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UNIVERSIDAD DE CARABOBO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE BIOANLISIS
ASIGNATURA DE FISIOLOGA
PRACTICA N 4
EXAMEN COMPLETO DE ORINA
INTRODUCCIN
El anlisis de orina es el ms antiguo de todos los exmenes clnicos de laboratorio.
Es una prueba que a menudo es relegada a un rincn lejano del laboratorio, pero que con
cuidado y atencin es uno de los exmenes ms valiosos. El valor del anlisis de orina
reside en la facilidad de obtener muestras, en la rpida determinacin de compuestos
qumicos al emplearse tiras reactivas y en la gran cantidad de informacin que brinda al
mdico.
La orina es un lquido acuoso transparente y amarillento, de olor caracterstico,
secretado por los riones y eliminado al exterior por el aparato urinario. La orina se genera
producto de todos los procesos fisiolgicos que tienen lugar en el rin. En el glomrulo
renal la sangre es filtrada a travs de la membrana glomerular. El ultrafiltrado de plasma,
producto de la filtracin, se transporta por una serie de tbulos que componen la nefrona,
como son el tbulo contorneado proximal, asa de Henle, tbulo distal y tbulos colectores.
A su paso por los tbulos el ultrafiltrado se enriquece de sustancias de desecho como
urea, amoniaco y cido rico mientras que se reabsorben compuestos que necesitan ser
recuperados por el organismo como el agua, glucosa y sales minerales. Una vez que sale
de los tbulos colectores, la orina es conducida hacia los urteres y vejiga, donde es
almacenada hasta expulsarse con la miccin.
Por tanto, mediante un anlisis de orina correctamente realizado e interpretado, es
posible dilucidar desordenes estructurales (anatmicos) y funcionales (fisiolgicos) del
rin y de tracto urinario inferior, as como tambin, obtener informacin secuencial acerca
de la enfermedad, su causa, pronstico, progresin o regresin.
El examen de orina es til para detectar individuos asintomticos (sin sntomas de
enfermedad), diagnosticar al paciente sintomtico y ayuda en el monitoreo teraputico de
condiciones que afectan al sistema urinario. Adicionalmente, diversas enfermedades
sistmicas, como patologas endocrinas o metablicas, pueden ser detectadas a travs del
reconocimiento de cantidades anormales de sustancias qumicas especficas de tales
enfermedades excretadas en la orina.

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El uroanlisis bsico (rutinario) consiste de cuatro partes fundamentales: evaluacin


del espcimen, anlisis macroscpico, examen qumico y anlisis microscpico del
sedimento urinario.
El anlisis de orina se inicia con una muestra bien recolectada, por ello antes de
proceder a realizar cualquier determinacin, la muestra deber ser evaluada en trminos de
su aceptabilidad para ser procesada. Se debe considerar aspectos como: apropiada
identificacin de la misma, signos visibles de contaminacin, fuente del espcimen
(mtodo de obtencin), condiciones de transporte al laboratorio, y si fueron cumplidas por
parte del paciente todas las indicaciones para recolectar apropiadamente una muestra de
orina. A pesar de se trata de una muestra fcil de obtener se deben tomar una serie de
precauciones para obtener una muestra de orina apropiada, ya que de otra forma se corre
el riesgo de contaminarla o cometer cualquier error que altere su anlisis.
El anlisis macroscpico de una orina comprende la determinacin de las
caractersticas fsicas y organolpticas ms relevantes como: aspecto, color, olor,
densidad u osmolalidad.
Las tiras reactivas diagnsticas de inmersin son las ms utilizadas para el examen
qumico de la orina. Estas son tiras de plstico a la que se fijan almohadillas que estn
qumicamente impregnadas de buffer e indicadores qumicos. Cuando se humedece en
orina, cada almohadilla se convierte en un medio qumico en miniatura que responde a la
presencia de compuestos qumicos especficos presentes en la orina cambiando de color.
El examen qumico comprende la medicin del pH urinario y, la deteccin y
semicuantificacin de sustancias como protenas, glucosa, cetonas (cido acetoactico),
bilirrubina, nitrito, urobilingeno y hemoglobina. Adicionalmente las tiras reactivas pueden
medir la densidad pero preferiblemente esta debe ser medida con instrumentos
especficos (refractmetro o urinmetro) y otras tambin pueden detectar la presencia de
leucocitos lo cual siempre debe ser corroborado mediante el examen microscpico.
El anlisis microscpico de la orina, en conjunto con el examen qumico, ayuda al
diagnstico de enfermedades renales y del tracto urinario. A travs del microscopio, se
pueden detectar aquellos elementos celulares y no celulares de la orina que no se pueden
reconocer con reacciones qumicas. Tambin sirve como test confirmatorio en algunas
circunstancias (ej. eritrocitos, leucocitos y bacterias).
El anlisis del sedimento urinario comprende la identificacin y cuantificacin de
elementos celulares y no celulares como: clulas epiteliales provenientes del rin y tracto
urinario inferior, clulas de origen hemtico (leucocitos y eritrocitos), cilindros que
contienen o no clulas en su interior, cristales, bacterias, hongos (levaduras), parsitos (Ej.
Trichomona spp, Giardia lamblia), espermatozoides, clulas con inclusiones virales,
clulas neoplsicas, filamentos de mucina.

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En esta sesin realizaras un examen completo de orina lo cual te brindar,


como estudiante, tu primer contacto con uno de los anlisis que practicaras
rutinariamente como Licenciado en Bioanlisis dentro de un laboratorio clnico.
Aprovecha al mximo esta oportunidad.
OBJETIVOS
1. Familiarizar al estudiante con las indicaciones para recolectar una muestra de orina
parcial a objeto de practicarle un examen completo.
2. Realizar el anlisis macroscpico de una muestra de orina, observando e interpretando
las caractersticas fsicas y organolpticas de la muestra.
3. Realizar el examen qumico de una muestra de orina empleando tiras reactivas.
4. Determinar proteinuria empleando el reactivo de Robert.
5. Realizar el anlisis microscpico del sedimento urinario de una muestra.

INDICACIONES PARA RECOLECTAR UNA MUESTRA DE ORINA PARCIAL


1. Preferiblemente recolectar la primera orina de la maana, inmediatamente despus
de levantarse.
2. Realizar higiene minuciosa de los genitales con agua abundante y jabn, para ello
el hombre debe retraer el prepucio y la mujer separar los labios mayores con el pulgar
e ndice.
3. Desechar la primera porcin del chorro de orina, para permitir que la orina inicial
limpie el canal uretral.
4. Luego del paso anterior y de inmediato, recoger la muestra en un recipiente limpio
con tapa, estril y de aproximadamente 50 mL (recolector de orina).
5. Rotular el envase con el nombre del paciente, edad, fecha y hora de toma de muestra.
6. Llevar de inmediato al laboratorio para su procesamiento; si esto no es posible se
debe mantener a 4 C en el refrigerador.

La primera muestra de la maana suele ser la preferida no slo porque tiene la


mxima concentracin de todos los constituyentes, tiene un pH ms bajo, sino que es la
ms estandarizada de todas las muestras del da.

Se desecha la primera porcin del chorro de orina para evitar la presencia clulas
epiteliales, bacterias, moco y cuerpos extraos de los genitales externos y para evitar
la contaminacin de la muestra con bacterias que suelen estar presente en la uretra.

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Es altamente recomendable que la orina sea examinada dentro de las dos horas
posteriores a su recoleccin, si esto no es posible la muestra deber ser almacenada
bajo refrigeracin (2 a 8 C). El examinar la muestra despus de este tiempo es
inapropiado, pues con el tiempo ocurre lisis de los eritrocitos, degeneracin de
leucocitos y cilindros, proliferacin de bacterias, gran alcalinizacin del pH, evaporacin
de cetonas, metabolizacin de la glucosa y oxidacin de los pigmentos biliares.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Experiencia N 1. Anlisis macroscpico.
1. Mezclar la orina y colocar una alcuota en un tubo de ensayo.
2. Observar el color y percibir el olor de la orina.
3. Colocar el tubo que contiene la orina por encima de un fondo con letras y establecer
el aspecto o turbidez de la orina tomando en cuenta si se leen con facilidad o no las
letras del fondo. El aspecto tambin puede ser establecido mirando al trasluz el tubo
con la orina.
4. Medir la densidad de la orina empleando un refractmetro previamente calibrado.
Debe calibrarse el refractmetro con agua destilada, la cual debe dar un lectura de
1,000.
Reporte del anlisis macroscpico:

COLOR: debe reportarse como AMARILLO o cualquier otro color que se observe (ej.
rojo, parda, naranja, etc). No es necesario especificar si es amarillo claro u oscuro.

OLOR: debe reportarse como SUI GENERIS O CARACTERSTICO, cualquier


variacin deber ser sealada (ej. olor amoniacal).

ASPECTO: debe reportarse como TRANSPARENTE, LIGERAMENTE TURBIO O


TURBIO, considerando la facilidad con que se lean las letras que se colocan por
debajo del tubo donde se examina la orina y tambin si a al trasluz se observan
pocas o muchas partculas en suspensin.
Experiencia N 2. Examen Qumico.
1. Retirar una sola tira reactiva del frasco contenedor y taparlo inmediatamente. Sumergir
completamente todas las almohadillas de la tira en la orina y retirarla inmediatamente
para evitar la disolucin de los reactivos.
2. Eliminar el exceso de orina deslizando el borde la tira sobre un papel secante.

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Mantener la tira en posicin horizontal para evitar la mezcla de las sustancias qumicas
entre las almohadillas o la contaminacin de las manos con orina.
3. Comparar cuidadosamente los colores formados en las almohadillas de la tira con los
correspondientes bloques de color ubicados en la etiqueta del frasco contenedor para
determinar la presencia de las sustancias que se detectan con la tira. Todas las reas
reactivas deben leerse dentro del minuto despus de sumergida la tira.
Reporte del examen qumico:
La comparacin de colores permitir reportar los resultados de la siguiente manera:

pH: resultado numrico.


PROTENAS,

GLUCOSA,
CETONA,
UROBILINGENO, BILIRRUBINA y
HEMOGLOBINA: deben reportarse como NEGATIVO o POSITIVO, en este ltimo
caso tambin debe indicarse la semicuantificacin a travs del reporte en cruces,
segn la intensidad del color (mientras ms intenso sea el color observado mayor
ser el nmero de cruces y viceversa).

NITRITO: debe reportarse como NEGATIVO o POSITIVO.


Nota: si se utiliza una tira que mide densidad y leucocitos, estos resultados no deben
reportarse ya que la primera se mide por un refractmetro y el segundo por anlisis
microscpico, los cuales son mtodos ms seguros para estos.
Experiencia N 3. Determinacin de Proteinuria empleando el reactivo de Robert.
El color de ciertos indicadores de pH se altera en presencia de protenas, este
fenmeno se llama error proteico de los indicadores de pH y ha sido ingeniosamente
aprovechado en las tiras reactivas para detectar las protenas en la orina. Sin embargo,
esta reaccin no es totalmente confiable ya que pueden reaccionar compuestos de
amonios presentes en el momento de recolectar la muestra dando un falso positivo.
Tambin se pueden generar falsos negativos ya que las tiras reactivas no reaccionan con
protenas diferentes a la albmina presentes en la muestra de orina como la hemoglobina,
mioglobina, protena de Bence Jones y otras globulinas.
Dado que la proteinuria tiene serias implicaciones clnicas, estos falsos resultados
deben evitarse en todos los casos. Para ello es necesario verificar la presencia de
protenas en toda orina con tcnicas que son sensibles a todas las protenas y que se
fundamentan en la precipitacin irreversible de las mismas con reactivos qumicos como el
reactivo de Robert.

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Procedimiento
1. Dispensar en un tubo de centrifuga 10 mL de orina y centrifugar a 3.000 rpm por 5
min.
2. Dispensar 1 mL de reactivo de Robert en un tubo de ensayo 13x100.
3. Aadir lentamente por las paredes del tubo con ayuda de una pipeta Pasteur un
volumen igual de sobrenadante. Cuide de que los lquidos no se mezclen y de que se
forme una interfase visible entre los mismos.
4. Llevar la preparacin contra un fondo negro. La evidencia de un anillo blanco en la
interfase confirma la presencia de protena, lo cual en este caso debe reportarse
como POSITIVO graduado en ligeras trazas, +, ++, +++ de acuerdo al espesor o
grosor del anillo observado.
Nota: la prueba con el reactivo de Robert se considera como un test confirmatorio, por lo
que el reporte de las protenas en el examen qumico depender exclusivamente de lo
evidenciado con el reactivo de Robert; el resultado de la tira de inmersin solo se tomara
como una orientacin (no definitivo).
Experiencia N 3. Anlisis Microscpico.
1. Descartar el sobrenadante que rest de la experiencia anterior cuidando de no perder el
sedimento.
2. Agitar el tubo de centrfuga hasta lograr homogenizar perfectamente el sedimento.
3. Colocar una gota del sedimento en una lmina porta-objeto, cubrir con un
cubreobjeto y observar al microscopio.
4. Enfocando con el objetivo de 10x, visualizar la mayor cantidad de campos para hacer
un reconocimiento preliminar del sedimento urinario; se debe verificar si existe
presencia o no de cilindros (se acumulan en los bordes del cubreobjeto), en caso de
existir, contar el nmero de stos en cada campo microscpico (observar al menos 10
campos). Luego enfocar con el objetivo de 40x (o 45x) para identificar el tipo de cilindro
observado.
5. Enfocando el objetivo de 40x (o 45x) y observando al menos 10 campos:
Identificar y contar el nmero de hemates, leucocitos, clulas
espermatozoides observados en cada campo microscpico.

epiteliales,

Identificar la presencia y estimar la cantidad de bacterias, cristales y filamentos


mucina observados en cada campo microscpico.
Identifique la presencia de parsitos y levaduras en cada campo microscpico.

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Nota: la identificacin, estimacin de la cantidad y recuento (de ser necesario) de los


elementos del sedimento debe realizarse en cada uno de los campos observados.
Reporte del sedimento urinario:
De acuerdo al elemento observado, el reporte puede expresarse de tres modos:
1. Rango promedio del nmero de elementos visualizados por campo
microscpico. Los rangos a reportar no deben ser excesivamente amplios (Ej.: 02/campo, 2- 5/campo, 5-10/campo) y siempre deben representar lo observado en la
mayora de los campos. De este modo debe reportarse los siguientes
elementos: leucocitos, hemates, cilindros (indicando el tipo de cilindro observado),
clulas epiteliales planas, clulas epiteliales redondas, espermatozoides (slo
deben reportarse en hombres mayores de 40 aos, si ese no es el caso, la
muestra se considera CONTAMINADA, no debe reportarse el resultado del
examen de orina y se debe repetir la muestra).
2. Cantidad del elemento visualizado expresada como escasa, moderada
abundante. De este modo debe reportarse los siguientes elementos: bacterias,
cristales (indicando el tipo de cristal observado), filamentos de mucina.
3. Expresando solamente que el elemento est presente en la muestra. De este modo
debe reportarse los siguientes elementos: parsitos y levaduras.
Descripcin microscpica breve de algunos elementos del sedimento urinario:

Hemates o glbulos rojos: aparecen como formas circulares, ocasionalmente


hay un aspecto evidente de disco bicncavo (hemates intactos) o pueden
observarse como simples aros sin contenido interior (hemates lisados); no
tienen ncleos y refractan un poco la luz.

Leucocitos o glbulos blancos: son ms grandes que los rojos y contienen uno
o ms ncleos; muy a menudo su citoplasma es punteado y sus lmites pueden
ser ligeramente irregulares.

Clulas epiteliales: son varias veces ms grandes que los leucocitos y


hemates; tienen un solo ncleo, un citoplasma claro y segn su origen diferentes
formas. Las clulas epiteliales escamosas son las de mayor tamao, tienen un
citoplasma abundante y aplanado con ncleos pequeos; las clulas de
transicin de la vejiga son redondas u ovales, poseen un ncleo central,
bordes engrosados y parecen tener un proyeccin; y las clulas de la pelvis y

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de los tbulos renales son ms pequeas y redondas o polidricas con ncleos


esfricos parecidos a los leucocitos pero de mayor tamao.

Microorganismos: las bacterias se ven como pequeos bacilos o cocos; las


levaduras tienden a ser ovoideas, un poco ms pequeas que los hemates, de
color verdoso y a menudo muestran gemaciones.

Cilindros: de forma alargada, varan de tamao de acuerdo a su origen, pueden


ser delgados o anchos. Su apariencia microscpica depende del tipo de cilindro del
cual se trate, clasificndose en: hialinos, epiteliales, granulosos (finos o gruesos),
hemticos, leucocitarios, creos, grasos.

Cristales: su morfologa microscpica es especfica de cada tipo de cristal. En


la orina pueden presentarse como verdaderas formas cristalinas o como material
amorfo (cristales amorfos). Los cristales ms comnmente encontrados en
orinas cidas normales son de: uratos amorfos, urato de sodio, cido rico, y
oxalato de calcio. Los cristales ms comnmente encontrados en orinas
alcalinas normales son de: fosfato amorfo, fosfato triple de amonio y magnesio,
fosfato de calcio, carbonato de calcio y biurato de amonio.

Filamentos de Mucina: representa el moco que recubre las vas urinarias, se


presenta como filamentos de materia amorfa poco refringente y sin color.
En la siguiente pgina web se pueden encontrar una gran variedad de ilustraciones
de los elementos antes descritos: http://www.scribd.com/doc/2547300/Sedimentourinario
Descripcin breve de algunos trminos:

Bacteriuria: presencia anormalmente elevada de bacterias en la orina.


Bilirrubinuria: presencia de bilirrubina en la orina.
Clulas epiteliales escamosas: clulas epiteliales planas que pueden aparecer
en la orina y que provienen de porcin distal del tracto urinario o del tracto
genital femenino.

Cetonuria: presencia de cuerpos cetnicos, que son productos intermedios del


metabolismo de las grasas.

Cilindros: estructura cilndrica moldeada constituida por aglutinacin de clulas y


precipitacin de protenas en el lumen del tbulo contorneado distal o tbulo
colector del nefrn, que aparece en el sedimento urinario.

Cilindruria: presencia de cilindros en la orina.


Cristales: formas amorfas o cristalinas de las sustancias orgnicas o minerales
excretadas en la orina. Diversos componentes qumicos se saturan o sufren

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alteracin de su solubilidad, precipitando como cristales cuando la orina se refrigera


o se mantiene a temperatura ambiente por varias horas. Los cristales generalmente
no estn presentes en la orina recin evacuada y, en general, su formacin debe
considerarse un artificio del sistema de recoleccin. Aunque la mayora de los
cristales en la orina son de limitada significacin clnica, su correcta identificacin
es esencial para reconocer aquellos pocos que son asociados a condiciones
patolgicas.

Cristales amorfos: cristales de forma no bien definida, generalmente de


fosfato (orinas alcalinas) de uratos (orinas cidas).

Cristaluria: presencia de cristales en orina.


Densidad urinaria: su valor normal en la orina es de 1005-1030 g/L (1,005-1,030
g/mL).

Glucosuria: presencia de glucosa en la orina.


Hematuria: presencia anormalmente elevada de hemates en la orina.
Hemoglobinuria: presencia de hemoglobina libre en la orina.
Leucocituria: presencia elevada de leucocitos en la orina.
pH urinario: mide la concentracin de hidrogeniones libres en orina. Su valor
normal en orina vara entre 4,6 y 8.

Proteinuria: presencia de protena en la orina.


INVESTIGUE
1) Defina densidad absoluta y relativa e indique sus unidades.
2) Mtodos que se emplean en el laboratorio clnico para medir la densidad de la orina.
Establezca si miden densidad absoluta o relativa.
3) Qu funcin renal se relaciona directamente con la densidad de una muestra de
orina?. Explique.
4) Cmo est compuesto el reactivo de Robert?
3) Cmo se puede reconocer la presencia de infecciones en el tracto urinario?
4) Qu significa la presencia de: a) Clulas epiteliales tubulares del rin. b) cilindro
granuloso en una muestra de orina?.
5) Discuta si tiene valor diagnstico el pH urinario medido despus de 2 horas.

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REPORTE DE LABORATORIO
Nombre del Paciente:
Fecha:

Edad:
EXAMEN DE ORINA COMPLETO

EXAMEN FSICO
Aspecto:

Color:

Olor:

Densidad:

EXAMEN QUMICO
pH:

Nitrito:

Protenas:

Glucosa:

Cetonas:

Urobilingeno:

Bilirrubina:

Hemoglobina:

ANLISIS MICROSCPICO DEL SEDIMENTO URINARIO


Leucocitos:
Clulas epiteliales redondas:
Cristales:
Cilindros:
Otros:

Bacterias:

Clulas epiteliales planas:


Hemates:

Filamentos de Mucina:

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