Informe #2 MICROSCOPIA DE HONGOS

Paula Andrea Silva Angarita, Karen Franco Ramrez, Juan Jos Snchez, Viviana Lpez
Colorado, Laura Castao Valencia
Fecha de presentacin: 26/10/2016
INTRODUCCIN

Los hongos son grupos de seres vivos diferentes de las plantas y de los animales, razn por
la cual se clasifican en un reino aparte llamado Fungi, estos organismos poseen gran
cantidad de adaptacin y se reproducen por medio de esporas, las cuales son diseminadas
principalmente por el viento y por el agua (Instituto Nacional de Biodiversidad, s.f.).
Los hongos Juegan un papel descomponedor, ya que transforman la materia orgnica en
sustancias ms simples y asimilables por otros seres vivos; gracias a esta capacidad de
descomposicin los hongos y mohos crecen fcilmente en los alimentos representando un
gran problema para la industria agrcola y alimentaria.
A pesar de que los hongos tienen una gran capacidad de adaptacin dependen de unos
factores para su buena colonizacin y proliferacin; tales como: la humedad en la que se
encuentre el ambiente donde van a colonizar, al igual que tienen mejor crecimiento con baja
irradiacin solar, el pH del sustrato tambin es una condicin ambiental necesaria,
igualmente la temperatura es esencial para la supervivencia de los hongos.
En el presente informe se examinan diferentes sustratos con el fin de identificar por medio
de la microscopia los gneros hongos que comnmente los afectan, lo cual nos llevar a
responder la pregunta que se plante al inicio del experimento:
Qu caractersticas permiten que las sepas (gneros) de diferentes hongos colonicen
distintos sustratos como la fresa, arepa y gelatina?

SNTESIS
Este informe es producto de un estudio investigativo con relacin a cultivos caseros
micticos en diferentes tipos de alimentos, para el reconocimiento de morfotipos y
colonias de crecimiento de hongos microscpicos y estructuras principales, adems de
evaluar otros factores como la variabilidad de cepas segn el tipo de sustrato y las
condiciones ambientales a las que son expuestos.

Para el estudio de estos microorganismos cultivables, es necesario conocer la morfologa

microscpica y macroscpica a partir de su crecimiento en los diferentes sustratos;
adicionalmente, es posible evaluar el comportamiento de ellas frente a los diferentes
compuestos nutritivos proporcionales aquellos nutrientes adecuados para su desarrollo y
de otros factores generales que los condicionan.
Los gneros de hongos encontrados sustratos fresa, gelatina y arepa fueron: Rhizopus,
Mucor, Fusarium, Diplosporium, Penicillium, Aspergillus y Rhizomucor. Estos
microorganismos son saprfitos, tpicos descomponedores de materia orgnica y son
importantes tanto para.
REACCIN INTELECTUAL
Materiales y metodologa
Para este laboratorio se utilizaron tres tipos de sustratos para el crecimiento de las cepas de
hongos: fresas, arepas comerciales y gelatina de mandarina.
Todas las muestras se conservaron en ambientes cerrados, oscuros y hmedos. Estos
sustratos estuvieron expuestos durante ocho das, lo que posibilit el asentamiento de
esporas fngicas y crecimiento de varias unidades formadoras de colonia en los alimentos a
estudiar.
El crecimiento de los hongos vari conforme al tiempo y a las condiciones estudiadas.
Durante los ocho das de investigacin se realiz una observacin y caracterizacin
macroscpica de la aparicin de diversas unidades formadoras de colonias, la identificacin
general de los hongos se realiz por microscopa en el octavo da.

ANLISIS

Tabla 1. Condiciones del medio global (Manizales) a las que fueron expuestos los
sustratos.
SUSTRATO 1. GELATINA:
Composicin:
La mayora de la gelatina procede de la piel del cerdo, la cual est compuesta de 85 o 90%
de protena proveniente del colgeno y entre 1 y 2% de sales minerales. El porcentaje
restante es agua. aprox. 11%.
Debido a su composicin y a la dilucin que lleva en agua para su preparacin la humedad
de la gelatina es perfecta para el crecimiento de cepas. La gelatina presenta un pH entre 4.6

y 5.2 indicando que es acido. La elaboracin de la gelatina se origina con partes de

animales muertos, contando con un 27 % hueso, 28% piel de vaca, 44% piel de cerdo, y
1% otros. (Clemente, 2015)
Aspergillus y Penicillium observados en la gelatina
Los hongos observados en la gelatina pertenecen a los gneros Aspergillus y Penicillium,
los cuales hacen parte del filo Ascomycota, estos gneros son saprfitos los cuales son
capaces de colonizar y degradar numerosos sustratos como papel, cuero, pinturas o
alimentos, sus hbitats comunes son pilas de heno, el compost, el suelo y los ambientes
polvorientos. El Aspergillus se caracteriza por presentar colonias de colores variados
(verdes, amarillas, blancas, marrones o negras), la mayora de las especies de Aspergillus se
encuentran en lugares que son hmedos y donde hay gran cantidad de oxgeno. El
Penicillium es conocido como mohos verdes o azules.
Los dos gneros pueden vivir casi en cualquier lugar, ya que liberan esporas que estn en el
aire. Tambin se encuentran comnmente en lugares con una temperatura alta.
(Abigailsanluis, 2013)
La colonizacin del Aspergillus y el Penicillium en la gelatina se ve fomentada por las
caractersticas presentes tanto en el alimento (ver composicin gelatina) como en el medio
al cual fue expuesto (ver tabla 1).
Los hongos saprfitos crecen fcilmente en un medio con un pH entre 5 y 8, la acidez con
la que cuenta el alimento estudiado (ver composicin gelatina) pudo ser un factor
inhibitorio para la proliferacin de ms hongos de estos tipos.
Una caracterstica muy importante a la hora del crecimiento de estos hongos saprfitos es la
temperatura, para que sea ptima para el crecimiento debe estar entre los 20 y 30 C
(hongos , s.f.). como se observa en la tabla 1 la temperatura promedio de manizales para
mediados de octubre fue ptima para la buena proliferacin de los hongos Aspergillus y
Penicillium.

Ilustracin 1: Arpergillius

Ilustracin 2: Penicilium

Zhizomocur miehei en gelatina.

Ilustracin 3:
Rhizomucor

Una de las colonias formadoras de colonia no fue

identificada inmediatamente en el laboratorio dada su
morfologa microscpica. Segn las caractersticas que
presenta este hongo, se le identific posteriormente en el
gnero Rhizomucor, probablemente de la especie
Rhizomocur miehei. Posee aleuriosporas (esporas que se
forman a partir de la hifa a manera de brote), siempre
con un septo por debajo del esporangio y las hifas no son
septadas (Ver Ilustracin 1).

El gnero Rhizomucor se distingue principalmente de Mucor por la presencia de estolones y

rizoides poco desarrollados en la base de los esporangiforos y por la naturaleza termfila
de sus dos especies: R. miehei y R. pusillus. Ambas especies son potenciales patgenos
humanos y animales y se clasificaron originalmente en el gnero Mucor. (The University of
Adelaide)
Los cultivos se caracterizan por compacto y de bajo crecimiento (2-3 mm de alto). Todas
las cepas de Rhizomocur miehei son homotlicas y forman numerosas zigosporas. Resalta
por su crecimiento a 45C (termfilos) y el escaso desarrollo de ramificacin. El
crecimiento es estimulado por la tiamina, sin asimilacin de temperatura de crecimiento de
sacarosa y el mximo es 54-58C (The university of Adelaide).
Se encuentra en abundancia en los pastos, y quizs incluso en su montn de compost. En
investigaciones se realiz una preseleccin de un organismo que produjera una enzima
similar a la quimosina, este hongo apareci fuertemente (Lactocyex).
La lipasa de Rhizomucor miehei (anteriormente Mucor miehei) (RML) es una enzima
disponible en el mercado tanto en forma soluble e inmovilizado con actividad muy alta y
buena estabilidad en diversas condiciones (disolventes orgnicos anhidros, fluidos
supercrticos, etc.). Esta lipasa fue producida inicialmente para ser utilizado en la industria
alimentaria. (Rodrigues & Fernndez, 2010)
En un estudio se evaluaron las cepas de Rhizomucor y todas mostraron tener capacidad para
producir enzimas con actividad coagulante. La variacin de la concentracin de glucosa del
medio cultivo durante la incubacin, fue similar para todas las cepas evaluadas, mostrando
la misma tendencia y tasas de consumo de glucosa, un comportamiento similar fue
registrado por la sepa Mucor miehei en un medio estndar utilizando glucosa y almidn
soluble como fuente principal de carbono. La mxima actividad coagulante de cada cepa en
estudio, fueron inferiores a los registrado por una cepa de Mucor miehei. (Morillo, Garca,
Guerrero, Torres & Castaeda, 2015). Debido a esta concordancia de factores, surge una
hiptesis: la presencia de Rhizomucor en la gelatina puede ser debida al asentamiento

fortuito de las esporas durante la semana de estudio o quiz es debido a una

termorresistencia de las esporas durante la cadena agroalimentaria.
Lo anterior, sirve como sustento para validar la presencia del hongo Rhizomucor en el
sustrato de gelatina, no slo en la relacin que mantienen por las enzimas con actividad
coagulante, sino que adems la gelatina brinda todo una serie de condiciones fsicoqumicas apropiadas para la reproduccin de este microorganismo (suministro de
nutrientes, sustrato consistente, humedad). Durante la semana de observacin, se analiz
que el crecimiento mictico tard alrededor de 5 das, este tiempo pudo ser menor si se
tuvieran condiciones ms controladas para el desarrollo de la colonia en particular (por
ejemplo la temperatura: se conserv la muestra a una temperatura aproximada de 22C, al
ser un microorganismo termfilo, R. miehei requiere de una temperatura ptima de 45C).

Diplosporium sp. en gelatina

El hongo Diplosporium se caracteriza
por la produccin de esporas que nacen
en conidiforos cortos como esporas
individuales. El gnero y su posicin
taxonmica son tan imperfectamente
descritos que ser designado en el
presente
informe
slo
como
Diplosporium sp.
Diplosporium crece fcilmente en
medios lquidos o semislidos en una
fuente de carbono orgnico, lo que
produce un gran nmero de
Ilustracion 4:
conidiosporas que son fcilmente
liberadas de los micelios y que germinan a un ritmo elevado . Esto explica en parte porque
este hongo se encontr en gran cantidad en el sustrato de gelatina, la cual es semislida y
proporciona carbono para las cepas micticas halladas. (Kidder)
Mucor y Rhizopus
Ambos gneros pertenecientes a la clase Zigomicetos, estos hongos son saprfitos, se
alimentan de materia orgnica muerta o en descomposicin, causa de la pudricin de las
frutas, invadindolas y secretando a travs de la herida ms leve, una enzima que produce
rpidamente una pudricin aguda que se sale de la fruta bajo condiciones de mucha
humedad, la fruta se cubre con una capa de micelio fibroso duro y de estructuras redondas
de color negro que producen esporas (Snchez, A.(2013))

Las condiciones ideales para que stos gneros se den de manera ptima son:
1. Temperatura en un rango de 20 a 30 C
2. Radiacin ultravioleta: no requieren radiacin, sin embargo la alteracin de luzoscuridad favorece la reproduccin.
3. La humedad relativa del ambiente: una alta humedad relativa puede provocar
condensacin de humedad en los alimentos. La condensacin a su vez causa superficies
hmedas, que conducen al crecimiento de organismos y la descomposicin de los
alimentos.
4. Un pH en un rango de 5 a 8.

Ilustracin 5: Mucor

Ilustracin 6: Rhizopus

Presencia en gelatina:
La presencia de estos morfotipos en la gelatina, se confronta con las condiciones del
sustrato y condiciones externas.
Para las condiciones externas, tenemos una compatibilidad perfecta (ver tabla #1: datos
generales de las condiciones externas).
Por otro lado, tenemos los medios que le proporciona el sustrato, como un pH de 5-8, al
cual se adapta perfectamente a lo tolerado por estos hongos,
La invasin de estos hongos sobre la gelatina, se ve favorecida por las caractersticas que
esta presenta, la gelatina posee un 11% aprox. de agua, lo que proporciona humedad que es
el medio ideal para el crecimiento de un hongo. Al comparar el pH ptimo para el
desarrollo del Mucor y el Rhizopus, con el pH de la gelatina, se puede deducir que este
retrasa el crecimiento de dichos hongo, pero al contar con ms caractersticas que favorecen
su desarrollo, un PH cido no es suficiente para evitar el crecimiento del Mucor y
Rhizopus.
La gelatina utilizada para el cultivo, fue expuesta a una temperatura promedio de 22 C,
con gran ventilacin, tomando en cuenta su mtodo de reproduccin (a travs de esporas)
esta condicin facilita el proceso de la colonizacin.
SUSTRATO 2. FRESA:

Composicin de la fresa
alrededor del 85% de su composicin es agua
posee un PH de 3,3 (cido)
La invasin de estos hongos sobre la fresa, se ve favorecida por las caractersticas, tanto de
la fruta, como del medio externo al cual fue expuesta. La fresa posee en torno al 85% de
agua, lo que nos indica alta humedad. Al evaluar y comparar el PH ptimo para el
desarrollo del Mucor y el Rhizopus, con el pH de la fresa el cual es de 3.3, se puede
deducir que este retrasa el crecimiento de dichos hongo, pero al contar con ms
caractersticas que favorecen su desarrollo, un pH cido no es suficiente para evitar el
crecimiento del Mucor y Rhizopus. Al dirigirnos al medio en el que se desarrollan,
podemos decir que un hongo saprfito, se ve favorecido por condiciones ambientales
mencionadas anteriormente.
Las fresas utilizadas para el cultivo de hongos, fueron expuestas a una temperatura
promedio de 22C, con gran ventilacin, tomando en cuenta su mtodo de reproduccin (a
travs de esporas) esta condicin facilita el proceso de la colonizacin. Dichas frutas
estuvieron 4 das exteriorizadas en el medio ambiente, es decir que la humedad relativa
promedio es de 80% (humedad relativa de la ciudad de Manizales) (Gobernacin de Caldas
(2016)).
Al analizar y comparar los factores que se requieren para el desarrollo del Mucor y
Rhizopus, con los factores a las cuales fueron expuestas las fresas, es consecuente que se
hayan desarrollado dichos hongos sobre esta fruta, teniendo en cuenta que se les
proporcionaron todas las herramientas necesarias para su crecimiento.

SUSTRATO 3. AREPA:
Composicin:
La arepa de maz posee una humedad del 56.61% el cual es un porcentaje bastante elevado
teniendo 13.20 gramos de agua por cada 100 gramos de arepa (Toro, Y., Guerra M.,
Espinoza C., Newman A., 2001), posee tambin 66.30 gramos de hidratos de carbono, 8.29
gramos de protena, 9.42 gramos de fibra, 2.82 gramos de grasa, 2.40 miligramos de hierro,
1.60 miligramos de zinc entre otros, todas estas masas estn presentes en cada 100 gramos
de arepa. Debido a todos estos datos, mayormente la humedad, es un muy buen medio para
el crecimiento de cepas de hongos.
Fusarium y Cephalosporium encontrados en la arepa
Los gneros Fusarium y Cephalosporium, son un generos de hongos filamentosos los
cuales para su desarrollo requieren temperaturas entre 0C y 50C (exactamente 37C en el
caso del fusarium), un pH entre 5.6 a 6.8, una humedad relativamente alta, en cuanto a la
luminosidad no es necesario una oscuridad constante, lo que ms ayuda son cambios de luz
frecuentemente, y los hongos no son exigentes en la riqueza del sustrato, pero hay dos
elementos necesarios para el crecimiento de los hongos que es el hierro y el zinc.

En el caso de nuestro cultivo los hongos se colocaron trozos grandes de arepa con un poco
de mantequilla debajo de un lavadero, lo cual aumenta el porcentaje de humedad en el
ambiente, a la sombra durante varios das en los cuales la variacin de la temperatura fue de
una mxima de 24C y una mnima de 13C la cual es perfecta para la aparicin de hongos.
En cuanto a la riqueza de Fe y Zn en el sustrato encontramos que por cada 100 gramos de
mantequilla encontramos 0.20 miligramos de Hierro y 0.10 miligramos de Zinc y por cada
100 gramos de arepa encontramos alrededor de 2.40 miligramos de Hierro y 1.60
miligramos de Zinc lo cual favorece ms el crecimiento de hongos en este alimento segn
su riqueza nutricional que en los otros sustratos evaluados en el experimento (Fresas y
gelatina).
CONCLUSIONES
Para el cultivo de microorganismos y para este caso en particular, los hongos,
requieren de unas condiciones generales necesarias para su desarrollo, tales como:
disponibilidad de nutrientes, temperatura, humedad, pH, consistencia del medio,
presencia o ausencia de oxgeno y otros gases, luz ambiental, etc.
La variabilidad y control sobre las condiciones evaluadas, pueden limitar o propiciar
el desarrollo de las colonias microbiolgicas.
Para la identificacin de las poblaciones micticas es necesario hacer una
caracterizacin morfolgica macro y microscpica. Si se desea hacer una
identificacin ms especfica del hongo, podra complementarse con pruebas
bioqumicas y/o medios de cultivo selectivos y diferenciales.
Los hongos encontrados en los diferentes sustratos son saprfitos, es decir, se
alimentan de materia orgnica muerta o en descomposicin. La biotecnologa y la
industria, pueden hacer uso de ste y otros procesos biolgicos de estos
microorganismos, ya sea para la produccin de alimentos y medicinas, procesos de
biorremediacin, etc.
A pesar de que el Mucor y el Rhizopus pueden colonizar otros tipos de alimentos
como cereales, gelatinas, e incluso estircol y excrementos, su crecimiento en las
frutas es ms propicio para su desarrollo debido principalmente a su alto ndice de
humedad, lo cual es indispensable para el proceso de colonizacin de dichos
hongos. Adems el cultivo de los hongos sobre la fruta fue exitoso gracias a que
fueron expuestas a las condiciones ambientales requeridas.
En la gelatina se pueden observar fcilmente hongos debido a que los ingredientes
que la componen forman un hbitat idneo para la buena alimentacin y
reproduccin de estos, asemejndose a los agares que se emplean en los laboratorios
de microbiologa.

 En el cultivo de cepas realizado en la arepa se observ gran efectividad debido a la

humedad tanto del medio como del ambiente que lo rodeaba, es decir, debajo de un
lavadero comn de patio donde la humedad relativa es siempre alta, esto y la
riqueza en hierro y zinc de el sustrato dieron unos resultados efectivos.

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ANEXOS

Tabla #2: Gnero hongo/sustrato

Gelatina, da 6 de exposicin.

Arepa, da 6 de exposicin.

Fresa, da 6 de exposicin