Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Notiuni de Morfologie Bacteriană
Notiuni de Morfologie Bacteriană
acestea fiind ntlnite la toate speciile de bacterii (constante), altele fiind ntlnite numai n
anumite condiii i doar la anumite specii sau tulpini bacteriene (facultative).
2.3.1. Structuri constante ale celulei bacteriene
Structurile constante ale celulei bacteriene sunt reprezentate de:
- perete,
- membran citoplasmatic,
- citoplasm (cu ribozomi i facultativ cu incluzii, vacuole, plasmide) i de
- nucleu.
2.3.1.1. Peretele bacterian
Peretele bacterian nconjoar membrana citoplasmatic. Lipsete la bacteriile din genul
Mycoplasma. Are o grosime de circa 15-30 nm.
Bacteriile Gram-pozitive conin aproximativ 80-90% murein (peptidoglican, glicopeptid
parietal). Mureina este un heteropolimer al crui schelet este format din lanuri polizaharidice.
Aceste lanuri sunt formate prin polimerizarea, alternant, a 2 structuri zaharidice:
- acidul N-acetil-muramic (NAM) i
- N-acetil-glucozamina (NAG).
Fiecare molecul de NAM are substituit un tetrapeptid alctuit din D i L-aminoacizi.
Se consider c aminoacizii n form D confer un grad de protecie fa de enzimele
proteolitice. ntre tetrapeptidele substituite, la lanurile polizaharidice alturate, se stabilesc
legturi peptidice prin gruparea terminal -COOH a unui tetrapeptid i grupri terminale
libere ale tetrapeptidului vecin. Astfel se formeaz structuri bidimensionale, destul de
complicate, sub forma unor straturi care nconjoar ntreaga celul bacterian.
Bacteriile Gram-pozitive rein violetul de metil (violet de genian n coloraia clasic)
i au culoare violet pe frotiul colorat Gram. La unele bacterii, reeaua de baz este acoperit
de reele suplimentare cu specificitate antigenic, alctuite de exemplu din acid teichoic
(polimer de ribitol fosfat i glicerol fosfat), legat de regul covalent la peptidoglican. n cazul
n care structurile fosfat se gsesc n cantiti limitate sau nu pot fi sintetizate, la nivelul
peretelui bacterian putem ntlni acidul teichuronic. Dintre bacteriile Gram-pozitive se pot
aminti stafilococul, streptococul, enterococul, bacilul difteric, bacilul listeriozei,
actinomicetele, bacilul antraxului, clostridiile etc.
n cazul bacteriilor Gram-negative se descrie un perete celular n general mai subire dar
mult mai complex. Peretele este alctuit dintr-un strat fin de peptidoglican (circa 10-20% din
structura peretelui) care este acoperit de o membran extern. Spaiul dintre membrana
citoplasmatic i membrana extern (include peptidoglicanul) reprezint spaiul periplasmic.
Din punct de vedere chimic, membrana extern este alctuit din fosfolipide, proteine i
cantiti variabile de lipopolizaharide. Alte proteine importante care se afl la acest nivel sunt
porinele. Lipopolizaharidul (endotoxina) are n componen dou structuri eseniale: lipidul A
i polizaharidul O. Bacteriile Gram-negative se decoloreaz cu alcool-aceton i se
recoloreaz cu fucsin diluat (au culoare roie la coloraia Gram). Dintre bacteriile
Gram-negative am putea aminti meningococul, gonococul, enterobacteriile, vibrionul holeric,
bacilul piocianic, cocobacilii Gram-negativi (ex. Haemophilus influenzae, Bordetella
pertussis, Brucella abortus) etc.
Bacteriile acid-alcool rezistente (de exemplu, mycobacteriile sau nocardiile) conin o
cantitate substanial de lipide la nivel parietal. Rezist decolorrii cu acid-alcool (au culoare
roie pe fond albastru la coloraia Ziehl-Neelsen); aceast coloraie continu s reprezinte o
etap esenial n diagnosticul bacteriologic al tuberculozei, indiferent de cele mai recente
descoperiri privind tehnicile moderne de laborator (inclusiv utilizarea sondelor nucleotidice
sau amplificarea genetic). n afar de mycobacterii (n special M. tuberculosis, dar i
numeroase mycobacterii atipice (non-tuberculous mycobacteria, NTM, ex. M. avium,
M. intracellulare, M. kansasii), exist i alte specii bacteriene care pot aprea colorate
- a fi sediul majoritii activitilor enzimatice ale celulei bacteriene (de exemplu intervine
activ n procesele de biosintez);
- excreie a unor enzime hidrolitice;
- a interveni activ n procese de biosintez;
- a contribui la formarea septului transversal (rol n diviziunea celular);
- a participa la procesul de chemotaxie prin receptorii de pe suprafaa sa.
Asupra membranei pot aciona anumite antibiotice (de exemplu polimixinele).
2.3.1.3. Mezozomii
Mezozomii sunt structuri care se formeaz prin invaginarea membranei citoplasmatice de
care rmn legai. Sunt prezeni n special la bacteriile Gram-pozitive. Au structura chimic a
membranei citoplasmatice i aceleai funcii n permeabilitate i respiraie. Cu un capt se pot
fixa de materialul nuclear, favoriznd distribuirea n mod egal a genomului ntre cele dou
celule fiice. Au rol i n formarea septului transversal.
2.3.1.4. Citoplasma
La microscopul optic, pe preparatele colorate uzual, observm numai citoplasma
bacterian, intens bazofil. Detaliile structurale (nucleoplasm, ribozomi, incluzii) se pot
observa numai cu ajutorul microscopului electronic. Are o structur mai simpl fa de
citoplasma eucariotelor. Este constituit dintr-un sistem coloidal format din proteine, enzime,
lipide, pigmeni, hidrai de carbon, sruri minerale i ap. Conine n mod caracteristic 80%
ap, menine ntr-un sistem coloidal proteine, carbohidrai, lipide, sruri etc, conine o mare
cantitate de ARN (ex. ARNm, ARNt).
Particulele citoplasmatice studiate sunt: ribozomii, incluziile, vacuolele; n citoplasm pot
exista i elemente facultative, plasmidele (formate din ADN extracromozomial).
La celula tnr citoplasma este intens colorat, omogen, conine ARN n cantitate mare,
este clar n timp ce la celula btrn citoplasma are aspect granular.
2.3.1.5. Ribozomii: structur, rol
Ribozomii au form aproximativ sferic, pot fi vzui la microscopul electronic.
Mrimea lor (circa 10-20 nm) depinde de concentraia ionilor Mg 2+ i K+. Unii ribozomi sunt
liberi n citoplasm, n timp ce alii apar legai de faa intern a membranei citoplasmatice.
Din punct de vedere chimic conin circa 65% ARNr (ribozomal). Au constanta de sedimentare
de 70 uniti Swedberg dar sunt constituii din dou subuniti de cte 30S i respectiv 50S.
n subunitatea mic intr o singur molecul de ARNr, 16S i 21 de tipuri de proteine
ribozomale. n subunitatea mare intr mai multe tipuri de molecule de ARNr (ex. ARNr 23S).
ntre cele dou subuniti se formeaz canalul prin care trec moleculele de ARNm (mesager)
n cursul sintezei proteice. Se apreciaz c ntr-o bacterie cu dimensiuni medii, aflat n faza
de cretere activ, se sintetizeaz circa 500 ribozomi/minut, metabolismul bacterian fiind
foarte intens.
Ribozomii au rol esenial n procesul de biosintez proteic. Au tendina de a se grupa n
polisomi (poliribozomi) cu eficien sporit n biosinteza proteic. n aceste condiii, la un
moment dat pe aceeai molecul de ARNm se afl n scopul traducerii mesajului genetic mai
muli ribozomi, care constituie un ansamblu care poart numele de polisom.
Biosinteza proteic
Biosinteza proteinelor are loc la nivelul ribozomilor.
Cu toate c secvena de aminoacizi din structurile proteice este dictat de secvena de
baze azotate din ADN, pentru c nu exist afinitate i posibilitate de cuplare ntre ADN i
aminoacizi este necesar ca o alt structur s permit poziionarea aminoacizilor n lanul
viitoarei proteine.
Iniial are loc transcrierea informaiei genetice pe ARNm (mesager), care va transporta
aceast informaie de la genom la nivelul ribozomilor, sub forma unei copii complementare.
Gena este segmentul de ADN care deine informaia genetic pentru sinteza unei proteine.
Segmentul de ADN care controleaz sinteza unui polipeptid poart numele de cistron.
ARNm care deine informaia genetic pentu sinteza unei singure catene de polipeptid
poart numele de ARNm monocistronic.
La bacterii, de obicei, o molecul de ARNm trebuie s poarte informaia necesar pentru
sinteza mai multor catene diferite i n acest caz ARNm poart numele de ARNm
policistronic. Aceast situaia particular este datorat dimensiunii mici a acestor procariote
precum i metabolismului intens care are loc n cursul procesului de cretere i multiplicare.
Spre exemplu, la E. coli, pentru metabolizarea lactozei sunt necesare potenial 3 enzime
diferite, iar mesajul genetic pentru sinteza acestora se afl deinut de o singur molecul de
ARNm policistronic.
De regul, numai o caten de ADN este folosit drept matri pentru ARNm. Transcrierea
mesajului genetic este selectiv (se desfoar ntre promotor i semnalul de terminare) i este
controlat de ARN polimeraza ADN-dependent.
Pentru traducerea mesajului genetic este necesar intervenia la nivel ribozomal a
moleculelor de ARNt (de transfer). Acestea au o dubl specificitate (pentru fiecare dintre cei
20 de aminoacizi exist una sau mai multe molecule de ARNt; n acelai timp exist enzime
specifice fiecrui tip de aminoacid care controleaz legarea corect a aminoacizilor activai pe
ARNt corespunztor). La nivelul fiecrui ARNt exist trei nucleotide (anticodon)
complementar codonului care corespunde aminoacidului.
ARNt nu are niciodat la anticodon succesiunea UUA, CUA sau ACU i n aceste condiii
ne putem explica motivul pentru care codonii UAA, UAG i UGA sunt codoni stop.
Succesiunea specific a nucleotidelor este transpus ntr-o secven specific de
aminoacizi care intr n constituia lanului polipeptidic din proteina n curs de formare.
2.3.1.6. Incluziile
Incluziile sunt formaiuni care apar n citoplasm la sfritul perioadei de cretere activ.
Dimensiunea i forma incluziilor citoplasmatice pot varia n funcie de condiiile externe.
Pot conine polimeri anorganici (de exemplu, corpusculii metacromatici ai genului
Corynebacterium, la a cror descoperire a avut un rol important Profesorul Victor Babe),
substane anorganice simple, polimeri organici (rezervor energetic mai ales la germenii
sporulai aerobi), lipide, cristale, granulaii de sulf etc.
2.3.1.7. Vacuolele
Vacuolele sunt formaiuni sferice care conin diferite substane n soluie apoas. Au o
membran lipoproteic numit tonoplast. Au fost descrise n mai ales la bacteriile acvatice i
ar putea avea un rol n plutirea acestora.
2.3.1.8. Nucleul
Masa nuclear vine n contact direct cu citoplasma. Este localizat n partea central a
celulei. Conine ADN, nu are nucleoli. Are afinitate pentru coloranii bazici, dar pe preparatele
colorate uzual este mascat de bazofilia intens a citoplasmei bogat n ARN.
Unicul cromozom bacterian este alctuit dintr-o singur molecul de ADN dublu catenar,
cu aspectul unui fir lung (1.000-2.000 m), nchis ntr-un inel i replicat pe el nsui,
superspiralat. Mrimea cromozomului poate s difere n funcie de specia bacterian
(i respectiv numrul de perechi de baze); cea mai mic celul bacterian ar fi cea de
Mycoplasma spp., la care dimensiunea este de 4.700 kpb, n timp ce cromozomul de E. coli
poate avea o dimensiune de circa 3 ori mai mare. Avnd n vedere c dimensiunea bacteriilor
este de circa 1-2 mm n cazul cocilor i de cteva ori mai mare n cazul bacililor, pentru ca
materialul genetic s poat fi coninut n acest spaiu redus, acesta trebuie s fie compactat
ntr-un mod remarcabil i astfel, rezult nucleoidul bacterian care poate fi difereniat
microscopic. Nucleoidul este format din molecula de ADN asociat cu proteine i o cantitate
variabil de ARN.
Relativ recent (1989) s-a descoperit c exist i bacterii care dein cromozomi lineari
(ex. Borrelia burgdorferi). Toate speciile din genul Borrelia dein i plasmide lineare.
Replicarea cromozomului bacterian se face printr-un mecanism semiconservativ. Aa cum
am menionat, cromozomul este unic, ns n celula care se dezvolt rapid exist posibilitatea
ca nainte ca prima replicare s se fi ncheiat s se iniieze nc o replicare i n acest caz
celula bacterian va putea fi meroploid (doar anumite regiuni cromozomiale sunt copiate de
mai multe ori) sau chiar poliploid (tot cromozomul a fost copiat de mai multe ori).
Dac replicarea cromozomial nu este succedat de diviunea celulei (aa cum se ntmpl n
mod obinuit), putem remarca n celula bacterian existena mai multor cromozomi.
Cromozomii suplimentari (n total 2 sau 4) nu aduc o informaie genetic diferit pentru c ei
sunt copii ale cromozomului iniial (identici cu acesta).
Nucleul deine informaia genetic necesar proceselor vitale de cretere i multiplicare.
Codonul
Din punct de vedere funcional, 3 nucleotide consecutive din structura moleculei de ADN
formeaz un codon. Codonii dein informaia genetic pentru a plasa ntr-o anumit secven
un anumit aminoacid, n lanul polipeptidic care va fi sintetizat la nivelul ribozomilor.
Cistronul
Cistronul reprezint o subunitate funcional a genei, capabil s determine independent
sinteza unui lan polipeptidic.
Gena
Gena structural reprezint o poriune a genomului, respectiv o anumit secven de
nucleotide dispuse liniar. Genele structurale reprezint circa 90% din ansamblul informaiei
genetice. Poart nscris n structura sa informaia genetic necesar pentru sinteza unei
proteine specifice, structurale sau funcionale (enzime).
2.3.2. Structuri facultative
Structurile facultative ale celulei bacteriene sunt reprezentate de capsul, cili (flagelii),
fimbrii (pili) i spori (forme de rezisten).
2.3.2.1. Capsula: structur, rol, evideniere
Numeroase bacterii sintetizeaz polimeri organici (de obicei polizaharide) care formeaz
n jurul celulei o matrice fibroas, numit glicocalix.
La unele bacterii glicocalixul ader strns de celula bacterian i reprezint capsula.
Exist bacterii care dein o capsul bine definit, cu structur polizaharidic (S. pneumoniae,
K. pneumoniae, unele tulpini de E. coli etc) sau cu structur polipeptidic (Bacillus anthracis
etc).
La alte bacterii, glicocalixul formeaz o reea lax de fibrile care se pierde parial n
mediu i poate fi separat de corpul bacterian prin centrifugare, capsula flexibil, care nu este
vizibil la microscopul optic.
Roluri:
- factor de virulen, mpiedicnd fagocitarea bacteriei i favoriznd invazivitatea;
- rezisten fa de surfactani, anticorpi;
- permite aderarea unor bacterii (rol de adezin);
- barier protectoare fa de bacteriofagi, protozoare;
- conine substane cu specificitate antigenic (de specie sau de tip) - antigenul K.
Spre exemplu, n cazul S. pneumoniae exist peste 90 tipuri antigenice capsulare n timp ce la
E. coli sau la Klebsiella pneumoniae exist peste 80 tipuri antigenice capsulare.
Referitor la modalitile de evideniere ale structurilor capsulare, este de menionat c prin
coloraia cu albastru de metilen sau tu de China/India, n jurul bacteriei apare un halou
necolorat. Exist i coloraii speciale pentru capsul, de exemplu coloraia Hiss.
Structura antigenic a capsulei permite identificarea bacteriilor, spre exemplu prin reacia de
umflare a capsulei (Neufeld) atunci cnd se folosesc seruri polivalente sau monovalente
anticapsulare pentru identificarea pneumococilor.
2.3.2.2. Flagelii: structur, rol, localizare
Cilii sau flagelii confer mobilitate bacteriilor. Mobilitatea poate fi evideniat n
preparatul proaspt (ntre lam i lamel) sau pe anumite medii speciale (ex. MIU).
Mobilitatea germenilor din genul Proteus este observat pe orice mediu de cultur solid pe
care acest microorganism foarte mobil se dezvolt (fenomenul de invazie).
Flagelii sunt formaiuni fine, alungite, flexibile, cu origine la nivelul corpusculului bazal.
Acesta este alctuit (de ex. la majoritatea bacteriilor Gram-negative) din patru discuri aranjate
ca dou perechi pe o structur care trece prin mijlocul lor. Corpusculul bazal este plasat n
perete i membrana citoplasmatic. Din punct de vedere chimic flagelul este de natur
proteic (flagelina).
Roluri:
- n mobilitate (cu o vitez de circa 50 m / secund); cilul are o micare de rotaie,
asemntoare unei nurubri n mediu i ca atare corpul bacterian este mpins n direcia
opus; motorul rotaiei e reprezentat de corpusculul bazal iar energia este obinut din ATP;
- antigenic (datorit structurii proteice - antigenul H, specific de tip);
- n clasificarea bacteriilor (prin numr i distribuie), bacteriile putnd fi
- monotriche (cu un flagel dispus la o extremitate), de exemplu Vibrio cholerae,
Pseudomonas aeruginosa;
- lofotriche (cu un mnunchi de flageli dispus la o extremitate);
- peritriche (cu mai muli flageli dispui de-a lungul suprafeei bacteriene), de exemplu
E. coli, Proteus mirabilis.
2.3.2.3. Fimbriile (pilii)
Sunt formaiuni scurte, fine, nu au rol n mobilitate. De obicei pilii sunt mai subiri dect
cilii. Pot fi foarte numeroase pe suprafaa majoritii bacteriilor; pot fi observate numai la
microscopul electronic.
Exist pili comuni, cu urmtoarele roluri:
- n aderena bacterian (adezine);
- conin receptori specifici pentru bacteriofagi;
- antigenic (la unele bacterii), ex. N. Meningitidis i N. gonorrhoeae.
Exist pili F (sexuali), determinai genetic de factorul de fertilitate F (episom). Acetia
ndeplinesc rolul canalului de conjugare.
2.3.2.4. Sporii: structur, compoziie chimic, rol, localizare
Fenomenul de sporogenez este mai des ntlnit la Bacillaceae (genurile Clostridium i
Bacillus). Pe sol, n condiii de uscciune, la adpost de lumina solar direct, endosporii
persist zeci i poate sute de ani.
Materialul genetic este concentrat i, mpreun cu apa legat, lipide, Ca ++, Mg++, este
nconjurat de un strat protector (membrana sporal, cortexul sporal, nveliurile sporale).
Smburele sporal mpreun cu membrana citoplasmatic formeaz protoplastul sporal.
Roluri:
- form de rezisten i conservare a speciei (n condiii favorabile un spor se poate
transforma ntr-o bacterie/forma vegetativ; procesul de formare a sporului ar putea fi
considerat una dintre cele mai primitive forme de difereniere, dar nu este un proces de
reproducere celular aa cum se ntmpl la fungi sau parazii);
- rezist la cldur, uscciune, la anumite substane chimice i antibiotice, raze UV, etc.
Sporul poate fi localizat:
- central sau subterminal, mai mic dect celula (ex. la Bacillus anthracis);
- central sau subterminal, mai mare dect celula (ex. la Clostridium hystoliticum, etc.);
- terminal (ex. la Clostridium tetani, cu aspectul de b de chibrit).
Poate fi evideniat prin coloraii speciale (de exemplu verde malachit) sau prin coloraia
Gram (locul sporului rmne necolorat).
Este sensibil la formol, propiolacton etc. Este distrus prin autoclavare.
BIBLIGRAFIE: Popa G.L., Popa M.I., Structura celulei bacteriene, n Popa M.I. (coord.),
Microbiologie Medical, vol 1 - curs UMF Carol Davila, 2010.