1. Cul es el producto final de la replicacin?

El producto de la duplicacin o replicacin es una molcula de ADN que

posee la misma informacin gentica que la molcula que le dio origen.
2. Qu significa replicacin semiconservativa y bidireccional en
procariotas?
En la replicacin semiconservativa se originan dos molculas de ADN, cada
una de ellas compuesta de una hebra del ADN original y de una hebra
complementaria nueva. En otras palabras el ADN se forma de una hebra
vieja y otra nueva. Es decir que las hebras existentes sirven de molde
complementario a las nuevas.
La replicacin se lleva a cabo bidireccionalmente, es decir, a partir de un
punto se sintetizan las dos cadenas en ambas direcciones. Esto ocurre en la
mayora de los organismos, pero algunos plsmidos y virus tienen
crecimiento unidireccional de cadenas simples a partir de uno o dos puntos
de origen.
No obstante, la replicacin se puede considerar, de forma general,
bidireccional desde puntos fijos. El genoma es muy grande y la replicacin
se lleva a cabo a partir de unos puntos fijos llamados orgenes de
replicacin.
La cantidad de DNA que se puede sintetizar a partir de un nico origen de
replicacin se denomina replicn. El genoma bacteriano es un replicn nico
circular. En organismos eucariticos, la replicacin del ADN se inicia en
muchos sitios diferentes a la vez, es decir, hay varios replicones.
3. Responda: Qu tipo de clulas utilizaron?
Se realiz un cultivo de E. coli durante varias generaciones en un
medio con 15N.
3.1
El primer medio que tena como fuente de nitrgeno?
- Nitrgeno 15
3.2

Qu es

N 15 ?

El nitrgeno-15 es un istopo estable y no radiactivo del

nitrgeno. El 15N se emplea a menudo en investigacin mdica y
en agricultura. Tambin se emplea habitualmente en
espectroscopia de resonancia magntica nuclear (NMR) porque, a
diferencia del istopo ms abundante 14N, posee un espn de ,
lo cual simplifica su observacin mediante la tcnica de NMR. En
investigacin, se puede obtener protenas o cidos nucleicos
marcados isotpicamente con 15N, cultivando muestras biolgicas
en medios conteniendo 15N como nica fuente de nitrgeno.

3.3
Qu tcnica utiliza para distinguir el ADN?
Mediante centrifugacin se logr distinguir el ADN con Nitrogeno
15 y 14 ya que el primero su peso molecular es mayor.
3.4
Hay replicacin o no de clulas?
Si existe una replicacin semiconservativa descartando las
anteriores como conservativa y dispersa
3.5
Despus de la centrifugacin que se observa?
Dos lneas la que est ms a fondo es el ADN de la bacteria que se
someti al Nitrgeno 15 y la que estas ms arriba es la del
nitrgeno 14 y cuando la bacteria estando en nitrgeno 15 se
someti a una generacin en nitrgeno 14 se nota una raya en el
centro.
3.6
Es cierto que despus de dos divisiones celulares,
las muestras mostraron dos bandas de distinta densidad y
es significativo que la replicacin es semiconservativa?
Si la razn se explica en la anterior pregunta.
4. Cuntos puntos de origen de replicacin tiene los procariontes
en que direccin va?
Hay 1 lugar de origen de replicacin que se muestra en la horquilla de
replicacin (replication fork) y que seala el avance de la copia. La
horquilla (fork) indica que se est haciendo la separacin y la replicacin
a la vez. El avance es bidireccional, lo que acorta el tiempo. En el sitio en
que empieza la replicacin se organizan las protenas en un complejo
llamado replisma. La replicacin del ADN en procariotas sucede a una
velocidad de 500 nucletidos por segundo.
5. Cmo se denomina el sitio de origen de replicacin en
procariota?
La secuencia de origen de la replicacin se conoce como oriC, tiene una
longitud de 245 pb. El origen de replicacin se compone de 4
repeticiones de una secuencia de 9 pb que une la protena de iniciacin,
el producto del gen dnaA, secuencia 5-TTATNCANA-3. A la izquierda de
estos lugares hay 3 repeticiones directas de una secuencia de
13 pb que contiene una cantidad abundante de A y T, y que por tanto,
puede desnaturalizarse con facilidad. La secuancia es 5GATCTNTTNTTTT-3, secuencias DUE. Esta secuencia contiene tambin
lugares de unin para varias protenas bsicas (HU e IHF) que facilitan
que el DNA se doble, un paso importante de la secuencia que conduce a
la iniciacin.
6. Replicacin en eucariotas, Cuntos puntos de inicio tiene y en
qu sentido se produce?

La principal diferencia de la replicacin de virus y bacterias con la

replicacin de eucariontes radica en que los eucariontes poseen muchos
orgenes de replicacin, probablemente debido a la enorme cantidad de
ADN que poseen y a que su material hereditario en la inmensa mayora
de los casos est repartido en varias molculas de ADN distintas o varios
cromosomas. Por tanto, los eucariontes tienen en cada cromosoma
muchos orgenes de replicacin, y como consecuencia, muchos
replicones y en sentido bidireccional.
7. Cules son las enzimas que participan en la replicacin y diga
la respectiva funcin?
En la Replicacin Semiconservativa del ADN participan las siguientes
enzimas:
- ADN Polimerasa quien hace una lectura o copia exacta de los
nucletidos de ambas cadenas del ADN cuando estas se separan para
sintetizar otra cadena complementaria.
- Helicasa, participa en la ruptura de los puentes H que unen los pares
de bases nitrogenadas complementarias ( AT/CG), luego de ello, la
misma enzima reaparece para ordenar la secuencia de los nucletidos
en la molcula de ADN hija, es decir, controla el reordenamiento de las
bases nitrogenadas complementarias en la molcula de ADN hija para
evitar alteraciones en la secuencia de las 4 letras repetidas a lo largo de
la Biomolcula del ADN ( AT/CG).
8. Funcin de los plsmidos y como es su replicacin
Los plsmidos son anillos de ADN -molculas de doble cadena con
informacin gentica que se encuentran dentro de la mayora de
bacterias. Estas estructuras circulares, que son independientes del ADN
bacteriano, contienen un conjunto de genes beneficiosos para la vida de
las bacterias.
La replicacin del ADN de los plsmidos se origina siempre en el mismo
lugar y utiliza un mecanismo denominado de crculo rodante. En el punto
de origen, sobresale una protuberancia en forma de horquilla de cabello
donde se engancha la protena RepB para iniciar la replicacin.
9. Qu son los plsmidos multicopias?
Las bacterias pueden contener plsmidos tipo unicopia o multicopia
(ms de 20). En general, los plsmidos multicopia son pequeos y a
menudo se utilizan como vehculos moleculares de donacin. Por
ejemplo, una clula de E. coli generalmente contiene 20 molculas
(copias) de plsmidos y slo una molcula del cromosoma principal.
10.
Cmo ocurre la replicacin en la cadena retardada y
porque?
La replicacin es discontinua porque va de 3 a 5 e interfiere en la
replicacin un grupo fosfato por lo tanto es necesario colocar un cebador

con un grupo OH para iniciar la replicacin este proceso se repite y

adems se agregan fragmentos para cubrir esos espacios.
11.
Cul es la funcin exonuclasa y endonucleasa de la
polimerasa?
La ADN polimerasa son protenas que adems de las actividades
polimerasas que poseen, tienen tambin actividades exonucleasas. Los
ADN pol de tipo I terminn la replicacin, eliminando los fragmentos de
Okazaki y corrigindo los errores producidos por la polimerasa de tipo 3.
Para realizar sta actividad, una ADN polimerasa de tipo I posee dos
tipos de actividades exonucleasas. Una actividad exonucleasa 5' ---> 3'
que elimina todos los nucletidos (ribonucletido o desoxiribonucletido)
situados al final del cebador. Esta actividad es muy til para la reaccin
en cadena en tiempo real y en la tcnica del marcado de sondas
denominada translacin nick (nick translation). La otra actividad (3' --->
5') es la actividad "proofreading", osea la correcin de errores. Esta
actividad no existe en los procariotas (bacterias), solamente en los
eucariotas y archaea. Las polimerasas que poseen sta actividad
exonucleasas producen menos faltas pero son sustancialmente ms
lentas.
Las endonucleasas son enzimas que catalizan la ruptura de enlaces
fosfodister en diferentes regiones ubicadas en el interior de una cadena
polinucleotdica. Esto las diferencia de las exonucleasas, que catalizan la
escisin de enlaces fosfodister en los extremos de las cadenas.

Universidad Simn Bolvar

Tema:
Conceptos bsicos de biologa molecular
Programa de Microbiologa
V semestre

Docente: Pacifico Castro Gil

Presentado por:
Anthony Marimon Daz

2016