El bacilo insecticida thuringiensis silencia virulencia carotovora de Erwinia por una

nueva forma de antagonismo microbiano, interferencia Yi-Hu Dong, XI-Pantano Zhang,

Jin-Ling Xu, y Lian-Hui Zhang*

Está comúnmente que las bacterias pueden producir los antibióticos para interferir con las funciones biológicas normales
de sus competidores para ganar ventajas competitivas. Aquí divulgamos que el bacilo thuringiensis suprimió la virulencia
quorum-detectar-dependiente de carotovora de Erwinia el patógeno de la planta a través de una nueva forma de
antagonismo microbiano, interferencia de la señal. El E. carotovora produce y responde a la lactona del acyl-homoserine
(AHL) quorum-que detecta señales de regular la producción y la expresión antibióticas de los genes de la virulencia,
mientras que las tensiones del B. thuringiensis del. poseen AHL-lactonase, que es una enzima AHL-que degrada potente.
El thuringiensis del B. no se parecía interferir con el crecimiento normal del E. carotovora; algo, suprimió la acumulación
de la señal de AHL cuando eran cocultured. En planta, el thuringiensis del B. disminuyó perceptiblemente la incidencia
de la infección del E. y del desarrollo carotovora del síntoma de la putrefacción suave de la patata causada por el
patógeno. La eficacia del biocontrol se correlaciona con la capacidad de tensiones bacterianas de producir AHL-lactonase.
Mientras que todas las siete tensiones del B. thuringiensis de AHL-lactonaseproducing proporcionaron la protección
significativa contra las tensiones carotovora de la infección del E., de coli del bacilo fusiformis y de Escherichia que no
procesan la enzima de la AHL-degradación demostró poco efecto en biocontrol.

La mutación del aiiA, el gene que codificaba AHL-lactonase en thuringiensis del B., dio lugar a una disminución
substancial de la eficacia del biocontrol. Estos resultados sugieren que los mecanismos de interferencia de la señal que
existían en ecosistemas naturales se podrían explorar como nueva versión del antagonismo para la prevención de
infecciones bacterianas.

Ha sido establecido ahora que las solas-celled células bacterianas hablan con frecuencia con una otra con la secreción, el
uptake, o el reconocimiento de las moléculas pequeñas de la señal. En muchos casos, tal comunicación de la célula-
célula es dependiente de la densidad demogr'afica, un mecanismo conocido como detección del quorum. El Quorum que
detecta bacterias produce un nivel básico de las señales de detección del quorum- en la densidad demogr'afica baja y
responde normalmente a las concentraciones crecientes de señales mientras que él prolifera.

Diversa especie bacteriana puede producir y responder a diversas señales de quorum-detección, pero ella utiliza la
quorum-detección de mecanismos en una manera similar: para sincronizar la expresión del gene de la blanco y coordinar
actividades celulares. Las lactonas n-acílicas del homoserine (AHLs), que están presentes en los sistemas de quorum-
detección de muchas bacterias gram-negative, son una familia de caracterizado quorum-detectando señales. AHLs
regula funciones biológicas microbianas diversas, incluyendo la producción, la expresión de factor de la virulencia, y la
formación antibióticas del biofilm.

Por que el quorum que detecta controles una gama de las actividades implicadas en la interacción del anfitrión el
patógeno y la competición del microbio-microbio, tal como expresión de los genes de la virulencia y producción de
antibióticos, él se piensa que tal mecanismo de la regulación del gene podría proveer probablemente del quorum- que
detectaba bacterias una ventaja competitiva en su ambiente natural.

Porque las interacciones del microbio del microbio son comunes en el ecosistema natural, no está sorprendiendo que los
microorganismos podrían también desarrollar diversas versiones de los mecanismos de interferencia de la señal para
contrariar señalar quorumsensing de sus competidores. Entre el varios caracterizados la quorum-detección de los
mecanismos de interferencia de la señal, también conocidos como quorum que apaga, allí es dos grupos de enzimas
AHL-que degradan producidas por varios especie bacteriana del suelo. AHL-lactonase, que primero fue identificado en un
bacilo especie, hace inactivo AHLs hidrolizando el anillo de la lactona de las señales. los AHL-acylases del paradoxus de
Ralstonia y de Variovorax degradan señales rompiendo el acoplamiento de la amida de AHLs.

Estas enzimas de AHLdegrading, cuando está expresado en plantas transgenic o en patógeno bacterianos, la detección
bacteriana bloqueada del quorum y la infección densidad-dependiente desintegrada de la población bacteriana. Sin
embargo, menos está mucho claro si estas bacterias del suelo que producen las enzimas de interferencia de la señal de
AHL podrían contrariar con eficacia los patógeno bacterianos quorum-detectar-dependientes, y si tal mecanismo de
interferencia de la señal se podría utilizar como nueva forma de antagonismo en biocontrol.

El bacilo thuringiensis de la bacteria del suelo es el agente más ampliamente utilizado del biocontrol para el control del
insecto. Recientemente, fue demostrado que muchos aislantes del thuringiensis del B. producen y exhiben la actividad
fuerte de AHL-lactonase (10, 24). Está de interés significativo de investigar si el thuringiensis del B. se podría también
utilizar como reactivo del biocontrol para controlar enfermedades bacterianas infecciosas. Carotovora de Erwinia
bacteriano el patógeno de la planta fue seleccionada como el organismo de la blanco para este propósito.

La virulencia de este patógeno se correlaciona con su capacidad de producir y de secretar las enzimas que degradan de
la pared de célula de la planta, incluyendo lyase del pectate, lyase de la pectina, y polygalacturonase. Habíamos
demostrado previamente que expresión de AHL-lactonase en carotovora transformada del E. perceptiblemente reducida
la producción y el lanzamiento de estas enzimas pectolytic. En este estudio, probamos el efecto del thuringiensis del B.
en el crecimiento y la detección del quorum del E. carotovora y determinamos el efecto del thuringiensis del B. en el
control de la enfermedad suave de la putrefacción de la patata causada por el E. carotovora. Determinamos más lejos el
papel de AHL-lactonase del thuringiensis del B. en biocontrol por la generación de un mutante AHL-lactonase-nulo.

MATERIALES Y MÉTODOS.

Tensiones y condiciones bacterianas del crecimiento.

Las tensiones y los plasmids bacterianos usados en este estudio se enumeran en la tabla 1. COT1, que fue divulgado
originalmente como bacilo aislante que demostraba un de alto nivel de la homología ribosomal de la DNA 16S (rDNA) al
thuringiensis del B., fue confirmado para ser una tensión del thuringiensis del B. basada en su capacidad de producir las
proteínas cristalinas parasporal (datos no demostrados). Las otras seis subespecies de las tensiones del thuringiensis del
B. fueron descritas previamente. Las tensiones de coli de Escherichia fueron crecidas en 37°C en el medio de Luria-
Bertani (libra). Las otras manchas bacterianas fueron crecidas en 28°C en medio de la libra. Los antibióticos ampicilina
y tetracycline fueron agregados en las concentraciones de 100 y 10 _g/ml, respectivamente. X-Galón (5-bromo-4-chloro-
3-indolyl-_-D-galactopyranoside) (Promega) fue incluido en medio en 50 _g/ml para la detección de la actividad
enzimática del _-galactosidase.

Prueba biológica de AHL.

Para determinar el nivel de n (3-oxohexanoyl) - lactona del L-homoserine (OHHL), el AHL producido por E. SCG1
carotovora, el supernatant de la célula de la cultura bacteriana en diversos puntos del tiempo, según lo indicado en el
higo 1A, fue cargado sobre una placa de la prueba biológica de AHL (medio mínimo del agar suplido con X-Galón) y
cuantificó según lo descrito previamente. El OHHL sintético fue utilizado como el control positivo. Los tumefaciens de la
agrobacteria filtran 749, conteniendo una fusión del lacZ con el gene del tra de pTiC58, fueron utilizados como tensión
del indicador para la actividad de AHL.

Patatas (cv de Solanum Tuberosum L. Binjet) fue obtenido de almacenes locales.

Después de ser lavado con el agua del grifo y el ser secado en una toalla de papel, los tubérculos de la patata eran
superficie esterilizada con etanol del 70% y después rebanada uniformemente cerca de 5 milímetros en altura. Para el
tratamiento previo, las rebanadas de la patata fueron sumergidas en una suspensión del thuringiensis del B. u otras
tensiones bacterianas en una concentración de 5 _ 108 CFU/ml para cerca de el agua esterilizada 20 S. fueron utilizadas
como control. Las rebanadas tratadas entonces fueron secadas en un gabinete laminar del flujo por cerca de 20 minutos
para reducir la humedad superficial antes de la inoculación con el _l 2.5 de una suspensión bacteriana carotovora SCG1
del E. de diversas concentraciones. Para el tratamiento de la mezcla, un volumen igual de cada organismo de la prueba
fue mezclado con la suspensión bacteriana carotovora SCG1 del E. según lo indicado.

La superficie del corte de la rebanada de la patata fue inoculada con la mezcla (_l 2.5). Todas las rebanadas de la patata
fueron puestas en los platos de petri cubiertos e incubadas en 28°C. El área de la maceración (en milímetros
cuadrados) fue medida en ese entonces especificó. Cada tratamiento fue repetido 4 a 12 veces (12 veces para COT1), y
cada repetición fue utilizada para inocular 1 a 3 sitios por rebanada. Para el experimento de la colonización, cada
tratamiento fue repetido cuatro veces; cada rebanada fue inoculada en el centro de la rebanada. Para probar el efecto
del thuringiensis del B. y del mutante del aiiA (el gene que codifica AHL-lactonase) en la infección carotovora del E., seis
subespecies del thuringiensis del B. y el mutante B23_ai fueron utilizados por separado para pretratar rebanadas de la
patata antes de la inoculación con E. SCG1 carotovora.

Competición in vitro entre el thuringiensis del B. y el E. carotovora.

Los experimentos de la competición fueron conducidos por el coinoculation del thuringiensis del B. y del E. carotovora en
medio de la libra. El E. carotovora fue inoculado a una concentración final de cerca de 107 CFU/ml, y los otros fueron
inoculados en 106 CFU/ml. La mezcla fue incubada en 28°C. En diversos puntos del tiempo, las muestras de las
bacterias fueron tomadas para la prueba biológica de AHL y de la extensión en las placas para la cuenta de colonia
después de dilusiones apropiadas. El thuringiensis del B. y las colonias carotovora del E. eran fácilmente distinguibles
basados en sus morfologías únicas de la colonia. El experimento fue repetido cuatro veces.

Construcción de un mutante de AHL-lactonase.

Para determinar el papel de AHLlactonase en la supresión de la virulencia del Erwinia, el acercamiento del reemplazo del
gene fue utilizado para generar el mutante del aiiA del subsp del thuringiensis del B. israelensis B23 (BGSC 4Q7). Los
fragmentos cerca de el punto de ebullición 300 del 5 _ y 3 _ extremos de aiiA eran por aguas arriba y enes sentido
descendiente por separado ligada del gene de la resistencia del tetracycline en el vector pUCTV2 (36) del reemplazo del
gene para generar pUCTV2_ai (tabla 1). Esta construcción fue transferida en B23 por el electroporation con el
manipulante 600 (1.5 kilovoltios de la célula del electro, 246 _, cubeta de 2 milímetros; BTX, San Diego, California), y
los transformants fueron incubados en 42°C para conseguir librados del plasmid. Después de la cultura consecutiva por
3 días (recultivados en 12 intervalos de h), tomaron a las colonias tetracycline-resistentes. La mutación correcta fue
confirmada por análisis de PCR y por el phenotype de la falta de información del lactonase de AHL.
 RESULTADOS

El thuringiensis del B. bloqueó la acumulación carotovora de la señal del E.

AHL pero no afectó su crecimiento. Probar el efecto del thuringiensis del B. en la acumulación de AHL y el crecimiento
de E. SCG1 carotovora, SCG1 era cocultured con las tensiones COT1 del thuringiensis del B. y los fusiformis de B1, del E.
coli DH5, y del B., respectivamente. La figura 1A demuestra que el AHL producido por strain SCG1 era 2 perceptibles h
después de inoculación, y un aumento rápido fue observado entre 2 a 6 h después de la incubación, paralelo a la etapa
exponencial de la proliferación de las células bacterianas (higo 1B). Sin embargo, no se detectó ningún AHL en el
supernatant de la cultura de SCG1 cocultured con COT1 o B1, que producen AHL-lactonase. Sin embargo, el coculture de
SCG1 con las células de los fusiformis del E. coli DH5 o del B., que no producen la enzima de AHLdegrading, tenía mucho
menos efecto en la acumulación de AHL que las tensiones del thuringiensis del B., que producen AHLlactonase.

Ni las tensiones del thuringiensis del B. ni SCG1 demostraron a canto del signifi- efecto inhibitorio cara a cara, aunque
un efecto inhibitorio débil pero visible de SCG1 en el mutante del aiiA del thuringiensis del B. fue observado en el análisis
de la placa (datos no demostrados). Sin importar si SCG1 y las tensiones del thuringiensis del B. fueron cultivados
solamente (higo 1B) o cocultured (higo 1C y D), crecieron en un patrón comparable que demostraba tasas de
crecimiento similares sobre 24 períodos de h.

El thuringiensis del B. suprimió la virulencia del E. carotovora.

Para probar la posibilidad de usar bacterias AHL-que degradaban para controlar las infecciones bacterianas que son
mediadas por las señales de AHL, investigamos el efecto del thuringiensis del B. en el desarrollo de la enfermedad suave
de la putrefacción de la planta causada por el E. carotovora. Según las indicaciones del higo 2 y 3, el E. SCG1 carotovora
causó la maceración severa del tejido fino de la patata.

El grado de la maceración fue correlacionado positivamente a la densidad demogr'afica del patógeno inoculado. La
densidad demogr'afica más alta del inoculum, más en gran parte el área de la maceración fue desarrollada en rebanadas
de la patata. Sin embargo, cuando las rebanadas de la patata fueron pretratadas con la suspensión COT1 (tratamiento
previo) antes de la inoculación con SCG1, el síntoma de la maceración fue aliviado perceptiblemente (el higo 2A,
izquierdo, y 3A). Coinoculation de SCG1 con COT1 (tratamiento de la mezcla) también atenuó los síntomas suaves de la
putrefacción (higo 2). La eficacia del biocontrol aparecía depender de AHL-lactonase. En cambio, el tratamiento previo y
el tratamiento de la mezcla con los fusiformis del E. coli o del B., que no producen las enzimas de la degradación de AHL,
no pudieron evitar que SCG1 cause los síntomas severos de la maceración del tejido fino (higo 2A).

Para probar el efecto del thuringiensis del B. en el desarrollo suave del síntoma de la putrefacción, las rebanadas
inoculadas de la patata fueron incubadas en 28°C por 4 días. Según las indicaciones del higo 2B, las rebanadas de la
patata inoculadas con SCG1 solo demostraron el desarrollo suave progresivo del síntoma de la putrefacción, mientras
que esas rebanadas de la patata pretratadas con COT1 dieron lugar solamente a la maceración de menor importancia
inicialmente, aunque las lesiones acuosas llegaron a ser secas y desarrollo del síntoma fue terminado pronto después.

Entonces probamos si otras tensiones del thuringiensis del B. sabidas para producir AHL-lactonase (10) tienen un efecto
similar en la supresión de la infección carotovora del E. Seis tensiones del thuringiensis del B. AHL-lactonase-que
producen, incluyendo subsp del thuringiensis del B. thuringiensis B1 (BGSC 4A3), subsp del thuringiensis del B. kurstaki
B2 (BGSC 4D1), subsp del thuringiensis del B. israelensis B23 (BGSC 4Q7), subsp del thuringiensis del B. el wuhanensis
B17 (Mycogen PSS2A1), y las otras tensiones del thuringiensis de dos B. de nuestra colección del laboratorio (véase la
tabla 1 para los detalles), fueron utilizados para el tratamiento previo de las rebanadas de la patata. Para cada
tratamiento, las rebanadas de la patata fueron manchadas con SCG1, y el número de puntos macerados y el área de la
maceración fueron determinados.

Pocos incidentes de la maceración fueron encontrados en las rebanadas de la patata pretratadas con seis tensiones del
thuringiensis del B. que las rebanadas del control (higo 4A), y el área de la maceración por sitio en las rebanadas
pretratadas era también perceptiblemente más pequeña que ésa en las rebanadas del control (higo 4B). Filtrar B18, que
exhibió una actividad más baja de la inactivación de AHL, demostró menos protección contra la infección del Erwinia que
otras tensiones del thuringiensis del B. (higo 4).

Efecto del thuringiensis del B. en la colonización del E. carotovora en planta.

Para facilitar la investigación de la colonización de E. SCG1 carotovora en rebanadas de la patata, la tensión SCG1-GFP
fue obtenida por la transformación de un gene verde de la proteína de la fluorescencia (GFP) llevado por el vector pGEM7
de la expresión en la tensión SCG1 (tabla 1).

No había diferencia en virulencia entre la tensión SCG1- GFP y el salvaje-tipo SCG1. Para investigar el efecto de las
bacterias del thuringiensis del B. en la supervivencia y el crecimiento de SCG1 en las plantas, las rebanadas de la patata
fueron pretratadas con una suspensión bacteriana de COT1 y después inoculadas con SCG1-GFP. Los cambios en
números de la célula y el desarrollo bacterianos del síntoma suave de la putrefacción en tejido fino de la patata fueron
supervisados diariamente por 4 días. No había cambios significativos en números de la célula de SCG1-GFP en las
rebanadas de COT1-treated y controla las rebanadas (agua tratada) durante los primeros 2 días de la incubación, y
entonces una disminución leve fue notada en los terceros y cuartos días de ambos casos (datos no demostrados).

Sin embargo, las distribuciones bacterianas en las rebanadas pretratadas con COT1 o tratadas con agua eran
absolutamente diferentes. En el primer día después de la incubación, las rebanadas del control exhibieron síntomas
suaves de la putrefacción, y la mayor parte de las bacterias carotovora SCG1 del E. fueron observadas en el borde del
área putrefacta. Sin embargo, en las rebanadas de COT1-pretreated, las células SCG1 fueron confinadas alrededor del
sitio inoculado, indicar el SCG1 agresivo perdió su virulencia (higo 5A y B). Estos resultados confirman que las bacterias
del thuringiensis del B. suprimieron la virulencia del E. carotovora vía interferencia de la quorum-detección que señalaba
entre las células patógenas más bien que que mataba al patógeno.

El mutante AHL-lactonase-nulo del thuringiensis del B. es menos eficaz en silenciar la virulencia del E.
carotovora.

Para confirmar más lejos el papel de AHL-lactonase en silenciar la virulencia del E. carotovora, interrumpimos el gene del
aiiA, que codifica AHLlactonase, en la tensión B23 del thuringiensis del B. por la recombinación de la doble-cruce usando
el gene de la resistencia del tetracycline como el marcador. La mutación fue confirmada por PCR con las cartillas aiiA-
específicas y por prueba biológica de AHL. No se detectó ninguna actividad enzimática AHL-que degradaba en el mutante
AHL-lactonase-nulo B23_ai (higo 5C).

El análisis de la virulencia demostró que todas las rebanadas de la patata de SCG1-inoculated fueron maceradas,
mientras que el tratamiento previo de B23_ai no pudo prevenir la infección SCG1, aunque el grado de la maceración era
restricto (tabla 2). El control positivo, en el cual la patata rebana fue pretratado con el salvaje-tipo B23, no demostró los
síntomas de la infección SCG1 (tabla 2). Los datos indican que AHL-lactonase es esencial para silenciar la virulencia del
E. carotovora. Sin embargo, otros mecanismos del thuringiensis del B. pudieron también desempeñar un papel en
biocontrol, porque el tratamiento previo de B23_ai redujo el área de la maceración en comparación con la del control
(withwater pretratado).

DISCUSIÓN

El B. thuringiensis del se ha utilizado extensivamente como insecticida microbiano en las últimas décadas debido a su
capacidad de producir las proteínas cristalinas insecticidas selectivas que son generalmente ambientalmente seguras. El
B. thuringiensis del filtra actividad biocidal demostrada contra varias familias de los insectos del parásito, por ejemplo
lepidóptero, dipteran, y colepteran en las etapas larvales, así como ácaros, los nematodos, los flatworms, y los
protozoos.

Sin embargo, la mayoría de las tensiones insectcidal del thuringiensis del B. no se han explotado para la enfermedad
controlprobably porque no producen normalmente los antibióticos eficaces contra patógeno bacterianos y fungicidas. En
este estudio, demostramos que las bacterias gram-positive del thuringiensis del B. interrumpieron la quorum-detección
de señalar del E. gram-negative carotovora cuando viven como commensals (higo 1A y 5C), y tal interferencia de la
señal dio lugar a la atenuación drástica de la virulencia carotovora del E. (tabla 2 e higo 2 a 5). Los siete aislantes
bacterianos aleatoriamente seleccionados del thuringiensis del B. exhibieron actividad del biocontrol contra la
enfermedad suave de la putrefacción de la patata causada por el E. carotovora, cualquiera cuando fueron utilizados para
pretratar rebanadas de la patata antes de la inoculación del patógeno o cuando eran coinoculated con el patógeno en
tejidos finos de planta.

Estos resultados demuestran por primera vez que el espectro del biocontrol del thuringiensis del B. se podría ampliar
más a fondo para incluir por lo menos la enfermedad suave de la putrefacción causada por el E. carotovora. Nuestros
datos demostraron que las tensiones del thuringiensis del B. probadas no produjeron antibiótico-como sustancia para
interferir con la proliferación del E. carotovora (higo 1C y D).

La eficacia del thuringiensis del B. en la prevención de la infección carotovora del E. depende de su capacidad de
producir AHL-lactonase, una enzima potente que haga inactivo señales de detección del quorum de AHL hidrolizando el
anillo de la lactona del homoserine. El aislante B18 del thuringiensis del B., que exhibió la actividad más pobre de AHL-
lactonase entre las tensiones del thuringiensis del B. probadas, también demostró el menos efecto en el biocontrol (higo
4A y B). Los fusiformis del B., que no procesa un AHL-lactonase, demostraron poco efecto en el biocontrol (higo 2A). Por
otra parte, la mutación nula del gene del aiiA que codificaba AHL-lactonase disminuyó substancialmente la potencia del
biocontrol del thuringiensis del B. (higo 5 y tabla 2).

Los resultados sugieren que interferencia de la señal pudiera representar una forma de la novela de antagonismo
microbiano que se podría explorar para el control y la prevención de la quorum-detección de AHL señal-medió
enfermedades bacterianas. AHL-lactonase aparece ser conservado extensamente. El bacilo cirio y el bacilo mycoides,
especie se relacionaron de cerca con el thuringiensis del B., también producen AHL-lactonases. Este el bacilo enzimas se
conserva altamente, compartiendo la homología más del de 90% en el nivel del peptide. Un informe reciente demostró
ese bacilo SP. filtrar A24, demostrando actividad del lactonase de AHL, con tal que biocontrol preventivo y curativo
significativo contra la putrefacción suave de la patata causada por el E. carotovora y la rozadura de corona del tomate
incitada por los tumefaciens del A.
AHL-lactonase también se ha identificado en especie bacteriana gram-negative, tal como tumefaciens del A. Aunque los
niveles de la homología entre el bacilo AHL-lactonase y el AHL-lactonases de la especie bacteriana gram-negative son
bajos (generalmente cerca de 30 a el 35%), comparten un adorno altamente conservado, HXDH_H_D, que es esencial
para la actividad enzimática. A excepción de los tumefaciens del A., en los cuales el AHL-lactonase codificado por el attM
juega una función vital en volumen de ventas de quorum-detección de la señal en respuesta a cambios en crecimiento,
el papel de AHL-lactonase en otros organismos sigue siendo confuso.

Sin embargo, porque las señales de AHL (particularmente, los miembros de cadena cortos) difunden convenientemente
en las células bacterianas, cualquier microorganismo que procese una enzima potente de la degradación de AHL podría
tener un impacto significativo en las bacterias de quorum-detección AHL-dependientes si viven como commensals.
Porque las interacciones del microbio-microbio son ubicuas y las señales de AHL están implicados en la regulación de una
gama de las funciones biológicas importantes para la supervivencia, tal como producción, motility de la salida en
enjambre y de la natación, y formación antibióticos del biofilm, es probable que AHL-lactonase pueda desempeñar un
papel significativo en la obtención de las ventajas competitivas para su productor sobre competidores en ecosistema
natural.

Esta noción es consolidada por encontrar que la presencia del thuringiensis del B. AHL-lactonase-que producía paró con
eficacia la extensión de otra manera rápida de las células carotovora del E. en los tejidos finos de planta (higo 3 y 5A y
B). La producción antibiótica ha sido el mecanismo principal de los antagonismos microbianos que se explotan
comúnmente en el biocontrol de enfermedades bacterianas y fungicidas.

Estos antibióticos funcionan la matanza o parando crecimiento bacteriano. Estos últimos años, otras versiones de los
antagonismos microbianos, que no matan directamente a patógeno, también se han investigado. Un ejemplo interesante
es ese fermentum RC 14, un aislante bacteriano probiotic, infección aguda inhibida del lactobacilo del estafilococo áureo.

Las bacterias probiotic no aparecían afectar crecimiento el patógeno: algo, el patógeno secreta las proteínas matriz-que
atan extracelulares superficiales de la célula y el biosurfactant que previnieron de alguna manera adherencia el patógeno
a los implantes quirúrgicos y a la infección aureus inhibida de S. Más recientemente, Molina y otros. divulgado que la
tensión recombinant de los fluorescens de los Pseudomonas overexpressing AHL-lactonase atenuó la virulencia del E.
carotovora en las patatas. Estos resultados, tan bien como los datos presentados en este estudio, ilustran el potencial
prometedor de explorar los mecanismos antagónicos microbianos con excepción de la producción antibiótica, tal como
interferencia de la señal, para el control y la prevención de enfermedades infecciosas.