LEVE

DURA

Capturando levedura

Voc quer capturar sua prpria cultura de levedura selvagem ou estirpe?

Com as ferramentas certas, e estes trs mtodos fceis, voc pode capturar
certo fermento em seu prprio quintal.

Mtodo # 1: Frascos starter de levedura selvagem

O fato o seguinte como o S. arlingtonesis foi originado a partir do ar

ambiente em Arlington, VA. Esta uma modificao da tcnica de starter de
levedura Ambiente-espontnea do The Mad Fermentationist. O objetivo final
isolar uma cepa, assim que as mudanas foram feitas.

Criar um banho de levedura: Dia Um

Frascos de arranque de levedura selvagem

Criar um frasco de starter como voc faria normalmente para um lote de
cerveja caseira. Para facilitar, utilizar uma proporo de gua filtrada na
proporo de 1/10 de extrato de malte (1,040 gravidade). A gravidade mais
fraca vai funcionar to bem, use o que voc est confortvel. Crie um
volume suficiente para encher trs ou mais jarros pela metade (quanto mais
frascos, maior ser a probabilidade de sucesso).
Ferve-se a mistura de lquido com uma pequena quantidade de lpulos
durante pelo menos 20 minutos. Voc pode ferver por mais tempo com mais
lpulo, mas o que se est querendo aqui apenas tentar esterilizar o mosto
e pegar as propriedades antibacterianas do lpulo (lpulos vo abrandar
principalmente o crescimento de Lactobacillus. Claro, voc pode, no futuro,
quer cultivar Lacto ter sua prpria estirpe azeda. Mas vamos guardar isso
para outro dia).
Uma vez que o lquido tenha esfriado o suficiente para que voc no se
queime caso este venha a derramar, despeje em frascos de geleia
sanitizados. Se voc tem um medidor de pH, agora um bom momento
para verificar o nvel de pH; isso vai ser til mais tarde, quando verificar se o
tipo certo de fermentao ocorreu.
Cubra com pano de queijo, gaze ou perfect (para evitar que insetos entrem
em sua partida de levedura) e mantenha no lugar para rosquear as tampas
do pote ou apertar com um elstico.
Coloque os frascos durante a noite do lado de fora, em uma erva ou horta,
debaixo de uma rvore de fruta ou at mesmo em sua cave cervejeira.
Qualquer lugar com bom fluxo de ar, vegetao vibrante e livre de criaturas
da floresta curiosos ir funcionar bem. Por favor, no coloque perto de um

tanque sptico, um beco ou outro local potencialmente contaminado (que

nojento, e provavelmente no seguro).

De volta para casa: Segundo Dia

No dia seguinte, trazer todos os frascos deixados do lado de fora.

Remover o pano de queijo. Voc pode deixar o lquido nos frascos, mas se
voc fizer isso certifique-se de cobrir a superfcie do lquido para evitar o
contato com o ar. Isso ajudar a reduzir as chances de crescimento de
fungos na superfcie. Voc provavelmente ainda assim poder obter mofo,
mas isso provavelmente vai fazer voc se sentir mais pr-ativo. Outra opo
a derramar o lquido em um Growler ou jarro e tampar e cobrir com um air
lock.
Deixe em um lugar escuro, a temperatura ambiente.
Monitorar os sinais de fermentao: Um dia + Duas Semanas
H um fungo entre ns
H um fungo entre ns
Dentro de alguns dias deve haver os primeiros sinais de fermentao, uma
pequena quantidade de bolhas de CO2 na superfcie de seu frasco ou uma
pequena atividade no seu air lock. No se preocupe se voc no v sinais de
atividade rapidamente. Comparado a um starter normal que teve milhares
de milhes de clulas de levedura acostumados ao acar da cevada, uma
quantidade relativamente pequena de micrbios selvagens comearo a
colonizar seus starters de leveduras selvagens.
ABSOLUTAMENTE NO GOSTO de provar nada at tudo estar totalmente
fermentado. Nunca prove o gosto de qualquer starter a menos que a
fermentao ativa foi verificada por um perodo suficiente de dias.
Aproximadamente duas semanas (assumindo que cada frasco ou Growler
fermentou) deve ser seguro provar o gosto. Certifique-se de raspar todo o
mofo, a menos que esse seja o seu objetivo (por favor, simplesmente o
faa). A presena de bolor, no significa que o seu starter de levedura
selvagem est arruinado, apenas uma parte comum do processo. Se voc
tem um medidor de pH, comparar o pH atual para a leitura que voc tomou
antes de colocar os frascos do lado de fora. Se o pH caiu significativamente

provavelmente voc est seguro. Se o pH aumentou para qualquer um dos

seus frascos, descartar o lquido e seguir em frente.
Use o teste do cheiro em primeiro lugar. Se cheira bem (mel, frutas ctricas,
etc), voc provavelmente tem algo seguro. Creme de milho um aroma
comum a partir de certos leveduras selvagens, e estas estirpes muitas
vezes no iro flocular bem. Se cheirar bem, use uma pipeta higienizada
para puxar uma amostra de debaixo da superfcie. Se o gosto
remotamente aceitvel, e caiu bem ... voc provavelmente tem algo
incrivelmente IMPRESSIONANTE.
Agora voc est pronto para criar placas de gar para que possa isolar o seu
prprio fermento. Voc sabe que voc quer.

NOTA DO EDITOR: Sempre praticar o bom senso. Se cheirar horrvel, e

parece horrvel no prove o gosto dele. Tente um de seus outros frascos de
teste. Se voc olhar para a foto acima, o frasco no meio tem uma tonalidade
avermelhada / orangeish. Um bom sinal que este frasco no deve ser
provado. Coisa boa no , porque, eventualmente, cresceu um cogumelo
maldito. Isso tudo.

NOTA DO EDITOR # 2: Depois de ler esta pgina, Ingo, mencionou que ele
adiciona o cido lctico para baixar o pH ao fazer starters selvagens. Se
voc est preocupado com convidados indesejados no seu starter de
levedura selvagem, este poderia ser um bom caminho a tomar. Maltes
acidulados poderiam ser usados tambm.

Levedura selvagem da Fruta

Mtodo # 2: Coleta de amostras de Frutas e Legumes

Os micrbios que vivem em frutas so principalmente leveduras e fungos,

enquanto os vegetais tm tipicamente bactrias acido-lcticas-produtoras
de "azedo", como Lactobacillus e Pediococcus de uma forma geral (de
acordo com um artigo de Microbiologia de Alimentos). Tenha isso em mente
ao tentar capturar os micrbios da sua vegetao local.
Coleta de amostras de leveduras selvagens de frutas e legumes
significativamente mais fcil do que criar um arranque levedura selvagem
(Mtodo # 1). Procure por frutas e vegetais que parecem ter uma fina
camada de sujeira em sua pele ou que comearam a apodrecer (mas no
use nada que j esteja cado no cho!). Mesmo se a terra no estiver
presente, voc est praticamente garantido de coletar certa quantidade de
leveduras selvagens.

Tal como ilustrado direita, to simples como colocar diversas frutas em

tubos de centrfuga higienizado, ou frascos de geleia de vidro.
Despeje uma baixa gravidade (1,010-1,020) de mosto de starter sem lpulo
para o recipiente com frutas. Apenas despeje o suficiente para cobrir a fruta
ou legumes, mas deixar espao suficiente para a atividade de fermentao
no topo. No necessrio para a fruta ser esmagada para que a
fermentao ocorra.
Enrole a vedao entre a tampa e o recipiente com filme plstico. Agite
vigorosamente para arejar, e depois deixe em um lugar de temperatura
ambiente e escuro, um quarto.
Dentro de alguns dias voc deve ver sinais de fermentao ocorrendo. Um
sedimento de levedura ir, eventualmente, formar, na parte inferior.
hora de criar placas de gar. Voc pode faz-lo!
Swab de levedura selvagem

Mtodo # 3: estreis compressas de algodo

Cotonetes estreis so pequenos e esto embalados individualmente,
tornando-os mais fceis de viajar do que com um pote de starter.
Ir de frias para um local divertido? Leve um cotonete e um tubo. Voando
internacionalmente e com medo que voc no possa trazer frutos de volta,
em funo de funcionrios aduaneiros curiosos? Cotonete, tubo. Visite uma
fbrica de cerveja azeda disposta a dar-lhe uma entrada em seus
recipientes de fermentao? Voc adivinhou. (Mas no seja um idiota de
pedir-lhes permisso para pincelar a cervejaria, faa-o quando ningum
estiver olhando).

A srio.
Desembrulhar cotonete estril.
Swab de fruta apetitoso, tanque de fermentao ou voluntrio entusiasta.
Coloque em um tubo higienizado de centrfuga, sele, e aloje em um lugar
escuro at que voc esteja pronto para comear a fermentao.
Crie um mosto de baixa gravidade (1,010-1,020) sem lpulo para starter e
despeje em um recipiente esterilizado com uma tampa, ou uma jarra ou
outro tubo de centrfuga.
Remova seus cotonetes e misture formando um redemoinho no mosto de
starter vrias vezes at que o cotonete fique totalmente saturado, e
qualquer poeira do cotonete tenha dissolvida no mosto.
Dentro de alguns dias voc dever ver os sinais normais de fermentao.
Veja, no foi assim to dificil?

Voc adivinhou. Hora de criar placas.

Criando
placas de
gar

Ento voc j adquiriu algumas leveduras selvagens e os micrbios de seu

quintal, frutas ou sala de barril. Talvez voc j tenha fabricado cervejas com
ela e agora tem a sua prpria cultura em sua casa. Fantstico. Voc uma
estrela do rock.
Mas o que voc realmente tem? Leveduras selvagens? Ou algo funky, como
Brett? Ou tudo isso que falamos? O que est causando aquela fermentao
azeda? Culturas selvagens mistas so maravilhosas, e esto to perto de
ns que j vamos comear a replicar prticas de fermentao milenares.
No somente isolar estirpes individuais puras que voc vai te dar a
capacidade de obter algum tipo de controle sobre seus micrbios e ser
capaz de reproduzir com preciso lotes semelhantes. Voc tambm vai ter
que aprender o que fazer com cada tipo de estirpe, e quais estilos de
cerveja e ingredientes que iro se fundir melhor. Alm disso, uma vez
isolada a sua prpria cepa de levedura, todos vo pensar que voc um
garoto prodgio..

*** Outro / ferramentas opcionais ***

Agar uma substncia gelatinosa feita a partir de algas que quando cozidas
com o mosto faz com que a mistura se transforme rapidamente em um
slido, gelatinoso, que as colnias de micrbios individuais podem crescer e
se alimentar.

Criando uma plac Simples: 3

300 ml de mosto 1.040 (ou inferior) (Se estiver usando o extrato,

ferver a gua e mistura DME antes de adicionar outros ingredientes
da receita)
5 gramas de p de gar-gar (Adicione mais se o lquido no se
definir)
Nutrientes de levedura (outras fontes de aminocido pode ser
adicionados, devido sua vantagem para metabolismo da levedura,
mas no so necessrios)

Ferva o mosto em uma panela pequena at prximo da ebulio e misture

com o gar.

Leve para ferver. Agar e mosto de cerveja no vai se ligar com sucesso se
no for trazido at ferver.
Deixe esfriar por alguns minutos at que a temperatura esteja abaixo de
38C por aproximadamente 5-10 minutos. Assista o seu pote de perto, o gar
pode definir muito rapidamente; o meio ainda deve ser um lquido espesso
quando vertido para a placa de petri.
Criando Placas - Despeje uma pequena camada de lquido sobre a placa de
petri e mova-se para uma rea sem correntes de ar. importante deixar que
o lquido esfrie antes de cobrir com tampa a placa de Petri para evitar a
formao de condensao na tampa, o que ajuda a reduzir a probabilidade
de crescimento de fungos.
Se foi utilizada uma boa relao gar/mosto, as placas de gar devem se
definir dentro de alguns minutos. Se voc achar que suas placas no esto
prontas, voc pode precisar referver sua mistura acrescentando mais gar.
Enrole as extremidades da tampa da placa com filme plstico extensvel ou
durex esticado de 1/2 polegada em tiras. Isso ajudar a reduzir
contaminantes na placa de gar e impedir que a placa de gar seque, se
voc no usar a placa logo em seguida.
Deixe suas placas de cabea para baixo (evita a condensao de cair no seu
meio de gar) por um par de dias em um lugar quente, escuro para incubar.
Isso ajudar a determinar quais as placas que esto contaminados com
esporos de fungos ou outros convidados indesejados, tornando-as inteis
para uso. Quando estiver pronto, armazene de cabea para baixo em um
saco plstico e leve geladeira.
Lembre-se, voc no est trabalhando em uma sala limpa com um capuz,
voc ter pratos contaminados. Ento, no fique triste quando alguns dos
pratos que voc criou esta aparncia aps incubao:

Agora que voc j fez a sua prpria placa de gar, a ltima coisa a fazer
isolar o fermento.
1. Agar barata pode ser adquirida em alguns supermercados internacionais,
atravs da Amazon ou o pessoal da Bootleg Biology. Muitas pessoas que
trabalham em laboratrios fazem placas de gar apenas fervendo batatas.
2. A nica maneira de evitar que verdadeiramente outros bugs e mofos
cresam em suas placas de gar usando alguma forma de radiao, como
coloc-los sob uma luz UV antes da incubao. Voc provavelmente vai
perder algumas placas sem a luz, por isso pode ser melhor usar placas
reutilizveis de petri ao invs de vidro. Eu comprei uma luminria barata a
partir da Home Depot e uma lmpada UV antimicrobiana barata de
1000bulbs. Se voc vai cruzar a rota de uma luz UV, no seja tolo e tome
cuidado para no queimar seu olho, use sempre protetor de olho e roupas
quando se trabalha com luzes UV.
3. Esta receita to simples como comear um mosto de cerveja. Se voc
quiser experimentar com diferentes receitas / meios para ajudar a
selecionar para diferentes tipos de micrbios, eu recomendo visitar blog.
de BKYeast.

Se voc
criou
terminar
Isolar a
simples.
em uma
gar,

Isolan
do
ferme
nto

j capturou a levedura selvagem e

placas de gar, ento por que no
o trabalho?
levedura neste momento to
Basta pegar uma quantidade muito
pequena de sua cultura e esfrega-las
placa de gar. Devido ao meio do
estveis e no-lquido, uma vez
esfregadas, as colnias individuais

iro se formar por si s.

Depois de alguns dias ou semanas (dependendo da temperatura de
incubao e da populao microbiana), eles vo multiplicar e crescer o
suficiente para ser visto a olho nu. Nesse ponto, uma questo de
selecionar as colnias que voc gosta e faz-las crescer at quantidades
maiores.
importante reforar bastante a ideia da limpeza e do saneamento neste
momento do processo. Se voc quiser realmente uma linhagem pura, voc
precisa garantir que no esteja contaminando o que voc est tentando
isolar com outras culturas.
*** Outro / ferramentas opcionais ***
Se voc j tem uma cultura Saccharomyces de um laboratrio de levedura
acessvel, o ideal e praticar em uma placa com uma cultura pura. Isso
ajudar voc a ter uma ideia do que colnias de levedura de cerveja
geralmente se parecem. Isso ser til ao decidir que as colnias que deseja
selecionar quando se isola.
Ligue o queimador. Tente fazer o mximo de seu trabalho como possvel
prximo a esta fonte de calor. Ele ir ajudar a manter a sua rea de trabalho
descontaminada atravs da criao de uma corrente ascendente em que
voc vai fazer a sua estrias.
Retire o filme plstico de sua placa de gar. Se voc manteve-o refrigerado
de cabea para baixo, voc vai ter alguma condensao que formada na
tampa. Mantenha o prato de cabea para baixo, retire a tampa do fundo e
apenas rapidamente deixe a gua cair. Coloque o seu prato de cabea para
baixo de volta na tampa.
Esterilize seu loop (ou clipe de papel), colocando sob chama do queimador
at ficar bem quente vermelho. Certifique-se de deix-lo esfriar por cerca de
30 segundos antes de ir para a prxima etapa (ou mergulhando-o em algum
desinfetante), caso contrrio voc vai caramelizar seus amigos micrbio.
Se a sua cultura foi adquirido a partir de um starter de fermento Selvagem,
use uma pipeta higienizado para puxar uma amostra a partir do fundo. Se a

sua cultura est em um tubo de ensaio, agit-lo para distribuir a levedura.

Mergulhe o loop em sua cultura lquido. Voc s precisa de uma quantidade
muito pequena, apenas o suficiente para chegar a ponta molhada (apenas a
ponta). Embora parea uma pequena quantidade, uma vez banhado e
incubadas voc ter micrbios suficiente para trabalhar.
Remover a tampa da placa de gar. Gentilmente raia algumas linhas ao
longo da borda externa da placa de gar em um ngulo. H muitas tcnicas
para estrias, mas acho que a criao de uma forma de diamante funciona
melhor para mim (assista ao vdeo e confira a imagem abaixo para
exemplos).
Placa riscada aps incubao
Esterilizar a ala sob a chama novamente. Isto importante porque voc
acabou de colocar uma enorme quantidade de micrbios no seu prato em
uma raia. Aps este ponto, voc s quer desbastar o que voc j semeado
em placa. Caso contrrio, voc vai ter grandes bolhas de micrbios em
todos os lugares, o que torna quase impossvel isolar uma colnia.
Esterilizar ciclo novamente. Volte para as estrias anteriores e arraste
atravs delas, a criao de linhas em outra direo. Continue a repetir esse
processo at que voc tenha riscado em quatro direes diferentes na parte
externa da placa. Se houver espao, faa um ltimo conjunto de estrias,
mas desta vez estrias para o interior da placa. Tenha cuidado especial que
voc s raia para o espao no utilizado anteriormente.
Gire a placa (gar para o lado de cima) e coloque em cima da tampa. Mover
para, rea escura quente para incubar. Isso pode levar apenas alguns dias
ou um par de semanas, dependendo de quantas clulas que inicialmente
comeou e a temperatura de incubao.
Se voc usou um Saccharomyces puro inocule para praticar, voc deve ver
agora uma grande quantidade de colnias brancas e off-white de levedura.
As primeiras linhas que voc listrou deve ser a parte mais pesada na
concentrao, e as linhas seguimtes devem ficar progressivamente menos
densas at se ver colnias individuais por si no interior da placa.
Cultura de levedura selvagem: Repita os passos 1 a 8. Uma vez que a placa
foi incubada, voc ver diversos tipos de colnias em crescimento e,
possivelmente, de mofo. Desde que voc deseje isolar uma cepa de
levedura selvagem entre vrios tipos diferentes de micrbios, importante
que voc inicie o prximo processo logo depois de ver uma boa quantidade
de colnias se formarem na placa. Se voc esperar muito tempo, algumas
colnias vo crescer mais rpido do que outras e, eventualmente, lev-las a
um longo perodo de tempo, tornar impossvel isolar qualquer uma delas.
Seleo de Colnias:
Visite nossa Galeria de Micrbios para ver exemplos dos micrbios mais
comuns observados na fabricao de cerveja para as colnias com
morfologias semelhantes (cor, forma de arestas e tipo de crescimento para
cima). Voc deve fazer um prato modelo para praticar utilizando uma
estirpe Saccharomyces pura, e comparar essa com as outras.

Para aumentar as chances de isolar uma cultura pura, selecione apenas

uma colnia para se propagar. O ideal selecionar pelo menos algumas
colnias para aumentar a diversidade gentica de sua cultura, mas sem o
benefcio de um microscpio, voc no vai saber se as colnias que voc
selecionou so as mesmas. Se voc quiser ir por esse caminho, voc
precisar de outra placa modelo usando a cultura que voc selecionou para
garantir uma linhagem pura.
Pegue uma nova placa da geladeira e remova o durex.
Segure seu prato previamente riscado. Deve ser uma cornucpia de
micrbios (incluindo mofo). Este ok!
Selecione colnias por cor / tamanho / formato
Esterilize o loop sob o seu queimador. Deixe esfriar por cerca de 30
segundos.
Procure colnias individuais de mdio porte, brancas a esbranquiadas, bem
redondas.
Pegue uma pequena quantidade de uma colnia. Risque novamente uma
nova placa utilizando os passos # 1-8 da lista.
Continue escolhendo uma nica colnia, riscando e incubando as placas at
que voc tenha aquela em que todas as colnias em crescimento tm a
mesma forma, tamanho e cor.
Quando estiver neste ponto voc ter uma placa uniforme de organismos,
selecione uma colnia da placa utilizando uma ala estril.
Enterre em um frasco com 10 ml de mosto de baixa gravidade fervida ou
esterilizado (1,010-1,020). Sele e agite vigorosamente.
Voc tem agora o menor starter de levedura do mundo. O cu o limite
agora! Aumente at a quantidade desejada (10 ml para 100 ml a 1 litro) e
coloque em um lote de teste de cerveja.

No
sobre
para
1-

Esteriliza
o das
placas de
petri

achei muita coisa por aqui, tratando

as placas de petri em vidro, logo resolvi
compartilhar o procedimento que adoto
esterilizao
das
mesmas.
Lavagem

As placas so lavadas com detergente neutro, em gua corrente. A secagem

feita em escorredor, pois o uso de toalhas de pano ou papel podem deixar
resduos.
2-Preparao
Monto as placas e as embrulho em alumnio, mas antes dou UMA borrifada

de uma soluo de gua H2O2 (gua oxigenada) 3% dentro de cada

uma
delas.
3-Esterilizao com uso de calor
As placas so colocadas no forno (utilizo um eltrico) 200 graus Celsius
por trinta minutos. A soluo borrifada no interior de cada placa, no passo
anterior, far com que o envelope de alumnio funcione como uma micro
estufa.
isso! Com esse procedimento simples as placas ficam prontas para
receber o gar-gar.
Minha experincia com cido peractico e iodophor so muito boas na
desinfeco e reutilizao de placas de petri plsticas descartveis (ok, de
vidro tambm, mas a j tem as tcnicas j descritas).
Depois de tudo lavado, mergulho as placas em soluo de 200ppm de cido
peractico OU 25ppm de iodophor. Nem precisa enxaguar.
No tive problemas com contaminao nas placas que fiz isso.

Como
Cultivar
Bactria
em uma
Placa de
Petri

Sempre quis cultivar bactrias para um projeto

de cincia ou apenas por diverso?
surpreendentemente simples - tudo que voc
precisa um pouco de gar (um material de
crescimento gelatinoso especial), uma srie de
placas de Petri esterilizadas e algumas boas
fontes de bactrias repugnantes!
Parte1
Preparando as placas de Petri
1

Prepare o gar. gar a substncia gelatinosa usada para cultura de

bactrias. feito de um tipo de algas vermelhas, que fornece uma superfcie
ideal de crescimento para muitos tipos diferentes de bactrias. Alguns tipos
de gar contm nutrientes (como o sangue de ovelha), que ajudam a
promover o crescimento bacteriano mais vigoroso.
O tipo mais fcil de gar para se utilizar nesta experincia

um gar que vem em forma de p. Voc vai precisar de 1,2 g (cerca de 1/2
colher de ch) de p de gar para cada placa de Petri de 10 cm que desejar
usar.
o

Em um prato ou tigela prova de calor, misture 1/2 colher de

ch de p de gar em 60 ml (aproximadamente 1/4 de xcara) de gua

quente. Multiplique essas quantidades para quantas placas de Petri planejar

usar.
Coloque a tigela ou prato no micro-ondas e deixe ferver por um

minuto, olhando para certificar-se de que a soluo de gar no transborde.

Quando a soluo estiver pronta, o p de gar dever estar

completamente dissolvido e o lquido dever estar claro.

Permita que a soluo gar esfrie por alguns minutos antes de

prosseguir.[1]
2
Prepare as placas de Petri. Placas de Petri so pequenos recipientes com
fundo plano feitos de vidro transparente ou plstico. Elas tm duas metades
superior e inferior que se encaixam uma na outra. Isso protege o
contedo de qualquer ar contaminado indesejado, mas tambm permite
que quaisquer gases produzidos pelas bactrias escapem.
As placas de Petri devem ser completamente esterilizadas

antes de ser usadas para o crescimento de bactrias; caso contrrio, os

resultados do ensaio podem ser afetados. Placas de Petri recm-adquiridas
devem vir pr-esterilizadas e seladas em embalagens de plstico.
Remova a placa de Petri a partir da sua embalagem e separe

as duas metades. Cuidadosamente, verta a soluo quente de gar na

metade inferior da placa de Petri - apenas o suficiente para formar uma
camada sobre o fundo da placa.
Coloque rapidamente a metade superior da placa de Petri para

evitar que bactrias no ar de contaminem o experimento. Deixe as placas

de Petri de lado por 30 minutos a duas horas, at que a soluo de gar
esfrie e endurea (quando pronta, se assemelhar a gelatina). [2]
3
Refrigere as placas de Petri at que estejam prontas para uso. Se
voc no planeja usar imediatamente as placas de Petri preenchidas com
gar, devero ser armazenadas na geladeira at que esteja pronto para
prosseguir com o experimento.
o

Armazenar as placas de Petri no refrigerador impede que a

gua dentro das placas evapore (bactrias necessitam de um ambiente

mido para crescer). Ele tambm permite que a superfcie do gar endurea
um pouco, o que impede qualquer rompimento ou goivagem quando
transferir suas amostras de bactrias.
Ao armazenar placas de Petri no refrigerador, elas devem ser

colocadas de cabea para baixo. Isso ajuda a evitar que a formao de

condensao na tampa caia na amostra e interrompa a superfcie de
crescimento.[3]
As placas de Petri com gar podem ficar no refrigerador por at

dois meses. Quando estiver pronto para us-las, retire-as da geladeira e

permita que atinjam a temperatura ambiente antes de introduzir suas
amostras.

Parte2
Cultivando bactrias
1
Introduza bactrias nas placas de Petri. Uma vez que a soluo de gar
tiver endurecido e as placas de Petri estiverem temperatura ambiente,
voc estar pronto para a parte divertida - a introduo da bactria. H dois
mtodos de se fazer isso - atravs do contato direto ou por meio de coleta
de amostras.
o

Contato direto: Isto , quando as bactrias so transferidas

para a placa de Petri usando contato direto, ou seja, tocando o gar. Uma
das maneiras mais comuns de se fazer isso simplesmente pressionando a
ponta do dedo (antes ou depois de lavar as mos) levemente na superfcie
do gar. No entanto, voc tambm pode tentar pressionar a unha ou a
superfcie de uma moeda antiga no gar, ou at mesmo colocar um
pequeno cabelo ou gota de leite na placa. Use sua imaginao!

Coleta de amostras: Com esse mtodo, voc pode coletar as

bactrias a partir de praticamente qualquer superfcie e transferi-las para a
placa de Petri; tudo que voc precisa so alguns cotonetes limpos. Basta
pegar um cotonete e passa-lo sobre qualquer superfcie que imaginar - o
interior de sua boca, a maaneta da porta, as teclas no teclado do
computador ou os botes do controle remoto e, em seguida, risc-lo
superfcie do gar (sem rasg-lo). Esses lugares abrigam uma grande

quantidade de bactrias, e deve fornecer alguns resultados interessantes (e

nojentos) em dois dias.
Se voc quiser, pode colocar mais de uma amostra de

bactrias em cada placa de Petri - tudo que voc precisa fazer dividir a
placa em quadrantes (quartos) e passar uma amostra diferente de bactrias
em cada um deles.
2
Rotule e sele as placas de Petri. Depois de ter introduzido as bactrias,
voc deve colocar a tampa da placa de Petri e sel-la com um pouco de fita.
Certifique-se de etiquetar cada placa de Petri com a fonte da

bactria que ela contm; caso contrrio voc no ser capaz de dizer qual
qual. Voc pode fazer isso usando uma fita e um marcador.
Como uma precauo extra, voc pode colocar cada placa de

Petri em uma sacola com fecho hermtico. Isso fornecer uma camada extra
de proteo contra quaisquer colnias de bactrias perigosas que possam
se desenvolver, mas ainda permitir que voc visualize o contedo da placa
de Petri.
3
Coloque as placas de Petri em um lugar quente e escuro. Deixe as
placas de Petri em um lugar quente, escuro, onde as bactrias possam se
desenvolver, sem perturbao, por vrios dias. Lembre-se de guardar as
placas de cabea para baixo, de modo que o crescimento de bactrias
permanea imperturbvel por qualquer gota de gua.
A temperatura ideal para o crescimento de bactrias entre 70

e 98 graus F (20 a 37 graus C). Se necessrio voc pode colocar as placas

de Petri em um local mais fresco, mas a bactria vai crescer muito mais
lentamente.
Deixe as bactrias desenvolverem-se por 4 a 6 dias, pois isso

dar tempo suficiente para a cultura crescer. Uma vez que as bactrias
comearem a crescer, voc poder notar um cheiro vindo das placas.
4

Anote seus resultados. Depois de alguns dias, voc vai notar uma incrvel
variedade de bactrias, bolores e fungos crescendo dentro de cada placa de
Petri.
Use um caderno para registrar suas observaes sobre o

contedo de cada placa e, talvez, chegar a uma concluso sobre quais

locais tiveram o maior nmero de bactrias.
Foi o interior de sua boca? A maaneta da porta? Os botes do

controle remoto? Os resultados podem surpreend-lo!

Se quiser, poder medir o crescimento dirio das colnias de

bactrias, usando um marcador com ponta de feltro para traar um crculo

ao redor de cada colnia na parte inferior da placa de Petri. Depois de vrios
dias, dever ter um conjunto de anis concntricos no fundo de cada
recipiente.
5
Teste a eficcia de agentes antibacterianos. Uma variao interessante
sobre esta experincia a introduo de um agente antibacteriano
(desinfetante para as mos, sabonete, etc.) na placa de Petri, a fim de
testar a sua eficcia.
Depois de ter introduzido as bactrias a placa de Petri, use um

cotonete para colocar uma pequena gota de gel sanitizante de mos, sabo
desinfetante ou gua sanitria no centro da amostra bactrias e, em
seguida, continuar a experincia normalmente.
Conforme as bactrias na placa crescem, voc deve ver um

anel ou "halo" ao redor do local onde colocou o agente antibacteriano que

nenhuma bactria est crescendo. Isso conhecido como a "zona de
morte".
Pode-se medir a eficcia de diferentes agentes antibacterianos,

comparando o tamanho das zonas de morte em cada placa de Petri. Quanto

maior a zona de morte, mais eficaz ser o agente antibacteriano. [3]

Parte3
Descartando as bactrias de forma segura
1

Tome as devidas precaues de segurana. Antes de tentar desfazer-se

de suas placas de Petri, primeiro voc precisa tomar as precaues de
segurana adequadas.
Embora a maioria das bactrias que voc cultivar no seja

perigosa, grandes colnias de bactrias podem representar mais de um

risco - assim voc ter que mat-las antes do descarte, usando gua
sanitria.
Proteja as mos da gua sanitria atravs do uso de luvas de

borracha, proteja os olhos com culos de plstico e proteja as suas roupas

vestindo um avental.
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Despeje gua sanitria nas placas de Petri. Abra a placa de Petri e
despeje cuidadosamente uma pequena quantidade de gua sanitria em
cima das colnias de bactrias, segurando a placa sobre uma pia. Isso
destruir as bactrias.
Tenha muito cuidado para no deixar a gua sanitria tocar sua

pele, j que ele pode queimar.

Em seguida, coloque a placa de Petri desinfetada de volta em

um saco plstico hermtico e descarte o saco no lixo.

Dicas

Tente usar um BDA como um meio de crescimento. Prepare um meio

de batata dextrose fervendo 20 g de batata, 4 g de gar e 2 g de dextrose
em um bquer. Coloque essa soluo em uma placa de Petri e deixe secar.
Pegue alguns cotonetes estreis e esfregue-os sobre qualquer lugar
(controle remoto, maaneta da porta, tubulao de gua, etc.). Cubra a
placa de Petri com filme plstico. Deixe incubando por 24 horas em um
lugar quente. No dia seguinte, verifique a placa de Petri. Voc dever ser
capaz de ver as colnias de bactrias.

Avisos

Nunca coloque nada na placa que seja provvel o crescimento de

bactrias perigosas (fluidos corporais nunca devem ser colocados em uma
placa de Petri). Se a placa fosse reaberta poderia causar doenas graves.

Fontes e Citaes
http://www.stevespanglerscience.com/lab/experiments/growingbacteria
2.
http://www.scienceenterprises.com/growingbacteria.aspx
3.
3,03,1http://www.sciencecompany.com/Bacteria-GrowingExperiments-in-Petri-Dishes-W54C659.aspx
1.