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VICERRECTORADO ACADMICO
DIRECCIN DE NIVELACIN Y ADMISIN
Nombres: Andrea Yorely Bastidas Rodrguez.
Curso: VO2.
Fecha: Machala, 15 de junio del 2016.
Gua: Freddy Alberto Pereira Guanuche.
Estructura del informe de una prctica de biologa.
1. Portada.
Nombre de la institucin (logo).
Ttulo de la prctica realizada.
Nombre del (los) estudiantes que presentan el informe.
Nombre del gua que dirige el curso.
rea, ciudad, fecha y ao.
2. Objetivo General.
2.1 Objetivos especficos.
3. Materiales.
4. Marco terico.
5. Proceso.
6. Clculos y resultados.
7. Observaciones.
8. Anexos.
9. Conclusiones.
10. Recomendaciones.
Firma de responsable
VICERRECTORADO ACADMICO
DIRECCIN DE NIVELACIN Y ADMISIN
Nombres: Andrea Yorely Bastidas Rodrguez.
Curso: VO2.
Fecha: Machala, 15 de junio del 2016.
Gua: Freddy Alberto Pereira Guanuche.
Se deben utilizar mascarillas descartables cuando exista riesgo de produccin de aerosoles (mezcla de
partculas en medio liquido) o polvos, durante operaciones de pesada de sustancias toxicas o
materia viable, utilizando productos probadamente efectivos contra los agentes con que se trabaja.
El derrame o caida de muestras contaminadas, diluciones y medios sombrados o inoculados ser
informada al docente responsable de inmediato. Se proceder a tratar el rea afectada con la solucin
desinfectante que corresponda, la cual se dejar actuar y se recoger con papel absorbente que ser luego
interruptores, enchufes, llaves de gas o de agua, etc., puede acarrear consecuencias muy graves.
No debes de trabajar con prendas que cuelguen sobre la mesa (collares, bufandas, corbatas, etc.) Si llevas
el pelo largo, conviene recogerlo. Con todo ello evitars arrastrar y volcar objetos o quemarte con los
mecheros. Coloca tus libros y otras pertenencias en los lugares adecuados, de modo que no dificulten el
mientras no se estn utilizando. Aparte del ahorro que supone, se pueden evitar accidentes.
Lava tus manos antes de salir y espera a que el profesor te indique que puedes abandonar el laboratorio.
Antes de utilizar un compuesto hay que fijarse en la etiqueta para asegurarse de que es el que se necesita y
disponga en el Centro.
Cuando se quiera diluir un cido, nunca se debe echar agua sobre ellos; siempre al contrario: cido sobre
agua.
Cualquier material de vidrio no debe enfriarse bruscamente justo despus de haberlos calentado con el fin
de evitar roturas.
Bibliografa:
Normas que se deben cumplir en un laboratorio de biologa (2012), recuperado el 14 de junio de 2016 de,
http://biologiapuntocom.blogspot.com/2012/05/normas-de-uso-del-laboratorio-de.html.
VICERRECTORADO ACADMICO
DIRECCIN DE NIVELACIN Y ADMISIN
Nombres: Andrea Yorely Bastidas Rodrguez.
Curso: VO2.
Fecha: Machala, 15 de junio del 2016.
Gua: Freddy Alberto Pereira Guanuche.
Funcin
Tipo de material
3.- Fiola
4.-Frasco de reactivo
Permite: guardar sustancias para almacenarlas los hay
mbar y transparentes los de color mbar se utilizan para
guardar sustancias que son alteradas por la accin de
Material de vidrio.
la luz del sol, los de color transparente se utilizan para
guardar sustancias que no son afectadas por la luz solar
De vidrio.
De vidrio.
De vidrio.
7.-Probeta milimetrada
8.- Pipeta
Es un instrumento volumtrico
de laboratorio que permite medir la alcuota de lquido
con bastante precisin.
De vidrio
9.-Pera de decantacin
De vidrio.
De vidrio o metal.
De metal.
13.-Rejilla de asbesto
Es la encargada de repartir la temperatura de manera
uniforme, cuando se calienta con un mechero. Para esto se
De metal.
usa un trpode de laboratorio, ya que acta como un
sostenedor a la hora de experimentar.
14.-Cucharilla de combustin
De metal.
15.-Pinza de madera
De madera.
De vidrio.
17.- Matraz
Recipiente de cristal donde se mezclan las soluciones
qumicas, generalmente de forma esfrica y con un cuello
De vidrio.
recto y estrecho, que se usa para contener lquidos; se usa
en los laboratorios.
18.-Luna de reloj
Es un instrumento de laboratorio de qumica que se usa
para pesar sustancias solidas o desecar pequeas
cantidades en disolucin.
De porcelana.
De vidrio.
De porcelana.
19.-Portaobjetos
20.-Crisoles
De porcelana o vidrio.
23.-Gradilla
24.-Pinza
25.-Escobillas de cerdas
26.-Tripode
De metal.
De vidrio.
1. Nos da informacin sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra. Esto podemos lograrlo midiendo la
absorbancia (Abs) a distintos largos de onda (l) y graficar estos valores en funcin del largo de onda, formando
un espectrograma. Como cada sustancia tiene unas propiedades espectrales nicas, distintas sustancias producen
distintos espectrogramas. Esto se debe a que cada sustancia tiene un arreglo de tomos tridimensional particular
que hace que cada sustancia tenga caractersticas nicas. Al ser expuestos a la luz del espectrofotmetro, algunos
electrones de los tomos que forman las molculas absorben energa entrando a un estado alterado. Al recuperar
su estado original, la energa absorbida es emitida en forma de fotones. Esa emisin de fotones es distinta para
cada sustancia, generando un patrn particular, que vara con el largo de onda usado. Dependiendo del largo de
onda, ser la cantidad de energa absorbida por una sustancia, lo que logra generar un espectro particular al
graficar Abs vs l
2.
Nos dice cuanta cantidad de la sustancia que nos interesa est presente en la muestra. La concentracin es
Las cubetas son unos viales de plstico transparente o cuarzo que dejan pasar la luz. Los mejores para trabajos
de investigacin son las de cuarzo porque su interferencia al paso de la luz es mnimo. Son ms costosas
inicialmente pero bien tratadas pueden ser reusables. Las de plstico vienen con distintas caractersticas. Por lo
general son desechables, aunque pueden reusarse. El tipo de cubeta plstica a usar depende del rango de luz en el
que se van a analizar las muestras. Vienen unas para luz visible, que son las ms econmicas, y otras para el
rango de visible a ultravioleta. Estas son ms verstiles.
Ambos tipos de cubetas deben manejarse con cuidado para evitar trallazos sobre la superficie por donde pasa la
luz. Si la cubeta est rallada, los rayos de luz que incidan en la zona se difractan y no pasan por la muestra, por lo
que puede dar lecturas de absorbancia errneas. Esto es especialmente crtico cuando queremos determinar
concentracin en una muestra. Antes de tomar una lectura, debemos observar que la cubeta no tenga trallazos ni
est sucia. Si se ven marcas de polvo u otro tipo de sucio la cubeta debe limpiarse con papel tis (Kimwipes). Si
la cubeta se manipula mucho, debemos sostenerla usando papel tis para evitar pegarle los aceites que
normalmente tenemos en las manos. No debemos usar ningn otro tipo de papel para limpiar las cubetas, puesto
que pueden soltar fibras que pudieran caer en la muestra o rallar la superficie.
Las cubetas vienen en distintos volmenes, desde 1 ml hasta 4 ml. El volumen a escoger depende de la cantidad
de muestra disponible. Si la muestra disponible es poca o difcil de conseguir, lo mejor es usar una cubeta de
menor volumen para perder la menor cantidad posible de la muestra. Por lo general, la muestra utilizada para
hacer la lectura se pierde, sobre todo si es una sustancia bien sensitiva, como el ADN.
Pipetas y pipeteadores
Usamos las pipetas para medir volmenes de lquidos de forma ms precisa que con una probeta. Y son ms
verstiles, sobre todo al manejar volmenes pequeos.
Las pipetas de bulbo son tiles para medir volmenes que no requieren de mucha precisin. Antes se usaban
pipetas "Pasteur" de cristal a las que se les editaba un bulbo de goma que se usaba para succionar el lquido.
Ahora vienen en plstico desechable de una sola pieza y se consiguen con o sin calibracin.
Las pipetas volumtricas vienen en distintos tamaos, desde 1 ml hasta 200 ml, y con distintas formas, de
acuerdo al uso que se les d. Tambin vienen en distintos materiales como boro silicato y plstico, desechables o
reusables, estriles o sin esterilizar. Algunas pueden ser esterilizadas en horno o autoclave. Para llenarlas se
pueden usar bulbos de caucho, bombas manuales o elctricas, o equipos de llenado. Las bombas elctricas y los
equipos de llenado son muy tiles si se est trabajando con mltiples muestras, pues minimizan la fatiga del
tcnico.
Los micros pipetas son extremadamente tiles en los laboratorios de biotecnologa. Estas permiten medir con
precisin volmenes tan pequeos como 0.1 l hasta 1 ml. Estas requieren de unos pipeteadores especiales que
deben der tratados con mucho cuidado para evitar que se descalabren. Los pipeteadores vienen de distintos tipos.
La mayora pueden servir muestras individuales. Pero vienen los que pueden servir muestras mltiples, por medio
de multicanales: pipetas que sirven 8 o 12 muestras a la vez. Estas son muy tiles al hacer pruebas de ELISA,
donde se practican diluciones seriadas mltiples, o para preparar reacciones de varias muestras distintas a la vez.
Se usan en conjunto con platos de fosas mltiples.
Las puntas de micro pipetas vienen con distintas caractersticas de acuerdo al uso que se les d. Vienen con punta
ancha, estrecha o aplanada, con o sin filtros contra aerosoles, estriles o sin esterilizar y pueden ser esterilizadas
en autoclave.
Aparatos de electroforesis
Estos son unas cmaras que contienen un circuito elctrico expuesto a un lquido electroltico, llamado
amortiguador. El aparato se usa para separar mezclas de molculas grandes de acuerdo a su carga y/o su tamao.
La tcnica consiste en inocular la muestra en un medio semislido, la fase estacionaria, que se somete a un campo
elctrico, en una cmara donde en un extremo se encuentra un filamento que acta como polo positivo, y en el
extremo opuesto hay otro filamento formando el polo negativo. Las molculas con cargas netas positivas se
movern hacia el polo negativo y las de carga negativa se irn hacia el polo positivo. Luego de la muestra ser
tratada apropiadamente dependiendo del tipo de electroforesis, las molculas que viajen hacia uno de los polos se
separarn por tamao, viajando ms en la fase estacionaria las molculas ms pequeas. El tipo y concentracin
de la fase estacionaria depender del tipo de molculas que nos interesa correr.
Centrfugas
Son muy tiles para precipitar clulas y molculas. Vienen en distintos tamaos y con distintas capacidades en el
manejo de muestras. Este aparato somete la muestra a fuerzas de aceleracin que obligan a las molculas a
concentrarse en el fondo del envase utilizado, separndolas del medio en que se encuentran. Incluso, bajo
ciertos mtodos se puede generar un gradiente de concentraciones dentro del mismo tubo, separando distintas
molculas a distintos niveles o fases dentro del tubo. Con ayuda de jeringas, se puede perforar la pared del tubo y
extraer del mismo slo aquella fase donde se encuentren las molculas de inters.
Entre las centrfugas que usaremos durante el semestre estn la centrfuga refrigerada, que nos va a permitir
separar clulas de los medios de cultivo. El rotor de esta centrifuga puede sostener tubos de 50 ml, pero puede ser
intercambiado por rotores que sostienen botellas de cultivo.
El micro centrfugo es una versin ms pequea de la descrita anteriormente. Es compacta, se coloca sobre la
mesa y procesa muestras de hasta 2 ml. Es muy til para precipitar ADN y otras sustancias que se trabajan en
volmenes pequeos.
Equipo de cromatografa
Haremos varias cromatografas al final del semestre. En una cromatografa buscamos separar uno o varios tipos
de molculas, relativamente pequeas, de una mezcla de sustancias o para purificar muestras. Existen varios tipos
de cromatografas. La que se utilice depender del tipo de molculas que buscamos aislar.
La cromatografa de capa fina es ideal para separar muestras pequeas. Presenta dos componentes: una fase
estacionaria y una fase mvil. La fase estacionaria consiste de una placa de vidrio o celulosa impregnada con
polvo de silicato (vidrio molido extremadamente fino). Las muestras se colocan a un centmetro del borde
inferior y se coloca en un tanque de revelado que contiene algn tipo de solvente en el fondo. La placa se coloca
de forma que el solvente no toque directamente las muestras. La fase mvil consiste del solvente. El solvente a
usarse depender de las propiedades qumicas de los componentes de la mezcla.
El solvente sube por capilaridad por la superficie impregnada con las muestras. Los componentes de la mezcla
comenzarn a migrar, segn el grado de afinidad que tengan por el solvente y/o la fase estacionaria. Mientras ms
afn sea algn componente a la fase mvil, ms rpido se mover y ms lejos llegar en su migracin sobre la
fase estacionaria.
En la cromatografa de columna se pueden separar volmenes ms grandes de muestras. Tambin tiene una fase
estacionaria que consiste de un tubo conteniendo un material que separa la mezcla analizada. Los amortiguadores
que se usan para lavar la columna constituyen la fase mvil.
El empaque de las columnas puede separar molculas por su tamao, por sus interacciones inicas o por
interacciones hidrofobias. El tipo de empaque a usar depender de las propiedades de la muestra.
Existen otros tipos de cromatografa ms sofisticados, que se usan en laboratorios de investigacin y
en procesos de manufactura en varios tipos de industrias. Nosotros nos limitaremos a los descritos anteriormente.
Microscopio
Es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeos para ser vistos a simple vista. El
tipo ms comn y el primero que se invent es el microscopio ptico. Se trata de un instrumento ptico que
contiene dos o ms lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refraccin.
La ciencia que investiga los objetos pequeos utilizando este instrumento se llama microscopa.
Reactivos:
Sustancias
Lugol
Hematoxilina
Suero fisiolgico
Bibliografa:
Materiales e instrumentos de laboratorio (2012), recuperado el 14 de junio de 2016 de,
http://www.monografias.com/trabajos93/materiales-e-instrumentos-laboratorio/materiales-e-instrumentoslaboratorio2.shtml.
VICERRECTORADO ACADMICO
DIRECCIN DE NIVELACIN Y ADMISIN
Nombres: Andrea Yorely Bastidas Rodrguez.
Curso: VO2.
Fecha: Machala, 15 de junio del 2016.
Gua: Freddy Alberto Pereira Guanuche.
Fsicos:
Mtodos fsicos: estos mtodos son aquellos en los cuales la mano del hombre no interviene para que estos se
produzcan, un caso comn es el de sedimentacin, si t depositas una piedra en un lquido el slido rpidamente
se sumergira por el efecto de la gravedad.
Mecnicos:
Decantacin: Se aplica para separar una mezcla de lquidos o un slido insoluble de un lquido, en el
caso de un slido se deja depositado por sedimentacin en el fondo del recipiente y luego el lquido es
retirado lentamente hacia otro recipiente quedando el slido depositado en el fondo del recipiente, ahora
bien cuando los lquidos no miscibles estos lquidos al mezclarse tienen la propiedad de ir separndose en
el recipiente, al comienzo quedan como un sistema homogneo pero luego al separarse se puede sacar al
lquido que quede en la parte superior, quedando el otro en el recipiente de origen.
Filtracin: es aplicable para separar un slido insoluble de un lquido se emplea una maya porosa tipo
colador, la mezcla se vierte sobre la maya quedando atrapada en ella el slido y en el otro recipiente se
depositara el lquido, de ese modo quedan separados los dos componentes. Para no confundirnos de
mtodos, las aplicaciones a travs de materiales porosos como el papel filtro, algodn o arena se separan
el slido que se encuentra suspendido en un lquido. De esta manera estos materiales son quienes
permiten que solamente pase el lquido, reteniendo al slido.
Evaporacin: Aqu un slido soluble y un lquido por medio de temperatura de ebullicin la cual
evaporara completamente y luego por condensacin se recuperara el lquido mientras que el slido
quedara a modo de cristales pegado en las paredes del recipiente de donde podra ser recuperado.
Destilacin: Las soluciones (sistemas homogneos) o mezclas de lquidos miscibles pueden separarse por
cambios de estado Congelacin, Evaporacin y Condensacin para separar los componentes de una
solucin se emplea con frecuencia la destilacin; tambin se usa para purificar las sustancias lquidas. El
agua se destila con el fin de eliminar las sales contenidas en sta. La destilacin se basa en la diferencia de
los puntos de ebullicin de sus componentes. Se calienta la solucin y se concentran los vapores, la
sustancia que tiene menor punto de ebullicin (ms voltil9 se convierta en vapor antes que la otra, sta
primera sustancia se hace pasar al condensador para llevarla a estado lquido.
Sublimacin: Es para separar una mezcla de dos slidos con una condicin uno de ellos podra
sublimarse, a esta mezcla se aplica una cantidad determinada de calor determinada produciendo los gases
correspondientes a los elementos, estos vuelven a recuperarse en forma de slidos al chocar sobre una
superficie fra como una porcelana que contenga agua fra, de este modo los gases al condensarse se
depositan en la base de la pieza de porcelana en forma de cristales.
Centrifugacin: Aqu como tantas ocasiones pondremos de ejemplo al talco como slido, para acelerar
su sedimentacin se aplica una fuerza centrfuga la cual acelera dicha sedimentacin, el movimiento
gravitacional circular por su fuerza se logra la separacin.
Cristalizacin: La cristalizacin es una operacin de transferencia de materia en la que se produce la
formacin de un slido (cristal o precipitado) a partir de una fase homognea (soluto en disolucin o en
un fundido). Destaca sobre otros procesos de separacin por su potencial para combinar purificacin y
produccin de partculas en un solo proceso. Comparado con otras operaciones de separacin la
cristalizacin en disolucin presenta varias ventajas.
Cromatografa: Tcnica que se usa para permitir separar aquellos componentes de una mezcla, para ello
se hace pasar a travs de un absorbente (que se adhiere a una superficie). Estos componentes se separan
cuando estos componentes manifiestan sus diferentes afinidades por el filtro de papel o bien el disolvente
que acciona. Nombremos algunos ejemplos que se pueden usar para este mtodo, los productos que se
usan como medio de absorcin pueden ser, arena, papel, tiza, filtro, etc.
Decantacin: La decantacin es un proceso fsico de separacin de mezclas, especial para separar
mezclas heterogneas, estas pueden ser exclusivamente lquido lquido o slido lquido. Esta tcnica
se basa en la diferencia de densidades entre los dos componentes, que hace que dejndolos en reposo se
separen quedando el ms denso arriba y el ms fluido abajo. Para realizar esta tcnica se utiliza como
instrumento principal un embudo de decantacin, que es de cristal y est provisto de una llave en la parte
inferior. Como se realiza su extraccin en esta tcnica de separacin, se basa en las diferentes afinidades
de los componentes de las mezclas en dos solventes distintos y no solubles entre s. Es una tcnica muy
til para aislar cada sustancia de sus fuentes naturales o de una mezcla de reaccin. La tcnica de
extraccin simple es la ms comn y utiliza un embudo especial llamado embudo de decantacin.
Tamizado: El tamizado es un mtodo de separacin de los ms sencillos, consiste en hacer pasar una
mezcla de cualquier tipo de slidos, de distinto tamao, a travs del tamiz. Los granos ms pequeos
atraviesan el tamiz y los ms grandes son retenidos, de esta forma podrs separa dos o ms slidos,
dependiendo tanto de dichos slidos como el tamizador que utilizamos.
Centrifugacin: Es un procedimiento que se utiliza cuando se quiere acelerar la sedimentacin. Se coloca
la mezcla dentro de una centrifuga, la cual tiene un movimiento de rotacin constante y rpido,
logrndose que las partculas de mayor densidad, se vayan al fondo y las ms livianas queden en la parte
superior. Un ejemplo lo observamos en las lavadoras automticas o semiautomticas. Hay una seccin del
ciclo que se refiere a secado en el cual el tambor de la lavadora gira a cierta velocidad, de manera que las
partculas de agua adheridas a la ropa durante su lavado, salen expedidas por los orificios del tambor.
Bibliografa:
Mtodos de separacin de la mezcla (2013), Recuperado el 14 de junio de 2016 de,
http://es.slideshare.net/konirivas/metodos-de-separacion-de-mezclas-29134090.
VICERRECTORADO ACADMICO
DIRECCIN DE NIVELACIN Y ADMISIN
Nombres: Andrea Yorely Bastidas Rodrguez.
Curso: VO2.
Fecha: Machala, 15 de junio del 2016.
Gua: Freddy Alberto Pereira Guanuche.
OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Ampla la imagen del objetivo.
OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparacin. Ampla la imagen de sta.
CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparacin.
DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador.
FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
Sistema mecnico
SOPORTE: Mantiene la parte ptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo.
PLATINA: Lugar donde se deposita la preparacin.
CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular, binocular.
REVLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los objetivos.
TORNILLOS DE ENFOQUE: Macromtrico que aproxima el enfoque y micromtrico que consigue el
enfoque correcto.
Uso:
Colocar el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y bajar la platina completamente. Si el microscopio
se recogi correctamente en el uso anterior, ya debera estar en esas condiciones.
Colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas metlicas.
Comenzar la observacin con el objetivo de 4x (ya est en posicin) o colocar el de 10 aumentos (10x) si la
preparacin es de bacterias.
Para realizar el enfoque:
Acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el tornillo macromtrico. Esto debe hacerse
mirando directamente y no a travs del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparacin
pudindose daar alguno de ellos o ambos.
Mirando, ahora s, a travs de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparacin con el
macromtrico y, cuando se observe algo ntida la muestra, girar el micromtrico hasta obtener un enfoque fino.
Pasar al siguiente objetivo. La imagen debera estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el
micromtrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdi por completo la imagen, es
preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y repetir la operacin desde el paso 3. El objetivo de 40x
enfoca a muy poca distancia de la preparacin y por ello es fcil que ocurran dos tipos de percances: incrustarlo
en la preparacin si se descuidan las precauciones anteriores y mancharlo con aceite de inmersin si se observa
una preparacin que ya se enfoc con el objetivo de inmersin.
Empleo del objetivo de inmersin:
Bajar totalmente la platina.
Subir totalmente el condensador para ver claramente el crculo de luz que nos indica la zona que se va a
visualizar y donde habr que echar el aceite.
Girar el revlver hacia el objetivo de inmersin dejndolo a medio camino entre ste y el de x40.
Colocar una gota mnima de aceite de inmersin sobre el crculo de luz.
Terminar de girar suavemente el revlver hasta la posicin del objetivo de inmersin.
Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la lente toca la gota de aceite. En ese
momento se nota como si la gota ascendiera y se adosara a la lente.
Enfocar cuidadosamente con el micromtrico. La distancia de trabajo entre el objetivo de inmersin y la
preparacin es mnima, aun menor que con el de 40x por lo que el riesgo de accidente es muy grande.
Una vez se haya puesto aceite de inmersin sobre la preparacin, ya no se puede volver a usar el objetivo 40x
sobre esa zona, pues se manchara de aceite. Por tanto, si desea enfocar otro campo, hay que bajar la platina y
repetir la operacin desde el paso 3.
Una vez finalizada la observacin de la preparacin se baja la platina y se coloca el objetivo de menor aumento
girando el revlver. En este momento ya se puede retirar la preparacin de la platina. Nunca se debe retirar con el
objetivo de inmersin en posicin de observacin.
Limpiar el objetivo de inmersin con cuidado empleando un papel especial para ptica. Comprobar tambin que
el objetivo 40x est perfectamente limpio.
Bibliografa:
Partes, manejo y uso del microscopio (2013), recuperado el 14 de junio de 2016 de, http://www.eumed.net/librosgratis/ciencia/2013/22/microscopio.html