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CONTROL ENDOCRINO DEL CICLO REPRODUCTOR EN LA RATA: UNA EXPERIENCIA DOCENTE UTILIZANDO UN METODO DE CARACTERIZACION CITOLOGICO_ Rosa R de la Cruz Rosario Pésaro Departamento de Fisiologia y Biologia Animal Universidad de Sevilla RESUMEN Se presenta el desallo de un actividad pricicn recemeentencrporada al programa de Fisiologia Animal ena Facultad de Bologl,conssteats en caracezar el cio esta nla ata melanin histoldgica de fos vaginal. Ademis de ampli ls eonocimienos trices, la rca cumple varios obetivos, come el manejo cudado de animales de laboratories de ‘eniae de tncgn hisoogies yeh demrolo Je un potcolo experimental Ast ab une inrodieciin tenes yuna demostain pit, os alos deena las aes el il eal “un prpo de animales malian mucsen, inednchservsi y anid os datos, Detallamos Ios apts fundamentals de este proyecto docete, que icluyer los prinposslégions Subyaceates,dseo experimental, materi, oganizaciontempral métods de evalacin yl ‘experiencia docente agin. ABSTRACT ‘The fundamentals ofa teaching laboratory projet in Physiology recently introduced inthe Facaly of Biology ae presented. The lorry project consis inthe characterization ofthe ‘Stouvyslein theta the hisologial staining of vaginal smears Inaddson extend theoreti ‘pects his acy ever several objectives, sch asthe handing and ao aboratry animal, {he we ofhitalogial ining fecbnigoes and th performance of an experimental protool. Thus, itera theoreti introdton and spacial demonstaton, te suns determine the phases of {he etrous cycle ina groop of animal by sampling, staining and arlysing the data. This work ‘umumanaes the main arpeets of his teaching projet that include te underlying physiological ‘niles experimental desig, trl tmporalorganigation, evasion metous an teres tthe teaching experience | INTRODUCCION neste atculo se presenta la memoria de una actividad docente que ba sido recientemente ncorporada como trabajo prictico de la asignatura de Fisiologia Animal de Is Licenciature de Biologia. El tabajo de laboratorio supone una participaién mis directa de los alumios en el, proceso de aprendizae. En los watadoselisicos de didéctica de las ciencia se considera este tipo de trabajo prictico como laboratorio de comprobacién, ene que ls aumnos seenfretan ‘on trabajos dirigos y orentados pore guidn de a prctca y queconduce ala observacion ‘de un fendmeno conereto (Schwab, 1962). Sin embargo, esl profetoraquien compete sacat el méximo provecho formativo del laborataro de pricicas, promoviendo Ta patcipacion ‘tiv del slimnoenel proceso de aprendzaj (Ferndndes Usa, 197) Flobjtivo final bas sede que el alumno aprends a desenvolverse por si mismo en elaboratoro en el manejo fe animales, aspecto este thtimo muy controverido. En la mayoria de las prictcas con ‘nimales de los manuals ctuales (Segura Carden 1987) se procade a anestsir al animal ss ormadasAndalizas ¥ya contnuacién sometero a diversos procedimientos, cuando no, dectamente se realiza un Snilisis postmortem de su anatomia. Estas prictias estin hoy en desuso y se utllzan fandamentalmente los métodosalterativos de modelos ysimulacions por ordenador (Wester yyMeMullen, 1997), Sin embargo, desde el punto de Vsta de la experimentacién en Fisiologia ‘Animal, se pierde el contacto con el animal y con los procedimientos llevados a cabo en el laboratorio, Por todo ell, nos propusims plantar una experiencia de faboratrio que tuviera como sujeto la ata (animal de experimentacion en Fisiologia por excelencia), que el ani] no suftese dato, es decir, sin anestesia preva ni intervencién cruenta, tineamente su ‘manipulacién. Por oo lado, nose olvidalafnalida de los trabajos prictcos en genera, es ‘ocr la de facilitar por medio de una serie de operaciones y atvidads la adguisicién de una tesperincia de gran valor y wlidaden el context dela frmacin del alumao en Fisiologia ‘Animal (Femindez Uris, 1979; Segura Cardena, 1987). La prictica desarolaaspectos relacionados con la regulacidn endocrin de la funcién repraductore, tomando como modelo experimental el ciclo reprodactor de la rata hembra, también nmado ciclo esta. El ciclo esta est consttuido por varia fsesy los alumnos deben caacterizar, durante aproximadamente2ciclos estaes, las diferentes fases en las que Sse encuentra cad Tata individualmente denificads enn gropo de animales expermentales, [La deterinacién dela fase del ciclo ellevaa cabo mediante atincgnhistoldpea dun frotis vaginal, muestra que debe cers diariamente ala misma hor. (Con a puesta en marcha de esta actividad prctice se pretendecumplir varios prop6sitos, Porun ad, offecer aos alumnos de Biologia maticulados en Fisiologia Animal asignatura troncal de 4 curso en los actuals Planes de Estudio) a oportunidad de aprender el manejo y ‘manipolacién de un animal de laboraorio, en este caso, la rata Por oto lado, prepara al lumno para el desarolo den protocolo experimental en sus distintasfases (Le, disco ‘experimental, muesizeo, andlisis, preseatacisn,dscusia), que él mismo deberiejcutar bajo la Supervision del profesor. Por imo, la prctca aqui descrta amplia y consoida los conotimients tedricos que el alumno recibe en las clases teéreas & Endocrinologa dento el programa de la asignatura de Fisiologia Animal, 2. OBJETIVOS Los objetivos qu la prictica pretendecubris, respecto a siguientes 2) conocer el ciclo reproductor dela rata y distingur entre sus distntasfases. ‘relacionar la faces de ciclo extral com laevariaciones hormonalessubyacentes ©) dominar el manejo y cuidado de un animal de Iaboratri. utilizar téenicas de preparacén ytincién de muestras paral obervacién al miroscopio ‘de un frots vaginal y posterior reconocimiento de los elementos cellars ©) desarollar un protocolo experimental completo. formacién dl alumno, son los 3. PRINCIPIOS FISIOLOGICOS 3.1. CONTROL ENDOCRINO DEL. CICLO REFRODUCTOR EN LAS HEMBRAS DE MAMIFEROS [Las alteracionesciclcas dela func reproductoraestn regula por varias hormonas el ee hipotilamo-adenohipofisario y de las génadas. El hipotilamo (estructura nervosa 46 - (Calidad en le Enseianaa Universtaris iencefilica) es la fuente de factores que pasan a wavds de las venas porales 2 la ‘adenohipisi (estructura endocrina stan en labase del diencéfalo) donde aetuanregslando Ia liberacin de las hormonas adenohipofisaris, ncluidas las gonadovofinas (Kreger, 1989; ‘MeCana y Ojeda, 1992). La hormona hipoalimiea liberadora de gonadotofinas (GnRH) stimula ia secrecion en la adenohipisis dels hormona ltenizante (LI) y de la hormona ‘stimulate de os foliculos (FSH). Estas hormonas son de naturaleca peptides, LH y FSH van ‘ actuar sobre las génadas, que ene caso de las hembas son os ovatok. A Su ver [0s oarios son glindulasendocrinas que secretanestdgenos y progestrona, ormonas de natraleza esteroidea. Por dltimo, los niveles ciculanes de estrOgenos y progestrona, mediante ‘etvoalimentacién, regulan la iberacion de las gonadatofinas adenohipofisarias LH y FSH, sta compleja inteaccién hormonal va a se la responsable de la sucesin de los ciclos reproductores en las hembra. En generale ccloeprodctor de as hembras de mamiferosse puede cracterizar por una fase preovulatoria yuna fase postovulatoria, entre amb fsesocure la ovulacion. A'S vez, ncaa fase se suceden cambios a nivel dl ovario y del te que seresumen aconinuacion, Respect a los cambios ene ovari, ena fase preovulatori, bap I inflencia de a FSH, cmpiezs la maduracin de un conjuntodefliclosovdrcos, qu cumina con la extrusin de tio o varios 6vulos (sega la especie a cavidad abdominal, donde son recogides por las Fimbras de los ovidtosy canalizados hacia liter, El foicuo ovéico es una esters mulicelular que tas ln extrusin del Gvalo ae transforma en el cuerpo liteo, Haciae inal de 1a fase postovuatoria, el cuerpo hiteo finalmente degeneraen cuerpo albicans, estructura azofiada que sereconoce en los cote histol6picos de ovaio como una masa pélida (Genuth, 992; Guyton, 1991; Peluso, 1996). Desde el punto de vista de los cambios ovrics, la fase roovulatri también se llama fase foliculr la postovulatri, fase ltea, Respect los cambios ent iteo, durante ls fsepreovulatoria los estrdgenosestimulan la hiperplasa del endometrio uterino mediante divisions cluares que aumentan el espesor 257 [i650 rene de bonnes lacocon Lair [Deseo [Se cevanacatae estan son arom eros [esc Je aein Se enone a ractxmens nse herve lat Ser deena ss Calidad en Fnseionse Universaris 03-97 ]1630] Pasir nie apo qe parse [Pronto [ncn onda Tabla Bjomplo de na ala de dats constada por ox adie ») La prutbs teria consta de dos apartados, 10 preguntas de elecciéa miltiple y una pregunta Cota de desarollo(miximo una carlls) a realizar en un tiempo maximo de 4S minutos. La ealficaciin maxima que se puede obtener es de 7-5 puntos (3.75 en cada sparado) 7. EXPERIENCIA DOCENTE La prictca del ciclo del esto se ha impart, hasta el momento, durante dos aflos consecutivos en la asignatua de Fisiologia Animal de la Facultad de Biologia. En el primer tho (1995196), la pritica se offecié como una actividad complementaria a clegit ‘oluntariamente por tn grupo reduido de alunos. Los dems alumaos pudirun clepir otras ‘ctividadadescomplementarasalterativas com videos oseminarios. La idea era probar el funcionamiento de la pricticaen un nimero redacido dealumnos ates de ofertarla a todo el coletvo; sobre todo, teniendo en cuenta qu la prctica implica a manpulacin de animales, ¥ contequentemente cl objetivo ere asegurar que su desarrollo cusara con normalidad Durante el presente curso ecadémico (199697) la prictica se oferta todos os alumnos, en as mismas condiciones que el resto de las actividades pricticas [La orgenizacén dela prctcay su horari se detallan a contac, 4) Clase introductoria teériolprdctica Es impartida por el profesor a cada grupo de slumnos. En primer lugar, los alumnos| reciben una clase tedric ical en la que Se comentan los prinipios de fisiologta endocrina ‘ecesaros y que sirven de base para la prictica. Tras la clase, el profesor realiza para cada frupo de alumnos una demostaciénprictica dela actividad en el laboratori 1) Preparacién de as muestas CCada grupo de slumnostene Ia misién de seguir ls fases del ciclo estal a 3 animales ‘dentificados durante un petiodo de I-2 semanas. Los alunos realian todos los pasos bajo la supervisiin de los docentes. As, deben de manipula al animal, oma la muestra y realizar Ja tncin, cada dia la misma hora. 6) Observacién de las muestra ‘Una vez que un grupo dealumnos ha terminado su periodo de preparacién de as macs puede proceder 4 la observacion de las mismas en el laborsoro visulizindolas ba) Inicroscopio pico, Tras recibir unas nstruccions bisicas los alumnos debe ells la tabla te datos (ver Tabla 3) de modo individu: si bien pueden discutr en grupo as conclusiones ‘eben ser personales, El tempo total de que disponen par a obseracin es de 3 horas 1) Pruebas prictica yteérica, Cada grupo escitado para dscutirl tabla de datos experimentales (prueba prctic)y para realizar una prueba tric escrta,segin se indieé en el apartado 6, 583 8. CONCLUSIONES La puesta en marcha de este trabajo experimental para los alurnos de Fisiologia Animal ba supuesto un reto para los docentes implicados en dicka actividad. Por una pate, se ha intentado materaizarlos objetivoscognoseitvosy de aprendizaj implicit entoda actividad prdetica; por otra, se ha tat de motivar alos luminos con dichs abjetivos. Enel primer Bio (curso. 1995/96) se oferé a un nimero reducido de alumnos como actividad ‘complementariay ene curso 199697 a todos aquellos alumnos inferesados en Ia misma. Los Alumnos han acogido muy favorablemente la realizacén de esta pricticay los resultados ‘obtenidos en las evaluciones han demostrado una adquiscién de conocimientos ydestezas Jmportantes. Creemos que se han logrado los objctivos propuestos REFERENCIAS «T, R, RANDALL, D. y AUGUSTINE, G. (1988). Anta! Physiology. Mechanisms and Adaptations. New York, W-H. Freeman and Company. FERNANDEZ URIA, E, (1979). Bsuctura y Didécica de lar Ciencias, Breviaros de Educacion, Madrid, Servicio de Publicaciones del ME. GENUTH, SM, (1992) The reproductive glands, en RM. BERNE y MLN. LEVY (Eds). Physiology. St Louis, Mosby Year Book. 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