que
pone
en rotacin una muestra para por fuerza
centrfuga acelerar la decantacin o
la sedimentacin de sus componentes o
fases (generalmente una slida y una
lquida), segn su densidad.

Nefelmetro de Se usan como referencia en suspensiones

bacteriolgicas para saber que el nmero de
Mac Farland
bacterias por mililitro.

Membranas
Millipore

Membrana que tiene agujeros tan

pequeos, que las bacterias no pueden
pasar a travs de ellos.

Cuenta
colonias

Instrumento
utilizado
para contar
colonias
de
bacterias o
de
otros microorganismos que crecen en
una placa de agar.

4. Ilustre un Microscopio ptico de campo claro con los nombres de todas sus
partes.

5. Enliste detalladamente todas las medidas que se requiere tomar en cuenta para
el manejo correcto y cuidados del microscopio compuesto.
a)
Para transportar el microscopio deben utilizarse siempre las dos manos, sujetndolo
por el brazo con una mano y por el pie con la palma de la otra.
b)
Una vez colocado el microscopio en su sitio, no debe moverse hasta que finalice la
prctica. Cuando se vaya a cambiar de observador se debe mover l y no el microscopio.
c)
Mover siempre suave y lentamente cualquier elemento del microscopio.
d)
Nunca poner los dedos en las lentes del ocular ni del objetivo. Si se ensucian dichas
lentes se limpiarn con un pao suave de algodn, sin utilizar ningn disolvente.
e)
No sacar de su sitio el ocular ni los objetivos, a no ser que vayan a ser sustituidos, en
cuyo caso la operacin debe realizarse lo ms rpidamente posible, para evitar la entrada de
polvo.
f)
Asegurarse de que el portaobjetos est bien seco cuando va a ser colocado sobre la
platina.
g)
Al enfocar, sobre todo con los objetivos de mayor aumento, hay que evitar que el
extremo del objetivo choque con la preparacin. Para ello acercaremos el objetivo a la
preparacin mirando lateralmente y luego, mirando ya a travs del ocular, enfocamos
alejando el objetivo.
6. Enliste detalladamente todos los pasos que se requiere seguir para enfocar
imgenes en un microscopio compuesto.

a) Quitar la funda protectora del microscopio.

b) Enchufar/encender el microscopio.
c) Colocar en primera instancia el objetivo de menor aumento para lograr un enfoque
correcto. Subir el condensador utilizando el tornillo correspondiente.
d) Colocar el preparado sobre la platina, con el cubre-objetos hacia arriba y sujetndola con
las pinzas/guas.
e) Enfoque el preparado mirando a travs del ocular y lentamente mueva el tornillo
micromtrico.
f) Recorra todo el preparado y haga sus observaciones. Elija el sitio donde debe seguir
observando a mayor aumento.
g) Cambie al objetivo de mediano aumento (20 X) y para lograr el enfoque siga moviendo
lentamente el tornillo micromtrico. Al cambiar de objetivo, la imagen debe estar
ligeramente enfocada gracias a que la mayora de microscopios son para focales, es decir,
una vez logrado el primer enfoque, al pasar al objetivo de aumento inmediato superior la
imagen queda en un foco aproximado y solo se debe realizar un ajuste.
h) Realice la observacin y haga sus anotaciones. Determine cul es la estructura que va a
observar a mayor aumento y colquela en el centro del campo.
i) Cambie al objetivo de mayor aumento. Si realiz el enfoque de manera correcta con el
objetivo anterior, al colocar el objetivo de mayor aumento la imagen solo se debe enfocar
girando nica y lentamente el tornillo MICROMTRICO. NUNCA se debe utilizar el

j)

k)
l)
m)
n)

tornillo micromtrico con los objetivos de mayor aumento, pues al estar ste muy cerca
del preparado, se corre el riesgo de partirlo.
Al lograr el enfoque con el objetivo de mayor aumento debe realizar la observacin
moviendo constantemente el tornillo micromtrico para variar los planos de enfoque. De
igual manera, abra o cierre el diafragma para regular la intensidad de la luz y mejorar el
contraste. Haga sus observaciones.
Una vez finalizada la observacin, aleje la platina y coloque nuevamente el objetivo de
menor aumento.
Retire la muestra.
Limpie la lente objetivo si us medio de inmersin, apague la/s lmpara/s.
Cubra el microscopio con la funda protectora.
7. Defina los siguientes trminos en microscopa: Lmite de resolucin, poder de
resolucin y poder de amplificacin, indicando la frmula mediante la que se
calculan cada uno.

Poder de resolucin: es la capacidad de presentar dos puntos que se encuentran muy cercanos
entre s como separados, lo cual permite observar detalles de los objetos que con el ojo humano
no se podran ver. El ojo humano no puede ver separados dos puntos cuando su distancia es
menor a una dcima de milmetro. Con el Microscopio ptico, el poder separador mximo es de
0,2 dcimas de micra. Mejora la visin unas 500 veces con relacin a la del ojo humano.
El Poder de resolucin est dado por la frmula:
Poder de resolucin= / 2x A.N.
8. Mencione los tipos de microscopio electrnico que existen actualmente y cules
son las diferencias y ventajas que usted considera ms importantes entre estos y
el microscopio ptico cuando se trabaja en un laboratorio de microbiologa.

Microscopio compuesto: es un aparato ptico hecho para agrandar objetos, consiste en un

nmero de lentes formando la imagen por lentes o una combinacin de lentes posicionados cerca
del objeto, proyectndolo hacia los lentes oculares u el ocular. El microscopio compuesto es el
tipo de microscopio ms utilizado.
Microscopio ptico: tambin llamado "microscopio liviano", es un tipo de microscopio
compuesto que utiliza una combinacin de lentes agrandando las imgenes de pequeos objetos.
Los microscopios pticos son antiguos y simples de utilizar y fabricar.
Microscopio digital: tiene una cmara CCD adjunta y est conectada a un LCD, o a una pantalla
de computadora. Un microscopio digital usualmente no tiene ocular para ver los objetos
directamente. El tipo trilocular de los microscopios digitales tienen la posibilidad de montar una
cmara, que ser un microscopio USB.

9. Cul es la utilidad del asa recta y redonda?

El asa recta o en hilo sirve para trasladar una sola colonia a medios de identificacin, o subcultivo. El asa redonda generalmente es de alambre de nicromo. Sirve para la siembra por estras
e inoculaciones en general.
10. Qu se entiende por resiembra o pase bacteriano?
Es el proceso mediante el que clulas, ya sean clulas procariotas o eucariotas, pueden cultivarse
en condiciones controladas.

PRACTICA N.2
MTODOS DE SIEMBRA
o PARTE A
Objetivo general
Inocular medios de cultivos para la recuperacin, mantenimiento y/o aislamiento de
microorganismos.
Objetivos especficos
Reconocer que es mtodo de siembra y las formas que hay de realizarlas.
Diferencias los microorganismos sembrados.
Estudiar e identificar los resultados obtenidos.

MARCO TERICO

Crecimiento microbiano: Entendemos por crecimiento microbiano el aumento del nmero de

microorganismos a lo largo del tiempo. Por tanto, no nos referimos al crecimiento de un nico
microorganismo que denominaremos ciclo celular, sino al demogrfico de una poblacin. En este
tema nos centraremos en el crecimiento de bacterias, el estudio que se hace puede servir tambin
para entender el crecimiento de levaduras y de otros hongos.
Cultivo de microorganismos: El cultivo de microorganismos consiste en proporcionarles las
condiciones fsicas, qumicas y nutritivas adecuadas para que puedan multiplicarse de forma
controlada. En general, podemos distinguir cultivos lquidos y slidos en funcin de las
caractersticas del medio y cultivos discontinuos y continuos en funcin de la disponibilidad de
nutrientes en el medio
Medios de cultivo: Un microorganismo necesita para crecer nutrientes que le aporten energa y
elementos qumicos para la sntesis de sus constituyentes celulares. Dependiendo de la fuente de
carbono que utilizan, los microorganismos se pueden clasificar en auttrofos si es el CO2
atmosfrico (microorganismos que fotosintetizan) y hetertrofos si utilizan carbono orgnico.
Inoculacin de semillas: es una prctica que busca logar la adherencia efectiva de un alto
nmero de bacterias fijadoras de Nitrgeno (Azospitillium y Micorrizas) sobre la superficie de las
semillas de leguminosas y gramneas previo a la siembra de las mismas
Microorganismos: Los microorganismos son formas de vida muy pequeas que slo pueden ser
observados a travs del microscopio. En este grupo estn incluidos las bacterias, los virus, los
mohos y las levaduras. Algunos microorganismos pueden causar el deterioro de los alimentos

entre los cuales se encuentran los microorganismos patgenos, que a su vez pueden ocasionar
enfermedades debido al consumo de alimentos contaminados.

MATERIALES Y EQUIPOS
Materiales
Muestra contaminada con microorganismos
Agua peptonada al 0,1% estril
Vinipel
Agar nutritivo en caja de Petri
Asa redonda

Equipos
mechero
gradilla
incubadora
Marcador de vidrio

PROCEDIMIENTO
Primeramente desinfectamos el rea de trabajo, prendimos el mechero y preparamos los
materiales a trabajar.
Tomamos parte de la muestra y la colocamos en el tubo de ensayo que contiene agua
peptonada.
Dejamos 20-30 minutos en incubacin los tubos.
Realizamos el diagrama de aislamiento de colonias, en el crculo de papel, y lo reposamos
debajo de la caja de Petri.
Despus de finalizar el tiempo de incubacin tomamos el asa redonda y la esterilizamos
por calos hasta que tomo un color rojo, dejamos enfriar cerca del mechero.
Luego abrimos el tubo que contena las muestras y tomamos una asada.
Cerramos el tubo y lo colocamos en la gradilla.
Abrimos la caja de Petri y seguimos el esquema para el aislamiento.
Terminando la siembra marcamos las cajas y las envolvimos en papel vinipel.
Colocamos el tubo y la caja a incubar a 37C.
Observamos el resultado.
RESULTADOS:
Muestra N 1. Lulo

Muestra N 2. Cebolla

Muestra N 3. Moho de pan

Muestra N 4. Tomate

ANLISIS DE RESULTADO
A estos cuatro procedimientos se les denomina aislamiento de bacterias, debido a que las
bacterias presentes en las muestras se distribuyen sobre las superficies de los agares, y cada
clula se reproduce independientemente hasta formar un conglomerado de bacterias observables a
simple vista (colonia bacteriana). De esta manera es posible que observramos sobre la superficie
del medio, colonias de diferentes caractersticas en cuanto a forma, superficie, borde, forma,
color, aspecto y elevacin, lo que indica microscpicamente presencia de diferentes tipos
microbianos en la muestra. As se puede estudiar e identificar independientemente cada especie.

PRACTICA N.3
TCNICAS DE TINCIN
Objetivo general
Analizar y reconocer las tcnicas de coloracin simple y coloracin compuesta y las distintas
morfologas que se presenten durante el procedimiento.
Objetivos especficos
Reconocer las bacterias a observadas.
Identificar los materiales suministrados para obtener la muestra.
Analizar los resultados obtenidos.
Identificar la morfologa (coco, bacilo y etc.) y tipo de tincin (Gram positiva o Gram
negativa) de las cepas proporcionadas.

MARCO TERICO

Tincin: Es el proceso por el cual las molculas de un colorante se adsorben a una superficie. El
uso de colorantes permite cambiar el color de las clulas de los microorganismos y poder realizar
la observacin en microscopio ptico. Dado que las bacterias son casi incoloras, no presentan
contraste con el medio en el cual se encuentran suspendidas y no pueden observarse claramente
sin algn tratamiento previo.
Tincin diferencial de Gram: Esta tincin se denominada as por el bacterilogo dans
Christian Gram, quien la desarroll en 1844. Sobre la base de su reaccin a la tincin de Gram,
las bacterias pueden dividirse en dos grupos, grampositivas y gramnegativos (en este caso, los
trminos positivo y negativo no tiene nada que ver con carga elctrico, sino simplemente
designan dos grupos morfolgicos distintos de bacterias).
Bacterias: Las bacterias son organismos unicelulares microscpicos, sin ncleo ni clorofila, que
pueden presentarse desnudas o con una cpsula gelatinosa, aisladas o en grupos y que pueden
tener cilios o flagelos.
La bacteria es el ms simple y abundante de los organismos y puede vivir en tierra, agua, materia
orgnica o en plantas y animales.

MATERIALES Y EQUIPOS
MATERIALES

EQUIPOS

Colonias aisladas de bacterias para

observacin bacterias

Microscopio ptico

Agua destilada estril

Asas bacteriolgicas redondas y asa recta

Azul de metileno

machero

Cristal violeta

Guantes de ltex

Lugol

Lamina portaobjetos

Alcohol acetona

Laminillas cubreobjetos

Fucsia bsica o safranina

Tinta china

PROCEDIMIENTOS
COLORACIN SIMPLE

En una lmina portaobjetos colocamos una gota de agua destilada estril, luego con la
ayuda de un asa redondea estril extendimos la gota de suspensin.

Dejamos que la preparacin se secara al aire, fijamos con calor.

Dejamos enfriar la muestra.

Colocamos la preparacin sobre una rejilla del vertedero.

Cubrimos la suspensin con los colorantes, cristal de violeta (1mn), azul de metileno
(5mn), fucsina (1mn).

Lavamos suavemente eliminando los colorantes, dejamos secar y observamos a 100X.

RESULTADO:
LECTURA AGRUPACIONES BACTERIANAS
Color:

Morado

Tamao:

1,3 mm de dimetro por 3 a 5 mm de largo.

Forma:

Cilndrica cadenas cortas.

 En esta prctica se realiz tincin simple, donde se utilizan unos colorantes, con el objeto
de permitir la observacin de la morfologa bacteriana.
Se aplic la coloracin, para determinar tipo de pared y la morfologa de las clulas
bacterianas, as como el tipo de agregacin, mediante observacin microscpica.
En la caracterizacin microscpica, se identific la especie de 1,3 mm de dimetro por 3 a
5 mm de largo con bordes redondeados aproximadamente, que forman cadenas cortas. Se
observan esporas cilndricas subterminales.

COLORACIN COMPUESTA

Realizamos un frotis a la muestra a estudiar.

Colocamos una rejilla para la coloracin y cubrimos el frotis con el cristal violeta (1mn),
Lavamos con agua el colorante.

Agregamos el segundo colorante Lugol (1mn).

Realizamos la decoloracin con alcohol-acetona (25seg), lavamos inmediatamente con

agua.

Despus adicionamos el colorante de contraste en este caso safranina (30seg), lavamos

con agua.

Dejamos secar la muestra y montamos al microscopio y observamos.

Resultado:
Compuesta de Cebolla

En estas muestras se observaron bacterias

Gram + en forma de diplococos, en 40x y 100x.

Compuesto de lulo

En esta se observaron bacterias

Gram +, en 40x.

obs
Compuesto de boca

En esta se observaron Gram + en forma de diplococos.

ANLISIS DE RESULTADO
Este tipo de tincin presenta un inters especial por su importancia en taxonoma bacteriana. Con
este procedimiento de tincin se constituye el punto de partida de cualquier procedimiento de
identificacin de bacterias.

PRACTICA N.4
OBSERVACIN MICROSCPICA DE LOS HONGOS

Objetivo general
Conocer los dos grandes grupos de hongos, los algodonosos que se conocen como los mohos y
las colonias hmedas y se conocen como levaduras.
Objetivo especifico
analizar las diferencias de cada especie observadas.
Estudiar en que grupo se encuentran las muestras en observacin.
Identificar los resultados arrojados.
MARCO TERICO
Hongos: los hongos son un grupo de seres vivos diferentes a las planta y de los animales, razn
por la cual se clasifican en un reino aparte llamado fung. La ciencia que estudia se llama
micologa (Mykes=hongos y lodos=estudio). Poseen gran capacidad de adaptacin y pueden
desarrollarse sobre cualquier medio o superficie, tanto en los bosques como en las ciudades. Se
reproducen por medio de esporas, las cuales son diseminadas principalmente por el viento y por
el agua.
Microscopio ptico: El funcionamiento del microscopio ptico se basa en un sistema de
lentes cuyo esquema puedes ver en la imagen adjunta. El microscopio ptico ms comn hoy en
da es el microscopio ptico compuesto. Este microscopio combina al menos dos juegos de
lentes, el objetivo y el ocular.
La clula: Segn el nmero de clulas que los forman, los seres vivos se pueden clasificar
en unicelulares y pluricelulares.
Unicelulares: Son todos aquellos organismos formados por una sola clula. En este grupo, los
ms representativos son los protozoos -ameba, paramecio, euglena-, que slo pueden observarse
con un microscopio.
Pluricelulares: Son todos aquellos organismos formados por ms de una clula. Existe gran
variedad de ellos, tales como los vertebrados (aves, mamferos, anfibios, peces, reptiles) y los
invertebrados (arcnidos, insectos, moluscos, etc.).

MATERIALES Y EQUIPOS

MATERIALES
Cultivos de hongos
Azul de lactofenol

EQUIPOS
Laminas portaobjetos
laminillas
microscopio

PROCEDIMIENTO
Colocamos en una lmina de portaobjetos una gota de azul de lactofenol, luego tomamos
con el asa micologa previamente estril parte del hongo y los suspendimos en la gota del
colorante.
Colocamos luego una laminilla encima de esta preparacin y esperamos 3 minutos.
Finalizando el tiempo montamos en el microscopio y observamos.
Dibujamos las caractersticas.

PRACTICA N.5
CONTROL DEL CRECIMIENTO BACTERIANO

Objetivo general
Observar cmo crecen las bacterias a estudiar, como son sus caractersticas y la importancia de
cada una de ellas representan en el mundo.
Objetivos especficos
analizar la accin de temperatura.
Estudiar el pH arrojado por las muestras.
Identificar la accin de la presin osmtica y la de la luz ultravioleta.
MARCO TERICO
Crecimiento bacteriano: Se suele definir el crecimiento de cualquier sistema biolgico como el
incremento ordenado de todos los elementos componentes de ese sistema, lo cual implica un
aumento de la masa celular que eventualmente conduce a la multiplicacin celular. En
organismos pluricelulares dicha multiplicacin se traduce en un aumento del tamao del
individuo, mientras que en unicelulares que se dividen por fisin o por gemacin, lo que ocurre
es un aumento de la poblacin. En los microorganismos cenocticos (en los que la duplicacin del
genoma no se acompaa de divisin celular) el crecimiento se traduce en aumento de tamao de
la colonia cenoctica.
Temperatura: es una propiedad de la materia que est relacionada con la sensacin de calor o
frio que se siente en contacto con ella. Cuanto tocamos un cuerpo que est a menos temperatura
que el muestro sentimos una sensacin de frio, al revs de calor. Sin embargo, aunque tenga una
estrecha relacin, no debemos confundir la temperatura con el calor. Cuando dos cuerpos, que se
encuentra en distintas temperaturas, se ponen en contacto, se produce una transferencia de
energa, en forma de calor, desde el cuerpo caliente a frio, esto curre hasta que las temperaturas
de ambos cuerpos se iguales, en este sentido, la temperatura es un indicador de la direccin que
toma la energa en su trnsito de unos cuerpos a otros.
PH: cida y bsica son los dos extremos que describen las sustancias qumicas, tal y como
caliente y fro son los dos extremos que describen la temperatura. La mezcla de cidos y bases
puede cancelar sus respectivos efectos extremos, de la misma forma que al mezclar agua caliente
con agua fra se equilibra la temperatura del agua. Una sustancia que no es ni cida ni bsica es
neutra.
Presin osmtica: Se conoce como presin a la consecuencia de aplicar compresin o apretar algo.
Estos verbos describen actividades como estrechar, ajustar, apiar u oprimir. Esto significa que
una presin es una fuerza que se destina a una cosa. El trmino tambin se emplea para nombrar

una magnitud de raz fsica que da cuenta de la fuerza que ejerce un objeto o elemento respecto a la
unidad de superficie.
Luz ultravioleta: El termino luz ultravioleta (UV) es aplicado a la radiacin electromagntica

emitida por la regin del espectro que ocupa la posicin intermedia entre la luz visible y los rayos
X. El espectro ultravioleta est dividido en tres reas designadas: UV-A, UV-B y UV-C. La
longitud de onda que produce el bronceado de la piel est en la regin UV-A.

MATERIALES Y EQUIPOS
MATERIALES
Cultivo de un microorganismo Gram-positivo.
Cultivo de un microorganismo Gram-negativo.
Medio de cultivo nutritivo en cajas de Petri
con diferentes pHs.
Medios de cultivo nutritivo en cajas de Petri
con diferentes concentraciones de NaCl.
Medio de cultivo nutritivo en caja de Petri.
Caldo nutritivo.

EQUIPOS
Pipetas de 1 y 2 mL
Estufa
Vaso precipitado de 500mL.
Incubadora

PROCEDIMIENTO
1. ACCIN DE LA TEMPERATURA
Suspendemos una colonia de microorganismos seleccionado del caldo nutritivo y dejamos por
media hora, luego tomamos 0.1 mL del medio y sembramos sobre el medio solido del agar
nutritivo. Llevamos el caldo nutritivo donde se inoculo los microorganismos a la estufa y lo
pusimos en ebullicin, llevamos las dos cajas de Petri e encubramos a 37C.
2. ACCIN DEL PH
Dividimos la base de las cajas en dos cuadrantes con el marcador de vidrio y con el asa redonda
sembramos por estra en un cuadrante el microorganismo Gram- Negativo y en el otro Gram positivo.
Realizamos este procedimiento con todos los medios de diferentes pH.

3. ACCIN DE LA PRESIN OSMTICA

Dividimos la base de las cajas en dos cuadrantes con el marcador de vidrio y con el asa redonda
sembramos por estra en un cuadrante el microorganismo Gram- Negativo y en el otro Gram positivo.

4. ACCIN DE LA LUZ ULTRAVIOLETA

Dividimos la base de las cajas en dos cuadrantes con el marcador de vidrio y con el asa redonda
sembramos por estra en un cuadrante el microorganismo Gram- Negativo y en el otro Gram positivo.
Tapamos la mitad de la caja con el papel de aluminio y colocamos sobre la otra parte de la caja de la luz
ultravioleta por 5 a 10 mn y tapamos la caja y llevamos a incubar.

Resultado:
1

Existen varios factores para el control del crecimiento bacteriano, los cuales se clasifican de la
siguiente forma:
-

Esterilizacin: consiste en la eliminacin total de los organismos viables que puedan

causar problemas de crecimientos indeseados.
Inhibicin: consiste en la limitacin del crecimiento microbiano.
Descontaminacin: tratamiento de un objeto para que el mismo sea seguro en su
manipulacin.
Desinfeccin: el objetivo principal es la remocin de los patgenos, pero esto no significa
la eliminacin de todos los microorganismos.

En el control del crecimiento microbiano existen dos clases de mtodos:

-

Mtodos Fsicos: calor, radiacin, filtracin.

Mtodos qumicos

La esterilizacin por calor, es el mtodo mayormente utilizado para el control del

crecimiento microbiano, la alta temperatura desnaturaliza macromolculas; el tiempo
requerido para reducir diez veces la viabilidad se llama tiempo de reduccin decimal.
Algunas bacterias producen formas de resistencias llamadas endosporas, pueden
sobrevivir a temperaturas que rpidamente exterminaran a clulas vegetativas.

El autoclave es el quipo caracterizado por estar sellado y usar vapor a presin,

permitiendo que la temperatura del agua llegue por encima de los 100C; no es la presin,
sino la temperatura lo que extermina a los microbios.
La pasteurizacin, usa calor de una forma controlada para la reduccin en la carga
microbiana de lquidos termo-sensibles. Esta tcnica no extermina todos los organismos,
por lo tanto no es una esterilizacin.

Control del crecimiento microbiano: Calor

Los microondas, UV, rayos X, rayos gamma y electrones pueden reducir el crecimiento
microbiano.
UV causan la suficiente energa para la modificacin y ruptura del ADN; siendo til para
la descontaminacin de superficies.
Radiacin ionizante: radiacin electromagntica que produce iones y otras molculas
reactivas, genera electrones y radicales hidroxilo, algunos microorganismos son ms
resistentes a la radiacin que otros, fuentes de radiacin incluyen tubos de rayos

Control de crecimiento microbiano: Radiacin

catdicos, rayos X y ncleos radioactivos, la radiacin se usa para esterilizacin en el

campo mdico y en la industria alimentaria.

La filtracin se caracteriza por evitar el uso de calor en lquidos y gases termo sensibles,
los poros del filtro son muy pequeos para que los organismos puedan atravesarlos, pero
permiten que el lquido a el gas pasen a travs de ellos
Filtros de profundidad: filtros HEPA
Filtros de Membrana: funcionan como un colador

Control de crecimiento microbiano: Filtracin

Antimicrobiano: son las sustancias qumicas sintetizadas parcial o temporalmente en

laboratorio que son capaces de inhibir el crecimiento y/o destruir microorganismos.
Bactericidas: su accin es letal sobre los microorganismos, por lo que estos
pierden irreversiblemente su viabilidad o son lisados.
Bacteriosttico: la mxima concentracin no toxica que se alcanza en suero y
tejidos impide el desarrollo y multiplicacin de los microorganismos, sin
destruirlos, pudiendo estos multiplicarse nuevamente al desaparecer el agente
antimicrobiano. Sirven para complementar los mecanismos defensivos del
husped.
Bactericidas bacteriolticos: producen la muerte mediante la lisis celular.

Cuantificacin de la actividad antimicrobiana: concentracin inhibitoria mnima

(CIM) consiste en emplear la menor cantidad del agente antimicrobiano necesario para
inhibir el crecimiento de un microorganismo.
Agentes antimicrobianos para uso externo: son los utilizados en el control de
microorganismos en aplicaciones comerciales e industriales, como: alimentos, torres de
refrigeracin de aire acondicionado, productos textiles y papelero, depsitos de
combustible; productos diseados para prevenir el crecimiento de patgenos para los seres
humanos en ambientes inanimados y en superficies corporales externas. Se dividen es
esterilizantes, desinfectantes y antispticos.
Agentes antimicrobianos utilizados in vivo: utilizados en el interior del cuerpo humano
para el control de enfermedades infecciosas, pueden ser sintticos o naturales
(antibiticos).

Control de crecimiento bacteriano: mtodos qumicos

PREGUNTAS FORMULADAS
1. Qu se entiende por resiembra o pase bacteriano?
Una resiembra es cuando se posee colonias bacterianas (en este caso), y por distintos factores,
tanto como desgaste del medio de cultivo o por necesidad de obtener colonias bacterianas
aisladas (colonia aislada es aquella colonia bacteriana que proviene de una sola bacteria que se
reprodujo muchas veces), tomas mediante un instrumento llamado asa de siembra, una parte de la
colonia o agrupacin bacteriana y la traspasas a una nueva placa de Petri. Haciendo esto
propiciars
la
duracin
de
tu
colonia
para
posteriores
trabajos.
Esto es recomendable realizarlo varias veces para asegurarse que la colonia es pura y que los
trabajos van a ser realizados adecuadamente.
2. Cul es la utilidad del asa recta y del asa curva?
La curva es de uso ms general, para sembrar en la superficie de las placas de Petri o dispersar en
medios lquidos (hay muchas variantes), mientras que la recta SOLO SE USA para picar como
con una aguja medios como el SIM para observar movilidad de las bacterias, o la produccin de
metabolitos cidos.
3. Cmo se esteriliza un medio de cultivo en microbiologa?
El sistema clsico para esterilizar los medios de cultivo es el autoclave (que utiliza vapor de agua
a presin como agente esterilizante)
El proceso completo de esterilizacin en una autoclave se compone de diferentes fases:
Fase de purgado: A medida que la resistencia calienta el agua del fondo del calderin, se
va produciendo vapor que desplaza el aire, hacindolo salir por la vlvula de purgado que
est abierta. Esta fase termina cuando se alcanza la temperatura de esterilizacin.
Fase de esterilizacin: Una vez cerrada la vlvula de purgado y alcanzada la temperatura
de esterilizacin previamente seleccionada se inicia el proceso de esterilizacin.
Fase de descarga: Terminado el proceso de esterilizacin, deja de funcionar la resistencia
calefactora, con lo que deja de producirse vapor y la presin y temperatura del calderin
empieza a bajar poco a poco.
4. Cules son las condiciones de esterilizacin en seco, que equipo se usa y para qu
materiales est destinada?
El material debe colocarse correctamente dentro del horno, ya que la forma como ste se ubica
puede interferir con la distribucin del calor, lo cual influye directamente en la eficacia del
proceso de esterilizacin.

Al colocar el material dentro de los hornos se deben tomar las siguientes precauciones:
Distribuir todo el material en forma ordenada en toda la superficie interna disponible.
Evitar amontonar el material en un rea especfica.
No colocar el material uno sobre otro.
Evitar que el material toque las paredes del horno.
Colocar en posicin vertical cualquier material, que lleve tapones de algodn.
Cerrar el horno y comenzar a contar el tiempo del proceso de esterilizacin cuando la temperatura
est en 170C.
Una vez transcurrido el tiempo de esterilizacin apagar el horno y esperar a que se enfre hasta
temperatura ambiente para retirar el material.
Equipos y materiales para la cual estn destinados:
Horno pasteur: se utiliza para materiales de vidrio
Autoclave: se utiliza para matraces y tubo
Radiaciones: se utiliza para materiales Plsticos desechables.
5. Cmo se esterilizan elementos con filo como cuchillas, tijeras, entre otros?
Se esterilizan por el proceso de esterilizacin en seco
6. Qu utilidad tiene la esterilizacin en frio?
Es un tipo de esterilizacin qumica, basada en el uso de un agente esterilizante denominado
xido de etileno. Es un mtodo de esterilizacin recomendado como alternativo para aquellos
elementos que no pueden esterilizarse con las tcnicas tradicionales de calor y/o vapor. El mtodo
de esterilizacin con gas de xido de etileno es el mtodo qumico que an no pudo ser superado
por otras tecnologas, lo que hace que en esta modalidad resulte irreemplazable para la
esterilizacin de elementos termo sensibles. Las tcnicas tradicionales de calor (seco y hmedo)
de estufas y autoclaves a vapor, necesitaron ser complementadas con la radiacin de rayos
gamma y la esterilizacin qumica por xido de Etileno; este ltimo es un mtodo de
esterilizacin en fro ya que trabaja con temperaturas que no superan los 60 grados. De este modo
se pudieron esterilizar elementos que de otro modo deberan ser descartados del uso, ya sea por
no poder ser reciclados con la mxima seguridad y garanta que requiere una unidad sanitaria, o
bien porque el calor los perjudica o reduce su vida til.

7. Qu es la tindalizacin?
La tindalizacin es un mtodo de esterilizacin por calentamiento discontinuo que debe su
nombre a John Tyndall, que la ide en 1887. Consiste en someter una sustancia a esterilizar a un
proceso seriado de elevacin y disminucin de la temperatura, de modo tal que en cada una de
esas etapas se eliminen paulatinamente las formas vegetativas y de esporas presentes. Se requiere
un mnimo de tres sesiones de elevacin y disminucin de la temperatura.
8. Qu se entiende por maduracin de un colorante?
La maduracin del colorante se entiende por cundo cambia un poco el color se deben filtrar cada
cambio de color por ms mnimo que sea se guardan en eso porque retarda el cambio de color
sirve para teir y es de los mejores se puede ver hasta lo ms mnimo del o de lo que quieras ver.
9. En qu momento se deben filtrar los colorantes y porque?
Dado que la mayor parte de los colorantes se obtienen por precipitacin desde un medio lquido
que puede ser acuoso, alcohlico, o mezcla de ambos, hay que proceder a la filtracin para
separar el colorante del resto.
10. Por qu razn los colorantes deben guardarse en frascos de color mbar?
Generalmente se usan frascos de color mbar para guardar sustancias que pueden sufrir
descomposicin o algn tipo de reaccin qumica catalizada por la luz, as el frasco absorbe la luz
y la sustancia se mantiene como tal.
11. Cules son los colorantes ms utilizados en microbiologa y porque?
La coloracin o tinciones en microbiologa, consiste en cubrir las preparaciones con uno o varios
colorantes de forma secuencial durante un tiempo determinado. Existen las tinciones simples que
se usan para observar la morfologa y el agrupamiento bacteriano, entre los colorantes tenemos el
azul de metileno, cristal violeta y fascina.
Las tinciones dobles o diferidos; se usan para poner de manifiesto diferencias entre
microorganismos o parte de ellos, la tincin de Gram, es la ms utilizada en Microbiologa, ya
que diferencia a las bacterias en Gram positivas y Gram negativas, segn retengan el cristal
violeta utilizado en la tincin, las Gram negativas no retienen el cristal violeta cuando son
decoloradas por una mezcla de alcohol y acetona. Las Gram positivas (+) si retienen el colorante
inicial, las Gram negativas (-) se cogern el segundo colorante; la safranina y presentan color
rojo.
En la tincin de Zich-Neelsen que se usa para presenciar de bacilos resistentes en cido-alcohol
se usa el colorante carbol-fascina o fascina feniada y el azul de metileno. Las bacterias resistentes
quedan teidas de rojas y el no resistente color azul. En la tincin de esporas por el mtodo de

Wirtz o de verde malaquita en caliente y posterior utilizacin de fascina como contra colorante,
las esporas existentes se teirn de verde, mientras que otras formas vegetativas, se tien de rojo.
Tincin de colorante auramina-rodamina; estos dos fluorocromo se fijan sobre el cido mi clico
de la pared celular de las micobacterias, apareciendo como puntos de color amarillo-verdoso
brillantes sobre fondo negro. Tincin de naranja de acridina, el cual se basa en la tincin selectiva
y diferencial de los cidos nucleicos por parte del fluorocromo naranja de acridina, dando un
color los microorganismos rojo-anaranjados.
12. Qu colorantes se utilizan para la tincin de hongos?
Azul de lacto fenol
Anaranjado de acridina
Rojo allura
Azul brillante
Blanco de calcoflor
13. Qu se entiende por indicadores biolgicos de calidad de aguas?
En general, todo organismo es indicador de las condiciones del medio en que se desarrolla, ya
que de cualquier forma su existencia en un espacio y momentos determinados responden a su
capacidad de adaptarse a los distintos factores ambientales. Sin embargo, en trminos ms
estrictos, un indicador biolgico acutico se ha considerado como aquella cuya presencia y
abundancia sealan algn proceso o estado del sistema en el cual habita. Los indicadores
biolgicos se han asociado directamente con la calidad del agua ms que con procesos ecolgicos
o con su distribucin geogrfica. Es pertinente aclarar que ms que a un organismo, el indicador
biolgico se refiere a la poblacin de individuos de la especie indicadora, y en el mejor de los
casos al conjunto de especies que conforman una comunidad indicadora.
El concepto de organismo indicador se refiere a especies seleccionadas por su sensibilidad o
tolerancia (normalmente es la sensibilidad) a varios parmetros. Usualmente los bilogos
emplean bioindicadores de contaminacin debido a su especificad y fcil monitoreo
(Washington, 1984). Odum (1972 in Vzquez, etal), define a los organismos indicadores como la
presencia de una especie en particular, que demuestra la existencia de ciertas condiciones en el
medio, mientras que su ausencia es la consecuencia de la alteracin de tales condiciones
14. Cules son los microorganismos usados como indicadores de contaminacin en agua?
Los microorganismos indicadores contemplados por la Norma Tcnica Nacional (NTN ITINTEC
214.003) son tres: Bacterias Heterotrficas, Coliformes totales y Coliformes fecales.
Las Bacterias Heterotrficas estn presentes en todos los cuerpos de agua y constituyen un grupo
de bacterias ambientales de amplia distribucin, stas son indicadoras de la eficacia de los
procesos de tratamiento, principalmente de la desinfeccin (descontaminacin).

El grupo coliformes abarca los gneros Klebsiella, Escherichia, Enterobacter, Citrobacter y

Serrara. Cuatro de estos gneros (Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter y Serrara) se encuentran
en grandes cantidades en el ambiente (fuentes de agua, vegetacin y suelos) no estn asociados
necesariamente con la contaminacin fecal y no plantean ni representan necesariamente un riesgo
evidente para la salud (ALLEN, 1996). Las bacterias coliformes, no deben estar presentes en
sistemas de abastecimiento, almacenamiento y distribucin de agua, y si as ocurriese, ello es
indicio de que el tratamiento fue inadecuado o que se produjo contaminacin posterior. Se ha
demostrado que las especies de Enterobacter y Klebsiella colonizan con frecuencia las superficies
interiores de las caeras de agua y tanques de almacenamiento (a menudo llamado "rebrote") y
crecen formando una biopelcula cuando las condiciones son favorables, es decir, presencia de
nutrientes, temperaturas clidas, bajas concentraciones de desinfectantes y tiempos largos de
almacenamiento (ALLEN, 1996).
15. Cul es la normativa vigente que regula
vertimientos y aguas residuales?

a nivel nacional lo concerniente a

Decreto 1594 de 1984 y la actualiza el Artculo 28 del Decreto 3930 de 2010

16. Cules son los medios de cultivo utilizados para el crecimiento de indicadores fecales
como E. coli y coliformes fecales?
Caldo Endo, MF
Caldo nutritivo
Agar nutritivo
17. Qu tcnicas se usan para la deteccin de coliformes totales en agua?
Los coliformes totales se hacen por medio del sustrato cromognico X-Glucorsido, que
reacciona con la enzima glucoronidasa pero estas tambin reaccionan con el Sustrato SalmnGAL produciendo un color azul - violeta en la colonia.
18. Cul es la utilidad microbiolgica de los medios de cultivo simples; enriquecidos;
diferenciales; de prueba; para recuento: bioqumico y de mantenimiento?
Enriquecidos: suprimen el crecimiento de la flora competitiva normal potenciando el cultivo y
crecimiento deseado (Selenito, medio con Vitamina K).
Diferenciales: permiten distinguir unos microorganismos de otros por las caractersticas que
presentan las colonias. Se elaboran con base en las caractersticas fisiolgicas especficas de los
microorganismos, por ejemplo, nutricin, respiracin entre otras. Algunos medios diferenciales
llevan incluido un indicador de pH, que pone de manifiesto la degradacin de un nutriente
especfico (generalmente un azcar) por el cambio de color que se origina cuando ste es
metabolizado, como en el caso del medio CLED. Los colorantes que se aaden a estos medios
actan como indicadores para detectar, por ejemplo, la formacin de cido. Un ejemplo es el

Rojo Fenol es de color rojo en pH bsico y amarillo en pH cido. A travs del cultivo en medio
diferencial se puede distinguir las bacterias que fermentan la lactosa (con produccin de cido) de
las no fermentadoras. Otros colorantes actan como inhibidores del crecimiento de unos
microorganismos y no de otros, por ejemplo la Violeta de Genciana inhibe el crecimiento de la
mayora de las bacterias Gram-positivas).
Para recuento: Recuento de microorganismos viables totales. (Muestras lquidas u
homogeneizadas).
Se trata de conocer el nmero total de microorganismos presentes en el alimento. Este nmero no
guarda relacin con el de microorganismos patgenos por lo que no puede usarse como ndice de
su presencia y slo debe considerarse un indicador de las caractersticas higinicas generales del
alimento.
Dependiendo de las caractersticas del medio utilizado (medio rico, medio limitado en nutrientes
para medida de la flora no lctica de alimentos fermentados) y de las condiciones de incubacin
(mesfilos, psicrfilos) los microorganismos analizados sern miembros de poblaciones
diferentes. En general se investiga la presencia de microorganismos aerobios o aerotolerantes
(anaerobios facultativos); aunque, en ciertas situaciones (alimentos envasados al vaco), puede ser
de inters hacer recuentos de anaerobios totales.
Se han desarrollado tcnicas que hacen posible la automatizacin del proceso.
Hay cuatro tcnicas biolgicas bsicas tcnicas de recuento de viables:.
1. - Contaje en Placa Standard (Standard Plate Count).
2.- Determinacin del nmero ms probable.
3.- Mtodos basados en la reduccin de colorantes por viables.
4.- Contaje microscpico directo.
Enriquecimiento: Son aquellos que, adems de las sustancias nutritivas normales, incorporan
una serie de factores indispensables para el crecimiento de microorganismos exigentes. Este
enriquecimiento se hace por adicin de sangre u otros productos biolgicos (sangre, suero, leche,
huevo, bilis, etc.) que aportan dichos factores. En ocasiones es posible aadir suplementos
artificiales a los medios para producir un enriquecimiento del mismo (p. ej. Polivitex, Isovitalex,
etc.). El gonococo, por ejemplo, necesita cistina y cistena para su crecimiento. Estas sustancias
son aportadas por la sangre calentada adicionada al medio de cultivo (agar chocolate).

Identificacin: Son los destinados a comprobar alguna cualidad especfica que puede servirnos
para reconocer la identidad de un microorganismo. Estos medios han de poseer los elementos
necesarios para asegurar el crecimiento de los microorganismos, el sustrato especfico que vaya a
ser metabolizado y el indicador que nos muestre el resultado. El agar Kligler, el medio de
Simmons y en general, cualquier medio al que se le haya aadido un elemento diferencial de un
microorganismo, son medios utilizados en identificacin. Actualmente estn apareciendo en el
mercado una gran cantidad de medios especficos de identificacin para ciertos microorganismos,
con lo cual se consigue simultneamente abaratar el costo y reducir el tiempo de identificacin.
Son ejemplos de esto ltimos los medios CPS ID3 o Uriline ID (Biomerieux), utilizados para
identificar los grmenes urinarios ms importantes a partir de la placa de cultivo gracias a la
utilizacin de sustratos cromognicos especficos.
Multiplicacin: Sirven para obtener una gran cantidad de clulas a partir de un microorganismo
ya aislado. Se emplean en la obtencin de vacunas, en la investigacin y en la industria. Los
medios ms adecuados para la multiplicacin suelen ser lquidos. El caldo-infusin cerebrocorazn (BHI), es un ejemplo tpico de estos medios.
Mantenimiento: Suelen ser distintos a los de crecimiento optimo ya que el crecimiento rpido y
prolfico suele ocasionar la muerte rpida de las clulas.

CONCLUSIONES
Se puede deducir que se obtuvieron resultados muy favorables en todas las muestras, es decir; se
logr identificar cada uno de ellos y al estudiarnos se pudo establecer la importancia que estos
poseen en nuestra vida cotidiana.
Se logra entender y comprender todos los conceptos y muestras vistas, esto arroja como resultado
un conocimiento ms para nuestra vida profesional y personal de mucho inters, adems se
realiza los procedimientos paso a paso para que se obtuvieran los resultados esperados.

BIBLIOGRAFA
(1)(2)(3)(4)(5) CONROL DEL CRECIMIENTO MICROBIANO. Recuperado el 3 de Noviembre
del
2015.
Disponible
en
http://www.fbioyf.unr.edu.ar/evirtual/pluginfile.php/117403/mod_resource/content/0/Clase%20C
recimiento%20microbiano%202015d.pdf
MICROBIOLOGIA (OUTSIDE). Recuperado el 3 de Noviembre del 2015. Disponible en
http://www.microbiologia.com.ar/antimicrobianos/general.php
Bustamante Andrade, Mara Fabiola, Herrera Machuca, Jessica, Ferreira Adam, Roxana, &
Riquelme Snchez, Denisse. (2014). Contaminacin Bacteriana Generada por Aerosoles en
Ambiente Odontolgico. International jornal of odontostomatology,8(1), 99-105. Recuperado en
06 de noviembre de 2015, de http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0718381X2014000100013&lng=es&tlng=es. 10.4067/S0718-381X2014000100013.
Universidad Tecnologica Nacional . (2009). Recuperado el 6 de Noviembre de 2015, de
Universidad
Tecnologica
Nacional
:
http://www.frro.utn.edu.ar/repositorio/catedras/quimica/5_anio/biotecnologia/practico4.pdf
Laboratorio clinico Echandi. (s.f.). Recuperado el 5 de Noviembre de 2015, de Laboratorio
clinico
Echandi:
http://www.labechandi.com/index.php?option=com_content&view=article&id=73&Itemid=81
unavarra. (s.f.). Recuperado el 5 de Noviembre
http://www.unavarra.es/genmic/microgral/Tema%2002.%20Cultivo%20de%20microorganismos.pdf

de

2015,

de

unavarra:

universidad nacional abierta y a distancia . (s.f.). Recuperado el 06 de Noviembre de 2015, de

universidad
nacional
abierta
y
a
distancia
:
http://datateca.unad.edu.co/contenidos/358010/exe/leccin_2_microbiologa.html