MEIOS DE CULTIVO DE BACTRIAS

Prof. Dra. Dejanira de Franceschi de Angelis

1 INTRODUO
As bactrias podem ser cultivadas em diferentes meios de cultura, contudo
importante a deteco daquelas que predominam em um determinado ambiente causando
perturbaes de ordem ecolgica, social e econmica.
Na industria alcooleira, existem bactrias que produzem deteriorao na cana-deacar, no caldo de cana, nas tubulaes, na fermentao, na qualidade do acar,
introduzindo o que reverte-se em perdas no processo.
Considerando, que cada unidade industrial tem suas caractersticas prprias verificouse que possvel cada uma reproduzir seus meios de cultivo atendendo as condies de
provenincia de sua matria-prima.
Desta forma sugere-se os seguintes meios para controle das bactrias do processo:
2 MEIO CSN (CALDO SUPLEMENTADO COM NUTRIENTES)
Este meio pode ser preparado sem o gar na forma liquida para multiplicao de
bactrias isoladas do processo.
Outra opo para o cultivo de levedura, neste caso no se coloca a cicloheximida.
Este meio pode ser empregado para diferentes finalidades: avaliao da sensibilidade
aos biocidas, resistncia trmica, resistncia ao etanol, variao de pH, crescimento em
diferentes potenciais osmticos, queda de ART (Aucares Redutores Totais), entre outras.
Pode ainda ser empregado para os ensaios de avaliao da sensibilidade de bactrias no
teste de CIM (Concentrao Inibitria Mnima) ou MIC (Minimal Inhibitory Concentration) .
Formula:
Caldo de cana clarificado Brix ...........................................................1000mL
Extrato de levedura ........................................................................... 0,5g
Peptona ............................................................................................. 0,5g
Tweem 80 .......................................................................................... 0,12mL/g
Cicloheximida ..................................................................................... 10,0 ppm
pH ...................................................................................................... 6,2 +/- 0,1
Agar ................................................................................................... 17,0g
PREPARO DO MEIO:
Na industria emprega-se o caldo clarificado, porm se tiver muito sulfito este poder
prejudicar os ensaios de laboratrio.
Clarificao do caldo: 1 litro de caldo-de-cana (garapeiro) adiciona-se 2 claras de ovo,
batidas em neve. Leva-se autoclave em frasco e deixa-se por 30 minutos com a vlvula
aberta. A seguir deixa-se esfriar at condio de abrir ainda quente a autoclave (abre-se com
cuidado). Filtra-se o caldo com gase dobrada ou em algodo colocado em funil.
O caldo filtrado fica claro e livre de matria polimerizada como pectina, albuminas,
mucilagem, etc. Neste ponto ajustam-se o Brix e o pH para o uso no laboratrio.

3 MEIO CSN COM CARBONATO

Este meio presta-se para verificar a presena de bactrias produtoras de acido.
PREPARO DO MEIO:
Pesar 20g CaCO3 e dissolver em 100mL de gua destilada. Esterilizar.
Usar 4 mL desta soluo para cada 100 mL de meio CSN.
4 MEIO PARA PRODUTORAS DE GOMA
Este meio presta-se para verificar a presena de bactrias produtoras de goma.
Formula:
Sacarose ........................................................... 100,0 g
Glicose .............................................................. 10,0 g
Triptona ............................................................. 5,0 g
Agar ................................................................... 16,0 g
pH ......................................................................
5,5
gua destilada ................................................... 100,0 mL
Cicloheximida ...................................................... 0,5 mL (soluo 1 mg/ mL)
Pesar a sacarose e a glicose e esterilizar separadamente :
- dissolver a glicose em 20 mL de gua
- dissolver a sacarose em 80 mL de gua
Na hora de usar acrescentar os demais componentes dissolvidos em 80,0 mL
Completar o volume com 100 mL de gua esterilizada.
Obs. Se a este meio for acrescentado 12,5 mL de uma soluo de azida sdica a 1%,
esterilizada em membrana filtrante, tornar-se- seletivo para Leuccnastac sp.