Conservacin por transferencia peridica o subcultivo.

La cepa microbiana se guarda en forma de cultivo activo en el medio de

cultivo en el que ha crecido, consiste en la transferencia del cultivo a un
medio de cultivo fresco a intervalos que aseguren la viabilidad del
mismo. Estos intervalos varan dependiendo de las caractersticas del
microorganismo en cuestin, algunas especies requieren ser transferidas
a nuevos medios despus de das o semanas, y otras despus de meses
o aos. Esta frecuencia puede reducirse con el almacenamiento del
subcultivo a temperaturas
relativamente bajas, en un refrigerador a 4C o en un freezer entre
10C y 20C, bajo aceite mineral o agua.
Sin embargo, estas clulas no pueden permanecer indefinidamente en
el mismo tubo, porque al seguir activas excretan productos txicos
del metabolismo que se cumulan, provocando el envejecimiento y
muerte celulares. Este es el peor mtodo para conseguir la estabilidad
gentica, puesto que al estar las clulas creciendo hay una
alternancia de generaciones, y al cabo del tiempo las clulas que
se estn guardando sern descendientes lejanas de las clulas iniciales
y es posible que ya no conserven algunas de sus caractersticas.
Es conocido que el riesgo de contaminacin y de cambios genticos se
incrementa a mayor nmero de transferencias; as como el peligro de
prdida del cultivo sobre todo cuando se trabaja con microorganismos
delicados y la posibilidad de que ocurra deshidratacin del medio de
cultivo, a estos inconvenientes se suma adems que cuando hay
muchos microorganismos el trabajo es muy intenso y se requiere un
espacio grande para el almacenamiento.
Si se va a utilizar este mtodo es aconsejable retardar el envejecimiento
y alargar los periodos entre dos resiembras. Esto se puede conseguir de
varias maneras como, por ejemplo: disminuyendo la cantidad de inculo;
rebajando la proporcin de algunos nutrientes en el medio de cultivo;
inoculando en picadura los microorganismos que son anaerobios
facultativos, ya que el crecimiento en presencia de oxgeno es ms
rpido y origina productos generalmente txicos.
Este mtodo es muy simple, con l se puede mantener la
viabilidad de algunos microorganismos por muchos aos, y la
recuperacin de los cultivos activos es relativamente fcil. En el caso de
colecciones pequeas, ste puede ser un mtodo econmicamente
factible en cuanto al equipamiento y al tiempo que se invierte.
A corto plazo, un mtodo comn es el subcultivo; que consiste en el
repique peridico del cultivo en un medio nutritivo fresco. Una vez

desarrollados los cultivos, se mantienen a 4C durante lapsos que van

entre 15 das y dos meses. Sin embargo esta tcnica presenta algunos
inconvenientes, entre los cuales estn: Incremento de la posibilidad de
mutacin con cada transferencia, riesgo de contaminacin y alteraciones
en el medio de cultivo, durante la etapa en fro, que produce una
desecacin gradual del mismo.