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POR
MARCO TULIO ARRIETA RODRGUEZ
DIRECTORA
YAMILE VALENCIA GONZLEZ
CODIRECTOR
OSCAR ECHEVERRRI RAMREZ
II
AGRADECIMIENTOS
El autor desea expresar sus ms sinceros agradecimientos a:
A la ingeniera DSc. Yamile Valencia, quien con su comprensin, apoyo,
dedicacin, y en especial por su paciencia, logr alentarme a la culminacin de
esta investigacin. Tambin quiero agradecerle por sus conocimientos aportados,
tanto acadmica como personalmente. Profe no habr nada en este mundo con lo
que yo pueda pagar todo lo que usted hizo por m. Ocupa un lugar muy grande en
mi corazn como docente, maestra y mentora. GRACIAS!!!!!
Al Ingeniero MSc Oscar Echeverri, por su continua supervisin y colaboracin
durante el desarrollo de esta investigacin.
Al grupo del laboratorio de geotecnia de la Universidad Nacional Sede Medelln
(Facultad de Minas), por su colaboracin en la ejecucin de los ensayos de
laboratorio.
Al Ingeniero Medardo Antonio Prez Guisao por su disposicin y ayuda en el
Laboratorio de Microscopa Avanzada.
A la coordinadora del laboratorio de geotecnia de la Universidad Nacional, Sede
Medellin, Facultad de Minas, a la laboratorista Jenny Ruiz y auxiliar Duvian Diaz,
por su incondicional ayuda y por sus aportes durante la ejecucin de las pruebas
de laboratorio.
Por ltimo pero no menos importante a Maria Monica Santos Feria, por esas
largas horas de desvelo en ejecucin de los ensayos, por su colaboracin en el
procesamiento de los resultados y en especial por ser siempre el pilar que me da
fuerzas para seguir adelante.
Gracias a todos por aportar un grano de arena en la ejecucin de la presente
investigacin.
III
TABLA DE CONTENIDO
1.
INTRODUCCIN ....................................................................................................... 1
2.
OBJETIVOS ............................................................................................................... 2
1.1.
General. ............................................................................................................... 2
1.2.
Especficos. ........................................................................................................ 2
2.
JUSTIFICACION ........................................................................................................ 3
3.
3.2.
3.3.
3.3.1.
Bioremediacin ............................................................................................ 17
3.3.2.
Biosellado y biosedimentacin..................................................................... 17
3.3.3.
Biomineralizacin......................................................................................... 18
3.4.
4.
Erosin .............................................................................................................. 21
3.4.1.
3.4.2.
3.4.3.
Esqueletizacin............................................................................................ 26
3.4.4.
3.4.5.
4.1.1.
4.2.
5.
5.2.
5.2.1.
5.2.2.
5.2.3.
5.2.4.
5.2.5.
5.3.
5.4.
5.4.1.
5.4.2.
5.5.
6.
5.5.1.
5.5.2.
5.5.3.
5.5.4.
5.5.5.
Desagregacin............................................................................................. 47
6.1.1.
6.1.2.
6.1.3.
6.2.
6.3.
6.3.1.
6.3.2.
6.4.
6.4.1.
6.4.2.
6.4.3.
6.4.4.
6.4.5.
Desagregacin............................................................................................. 81
7.
8.
VI
LISTA DE FIGURAS
Figura 1. Curva de crecimiento tpica para una poblacin bacteriana (Tomado de
Gmez, 2006)................................................................................................. 6
Figura 2. Fotografas con microscopio electrnico a) control, b) bacteria calcificada, c)
calcita formada, d) Biofilm (Rodrguez et al. 2003). ...................................... 10
Figura 3. Mecanismo de la precipitacin de calcita Bioinducida (Tiano. 2003)............... 11
Figura 4. Imagen de microscopio binocular. Minerales de carbonato de calcio con
tamao aproximado de 0,45 m. Aumentado 15 veces (Montoya et al.,
2003). ........................................................................................................... 12
Figura 5. Imagen en microscopio electrnico de alta resolucin, de los precipitados
bacterianos con B4 y urea, para una muestra a 4 m de profundidad, con
bacteria Bacillus spp. Aumento 100 veces. (Tomado y modificado de
Valencia, 2009). ........................................................................................... 14
Figura 6. Placas petri con los 2 medios nutrientes probados (B4 y urea), para un suelo a
4 m de profundidad con bacterias Bacillus spp. (Tomado de Valencia 2009).15
Figura 7. Precipitados bacterianos. a) En medio con B4 y b) en medio con urea, para la
bacteria Bacillus spp. Imagen en el microscopio petrogrfico aumentado 4
veces. (Tomado y modificado de Valencia, 2009). ....................................... 15
Figura 8. Precipitados bacterianos en medio con B4, para la bacteria Bacillus spp.
Imagen en MEB. (Tomado de Valencia, 2009)............................................. 16
Figura 9. Precipitados bacterianos en medio con urea, para la bacteria Bacillus spp.
Imagen en MEB. (Tomado de Valencia, 2009)............................................. 16
Figura 10. Principio de la formacin de Biosealing y Biogrout en arenas (Tomado y
modificado de Gmez 2009). ....................................................................... 18
Figura 11. Variacin entre el nmero de ensayos y la permeabilidad. a) En una arena. b)
En una arena arcillosa (Tomado y modificado de Valencia, 2009). .............. 18
Figura 12. Resultados del ensayo Pinhole para 3 m de profundidad (Tomado de
Valencia, 2009). ........................................................................................... 19
Figura 13.Ensayo de desagregacin muestra a 4 m de profundidad (Tomado de
Valencia 2009). ............................................................................................ 20
VII
Figura 14. Imagen de MEB del suelo a 3 m de profundidad. Zoom 1000x. a) Sin
nutriente. b) Con nutriente. (Tomado y modificado de Valencia, 2009). ....... 20
Figura 15. Amorfismos geogrficos debido a fenmenos erosivos intensos (Tomado de
Suarez, 2001) ............................................................................................... 21
Figura 16. Erosin por sobrepastoreo (Tomado de Vigenci 2000). ................................ 22
Figura 17. Erosin interna. (Tomado de Suarez, 2001). ................................................. 23
Figura 18. Crcavas en forma de anfiteatro (Tomado de Salvatore, 1999). ................... 25
Figura 19. Erosin en canales. (Tomado de Suarez, 2001). .......................................... 25
Figura 20. Erosin en crcavas. (Tomado de Suarez, 2001). ........................................ 26
Figura 21. Esqueletizacin. (Tomado de Suarez, 2001). ................................................ 27
Figura 22. Erosin en pedestal. (Tomado de Camapum, 2006). .................................... 27
Figura 23. Erosin superficial (Tomado Suarez, 2001). ................................................. 28
Figura 24. Localizacin del cerro Nutibara. (Tomado de urbanismo de Medelln.
Disponible
en
http://urbanismosocialmedellin.universia.net.co/sectores_elcerro.jsp. Visitado
5 de Agosto de 2011) ................................................................................... 29
Figura 25. Geomorfologa Valle de Aburra. (Tomado de Ingeominas, 2000. Pl G_19_1).30
Figura 26. Unidades geolgicas Medelln. Cerro Nutibara. (Tomado de Ingeominas,
2000. PL 6). .................................................................................................. 31
Figura 27. Taludes revegetalizdos. ............................................................................... 31
Figura 28. Control de erosin mediante trinchos. ........................................................... 32
Figura 29. Puntos tratados sin resultados eficaces. ....................................................... 32
Figura 30. Ubicacin y distribucin de los sitios de muestreo (Tomada y modificada de
Google Earth. Visitado 5 de Agosto de 2011). ............................................. 33
Figura 31. Toma de muestras en los diferentes sitios. ................................................... 34
Figura 32. Muestras alteradas. ....................................................................................... 34
VIII
IX
Figura 47. Resultado del ensayo "Pinhole test". (Tomado y modificado de Camapum de
Carvalho et al, 2006). ................................................................................... 47
Figura 48.Inmersin total. ............................................................................................... 49
Figura 49. Inmersin parcial. .......................................................................................... 49
Figura 50. Muestras tratadas con nutriente B4. .............................................................. 51
Figura 51. Carta de plasticidad de Casagrande (CG) suelo SN. .................................... 52
Figura 52. Carta de plasticidad de Casagrande (CG) suelo CN. .................................... 53
Figura 53. Carta de plasticidad de Casagrande. Suelo SN y CN. .................................. 53
Figura 54. Anlisis comparativo de los resultados obtenidos en esta investigacin y los
obtenidos por Camapum de Carvalho (1985), en cuanto a la influencia del
carbonato de calcio en la plasticidad. ........................................................... 54
Figura 55. Variacin de la contraccin por el mtodo MCT rpido debido al contenido de
finos de la muestra. ...................................................................................... 55
Figura 56. Curva granulomtrica M1 - SN. ..................................................................... 56
Figura 57. Curva granulomtrica M1 - CN. ..................................................................... 56
Figura 58. Granulometra M1 SN y CN. .......................................................................... 57
Figura 59. Curva granulomtrica M2 - SN. ..................................................................... 57
Figura 60. Curva granulomtrica M2 - SN. ..................................................................... 58
Figura 61. Granulometra M2 SN y CN. .......................................................................... 58
Figura 62. Curva granulomtrica M3 - SN. ..................................................................... 59
Figura 63. Curva granulomtrica M3 - SN. ..................................................................... 59
Figura 64. Granulometra M3 SN y CN. .......................................................................... 60
Figura 65. Variacin del pH en agua. Muestras SN y CN. .............................................. 61
Figura 66. Variacin del contenido de Ca con el pH. Muestras SN y CN. ...................... 62
Figura 67. Variacin del contenido de Ca. Muestras SN y CN. ...................................... 62
X
XII
LISTA DE TABLAS
Tabla 1. Clasificacin de erosin por factores activos (Modificado de Camapum, 2006,
tomado de Zachar 1982). ............................................................................... 22
Tabla 2. Coordenadas sitios muestreados, segn Magna Sirgas. ................................ 33
Tabla 3. Clasificacin MCT rpida (Tomado de Nogami y Villibor, 1995). .................... 40
Tabla 4. Pruebas ndice del suelo SN. .......................................................................... 52
Tabla 5. Pruebas ndice del suelo CN. .......................................................................... 52
Tabla 6. Clasificacin S.U.C.S y MCT rpida, para cada una de las muestras............. 55
Tabla 7. Resultados de anlisis qumico. Muestras sin nutriente (SN) y muestras con
nutriente (SN). ................................................................................................ 61
Tabla 8. Valores de cohesin y ngulo de friccin, obtenidos a partir del ensayo de
corte directo, muestras saturadas y no saturadas. Suelo con y sin nutriente. 71
Tabla 9. Resultados ensayo de desagregacin inmersin parcial suelo SN. ................ 81
Tabla 10. Resultados ensayo de desagregacin inmersin total suelo SN. ................. 81
Tabla 11. Resultados ensayo de desagregacin inmersin parcial suelo CN. ............. 83
Tabla 12. Resultados ensayo de desagregacin inmersin total suelo CN. ................. 83
XIII
RESUMEN
En la actualidad los avances cientficos se han dado a pasos agigantados, por eso
da a da se debe profundizar en diferentes reas del conocimiento que permitan
aplicar nuevos mtodos para dar solucin a algunos de los problemas que se
presentan en la ingeniera, especficamente en el mbito de la geotecnia. Dado
que son pocas las investigaciones en el rea de la geotecnia que involucran la
biotecnologa con el fin de mejorar las propiedades mecnicas y de estabilidad de
los suelos, se propone esta investigacin, con el objetivo de analizar el efecto de
la biomineralizacin a partir de la aplicacin de un nutriente precipitador de
carbonato de calcio sobre la microflora nativa del suelo en la mitigacin de
procesos erosivos superficiales.
La metodologa utilizada en esta investigacin, consisti en la toma de 3 muestras
provenientes del Cerro Nutibara, el cual se encuentra ubicado en el centro de la
ciudad de Medelln (Antioquia). Las muestras en estado natural fueron
caracterizadas fsica, qumica, mineralgica y mecnicamente, luego a muestras
inalteradas de los suelos, se les adicion el nutriente B4 para que se generara la
precipitacin de carbonatos de calcio a partir de las bacterias nativas del suelo,
para ser comparados los resultados obtenidos de los ensayos del suelo sin
tratamiento y del suelo con tratamiento, con el fin de estimar si existe una
reduccin de la erodabilidad del suelo con el tratado.
Finalmente, se obtuvo que el uso del nutriente B4, induce precipitacin de
carbonato de calcio por medio de las bacterias nativas del suelo, generando una
mejora en las propiedades fsicas, qumicas, mineralgicas y mecnicas de los
suelos estudiados, mitigando en trminos generales los procesos erosivos
superficiales de los suelos estudiados. Por lo tanto, la tcnica de biomineralizacin
a travs de la precipitacin de carbonato de calcio para mejorar las propiedades
del suelo demostr ser efectiva, convirtindose en un gran avance en la
biotecnologa aplicada a la geotecnia.
XIV
1. INTRODUCCIN
Los estudios de biotecnologa se han enfocado en el manejo de microorganismos
en la restauracin de obras de arte y mejoramiento de concretos; y son pocos los
estudios que se tienen del uso de microorganismos para el mejoramiento de las
propiedades mecnicas y fsicas de los suelos para obras civiles, especficamente
en el control de un proceso erosivo superficial. Por lo que el estudio, anlisis e
investigacin de los modelos y tcnicas utilizadas a partir de bacterias calcificantes
para lograr efectos como la estabilizacin de los suelos utilizados en el campo de
la geotecnia, an se encuentra en fase de desarrollo.
Aunque investigaciones anteriores han presentado buenos resultados, uno de los
mayores inconvenientes que existe, para que la bioingeniera se afiance con ms
fuerza dentro de la geotecnia, es que se debe disponer de un conocimiento
avanzado sobre otras ramas de la ciencia (bacteriologa, qumica, geologa etc.)
que exige de un enorme trabajo interdisciplinario.
Pensando en profundizar en el tema de la biotecnologa aplicada a la geotecnia,
en la presente investigacin se trabaj con muestras de un perfil de suelo residual
tropical, las cuales fueron tomadas en 3 puntos diferentes del Cerro Nutibara, en la
ciudad de Medelln, donde se observan procesos erosivos superficiales actuantes.
Sobre las muestras de suelo natural se realizaron ensayos de humedad natural,
granulometra por tamizado mecnico e hidrmetro, lmites de Atterberg,
clasificacin Miniatura Compactada Tropical (MCT) expedita, caracterizacin
qumica y mineralgica., adicionalmente se ejecutaron ensayos de caracterizacin
mecnica como corte directo, Pinhole, succin total y matricial, desagregacin y
consolidacin, luego se adicion el nutriente B4 compuesto por 15 g de acetato de
calcio, 4g de extracto de levadura, 5g de glucosa, para 1 litro de agua destilada y a
un pH del suelo aproximado de 8.0; pretendiendo, tal como fue realizado por
Valencia (2009), llenar el 60% de los vacios del suelo que no contienen agua. Este
nutriente se deja actuando un mnimo de 15 das para que se diera la precipitacin
de carbonato de calcio, y posteriormente se procedi a la ejecucin de los mismos
ensayos que se ejecutaron en las muestras sin nutriente, para analizar el efecto
que tiene el tratamiento en la estabilizacin de los suelos.
Se destaca que el uso de esta tcnica para fines de ingeniera permitir un avance
en el desarrollo tecnolgico del pas.
2. OBJETIVOS
1.1.
General.
Mitigar un proceso erosivo superficial que afecte un suelo tropical del Valle de
Aburr, mediante la aplicacin de un nutriente que genere condiciones propicias
para la precipitacin de carbonato de calcio por la micro flora nativa del suelo.
1.2.
Especficos.
Determinar el potencial que tiene la micro flora existente en un suelo tropical
afectado por procesos erosivos superficiales para generar carbonato de calcio al
agregar un medio nutriente.
Caracterizar fsica, qumica, mineralgica y mecnicamente un suelo tropical
afectado por procesos erosivos superficiales sin tratamiento y con tratamiento
(Proceso de biomineralizacin).
Comprobar la eficiencia del tratamiento en la mitigacin del proceso erosivo
superficial del suelo natural.
2. JUSTIFICACION
En esta era, donde los avances cientficos se van dando a pasos agigantados, no
se puede desaprovechar la oportunidad de estudiar, y de ser posible, aplicar
nuevos mtodos que permitan dar solucin a algunos de los problemas que se
presentan en la ingeniera, especficamente en el rea de la geotecnia. La
bioingeniera, aunque ha sido poco estudiada en comparacin con otras reas de
la geotecnia; ha tenido un desarrollo dirigido a la produccin de biocemento,
bioremediacin de concretos y en limpieza de suelos. En lo que se refiere a la
estabilizacin o mejoramiento de las propiedades mecnicas de los suelos, las
investigaciones son pocas. Aunque, el entendimiento del comportamiento del
suelo en los ltimos aos se ha centrado en los principios mecnicos, procesos
geolgicos y posteriormente en la mineraloga y la relevancia de la qumica de las
partculas coloidales, recientemente investigaciones en ciencias de la tierra han
permitido avances importantes en la comprensin del papel crucial de los
microorganismos en la evolucin de la tierra, su presencia generalizada en suelos
superficiales y rocas, y su participacin en la mediacin y facilitacin de la mayora
de las reacciones geoqumicas. Esta tesis sirve para profundizar ms en nuevas
tcnicas de bioingeniera, especficamente en el mejoramiento de suelos.
La biotecnologa enfocada al tratamiento de suelos con bacterias calcificantes, ha
sido poco utilizada en el mejoramiento de las propiedades mecnicas y fsicas de
los suelos para obras civiles. Se tiene conocimiento del manejo de
microorganismos en la restauracin de obras de arte y mejoramiento de concretos;
pero son pocos los registros que se tienen del uso de microorganismos para el
control de un proceso erosivo superficial, por lo que el estudio, anlisis e
investigacin de los modelos y tcnicas utilizadas a partir de bacterias calcificantes
para lograr efectos como la estabilizacin de los suelos utilizados en el campo de
la geotecnia, an se encuentra en una fase de desarrollo; es por esto que un
estudio importante en este tema, se convierte en un referente para futuras
investigaciones. Aunque investigaciones anteriores han presentado buenos
resultados, uno de los mayores inconvenientes que hay, para que la bioingeniera
se afiance con ms fuerza dentro de la geotecnia, es que se debe disponer de un
conocimiento avanzado sobre otras ramas de la ciencia (bacteriologa, qumica,
geologa etc.) que exige de un enorme trabajo interdisciplinario; aspecto que
motiv an ms la realizacin de esta tesis.
As, con esta investigacin se pretende que los ingenieros, como intrpretes y
ejecutores de los avances cientficos, procuren un acercamiento a la investigacin
cientfica, no solo para dotarse de mejores instrumentos tecnolgicos, sino, para
ser capaces de prever evoluciones futuras de los procesos en la bioingeniera
aplicada a la geotecnia y promover activamente un desarrollo sostenido. Este
trabajo es precisamente un acercamiento a la aplicacin de los procesos
biolgicos, en procedimientos tecnolgicos relacionados con la geotecnia, por
tanto se intenta abogar por una relacin ms estrecha entre la ingeniera y la
biotecnologa que sea ms productiva y que permita fortalecer su interaccin.
3
Algunas investigaciones hechas hasta el momento, entre las que se destacan las
adelantadas por Barker (1994), Gray y Sortir (1996) y Ghissian (1997), se han
inclinado al uso de materiales vegetales en combinacin con materiales inertes
para la proteccin de taludes y el control de la erosin; investigadores como el Dr
Donald H. Gray , de la Universidad de Michigan, plantean que no existe ninguna
razn por la cual las biotcnicas de estabilizacin deban limitarse a este tipo de
material y resalta la existencia de una amplia variedad de microorganismos aptos
para el desarrollo de tcnicas de estabilizacin basadas en la utilizacin de sus
caractersticas y en los productos derivados de sus metabolismos. El Dr Donald H.
Gray referencia algunos estudios realizados en la dcada pasada con bacterias
que poseen la caracterstica de secretar sustancias con cierta propiedad
cementante y otros microorganismos de ambiente marino, los cuales se orientaron
a verificar la propiedad cementante de las sustancias secretadas por las bacterias
en arenas y bajo condiciones controladas. (Martnez et al, 2003).
Numerosas especies de diferentes bacterias han sido previamente detectadas y
se asume que estn asociadas con la precipitacin natural de carbonatos de calcio
en diversos ambientes. El rol primario de la bacteria en el proceso de precipitacin
ha sido atribuido a su habilidad para crear un ambiente alcalino (pH alto y aumento
en la concentracin de carbono inorgnico disuelto) a travs de varias actividades
fisiolgicas (Castanier et al. 1999; Douglas & Beveridge 1998).
Aunque, la precipitacin microbiolgica de carbonatos de calcio ha sido
extensamente investigada en ambientes naturales y bajo condiciones definidas de
laboratorio, el mecanismo exacto de precipitacin y la funcin de su proceso
dentro de la ecologa microbiana del organismo de precipitacin permanece sin
solucin (Yates & Robbins 1999; Rivadeneyra et al. 1994; Ferrer et al. 1988). Es
por esto que la precipitacin de carbonatos de una especie en particular, la cual se
ha investigado mediante la observacin de diferentes especies de bacterias que
son capaces de precipitar diferentes cantidades, formas y tipos de cristales
(calcita, aragonita, dolomita, etc.), bajo las mismas condiciones de presin,
temperatura y niveles de pH, puede ser una de las mltiples explicaciones de este
vaco en el conocimiento (Ferrer et al, 1988).
En el artculo de Frederik Hammes & Willy Verstraete, Key roles of pH calcium
metabolism in microbial carbonate precipitation (2002) se explica el mecanismo
comnmente conocido de la precipitacin microbiolgica de carbono (MCP),
junto con la especie microbiolgica asociada y el ambiente de precipitacin.
Adems, explora una posible explicacin para la interaccin de especie y
ambiente especfico para la MCP, y considera la hiptesis del ambiente en pH
alcalino y el subsecuente metabolismo del calcio en la bacteria como puntos clave
en el proceso de precipitacin.
Los microorganismos pueden reproducirse rpidamente. Su tasa de reproduccin
es controlada por factores como la temperatura, el pH, concentracin de iones,
nutrientes y disponibilidad de agua. Bajo condiciones ideales, el tiempo de
generacin para la divisin bacterial puede ser tan corto como 10 minutos y su
5
para formar una mol adicional de amonio y cido carbnico. (Bang et al, 2000),
(Shannon et al, 1999).
Es conveniente aclarar que el calcio no es utilizado en los procesos metablicos
del microorganismo, l se acumula por fuera de la clula y tiene estrecha relacin
con la cantidad de carbonato de calcio a precipitar. Es claro que los
microorganismos juegan un papel importante en la formacin del carbonato de
calcio. Mediante procesos metablicos logran producir las condiciones y los
elementos necesarios para que se desarrolle el enlace entre el in carbonato y el
in de calcio. El incremento del pH, el aumento en las concentracin de carbono
inorgnico diluido y el proveer un posible sitio de nucleacin, son las actividades
que hasta ahora se tienen identificadas como resultado del metabolismo de la
bacteria que facilitan la formacin de carbonatos (Majad, 2001).
La precipitacin de carbonato de calcio es un proceso qumico mediante el cual los
cationes de calcio se unen a iones carbonato para formar carbonato clcico
(Ecuacin 1).
+
( )
-
( )
10
11
14
Medio con B4
Figura 6. Placas petri con los 2 medios nutrientes probados (B4 y urea), para un
suelo a 4 m de profundidad con bacterias Bacillus spp. (Tomado de Valencia
2009).
Colocando directamente las placas petri en el microscopio petrogrfico, Valencia
observ que el medio B4 form especies minerales con forma y estructura ms
definidas, adems pudo identificar la presencia de cristales de calcita con tamaos
que varan entre 0.01 mm y 1 mm, a diferencia que el medio con urea dado que
las estructuras cristalinas formadas con este nutriente no tenan forma definida, tal
como se muestra en la Figura 7 (Tomado de Valencia, 2009).
Metalizacin
Figura 8. Precipitados bacterianos en medio con B4, para la bacteria Bacillus spp.
Imagen en MEB. (Tomado de Valencia, 2009).
Composicin qumica del punto rojo
C
Metalizacin
16
3.3.1. Bioremediacin
El petrleo crudo y sus derivados son propensos a ser aerbicamente
degradados. La bioremediacin es una herramienta efectiva para mejorar la
degradacin de contaminantes en suelo. Esta consiste en la adicin de nutrientes
inorgnicos (por ejemplo fosforo y nitrgeno), un aceptador del electrn,
tpicamente oxgeno y posiblemente un donador de electrones puesto en la
superficie que estimule el crecimiento de los microorganismos y degrade los
contaminantes, cuya finalidad es obtener productos no txicos como agua y CO2.
Estas tcnicas son aplicables especialmente a las arenas por su alta
permeabilidad y no se aplica en arcillas por su baja permeabilidad, dado a la alta
adsorcin de agua en las partculas de arcilla, debido a su gran superficie
especfica, limita la capacidad para el crecimiento celular. Se han hecho muchos
esfuerzos exitosos utilizando la bioremediacin, incluyendo la limpieza del
vertimiento de petrleo del Exxon Valdez en 1989. (Palmir, 2001). La temperatura
es un factor limitante de estos procesos, por lo que resulta adecuado el uso de
bacterias sicrotolerantes (Whyte & Col, 2001). Se ha propuesto a la
biomagnificacin como la estrategia ms efectiva (Collerman, 1997; Coulon &
Delille, 2003; Cuningham & Philp, 2000); sin embargo, la optimizacin de factores
fsicos y/o qumicos del suelo contaminado mejora la actividad degradadora de la
microflora autctona, haciendo innecesaria la aplicacin de tcnicas de
biomagnificacin (Ruberto & Col, 2003). En muchas reas de clima fro muestran
contaminacin por hidrocarburos, es un ejemplo claro de esta problemtica, la
presentada en las inmediaciones de las bases Antrticas, donde las condiciones
climticas y las regulaciones internacionales hacen indispensable el uso de
microorganismos nativos de la microflora del suelo. (Ruberto & Col, 2003).
3.3.2. Biosellado y biosedimentacin
Otra aplicacin importante es el biosellado (biosealing) y el biosedimentacin
(biogrout) en el cual la bacteria y la eukaria pueden reducir la conductividad
hidrulica de los suelos o de rocas fracturadas, alterar la migracin de finos,
taponar los poros, entre otras. La bioactividad puede desarrollarse naturalmente o
puede ser promovida y controlada por la disponibilidad de nutrientes y las
condiciones ambientales. La disminucin en la conductividad hidrulica puede
alcanzar tres rdenes de magnitud, trasformado un suelo permeable en uno muy
poco permeable. Sobre estas aplicaciones se encuentra ms informacin en el
documento de Mitchell y Santa Marina, adems de otras aplicaciones importantes.
(Palmir, 2001)
Whiffin et al., 2005, denominan esta tcnica de sellado de los poros del suelo
como Biosealing. Estos autores emplean otra tcnica en suelos permeables
denominada Biogrout, la cual consiste en precipitar CaCO3 en los vacios del suelo
con microorganismos que degradan la urea (Figura 10). Estas tcnicas se han
utilizado en suelos arenosos principalmente (Valencia, 2009).
17
Arena
original
Biosedimentacin
Biosellado
Agua destilada
Agua destilada+levadura
Tapn+levadura+nitrato calcio
Permeabilidade
(cm/s)
Permeabilidad
(cm/s)
Permeabilidad (cm/s)
gua
Aguadestilada
destilada
biogrout (4 semanas depois)
Biogrout (4 sem. despus)
biogrout (8 semanas depois)
Biogrout (8 sem. despus)
Tapn+levadura+nitrato calcio+glicosa
a)
Nmero de ensayos
b)
Nmerode
deensayos
ensaios
Nmero
Caudal (ml/seg)
5
4
3
2
`
1
0
0
200
400
600
800
1000
1200
3m Con nutriente
19
Figura 14. Imagen de MEB del suelo a 3 m de profundidad. Zoom 1000x. a) Sin
nutriente. b) Con nutriente. (Tomado y modificado de Valencia, 2009).
Consolidando las investigaciones consultadas, se identifica que en dichos estudios
relacionados con precipitacin bacteriana de minerales, y en especial de CaCO3,
tiene una falencia en el estudio no slo de los minerales y los cristales precipitados
sino tambin de las microestructuras formadas por ellos, este punto es muy
importante, ya que la precipitacin de dichos materiales puede darse por medio de
cristales de forma y caractersticas definidas o mediante la formacin de
biopeliculas que sellan los poros del material original, generando la reduccin de la
permeabilidad y el aumento de la resistencia mecnica, por lo que esto podra
minimizar el potencial erosivo del suelo estudiado, objetivo primordial de la
presente investigacin.
20
3.4.
Erosin
Se considera como erosin, la degradacin y el transporte de material o sustrato
del suelo, por medio de un agente dinmico, como son el agua, el viento, el hielo o
por los agentes antrpicos en la naturaleza. Puede afectar a la roca o al suelo, e
implica movimiento, es decir, transporte de granos, por lo que la erosin es uno de
los principales agentes del ciclo geogrfico, tal como se muestra en la Figura 15
(Monroe, 1986).
El material erosionado puede estar conformado por:
Fragmentos de rocas producto de la meteorizacin mecnica (termoclastia,
gelifraccin, etc.) o formados por abrasin mecnica debida a la accin del viento,
aguas o glaciares.
Suelos, en especial aquellos que han sido despojados de su cubierta vegetal por
tala, sobrepastoreo o incendio.
21
2.
23
3.
Cuando la fraccin gruesa del suelo no funciona como filtro para la fraccin
fina, generando el desplazamiento de esta ltima y propiciando la formacin
de grandes cavidades en la interior de los estratos o macizo. Este proceso, a
pesar de estar tambin ligado a las condiciones de flujo, se puede originar en el
interior del macizo y no necesariamente a partir de la cara del talud o altas
pendientes. La remocin del material necesaria para el progreso del fenmeno,
ocurre de forma ms intensa cuando el flujo es turbulento. Este flujo puede ser
temporalmente bloqueado debido a la cada de bloques, situacin que puede
generar la transferencia del fenmeno hacia una regin adyacente. Es por esta
razn que para que exista continuidad en el fenmeno erosivo es necesario la
remocin de material mediante otros mecanismos que faciliten y favorezcan el
transporte de granos y material (Camapum, 2006).
Es comn que la erosin interna tenga origen en crcavas o canales que
interceptan los niveles superficiales de aguas subterrneas, provocando un
aumento en el gradiente hidrulico y las fuerzas de infiltracin, generando la
inestabilidad de la estructura interna y arrastre de partculas del suelo, siendo
todos estos fenmenos estudiados en laboratorio mediante del ensayo Pinhole
test (Camapum, 2006).
24
26
28
Geologa y geomorfologa
El Cerro Nutibara se encuentra desarrollado y subyacido por rocas metamrficas
del Grupo Ayur Montebello, las cuales estn rodeadas por extensos depsitos
aluviales del ro Medelln y sus quebradas afluentes. Las rocas metamrficas
hacen parte de las anfibolitas de Medelln (Kam), constituidas esencialmente por
hornblenda y plagioclasa, de textura por lo general isotpica a bandeada, en
ocasiones difcilmente distinguible de un gabro o una diorita. Abarcan
prcticamente todo el Cerro (van por la Calle 33 al norte, la autopista sur y la
Carrera 52 al este, la quebrada Altavista y la Calle 30A al sur, y la Carrera 65 al
oeste).
29
30
Figura 29.
29 Puntos tratados sin resultados eficaces.
32
5. MATERIALES Y METODOS
En este captulo se hace una descripcin de la metodologa y normas utilizadas
para la recoleccin de muestras en campo y ejecucin de ensayos de laboratorio
realizados en esta investigacin.
5.1.
33
34
35
adicin del nutriente, las pruebas deben realizarse en el suelo natural (sin adicin
de nutriente) y en el suelo tratado (con la adicin del nutriente).
5.2.1. Determinacin del contenido de humedad
La humedad de las muestras se tom mediante el mtodo del horno, segn la
norma ASTM D2974, tal como se muestra en la Figura 34.
Figura 35. Equipo para determinar el peso especfico de los slidos. (Tomado de
Apuntes en Ingeniera civil. Disponible en:
http://www.ingenieracivil.com/2008/07/gravedad-especfica-de-los-slidosdel_31.html. Visitado 2 de Agosto del 2011).
36
Figura 37. a) Las pruebas para determinar el lmite lquido, b) para determinar el
lmite plstico (Tomado y modificado de Valencia, 2009).
5.2.5. Ensayo Miniatura Compactada Tropical (MCT) expedita
Nogami y Villibor (1995), proponen un sistema de clasificacin ms adecuado para
los suelos tropicales, que el sistema de clasificacin SUCS, el cual fue ideado e
implementado para regiones de climas templados. El sistema de clasificacin MCT
expedita, tambin llamada la prueba "rpida de las pastillas", separa los suelos en
dos grupos, uno con comportamiento latertico y otro no latertico.
La prueba consiste en tomar una muestra de suelo que pasa por el tamiz N 40,
agregarle agua, formando una pasta. El material obtenido se deja penetrar en
cada libre por un penetrmetro que pesa 10 g y que tiene una punta plana de
1 mm de dimetro y altura 1.3 mm. Luego, con esta pasta se llenan por lo menos
tres anillos de PVC, de dimetro interno aproximado de 20 mm y 5 mm de
espesor. Adicionalmente son moldeadas pequeas bolas de suelo de
aproximadamente10 gramos de peso para el clculo del contenido de humedad.
Las pastillas y bolas de suelo son secadas al aire por lo menos durante 6 horas
(Figura 38) (Valencia, 2009).
38
Figura 38. Anillos de PVC y bolas de suelo, para la ejecucin del ensayo MCT
(Tomado de Lima, 2003).
Despus de que las pastillas se secan al aire, se mide el dimetro de ellos y se
determina la contraccin de las pastillas por prdida de humedad (CT),
calculndose sta como la diferencia entre el dimetro inicial y el dimetro final.
Posteriormente, las pastillas se colocan en un papel de filtro, que se encuentra
encima de una piedra porosa, que a su vez est en contacto con el agua. Las
pastillas absorben el agua por capilaridad, despus de dos horas se miden los
milmetros que penetra el penetrmetro (Figura 39). Adicionalmente, con el valor
de la contraccin (CT) que determina la constante c, mediante las Ecuaciones 3 y
4. Con c y la penetracin se clasifica el suelo tal como se muestra en la Tabla 3
(Valencia, 2009).
0.1 <
< 0.5
> 0.6
log( + 1)
( )
0.904
log(
+ 0.7)
( )
0.5
5.3.
Figura 40. Qumica de un suelo tropical residual (Tomado de: Madre frtil.
Disponible en: http://www.oni.escuelas.edu.ar/2002/santiago_del_estero/madrefertil/suelo.htm. Visitado: 3 de Agosto de 2011).
5.4.
42
5.5.
44
Cuerpo de prueba
Papeles
filtro
utilizados como
proteccin
Figura 43. Montaje del ensayo para medida de succin total y matricial (Tomado y
modificado de Da Silva, 2006).
Luego de realizar el montaje, los cuerpos de prueba son envueltos en papel
vinilpex y papel aluminio y guardados por lo menos 15 das en cajas de icopor,
para garantizar una estabilidad en la humedad, tanto de los papeles filtro como de
los cuerpos. Transcurridos los 15 das, son pesados los papeles filtro en una
balanza analtica de 4 dgitos de precisin y secados en una estufa a por lo menos
107 C durante mnimo 3 horas para ser nuevamente p esados (Valencia, 2009).
Segn la propuesta de Marinho (1995), este mtodo se basa en el equilibrio que
se alcanza entre la humedad adquirida por el papel filtro y la humedad del suelo.
La relacin entre la succin y la humedad (w) del papel filtro, puede ser obtenida
mediante la curva de calibracin, la cual se basa en las Ecuaciones 5 y 6.
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@
B
2.
48
49
50
M1
M2
M3
51
6.1.
Sin Nutriente
Los resultados de las pruebas ndice ejecutadas (lmites de consistencia y
gravedad especfica) se presentan en la Tabla 4 y la carta de plasticidad para el
suelo no tratado se presenta en la Figura 51.
Tabla 4. Pruebas ndice del suelo SN.
Con nutriente
Al igual que en el caso anterior se presenta en la Tabla 5 los resultados de
pruebas ndices para el suelo tratado y en la Figura 52 se presenta la carta de
plasticidad de la muestra CN, para este mismo suelo:
Tabla 5. Pruebas ndice del suelo CN.
52
54
57
58
59
60
6.2.
63
65
66
67
68
PRECIPITACIN
POR EL NUTRIENTE
PRECIPITACIN
POR EL NUTRIENTE
PRECIPITACIN
POR EL NUTRIENTE
70
6.4.
71
74
75
E1 + FG
&D
HIJK
HL(IJK)
M &6(NHOPQ) RS
(T)
Donde:
&D = UV
&WXY
&6(WXY)
&6(NHOPQ) =
Z V
&\XY
&6(\XY)
Z] &6(NHOPQ) (^)
_`&6(WXY) a + `&6(\XY) ab
(d)
2
enat = Relacin de vacios final para una tensin aplicada. Muestra con humedad
natural.
esat = Relacin de vacios final para una tensin aplicada. Muestra saturada.
e0nat = Relacin de vacios inicial para una tensin aplicada. Muestra con humedad
natural.
e0sat = Relacin de vacios inicial para una tensin aplicada. Muestra saturada.
76
Para poder realizar un anlisis comparativo, se llevaron las muestras tratadas con
nutriente a la misma humedad con la que se realiz el ensayo en estado natural,
obteniendo los siguientes resultados:
Figura 94. Variacin del ndice de colapso con la tensin vertical. Muestra M1.
Figura 95. Variacin del ndice de colapso con la tensin vertical. Muestra M2.
77
Figura 96. Variacin del ndice de colapso con la tensin vertical. Muestra M3.
De la Figura 94 a la Figura 96 se muestra un valor mximo del ndice de colapso
asociado a un nivel de tensin determinado, tensin que es descrita como tensin
critica de colapso, la cual corresponder a la tensin mxima soportada por el
suelo antes de que se vea afectada su estructura.
Se puede apreciar en las anteriores figuras una reduccin considerable del ndice
de colapso para las muestras tratadas en relacin a las muestras sin nutriente.
Para tensiones que varan desde 24 kPa hasta 379 kPa, se obtuvo reduccin en el
ndice de colapso de la muestra M1 del 17% hasta 30%, en la muestra M2 desde
un 28% hasta un 56% y en la muestra M3 desde un 36% hasta un 86%, reduccin
que se puede apreciar de la Figura 97 a la Figura 99. Este hecho evidencia la
mejora generada por el tratamiento en el suelo.
6.4.4. Pinhole test
Para analizar el potencial erosivo que posee el suelo y su variacin al momento de
adicionarle el nutriente se realiz el ensayo Pinhole, cuyo resultado se muestra
de la Figura 97 a la Figura 99:
78
Figura 97. Variacin del caudal con la carga hidrulica. M1 con nutriente y sin
nutriente.
Figura 98. Variacin del caudal con la carga hidrulica. M2 con nutriente y sin
nutriente.
79
Figura 99. Variacin del caudal con la carga hidrulica. M3 con nutriente y sin
nutriente.
En estas figuras, se puede observar que, para un mismo gradiente hidrulico
existe diferencia en las trayectorias de carga y descarga para todas las muestras
en el suelo sin nutrientes (gran abertura entre las curvas), lo que se traduce como
arrastre de partculas o prdida de la estabilidad estructural del suelo, procesos
directamente asociados a la incidencia de la erosin. El tratamiento aplicado,
proporciona una mayor estabilidad estructural, dado que la trayectoria de las
curvas carga-descarga en las anteriores figuras es prcticamente la misma para
diferentes gradientes hidrulicos. A medida que las curvas de carga y descarga se
encuentran separadas una de otra los suelos se consideran como dispersivos y
altamente erodables tal como se ve de la Figura 97 a la Figura 99 del suelo sin
nutriente. Al momento de adicionarle el nutriente todas las muestras fueron
consideradas como suelos no erodables, de acuerdo con lo anteriormente descrito
(curva carga-descarga prcticamente iguales) y no dispersivos (ya que no se ha
observo turbidez en el agua drenada durante la ejecucin del ensayo), de acuerdo
con la clasificacin de la Norma NBR 14114. (1998).
En la Figura 98 se aprecia que en el ensayo de la Muestra M2 sin nutriente no se
alcanza a ejecutar el ensayo en su totalidad (no hay curva de descarga), debido a
para una carga de 380 mm, la muestra colmat el orificio y no permiti la
circulacin del agua, evidenciando claramente la ocurrencia de un fuerte proceso
erosivo en este material, que no ocurri cuando la muestra fue tratada.
80
6.4.5. Desagregacin
A continuacin se presentan los resultados del ensayo de desagregacin para
cada una de las muestras, donde se compara de la Tabla 9 a la
Tabla 12, el suelo sin nutriente y el suelo con nutriente.
Tabla 9. Resultados ensayo de desagregacin inmersin parcial suelo SN.
81
82
83
7. COMENTARIOS Y RECOMENDACIONES
En la mayora de los casos, las investigaciones sobre erosin, apuntan a que el
mecanismo de su evolucin est directamente asociado con la degradacin del
suelo. En la actualidad se vienen implementando tcnicas comunes de
estabilizacin a costos muy elevados y en algunos casos con gran impacto
ambiental. Por esta razn y dada la naturaleza innovadora de esta investigacin,
los costos asociados con el uso de la biomineralizacin como tcnica propuesta
pueden llegar a ser bajos, si se piensa en el menor impacto ambiental que esta
tcnica causa en relacin con los tratamientos convencionales. Adicionalmente se
tiene que, el uso de biomineralizacin en la ingeniera geotcnica requiere la
integracin de profesionales de diferentes campos de conocimiento, que permitan
la comprensin del proceso de precipitacin de minerales a partir de bacterias, as
como sus efectos en las propiedades fsicas, qumicas, mecnicas e hidrulicas,
sin dejar de lado los impactos sobre el medio ambiente. Cabe resaltar el hecho de
que en esta investigacin se trabaj con bacterias nativas del suelo, metodologa
propuesta por Valencia (2009) y no con incorporacin de bacterias calcificantes al
medio, lo cual disminuye el impacto ambiental, dado que no se considera un
agente externo en la aplicacin del tratamiento, que pueda alterar el equilibrio del
ecosistema bacteriano.
Si bien no podemos a partir de este trabajo ser contundentes en los resultados
obtenidos, por ser una investigacin que hasta ahora est dando sus primeros
pasos, an existen muchos aspectos por conocer y se requerira de una mayor
cantidad de ensayos para verificar repetitividad estadstica, este es un aporte
importante en la biotecnologa aplicada a la geotecnia y que apunta a resultados
en general satisfactorios y que vislumbran un gran potencial de aplicacin de la
tcnica, tales como:
1.
2.
3.
Los cambios producidos por la adicin del nutriente en la clasificacin del perfil,
donde se observa que a pesar de no haberse evidenciado ningn cambio en la
clasificacin por el mtodo S.U.C.S, se tiene una reduccin en la plasticidad. Es
de anotar que aunque no se evidencia cambio algn en la clasificacin no
necesariamente significa que el tratamiento no influy en el comportamiento del
suelo, ms bien refleja la baja sensibilidad de los mtodos utilizados para evaluar
los niveles de cambio en las muestras. Por otra parte, la agregacin que se genera
con la adicin del nutriente genera que el tamao aparente de partcula aumente
85
5.
Al adicionarle el nutriente las muestras pasan de tener pH acido (pH menor a 7.0)
a pH bsico (pH mayor a 7.0). Este aumento en el pH proporciona un ambiente
alcalino el cual es propicio para que las bacterias generen la precipitacin de
carbonato de calcio. As mismo existe una estrecha relacin entre el aumento del
pH en la muestra y el contenido de carbonato de calcio, dado que al estar las
muestras en un ambiente ms bsico, se tiene una mayor cantidad de Ca, por lo
que se tiene que el nutriente propicia la formacin de estos o en su defecto crea
las condiciones necesarias y suficientes para la precipitacin de carbonatos.
6.
7.
8.
9.
10.
86
Por ltimo se puede decir que ante las mejoras verificadas en las propiedades del
suelo tratado, especialmente las relacionadas con la erosin de los materiales la
tcnica de biomineralizacin se constituye en una opcin positiva para el control
de los procesos erosivos superficiales.
Se recomiendan estudios ms detallados sobre diferentes tipos de bacterias que
generen diferentes tipos de precipitados para utilizar otros medios de tratamiento.
Adicionalmente, sera interesante estudiar otros tipos de suelos de diferentes
formaciones geolgicas.
Se sugiere el estudio de la implementacin in situ de esta tcnica utilizada en
laboratorio.
En investigaciones futuras se recomienda evaluar la estabilidad de los precipitados
de carbonato de calcio a largo plazo ante agentes qumicos.
87
8. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
ABNT. NBR 14114. (1998). Solo Solos argilosos dispersivos. Identificao e
Classificao por meio do ensaio do furo de agulha (Pinhole Test), Rio de Janeiro,
RJ.
lvarez y Otros. Estudio del efecto de la aplicacin de bacterias en la respuesta
mecnica de suelos de subrasante. Etapa 4. Tesis de Pregrado. Universidad
Nacional de Colombia. Seccional Medelln. Facultad de Minas. Medelln, 2004.
Bachmeier, L et al. Role of pore size location in determining bacterial activity
during predation by protozoa in soil. 2002.
Barker. D. Soil Microbiology and Biochemistry. Academic Press: San Diego. 1994.
Botero y Vargas. Estudio del efecto de la aplicacin de bacterias en la respuesta
mecnica de suelos de subrasante. Etapa 3. Tesis de Pregrado. Universidad
Nacional de Colombia. Seccional Medelln. Facultad de Minas. Medelln, 2004.
Brandy, R. Tillage, habitat space and function of soil microbes. 1979.
Camapum, J y otros. Processos Erosivos no Centro-Oeste Brasileiro. Ed:
FINATEC, Brasilia. 2006.
Cardona, J y Usta, K. Comunidad bacteriana degradadora de gasolina en un
biorreactor de lecho fluidizado. 2002.
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Bacillus pasteurii. Enzyme and Microbial Technology.
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Biochemistry. 1981.
Colleman, D. rease activity in microbiologically-induced calcite precipitation.
Journal of Biotechnology. 1997.
Da Silva, J. D. (2006). Estudo da colapsibilidade da argila porosa de Brasilia pelo
fluxo de contaminantes. Dissertacao de Mestrado. Universidade de Brasilia,
Faculdade de Tecnologia, Departamento de engenharia civil e ambiental, Brasilia,
DF. 2006.
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