Practica No.

6 CARACTERSTICAS MICROSCPICAS DEL CULTIVO

(MORFOLOGA COLONIAL)
1. qu es una colonia?
Se entiende por colonia bacteriana a la agrupacin de bacterias originadas a partir de una
bacteria madre que se establecen y extienden por determinado medio.
En condiciones de incubacin adecuados, cada clula bacteriana inoculada sobre la
superficie del medio slido proliferar lo suficiente para ser observable a simple vista, se
considera que la poblacin bacteriana resultante deriva de una sola clula bacteriana y se
conoce como colonia, es decir, todas las clulas bacterianas dentro de una colonia son del
mismo gnero y especie, lo que otorga caractersticas genticas y fenotpicas idnticas.
2. cmo se determina la consistencia de una colonia?
La caja petri con el medio de cultivo se coloca a la altura de la cara y con una asa se toca
una colonia (destruir) y se retira la asa con cuidado para poder obsrvar la consistencia de
esta
3. diga las diferencias entre las colonias desarrolladas en un medio enriquecido y
en uno selectivo
Medios selectivos: en 1905, MacConkey describi un medio diferencial selectivo que us
para aislar bacilos entricos gramnegativos de muestras con mezclas de especies
bacterianas, este agar contiene rojo neutro como indicador del pH y, como resultado, las
colonias que utilizan lactosa se ven de color rojo por la produccin de cidos mixtos, los
productores de cidos fuertes, como Escherichia coli forman colonias rojo oscuro, los
formadores de cidoa ms dbiles forman colonias rosado plido o colonias que son claras
en la periferia y tienen un centro rosado.
Medios de enriquecimiento: como su nombre lo indica, un medio de enriquecimiento se
usa para incrementar el crecimiento de ciertas especies bacterianas e inhibir el desarrollo de
microorganismos no deseados. En laboratorios, clnicos los medios de enriquecimiento con
mayor frecuencia se utilizan para la recuperacin de especies de Salmonella y Shigella de
muestras fecales. Los caldos de enriquecimiento son tiles sobre todo para la recuperacin
de microorganismos de las heces de portadores de Salmonella o de pacientes con
infecciones leves con Shigella en quienes el nmero de microorganismos puede ser tan
pequeo como de 200/g de materia fecal.
4. enumerar las principales caractersticas tomadas en cuenta para determinar
un crecimiento colonial
a) Tamao de la colonia: por lo comn calculado en mm o descrito en trminos
relativos como cabeza de alfiler, pequeo, medio o grande.
b) Forma: puntiforme, circular, filamentosa, irregular, rizoide, como huso.
c) Elevacin: plana, sobreelevada, convexa, pulvinada (con forma de cojn),
umbonada, umbilicada
d) Margen o borde colonial: entero, ondulante, lobulado, lacerado, filamentoso,
rizado.
e) Color o pigmentacin de la colonia: blanco, amarillo, negro, marrn,
anaranjado, etc.
f) Superficie: Brillante, opaca, roma, transparente.

g) Densidad: opaca, translcida, transparente, etc.

h) Consistencia: mantecosa, viscosa, membranosa, quebradiza, etc.
i) Olor: ciertas bacterias producen olores caractersticos
*cambios en los medios con agar como resultado del crecimiento bacteriano, como: patrn
hemoltico en agar sangre; cambios de color en los indicadores de pH, corrosin de la
superficie del agar.
5. de qu manera se observa si un agar sangre presenta hemlisis?
Las placas de agar sangre deben examinarse con transiluminacin con una luz brillante
desde detrs de la placa para detectar reacciones hemolticas en el agar.
Los hemocultivos deben incubarse a 35C y examinarse visualmente para ver si hay
evidencia de crecimiento (hemlisis, produccin de gas o turbidez) derante las primeras 6 a
18 horas, siguientes a la recoleccin. Deben examinarse contra luz fluorescente brillante o
con luz transmitida incandescente. Se deben examinar la superficie de la capa de sangre
sedimentada porque pueden detectarse colonias discretas.
6. describa cmo se observan los siguientes tipos de hemlisis:
a) Alfa: aclaracin parcial de sangre alrededor de las colonias con coloracin
verde del medio; contorno de eritrocitos intactos.
b) Beta: Zona de aclaracin total de sangre alrededor de las colonias debido a
la lisis o coloracin de los eritrocitos.
c) Gamma: ningn cambio del medio alrededor de la colonia; no hay lisis o
coloracin de los eritrocitos.
d) Alfa primaria: Halo de lisis incompleta inmediatamente alrededor de las
colonias con una segunda zona de hemlisis completa en la periferia.
7. Mencione que otras recaciones se dan en los siguientes medios de cultivo solidos
utilizados en la identificacin de bacterias:
a) Agra Sal y Manitol.
Medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento y diferenciacin de
estafilococos. Es recomendado para el aislamiento de estafilococos patognicos a partir de
muestras clnicas, alimentos, productos cosmticos y otros materiales de importancia
sanitaria. Tambin, este medio puede utilizarse para el cultivo de especies halfilas de
Vibrio, si no se dispone de medios apropiados, aunque algunas especies pueden no
desarrollar.
Fundamento
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracin salina. Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio; las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante. Los estafilococos coagulasa negativos,
presentan colonias rodeadas de una zona roja o prpura. Las colonias sospechosas, se
repicarn en un medio sin exceso de cloruro de sodio para efectuarles, posteriormente, la
prueba de la coagulasa. En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona,
constituyen la fuente de carbono, nitrgeno, vitaminas y minerales, el manitol es el hidrato
de carbono fermentable, el cloruro de sodio (que se encuentra en alta concentracin) es el
agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora acompaante, y el rojo fenol es el
indicador de pH. Las bacterias que crecen en un medio con alta concentracin de sal y
fermentan el manitol, producen cidos, con lo que se modifica el pH del medio y vira el
indicador de pH del color rojo al amarillo. Los estafilococos crecen en altas
concentraciones de sal, y pueden o no fermentar el manitol. Los estafilococos coagulasa

positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de una zona
del mismo color. Los estafilococos que no fermentan el manitol, se visualizan como
colonias rojas, rodeadas de una zona del mismo color o prpura.
Microorganismos

Crecimiento

Caractersticas de las colonias

Staphylococcus aureus

Excelente

Amarilla

Staphylococcus epidermidis

Bueno

Roja

Escherichia coli

Inhibido

Inhibido

Klebsiella pneumoniae

Inhibido

Inhibido

b) Agar Base Leche.

c) EMB.
Este medio (tambin denominado E.A.M.) es utilizado para el aislamiento selectivo de
bacilos Gram negativos de rpido desarrollo y escasas exigencias nutricionales. Permite el
desarrollo de todas las especies de la familia Enterobacteriaceae.
Fundamento
Este medio combina las frmulas de Holt-Harris y Teague con la de Levine, para obtener
un mejor rendimiento en el aislamiento selectivo de enterobacterias y otras especies de
bacilos Gram negativos. La diferenciacin entre organismos capaces de utilizar la lactosa
y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, est dada por los indicadores eosina
y azul de metileno; stos ejercen un efecto inhibitorio sobre muchas bacterias Gram
positivas. Muchas cepas de Escherichia coli y Citrobacter spp. presentan un caracterstico
brillo metlico. Las cepas que utilizan la lactosa poseen centro oscuro con periferia azulada
o rosada, mientras que las que no lo hacen son incoloras. Este medio permite el crecimiento
de Candida spp. como colonias rosadas y puntiformes; la siembra en profundidad permite el
desarrollo de clamidosporas en C. albicans. Enterococcus spp. crece en este medio como
colonias puntiformes y transparentes, mientras que Acinetobacter spp. y otras bacterias
oxidativas pueden dar colonias de color azul lavanda; esto puede ocurrir aunque las cepas
no sean capaces de acidificar a partir de lactosa al 0.5% y ello se debe a la incorporacin de
azul de metileno a sus membranas. En este medio se obtiene adems, un buen desarrollo de
especies de Salmonella y Shigella.
Microorganismos
Escherichia coli
Klebsiella pneumoniae
Proteus mirabilis
Enterococcus faecalis
Shigella flexneri
Salmonella typhimurium
8. Describa la morfologa colonial de:
a)

E. Coli en agar EMB

Tipo de Colonia
Verdosas con brillo metlico y centro
negro azulado
Mucosas, rosa prpura, confluentes
Incoloras
Incoloras, pequeas, puntiformes
Incoloras
Incoloras

Colonias verde-negras con un brillo metlico, pulvinada, semiopaca, gris, hmeda a un

poco seca.
b) S. aureus en agar sal y manitol
Convexa, borde entero, 2 a 3 mm, cremosa amarillenta. Fermenta el manitol produciendo
cidos con los que se modifica el pH y en indicador vira de rojo al amarillo. El
pigmento amarillo esta formado por dos carotenoides: caroteno y sarcinaxantina.
c) P.aeruginosa en agar nutritivo
Plan opaca, gris a verdosa, mrgenes lacerados a diseminados, pigmento verde-azul,
olor como a uvas.
9. De qu forma reporta la luz transmitida de una colonia?
Durante el examen para determinar las caractersticas macroscpicas de las colonias, las
placas deben inclinarse en diversas direcciones, con una iluminacin directa brillante, de
modo que la luz se refleje desde varios ngulos, para ello se recomienda el uso de una lupa
o microscopio para diseccin como ayuda para detectar las colonias diminutas o inmaduras
y observar mejor sus caractersticas.
10. De qu forma reporta la luz reflejada de una colonia?
Las placas de agar-sangre tambin pueden examinarse con transiluminacin con una luz
brillante desde detrs de la placa para detectar reacciones hemolticas en el agar.
BIBLIOGRAFA:
Davis, R. Dulbecco.Tratado de microbiologia, 2 ed. Salvat editores. Mexico
1979
Burdon, Kenneth L. Microbiologia,1 ed. Publicaciones Cultural, Mexico,
1986
Burrows William. Tratado de microbiologia,19 ed. Editorial
Interamericana, Mexico 1969
Koneman, Elmer K. Diagnstico microbiolgico. 3a ed. Editorial mdica
Panamericana. Mxico, 1997

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