Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
85
Finalmente, los chorros se pueden combinar con dispositivos mecnicos de dis persin
con el fin de aumentar la dispersin del gas. Este mtodo se emplea en el diseo de las
boquillas de flujo radial que se utilizan en algunas aplicaciones a gran escala destinadas
al tratamiento de aguas residuales, como por ejemplo los reactores BIOHOCH de
Hoechst32,45. En este diseo, un chorro vertical ascendente de lquido choca con un disco
desde cuyo centro se dispersa el aire. Para mejorar la circulacin del lquido, estas
boquillas radiales se colocan dentro de los tubos de corriente en el interior del reactor.
Cuando se utilizan chorros, la localizacin del chorro y la configuracin de! depsito
sern de gran importancia en el diseo global. Por ejemplo, la empresa BASF utiliza un
gran nmero de chorros de dos fases (de 40 a 56) para dispersar e! aire dentro de unos
tanques de aireacin de 125 m de largo, 20 m de ancho y 5 m de profundidad, con unas
eficiencias de transferencia de oxgeno en tomo a 1,5- 1,6 kg 0 2/kWh4L4S. Tambin se
usan otras configuraciones, en las cuales las boquillas se encuentran reunidas en grupos
de cuatro sobre el fondo de tanque de
86
aireacin y la descarga de cada boquilla se realiza en un ngulo de 45. En los reactores
de torre destinados al tratamiento de aguas residuales, el reactor general mente es ms
profundo y puede presentar formas diferentes para promover la re circulacin interna,
por ejemplo, cilindrica o cnica invertida. El volumen de estos reactores puede ser
pequeo, por ejemplo: 700 m 3 , o puede llegar hasta los 15.000 m 3 , con dimetros y
alturas que pueden alcanzar los 46 y 20 m respectivamente 45 . Los dispersores pueden
presentar boquillas en dos fases, de tipos diferentes (como en el reactor de torre Bayer),
o boquillas de flujo radial con tuberas de corriente (como en los reactores BIOHOCH
de Hoechst). Estos reactores ofrecern unos altos niveles de transferencia de oxgeno
(3,8 kg0 2 /kWh) 45 .
En los biorreactores de chorro zambullidor se puede encontrar una aplicacin
adicional de los chorros de lquido. En este diseo, la boquilla del chorro se sita por
encima del lquido y descarga el chorro de forma directa o formando ngulo sobre el
lquido. La oxigenacin del lquido en el reactor se produce en tres etapas que se
asocian respectivamente con la transferencia de oxgeno desde el aire al chorro libre,
desde el aire a la superficie del lquido, en el reactor, y desde las burbujas de aire
atrapadas en el seno del lquido por el chorro. La tasa de oxgena- jn est en funcin
de algunos parmetros, tales como: velocidad del chorro, ta cao y tipo de boquilla,
ngulo de incidencia y posicin de la boquilla; y en gene ral se encuentra dentro del
rango 0,92-3,90 kg0 2 /kWh 47 . Sin embargo, en algunas plantas de tratamiento de aguas
residuales se ha llegado a alcanzar un rendimiento de 8 kg0 2 /kWh 45 .
Biorreactores de bucle
Los biorreactores de bucle son tan slo reactores de flujo pistn con recircua- cin. Sin
embargo, el trmino reactor de bucle se refiere por lo general a los reactores con una
tasa de recirculacin mucho mayor que la tasa de afluente. En estos reactores, el lquido
se mueve fundamentalmente en un circuito movido por una bomba localizada en la lnea
de recirculacin. En el tratamiento de aguas residua- les, los canales de oxidacin son
un buen ejemplo de reactores de bucle (vase ms adelante Canales de oxidacin).
BI O RR E AC T O RE S
87
88
BI O T RATA M IE N T O DE R ES ID U O S T X I C O S Y PE LI G R O S OS
BIORREACTORES
89
90
B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S Y PEL I GR O S O S
El efluente del reactor aireado, que contiene una cantidad importante de bio masa.
va a un tanque de sedimentacin o decantador (separador de fangos), un dispositivo
capaz de separar el sobrenadante claro de la biomasa. El sobrenadante se lleva a un
proceso de tratamiento final (si es necesario) o se vierte. La biomasa (fango) se
recircula parcialmente al reactor de aireacin. El exceso ,se evaca o trata por
separado para reducir su volumen, el contenido en agua, y mejorar su estabilidad. Los
fangos en exceso suponen un producto residual importante en el proceso de fangos
activos, y se utilizan diversos sistemas alternativos para su tra tamiento y evacuacin
final.
Cuando se dan condiciones no favorables, como cargas txicas, fluctuaciones de
temperatura, o cambios del pH, los organismos filamentosos dominan a las po blaciones
microbianas en el tanque de aireacin. Entonces, el proceso se espesa y los flculos
microbianos tienden a quedarse suspendidos en lugar de sedimentar se. Como
consecuencia de todo esto, el decantador no es capaz de separar y recir cular la
biomasa, y el proceso entero falla. El esponjamiento tambin se puede ver afectado por
el diseo del reactor, tal y como se ver a continuacin.
Los procesos de fangos activos no difieren en su principio bsico operativo (que
siempre es el mismo) sino en la configuracin de los dos componentes princi pales del
proceso, es decir, el tanque de aireacin, y el decantador secundario. Actualmente
existen muchos diseos de reactores, y los ms importantes se exa minarn en las
secciones siguientes.
La configuracin bsica de este tipo
de reactor es la de un depsito en el que se mezcla y airea completa mente el contenido,
por lo tanto, la composicin del lquido en el interior ser la misma en cualquier punto,
como se muestra en la Figura 4.11a. Esto se puede lograr fcilmente en un tanque
pequeo equipado con un sistema de agitacin diseado apropiadamente. Si el
volumen del tanque es grande, se emplean mltiples agitadores o recirculadores
internos, y chorros. stos normalmente son depsitos de hormign en los que la
aireacin se proporciona mediante aireacin de superfi cie o difusores. Los detalles
sobre requisitos de aireacin, energa y aireacin ya han sido proporcionados
anteriormente en la seccin Configuraciones bsicas de los biorreactores.
Los sistemas de mezcla completa tienen la ventaja de que minimizan la reduc cin
de nutrientes (incluyendo al oxgeno) en cualquier parte del tanque de airea cin.
Adems, toleran bastante bien las sobrecargas puntuales, ya que cualquier variacin en
la composicin del afluente se amortigua en la disolucin que se ge nera cuando el
afluente se mezcla con el contenido del reactor.
Si las aguas residuales tratadas contienen una alta concentracin de hidrocar buros
fcilmente degradables, la composicin de la poblacin microbiana estar dominada
por los organismos filamentosos, y es probable que se produzca un es ponjamiento. En
estas circunstancias, no se recomienda el uso de un sistema de mezcla completa ya que
ste tendera a mantener las condiciones de esponjamien to en el tanque de aireacin.
Sin embargo, los reactores aerobios de mezcla completa se emplean con frecuencia
para tratar aguas residuales que contienen contaReactores de fangos activos con mezcla completa.
BIORREACTORES
91
92
BI O T RATA M IE N T O DE R ES ID U O S T X I C O S Y PE LI G R O S OS
S. +
K,
donde es el tiempo medio de retencin de los fangos activados en el sistema (edad del
fango), y se define como la relacin entre el volumen del fango y el caudal de purga
del fango; ji max y Ks son constantes de la cintica de Monod para la poblacin
microbiana; ke es la constante de la velocidad de respiracin endgena; y Sa es la
concentracin del contaminante en el reactor y en el efluente. Segn la definicin
establecida, viene dado por:
0,_________
Vm
________
(1 - p )Qm, + |3 Qm r
donde V es el volumen del tanque de aireacin; ma, me, y mr son las concentraciones
de biomasa en el depsito y su efluente, en el efluente del decantador y en el flujo de
recirculacin, respectivamente; Q es la velocidad de flujo del afluente; y (1 - fi)Q y Q
son los caudales de la purga de fango y del fango recirculado desde el decantador,
respectivamente. Adems, a partir del balance de masas para el sus trato se obtiene la
siguiente expresin:
Vm m
- o >m
i + *,e,
= Qj 1 + a+a
V
V
l
a
una vez establecida la relacin de recirculacin a (igual a la relacin entre el cau dal
de recirculacin y el caudal del afluente).
Algunos valores tpicos para los parmetros cinticos a 20 C son: Y= 0,5; jx max =
2-6 das 1 ; Ks = 30-300 mg/1; ke = 0,05 das 1 . La edad del fango normalmente es de 615 das 5 .
B I OR R E AC T OR ES
93
94
Desde el punto de vista del reactor, los estanques de oxidacin son reactores de flujo
pistn con un importante caudal de recirculacin.
El aire se dispersa en varios lugares a lo largo del circuito, de tal modo que se
forman cortinas de burbujas cruzadas en el flujo de agua. Cuando las burbujas suben, se
mueven transversalmente respecto al agua. Mediante un espaciamiento calculado de los
puntos de inyeccin del aire se pueden crear zonas alternas, ricas y pobres en oxgeno, a
lo largo del circuito. All donde el oxgeno sea abundante, podr tener lugar la
oxidacin del amonaco en nitratos (nitrificacin) (adems de la oxidacin aerobia de la
DBO). Por el contrario, donde exista menos oxgeno, se favorecern las reacciones
biolgicas anxicas, como por ejemplo la conversin de los nitratos formados durante
la nitrificacin en nitrgeno molecular (desnitrificacin), con lo que se completa la
separacin de la carga de nitrgeno orgnico inicial. Esto constituye una caracterstica
atractiva de los estanques de oxidacin. Como sucede en cualquier otro proceso de
fangos activados, el efluente del estanque se separa de forma continua en un punto del
circuito antes del punto de entrada y se enva a un decantador donde se separa
parcialmente la biomasa y se re- circula.
Estos sistemas tienden a ser relativamente insensibles a las sobrecargas puntuales,
ya que estas cargas quedaran ms o menos homogeneizadas a lo largo del circuito,
debido a la alta relacin que existe entre el flujo de agua del circuito y el flujo afluente.
B I OR R E AC T OR ES
95
96
BI O T RATA M IE N T O DE R ES ID U O S T X I C O S Y PE LI G R O S OS
BI O RR E AC T O RE S
97
recogen en el fondo del decantador, en un sumidero localizado debajo del punto donde el
lquido afluente entra al decantador 12 .
Los decantadores circulares son grandes dispositivos de forma circular (de 3 a 150 m
de dimetro), con un fondo inclinado hacia el centro, tal y como se muestra en la Figura
4.13. Funcionan bajo los mismos principios que los decantadores rec tangulares. La entrada
se localiza habitualmente en el centro. El agua clarificada se mueve radialmente y se
recoge en el borde, donde fluye por encima de un ver tedero circular situado alrededor del
decantador. Se emplea un mecanismo de ras quetas para limpiar el fondo y empujar los
fangos sedimentados hacia un sumidero central donde sern recogidos 14 ' 38 .
Reactores secuenciales discontinuos
Un reactor secuencial discontinuo (SBR) es un reactor en el que tiene lugar un proceso de
fangos activados, dentro de un marco temporal secuencial, utilizando un nico reactor para
todos los pasos del proceso. Los mismos pasos que se en cuentran implicados en un
proceso convencional continuo de fangos activados (aireacin, oxidacin del
contaminante, sedimentacin de fangos, y recirculacin) tienen lugar ahora uno tras otro
de forma discontinua.
En un proceso SBR, cada ciclo comienza con el reactor casi vaco, slo con tendr una
capa de fangos aclimatados en el fondo (Fig. 4.14). Despus, el reactor se llena con las
aguas residuales y se inicia la aireacin y agitacin. El proceso de degradacin biolgica
comienza durante el paso de llenado y contina, una vez lleno el reactor, hasta lograr un
nivel satisfactorio de depuracin del contaminan te. Entonces, la aireacin y agitacin se
paran, y el fango comienza a sedimentarse. Segn el tiempo de sedimentacin, se podran
dar reacciones anaerobias que reduciran el contenido orgnico del fango. Una vez que los
fangos se han sedimentado, se vierte la capa superior clarificada de las aguas residuales
tratadas, y
98
se puede iniciar un nuevo ciclo. La digestin anaerobia de los fangos tambin se puede
incluir como uno de ios pasos del ciclo 8 .
Desde el punto de vista del tipo de reactor, un SBR es un reactor conven cional de
aireacin, equipado con sistemas de aireacin, agitacin y decantacin, que puede
asimilar los cambios que se produzcan en el nivel del lquido en cada ciclo del
proceso 49 . Esto puede realizarse utilizando un equipo de mezcla y airea cin, y un
dispositivo decantador flotante conectado a una bomba para vaciar el reactor 23 .
La ventaja de los SBRs es que pueden asimilar unas grandes variaciones de caudal
y composicin del afluente sin fallar. No se puede decir lo mismo de los procesos de
fangos activos convencionales, en los que un incremento en el afluen te provoca un
menor tiempo de retencin de las aguas residuales en el tanque de aireacin y de los
fangos en el decantador, con el posible fallo de uno de los dos procesos o de ambos.
Adems, los compuestos txicos o los cambios importantes en la carga orgnica pueden
provocar alteraciones en la dinmica de las poblacio nes microbianas dentro de los
procesos convencionales con fangos activos, con el consiguiente esponjamiento o fallo
del proceso. Sin embargo, el tiempo de reten cin de las aguas residuales en un SBR se
puede prolongar hasta que la poblacin microbiana se haya recuperado y haya
completado el proceso de depuracin. De forma similar, se puede modificar el tiempo
de sedimentacin para permitir una sedimentacin completa antes del vertido. En otras
palabras, los procesos SBR, como todos ios procesos discontinuos, son ms flexibles 50 .
Por otra parte, el uso de SBRs para tratar un flujo continuo de aguas residuales requiere
el uso simultneo de mltiples reactores y/o la presencia de instalaciones para el
almacenamiento de las aguas residuales hasta que uno de los SBRs est disponible.
Tambin se han utilizado SBRs en aplicaciones de desnitrificacin 6 .
BIORREACTORES
99
100
B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S Y PEL I GR O S O S
102
BI O T RATA M IE N T O DE R ES ID U O S T X I C O S V PE LI G R O S OS
B I OR R E AC T OR ES
101
1
t
I+
^res
B I OR R E AC T OR ES
103
104
BI O T RATA M IE N T O DE R ES ID U O S T X I C O S Y PE LI G R O S OS
B I OR R E AC T OR ES
105
lecho con relleno. Este reactor presenta alguna similitud respecto al lecho bacteriano
aerobio, en ambos casos la biomasa se acopla a un soporte slido para prevenir su
desprendimiento 52 . Sin embargo, el filtro anaerobio se rellena completamente con el
lquido que fluye de forma ascendente o descendente (a ex cepcin del gas que se forma
durante el proceso). Se pueden utilizar diferentes tipos de material de relleno, como
anillos Rashig, grava, y relleno plstico de diversas formas y tamaos l7 . El relleno
normalmente es bastante grueso (2-6 cm), ya que los filtros anaerobios tienden a
atascarse. Esto se produce cuando los orga nismos anaerobios forman grandes flculos en
vez de una pelcula fina acoplada a la superficie del relleno, y, por lo tanto, llenan la
interfase y originan un efecto de canalizacin y de desprendimiento de la biomasa 12 .
Debido a su baja difusin radial, los lechos con relleno normalmente operan en flujo
pistn. Como se seal con anterioridad, esto provoca que los sistemas sean ms
vulnerables a los choques txicos y a los cambios en la composicin del afluente.
No obstante, los filtros anaerobios presentan diversas ventajas: una alta efica cia con
bajas cargas orgnicas, una gran capacidad de carga, estabilidad global en presencia de
sustancias txicas y bajas necesidades energticas. Se han lo grado reducciones de DQO
de 4 a 10 kg(m 3 da) con tiempos de retencin del orden de 4 a 18 h 45 .
El acrnimo UASB significa Upflow anaerobic sludge
blanket (reactor de lecho de fangos anaerobios de flujo ascendente). El pro ceso, que
Reactores de proceso UASB.
106
describir como un sistema con recirculacin interna de biomasa basado en la sedi mentacin por gravedad.
Como se muestra en la Figura 4.18, el afluente inyectado en el fondo de la columna
se encuentra primero con una capa gruesa (1,5-2,5 m) de grnulos de biomasa producidos
por los organismos anaerobios bajo determinadas condicio nes. Estos grnulos, que
forman un lecho con un alto contenido en biomasa (de 60-70 g/1 hasta 100-150 g/) 14 , son
los principales responsables de la eliminacin de los contaminantes. Los grnulos poseen
una densidad lo suficientemente alta como para quedar retenidos en la parte baja de la
columna sin ser arrastrados por las aguas residuales que suben en el reactor. Por encima
de esta capa de biomasa existe una regin de 2 a 4 m que contiene organismos
individuales, flculos y grnulos pequeos, con una concentracin de biomasa de unos
15-25 g/1. Esta biomasa se mantiene en suspensin y es arrastrada en sentido ascendente
por el flujo del lquido y las burbujas de gas que se forman durante el proceso anaero bio.
Toda esta regin posee recolectores de gas en forma de campana que slo dejan pasar el
lquido a la parte superior del reactor. Por encima de los recolecto res de gas existe una
zona en calma de unos 2 m que permite que gran parte de
BI O RR E AC T O RE S
107
los slidos vuelvan a las regiones inferiores donde podrn seguir con su activi dad
metablica.
Este tipo de reactor se ha utilizado en aplicaciones industriales con un rendi miento
de eliminacin de unos 4-10 kg DQO/(m 3 da). Sin embargo, se han regis trado tasas
incluso mayores [96 kg DQO/m 3 da)]. Los tiempos de retencin estn en tomo a 3-8 h.
En los reactores anaerobios de lecho fluidizado,
la retencin de la biomasa dentro del reactor se consigue mediante la inmovilizacin de
los microorganismos sobre pequeas partculas de soporte que se suspenden empleando
un lquido en ascenso, pero que son lo suficientemente densas como para evitar su
separacin con el efluente. Para este propsito se pueden usar determinados slidos,
como por ejemplo, partculas de carbono o arena.
Slo recientemente se han empleado los reactores de lecho fluidizado para el
tratamiento anaerobio a gran escala de aguas residuales 25 . En una aplicacin especfica se
ha usado este tipo de reactor para degradar el efluente que proceda de una planta de
levadura de cerveza. En este caso, los reactores tenan un dimetro de 4,6 m, una altura
de 21 m (incluyendo los 13 m del lecho con relleno), y un volumen de lecho fluidizado
de 215 m 3 . Estos reactores operaron con una concen tracin de biomasa (40 g/1), una
velocidad de lquido superficial (10-30 m/h) y una eficacia de eliminacin de DQO [2027 kg/(m 3 da)] muy altas 20 . Otras fuentes tambin han informado sobre rendimientos
ptimos de este tipo ,4 .
Reactores anaerobios de lecho lluidizado.
108
BI O T RATA M I N T O DE R ES ID U O S T X I C O S Y PE LI G R O S OS
BI O RR E AC T O RE S
109
ceso posee un valor calorfico importante (23.100 kj/m 3 ), se puede utilizar para mantener
una temperatura correcta dentro del reactor.
Sistemas combinados
Los sistemas combinados se definen aqu como aquellos procesos para el trata miento de
aguas residuales que utilizan organismos tanto aerobios como anaero bios con el fin de
obtener un producto residual final que sea estable y ambiental mente aceptable. Cuando se
haya logrado adquirir un conocimiento ms profundo sobre la microbiologa de los dos
tipos de microorganismos, probablemente se emplearn de forma selectiva para
solucionar los problemas de tratamiento ms difciles aprovechando el potencial
degradador especfico de cada grupo. Con el tiempo, esto requerir el diseo de reactores
con unas configuraciones especficas capaces de aportar las condiciones deseadas para
cada actividad microbiana. A continuacin se examinan algunos de los sistemas
combinados.
Lagunas facultativas
La laguna facultativa probablemente es una de las aplicaciones ms antiguas de los
sistemas combinados. Las lagunas facultativas son grandes estanques de agua, sin
agitacin y sin aireacin, en los que se establecen condiciones aerobias en la capa
superior de ia laguna y condiciones anaerobias en las capas inferiores. El establecimiento
de estas condiciones depende de la carga orgnica de la laguna, de su temperatura y de su
profundidad. Este tipo de lagunas suelen tener una profun didad de 1 a 2 m, lo que ms o
menos se sita en un nivel intermedio entre la profundidad de las lagunas aerobias y la
profundidad de las anaerobias. Los terraplenes normalmente se construyen con pendientes
de entre un 15 y un 25 por cien to l4 , y se utilizan materiales capaces de resistir la erosin,
como por ejemplo grava y piedras, adems se toman medidas para tener en cuenta las
posibles fluctuaciones de nivel.
Las lagunas facultativas presentan una rica variedad de poblacin microbiana, desde
algas y bacterias en las capas superiores hasta organismos facultativos y asociaciones de
microorganismos estrictamente anaerobios en las capas inferiores y en los sedimentos. El
espesor de la capa en la que viven los organismos aerobios depender de la profundidad a
la que penetre el oxgeno, o bien de la profundidad a la que se encuentren las algas
capaces de producir oxgeno mediante fotosnte sis. Por lo tanto, el espesor de esta capa
cambiar de forma importante del da a la noche y de una estacin a otra, debido al
cambio de intensidad en la radiacin solar. Por otra parte, unas cargas orgnicas altas
contribuirn a incrementar el espesor de la capa anaerobia. Se ha logrado establecer una
relacin entre estos factores y la profundidad de penetracin del oxgeno 37 . Si las cargas
orgnicas son excesivas [unos 4.000 kg DBO/(km 2 * da) para aguas residuales turbias],
la capa de oxgeno casi desaparecer por completo, y se establecern condiciones
anaerobias en toda la laguna. Esto posiblemente ocasionar problemas de olores.
110
B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S Y PEL I GR O S O S
111
BI O RR E AC T O RE S
fue demostrada recientemente por Eckenfelder et al. , cuyo anlisis econmico puso de
manifiesto que si las aguas residuales tenan un DBO por encima de 1.000 mg/1, poda
ser beneficioso un proceso combinado anaerobio/aerobio.
Esta aproximacin ha sido utilizada en diversas aplicaciones !0,22 , incluyendo una
reciente en la que se utiliz una combinacin de carbono activo y etapas anae robia
(primera etapa) y aerobia (segunda etapa). Estas aplicaciones se desarrolla ron
principalmente para tratar aguas residuales muy contaminadas. En todos estos casos, los
reactores utilizados en cada etapa fueron del tipo descrito anteriormente para cada clase
de organismos. En la Figura 4.19 se muestra un proceso anaerobio- aerobio.
T^orinados7xompustosnrrniy^entamente_bidegradabtes_aenibramente^42T4^7^Tn
r
tratadas
12
B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S Y PEL I GR O S O S
Referencias bibliogrficas
. Adams, C. E., W. W. Eckenfelder, and R. C. Stien. 1974. Modification to Aerobic Digestor
Design. Water Res. 8:213-225.
2. Aivasidis, A., and C. Wandrey. 1988. Recent Developments in Process and Reactor Design for
Anaerobio Wastewater Treatment. Water Sci. Technol. 20:211-218.
BI O RR E AC T O RE S
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
113
114
B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S Y PEL I GR O S O S
B I OR R E AC T O RE S
115
46. Suflita, J. M., A. Horowitz, D. R. Shelton, and J. M. Tiedje. 1982. Dehalogenation: A Novel
Pathway for the Anaerobio Biodegradation of Haloaromatic Compounds. Science. 218:11151117.
47. Tojo, K., and K. Miyanami. 1982. Oxygen Transfer in Jet Mixers. Chem. Eng. J. 24: 89-97.
48. Verstraete, W. H., and D. Schowanek. 1987: Aerobic versus Anaerobie Wastewater Treatment. In
Proc. 4th Europ. Congress on Biotechnology, vol. 4, pp. 49-63.
49. Weber, A. S., and Matsumoto. 1987. Feasibility of Intermittent Biologica Treatment for
Hazardous Waste. Environ. Progr. 6:166-171.
50. Wentz, C. 1989. Hazardous Waste Management. McGraw-Hill, New York.
51. Wu, A. C., E. D. Smith, and Y. T. Hung. 1980. Modeling of Rotating Biologica Con tactor
Systems. Biotechnol. Bioeng. 22:2055-2064.
52. Young, J. C., and M. F. Dahab. 1982. Operational Characteristics of Anaerobie Pac- ked-Bed
Reactors. pp. 303-316. In E. L. Gaden, Jr. (ed.), Biotechnology and Bioengi- neering Symposium
No. 12. Wiley, New York.
53. Zlokarnik, M. 1979. Scale-Up of Surface Aerators for Waste Water Treatment. pp. 157-180. In T.
K. Ghose, A. Fichter, and N. Blackebrough (eds.), Advances in Bioche- mical Engineering, vol.
11. Springer Verlag, Berlin.
118
BI O T RATA M IE N T O DE R ES ID U O S T X I C O S Y PE LI G R O S OS
Captulo
usar los sustratos secundarios. La clave final consiste en tener en cuenta las inte racciones directas entre sustratos, como por ejemplo, las limitaciones y los requi sitos de
los cosustratos. Los sustratos secundarios pueden alterar el crecimiento de la biomasa
mediante una limitacin del uso del sustrato primario yde la produc cin celular,
mientras que los sustratos primarios pueden limitar directamente la transformacin de
los sustratos secundarios. Estos efectos limitantes se modelan mediante parmetros
cinticos, cuyos valores varan segn la presencia de otros componentes (limitantes).
Los efectos del cosustrato se producen cuando la enzi ma degradadora requiere un
sustrato especfico u otro cosustrato. Existen varios ejemplos de la cintica de los
cosustratos. Uno de los ejemplos ilustra la formulacin de modelos y demuestra cmo
las interacciones entre sustratos pueden afectar de forma significativa al rendimiento del
proceso.
MODELACIN DE LOS
PROCESOS BIOLGICOS
IMPLICADOS EN LA
DEPURACIN DE LOS
Introduccin
SUSTRATOS ORGNICOS
El eje central de la modelizacin de las aplicaciones de biotratamiento implica la
PELIGROSOS
formulacin y solucin de
ecuaciones de balances de masas para las especies bio lgicas
120
O DE
LO
PROOSCTES
OISC OS
B I OYL
GI C
ORSOS
. OS
BJ O T R MATA
ML
IEAC
N TI N
O DDE
E RE
SISDU
X
PEL
IG
119
Este captulo se centra en los factores que se deben tener en cuenta cuando se
formula un modelo para las aplicaciones de biotratamiento, identifica los fenme nos
que pueden ser importantes, define bajo qu condiciones se deben incluir los
fenmenos en un modelo, indica cmo interactan, y ofrece orientaciones sobre cmo
se pueden cuantificar. Todas estas cuestiones son imprescindibles para aquellas
personas que estn elaborando modelos y para quienes intentan seleccionar mode los
construidos por otros. Lo importante son las situaciones en las que los proce sos
biolgicos se muestran activos respecto a la destoxificacin de los productos
qumicos orgnicos peligrosos. Este captulo da respuestas a las siguientes pre guntas:
Qu factores se deben incluir en los modelos sencillos pero adecuados?, y
Cmo se pueden incluir estos factores?.
FIGURA
5.1. Flujos de
y de energa
en una
clula bacteriana. D =
Fundamentos
deelectrones
la modelacin
de tpicos
procesos
biolgicos
sustrato primario donante, D ox = sustrato donante oxidado, A = sustrato primario
receptor, A re d = sustrato receptor reducido,
Objetivos
del metabolismo microbiano
ICH
2 = cosustrato interno reducido, C = cofactor interno oxidado, e~ = electrn,
ATP - adenosina trifosfato, ADP = adenosna difosfato y P = fosfato inorgnico.
Las bacterias y, en menor grado, los hongos, son responsables de las reacciones de
biodegradacin que utilizamos en el biotratamiento. Aunque la mayora de las
reacciones de degradacin forman parte del metabolismo normal de estas clulas, el
objetivo del metabolismo de los microorganismos no es la eliminacin de los
contaminantes ambientales. El objetivo principal del metabolismo microbiano es
crecer y mantenerse. Por lo tanto, la formulacin de los modelos debe comenzar por
puestos_orgnicos posibles. ELdonante .de electrones primario puecte ser-o no-uno- de
la biomasa activa y por los factores que permitan este crecimiento y manteni miento.
los compuestos que se desean destoxificar. El receptor de electrones primario
normalmente es 0 2 , N0 3 , N0 2 , SO 2 o C0 2 , aunque en las fermentaciones tambin se
n organismos
crecen
y se alimentan extrayendo nutrientes, electrones, y
puedenLos
emplear
compuestos
orgnicos.
energa ca ambiente. Los nutrientes son C, N, P, S, y otros oligo-elementos que
conforman la base de los constituyentes celulares: carbohidratos, aminocidos, lpidos y cidosde
nucleicos.
Los electrones son necesarios para reducir los nutrientes a
Fenmenos
biotransformacin
la forma qumica utilizada por los constituyentes celulares, y para generar la energa
Una
vez queque
seposibilite
tenga unala biomasa
se podr producir
cualquier reaccin de
necesaria
sntesis yactiva,
el mantenimiento
de la biomasa.
biotransformacin,
siempre
que
los
microorganismos
posean
las
enzimas necesa
rias El proceso ms bsico del metabolismo microbiano es la transferencia
de elec
para
catalizar
la
reaccin.
Sin
embargo,
se
debe
dar
respuesta
a
tres
preguntas
antes
trones desde un sustrato donante hasta un sustrato receptor. La Figura 5.1 ilustradela
poder
formular
uncual
modelo
la biodegradacin
de un contaminante
oxidacin
del correctamente
donante (D), el
emitepara
electrones
que son llevados
por un cosusespecfico:
trato interno reducido (ICH 2 ). Algunos de los electrones llevados por ICH 2 se trans-
M O DE L AC I N DE LO S PR O C ES O S B I O L GI C O S ..
121
biodegradar como sustrato secundario, es decir, como un sustrato cuya oxidacin (o, a
veces, reduccin) produce un bajo flujo de electrones y energa que se mues tra
incapaz de mantener la biomasa que lo degrada (Kobayashi y Rittmann, 1982; Stratton
et al., 1983).
Los sustratos secundarios se pueden dividir en dos tipos. El primero, denomi nado
sustrato secundario de baja concentracin , incluye a los sustratos que pueden aportar
flujos de electrnes y energa al metabolismo celular, pero la veloci dad que presentan
estos flujos es menor que el flujo mnimo necesario para mantener la biomasa activa.
Lo que provoca que estos flujos sean muy bajos es que el sus trato secundario est
presente en una baja concentracin. Rittmann y McCarty (1980) derivaron Smi, la
concentracin mnima requerida para mantener una biomasa en estado estacionario.
Los sustratos secundarios de baja concentracin podran so portar la biomasa, pero su
concentracin es menor que Smm.
Otro tipo de sustrato secundario es el denominado cometabolito clsico , trmino
utilizado para describir un compuesto cuya transformacin no puede generar flujos de
energa y electrones (Alexander, 1981; Dalton y Sterling, 1982). Gene ralmente, el
cometabolito se transforma mediante metabolismo incidental, es de cir, mediante una
enzima que normalmente reacciona con un compuesto diferente, pero relacionado, que
cataliza un paso de transformacin sencillo para el cometa bolito. Como no se produce
ningn otro paso de transformacin, la transformacin del cometabolito no genera
flujos de electrones y energa. Por lo tanto, un cometa bolito clsico no puede ser
sustrato primario; incluso aunque su concentracin sea elevada.
El trmino cometabolismo se emplea en ocasiones con demasiada libertad para
hacer referencia a cualquier situacin en la que otro sustrato aumente la biodegradacin de un compuesto especfico. Esta utilizacin del trmino es desafortunada, ya
que oscurece su significado: ser requisito obligado para un sustrato prima rio, ya que
la transformacin del cometabolito no produce flujos de electrones ni energa.
122
BJ O T RATA M IE N T O OE RE SI DU O S T XI C O S Y PEL I GR O S O S
M O DE L AC I N DE LO S PR O C ES O S B I O L GI C O S .
Los
inhibidores
desaceleran
paran
oxidacin
donante
inhibicin
123
la
del
mediante
la
competitiva
o no competitiva
Los
desacopladores
paran
reducen
la
ganancia de energa de
Los
la transferencia de
pasan o desacele-
inhibidores
FIGURA 5.2. Diagrama ilustrativo de cmo los limitantes pueden afectar a los
fl ujos primarios de electrones y energa.
124
BI O T RATA M IE N T O DE R ES ID U O S T X I C O S Y PE LI G R O S OS
suspensin voltiles). Gran parte de lo que parece ser biomasa son slidos orgni cos
metablicamente inertes producidos por la descomposicin y muerte de las bacterias
activas. Solamente la biomasa activa es capaz de llevar a cabo reaccio nes de
transformacin.
Parte de la biomasa se encuentra en suspensin libre, mientras otra parte se adhiere a
las superficies slidas formando bopelculas. La distincin clave consiste en que la
biomasa en suspensin se mueve con el flujo de agua, mien tras que en el caso de la
biomasa adherida el agua fluye sobre ella. Adems, los mecanismos de transporte que
ponen en contacto a los substratos con las bacterias a menudo son limitantes en los
sistemas con bopelculas (Rittmann y McCarty,
1980).
Las bacterias activas de los sistemas de biotratamiento normalmente inclu yen muchas
cepas distintas. Aunque existe alguna redundancia ecolgica, es co mn una gran
diversidad ya que distintas cepas utilizan los sustratos primarios presentes en el afluente.
El uso de diferentes sustratos primarios crea nichos eco lgicos. Algunos nichos son muy
diferentes desde un punto de vista funcional, mientras que otros slo presentan diferencias
sutiles. Por ejemplo, las bacterias que utilizan fenol como donante primario de electrones
son completamente distintas a las que utilizan amonaco, pero son relativamente similares
a las que usan benceno.
La idea de que es necesario contar cor^unacepa_porseparado_para_cada-tipo-de
sustrato~es bastante errnea. Por otra parte, ninguna cepa sirve para todos los sus tratos
posibles. Por lo tanto, la realidad se sita entre estos dos extremos. El mode lo de seleccin
ecolgica se debe basar en el uso del sustrato primario porque ste es quien controla la
capacidad de crecer y competir de las diferentes cepas. Se desconoce cmo afecta la
presencia de un sustrato secundario a la seleccin ecol gica, ya que los sustratos
secundarios contribuyen poco o nada al crecimiento celular.
La cuestin final en la diferenciacin de la biomasa es la distribucin de los
plsmidos. Los plsmidos son pequeas hebras de ADN que no son necesarias para el
funcionamiento celular normal, contienen genes degradadores interesan tes, y se pueden
copiar entre bacterias (Rittmann et al., 1990). Como los plsmidos no son esenciales, las
bacterias pueden vivir bastante bien sin ellos. Sin embargo, si una clula adquiere un
plsmido, dicha clula puede ganar en capacidad degra- dadora. Si aumenta la fraccin de
biomasa que contiene el plsmido, entonces la concentracin de biomasa activa en la
reaccin degradadora aumentar proporcionalmente. De modo similar, debera crecer en la
misma proporcin la velocidad de degradacin.
El contenido en plsmidos de la biomasa depende del equilibrio entre la trans ferencia
y prdida de plsmidos. La transferencia de plsmidos aumenta con con centraciones
celulares altas, con la disponibilidad de una fuente de energa (p. ej., sustratos primarios)
para estimular la reaccin conjugativa, y con la entrada de clulas donantes que contengan
plsmidos (Smets et al., 1990; MacDonald et al., 1992). Las tasas de prdidas no se
conocen muy bien, pero probablemente aumentan cuando las bacterias crecen rpidamente.
M O DE L AC I N DE LO S PR O C ES O S B I O L GI C O S ..
125
Balances de masas
Un modelo matemtico es aquel formado por una serie de ecuaciones de balances de
masas que incluyen a las especies qumicas y microbianas ms significativas. Esta
seccin desarrolla los balances de masas que normalmente se requieren para la
elaboracin de un modelo completo. Los trminos de velocidad que se incluyen en las
ecuaciones de balances de masas se discuten en la seccin siguiente. Por lo tanto, esta
seccin se centrar en dnde y cmo se incorporan las expresiones de velocidad en un
modelo.
Ya que la biomasa finalmente debe utilizar los sustratos primarios para su crea cin y
sostenimiento, es esencial realizar un balance de masas sobre uno o ms de los sustratos
primarios: el donante y receptor de electrones. A continuacin se pre sentan las
ecuaciones para el balance de masas de cada sustrato y de un volumen de reactor de
mezcla completa:
V ~ Q(A Q- A) + RA - rAV
at
(5.1)
(5.2)
* En corchetes se encuentra la dimensin de las unidades para cada parmetro. Las dimensiones
principales son: M = masa, L = longitud y T - tiempo. Los subndices diferencian tipos de masas, como D =
donante, A = receptor y X ~ biomasa. Toda masa se debe expresar en unidades proporcionales a sus
equivalentes en electrones. La demanda qumica de oxigeno (DQO) es la unidad de masa ms comn que
cumple este requisito. Si se emplean otros sistemas de unidades (p. ej., SSV para biomasa), es necesario
utilizar factores de conversin.
126
B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S V PEL I GR O S O S
Las ecuaciones (5.1) y (5.2) poseen tres caractersticas comunes en todos los
balances de masas.
La parte izquierda expresa el cambio de masa por unidad de tientpo.- Para el caso
comn de estado estacionario, su diferencial es cero.
La parte derecha contiene tres tipos de trminos. El primero es de adveccirt, que
define cunta masa entra en el afluente y sale con el efluente. El segun do es un
trmino para los afluentes (o efluentes cuando R es negativo) que entran (salen)
independiente al flujo liquido. El tercero incluye todas las re acciones que se
producen en el volumen del reactor. En estas ecuaciones, el donante primero se
consume para la sntesis celular ( YDrDV), mientras que el receptor primario se
consume para la sntesis celular [(1 - YD)rDV] y para la oxidacin que apoya el
mantenimiento (asimilacin) celular ( bXaV).
El segundo balance de masas esencial hace referencia a la biomasa activa:
V^ = Q(X M-Xa)*Rx+riV
at
(5.3)
(5.4)
M O DE L AC I N DE LO S PR O C ES O S B I O L GI C O S ..
127
Expresiones de cintica
Esta seccin presenta y discute tas expresiones matemticas utilizadas para los
trminos de la tasa bitica (r). El objetivo es representar de forma cuantitativa la
frmula para los fenmenos biolgicos que afectan a los sustratos primarios y se cundarios. De una relevancia especial son los enlaces entre los diferentes sustratos y
biomasas activas. Las expresiones para la diferenciacin de la biomasa estn fuera del
alcance de esta seccin.
Sustratos primarios y biomasa activa
La tasa neta de crecimiento de las bacterias activas requiere dos trminos. El pri mero
representa la sntesis de la biomasa, que es proporcional a la utilizacin del sustrato
primario, tal y como se muestra en la Figura 5.1. El segundo trmino re presenta la tasa
a la cual se oxida la biomasa para proporcionar energa con el fin de lograr su
mantenimiento, fenmeno denominado metabolismo endgeno (Rois, 1983). Cuando la
tasa de oxidacin de la biomasa se representa mediante
128
B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S Y PEL I GR O S O S
rs-Yef(rD)-btfXa
(5.5)
Ko-df+O
donde q tasa especfica mxima efectiva de utilizacin del donante de elec trones
primario [MJrf-'T1]
= concentracin de semisaturacin efectiva del donante de electro nes
primario
La tasa de utilizacin del receptor de electrones primario est relacionada con la
tasa de utilizacin del donante y la tasa de crecimiento de la biomasa.
r-A-
=r
M O DE L AC I N DE LO S PR O C ES O S B I O L GI C O S .
129
ED R + E
El segundo sistema implica a un sustrato primario autolimitante, sin interac ciones
entre los sustratos primarios y secundarios. En este caso, cuando existe una gran
cantidad de sustrato primario, disminuye la reaccin catalizada por las enzi mas debido
al exceso de sustrato primario. Este fenmeno se conoce como autoli- mitacin o
limitacin por sustrato primario. La forma habitual de expresar la cintica de un sustrato
primario autolimitante es mediante la expresin de Haldane (Andrews, 1968), en la que
qD_efr y KD_ef disminuyen cuando se produce un incremento de la concentracin del
sustrato primario. El sustrato primario parece ser un limitante competitivo cuando est
presente a altas concentraciones, combinndose con el complejo ED para dar el
intermedio no reactivo ED 2 .
D + E = ED D + ED - ED 2 (no reactivo)
ED -> R + E
En realidad, la autolimitacin probablemente es ms complicada que la formacin de un
complejo no reactivo. Sin embargo, la expresin de Haldane normalmente representa
satisfactoriamente los efectos limitantes.
El tercer sistema consiste en un sustrato primario no autolimitante y un sustra to
secundario que es limitante competitivo del sustrato primario. Los limitantes
competitivos incrementan el coeficiente KD.ef y no tienen ningn efecto sobre el
coeficiente qD.cf. El sustrato secundario limitante competitivo S se une con la en zima E,
dando lugar a un complejo no reactivo limitante de enzimas ES:
D + E = ED
Sistema
Sustrato
primario
l. No autolimitante
2. Autolimitante
3. No autolimitante
W**
v **
b **
u
tff
Referencia
Interacciones SP y
SS*
Niguna interaccic
S + E - ES (no reactivo) ED * R + E
i
Ninguna interaccin
l
I
El SS es inhibidor 1
Monod (1949)
Andrews (1968)
Vd
1 + ( D / K r)
Bailey y Ollis (1986)
9d
i
l
1
K
4
i + (w
competitivo del SP
4. No autolimitante
l
i
El SS es inhibidor no
SS es un desacoplacior
1 + (S/K3)
competitivo del SP
5. No autolimitante
Gottschalk (1986)
<n
[(1 +
(S/K<)]
fe
(1+-i)
M OD E L AC I N D E LOS PR OC E S O S BI O L G I C OS . .
131
En este caso, ios enlaces del sustrato primario y del limitante de la enzima se ex cluyen
mutuamente. Como parte de la enzima est enlazada al complejo ES, no toda la enzima
se encuentra disponible para catalizar la conversin del sustrato primario adems, el
sustrato secundario baja la velocidad de reaccin. La reduc cin de velocidad provocada
por el sustrato secundario limitante competitivo se puede compensar completamente
mediante* el aumento adecuado de la concentra cin del sustrato primario; la velocidad
mxima que se puede dar en la reaccin no se ve afectada por el limitante competitivo.
Los limitantes competitivos normalmente son anlogos del sustrato primario, ya que
tienen relaciones estructurales cercanas al sustrato normal.
El cuarto sistema implica un sustrato primario no auto-limitante y un sustrato
secundario que es un limitante no competitivo del sustrato primario. Los limitan tes no
competitivos bajan el coeficiente qD.efr> y no afectan al coeficiente KD_ef. Un sustrato
secundario que sea un limitante no competitivo reaccionar con la enzima
metablica'en un lugar diferente del centro activo. El limitante y el sustrato prima rio se
pueden enlazar de forma simultnea con la enzima, formando el complejo ternario EDS
no reactivo o poco reactivo.
D + E = ED S + E = ES ED + S = EDS ES + D = EDS ED -* R + E
En presencia de un limitante no competitivo, ninguna cantidad de sustrato prima rio que
se pueda aadir a la mezcla ser capaz de proporcionar la tasa mxima de reaccin que
es posible conseguir sin el limitante. La limitacin no competitiva tambin se
denomina limitacin alostrica. Originalmente, se dio el trmino alos- trico (otra
forma) a este mecanismo porque estos tipos de limitadores de la actividad enzimtica
reaccionan en un lugar distinto al centro activo. Tambin pueden ser estructuralmente
diferentes al sustrato primario.
El ltimo sistema considerado consiste en un sustrato primario no autolimitan- te y
un sustrato secundario que desenlaza la oxidacin del sustrato primario y la sntesis de
la biomasa. Este caso se puede modelar matemticamente mediante la reduccin del
* SP = sustrato primario; SS - sustrato
secundario.
coeficiente
Yef y/o el incremento del coeficiente bcfr> al mismo ' tiempo que se mantienen
** qp - tasa especfica mxima de utilizacin del sustrato primario en ausencia de inhibicin
K 0 ~ concentracin de semsaturacin
constantes los coeficientes
qD,eff yde K
D_ef. Los desenlazadores normalmente hacen la
del sustrato primario en ausencia de inhibicin
Y - coeficiente
produccin
real en ausencia de deacoplamiento [MX M'\, b = coeficiente de
membrana
citoplasmtica
permeable
protones.
En con secuencia,
la [M^ J; K2 =
descomposicin de primer orden
en ausencia
de desacoplamiento
[P -1]; Ka) =los
constante
de autolimitacin
para el dentro
sustrato de
primario
puede
establecer
un a bombeo
de protones,
y el ATP
se puede
= constante de inhibicin debido membrana
a la presencia no
de,l se
sustrato
secundario
asociado
la concentracin
de serrt i saturacin
dei no
sustrato
primario [MyZ, -3];
- constante de inhibicin debido
a la presencia
del la
sustrato
secundariodel
asociado
a tasa de
mxima
especfica
de'utilizacin1986).
del sustrato primario
sintetizar
mediante
fosforilacin
transporte
electro
nes (Gottschalk,
3
[M^Zr 3]; = constante de inhibicin
debido
a
la
presencia
del
sustrato
secundario
asociado
al
coeficiente
e
produccin
[A//.*
]; - constante de
Debido a su modo de actuacin, los desenlazadores
tam bin se denominan
3
inhibicin debido a la presencia del sustrato secundario asociado al coeficiente de descomposicin fA^' ];, D = concentracin del sustrato primario
protonoforos.
1
S ~ concentracin del sustrato
secundario (A-/,// 3 ].
13
0
BI
OT
RA
TA
MI
EN
TO
DE
RE
SI
DU
OS
T
XIC
OS
Y
PE
LIG
RO
SO
S
132
B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S Y PEL I GR O S O S
Los sustratos secundarios pueden ser de tipo de baja concentracin (es decir, por
debajo de la S mm ), o pueden ser cometablicos. En algunos casos se implica a los
cosustratos. Esta seccin describe la cintica para estas tres situaciones.
La relacin funcional para la tasa de transformacin de los sustratos secunda rios depende de las interacciones entre los sustratos primarios y secundarios. En el
caso de baja concentracin, cuando los sustratos no interactan entre s, se utiliza el
modelo de Monod para la tasa de transformacin del sustrato secundario (Stratton et
al., 1983; Bouwer y McCarty, 1985).
,=
donde qs
(5.9)
,+s
~K~.+S
(5-10)
donde
Los coeficientes efectivos, qs^ y Ks^, pueden tener expresiones similares a las que
se muestran en la Tabla 5.1 para los sistemas 3 y 4, pero D es el compuesto que
afecta a los coeficientes para la separacin de S. Cuando el sustrato primario es un
limitante competitivo del sustrato secundario, q^f - qs y K$ef = Ks (1 + DI K' 2 ); por
otra parte, qs,ef = qj{\ + D//Q y = Ks cuando el sustrato primario es un limitante no
competitivo dei sustrato secundario. Los coeficientes K\ y K\ son las constantes de
limitacin [iM^I' 3 ] debido a la presencia de un sustrato primario asociado a Ja
concentracin de semisaturacin del sustrato secundario y a la tasa especfica
mxima de transformacin del sustrato secundario, respectiva mente.
M O DE L AC I N DE LO S PR O C ES O S B I O L GI C O S ..
133
La ltima situacin plantea cmo describir las cinticas del sustrato secunda rio
cuando se necesita un cosustrato. La transformacin del sustrato secundario requiere
contribuciones que no se relacionan directamente con su transformacin. Por lo tanto,
la velocidad de transformacin del sustrato secundario debe relacio narse con la
concentracin del cosustrato o su tasa de utilizacin. En algunos ca sos, tales como la
utilizacin directa de 0 2 en una reaccin de la monooxigenasa o la dioxigenasa (Little
et al., 1988), el cosustrato (en esta ocasin 0 2 ) puede tener su propia funcin de Monod
que controla de forma efectiva a qs<fr ,
/j-eff qs
Kc+C
(5.11)
(5.12)
Un ejemplo
La unin de las ecuaciones de balance de masas y las expresiones cinticas permi te la
prediccin del comportamiento en una situacin dada. En esta seccin, como ejemplo,
investigamos el comportamiento de un reactor de fangos activos en esta do estacionario
en presencia de un sustrato primario no autolimitante y de un sus trato secundario que
es limitante competitivo del donante primario y requiere al donante primario como
cosustrato.
134
B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S Y PEL I GR O S O S
Cuando la concentracin de biomasa activa en el afluente es escasa, las ecua ciones de balance de masas para un reactor de fangos activos en estado estaciona rio
son las siguientes:
Para la biomasa activa:
(5.3)
Para el sustrato primario:
D0-D
(5.14)
r =~-------
SQ-S
(5.15)
r^y{r D )~bX a
(5.16)
rD=--------SJZLJH.------
(5.(7)
Kod + S/KJ + D
S = S0-a(D 0~D)
(5.19)
La concentracin de biomasa activa en el reactor se obtiene combinando las Ecua ciones (5.13), (5.14) y (5.16):
r(> 0 -p) e,
M O DE L AC I N DE LO S PR O C ES O S B I O L GI C O S .
135
KD[\ + S0/K2-aP0/K2\
(5.21)
Valor*
Coeficiente
Tasa de crecimiento de biomasa
Y
0,5 mg SS/mg
DBO fi 0,1 da -1
b
Tasa de utilizacin del sustrato primario
14,4 mg DBO^/mg SS * da
1
mg
DBO/l
10 mg DBO/1
Tasa
de
transformacin
del
sustrato
secundario
0,1 mg DBO/mg DBQ 0
* SS = Slidos en suspensin (una medida de biomasa); DBO^ = Demanda bioqumica de oxige no para el
sustrato donante primario; DBO ( = Demanda bioqumica de oxgeno para el sustrato se cundario.
3 6
B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S Y PEL I GR O S O S
O fl (mg/l)
Oo(mgfl
)
FIGURA 5.3. Efecto de la concentracin del sustrato primario sobre las con centraciones en el afluente de (a) sustrato primario donante y (b) sustrato secundario.
Las constantes son S0 = 500 mg BOD s /l y 0, = 1 da.
M OD E L AC I N D E LOS PR OC E S O S BI O L G I C OS . .
137
S0 (mg/l)
para 50 mg/l < S0 < 27.700 mg/l. Finalmente, el sistema se encuentra completamente
limitado sin ninguna eliminacin de sustrato para SQ 27.715 mg/l. Estos resultados
muestran cmo un sustrato secundario inhibidor reduce la eliminacin del sustrato
primario, lo que reduce la biomasa activa y hace decrecer el flujo de electrones para
la funcin como cosustrato del sustrato primario.
138
B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S Y PEL I GR O S O S
La Figura 5.5 muestra los efectos del tiempo de retencin de la biomasa x sobre las
concentraciones efluentes de D y S para Z> 0 = 500 mg DBO^/1 y S0 = 500 mg DBOA
Para 0 < 0,17 das, el sistema est completamente limitado, y no se elimina ningn
sustrato. El grado de limitacin desciende cuando 0 X es superior a 0,17 das. Debido a los
valores de las constantes cinticas y a las concentraciones de afluente consideradas, en
este caso, la eliminacin del sustrato secundario es baja. Sin embargo, cuando aumenta lo
suficiente, D se acerca a cero, aunque S todava sea grande, debido a la acumulacin de
biomasa mediante retencin celular.
En resumen, la modelacin muestra que el sistema se vuelve menos limitante y ofrece
mejores rendimientos de limitacin cuando aumenta la concentracin del sustrato
primario en el afluente, disminuye la concentracin en el afluente del sus trato secundario,
y aumenta el tiempo de retencin de la biomasa. Estas caracters ticas son consecuencia
directa de las interacciones entre sustratos: 1. una mayor eliminacin del sustrato
primario da lugar a una mayor acumulacin de biomasa y un mayor flujo de electrones
para la eliminacin del sustrato secundario; 2. las concentraciones reducidas del sustrato
secundario provocan una limitacin menor, y 3. un tiempo de retencin de biomasa mayor
incrementa la acumulacin de biomasa. Una vez reconocidas mediante la modelizacin,
estas interacciones se pueden tener en cuenta en el diseo y operacin de un proceso.
Conclusin __________________________________________________________
Este captulo ha proporcionado los fundamentos conceptuales y cuantitativos para la
modelacin de un proceso biolgico. Las caractersticas bsicas de un mo delo son:
ex (das)
FIGURA 5.5. Efecto del tiempo de retencin de la biomasa sobre las
concentraciones de los sustratos primario y secundario en el efl uente.
Las condiciones constantes son: D 0 - S 0 = 500 mg BOD/I.
M OD E L AC I N D E LOS PR OC E S O S BI O L G I C OS .
139
Referencias bibliogrficas
Alexander, M. 1981. Biodegradation of chemicals of environmental concern. Science , 211:132-138.
Andrews, J, F,. 1968. A mathematical model for the continuous culture of microorganisms utilizing
inhibitory substrates. Biotechnol. Bioeng., 10:707-723.
Bailey, J. E., and D. F. Ollis. 1986. Biochemical Engineering Fundamentis, McGraw-Hill, New York.
Bouwer, E. J., and P. L. McCarty. 1985. Utilization rates of trace halogenated organic com- pounds in
acetate-grown biofilms. Biotechnol. Bioeng., 27:1564-1571.
Daiton, H., and D. I. Stirling. 1982. Co-metabolism. Philosoph. Trans. R. Soc. London Ser. B.,
Biolog. Sci., 297:481-496.
Finlayson, B. A. 1980. Nonlinear Analysis in Chemical Engineering, McGraw-Hill, New York.
Godrej, A. N., and J. H. Sherrard. 1988. Kinetics and stoichiometry of activated sludge treatment of a
toxic organic wastewater. J. Water Pollut. Contr. Fed., 60:221-226. Gottschalk, G. 1986.
Bacterial Metabolism, 2nd ed., Springer-Verlag, New York.
Kobayashi, H., and B. E. Rittmann. 1982. Microbial removai of hazardous organic chemi- cals. Environ.
Sci. Technol., 16:170A-I81A.
Little, C. D., A. V. Palumbo, S. E. Herbes, M. E. Lidstrom, R. L. Tyndall, and P. J. GiJmer. 1988.
Trichloroethylene biodegradation by a methane-oxidizing bacterium. Appl. Environ. Microbiol.,
54:951-956.
MacDonald, J. A., B. Smets, and B. E. Rittmann. 1992. The effects of energy availability on the
conjugative-transfer kinetics of plasmid RP4. Water Research, 26:461-468.
Monod, J. 1949. The growth of bacterial cultures. Annu. Rev. Microbiol., 3:371-394.
Namkung, E. and B. E. Rittman. 1987. Estimating volatile organic compound emissions from publicityowned treatment works, JWPCF, 59:670-678.
Rittmann, B. E. 1990. Biotechnological control of hazardous organic contaminants in sewage works, pp.
21-36, in Proc. 4th WPCF/JSWA Joint Technical Seminar, Tokyo, Japan.
Rittmann, B. E., D. Jackson, and S. L. Storck. 1988. Potential for treatment of hazardous organic
chemicals with biological processes, pp. 15-64, in D. L. Wise (ed.), Biotreat- ment Systems, vol.
III, CRC Press, Boca Ratn, FL.
Rittmann, B. E., and P. L. McCarty. 1980. Model of steady-state-biofilm kinetics. Biotechnol.
Bioeng., 22:2359-2357.
Rittmann, B. E., B. Smets, and D. A. Stahl. 1990. Genetic capabilities of biological proces ses. Part 1.
Environ. Sci. Technol., 24:23-29.
Rois, J. A. 1983. Energetics and Kinetics in Biotechnology, Elsevier, Amsterdam.
140
BI O T RATA M IE N T O DE R ES ID U O S T X I C O S Y PE LI G R O S OS
Sez, P. B., and B. E. Rittmann. 1989. Discussion of kinetics and stoichiometry of activated sludge treatment of a toxic organic wastewater. J. Water Pollut. Contr. Fed., 61:
357-358.
Sez, P. B., and B. E. Rittmann. 1991. Biodegradation kinetics of 4-chIorophenol, an inhibitory co-metabolite. J. Water Pollut. Contr. Fed., 63:838-847.
Smets, B., B. E. Rittmann, and D. A. Stahl. 1990. Genetic capabilities of bicslogical processes. Part II. Environ. Sci. Technol 24:162-169.
Smith, G. D. 1978. Numerical Solution of Partial Differential Equations: Finite Difference
Methods. Clarendon Press, Oxford, United Kingdom.
Stratton, R. G., E. Namkung, and B. E. Rittmann. 1983. Secondary utilization of trace organics by biofilms on porous meda. J. Am. Water Works Assoc., 75:463-469.
Tsien, H, C., G. A. Brusseau, R. S. Hanson, and L. P. Wackett. 1989. Biodegradation of
TCE by Methylosinus trichosporium OB3b. Appl. Environ. Microbiol., 55:3155-3161.
Vogel, T. M., C. S. Criddle, and P. L. McCarty. 1987. Transformations of halogenated
aliphatic compounds. Environ. Sci. Technol., 21:722-736.
Wang,~ H. E., and M. P. Anderson. 1982. Introduction to Groundwater Modeling, W. H.
Freeman, San Francisco.
Captulo
LIMITACIONES DE LA
LEGISLACIN Y POLTICA
VIGENTE: REGULACIN DE LA
BIORRECUPERACIN DE
RESIDUOS PELIGROSOS
David E. Giamporcaro
Jefe de Seccin, Programa de Biotecnologa Oficina de Prevencin de ta
Contaminacin y Txicos Agencia de Proteccin Ambiental U.S.A. 1 Washington,
DC
Vamos a comenzar por una prediccin: la dcada de los 90 ser testigo de una
importante expansin del uso de la biorrecuperacin para degradar los residuos
peligrosos, incluyendo las primeras aplicaciones comerciales de microorganismos
sometidos a ingeniera gentica 2 . Este pronstico optimista no se basa solamente en el
estado actual de la ciencia de biorrecuperacin. El progreso en este frente contina a
una velocidad impresionante; casi cada semana se anuncian logros im
1
Las opiniones expresadas son del autor, y no de la Agencia de Proteccin Ambiental de Esta dos
Unidos.
7
Biorrecuperacin es el proceso natural mediante el cual las bacterias u otros microorganis mos
alteran y rompen las molculas orgnicas dando lugar a los componentes constituyentes. La
biorrecuperacin est relacionada con la biodegradacin ( l t ) . Existen dos mtodos principales de
biorrecuperacin: la bioestimulacin, mtodo de recuperacin predominante, y el bioaumento (6). La
bioestimulacin implica la adicin de materiales, como oxgeno, nitrgeno, fsforo, y oligoele- mentos, en
una zona contaminada para acelerar los procesos naturales de biodegradacin (20). El bioaumento implica
la introduccin de microorganismos en una zona para aumentar la poblacin autctona o incrementar la
velocidad degradadora (6).
141
142
B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S Y PEL I GR O S O S
portantes en las revistas tcnicas. Sin embargo, el xito futuro de la borrecuperacin depende no solamente de los logros cientticos, sino tambin de la poltica y
los requisitos reglamentarios (Day, 1990). Este pronstico optimista se basa, por lo
tanto, en el progreso realizado por la Agencia de Proteccin Ambiental (EPA) de
EE.UU. durante los ltimos aos a la hora de abordar los obstculos reglamenta rios
y diferencias de datos que han impedido la aplicacin de esta tecnologa. Este
desarrollo fomentar la comercializacin de esta tecnologa, y permitir la aplica cin de las tcnicas de biorrecuperacin de una forma ambientalmente correcta.
Este captulo discutir los estatutos y reglamentos federales, tanto existentes
como en desarrollo, aplicables al uso de la biorrecuperacin para el tratamiento de
residuos peligrosos. Los principales estatutos implicados son el Acta de Recupe racin y Conservacin de Recursos (RCRA) 3 , y el Acta Global de Responsabilidad,
Compensacin-y Respuesta Ambiental (GERGLA)^ Laraplraci~n de esta
tecnologa tambin se puede ver afectada por la poltica y los reglamentos implan tados bajo el Acta de Control de Sustancias Txicas (TSCA) 5 y el Acta Federal de
Plagas Agrcolas (FPPA) 6 , El propsito de este captulo no es describir detallada mente los contenidos de estos estatutos y programas reglamentarios; ya se han
escrito muchos tratados y artculos que cumplen esta finalidad, a los cuales se pue de remitir el lector. El propsito de este captulo es discutir el impacto, sobre el uso
de la biorrecuperacin, de los contenidos ms importantes de los estatutos y
programas reglamentarios mencionados anteriormente.
La promesa de biorrecuperacin
Ms de una dcada despus de la aprobacin de las leyes federales que intentaron
solucionar el problema del tratamiento y evacuacin de los residuos peligrosos, los
EE.UU. todava se enfrentan a un problema de una magnitud enorme. Aproxi madamente 1.200 zonas de residuos peligrosos estn registradas^ en Ja Lista de
Prioridades Nacioles(NPL) establecida^bajo el programa Superfondo (Bakst,
1991), EPA estima tambin que unas 4.000 zonas ms precisan de una accin co rrectora segn el RCRA. Todas juntas, segn Thayer (1991), Decenas de miles de
lugares, incluyendo depsitos subterrneos y derrames de petrleo o de produc tos
qumicos, necesitarn tratamiento.
Enfrentados a una tarea de estas proporciones, la biorrecuperacin ofrece al gunas ventajas claras sobre las tcnicas convencionales de tratamiento de residuos
peligrosos. Una de las principales ventajas es el coste. La biorrecuperacin ofrece
importantes ahorros frente a las principales tecnologas de tratamiento de residuos
3
4
L IM I TAC I O N E S DE L A L EG I S L AC I N Y PO L TI C A V IG E N TE
143
peligrosos. Los costes de incineracin, por ejemplo, varan entre 300 $ y 1.000 $ por
tonelada de suelo, mientras la evacuacin terrestre supone entre 200 $ y 300 $ por
tonelada. Frente a estas cifras, la biorrecuperacin del suelo cuesta entre 50 $ y 150
$ por tonelada (Glass, 1991). Otra ventaja importante es que la biorrecupe racin se
puede realizar provocando un menor impacto ambiental negativo sobre el lugar
afectado y, posiblemente, sobre el 'ambiente en general. Por ejemplo, la
biorrecuperacin in situ normalmente implicara una perturbacin mnima del sue lo
superficial. Adems, la biorrecuperacin evita algunos de los inconvenientes
ambientales asociados a las principales tecnologas de tratamiento 7 .
Sin embargo, la mayor ventaja de la biorrecuperacin quizs todava no se haya
aprovechado. Se trata del uso de las tecnologas de biorrecuperacin como
instrumento en la prevencin de la contaminacin. Varios expertos en el tema han
citado la biorrecuperacin para la minimizacin de los residuos como una de las
aplicaciones futuras ms prometedoras de la tecnologa (Bakst, 1991; Glass, 1991).
EPA conoce bien este potencial. El Administrador de EPA, William Reilly, en una
reunin celebrada en junio de 1991 entre representantes de la industria de la bio rrecuperacin y la Agencia, dijo acerca de las diversas aplicaciones de esta biotec nologa: deben llegar a formar parte de nuestras futuras discusiones y acciones en
la prevencin de la contaminacin (U.S. EPA, 1991a).
No es sorprendente, entonces, que EPA haya mostrado tanto inters durante los
ltimos dos aos y medio en relacin a valorar los obstculos cientficos, ins titucionales y reglamentarios que existen en contra de la aplicacin de esta tecno loga. Reilly ha expresado claramente el compromiso de la Agencia respecto a
aprovechar el potencial de la biorrecuperacin:
Creo que debemos seguir desarrollando de forma agresiva todo el potencial de la
biorrecuperacin para tratar los residuos peligrosos, y limpiar nuestras zonas aban donadas...
Sigo creyendo que 1a biorrecuperacin tiene el potencial para ser una tec nologa de tratamiento
dominante para las operaciones de limpieza en el futuro. (U.S. EPA, 1991a.)
7
Por ejemplo, las incineradoras plantean inquietudes en relacin a las emisiones atmosfricas y
problemas con la evacuacin de las cenizas (Glass, 1991; Thayer, 1991).
144
BI O T RATA M IE N T O DE R ES ID U O S T X I C O S Y PE LI G R O S OS
grosos, y a los propietarios y operadores de las instalaciones de tratamiento, alma cenamiento y evacuacin.
El CERCLA se aprob para permitir y otorgar a EPA la capacidad de limpiar las
zonas contaminadas en toda la geografa nacional. Como el CERCLA depende de
alguna forma de las determinaciones y requisitos impuestos por el RCRA, este ltimo
estatuto y sus reglamentos sern discutidos en primer lugar.
Acta de conservacin y recuperacin de recursos (RCRA)
El RCRA se divide en varias secciones principales, o subttulos. Esta discusin se
centrar en los contenidos seleccionados de los Subttulos C (Residuos Peligro sos), e I
(Depsitos de Almacenamiento Subterrneo).
Subttulo
C:
Identifi cacin,
tratamiento,
almacenamiento
evacuacin
de
re siduos
LI M I TAC I O NE S D E L A LE GI S L AC I N Y PO L T IC A VI G EN T E ..
145
12
40 C.F.R. 261.24.
13
40 C.F.R. 261.31.
40 C.F.R. 261.32.
40 C.F.R. 261.33(e).
40 C.F.R. 261.33(0.
40 C.F.R. 261.3(a)(2)(iii), (d)(l).
40 C.F.R. 261.3(a)(2)(iv).
14
15
16
17
18
146
B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S Y PEL I GR O S O S
no puede cambiar su estado a residuo reglamentario mediante este tipo de trata miento
l9
.
La poltica contenido de EPA establece que cualquier medio ambiental (es decir,
suelo o aguas subterrneas) que contenga un residuo peligroso listado ser
considerado como residuo peligroso, y se deber tratar, almacenar, o evacuar como tal
(Bakst, 1991) 20 . Adems, la norma derivado de de EPA establece que cual quier
producto secundario generado por el tratamiento, almacenamiento, o eva cuacin de un
residuo peligroso listado ser considerado de la misma forma que el residuo listado
(Bakst, 1991; Hill, 1991) 21 .
El efecto prctico de estas normas es que el suelo o el agua subterrnea conta minada con residuos peligrosos listados, o el rechazo de cualquier proceso de tra tamiento empleado para degradar un residuo peligroso listado por ejemplo, las
cenizas de una incineradora o la biomasa de un reactor debe ser tratado,_en s_
mismo, como residuo peligroso.
El 6 de diciembre de 1991 el Tribunal de Apelacin de Estados Unidos para el
Distrito de Columbia invalid y devolvi las normas derivado de y mezclas a
EPA basndose en que la agencia no haba notificado y comentado las normas lo
suficiente antes de su promulgacin en 1980 22 . Para evitar una discontinuidad en la
regulacin de los residuos peligrosos, el tribunal recomend a EPA volver a
promulgar normas con carcter provisional 23 .
EPA reinstaur las normas en marzo de 1992 publicando una norma final pro visional 24 . El objetivo de la norma final provisional es asegurar que no exista un
agujero legal en la administracin del programa de residuos peligrosos. Esta nor ma
provisional caduc el 28 de abril de 1993. Durante el perodo intermedio, EPA volver
a proponer las normas sobre mezcla y derivado de con el fin de soli citar
comentarios de la opinin pblica acerca de las alternativas de gestin para los
residuos mezclados y subproductos de tratamiento 25 .
Cuando se determina que un residuo es peligroso, se desenlazan una serie de
requisitos reglamentarios en relacin a su almacenamiento, tratamiento 26 , y eva-
19
40 C.F.R. 261.3(c)(I). Para que un residuo peligroso listado, o el material como suelo o aguas
subterrneas que contiene un residuo peligroso listado, no sea considerado peligroso, debe ser excluido
de la lista. 40 C.F.R. 261.3(d)(2).
20
21
22
40 C.F.R. 261.3(b)(2).
40 C.F.R. 261.3(c)(2)(i).
23
25
Vase Sistema de Gestin de los Residuos Peligrosos; Definicin de Residuos Peligrosos; Normas
sobre Mezclas y Derivado de; Normativa Propuesta, 57 Registro Federal 7636 (3 de marzo, 1992).
26
Tratamiento se define como cualquier mtodo, tcnica, o proceso, diseado para cambiar la
naturaleza o composicin fsica, qumica o biolgica de cualquier residuo peligroso con el fin de
convertir dicho residuo en un residuo no peligroso... 42 U.S.C. 6903(34); 40 C.F.R. 260.10.
L IM I TAC I O N E S DE L A L EG I S L AC I N Y PO L TI C A V IG E N TE .
147
cuacin. Cualquier instalacin que trate, almacene o evace los residuos peligro sos del
RCRA debe contar con un permiso de EPA, o estar operando bajo lo que se denomina
estado provisional pendiente del permiso final. Mediante los permi sos RCRA, o las
normas aplicables a las instalaciones con estado provisional, EPA impone los requisitos
que controlan la limpieza de los residuos peligrosos para la accin correctora. A
continuacin se discuten dichos requisitos.
Existen algunas excepciones importantes al requerimiento de un permiso o al
cumplimiento de las normas provisionales antes de poder tratar o evacuar un resi duo
peligroso. Los generadores que originen menos de 100 kg de residuos peligro sos al mes
(generadores en pequeas cantidades) estn exentos del RCRA 27 . Los que generen ms de
100 kg pero menos de 1.000 kg al mes pueden acumular y tratar los residuos peligrosos
en la propia instalacin durante un perodo lmite de 180 das, en depsitos o
contenedores que pueden cumplir los requisitos reglamentarios mnimos sin necesidad de
obtener un permiso RCRA o cumplir las nor mas de estado provisional 28 . De igual forma,
los generadores de ms de 1.000 kg de residuos peligrosos al mes pueden acumular y
tratar los residuos in situ durante un perodo lmite de 90 das sin el requisito de obtener
un permiso 29 .
Adems, los propietarios u operadores de instalaciones de tratamiento comple tamente cerradas no estn sujetos al permiso RCRA o a los requisitos de estado
provisional 30 . Una instalacin de tratamiento completamente cerrada se define como una
instalacin que est directamente conectada a un proceso de produc cin industrial y que
est construida y operada de forma que evite la emisin de cualquier residuo peligroso, o
de cualquier constituyente del mismo, al ambiente durante su tratamiento 31 .
Estas excepciones son importantes, ya que permitirn el uso de la biorrecupe- racin
o de cualquier otra forma de tratamiento de residuos peligrosos sin necesi dad de obtener
primero la aprobacin del mtodo de tratamiento bajo el programa RCRA. EPA ha
adoptado de forma expresa que los residuos peligrosos se puedan tratar mientras se
almacenan en los depsitos o contenedores durante los perodos de acumulacin de 90 o
180 das 32 .
La excepcin que se aplica a las instalaciones de tratamiento completamente cerradas
tambin puede tener consecuencias importantes sobre el uso de la biorre- cuperacin
como forma de tratar flujos de residuos. Los biorreactores instalados como sistemas de
tratamiento final de tubera para los efluentes industriales se pueden clasificar bajo el
RCRA como instalaciones de tratamiento completamente cerradas. Adems de que
reducen las inquietudes reglamentarias debido a su natu raleza cerrada, los biorreactores
se pueden disear tambin para tratar flujos residuales industriales especficos. La
integracin de los biorreactores en los procesos
27
28
29
30
31
32
40 C.F.R. 261.5(a).
40 C.F.R. 262.34(d).
40 C.F.R. 262.34(a).
40 C.F.R. 264.1(g)(5).
40 C.F.R. 260.10.
51 Registro Federal 10146, 10168 (24 de marzo, 1986).
.17
'8
W
411
41
42
43
40 C'.F.R. 264.101.
42
40
40
40
40
40
u.s.c.
C.F.R.
C.F.R.
C.F.R.
C.F.R.
C.F.R.
6924(d).
268.30.
268.31.
268.32.
268.33
268.34.
148
BI O TLI
RAT
A M IE
TO
DU
T X
Y L
PEL
IG
OS
S TE.
M I TAC
I ON
NE
S D E RE
L A SI
LE
GIO
SS
L AC
I INC OS
Y PO
T IC
ARVI
GO
EN
149
industriales
ya existentes
minimizar procedentes
los residuosdeno
debe plantear
de residuos
peligrosos para
o constituyentes
cualquier
unidad demuchos
ges tin de
problemas
de slidos
carcter en
tcnico,
ya que
la tecnologa
es similar
la accin
utilizada
duran te se
residuos
la propia
instalacin,
y requiere
que ala
[cjorrectora
37
dcadas
para el en
tratamiento
residuales
industriales
La que
especifique
el permisode[delasla aguas
instalacin]
. En
la prctica,(Glass,
esto ha1991).
permitido
tecnologa
de tratamiento
caracterstica
biorreactores
similar
a la la
EPA pueda
controlar continuo
el proceso
de limpiezadeenlosuna
instala cin es
RCRA
mediante
tecnologa
utilizada del/de
para ellostratamiento
de tratamiento
aguas residuales
hecho,
especificacin
mtodo/s de
que se(Glass,
pueden1991).
utilizarDepara
afrontar
variasuna
empresas
de biorrecuperacin
estn
investigando
el realiza
uso de sistemas
emisinnacionales
de residuos
peligrosos en la
instalacin.
EPA
este control
contenidos
para la el
degradacin
losinstalacin
residuos (Garg
y Garg,
Glass,
1991).
modificando
permiso dedeuna
aprobada
por1990;
el RCRA
para
que especifique
Cuando
no sean aplicables
las excepciones
ya mencionadas,
las accin
provisiones
de
el/los mtodo/s
de tratamiento
que se pueden
utili zar en la
correctora,
o
accin
correctorao del
RCRA controlarn
uso de los mtodos
tratamiento en
para
emitiendo
modificando
la orden eladministrativa
de unade instalacin
estado
degradar
los residuos
en las (Hill,
instalaciones
provisional
con elpeligrosos
mismo objetivo
199). de tratamiento, almacenamiento o
evacuacin.
La aprobacin de los mtodos de tratamiento que se pueden emplear para la
Las
enmiendas
RCRA deen1984
modifican
de forma
el programa
limpieza
de lasalemisiones
las 34unidades
de gestin
dedramtica
residuos slidos
dentrodede las
accin
correctora. Antes
de 1984, las
normas del RCRA
para la accin
correc
se de
instalaciones
de tratamietno,
almacenamiento,
o evacuacin
implican
un tora
pro ceso
dirigan
fundamentalmente
supervisar
la lixiviacin
a las
subterr
de los
evaluacin
de mltiplesa etapas.
Primero,
EPA realiza
unaaguas
evaluacin
de neas
la instalacin,
y
constituyentes
peligrosos
presentes ende almacenes,
pilas de residuos,
a continuacin
una investigacin
la misma. Finalmente,
se lleva aunidades
cabo un de
estudio
35
tratamiento
terrestre,
o vertederos
. Lasel/los
enmiendas
de 1984
requieren auna
sobre las
medidas
correctoras(Hill,
para 1991)
identificar
mtodo/s
de tratamiento
aplicar
accin
correctora
porElparte
de la es
instalacin
oficial, o yensuele
esta do
provisional,
dedicada
al
(Bakst,
1991).
proceso
largo y costoso,
retrasar
la accin
de limpieza
tratamiento,
almacenamiento
evacuacin
para lim
piarretrasos
los derrames
escapes
de
establecida
bajo el RCRAo de
modo parecido
a los
sufridosobajo
el programa
constituyentes
procedentes
de ci alquier unidad de gestin de residuos
Superfondopeligrosos
en las zonas
NPL.
slidos localizada
dentroque
de laproporcionan
instalacin. Ui,a
unidadde
de gestin
de residuos in
slidos,
es una
Las empresas
servicios
biorrecuperacin
situ en
cualquier_estructura
paraRCRA
recolec^
tr,una
almacenar,
tratar,
evacuar
residuos nor instalacin con utilizada
permiso del
o en
instalacin
en oestado
provisional
36
slidos
.
malmente
no tienen obligacin de sacar su propio permiso (Bakst, 1991). Estas
Las
normasno
dese
accin
correctora
promulgadas
EPA enni1985
son muyugene
rales.ras de
empresas
consideran
ni generadoras
de por
residuos,
propietarias
operado
EPA la
exige
que los Sin
propietarios
operadores
de las de
instalaciones
de trata
miento,to de
instalacin.
embargo,u EPA
debe aprobar
forma expresa
el proyec
almacenamiento
o evacuacin
a cabo la del
accin
correctora
necesa
ria para
biorrecuperacin
mediante lleven
una modificacin
permiso
RCRA de
la insta
lacin, o
proteger
la salud pblica
y el medio la
ambiente
relacin a cualquier
concediendo
o modificando
orden en
administrativa
de la emisin
instalacin en estado
provisional. Adems, es necesario destacar que una empresa de biorrecupe racin que
reciba y trate residuos peligrosos en su propia instalacin s deber obtener un permiso
o cumplir las normas de estado provisional (Bakst, 991), En este caso, la empresa ser
33 considerada propietaria u operadora de una instalacin de tratamiento, almacenamiento,
La poltica contenido en y las normas derivado de y mezcla discutidas anteriormente quizs
evacuacin.
enmiendas
al RCRA
de 1984
prohibieron
tambin
la cin
evacuacin
no seany aplicables
a losLas
biorreactores
integrados
en procesos
industriales
para la
minimizade
residuos.
Los
requisitos
del
RCRA
para
el
tratamiento,
almacenamiento,
y
evacuacin
de
residuos
terrestre de algunos residuos peligrosos si s tos no han sido pretratados a los niveles
peligrosos
solamente se38aplican
de que
se genere
residuo peligroso
(Day,
Por lo tanto,
especificados
. EPA despus
implant
tambin
esteunrequisito
mediante
la 1990).
promulgacin
de una
los biorreactores utilizados para el tratamiento de los flujos de procesos industriales con el fin de evitar la
serie de normas que prohiban la evacuacin terrestre de diferentes grupos de residuos
generacin de un residuo peligroso, no
entrarn en los requisitos del RCRA. Sin embargo, otras
normas de
39
40
disolventes
, Acta
y de!
residuos
que pueden
contienen
dioxinas
los residuos
EPA (p.peligrosos:
ej., los permisos
NPDES bajo el
Agua Limpia)
ser aplicables
para los, efluentes
de
41
denominados
lista
de al
California
los residuos
estos biorreactores,
segn
el medio
que finalmente,sey vierta
el efluente.peligrosos especficos listados y
los caractersticos agrupados en las normas conmnmente denominadas Primer
34
Enmiendas
1984 sobre Tercio
Residuos43Slidos
y Peligrosos, Pub. L. No. 98-616.42 U.S.C. 6901 y ss.
Tercio 42 ,deSegundo
, y Ter35
150
BI O T RATA M IE N T O DE R ES ID U O S T X I C O S Y PE LI G R O S OS
cer Tercio 44 . Las normas de evacuacin terrestre (NETs) se han convertido en uno
de los elementos ms controvertidos del programa RCRA, e influyen directa mente
sobre el uso de la biorrecuperacin en las acciones correctoras de las insta laciones
RCRA.
La prohibicin de evacuacin terrestre no es aplicable si se puede demostrar que
no se producir ninguna migracin de los constituyentes peligrosos fuera de la
unidad de evacuacin mientras ios residuos sean peligrosos 45 . En este caso, es
posible lograr una excepcin a las NETs solicitando una peticin de no migra cin
a EPA46 .
Sin embargo, en ausencia de tal solicitud, las NETs requieren que, antes de la
evacuacin terrestre, los residuos peligrosos sean pretratados mediante un mtodo
especifico (p. ej., incineracin), o que el nivel de concentracin de residuo cum pla
un nivel establecido, lo que se denomina normas de tratamiento. En la norma Tercer
Tercio, por ejemplo, la biorrecuperacin ha sido identificada como un m todo
permisible de tratamiento para 16 residuos diferentes. Incluso cuando se ha yan
establecido determinados mtodos de tratamiento, existe un mecanismo regla mentario que permite el uso de mtodos alternativos equivalentes a los mtodos de
tratamiento que se hayan especificado 47 . Cuando se han establecido unas normas de
tratamiento, se puede utilizar cualquier mtodo incluyendo la biorrecupera cin
capaz de conseguir el valor lmite de la norma de tratamiento antes deja.
evacuacin ai terreno de los residuos._________________________
... EL problema radica en Tos niveles de concentracin que se hayan fijado en las
normas de tratamiento. Cuando se implantaron las restricciones de evacuacin te rrestre en las enmiendas al RCRA de 1984, EPA exigi que las normas de trata miento se fijasen segn la reduccin de residuos que se pudiese conseguir utili zando
la mejor tecnologa disponible contrastada (MTDD). Los sectores ms crticos han
denunciado que, como consecuencia de este requisito, las normas de tratamiento se
suelen basar en los niveles de descontaminacin que se pueden lo grar mediante
tecnologas convencionales, como por ejemplo la incineracin, y, por lo tanto, en
objetivos de descontaminacin artificialmente altos, difciles de conseguir
biolgicamente (Bakst, 1991; Day, 1990; Glass, 1991). Los sectores crticos tambin
han cuestionado el requisito MTDD por dar lugar a unas normas de tratamiento
basadas en la tecnologa y no en la salud (Day, 1990; Thayer, 1991).
Otra inquietud es que las NETs pueden restringir los casos en los que se puede
utilizar la tecnologa de biorrecuperacin. Las NETs consideran que ciertos resi duos
peligrosos no se pueden localizar en o sobre el suelo 48 si previamente no se tratan
con una tecnologa especfica, o cumplen las normas de tratamiento aplica-
44
Recientemente, algunas partes de la norma tercera se han devuelto a !a agencia. Vase Ges tin de Productos Qumicos Residuales contra EPA, 976 F. 2d 2 (D. C. Cir. 992) 40 C.F.R.
45
268.35.
42 U.S.C. 6924(d)( 1).
* 40 C.F.R. 268.6.
41
40 C.F.R. 268.42(b).
48
Evacuacin terrestre se define como la disposicin de un residuo peligroso en o sobre... el
suelo. 40 C.F.R. 268.2{c).
LI M I TAC I O NE S D E L A LE GI S L AC I N Y PO L T IC A VI G EN T E ..
151
bles. Por lo tanto, cualquier disposicin del material suelo o aguas subterr neas
contaminado con residuos peligrosos listados en las NETs puede disparar el requisito
de pretratamiento. Los sectores crticos han sealado que esto puede restringir el uso
de la biorrecuperacin como mtodo primario o secundario de tratamiento (Day, 1990).
Recientemente, EPA ha adoptado una serie de medidas para plantear estos pro blemas. Las enmiendas al RCRA de 1984 establecieron una excepcin de cuatro aos a
la aplicabilidad de las NETs al suelo y a los escombros contaminados que recibiesen
una accin de respuesta mediante el programa Superfondo o una acccin correctora
RCRA 49 . Esta excepcin estatutaria expiraba el 8 de noviembre de 1988. EPA ha
completado la excepcin mediante una serie de exenciones nacionales que consisten en
un perodo de dos aos antes de la aplicacin de los requisitos NETs al suelo y a los
escombros contaminados con una serie de residuos especficos 50 . Por ejemplo, en la
norma Tercer Tercio recientemente promulgada, EPA estable ci una exencin nacional
para el suelo y los escombros contaminados con diver sas categoras de residuos,
incluyendo aquellos con las normas de tratamiento ba sadas en la incineracin,
vitrificacin, y tratamiento del mercurio 51 .
EPA ha reconocido que los requisitos MTDD de las NETs quizs no sean apli cables
a las acciones correctoras RCRA o CERCLA hasta que se establezcan las normas
MTDD para el suelo y los escombros contaminados 52 . Las normas MTDD se
establecieron paia los flujos residuales de procesos o para los residuos puros, no para
materiales, como suelo y escombros, contaminados con residuos peligro sos (Thayer,
1991).
Sin embargo, cuando caduquen las exenciones nacionales, el suelo y los es combros
contaminados con residuos sujetos a las NETs no se podrn evacuar de
49
42 U.S.C. 6924(d)(3).
30
Las exenciones nacionales para el suelo y los escombros contaminados con residuos especfi cos
sujetos a las NETs estn codificadas en 40 C.F.R. 268.30 (c) (exencin para el suelo y los
escombros contaminados con residuos F001-F005); 40 C.F.R. 268.31 (a)( 1) (exencin para el
suelo y los escombros contaminados con residuos F020-F023 o F026-F028); 40 C.F.R. 268.32(d)
(l) y (d)(2) (exencin para el suelo y los escombros contaminados con los residuos de la lista de
Califor- nia); 40 C.F.R. 268.33(c) (exencin para el suelo y los escombros contaminados con los
residuos Primer Tercio con un estndar de tratamiento basado en la incineracin); 40 C.F.R.
268.43 (d) (exencin para el suelo y los escombros contaminados con los residuos Segundo
Tercio con una norma de tratamiento basada en la incineracin); 40 C.F.R. 268.35(c), (d) y (e)
(exencin para diversas categoras de residuos del Tercer Tercio).
51
Registro Federal 22.520, 22.634-22.635 (1 de junio, 1990). La exencin nacional para suelos y
escombros contaminados con los residuos peligrosos listados en la norma Tercer Tercio ha sido prorrogada
hasta el 8 de mayo de 1993. Las restricciones globales de evacuacin terrestre para los residuos Tercer Tercio
entraron en vigor el 8 de agosto de 1990.
52
EPA est desarrollando estndares MTDD por separado para los suelos y escombros contami nados con
residuos listados en las NETs. Los estndares MTDD para los escombros se promulgaron en agosto de 1992:
Restricciones de Evacuacin Terrestre para Residuos Listados Nuevos y Es combros Peligrosos, 57 Registro
Federal 37194 (18 de agosto, 1992). La norma recoge 17 tecnolo gas diferentes de tratamiento MTDD
incluyendo la biorrecuperacin que se pueden utilizar para tratar los escombros peligrosos.
152
BI O T RATA M IE N T O DE R ES ID U O S T X I C O S Y PE LI G R O S OS
forma terrestre sin un pre-tratamiento. Mientras tanto, las normas de tratamiento para el
suelo y los escombros contaminados se establecen mediante la emisin de exenciones
genricas o lugar-especficas 53 . Las exenciones se pueden otorgar si el residuo no se
puede tratar para conseguir un nivel especfico, o bien, cuando la tecnologa de
tratamiento no es apropiada para el residuo. El. solicitante debe demostrar que, debido
a que las propiedades fsicas y qumicas de residuo difie ren significativamente de las
que presentaban los residuos analizados durante el desarrollo de la norma de tratamiento,
el residuo no se puede tratar a los niveles especificados o mediante los mtodos
propuestos 54 .
EPA ha propuesto tambin otras posibles soluciones a los problemas plantea dos por
las NETs. En julio de 1990, EPA propuso una serie de reglamentos para llevar a cabo la
accin correctora en las instalaciones de tratamiento, almacena miento y evacuacin
RCRA 55 . Las normas propuestas incorporan varios concep tos importantes. Por ejemplo,
las normas de accin correctora tienen en cuenta un proceso ms flexible de evaluacin
del lugar. EPA espera que la flexibilidad en el proceso de evaluacin de la accin
correctora permita que los lugares RCRA lle guen al estado de limpieza ms rpidamente
de lo que ha sucedido con los lugares Superfondo (Thayer, 1991).
La norma propuesta adopta tambin un estndar basado en la salud para elegir el
nivel apropiado de limpieza en las instalaciones RCRA. Respecto a los residuos
cancergenos, las normas de limpieza para los constituyentes en aguas subterr neas,
aguas superficiales, suelos y aire se basaran en los estndares especficos
medioambientales que existen en la actualidad, como por ejemplo, los niveles mximos
de contaminantes establecidos en el Acta de Agua Potable. Cuando no existan tales
estndares, los estndares de limpieza se estableceran de acuerdo con el rango de
seguridad para riesgos, I * 10' 4 - 1 * 10 6 56 . Se emplearan factores lugar-especficos
para establecer dnde fijar el nivel de limpieza dentro de este rango 57 .
La norma propuesta tambin creara unidades de gestin de accin correctora, o
UGACs, que posibilitaran el tratamiento de los residuos peligrosos dentro de una zona
especfica sin disparar las normas de tratamiento NET (Thayer, 1991). Si se implantasen,
las UGACs representaran una excepcin importante a la aplicabi- lidad de las NETs.
Este concepto hara posible que varias unidades diferentes de gestin de residuos slidos
en una instalacin RCRA fuesen consideradas como una sola unidad a efectos de las
NETs. Los residuos se podran recolectar y verter sobre el suelo dentro de los lmites de
una UGAC sin disparar las normas de trata
53
54
40 C.F.R. 268.44.
40 C.F.R. 268.44(a).
Accin Correctora para Unidades de Gestin de Residuos Slidos en las Instalaciones de Residuos
peligrosos, 55 Registro Federal 30798 (27 de julio, 1990). Estas normas propuestas sus tituirn a las normas
generales de accin correctora que se encuentran ahora en 40 C.F.R. 264.101.
56
55 Registro Federal 30798, 30826 (27 de julio, 1990).
57
Ihdem.
55
LI M I TAC I O NE S D E L A LE GI S L AC I N Y PO L T IC A VI G EN T E .
153
miento NETs; de esta forma se lograra una mayor flexibilidad en la seleccin de los
mtodos de tratamiento (Bakst, 1991) 5X .
Adems, EPA ha propuesto recientemente el establecimiento de una unidad de
almacenamiento y tratamiento denominada edificio de contencin sy . Dentro de esta
unidad se podran tratar y almacenar ciertos residuos peligrosos, incluyendo es combros contaminados, sin disparar los requisitos NETs 60 . Es importante que EPA
haya reconocido que los proyectos de biorrecuperacin in situ a menudo tienen lugar
dentro de estructuras temporales, y haya solicitado sugerencias sobre qu niveles se
deben aplicar en estos edificios de tratamiento con biorrecuperacin . 6I EPA ha
reconocido tambin que se realizan diversos tipos de tratamientos, inclu yendo la
biorrecuperacin, en depsitos y contenedores, y ha propuesto qu se permitan estas
tcnicas de tratamiento dentro de los edificios de contencin 62 .
El Subttulo 1 se aadi al
RCRA como parte de las enmiendas de 1984 . Este subttulo impone a los depsitos
de almacenamiento subterrneo (DAS) una serie de requisitos, inclu yendo requisitos
para la accin correctora, similares a los impuestos en el Subttu lo C del RCRA a los
propietarios y operadores de instalaciones de tratamiento, almacenamiento y
evacuacin (Hill, 1991). En caso de producirse un escape en un DAS, el propietario u
operador probablemente tendr que desarrollar y entregar un plan de accin
correctora 64 . Adems, puede existir una clusula temporal o permanente del DAS que
dispare la accin correctora si se detecta un escape 65 .
Los estados son quienes regulan principalmente la contaminacin con petrleo
provocada por los escapes en los DAS. Existen diferencias considerables entre los
distintos estados a la hora de establecer los estndares de limpieza para los suelos o
aguas subterrneas contaminadas con petrleo o productos relacionados. [L]os
criterios numricos que activan la recuperacin de los suelos contaminados con
productos petrolferos... determinarn si la biorrecuperacin es una tecnologa de
tratamiento viable (Asociacin Nacional de Gobernadores, 1991).
Subtitulo 1: Depsitos de almacenamiento subterrneo.
63
,l
Los reglamentos que implantan el concepto UGAC se promulgaron en febrero de 1993. 58 Registro
Federal 8658 (16 de febrero, 1993).
5<>
Vase Restricciones de Evacuacin Terrestre para Residuos Listados Nuevos y Escombros
Contaminados, 57 Registro Federal 958, 978 (9 de enero, 1992).
M
Bajo el programa NET actual, el tratamiento y almacenamiento de residuos peligrosos dentro de una
estructura es considerado como una pila externa de residuos, lo que a su vez es considerado como un tipo de
evacuacin terrestre prohibida. 57 Registro Federal 958, 978. (9 de enero, 1992).
(,
154
B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S Y PEL I GR O S O S
46
40 C.F.R. 270.65{a).
67
40 C.F.R. 261.4{e),(f).
Vase definicin de estudio de tratabilidad en 40 C.F.R. 260.10.
6
' Las oficinas regionales de EPA, o los oficiales estatales en los estados autorizados, pueden aprobar
cantidades adicionales.
70
De C.F.R. 261.4(f)(l) a (f)(H)71
CERCLA Seccin 121(d)(2)(A), 42 U.S.C. 9621 (d)(2)(A).
1,6
L IM I TAC I O N E S DE L A L EG I S L AC I N Y PO L TI C A V IG E N TE .
155
Las partes potencialmente responsables son aquellas personas que tengan o puedan tener la
responsabilidad de parte o de todo el coste de limpieza en una zona Superfondo. Las PPRs pueden incluir a
las personas propietarias de una instalacin de evacuacin de residuos, a las que organiza ron la evacuacin
de sustancias peligrosas en tal instalacin, o a aquellas que transportaron sustan cias peligrosas a dicha
instalacin. 42 U.S.C. 9607(a).
72
73
Plan Nacional de Contingencia para la Contaminacin con Petrleo y Sustancias Peligrosas;
Dictamen Final, 55 Registro Federal 8666, 8760 (8 de marzo, 1990).
74
40 C.F.R. 268.44.
75
55 Registro Federal 8666, 8761 (8 de marzo, 1990).
156
76
7 7
7
Acta de Enmiendas y Reautorizacin del Supcrfondo, 1986 (SARA), Pub. L, No. 99-499.
42 U.S.C. 962Hb).
42 U.S.C. 966(b).
157
Las seis zonas corresponden a la zona Superfondo de Libby, Libby, Montana; el Derrame del Oleoducto
de Park City, Park City, Kansas; la zona Superfondo de Allied Signal, St. Joseph, Michi gan; la Base Area de
Eielson, Alaska; la Base Area de ill en Utah; y la zona Superfondo de Brookhaven, en Brookhaven,
Massaehusetts (U.S. I-PA. 199l<).
158
to de los productos disponibles (Barron, 1991). Este sistema permitir a las agen cias
reguladoras federales y estatales evaluar rpidamente los productos alternati vos cuando
tengan que seleccionar medidas correctoras para la limpieza de derra mes de petrleo.
El Programa de Evaluacin de Tecnologa Innovadora del Superfondo
(SITE) se estableci en 1986. Medante el programa SITE, EPA fi nancia parcialmente
los proyectos para evaluar el rendimiento y coste de las tec nologas alternativas e
innovadoras emergentes. Las tecnologas innovadoras son aqullas de las que faltan
datos sostenidos y fiables en relacin a la aplieabilidad y rendimiento de la tecnologa.
Las tecnologas emergentes son las tecnologas a escala piloto (Bakst, 1991). Hasta la
fecha, se han elegido 12 zonas bajo el progra ma SITE para la aplicacin de la
biorrecuperacin en el tratamiento de diversos medios contaminados (Glass, 1991).
El programa SITE.
159
ha caracterizado los logros conseguidos hasta la fecha cuando afirm: Creo que el
progreso realizado es ...un progreso de colaboracin entre la industria, el go bierno y la
comunidad investigadora e indica lo que se puede conseguir cuando todos los sectores
implicados cooperan (U.S. EPA, i 99la).
80
81
160
89
90
Sin embargo, conforme a la Seccin 5(h)(3) del TSCA, las sustancias qumicas fabricadas o procesadas
solamente en pequeas cantidades (como determina EPA por norma), y tan slo para l&D, estn exentas de los
requisitos de notificacin de la Seccin 5.15 U.S.C. 2604(h)(3).
91
15 U.S.C. 2607(b).
92
El amianto seria un ejemplo de sustancia qumica listada de forma implcita en ei inventario del TSCA.
93
Propuesta de Poltica Sobre Algunos Productos Microbianos, 49 Registro Federal 50886 (31 de
diciembre, 1984). La Declaracin de Poltica de EPA se public dentro de un documento ms amplio titulado
Propuesta para un Marco Reglamentario de Biotecnologa, 49 Registro Federal 50856 (31 de diciembre,
1984).
94
Sustancia qumica se define segn el TSCA como cualquier sustancia orgnica o inorgnica con
identidad molecular particular, incluyendo: (i) cualquier combinacin de tales sustancias pro vocada totalmente
o en parte como consecuencia de una reaccin qumica provocada por el hombre o la naturaleza... TSCA
Seccin 3(2), 15 U.S.C. 2602(2).
161
En respuesta a los sectores crticos que argumentaban que la aproximacin pro puesta
por EPA a la hora de controlar los microorganismos nuevos se basaba en los procesos
mediante los cuales se crearon dichos organismos, en vez de basarse en el riesgo que
pudiesen suponer, EPA cambi su aproximacin a la definicin de microorganismos
nuevos segn la Seccin 5 del TSCA. En 1986, como parte del Marco Coordinado para
la Regulacin de la Biotecnologa, EPA emiti una De claracin de Poltica anunciando
que los microorganismos intergenncos (los que implican la combinacin del material
gentico procedente de organismos de diferentes gneros) se consideraran sustancias
qumicas nuevas bajo la Seccin 5 del TSCA 95 . Quienes intentasen fabricar estos
microorganismos con fines comerciales tendran que entregar una NPM a EPA. La
agencia tambin solicit una entrega voluntaria de NPMs a quienes intentasen introducir
en el medio ambiente microorganismos intergenricos con fines de investigacin, y a
quienes trabajasen con microorganismos patgenos o que contuviesen material gentico
procedente de patgenos 96 .
Por lo tanto, segn el programa actual TSCA de biotecnologa, quienes tengan la
intencin de utilizar microorganismos intergenricos para la biodegradacin comercial
de residuos peligrosos tendrn que entregar un NPM a EPA. Quienes tengan intencin de
introducir en el ambiente microorganismos intergenricos para investigar la
biorrecuperacin, sern animados a que entreguen a EPA un NPM de forma voluntaria.
EPA no ha recibido ningn NPM hasta la fecha en relacin a microorganismos
intergenricos utilizados con fines de biorrecuperacin. Los proyectos de biorre cuperacin se suelen centrar en la bioestimulacin o el bioaumento de los micro organismos, ya presentes en una zona, que son capaces de descomponer los cons tituyentes peligrosos en los suelos o aguas subterrneas (Glass, 1991). Sin embargo, la
industria de biorrecuperacin muestra cada vez un mayor inters hacia el uso de
microorganismos modificados genticamente. Muchos expertos creen que se utili zarn
microorganismos modificados genticamente para la biorrecuperacin en biorreactores, y
quizs en demostraciones de campo, durante los prximos cinco- diez aos (Garg y
Garg, 1990; Glass, 1991; Roy, 1991). Como sealan Sayler y Day (1991), La prxima
generacin de productos y procesos de biorrecuperacin incorporar de forma rutinaria
la ingeniera gentica para mejorar las cepas y con seguir un mayor control del proceso,
garantizar un alto rendimiento, y controlar la actividad ambiental.
Se cree que los microorganismos modificados genticamente ofrecern varias
ventajas para la biorrecuperacin. Muchos expertos creen que los microorganis mos
modificados genticamente permitirn ejercer un mayor control sobre las ru tas
degradadoras enzimticas, incluyendo la direccin del flujo metablico para
1.5
1.6
EPA cree que los investigadores que tengan intencin de introducir al ambiente microorga nismos
intergenricos normalmente entregarn una NPM voluntaria. La agencia no ha recibido nin guna NPM
bajo las provisiones de patgenos de la declaracin de poltica de 1986.
162
9 7
15 U.S.C. 2607(e).
163
para un uso no listado, habra requerido la entrega de una notificacin de uso nuevo.
En julio de 1991, EPA reuni a un subcomit del Comit Consejero para la Ciencia
Biotecnolgica (BSAC) con el fin de plantear las cuestiones cientficas surgidas en el
borrador de una propuesta normativa TSCA de biotecnologa, ac tualmente en fase de
desarrollo por parte de la agencia". Las normas del borrador no proponen continuar con
la aproximacin delineada en el documento de 1988; es decir, establecer una lista con
todos los usos comerciales de los microorganis mos que se producen de forma natural, y
exigir la entrega de notificaciones de uso nuevo para los microorganismos no incluidos
en la lista.
En las normas propuestas en el borrador de julio de 1991, EPA expres su idea de
cambiar la definicin de microorganismos nuevos adoptada en la Declara cin Poltica
de 1986. La nueva norma probablemente presentar varias alternati vas para definir qu
microorganismos estaran sujetos a notificacin bajo la Seccin 5 del TSCA. La
aproximacin preferida por EPA es definir microorganismos nuevos como aquellos con
tendencias hereditarias deliberadamente modificadas, exceptuando los microorganismos
que entran dentro de algunas categoras de ex clusin. Bajo el programa actual, los
microorganismos que se producen de forma natural no se consideraran nuevos. Adems,
segn la aproximacin preferida por EPA, los microorganismos utilizados para la
biorrecuperacin que entran en una de las categoras de exclusin, de modo similar, no
estaran sujetos a^xamen bajo la Seccin 5~del TSCA.
En resumen, la [bjiorrecuperacin probablemente no se ver afectada de for ma
significativa por el TSCA si no se emplean microorganismos modificados ge nticamente
(Bakst, 1991).
Biorrecuperacin de PCBs
Los bifenilos policlorados (PCBs) se encuentran dentro de una posicin reglamen taria
nica. Cuando el Congreso aprob el TSCA en 1976, destac expresamente a los PCBs
para su regulacin. Mediante la Seccin 6(e) del TSCA l<w . el Congreso prohibi la
fabricacin, procesamiento o distribucin de PCBs a partir del 1 de enero de 1978,
excepto si se fabricaban para uso completamente interno, y orden a EPA promulgar
normas que controlasen la evacuacin de los PCBs l0t .
Las normas de EPA para la evacuacin de PCBs son aplicables a los PCBs y
artculos con PCB que contengan concentraciones de PCB de 50 ppm o ms 102 . Los
PCBs, tal y como se definen en las normas, incluyen: fluido dielctrico de aceite mineral
y otros lquidos que contienen concentraciones de PCB de 50 ppm
o ms, pero menores a 500 ppm; suelos y otros materiales slidos contaminados
** El BASC es un comit cientfico que aconseja sobre cuestiones de biotecnologa; forma parte de la
Oficina de Prevencin, Pesticidas y Sustancias Txicas de EPA (OPPTS).
100
15 U.S.C. 2605{e).
101
Ibd.
102
40 C.F.R. 761,60.
164
con PCBs, y los materiales dragados y fangos del tratamiento de aguas residuales
municipales I03 . Los artculos con PCB incluyen: transformadores, condensadores, y otros
artculos fabricados que contienen PCBs l04 .
Las normas sobre PCBs plantean dos tipos de permisos
de evacuacin; permisos comerciales y permisos I&D (Giamporcaro, 1991). Los
permisos comerciales pueden ser concedidos por la oficina central de EPA o por las
oficinas regionales. Las normas PCB normalmente consideran que los PCBs y los
artculos PCB se pueden evacuar en una incineradora, un vertedero de residuos qumicos,
o en una caldera de alto rendimiento ,05 .
Las normas tambin contienen provisiones que permiten el uso de mtodos
alternativos para la destruccin de estos materiales 106 . Los mtodos alternativos tienen
que lograr un nivel de rendimiento equivalente al que se consigue mediante incineracin
o el uso de las calderas de alto rendimiento. Para que se consideren equivalentes, los
mtodos alternativos, como por ejemplo la biorrecuperacin, deben reducir las
concentraciones de PCBs por debajo de 2 ppm por cada cong nere de PCB, tal y como se
mide con la cromatografa de gases !07 . El efecto prctico de esta norma es que la
concentracin real de PCBs en una muestra contami nada que se considera evacuada
variar en funcin del nmero de congneres de PCBs presentes en la muestra. Por
ejemplo, si la muestra contaminada contienen solamente un congnere de PCB, la
concentracin final de PCBs tendra que ser de-2 ppm o menos. Sm embargo, si 1a
muestra - contuviese seis congneres diferentes, la concentracin final de PCBs en la
muestra podra ser de 12 ppm o menos. Esta flexibilidad posibilita el uso de mtodos de
evacuacin alternativos.
EPA ha concedido 38 permisos comerciales para la evacuacin de PCBs. Vein ticuatro
de estos permisos han sido para mtodos de evacuacin alternativos, aun que solamente
uno implicaba la descomposicin biolgica de los PCBs.
Permisos de operacin comercial.
Las normas sobre PCBs tambin tienen en cuenta los permisos I&D para su
evacuacin l08 . Los permisos que implican el uso de menos de 500 Ib de material con
PCBs se revisan a nivel regional, mientras que los que implican 500 Ib o ms son
revisados por la oficina central de EPA.
Hasta la fecha, EPA ha aprobado 15 permisos I&D que implicaban mtodos de
descomposicin biolgica para los PCBs. Seis de estos permisos se han aprobado a nivel
central, y nueve a nivel regional. Toda la investigacin se ha centrado en el uso de
microorganismos producidos de forma natural, y en diversos mtodos de descomposicin
biolgica. Cada ao sube el nmero de solicitudes I&D. Por ejemPermisos l&D.
1 0 3
40 C. F.R . 761.3.
'* Ibid.
m
40 C.F.R. 761.60(a),(b).
40 C. F.R. 761.60(e).
1 0 6
lu7
Desde un punto de vista qumico, los PCBs estn formados por 209 estructuras qumicas diferentes,
denominadas congneres.
I 0
* 40 C. F.R. 761.60(i)(2).
165
po, de los seis permisos expedidos por la oficina central de EPA, el primero se concedi
en 1988 para el uso del hongo de carne de gallina con el que se tratara suelo
contaminado con PCBs. En 1990, se entregaron dos permisos I&D. Uno era para un
estudio in situ de los factores que incluyen sobre la biorrecuperacin anae robia de los
sedimentos de un estanque contaminados con PCBs. El otro era para el tratamiento de
suelos y sedimentos contaminados con PCBs en un biorreactor a escala piloto. En 1991
se concedieron tres permisos I&D. Dos fueron para el trata miento in situ de suelos y
sedimentos de ro contaminados, y el tercer proyecto consista en un estudio sobre la
eficacia al combinar fotolisis y biorrecuperacin en el tratamiento de suelos
contaminados.
Aunque la evacuacin de PCBs se debe
llevar a cabo de acuerdo con un permiso especial emitido bajo la Seccin 6(e) del
TSCA, las provisiones recogidas en los programas RCRA y Su perfondo tambin se
deben tener en cuenta cuando existe una contaminacin con PCBs en las zonas cubiertas
por estos dos programas. En las normas RCRA, los PCBs se tratan como un
constituyente peligroso, que si aparece en los residuos slidos podr ser razn suficiente
como para que stos se incluyan en la lista de residuos peligrosos l09 . De hecho, algunos
residuos P-listados y U-listados contie nen PCBs. Estos residuos deben cumplir los
requisitos de tratamiento y evacuacin, tanto del TSCA como del RCRA li0 . Es decir, la
concentracin de PCBs en un residuo peligroso listado en el RCRA se debe reducir
segn los requisitos de evacuacin de PCBs del TSCA, tal y como se discuti
anteriormente.
Adems, la eleccin del mtodo de tratamiento para la evacuacin de materia les
contaminados con PCBs en una instalacin RCRA o zona Superfondo viene determinada
por los procesos de evaluacin de la zona llevados a cabo por los respectivos programas.
El hecho de que un propietario u operador de una instala cin RCRA, o una parte
potencialmente responsable en una zona Superfondo, haya obtenido un permiso I&D
para utilizar una tecnologa en particular con el fin de degradar los materiales
contaminados con PCBs, no limita la eleccin de alguna otra tecnologa para la accin
correctora en dicha zona. Por ejemplo, varias de las zonas que han recibido permisos
I&D para PCBs bajo el TSCA estn en un proce so de accin correctora conducido por el
RCRA. Estos permisos incluyen una declaracin segn la cual el permiso de PCBs no se
puede utilizar para predeterminar
o apoyar la seleccin de ciertas medidas correctoras bajo el RCRA.
En relacin a esto, es importante destacar que aunque existe un volumen con siderable de investigacin para evaluar la eficacia de la biorrecuperacin de los PCBs,
hecho evidenciado por el nmero de permisos I&D concedidos durante los ltimos aos
para la biorrecuperacin de los PCBs, la investigacin an est en sus etapas iniciales, y
todava no se ha demostrado la eficacia de estos mtodos
Evacuacin de PCBs en zonas RCRA y superfondo.
166
para degradar los PCBs a gran escala. Es de esperar que durante la prxima dca da,
cuando la investigacin avance, se puedan conceder ms permisos comerciales para la
biorrecuperacin de los PCBs.
Conclusin
Durante los ltimos aos se ha avanzado mucho a la hora de plantear las reas
problemticas en la aplicacin de la biorrecuperacin; queda an mucho por ha cer.
Quizs el logro ms importante haya sido el establecimiento de una infraes tructura
para la recopilacin y diseminacin de datos e informacin sobre biorre cuperacin.
Estos esfuerzos deben continuar.
1,1
7 U.S.C. 150aa(c).
112
114
167
El rea que puede necesitar de una atencin especial quizs sean los obstcu los o
los desincentivos reglamentarios respecto al uso de esta tecnologa. En parti cular, las
exenciones nacionales recogidas en las NETs del RCRA pueden obsta culizar, al menos
a corto plazo, la aplicacin de esta tecnologa. Adems, cuando se desarrollen las
normas MTDD para los suelos y escombros contaminados, se debe enfocar
cuidadosamente el impacto potencial sobre la biorrecuperacin.
Por ltimo, la promulgacin de las normas finales sobre biorrecuperacin del
TSCA puede ayudar a acelerar el desarrollo de la siguiente etapa en la biorrecupe racin
el uso de microorganismos genticamente modificados. Estas normas clarificarn
la naturaleza y alcance de la aplicabilidad del TSCA para el uso de microorganismos en
la biorrecuperacin, y, por otra parte, ayudar a las empresas de biorrecuperacin a
evaluar mejor los costes de inversin asociados al desarro llo de los microorganismos
genticamente modificados para este propsito.
Referencias bibliogrficas
Bakst, J. S. 1991. Impact of present and future regulations on bioremediation. J. Ind. Microbiol. 8:13-22.
Barron, T. 1991. EPA closing in on standards for oil spil) bioremediation. Environ. Today
2:1,59.
Day, S. M. 1990. Federal regulations and policies hold the veto power over commercialization of biotreatmentan industry perspectiva. Hazardous Materials Management,
HAZMACON 90, Anaheim, CA.
Garg, S., and D. P. Garg. 1990. Genetic engineering and pollution control. Chent. Eng. Progr.
86:46-51.
Giamporcaro, D. E. 1991. Bioremediation waste control more promising. Reprint. BioWorld. lo
Publishing, San Mateo, CA.
Glass, D. J. 1991. The promising hazardous waste bioremediation market in the United States.
Reprint. Decisin Resources, Burlington, MA.
Hill, R. L. 1991. An overview of RCRA: The mind-numbing provisions ofthe most complicated environmental statute. Environ. Law Rep. 21:10254-10276.
National Govemors Association. 1991. States Use of Bioremediation: Advantages, Constraints and Strategies. National GovernorsAssociation, Washington, D.C.
Nicholas, R. B, and D. E. Giamporcaro. 1989. Natures prescription. Hazmat World , pp. 30-36,
June.
OTA. 1991. Bioremediation for Oil Spills. Office of Technology Assessment, OTA-BP-OU.S. Government Printing Office, Washington, D.C., May.
Roy, K. A. 1991. Ecovas hopes for success hitched to bioremediations rising star. Hazmat
World, pp. 40-43, May.
Sayler, G. S., and S. M. Day. 1991. Special Report: BioremediationExperts explore va- rious
biological approaches to cleanup. Hazmat World, pp. 51-53 (January).
Spann, J. J. 1991. EPA workshop on irnovative technologies. Water Environ. Technol., p. 18
(sidebar).
Thayer, A. M. 1991. Bioremediation: Innovative technology for cleaning up hazardous waste.
Chem. Eng. News 69:23-25, 28, 32-37, 41-44.
168
U.S. EPA. 1988. ROD (Record of Decisin) Annual Report. U.S. Environmental Protection
Agency, Washington, D.C., July.
U.S. EPA. 1990. Summary Report on the EPAIndustry Meeting on Environmental Appli cations of Biotechnology. U.S. Environmental Protection Agency, Washington, D.C.,
February 22.
U.S. EPA. 1991a. Summary of the Second EPA/Industry Meeting on Environmental Appli cations of Biotechnology. U.S. Environmental Protection Agency, Washington, D,C.,
June 14.
U.S. EPA. 1991 b. Furthering the Use of Innovative Technologies in OSWER Programs.
U.S. Environmental Protection Agency, Washington, D.C., August, Doc. No. 9380.0-17FS.
U.S. EPA. 1991c. Bioremediation in the Fietd. U.S. Environmental Protection Agency,
Washington, D.C., December.
U.S. EPA, 199W. Bioremediation Research Program Strategy. U.S. Environmental Protec tion Agency, Washington, D.C., December.
Captulo
BIORRECUPERACIN IN SITU:
FUNDAMENTOS Y PRCTICAS
Carol D. Litchfield
Chester Environmentaf
MonroeviHe,
Pennsylvania
169
170
Pozo
Pozos
de
de
control recuperacin
Posible sjsiema
de
tratamiento
171
172
geotcnicos deben determinar una serie de factores: la naturaleza exacta y exten sin
horizontal y vertical de la contaminacin; si impacta en el agua subterrnea o tan slo en
los suelos de la zona vadosa; la profundidad hasta el agua subterrnea; la conductividad
hidrulica y/o la permeabilidad de los suelos (es decir, si se pue de llevar el agua y los
nutrientes a travs de las zonas saturada y vadosa, y con qu rapidez); la productividad
especfica y el coeficiente de almacenamiento del acu- fero; la zona de influencia de los
pozos de recuperacin o reinyeccin; la direc cin del flujo de las aguas subterrneas; la
capacidad del acufero para recibir el agua reciclada; la capacidad de intercambio de
cationes en los suelos para estimar la adsorcin de nutrientes por parte de las partculas
de suelo; y la composicin aninica y catinica de los suelos y aguas subterrneas.
Se han desarrollado mtodos estndar para algunos de estos ensayos geotcni cos 5
(vase Tabla 7.1), y se deben utilizar si se est proyectando la biorrecupera- cin in situ
o una estrategia correctora ms tradicional. Para otros tipos de ensa yos, las Refs, 30 y 80
contienen detalles sobre los procedimientos aceptados. En muchos estados se exige que
un hidrogelogo/gelogo cualificado sea quien reali ce los ensayos. Los requisitos de los
permisos estatales estn cambiando constan temente, por lo tanto, s existen dudas acerca
de la situacin en un estado en particular, lo mejor es consultar con el departamento de
medio ambiente de dicho estado.
Adems, es imprescindible conocer los mtodos de perforacin e instalacin de los
pozos de control para asegurarse de que se utiliza el diseo correcto con el fin de
controlar de forma ptima la BIS l > .
Si se desea tener xito en el tratamiento de cualquier zona contaminada, es necesario
tener un conocimiento lo ms amplio posible sobre geologa, geoqumi ca, e hidrologa,
ya que un aspecto importante de la BIS es el reciclaje o introduc cin del agua en los
suelos cerca de la superficie o subsuperfcie. Es crucial, en tonces, que se establezca un
control hidrogeolgico para que el agua no entre en zonas no deseadas y, de esta forma,
se extienda an ms la contaminacin. Tam-
Nmero ASTM
D
4
2
2
D
D-1587 o D-2937
D-2488
D-5126
173
bien es importante evitar el uso excesivo de nutrientes, y el aumento de microor ganismos y del flujo de las aguas subterrneas en las zonas no contaminadas.
Adems, es fundamental conocer la geologa y geoqumica de la zona para evitar
interacciones no deseadas entre los suelos o aguas subterrneas y los nu trientes
aadidos. Esto es especialmente relevante cuando se aaden fosfatos a suelos con un
alto contenido en calcio y a aguas subterrneas, o cuando se aade oxgeno a ambientes
que contienen altas cantidades de hierro o manganeso reduci dos que pueden oxidarse.
Ambas situaciones provocan una precipitacin y el con siguiente atascamiento de la
formacin. Unos altos niveles en calcio, hierro o mag nesio no son problemas
insuperables, pero se deben tener en cuenta para poder disear sistemas que controlen o
eliminen el problema.
Otras caractersticas locales que se deben evaluar para cualquier actividad co rrectora son: la localizacin de objetos enterrados, como cables elctricos, tubos de
agua, alcantarillas; y la situacin del espacio exterior, es decir, topografa, pre sencia de
tuberas suspendidas, cables elctricos, etc., y la localizacin de edifi cios,
aparcamientos, carreteras, u otras estructuras y zonas de actividad. Todos estos
elementos pueden influir sobre la localizacin del equipo, sobre cules son las fuentes
de contaminacin, e incluso sobre la extensin y velocidad migratoria de la zona
contaminada.
Caractersticas microbianas
La premisa bsica para una BIS es que los microorganismos estn presentes en la zona
subsuperfcial, que se adapten a los contaminantes, y que estn presentes todos los
nutrientes necesarios o se puedan aadir para lograr una biodegradacin ptima de los
contaminantes.
Esto parece algo obvio y fundamental, pero, en fechas tan recientes como los aos
70, se podan encontrar datos en la literatura especializada en relacin a las bajas cifras
de microorganismos que existan en las aguas subterrneas. Se lleg a la hiptesis de
que el agua que se filtraba a travs del suelo perda todos los micro organismos y, a
consecuencia de ello, las aguas subterrneas se mostraban esen cialmente estriles. En
1973, McNabb y Dunlap 59 revisaron la literatura existente y afirmaron, al contrario de
las creencias prevalentes, que los microorganismos estaban muy extendidos en la
subsuperficie. Por lo tanto, postularon que exista la posibilidad de una degradacin
microbiana de los materiales orgnicos en las aguas subterrneas. Ghiorse y Balkwill,
durante un estudio realizado en las zonas primitivas de Oklahoma y Louisiana 1 ,
demostraron tambin que exista una poblacin microbiana muy diversa en la
subsuperficie.
Sin embargo, muchos cientficos crean que los microorganismos obtenidos en la
subsuperficie, de hecho, eran contaminantes derivados de los suelos superficia les. Esta
cuestin no se resolvi hasta que McNabb y Mallard 60 , y Wilson y colaboradores 1 ' 4 ,
describieron una tcnica para recuperar suelos subsuperficiales no contaminados. La
tcnica depende de un dispositivo de recorte acoplado a un ex- trusor utilizado para
empujar el suelo del portatestigos w>95 . Se utiliz una modificacin de esta tcnica
durante el programa de perforaciones profundas llevado a
174
cabo en Savannah River, Carolina del Sur, donde se aislaron e identificaron mi croorganismos en testigos (controles) sacados a 265 m 7 . Algunos estudios realizados
en Alemania tambin han demostrado la presencia de microorganismos en la
subsuperfcie 90 . Ghiorse y Wilson 32 publicaron una revisin de los mtodos de
deteccin, distribucin y actividades de los microbios en los ambientes subsuperficiales que mostraba claramente los avances logrados en nuestros conocimientos
sobre la ecologa microbiana en la subsuperfcie durante los ltimos 10-15 aos.
Sin embargo, no es suficiente con que los microorganismos estn presentes,
tambin se deben adaptar al ambiente y a los contaminantes. En 1972, McKee et al 61 ,
informaron de que las especies que se producen de forma natural de los gne ros
Pseudomonas y Arthrobacter estaban implicadas en la desaparicin de la ga solina
adsorbida por las partculas de suelo. La gasolina desapareci a la veloci dad de 2 g de
gasolina/g de clulas bacterianas. Al ao siguiente, Litchfield y Clark 54 informaron de
la existencia de importantes cantidades de bacterias hidrocarbono- clsticas
(degradadoras de hidrocarburos) presentes en las aguas subterrneas con taminadas
con hidrocarburos del petrleo, y de que estas cifras estaban relaciona das con la
concentracin del contaminante. Segn estos estudios, se haba producido una
adaptacin natural para posibilitar la biodegradacin de los hidrocarburos del
petrleo.
Existen estudios similares que tratan la contaminacin con hidrocarburos no
petrolferos. Spain y Van Veld demostraron que las poblaciones presentes en los
sedimentos fluviales del ro Esc ambla ^cuando se colocaban^ en ecotestigos, sep~ da adaptar a la exposicin repetida al ct-nitrofenol 82 . Este concepto de adaptacin
microbiana a los contaminantes orgnicos tambin fue examinado por Aelion et aL,
este grupo estudi las tasas de mineralizacin de algunos compuestos seleccio nados l .
De los cinco compuestos aromticos y bromuro de etileno (EB) ensayados por ellos,
solamente el a-ntrofenol mostr la respuesta de adaptacin deseada. El fenol, acresol, y EB se mineralizaron tan rpidamente que los autores llegaron a la
conclusin de que la adaptacin de las poblaciones al acufero ya haba tenido lugar 1 .
Lee et al. presentaron un trabajo adicional documentando la adaptacin o se leccin de microbios para degradar contaminantes en una zona contaminada con
creosota en Conroe, Texas 49 . En los microcosmos conseguidos con suelos proce dentes
de la zona contaminada en este lugar, haba seis compuestos especficos de creosota
con una prdida de uno dos rdenes de magnitud mayor que la observa da en los
microcosmos preparados con suelos procedentes de una zona limpia cer cana 49 .
De estos estudios surge la duda de si los contaminantes ejercen presiones se lectivas sobre la poblacin y, por lo tanto, apoyan a los microorganismos capaces de
degradar contaminantes y les permiten sobrevivir en mayor nmero que los dems, o
si se produce una alteracin gentica que permite a las nuevas bacterias degradadoras
del contaminante competir mejor que los otros microorganismos. Existen pruebas
circunstanciales a favor de ambas teoras. Ogunseitan et aL en contraron plsmidos en
cantidades significativamente mayores en las bacterias ais ladas de una zona
contaminada que en las de una zona primitiva (limpia) 69 . Jain et
175
al. demostraron tambin que los plsmidos catablicos que se producen de forma
natural se podan mantener sin la introduccin de cepas autctonas 42 . Ms recientemente, se constat la presencia de plsmidos en gran nmero de bacterias aisla das
procedentes de las perforaciones profundas realizadas en el Savannah River 29 . Por lo
tanto, se puede producir un intercambio gentico y modificaciones genti cas naturales
en respuesta a los compuestos orgnicos introducidos.
Tambin hay que sealar que se han encontrado mltiples poblaciones de bac terias
coexistiendo en los suelos 47 - 77 . Azam y Hodson han llegado a resultados similares
estudiando conjuntos microbianos martimos; en este caso, observaron ci nticas no
lineales durante la mineralizacin de los compuestos orgnicos en un rango de
concentracin de sustrato de tres rdenes de magnitud. Los autores atri buyeron esto a
la existencia de diversas poblaciones con distintas constantes de afinidad que
respondan a las diferentes concentraciones de los sustratos 6 . Estas poblaciones
mltiples provocan cinticas multifsicas para la biodegradacin. El grado en el que
se produce esto durante una BIS real an no se ha investigado. Si las cinticas
multifsicas fuesen operativas en aguas subterrneas contaminadas, esta informacin
servira para responder a los sectores crticos que consideran la BIS no aplicable en
una zona determinada porque las concentraciones son dema siado altas o bajas.
Finalmente, para que los microorganismos degraden activamente a los conta minantes, deben contar con suficientes nutrientes. Normalmente, la subsuperficie es
deficiente en uno o ms nutrientes o micronutrientes, por lo tanto, para lograr una
degradacin ptima es crucial llevar a cabo ensayos de tratabilidad con el fin de
establecer qu componentes son necesarios y en qu concentraciones. Esto im plica el
ensayo de los suelos y de las aguas subterrneas para conseguir fuentes de nitrgeno,
como amonaco o nitratos; para obtener fosfatos y otros micronutrien tes. Swindoll et
al. 85 y Lewis et al. 50 demostraron la importancia de estos nutrien tes en la degradacin
microbiana. Lewis et al. descubrieron que la duracin del perodo de retardo era
mayor en las poblaciones microbianas con ambientes limi tados en nitrgeno o fsforo,
y que la duracin era menor con la adicin de nitr geno o fsforo 50 . Tambin es
importante saber si el sistema es anxico u oxidado, ya que esto afectar al estado de
oxidacin-reduccin de muchos elementos y, por lo tanto, a su biodisponibilidad. En
1987, Barker et al. demostraron que unos nive les bajos de oxgeno limitaban la
biodegradacin del benceno, tolueno y xileno (BTX). En general, los ensayos de
tratabilidad suelen consistir en la adicin de oxgeno u otro receptor de electrones a
los materiales en el acufero, junto con una fuente de nitrgeno y/o fosfatos, y quizs
tambin oligoelementos o potasio.
Limitaciones a la BIS
Existen cuatro factores importantes que pueden limitar la aplicacin de una BIS:
Tiempo.
Metabolitos secundarios o recalcitrantes.
176
Geoqumica e hidrologa.
Factores ambientales.
El grado en el que estos factores limitan la aplicacin de una BIS a menudo es ms una
cuestin poltica y econmica que cientfica. Sin embargo, hay situaciones,
especialmente en lo que respecta a los productos de degradacin y al control hidrogeolgico, que podran limitar la aplicacin de esta tecnologa.
Tiempo
177
Hay que ser extremadamente cuidadosos, sin embargo, a la hora de extrapolar los
datos de laboratorio a situaciones reales. Recientemente se dio una situacin
potencialmente limitante en el laboratorio para una zona que contena clorobence- no.
Uno de los intermediarios en la biodegradacin del clorobenceno es el 3-cloro catecol 73 .
Cuando se observaron las bacterias degradadoras del clorobenceno, se descubri que
algunas colonias aparecan-de color prpura. Esta coloracin era resultado de la
acumulacin de 3-clorocatecol. Afortunadamente, las bacterias ais ladas de las colonias
no purpreas podan utilizar el 3-clorocatecol y el cloroben ceno. De esta forma, se
pudo demostrar que el consorcio microbiano natural no permitira la acumulacin de
este intermediario durante la BIS, y la agencia estatal aprob la biorrecuperacin in
situ en esta zona 68 . Por lo tanto, hay que tener en cuenta que el consorcio bacteriano
natural quizs consiga mineralizar mejor las mezclas complejas de lo que indican los
cultivos puros o incluso los estudios de laboratorio y, de este modo, se evite la
acumulacin de productos secundarios me- tablicos.
Existen compuestos, mezclas, y sustancias que son recalcitrantes, o para las cuales
no se ha desarrollado todava ningn tratamiento in situ que sea prctico. Entre estos
compuestos estn: algunos de los bifenilos policlorados (PCBs), espe cialmente los
PCBs congneres mayores del 1.248; los hidrocarburos policclicos aromticos (HPAs)
con anillos de seis miembros o ms; los residuos mezclados con radioistopos; el
amianto; y algunos metales, como cadmio, mercurio o cro mo. Si existen metales en
una zona durante los estudios de tratabilidad, se deber demostrar que no se produce
una movilizacin de los complejos metlicos que anteriormente permanecan
inmviles. Algunos cambios sutiles en el pH o en el contenido orgnico pueden alterar
la afinidad o estado de oxidacin de un metal y hacerle ms mvil, con lo que se crea
un problema donde anteriormente no exista. De modo similar, el metabolismo
microbiano puede provocar la precipitacin de metales en forma de sulfuros en
condiciones anaerobias. Esto puede ser ventajoso o provocar un atascamiento en el
acufero. La utilidad de la precipitacin selectiva in situ de los metales an tiene que
ser investigada en este campo.
Geoqumica e hidrologa
Un factor limitante en la BIS es el control de las aguas subterrneas. Por supuesto, se
trata de un problema para cualquier tecnologa correctora, pero se vuelve ms
relevante cuando se estn aadiendo nutrientes y/o oxgeno a la subsuperficie. Si no
existe un control sobre la distribucin de las aguas recicladas con nutrientes, no
dispondremos de ninguna indicacin acerca de si las enmiendas llegan a la zona
contaminada o estn afectando a otras regiones. Esto no solamente prolonga el perodo
de recuperacin, y quizs conduzca a un biotratamiento incompleto, sino que adems
es muy costoso y provoca un enriquecimiento innecesario de las aguas subterrneas.
Las condiciones que pueden provocar un escenario como ste son: un lecho de roca
fracturado o un acufero definido de forma pobre o incompleta.
Aunque la arcilla no sea el mejor medio para una BIS, siempre que sea posible
mover el agua y los nutrientes a travs del acufero (aunque sea lentamente), se
178
podr implantar la BIS. Una formacin poco permeable tardar ms en alcanzar los
niveles de limpieza, pero si el tiempo no es un factor crtico, la BIS es posible en las
formaciones de arcilla arenosa o arcillosas. Si se dan estas circunstancias, cualquier
tecnologa de tratamiento emplear ms tiempo del. qu necesitara en una formacin
ms permeable (>10 5 cm/s).
Factores ambientales
Los factores ambientales que se citan con ms frecuencia como influyentes en la BIS
son: temperatura, pH, y potencial redox. Ninguno de estos factores es necesa riamente
una limitacin para la BIS. La temperatura de las aguas subterrneas no cambia con
las estaciones. Puede que haya un ligero incremento de 3 a 4 C en Jas aguas
subterrneas poco profundas sureas durante el verano, y una cada similar en las
aguas subterrneas norteas durante el invierno, pero estas fluctuaciones no estn
fuera de los lmites del crecimiento microbiano. De hecho, el consorcio mi crobiano
presente en el acufero se ha adaptado a estas condiciones, y es capaz de
metabolizarse y reproducirse a temperatura ambiente.
El pH del acufero normalmente es de 6-9. En algunos casos los contaminantes
han bajado el pH a 4, pero incluso en esta situacin se ha podido demostrar la
biodegradacin en el laboratorio, lo que indica que el consorcio microbiano es capaz
de adaptarse a las condiciones ambientales locales. El peligro potencialvie-, ne
cuando se produce un cambio .drstico en el-pH debido al cido generado du rante 1a
biodegradacin. Si el acufero no est bien tamponado, existe el potencial,
especialmente con los compuestos altamente clorados, de que se produzcan altas
cantidades del ion de cloruro, lo que puede causar una cada importante del pH. Esto
podra conducir a una inhibicin de la actividad microbiana, y, tal y como se
mencion anteriormente, a movilizar compuestos que antes estaban inmoviliza dos.
Sin embargo, con unos estudios de tratabilidad cuidadosamente diseados, se puede
prever este problema, y disear mtodos para evitarlo.
Lo mismo se puede decir para el potencial redox y para los cambios que pue dan
ser necesarios en la disponibilidad de oxgeno del acufero. La mayora de los
acuferos no contaminados y poco profundos (menos de 60 m) contienen algo de
oxgeno, mientras que los acuferos ms profundos a menudo contienen sulfato o
nitrato. Sin embargo, donde existe contaminacin no es raro encontrar niveles muy
bajos de oxgeno disuelto. Esto se puede deber a la BIS natural. De hecho, Rifai y
Bedent, utilizando el modelo de ordenador Bioplume , confirmaron que los ni veles
de oxgeno suban al mismo tiempo que bajaban los de nitrgeno 4 . Chang et al. 1617
llegaron a conclusiones similares constatando que los pozos que contenan <0,9 ppm
de BTX tenan unos niveles de oxgeno disuelto mucho ms altos que los pozos que
contenan > 1,0 ppm de BTX. Por lo tanto, para conseguir una biode gradacin ptima,
el oxgeno puede llegar a ser el factor limitante ms crtico. Se puede solventar esta
deficiencia mediante la adicin de aire a la subsuperficie, de oxgeno puro, de
perxido de hidrgeno, o de otro receptor de electrones, como nitratos. La desventaja
ai aadir oxgeno, obviamente, es que tambin se van a oxidar el hierro y el
manganeso, que posteriormente se pueden precipitar y provo-
179
car el atascamiento del acufero. Pero si se han realizado los estudios necesarios,
descritos anteriormente, la precipitacin se puede evitar y se puede lograr la oxi genacin del acufero de forma segura.
Ventajas de la BIS
Existen cuatro ventajas fundamentales cuando se procede al aumento de las tasas
naturales de biodegradacin. La primero es que se reducen de forma importante los
tiempos de recuperacin en comparacin con los procesos no aumentados o las
tecnologas tradicionales de bombeo y tratamiento. Se tratan al mismo tiempo tan to
los suelos subsuperficiales como las aguas subterrneas y, de esta forma, se evita que
a largo plazo los contaminantes se lixivien de las partculas del suelo. Cuando slo se
tratan las aguas subterrneas, mediante el arrastre por aire o un biorreactor en la
superficie, los suelos sirven de depsito a los contaminantes y, lentamente, los
orgnicos se lixiviarn a las aguas subterrneas. La tasa de lixivia cin depender del
coeficiente de reparto de los contaminantes en las partculas de suelo, entre la matriz
orgnica del suelo, y las fases de agua y gas.
Otra ventaja importante al usar la BIS es que, bajo condiciones aerobias, los
contaminantes se mineralizan normalmente en C0 2 , agua, biomasa y sales, si es el
caso. Esto eliminara las responsabilidades futuras que se pudiesen derivar de una
excavacin y vertido del suelo contaminado. Una tercera ventaja seran los costes.
Aunque la incineracin sea ms rpida, es cada vez ms difcil obtener permisos para
la incineracin, y tanto los costes de transporte como los de excavacin dan lugar a un
coste de recuperacin entre tres y diez veces mayor que el originado por una BIS.
Finalmente, puesto que la BIS es un proceso natural que utiliza la pobla cin de
microorganismos autctonos, por lo general, se percibe como un proceso
ecolgicamente ms aceptable. Slo se aaden compuestos orgnicos al acufero, y se
trata de sustancias que van a ser consumidas cuando los microorganismos degraden
los contaminantes. Por lo tanto, la BIS proporciona una tecnologa efi caz y rentable
para la limpieza de los acuferos contaminados.
180
un mximo de 4,2 * 10 1 ' unidades formadoras de colonias/ml antes de que dismi nuyese
la poblacin cuando desapareci la fuente de carbono de la gasolina. 71
Desde los estudios iniciales de Raymond 71 , tanto l como sus colaboradores han
realizado otras biorrecuperaciones in situ en acuferos arenosos en Millville, New
Jersey 7 -; Long Island, Nueva York 4 *; y Watsonville, California 51 . En cada caso se
realizaron descripciones de la geologa/hidrologa, se hicieron ensayos de tratabilidad y
se determinaron las necesidades de aditivos, nutrientes y oxgeno, adems de informar
sobre el nivel de recuperacin logrado.
Estudios de casos publicados
Debido al trabajo pionero de Raymond sobre biorrecuperacin de hidrocarburos del
petrleo, la mayora de las aplicaciones de la BIS, hasta ahora, se han centrado en este
grupo de contaminantes. La mayor parte de los estudios de casos documentados'incluyen descripciones de geologa, hidrogeologa, datos sobre las concen traciones de contaminantes y distribuciones entre las fases acuosas y slidas, y
conductividad hidrulica, as como resultados de los ensayos de biotratabilidad. En la
Tabla 7.2 se recogen algunos de los estudios de casos mejor descritos sobre
hidrocarburos del petrleo.
Uno de los ensayos de campo ms completos sobre la BIS ha sido el trabajo
realizado en la Estacin Area de los Guardacostas de Traverse, Traverst City,
Michigan 4 Este lugar se contamin con c erca d e 38 m 3 (10.000 galones) de combustible
para reactores (JP-4) debido a una junta rota en un depsito subterr neo. La zona, de
aproximadamente 1,6 km (1 milla), en East Bay, Lago Michigan, es un acufero poco
profundo de arena y grava. La profundidad hasta el agua sub terrnea es de 4,5 m y el
flujo de las aguas subterrneas presenta una direccin noreste hacia East Bay. Se dise
un ensayo piloto para evaluar las necesidades de nutrientes y de perxido de hidrgeno
con el objeto de aumentar la BIS. La zona de ensayo fue una parcela de 10 por 30 m en
la que se instalaron cinco pozos de inyeccin; nueve pozos de control de 10 cm y doce
pozos agrupados de pequeo dimetro y distintas profundidades equipados con sondas
especiales distribuidas a distintas profundidades, entre 4 m y 8,5 m por debajo de la
superficie.
El diseo y la operacin del sistema seguan el modelo de ordenador Bioplume
II. Despus de calcular la demanda de oxgeno del sistema, se estableci que era
necesario lograr una tasa de flujo de 9 m 3 /h [40 galones por minuto (gpm)] para subir el
nivel fretico 30 cm con objeto de alcanzar el material atrapado en el borde capilar. Se
dividi el agua y se inyectaron 4,5 m 3 /h (20 gpm) directamente, mientras que 2,5 m 3 /h
(11 gpm) fueron tratados con los nutrientes necesarios antes de la inyeccin. Junto con la
adicin de nutrientes, se suministr oxgeno lquido puro al sistema durante
aproximadamente 3 meses, posteriormente se aadi pe rxido de hidrgeno durante el
perodo del ensayo piloto. Despus de la adicin del oxgeno lquido, se realizaron
diversos ensayos con trazador para determinar el transporte del oxgeno disuelto,
cloruro, amonaco y fosfatos.
Durante todo el estudio, adems de los nutrientes y del oxgeno, se control el benceno,
tolueno; etilbenceno, y los xilenos (BTEX), el pH, la conductividad, la
TABLA 7.2
Seleccin de es
182
L OCALIZACIN
T IPOY
CANTIDAD
CONTAMINANTE
E NSAYO
DE
COMPLETO
(C)
G EOLOGA *
REA
A DICIN
DE
NUTRIENTES
R ECEPTOR
DE
ELECTRONES
D URACIN
R ENDIMIENTO
P ROBLEMAS
E MPRESA **
R EFERENCIA
ro
DEL
TRATAMIENTO
ENSAYO
PILOTO
(P)
_j
181
temperatura, el nivel del agua, y las cifras microbianas utilizando los procedimientos
estndares publicados. Los testigos se recogieron aspticamente antes de que se
iniciase el proyecto, despus de 3 meses de operacin, y aproximadamente 5 me ses
despus.
Los resultados, despus de aproximadamente 9 meses de operacin, mostraron que
mientras se consuman el oxgeno y los riutrientes, descenda a cantidad de BTEX, lo
que serva como indicativo del consumo microbiano. Adems, haba un incremento de
hasta un orden de magnitud en las cifras de las bacterias degradado- ras de
hidrocarburos, especialmente en los niveles ms profundos. El incremento dependa de
la proximidad al oxgeno, de los nutrientes y de la presencia de BTEX. Se observ que
el oxgeno se consuma primero en los niveles menos profundos y que no pasaba al
siguiente nivel hasta que el nivel de BTEX era indetectable o <10 ppb. Tal y como se
poda esperar en un acufero arenoso, la permeabilidad no se vio afectada por la
adicin de perxido de hidrgeno 88 - 89 .
Problemas con el suministro de oxgeno y su sustitucin por nitrato
Se han dado varios casos en los que aadiendo perxido de hidrgeno a sistemas de
BIS han surgido problemas de descomposicin rpida 2,3881 o precipitacin 91 , Esto ha
propiciado el desarrollo de ensayos con nitrato como receptor de electro nes alternativo.
Una de las primeras zonas en las que se emple nitrato para la degradacin anaerobia
de los hidrocarburos del petrleo fue el Valle del Rhin, en Saarbrcken, Alemania 90 . En
la Tabla 7.2 se muestra informacin bsica sobre la geologa y contaminacin en esta
zona. Se eligi la BIS debido al tamao de la zona y a la presencia de edificios sobre la
zona contaminada. El hierro y el metano fueron algunos de los problemas a plantear. Al
agua filtrante se le aadi cloruro de amonaco, fosfatos y nitrato, este ltimo en
cantidades de aproximadamente 4 mg/mg de hidrocarburo. El agua de lavado tambin
se satur con oxgeno mediante un sistema de aireacin. Con el tiempo aumentaron
tanto el C0 2 como el gas nitrgeno. Los hidrocarburos alifticos descendieron desde un
nivel inicial de 2 mg/1 hasta 0,1 mg/I despus de dos aos. Originalmente presentes en
torno a 5,5 mg/1, los xilenos descendieron hasta 0,08 mg/1 durante los 24 meses de
operacin. Los investigadores constataron que la cantidad de oxgeno que se calculaba
que estaba presente no poda justificar el grado de biodegradacin, y llegaron a la con clusin de que en este sistema el principal receptor de electrones haba sido el
nitrato 9 .
En la Estacin del Guardacostas estadounidense de Traverse City, Michigan, se
realiz otro estudio importante sobre la BIS en condiciones desnitrificantes. Las
caractersticas generales de esta zona se han descrito anteriormente 4 88 .
Para el ensayo piloto de desnitrificacin se trat con nitrato de sodio y nutrien tes
(fosfatos y cloruro amnico), aadidos mediante una galera de infiltracin uti lizando
agua recirculada, una parcela de 10 m por 10 m, pendiente arriba de la zona del ensayo
aerobio. La desaparicin del benceno y del tolueno coincidi con el suministro de
oxgeno al acufero, suministro realizado mediante el agua airea da recirculada. Sin
embargo, el incremento repentino de nitratos en las aguas sub-
W ATSONVILLE ,
C ALIFORNIA
G ASOLINA , 3.785
1
ND***
NH ;,
FOSFATOS
H ,O2
13
MESES
>90%
ND
DERS
53
NH 4 *.
FOSFATOS
HA
64
MESES
>99%
ND
DERS
48
>
45 * 90 *
L ONG ISLAND ,
N UEVA YORK
N ORTE DE
I NDIANA
R EFINERA
M ICHIGAN
G ASOLINA ,
37.850 1.
S UR DE
C ALIFORNIA
CL
LENTES
G ASOLINA ,
302.800 1
EN
GP,
2,2
GM
3>
>
NH,\
60*120 *
180-300 M
HA
MESES
63-80%
CA, MG, FE
IT
FOSFATOS
z
O
o
M
JJ
H IDROCARBUROS
DEL PETRLEO ,
ND
G ASOLINA ,
ND
ND
ND
ND
A GUA
106
DAS
78-90%
AIREADA
L LUVIAS
OHM
78
INUNDACIONES
m
co
o
c
8
GM, CL
SM
2.787
M3
RESTORE
375
LENTES
HA
MESES
84
>99%
O TRO
IT
DERRAME
2,14
X
O
W
O AKLAND ,
C ALIFORNIA
C ANAD
G ASOLINA ,
5.000
GM, ML
6-8.000
M'
ND
HA
MESES
80%
ND
HL
63
G ASOLINA ,
ND
GP
RELLENO ,
LECHO
DE
ROCA
A + B = NH ;,
24 X 30 M FOSFATOS C = 21
HA
N ITRATO ,
300 PPM
24
MESES
72
M ATERIA !
A = 95%
ADSORBIDO
B = 40-50% C 85%
GTI
13
ND
90
FRACTURADO
V ALLE
D ERRAME
DE
S UPERIOR DEL PETRLEO , EST . 17
R HIN ,
TONELADAS
ALEMANIA
<
*0
m
f
O
PPM EN SUELO
SW, ML
270 * 90
NH ;,
FOSFATOS
MESES
>95%
H IERRO
METANO
3J
O
W
O
w
Camp
Grayling,
Base
Area,
Grayling,
Michigan
Gasle
o,
16.000
25.000
ppm en
Este de
Missou
ri
Gasolina
,
113.550
Suelo
impermea
ble con
lecho de
roca
fracturado
Sur de
Californi
a
Gasolina,
200 ppm total
de
hidrocarburos
de petrleo
Amsterdam,
Holanda
BTEX/aceite
mineral,
200 y 6.000
mg/kg
suelo,
respectivamente
Arnhem,
Holanda
Aceite
mineral,
10.000 mg/kg
de suelo
ND
Este de
Pensilvani
a
Gasoli
na,
3.400 I
SP, MH
SC
Biorrea
ctor
sobre el
suelo
con
recircul
acin
h2o3
108 * 2! m ND
>95%
ND
32 meses
>99%
ND
J. Mathes
10 meses
>99%
Baja
permea
bilidad
CAA
28
3 meses
79% del
aceite; 98%
del BTEX
ND
DRM
83
11 meses
5l
Agua
subterrnea a
a 18 m y
aprox.
12 * 15 m
sobre la
superficie
ACT
<nh;,
fosfatos)
ND
ND
Agua
saturada
con
oxigeno
6,3 m de
suelo no
saturado
hasta el
agua
subterrnea
ND
KNO,
Continuo
Despus de
2 meses, 556%
ND
DRM
83
HA
24 meses
99%
Nivel
fretico
bajo
por
sequa
GTI
52
;,
nh
fosfatos
BI
OR
RE
CU
PE
RA
CI
N
IN
SIT
U:
FU
ND
AM
EN
TO
S V
PR
C
TIC
AS
18
3
184
185
ral 25 , por otro lado, Hinchee et al. presentaron un modelo conceptual para aumen tar la
biodegradacin mediante la ventilacin del suelo 2 ' 39 . Todos estos autores han
reconocido la importancia de diferenciar entre las prdidas por evaporacin y por
biodegradacin, y sugieren la necesidad de controlar los gases de ventilacin, el C0 2 y
O r La ventaja que ofrecen estos sistemas es que se pueden extraer o empujar a travs
de la zona vadosa gran.des cantidades de aire, lo que permite introducir oxgeno en
cantidades proporcionalmente mayores por ejemplo, 1,7 Nm 3 /h (1 scfm) introducir
23 lb/dia de oxgeno en los suelos 58 . Otra ventaja es que los gases pueden penetrar
ms fcilmente que los lquidos, con lo que se incre menta la transferencia en masa del
oxgeno y se distribuye a ms organismos el oxgeno necesario para la biodegradacin.
Esta tecnologa de ventilacin del suelo se adapta bien a la situacin descrita por
Brown y Crosbie En este caso, la mayor parte de la contaminacin con ga solina residual
estaba presente a una profundidad de 3-4 m por debajo de la super ficie terrestre, en una
regin de fluctuaciones estacionales en el agua subterrnea. Se construyeron seis pozos
para la extraccin del vapor del suelo. Los vapores recogidos del suelo pasaron por
columnas de carbn vegetal para tratarlos antes de su emisin a la atmsfera. Se
control el gas efluente y la cantidad de C0 2 , inicialmente del 11 por ciento, descendi
hasta el 1,4 por ciento cuando baj la concentracin media de hidrocarburos l2 .
En la Base Area de Hill, Utah, se produjo un derrame de JP-4 en enero de 1985
provocando la emisin de 102,2 m 3 (27.000 galones) de combustible. 22 Aproximadamente 7,6 m 3 (2.000 galones) se recuperaron como producto libre, y el com bustible
restante se retuvo en los suelos no saturados de un rea de aproximada mente 4.050 m 2
(1 acre) y 17 m de profundidad. El nivel fretico estaba a 200 m de la superficie
terrestre. Se emple una ventilacin del suelo de alto volumen duran te unos 9 meses y
se control la respiracin ese tiempo. Los autores calcularon que se degrad entre el 15
y 25 por ciento de los hidrocarburos, y el resto de los pro ductos voltiles se recogieron
medante el procedimiento de ventilacin de suelos de alto volumen. Despus, se instal
un sistema de bioventilacin que operaba a una velocidad igual a la tercera parte o la
mitad de la tasa de alto volumen y se controlaron los efectos provocados por la adicin
de humedad y humedad ms nutrientes. En base al control de los gases in situ y en las
chimeneas de ventilacin, los autores llegaron a la conclusin de que el 80-90 por ciento
de la disminucin producida en los hidrocarburos del petrleo se poda atribuir a la
biodegradacin con adicin de humedad, el parmetro ms importante. La combinacin
de bioventilacin de alto y bajo volumen redujo el nivel de contaminantes en los sue los
desde una media de 410 mg/kg, antes de la ventilacin, hasta una media de 2,8 mg/kg,
despus de 21 meses de tiempo total de tratamiento 22 .
Estos resultados que muestran los efectos beneficiosos de la adicin de nu trientes no
han sido confirmados por Miller et al. para un derrame de combustible de reactor en la
Base Area de Tyndall, Florida 62 . En este lugar, un ensayo piloto de 7 meses mostr que
solamente el 55 por ciento de los hidrocarburos se biode- gradaban, pero ajustando tan
slo el flujo de aire, en base a un consumo de oxge no del 2 al 4 por ciento, el resultado
se poda haber incrementado hasta el 85 %.
186
187
Hasta la fecha, ha habido pocos estudios de casos documentados sobre la biorrecuperacin if situ de HPAs. Esto probablemente se debe, en parte, a la creencia de
que estos compuestos no son biodegradables, en parte, a que los tipos de indus trias que
utilizan o producen estas sustancias (plantas de coque, fbricas de gas, o plantas de
tratamiento de madera) normalmente se localizan en zonas industriales y no
residenciales y, finalmente, a que estos compuestos no son altamente volti les o
solubles en agua y, por lo tanto, no son tan mviles en las aguas subterrneas como lo
son los BTEXs. Adems, las velocidades de degradacin, segn los estu dios de
laboratorio, son ms lentas y, por lo tanto, la biorrecuperacin in situ ser un proceso
ms lento.
Existen numerosos estudios de tratabilidad sobre las aguas subterrneas y los
materiales procedentes de acuferos contaminados con creosota y/o pentaclorofe- nol
(Refs. 49, 57, 64, 86, 98, 99). Todos estos estudios demuestran que, con la
188
189
190
implicacin del trptofano en problemas de tipo mdico, y actualmente ha sido sustituido por
otros inductores de la dioxigenasa. Despus de una demostracin de campo que logr una
reduccin del TCE de 700 ppb a 90 ppb en 25 das mediante el uso de P. vepacia G4, se ha
planificado, para 1992, una recuperacin a escala real utilizando un nuevo inductor
(pendiente de patente) l00 .
En la base area de Moffit Field, en California, se realiz un ensayo ms am plio sobre un
sistema inductor de monooxigenasa. Este trabajo lo realizaron Mc- Carty y sus colaboradores
75 79
. Los estudios de campo se basaron en los resultados obtenidos por Higgins 37 en el Reino
Unido y por Wilson y Wilson; segn estos autores, la monooxigenasa del metano no es
especfica y declorar los disolventes aliftieos. Roberts et al 75 , describieron el diseo del
ensayo de campo. Por debajo de una capa de arcilla superficial con un espesor de unos 4 m,
el acufero poco profundo estaba contaminado con un disolvente aliftico clorado, el 1,1,1
-triclo- roetano (TCA). Los ensayos con trazador y los estudios de laboratorio mostraron que
se podan inducir metanotrofos aerobios en el sistema mediante el suministro de oxgeno y
metano. Estos gases se alteraron para evitar un exceso de crecimien to microbiano en los
pozos de inyeccin 75 . Se aadi TCE, cis- y trans- DCE, y VC al agua inyectada, y se sigui
su progreso a travs del acufero medante pozos de muestreo localizados aproximadamente a
1 m. Se calcularon los factores de retardo y se puls el sistema con metano y oxgeno. El
estudio continu durante 3 aos y se constat la degradacin de alrededor del 30 por ciento
del c/s-DCE, y de ms del 95 por ciento del VC durante el tercer ensayo <le 200 das. Sin
embargo, slo se transform entre el 10 y el 20 por ciento del TCE durante esta tercera etapa
de ensayo 79 . Los porcentajes de TCE y de m-DCE biotransformados haban sido mayores
durante la segunda etapa del ensayo, 10-30 por ciento y 30-58 por ciento, respectivamente 75 .
Las velocidades de flujo utilizadas para este estudio fueron bas tante rpidas (2 m/da), para
que la biodegradacin procediese con rapidez durante el corto intervalo del estudio. Estos
autores demostraron tambin que la monooxi genasa del metano era necesaria para las
biotransformaciones en este sistema, y que la induccin de la enzima slo se poda conseguir
mediante el suministro con tinuo de metano a los metanotrofos 79 .
Para la BIS anaerobia, Suflita y sus colaboradores demostraron que se poda degradar el
benzoato y el fenol de los lixiviados de vertederos bajo condiciones metanognicas o sulfatoreductoras, pero la deshalogenacin reductora quedaba limitada al sistema metanognico s4 .
Ms tarde demostraron que la inhibicin del sulfato de la deshalogenacin del cido 2,4,5triclorofenoxiactico a veces se po da aliviar mediante la adicin de molibdato al
microcosmos del ensayo 3 '. Hasta el momento, no se ha informado sobre otros intentos de
modificar la deshalogena cin anaerobia natural con enmiendas de nutrientes que incluyan
molibdato.
Otros investigadores han constatado la degradacin del 2,4,6-trinitrotolueno (TNT)
mediante Phanerochaee chrysosporium y han sugerido la aplicacin de este hongo a los
suelos contaminados con TNT 26 . Tambin se ha comprobado que este mismo hongo degrada
los insecticidas alquihaluros que contaminan los suelos de acuferos y las aguas
subterrneas 4 fi , pero, de nuevo, no se han llevado a cabo aplicaciones en sistemas de BIS ni a
escala piloto ni real.
191
Existe un informe sobre la biorrecuperacin in situ en una planta de herbici das"' donde
el acuifero se encuentra 11 m por debajo de un depsito glacial, (este depsito est formado
por 8,5 m de arena cenagosa y arcilla situada encima de 3 m de arena gruesa y grava), y sobre
un lecho de esquisto. El contaminante era el 4- cloro-2-metilfenol, compuesto muy
biodegradable cuando se airea el agua subte rrnea. Se modificaron los sistemas existerites-de
bombeo y tratamiento incremen tando el nmero de pozos de inyeccin y recuperacin, y
aadiendo bombas de transporte por aire a los pozos de recuperacin. Despus de seis meses
de opera cin, se produjo una reduccin del 50 por ciento en el tamao de la mancha de
contaminante l .
Conclusiones
La biorrecuperacin in situ (BIS) o el biotratamiento de los suelos subsuperfica les y de las
aguas subterrneas es una tecnologa ya adulta. Se ha aplicado con xito a la contaminacin
con hidrocarburos del petrleo durante casi 20 aos y, ms recientemente, a la contaminacin
con creosota y otros compuestos orgni cos. Quizs no sea la solucin adecuada en todos los
casos, pero se debe evaluar como una tecnologa correctora posible en aquellos compuestos
para los cuales sea aplicable. En algunos casos, incluso cuando la hidrogeologa no sea
ptima, puede ser el nico mtodo idneo en base al anlisis de los riesgos, costes, y lmi tes
de tiempo. La adaptabilidad y versatilidad de los microorganismos nunca de beran
sorprendernos, y deberamos dejar que sus capacidades sean el factor lti mo determinante
cuando estemos considerando la viabilidad de un proceso de biodegradacin.
Reconocimientos
Para proporcionar una informacin resumida sobre las aplicaciones reales en los trabajos de
campo, adems de utilizar la literatura publicada, se ha contactado con numerosos expertos
en BIS, quienes han compartido generosamente sus experien cias e informes con la autora.
Agradezco tambin a G. Gromicko y S. F. Nishino su revisin del manuscrito, y a S. Snchez
su ayuda con la bibliografa.
Referencias bibliogrficas
1.
2.
192
3.
193
States of America as representad by the United States Department of Energy, Was hington,
D.C.
19. Davis, H. E., J. Jehn, and S. Smith. 1991. Monitoring Well Drilling, Soil Sampling,
Rock Coring, and Borehole Logging. pp. 195-237. In D. M. Nielsen (ed.), Practical
Handbook of Ground-Water Monitoring. Lewis Publishers, Chelsea, MI.
20. Downs, W. C., S. R. Hutchins, J. T. Wilson, R. H. Douglass, and D. J. Hendrix. 1989.
Pilot Project on Biorestoration of Fuel-Contaminated Aquifer Using Nitrate: Part IField Design and Ground Water Modeling. pp. 219-233. NWWA/A-P1. Proceedings of
the Conference on Petroleum Hydrocarbons and Organic Chemicals in Ground Water:
Prevention, Detection and Restoration, Nov. 15-17, 1989. National Water Well Asso*
ciation, Dublin, OH.
21. Downey, D. C., R. E. Hinchee, M. S. Westray, and J. K. Slaughter. 1988. Combined
Biological and Physical Treatment of a Jet Fuel-Contaminated Aquifer. pp. 627-645.
NWWA/A-P1. Proceedings of Petroleum Hydrocarbons and Organic Chemicals in
Ground Water: Prevention, Detection and Restoration, Nov. 9-1 1, 1988. National
Water Well Association, Dublin, OH.
22. Dupont, R. R., W. J. Doucette, and R. E. Hinchee. 1991. Assessment of n Situ Bioremediation Potential and the Application of Bioventing at a Fuel-Contaminated Site,
pp. 262-282. In R. E. Hinchee and R. F. Olfenbuttel (eds.), In Situ Bioreclamation.
Applications and lnvestigations for Hydrocarbon and Contaminated Site Remediation.
Butterworth-Heinemann, Boston, MA.
23. Ehrlich, G. G., E. M. Godsy, D. F. Goerlitz, and M. F. Hult. 1982. Microbial Ecology
of a Creosote-Contaminated Aquifer at St. Louis Park, Minnesota. Dev. Ind. Microbio!. 24:235-245.
24. Ehrlich, G. G., D. F. Goerlitz, E. M, Godsy, and M. F. Hult. 1982. Degradation of
Phenolic Contaminants in Ground Water by Anaerobic Bacteria: St. Louis Park, Min nesota. Ground Water 20:703-710.
25. Ely, D. L., and D. A. Heffner. 1988. Process for In Situ Biodegradation of Hydrocar bon Contaminated Soil. U.S. Patent 4,765,902. Chevron Research Company, San Fran cisco, CA.
26. Fernando, T., J. A. Bumpus, and S. D. Aust. 1990. Biodegradation of TNT (2,4,6Trinitrotoluene) by Phanerochaete chrysosporium. Appl. Environ. Microbio!. 56:
1666-1671.
27. Flyvbjerg, J., E. Arvin, B. K. Jensen, and S. K.. Olsen. 1991. Biodegradation of Oiland
Creosote-Related Aromatic Compounds under Nitrate-Reducing Conditions. pp. 471 479. In R. E. Hinchee and R. F. Olfenbuttel (eds.), In Situ Bioreclamation: Applica tions and lnvestigations for Hydrocarbon and Contaminated Site Remediation.
Butterworth-Heinemann, Boston, MA.
28. Fogel, S., M. Findlay, and A. Moore. 1991. Enhanced Bioremediation Techniques for
In Situ and Onsite Treatment of Petroleum Contaminated Soils and Groundwater. pp.
201-209. In E. J. Calabrese and Paul T. Kostecki (eds.), Petroleum Contaminated
Soils, Vol. 2. Lewis Publishers, Chelsea, MI.
29. Fredrickson, J. K., R. J. Hicks, S. W. Li, and F. J. Brockman. 1988. Plasmid Incidence
in Bacteria from Deep Subsurface Sediments. Appl. Environ. Microbio!. 54:29162923.
30. Freeze, R. A., and J. A. Cherry. 1979. Groundwater. Prentice-Hall, Engtewood Cliffs,
NJ.
31. Ghiorse, W. C., and D. L. Balkwill. 1983. Enumeration and Morphological
Characteriza- tion of Bacteria Indigenous to Subsurface Environments. Dev. nd.
Microbio!. 24:213-224,
194
32. Ghorse, W. C., and J. T. Wilson. 1988. Microbial Ecology of the Terrestrial Subsurface. In A. I. Laskin (ed.), Advances in Applied Microbiology. 33:107-172. Acadcmc
Press, New York, NY.
33. Gibson, S. A., and J. M. Suflita. 1990. Anaerobio Biodegradation of 2,4,5-Trichlorophenoxyacetic Acid in Samples from a Methanogenic Aquifer: Stimulation by ShortChain Organic Acids and Alcohols. Appl. Environ. Microbiol. 56:1825*1832.
34. Godsy, E. M., D. F. Goerlitz, and G. G. Ehrlich. 1983, Methanognesis of Pbenolic
Compounds by a Bacterial Consortium from a Contaminated Aquifer in St. Louis
Park, Minnesota. Bull. Environ. Contam. Toxicol. 30:261-268.
35. Hayman, J. W., R. B. Adams, and J. J. McNally. 1988. Anaerobic Biodegradation of
Hydrocarbon n Confned Soils beneath Busy Places: A Unique Problem of Methane
Control, pp, 383-396. NWWA/APl. Proceedings of Petroleum Hydrocarbons and Or ganic Chemicals n Ground Water: Prevention, Detection and Restoration, Nov. 9-11,
1988.
National Water Well Association, Dublin, OH.
36. Hegeman, G. D., and D. G. Nckens. 1991. Aerobic bacterial remediation of aliphatic
chlorinated hydrocarbon contamination. U.S. Patent 5,024,949. BioTrol, Inc., Chaska, MN.
37. Higgins, 1. J. Apr. 6, 1982. Biotransformations Using Methane-litilizing Bacteria.
U.S. Patent 4,323,649. imperial Chemical Industries, Ltd. London,
38. Hinchee, R. E., and D. C. Downey. 1988. The Role ofHydrogen Peroxide in
Enhanced Bioreclamation. pp. 715-722. NWWA/API. Proceedings of Petroleum
Hydrocarbons and Organic Chemicals in Ground Water: Prevention, Detection and
Restoration, Nov. 9-11, 1988. National Water Well Association, Dublin, OH.
39. Hinchee, R. E^, D. C. Downey, andT^ Beard-1989. Enhancing"Biodegradation of Pe~ troleum Hydrocarbon Fuels through Soil Venting. pp. 235-248. NW WA/APl.
Procee dings of the Conference on Petroleum Hydrocarbons and Organic Chemicals
in Ground Water: Prevention, Detection and Restoration, Nov. 15-17, 1989. National
Water Well Association, Dublin, OH.
40. Hutchins, S. R., W. C. Downs, D. H. Kampbell, G. B. Smith, J. T. Wilson, D. A.
Kovacs, R. H. Douglass, and D. J. Hendrix. 1989. Pilot Project on Biorestoration of
Fuel-Contaminated Aquifer Using Nitrate: Part IILaboratory Microeosm Studies
and Field Performance, pp. 589-604. NWWA/API. Proceedings of the Confe rence on
Petroleum Hydrocarbons and Organic Chemicals in Ground Water: Preven tion,
Detection and Restoration, Nov. 15-17, 1989, National Water Well Association,
Dublin, OH.
41. Hutchins, S. R., W. C. Downs, J. T. Wilson, G. B. Smith, D. A. Kovacs, D. D. Fine, R.
H. Douglass, and D. J. Hendrix. 1991. Effect of Nitrate Addition en Biorestoration of
Fuel-Contaminated Aquifer: Field Demonstraron. Ground Water. 29:571-579.
42. Jain, R. K., G. S. Sayler, J. T. Wilson, L. Houston, and D. Pacia. 1987. Mantenance
and Stability of Introduced Genotypes in Groundwater Aquifer Material. Appl. Environ. Microhiol. 53:996-1002.
43. Jamison, V. W., R. L. Raymond, and J. O. Hudson, Jr. 1975. Biodegradation of HghOctane Gasoline in Groundwater. Dev. nd. Microbioi. 16:305-312.
44. Jhaveri, V. W., and A. J. Mazzacca. 1983. Bioreclamation of Ground and Ground water. Presented at the 4th National Conference on Management of ControUed
Hazardous Waste Sites. Groundwater Decontamination Systems, Inc., Paramus, NJ.
19 pp.
45. Jhaveri, V., and A. J. Mazzacca. 1985. Bioreclamation of Ground and Ground Water
by In-Situ Biodegradation. Case History. Presented at the 6th National Conference
on
196
micals in Ground Water Prevention, Detection, and Restoration, Nov. 20-22, 1991.
National Water Well Association, Dublin, OH.
59. McNabb, J. F,, and W. J. Dunlap. 1973. Subsurface Biological Activity in Relation
to Ground Water Pollution. Ground Water 13:33-44.
60. McNabb, J. F., and G. E. Mallard. 1984. Microbiological Sampling in the
Assessment of Groundwater Pollution. pp. 235-260. In G. Bitton and C. P. Gerba
(eds ), Ground water Pollution Microbiology. Wiley, NY.
197
82. Spain, J, C., and P. A. Van Veld. 1983. Adaptation of Natural Microbial Communites
to Degradation of Xenobiotic Compounds: Effects of Concentration, Exposure Time,
Inoculum, and Chemical Structure. Appl. Environ. Microbioi. 45:428-435.
83. Staps, J. J. M. 1988. Developments n in situ biorestoration of contaminated soil and
groundwater in the Netherlands. pp. 379-390. In Z. Filip (ed.), Biotechnologische lnsitu-Sanierung. Fischer Verlag, Stuttgart/New York.
84. Suflita, J. M., and S. A. Gibson. 1985. Biodegradation of Haloaromatic Substrates in
a Shallow Anoxic Ground Water Aquifer. pp. 30-32. In N. N. Durham and A. E.
Redelfs (eds.), Proceedings of the Second International Conference on Ground Water
Quality Research. Oklahoma State University Printing Services, Stillwater, OK.
85. Swindoll, C. M., C. M, Aelion, and F. K. Pfaender. 1988, Influence of Inorganic and
Organic Nutrients on Aerobic Biodegradation and on the Adaptation Response of
Sub- surface Microbial Communties. Appl. Environ. Microbioi. 54:212-217.
86. Thomas, J. M., and C. H. Ward. 1989. In Situ Biorestoration of Organic
Contaminants in the Subsurface. Environ. Sci. Technol. 23:760-766.
87. Vogel, T. M., C. S. Criddle, and P. L. McCarty. 1987. Transformations of Halogena ted
Aliphatic Compounds. Environ. Sci. Technol. 21:722-736.
88. Ward, C. H,, J. M. Thomas, S. Fiorenza, H. S. R. Rifai, P. B. Bedient, J. M. Armstrong, J. T. Wilson, and R. L. Raymond. 1988. A Quantitative Demonstration of the
Raymond Process for in Situ Biorestoration of Contaminated Aquifers. pp, 723-743.
NWWA/API. Proceedings of Petroleum Hydrocarbons and Organic Chemicals in
Ground Water: Prevention, Detection and Restoration, Nov. 9-11, 1988. National
Water Well Association, Dublin, OH.
89. Ward, C. H., J. M, Thomas, S. Fiorenza, H. S. Rifai, P. B. Bedient, J. T. Wilson, and
R. L. Raymond. 1989. n Situ Bioremediation of Subsurface Material and Ground
Water Contaminated with Aviation Fuel: Traverse City, Michigan, pp. 83-96. Procee dings of the 1989 A&WMA/EPA International Symposium on Hazardous Waste
198
Treatmcnt: Biosystems for Pollution Control. Air and Waste Management Association. Pittsburgh. PA.
90. Werner, P. I985. A New Way for the Decontaminaron of Polluted Aquifers by
Bio- dcgradation. Water Suppiv 3:41-47.
91. Wetzel, R. $., D. H. Davidson, and C. M. Durst. N. D. Effectiveness of In Situ
Bio- logical Treatment of Contaminated Groundwater and Soils at Kelly Air
Forc Base, Texas. Science Applications International Corporation, McLean,
VA. 18 pp.
92. Wilson, B. H., and M. V. White. 1986. A Fixed-Film Bioreactor to Treat
Trichlo- roethylene-Laden Waters from Interdiction Wells, pp. 425-436. In
Proceedings of the Sixth National Symposium and Exposition on Aquifer
Restoration and Ground Water Monitoring, May 19-22,1986. National Water
Well Association, Dublin, OH.
93. Wilson, J. T., and B. H. Wilson. 1985. Biotransformation of Trichloroethylene
in Soil. Appl. Environ. Microhiol. 49:242-243.
94. Wilson, J. T., J. F. McNabb, B. H. Wilson, and M. J. Noonan. 1983.
Biotransfor mation of Sclected Organic Pollutants in Ground Water. Dev. Ind.
Microbiol. 24:225-233.
95. Wilson, J. T., Jr., and B. H. Wilson. 1987. U.S. Patent 4,713,343. The United
States of America as represented by the Administrator of the U.S.
Environmental Protec- tion Agency, Washington, D.C.
96. Wilson, S. B., and R. A. Brown. 1989. In Situ Bioreclamation: A Cost-Effective
Technology to Remedate Subsurface Organic Contamination. Groundwater
Moni toring Review 9:173-179.
97. Wood, P. R., R. F. Lang, and I. L. Payan. 1985. Anaerobio Transformaron,
Trans pon, and Removal of Volatile Chlorinated Organics in Ground Water, pp.
493-511. In C. H. Ward, W. Giger, and P. L. McCarty (eds.), Ground Water
Quality. Wiley, New York, NY.
98. Baker et al., personal communication.
Captulo o
USO DE MICROORGANISMOS
MODIFICADOS PARA LA
BIODEGRADACIN DE
MATERIALES PELIGROSOS EN
TRABAJOS DE CAMPO
Michael A. Gealt
Departamento de Biociencia y Biotecnologa Universidad de Drexel Philadelphia,
Pennsylvania
Morris A. Levin
instituto de Biotecnologa de Maryiand Universidad de Maryiand Coilege Park,
Maryiand
Malcolm Shields
Centro de Diagnstico Ambiental Universidad de West Florida Pensacola, Florida
La gran cantidad de residuos peligrosos que se generan y evacan han dado lugar a una
serie de condiciones ambientales que necesitan un tratamiento corrector. Tradicionalmente,
el uso de vertederos ha sido una forma rentable de evacuar los residuos. Sin embargo, los
costes incrementados del transporte y el reducido n mero de lugares para la instalacin de
vertederos obligan ahora a examinar los procesos de tratamiento que se pueden realizar en
el propio lugar contaminado (tratamiento por aplicacin al terreno, compostaje), y,
preferiblemente, in situ. Por lo tanto, son los factores econmicos los que empujan a la
exploracin de las tc nicas de biorrecuperacin como mtodos alternativos, rentables, y
ambientalmen te aceptables.
200
Es difcil comprender por qu muchas personas piensan que la biorrecupera- cin es una
aproximacin nueva para la reduccin de residuos. El hecho de que no estemos todos
enterrados en materia orgnica confirma la eficacia del ciclo micro- biolgico del carbono.
Ahora hemos elegido centrarnos en algunos de los aspectos de este ciclo que pueden ayudar a
reducir los niveles de contaminacin ambiental. Aunque la primera aplicacin comercial de la
biorrecuperacin tuvo lugar hace ya ms de cuarenta aos, nuestro conocimiento sobre estos
procesos llega hasta los tiempos de hombre primitivo. El uso actual de los procesos de
tratamiento biolgi co (biotecnologia) est ms extendido de lo que es evidente para el
pblico. Las plantas de tratamiento de aguas residuales son ejemplos a gran escala fciles de
identificar, y las fosas spticas ofrecen un ejemplo an ms comn. El mayor cam bio que se
ha producido en nuestra mentalidad es la idea de que quizs los micro organismos implicados
se puedan trasladar a, o reclutarse en, el lugar contamina do, en vez de enviar los residuos
hasta donde estn los microorganismos.
Aunque se haya considerado el uso de microorganismos alterados gentica mente, hasta
ahora, la mayor parte de la biorrecuperacin se ha conseguido me diante una mejora del
crecimiento de los microorganismos autctonos, o aumen tando la poblacin microbiana con
organismos exgenos aislados en el propio lugar, o mediante procedimientos similares (Fox,
1992). Estos microorganismos pueden ser mejores degradadores porque los procedimientos de
seleccin o mutagnesis han mejorado su capacidad de degradacin respecto a un material en
particular. Por ejemplo, los estudios de casos han demostrado que la contaminacin con pe trleo crudo del suelo se puede reducir, hasta unos niveles aceptables para las agen cias
reglamentarias, en menos de 20 semanas y con unos costes totales de 45-155 dlares por
metro cbico utilizando solamente microorganismos autctonos. Esto supone bastante menos
tiempo y dinero que las alternativas no biolgicas (Hilde- brandt y Wilson, 1991; Levin,
Manual de Biotecnologa UNIDO, en fase de im presin). Desgraciadamente, como informaron
Fox et al. (1990), existen suelos que, cuando se han analizado en ensayos de viabilidad, han
mostrado una falta de organismos autctonos capaces de llevar a cabo la mineralizacin.
Evidentemen te, la adicin de bacterias u hongos extraos est indicado cuando se ha
producido una extincin de los microorganismos autctonos. Sin embargo, la nueva adicin de
microorganismos degradadores conocidos en una zona contaminada est muy lejos de
garantizar una mejora en la biodegradacin [vase Compeau et al., 1991, ejemplo en el que
los organismos adicionales no mejoraron la degradacin del pentaclorofenol (PCP)].
Si las capacidades o la viabilidad ambiental de los organismos exgenos se pudiese
mejorar, su adicin a un ambiente contaminado podra mejorar a su vez el proceso de
degradacin, bien cinticamente o bien ampliando el espectro de los compuestos degradados.
En algunos casos han surgido espontneamente organis mos con capacidades mejoradas. Por
otra parte, los procedimientos empleados en la actualidad para conseguir cepas modificadas
incluyen tanto mtodos conven cionales como de ingeniera gentica. Los mtodos
convencionales para obtener bacterias alteradas, es decir, la seleccin y la mutagnesis, son
fiables poseen una eficacia probada a la hora de producir fenotipos alterados pero lentos
y te
diosos. Adems, nunca se est seguro de que el protocolo de seleccin vaya a dar lugar
solamente al fenotipo deseado. Los protocolos de seleccin se deben disear
cuidadosamente para identificar y aislar los fenotipos deseados.
Aunque los mayores xitos con la biotecnologa se han producido en los cam pos de la
medicina y farmacologa, es fcil imaginar xitos futuros en la biotecno loga ambiental. Con
los avances realizados en-ingeniera gentica ya existen tc nicas que permiten optimizar
bacterias especficas para su uso en los trabajos de campo. El primer organismo diseado para
el uso en trabajos de campo fue una bacteria degradadora del petrleo desarrollada por
Chakrabarty. Sin embargo, la tcnica que utiliz este investigador (reproduccin asistida por
plsmidos) no se considera ingeniera gentica segn las definiciones reglamentarias actuales,
y el organismo nunca lleg a ser usado en los trabajos de campo (Levin, 1983). La cepa
Pseudomonas, degradadora del petrleo, fue creada mediante la introduccin de diversos
plsmidos degradadores para lograr la mineralizacin del xileno, to lueno, naftaleno, octano,
salicilato, y de otros aromticos y alifticos sencillos. Esto representa un rea atractiva para
la biorrecuperacin; es decir, un contami nante fcil de degradar en un lugar bastante
inaccesible que hace muy caro el tra tamiento fsico (vitrificacin, incineracin, etc.). Algunos
ejemplos podran incluir: los escapes de depsitos subterrneos, derrames de petrleo y flujos
de residuos industriales. Hay poca necesidad de utilizar una tecnologa recombinante si los
contaminantes son fciles de atacar.
La aplicacin principal de la tecnologa ADN recombinante (ADNr) en biorre cuperacin
ser el tratamiento de los residuos recalcitrantes: residuos difciles de degradar debido a la
escasez de rutas microbianas capaces de reconocerlos o trans formarlos, especialmente a altas
velocidades. Desgraciadamente, este tipo de con taminantes es muy amplio, incluye muchos
pesticidas, compuestos heterocclicos, aromticos sustituidos y halogenados, y alifticos
(metanos, etanos y etenos). La seleccin directa no es til en estos casos porque, o no est
disponible la enzima, o la ruta, o slo es posible inducirla mediante el compuesto
recalcitrante.
Actualmente, existen varios organismos que han sido modificados con xito en el
laboratorio para mejorar sus capacidades degradadoras (Rojo et al., 1987; Don et al., 1985;
Kukor y Osen, 1990; Zylstra et al., 1989). Pero estas cepas no se han probado en los trabajos
de campo, ni tampoco otras que han surgido por muta cin espontnea o mediante mutagnesis
y procesos tradicionales de seleccin (Rojo et al., 1987; Knackmuss, 1976; Taeger et al.,
1988). Se ha ensayado en los traba jos de campo con una cepa, la Pseudomonas B13, pero
slo en relacin a su super vivencia, no para la finalidad para la cual fue diseada, la
degradacin de los com puestos cloroaromticos (Krumme et al., 1991).
El bioaumento, tal y como se practica actualmente, utiliza organismos que se generan de
forma natural. Los organismos aadidos, o proporcionan una asocia cin, o, an ms
importante, incrementan de forma significativa el ttulo de los degradadores. El retraso en el
uso de microorganismos cultivados en el laboratorio se debe en parte a los reglamentos poco
claros promulgados por las agencias fede rales, estatales y locales en relacin a cules son los
organismos modificados que merecen ser considerados como organismos nuevos. En un
folleto publicitario apa
202
recido en The Biorremediation Report (publicado por COGNIS, INC., Santa Rosa, CA 95407),
se sealaba que ...la biorrecuperacin es un enigma. Aunque se trate de un enigma muy
estudiado. El enigma se clarificar dentro de los prximos aos. Este capitulo examinar las
ventajas e inconvenientes que presenta la utili zacin de organismos naturales y modificados
desde el punto de vista cientfico y reglamentario.
'