BIOENSAYOS

Trminos generales
ACLIMATAR: acostumbrar a los organismos a ciertas condiciones
ambientales.
RESPUESTA: medicin del efecto biolgico (muerte, cambios en
reproduccin, crecimiento)
CONTROL: organismos expuestas a agua de dilucin sola o el
agua natural al que estn normalmente expuestos, o a ambas.
ENSAYO PRELIMINAR: prueba destinada a establecer
aproximadamente la toxicidad de una solucin. Las
concentraciones se separan exponencialmente (1, 10, 100) y la
exposicin es de 8 a 24 h.
ENSAYO DEFINITIVO: prueba diseada para establecer la
concentracin a la que se produce la reaccin final buscada.

PRUEBA ESTATICA: aquella en que las soluciones y los

organismos estudiados se colocan en cmaras y se mantienen all
todo el tiempo que dura la prueba.
PRUEBA DE RECIRCULACION: prueba esttica con circulacin
de la solucin en estudio a travs de cmaras a fin de mantener la
calidad del agua.
PRUEBA DE RENOVACION: prueba esttica con recambio de
parte de las soluciones a las que estn expuestos los organismos.
PRUEBA DE FLUJO CONTINUO. Prueba en la cual la solucin
se reemplaza continuamente durante el tiempo que dure el
bioensayo.
PRUEBA IN SITU: bioensayo que se lleva a cabo en el ecosistema
de donde provienen los organismos

Seleccin de los organismos de prueba:

1. El organismo debe ser representativo de un grupo ecolgico
importante
2. El organismo ocupa una posicin dentro de una trama trfica
precedente al hombre o alguna otra especie de importancia.
3. Amplia disponibilidad, accesible para pruebas de laboratorio,
de fcil mantenimiento u de poblaciones genticamente estables
4. Amplio conocimiento de la fisiologa, gentica, taxonoma y
ecologa del organismo.

Organismos usados en bioensayos

a) Bacteria: Photobacterium
b) Algas: Selenastrum, Chlorella
c) Plantas: varias plantas que se cultivan (terrestres), Chichicastle
(acuticas)
d) Insectos terrestres: cucarachas, moscas, acaros

e) Acuticos:
Oligoquetos benticos
Moluscos
Zooplancton: (Daphnia, Ceriodaphnia)
Larvas de insectos (Chironomidos, mosquitos)
Crustceos (anfpodos, camarones, langostinos)
f) Vertebrados:
Terrestres: Mamferos (rata, conejo, conejillo de indias, hamster;
mink, huron),Aves (pollo, faisan, codornis)
Acuticos: Peces

Uso de las pruebas de toxicidad

Las pruebas de toxicidad son tiles para determinar:
1. Factores favorables y desfavorables del ambiente (O.D., TC,
pH, etc.)
2. Efectos de los factores ambientales sobre la toxicidad de
contaminantes
3. Toxicidad de los contaminantes sobre una determinada especie
4. Sensibilidad de los organismos acuticos
5. Magnitud que ha de tener el tratamiento de los desechos para no
causar efectos negativos sobre los organismos.

6. Efectividad de estos mtodos de tratamiento

7. Concordancia entre las normas de calidad de agua y los
permisos de descarga.
8. Las pruebas de toxicidad aguda tienen cierto poder predictivo
( a travs de un factor de aproximacin):
0.01 toxicidad ambiental
0.001 toxicidad humana
1x10-6 cncer
9. Las CL50 son interpretables desde el punto de vista legal.

Relaciones Dosis-Respuesta
Categoras por tiempo:
Mamferos/Humanos:
Agudos (usualmente < 24 h, una sola dsis)
Subagudo (usualmente < 30 d; dosis continua
o repetida)
Subcrnico (usualmente 1-3 meses; dosis
continua o repetida)
Crnico (usualmente 3 meses; dosis
continua o repetida)

Ecolgicos:

Agudo (usualmente 96 h o menos;

mortalidad parmetro medido)

Crnico (> 10 % ciclo de vida;

parmetros subletales)

Categoras por la intensidad del

estmulo:

Letal (respuesta binomial cuantificable)

Subletal (respuesta continua cuantificable, puede

provocar la muerte)
MORTALIDAD: Frecuencia o proporcin. Una poblacin
experimenta mortalidad, los individuos mueren.

TOLERANCIA: habilidad del individuo para enfrentarse

a un estrs fisiolgico de cierta intensidad y duracin.
Debido a que existe variabilidad entre los individuos, las
poblaciones exhiben una distribucin de tolerancia. til
para la evaluacin de riesgo.

El parmetro que generalmente se calcula en los

bioensayos de toxicidad aguda es una estimacin de la
intensidad/duracin del estmulo que provoca una
respuesta en 50% de la poblacin (estimado ms preciso
en una distribucin de frecuencias)

Terminologa basada en la estimacin de la respuesta del 50% de la poblacin

expuesta:
Subfijo Prefijo
(L)etal
(D)osis
(E)fecto (C oncentracin
(I)nhibicin
(T)iempo
v.g. DL50, CL50, CE50, CI50, TE50, TL50
Tambin se puede expresar como: CLx, donde x es cualquier porcentaje >0 y
< 100 (CL25, CI01)

Prueba de toxicidad: para determinar la relacin entre la

dosis (o concentracin o tiempo) y la respuesta. Relacin
dosis-respuesta.
Bioensayo: Una prueba de toxicidad usada para
determinar la dosis o concentracin de un txico que
provoca una cierta respuesta en una coleccin de
organismos.
Relaciones dosis-respuesta: tipo de relaciones (v.g.
dosis-dependiente), puede ser categorizada por individuo
o por poblacin y tambin por si el material es o no
esencial:

Dosis-respuesta de base individual: Respuesta de

un individuo a dosis variables (o concentraciones)
de un material, y exhibe una respuesta gradual
(rango continuo de efectos). Concepto de
UMBRAL (mnima dosis que causa un efecto
cuantificable). El diagrama muestra una respuesta a
un compuesto esencial (a) y otro no esencial (b).

A
Probit
Mortality

* * *

C
Log 10 Concentration

A y B - pueden ocurrir si los organismos de prueba estn en malos condiciones

(stress, mal aclimatado o si las cmaras de prueba estn contaminadas).
A - tambin puede ocurrir si las concentraciones fueron muy elevadas.
B - se puede dar si los organismos estn enfermos y el compuesto no es txico.
C - ocurre cuando el compuesto no es txico o bien cuando las concentraciones
son muy bajas.
D - (patrn bimodal)puede ocurrir por varias razones: debido a problemas
tcnicos, diferencias de edad o tamao, sexo, maduracin gondica, estadio
reproductivo, condiciones de salud, etc. (zonas en las cuales la prueba deber
ser repetida)

E - puede ocurrir cuando el agua de dilucin contiene algn

compuesto que al interaccionar con el txico produce un efecto
antagnico.
F - puede ocurrir cuando el agua de dilucin contiene algn compuesto
que al interaccionar con el txico produce un efecto sinergstico.
G - puede ser obtenido si el agua de dilucin contiene materiales
txicos pero el compuesto que se est probando no lo es. Tambin se
puede presentar si los organismo son sometidos a un choque osmtico.

Bioensayo subletal
Es comn medir respuestas como crecimiento y reproduccin. Para
poder reportar los resultados de ste tipo (respuestas contnuas):
1. Exponer a los organismos a un diferentes concentraciones de un
txico (dentro de un rango) y medir el efecto.
2. Usar ANOVA para analizar los datos (diferencias entre
promedios)
3. Nivel ms alto que no es diferente del control = Concentracin de
Efecto No Observable (NOEC) o Nivel de Efecto No Observable
(NOEL).

4. Nivel ms bajo que es diferente del control = Concentracin de

Efecto Observable ms bajo (LOEC o LOEL)
Con estos datos se puede saber que el efecto comienza a
manifestarse en algn punto entre el NOEC y el LOEC.
Esto se reporta como Concentracin Mxima Aceptable el Txico
(MATC) y es el rango de la NOEC a la LOEC (v.g. MATC = 0.1 0.5 mg/L)
Tambin se puede reportar el Valor Crnico (ChV) el cual es un
promedio geomtrico entre la NOEC y la LOEC:
ln(ChV)= (ln(NOEC)+ln(LOEC))/2

Mtodo de interpolacin (Icp; no paramtrico)

Actualmente la U.S. EPA recomienda el uso de la CI25 como el

parmetro de efecto a reportar en pruebas crnicas o subletales.
Dependiente del diseo del experimento
No se usan todos los datos para su clculo