PRE-PRCTICO IB 2

Plasmlisis y Turgencia

Introduccin
La clula vegetal adulta est compuesta por una vacuola central llena de jugo
vacuolar, el citoplasma con sus organelos y la pared celular. A su vez, tanto la
vacuola como el protoplasto (vacuola y citoplasma) estn delimitados por una
membrana semipermeable que permite el paso del agua pero dificulta el del soluto.
El agua penetra libremente paredes y membranas celulares por simple difusin,
pasando espontneamente desde regiones de mayor potencial de agua (o potencial
hdrico) a regiones de menor potencial de agua. Este movimiento en el cual estn
involucradas membranas semipermeables y difusin de molculas de agua a travs
de ellas se conoce como smosis.
Qu es el potencial hdrico o potencial de agua?
De acuerdo con Slatyer y Sterling (1960) se define al potencial hdrico de cualquier
sistema que contenga o pudiera contener agua como: el equivalente al potencial
qumico del agua en este sistema, comparado con el potencial qumico del agua
pura a las mismas temperatura y presin atmosfrica. Se considera, adems, que el
potencial hdrico de referencia del agua pura es cero. De forma resumida podemos
considerar al potencial hdrico como la energa potencial que posee una dada masa
de agua y depende de varios factores:
-

Concentracin: S, potencial osmtico: El agua fluir desde una solucin poco

concentrada hasta una solucin ms concentrada. Es la presin hidrosttica que
se debe aplicar a una solucin que se halla separada del solvente puro por una
membrana semipermeable, para impedir la smosis. Podemos decir tambin,
que la presin osmtica es la presin hidrosttica extra que se debe aplicar a la
solucin para que su potencial hdrico sea igual al del agua pura.

- Presin de turgencia : El agua fluir desde un sistema con presin alta hasta un
sistema con baja presin. (Es una presin hidrosttica ejercida sobre la pared de la
clula)
- Altura: g, potencial gravitacional: El agua fluir hacia abajo.
- Capilaridad: m, potencial matricial: Mezcla de S y este potencial se origina
por las fuerzas de capilaridad y tensin superficial en espacios pequeos.
- Potencial de referencia (0): Es el potencial hdrico que posee el agua pura en
condiciones estndar de temperatura y presin. Por convenio se le ha asignado el
valor 0.
Se puede expresar el potencial hdrico (H) como:
H = 0 + S + + g + m

(1)

La ecuacin anterior puede simplificarse, eliminando el potencial de

referencia, cuyo valor es 0, y quedndonos slo con:
H = S + + g + m

(2)

En una clula vegetal adulta el potencial hdrico est determinado

por el potencial de presin o presin de turgencia y el potencial de
solutos o potencial osmtico S, siendo la contribucin del primero positiva y la

del segundo negativa. Es necesario aclarar que en este caso el potencial mtrico
tiene una contribucin despreciable por lo que no se tiene en cuenta. De esta
manera podemos expresar el potencial hdrico de una clula como sigue:
H = S +

(3)

De acuerdo con estas definiciones si se sumergen clulas en soluciones con

diferentes concentraciones de soluto se podrn observar los siguientes resultados
de acuerdo con los tres tipos de soluciones:
Predicciones
1- Las soluciones isotnicas tienen una concentracin de soluto igual a la
del citoplasma celular, por lo que los potenciales hdricos son iguales, la
clula se encuentra en equilibrio osmtico con el medio.
2- Una solucin hipotnica tiene una concentracin de soluto menor que
el citoplasma celular, por lo que la clula absorbe agua y se hincha,
aumentando la presin de turgencia. (Fig. 1b)
3- Una solucin hipertnica tiene una concentracin de soluto mayor que
el citoplasma celular, por lo que tiene un potencial hdrico menor que el
del contenido celular. La clula pierde agua, la membrana se retrae
separndose de la pared y la clulas se vuelve flcida, se dice que la
clula se ha plasmolizado (ver Fig.1c).
-La turgencia en las plantas da lugar al crecimiento, movimientos y otras
respuestas como la apertura de los estomas-

b
c
Esquema extrado de www.forest.ula.ve/~rubenhg/relahid/ / consulta 18/11/08
11:28 a.m.
Fig.1: Esquema de una clula vegetal bajo diferentes condiciones
osmticas- a) Solucin isotnica, b) Solucin hipotnica y c) Solucin
hipertnica

Al poner clulas vegetales vivas en contacto con soluciones cuyo potencial de agua
es menor al potencial de agua del interior de la clula tiene lugar el fenmeno
conocido como plasmlisis.
Teniendo en cuenta que el potencial hdrico de una solucin est dado solamente
por su potencial osmtico o de solutos (de acuerdo con la ec. 3) una clula sufrir
plasmlisis al ser sumergida en una solucin con un potencial de solutos mayor que
el potencial de agua del interior celular.
Cmo determinar el potencial osmtico del jugo vacuolar?
Existen diferentes mtodos pero todos se basan en el siguiente principio:
La presin es una fuerza por unidad de rea (P=F/A), de tal forma que la presin
osmtica generada en la clula resultante de la smosis, produce una presin
hidrosttica sobre las paredes celulares la presin de turgencia ( ). De acuerdo
con la Tercera Ley de Newton, desde el exterior de la clula se ejerce una presin en
sentido contrario, pero con la misma magnitud que se llama presin parietal (Pp).
Cuando se alcanza la condicin de equilibrio (solucin isotnica), no ocurre difusin
neta de agua al interior de la clula y bajo esta condicin de equilibrio:
S = = Pp

(4)

S de una solucin diluida (siendo el soluto orgnico) se puede calcular de

acuerdo con la siguiente ecuacin:
s = - R T n

(5)

Donde:
R = 0.082 ATM. L. mol-1. K-1
T=K
n = moles / L

Mtodo plasmoltico
Est basado en conocer que concentraciones tiene una solucin que comienza a
provocar la plasmlisis en las clulas de un tejido.
Bajo estas condiciones se puede decir que la concentracin de la solucin
(expresada en trminos de potencial osmtico o de solutos) es igual al potencial de
solutos en el interior de la clula ya que de acuerdo con la ec. 3:
H = S +
Bajo condiciones de plasmolisis:

exterior = H interior
(- S ) exterior = (- S)

interior

Entonces tendremos que:

exterior = 0 porque ya no hay membranas presentes.
interior = 0 porque comienza a ocurrir la plasmlisis separndose la membrana
de la pared celular

s externo = s interior
Utilizando la ecuacin 5 se puede entonces calcular s del jugo vacuolar.
Correccin a la ecuacin 5
El potencial osmtico o de solutos depende del nmero de partculas
disueltas y en este caso su medicin se realiza utilizando una solucin de
NaCl (sustancia que se ioniza).
El coeficiente isotnico permite corregir el valor real de partculas que
existen en la disolucin, este valor depende del grado de disociacin y
vara con la disolucin.

s = - R T n i

(6)

(En la tabla 1 se expresan valores de i para diferentes concentraciones de NaCl)

Qu se puede tomar como solucin isotnica?

Las observaciones en la prctica no se realizan en una sola clula, sino que se
hacen cortes de tejidos que se ponen en contacto con las soluciones de diferentes
concentraciones, y tampoco las clulas de un tejido son homogneas, o sea, no
tienen igual contenido osmtico, entonces:
De forma estadstica se toma como valor promedio de solucin isotnica
aquella que provoque plasmlisis en el 50% de las clulas observadas.
Objetivo
Calcular el potencial osmtico del protoplasto celular de Allium cepa (cebolla)
utilizando el mtodo de plasmolisis.
Pregunta de investigacin: Completar
Hiptesis: Escriba una hiptesis
Variables: Completar

Materiales y Mtodos:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

Cebolla
Bistur
Agua destilada
Solucin de Cloruro de Sodio (NaCl)
Microscopio
Porta y cubreobjetos
Pipeta Pasteur

Desarrollo Experimental:
1. Realizar cortes de epidermis inferior de hojas de A. cepa.
2. Poner los cortes en un crisol de porcelana con agua destilada durante pocos
minutos.
3. Secar los cortes con papel de filtro y colocarlos en un portaobjetos con dos
gotas de una solucin de 0.7 molar de NaCl.
4. Esperar 5 minutos, observar el grado de plasmlisis y calcular el porcentaje
de clulas plasmolizadas.
5. Repetir pasos 2, 3 y 4 en soluciones de 0.6, 0.5, 0.4, 0.3, 0.2 y 0.1 molar de
NaCl.
6. Vuelque sus resultados en una tabla confeccionada a priori de las
observaciones
7. Realizar un grfico del porcentaje de clulas plasmolizadas en funcin de la
concentracin de NaCl
8. Buscar en la curva la concentracin que corresponde al 50 % de las clulas
plasmolizadas.
9. Buscar el coeficiente isotnico correspondiente en la Tabla 1.
10. Calcular el potencial osmtico del jugo vacuolar (ec. 6)

Tabla 1: Coeficientes isotnicos para el NaCl en funcin de diferentes

concentraciones molaresConcentracin (M/L) 0.7

0.6

0.5

0.4

Coeficientes
isotnicos

1.68

1.70

1.73

1.66

0.3
1.75

0.2
1.78

0.1
1.80

Mtodo Volumtrico y Gravimtrico

Pregunta de Investigacin: escriba una pregunta de investigacin
Objetivo: calcular el potencial de osmtico del jugo vacuolar en clulas de
tubrculos de papa utilizando el mtodo gravimtrico y volumtrico.
Hiptesis: Escriba una hiptesis
Predicciones: escriba una prediccin
Variables: escriba las variables independientes, dependientes y de control
Materiales
Un tubrculo de papa
Hoja de bistur
Sacabocados de 10 mm
Tubos de ensayo
Papel absorbente

Regla
Balanza
Batera de solucin de sacarosa en de 0.15 M a 0.5 M
Agua destilada
Mtodo
1- Rotule cada tubo de ensayo como sigue: 1: agua destilada, 2: 0.15 M, 3: 0.2 M y
siguientes soluciones hasta 0.5 M
2- Agregue 30 ml de cada solucin en los correspondientes tubos de ensayos
rotulados
3- Saque con el sacabocados 9 cilindros de papa del mismo tubrculo.
4- Pese cada cilindro separadamente.
5-Anote el largo y dimetro de cada uno de los cilindros pesados.
6- Identifique cada cilindro y coloque dentro de cada uno de los tubos de ensayo
rotulados.
7.- Coloque los tubos de ensayo en una gradilla y espere 24 horas.
8- Al cabo de 24 horas retire los cilindros, mida y pese nuevamente.
9- Realice los clculos y grficos necesarios para determinar el potencial osmtico
de las clulas

Bibliografa
Web Sites consultas 18/11/2008

www.itescam.edu.mx/principal/sylabus/fpdb/recursos/r22818.DOC

www.tiwanacu.wordpress.com/2008/08/10/-hidrico
www.forest.ula.ve/~rubenhg/relahid/