MICROBIOLOGIA

CBI 319
Instituto de Ciencias Naturales

Crecimiento Bacteriano y Antimicrobianos

Clase 8-9 Mdulo II

MATERIAL PROPIEDAD DE UDLA.

AUTORIZADA SU UTILIZACIN SLO PARA FINES ACADMICOS.

CLASE 10: CRECIMIENTO BACTERIANO

Crecimiento microbiano individual y poblacional

Fisin binaria
Fases del crecimiento bacteriano
Efecto de sustancias antimicrobianas en la curva de crecimiento

Bibliografa Obligatoria:
Biologa de los microorganismoa. Brock. , Ediciones Prentice Hall , 2010.
Bibliografa Complementaria:
Introduccin a la Microbiologa. Tortora, Editorial Panamericana, 2007
Biologa Celular y Molecular Conceptos y Experimentos. Karp, Gerald . McGraw-Hill. Interamericana. 2006

OBJETIVOS

I.

Conocer el ciclo celular bacteriano.

II. Familiarizarse con el concepto de fisin binaria.

III. Conocer e identificar curva de crecimiento y reconocer las principales
caractersticas de cada una de las etapas.
IV. Diferenciar conceptos bacteriostticos, bactericidas y bacteriolticos.

CRECIMIENTO BACTERIANO

El crecimiento es el incremento ordenado de todos los constituyentes

celulares que conducen a un aumento de masa y finalmente a un aumento
del nmero de clulas.

EL CRECIMIENTO INDIVIDUAL
Equivale al crecimiento celular (ciclo celular), es decir aumento de tamao
Sntesis de nuevos materiales de las envolturas,
ejemplo pared celular, cpsula, etc.
Seales que coordinan la replicacin del ADN con
la divisin celular
Inicio y transcurso de la replicacin cromosmica
y de plsmidos
Segregacin de cromosomas y plsmidos a las
clulas hijas

CRECIMIENTO BACTERIANO
EL CRECIMIENTO POBLACIONAL
Es el aumento del nmero de individuos dentro de dicha poblacin
Cintica de Crecimiento
Tiempo de Generacin y Factores que lo afectan

Limitantes del Crecimiento

Tiempo
Horas

Nmero
de Clulas

A NIVEL INDIVIDUAL: FISIN BINARIA

I.

Clula antes del proceso de Fisin.

II.

El DNA se replica.

III.

La clula comienza a elongarse, la

pared celular comienza a crecer,
Protenas MinCDE determinan el
punto medio.

IV.

Se forma un septo de divisin (Anillo

FtsZ)

V.

Finaliza la formacin del septo y se

forman dos clulas individuales
idnticas a la progenitora

CURVA DE CRECIMIENTO BACTERIANO

Latencia

Exponencial

Estacionaria

Muerte

CRECIMIENTO POBLACIONAL
FASE DE ADAPTACION (LAG)
NO hay aumento significativo del
numero de clulas.
Durante esta fase los organismos
individualmente pueden:
1. Aumentar en tamao,
2. Producir una gran cantidad de
energa en forma de ATP.
CUANTO TIEMPO TOMA ESTA ETAPA?
DEPENDE DE:
1.
2.

CARACTERSTICAS DE LAS ESPECIES

CONDICIONES DEL MEDIO (ADAPTACIN)

FASE EXPONENCIAL
Una vez que los microorganismos se han adaptado
a las condiciones del medio, la poblacin crece en
forma exponencial o logartmica.
Durante esta fase podemos calcular el Tiempo de
Generacin

Tiempo de Generacin : Es el tiempo

requerido para que a partir de una
clula se formen dos.

CRECIMIENTO POBLACIONAL: FASE EXPONENCIAL

Microorganismo

Tiempo en horas

Escherichia coli

0,25

Bacillus subtillis

0,43

Clostridium

0,58

Micobacterium

12

Sacharomyces

Paramecium

10,4

Euglena

10,9

Durante esta fase las clulas comienzan a

mostrar sus caractersticas visibles:

Morfologa
Pigmentacin
Densidad
Agrupamiento

Factores que afectan g

(tiempo de generacin)

Naturaleza del microorganismo

Condiciones ambientales (nutrientes)
Temperatura

Las clulas en esta fase son

metablicamente mas activas.
Los microorganismos en esta fase son
ms sensibles a las condiciones
ambientales adversas.
La radiacin y los frmacos
antimicrobianos ejercen su efecto y
son mucho mas efectivos para las
clulas bacterianas en esta fase.

CRECIMIENTO POBLACIONAL: FASE ESTACIONARIA

En esta fase disminuye la velocidad de
crecimiento.
N clulas muertas = N clulas nuevas.
La poblacin se estabiliza.
Las actividades metablicas de las clulas
sobrevivientes se hacen mas lentas en esta fase.
Hay acumulacin de productos txicos para las
clulas y se agotan ciertos nutrientes esenciales.
Hay cambios en el pH y la temperatura.
FASE DE MUERTE
En sta etapa en nmero de bacterias
muertas, supera pronto al nmero de
bacterias vivas en la poblacin bacteriana.
En general la poblacin bacteriana esta
muriendo, a pesar que un bajsimo porcentaje
de ellas an pueda multiplicarse.

SUSTANCIAS ANTIMICROBIANAS

AGENTE ANTIMICROBIANO
Sustancia qumica que destruye o inhibe la proliferacin de los microorganismos
I.
PRODUCTO NATURAL : En su mayora son producidos por microorganismos
(hongos filamentosos y bacterias del grupo Actinomicetos).

II.

SINTESIS QUIMICA

La sensibilidad de las bacterias es variable siendo

los Gram + mas sensibles que los Gram -.
Antibiticos de amplio espectro
Antibiticos de corto espectro
Sitio de accion (dianas) en Bacterias
I. Pared celular
II. Membrana celular
III. Procesos Biosinteticos
(sntesis de protenas, c. nucleicos, ribosomas)

Efectos de Compuestos Antibacterianos

Cuando se agrega un ANTIBITICO a un cultivo en crecimiento exponencial se obtienen
tres tipos de efectos:

Nmero de
clulas

Recuento total

Para que un agente BACTERIOSTATICO sea

efectivo debe encontrarse presente en forma
continua en el medio donde acta,
eliminando el factor dilucin

Recuento de
Viables

Tiempo

BACTERIOSTATICO
Se observa cuando el compuesto
inhibe la proliferacin, pero no existe
muerte celular.
Ejemplo
Tetraciclinas
Cloranfenicol

MECANISMOS DE ACCION
Inhibicin de la sntesis de protenas
Acta unindose a los ribosomas

Cloramfenicol: Es una sustancia que se obtiene del cultivo de

Streptomyces venezuelae. Bloquea la unin de los aminocidos de la
cadena peptdica naciente en la unidad 50S de los ribosomas,
interfiriendo con la accin de la peptidil-transferasa.
Tetraciclina: Impide la unin de nuevos aminocidos a la cadena
polipeptdica naciente porque se une a la subunidad 30S del ribosoma
bacteriano y bloquea la insercin del tRNA cargado con aminocidos.
Es producida por algunas especies del gnero Streptomyces.

Efectos de Compuestos Antibacterianos

Nmero de
clulas

Recuento total
Recuento de
Viables

Tiempo

BACTERICIDA
Un compuesto bactericida evita la
proliferacin e inducen la muerte, pero
no tiene lugar la lisis o ruptura celular.
Ejemplo
Estreptomicina
Neomicina
Actinomicina

Un agentes que es BACTERICIDA a mayor

concentracin puede ser solo BACTERIOSTATICO
a menor concentracin.

MECANISMO DE ACCION
Se unen muy ntimamente con sus blancos
celulares y no pueden eliminarse por
dilucin.

Streptomicina: Este antibitico es producido por Streptomyces griseus.

Se une a la subunidad 30S del ribosoma, cambiando su conformacin, lo
que impide la interaccin entre el codn del mRNA y el anticodn del
tRNA.
El mensaje puede ser ledo deficientemente produciendo protenas no
funcionales. Es un bactericida efectivo tanto contra bacterias Gram(+)
como Gram (-). Monitorear su uso, puede producir dao renal.

Nmero de clulas

Efectos de Compuestos Antibacterianos

Los agentes BACTERIOLITICOS pueden producir

respuestas inmunes exacerbadas por la ruptura
celular (PG LPS)

Tiempo

BACTERIOLITICO
Inducen la muerte por lisis celular. Esto se
observa en la disminucin del numero de
clulas o en la turbidez
Ejemplos
Penicilina : sntesis de pared
Agentes que actan a nivel de
membrana: (alcoholes, detergentes KOH)

MECANISMOS DE ACCION
Sntesis de pared
Membrana plasmtica
Penicilina: Inhibe selectivamente la sntesis de pared celular
bacteriana al bloquear la actividad de la enzima transpeptidasa.
Esta enzima media la formacin de enlaces cruzados entre las
hebras lineares de los glucopptidos..
Cicloserina: antibitico activo contra Gram (+) y Gram (-),
incluyendo coliformes, Proteus y M. tuberculosis.
Actan inhibiendo la incorporacin de D-Alanina en el
peptidoglicano de las paredes bacterianas, bloqueando la alaninracemasa .
Polimixina: Recubre la membrana celular de las bacterias y
destruye su funcin osmtica de barrera de la permeabilidad
selectiva. Actan como detergentes catinicos. Son bactericidas
enrgicos para bacilos Gram (-), incluyendo Pseudomonas
resistentes a otros antibiticos que pueden causar septicemia.

FACTORES AMBIENTALES Y CRECIMIENTO

Los requerimientos para el crecimiento microbiano se pueden dividir en dos categoras:

FISICOS (Temperatura, pH, Presin osmtica)

QUIMICOS (Agua, Oxigeno, Nutrientes)
TEMPERATURA

PSICROFILOS Se encuentran principalmente en el mar

y en ciertas regiones rticas, por los que raramente
afectan los intereses humanos.
MESOFILOS Se han adaptado a vivir en el cuerpo de
animales de sangre caliente por lo cual suelen tener
una temperatura optima de crecimiento cercana a la
del husped. Incluyen a la mayora de los
microorganismos causantes de enfermedad y del
deterioro de los alimentos.
TERMOFILOS Son organismos adaptados a crecer a
altas temperaturas > 50c.

EL CRECIMIENTO DE CADA ESPECIE BACTERIANA PRESENTA UNAS TEMPERATURAS QUE SON

MINIMAS, MAXIMAS Y OPTIMA (Temperaturas cardinales).
La temperatura mnima de crecimiento es la mas baja a la cual la especie puede crecer.
La temperatura optima de crecimiento es aquella a la que la especie crece mejor.
La temperatura mxima de crecimiento es la mayor temperatura a la que el crecimiento es posible.

FACTORES AMBIENTALES Y CRECIMIENTO

pH

ACIDFILOS
Los microorganismos que tienen un crecimiento ptimo
en niveles de pH inferiores a Estos microbios se
encuentran en varios entornos, incluyendo los giseres y
las piscinas sulfricas, as como en el estmago humano.
ALCALFILAS
Los microorganismos alcalfilos tienen un crecimiento
ptimo en valores de pH entre 9 y 12. Estos
microorganismos crecen en lagos, suelos alcalinos y otros
entornos de pH alto.
NEUTRFILOS
Los valores de pH neutro, entre 6 y 8, son ms comunes
en la naturaleza. A lo largo de su evolucin, la mayora de
los microorganismos se han adaptado para tener
crecimientos ptimos en entornos de acidez neutra.

ACTIVIDAD DEL AGUA Y OSMOSIS

Todos los microorganismos requieren agua, su disponibilidad del agua depende de :
Disponibilidad de agua en el ambiente - Concentracin de solutos en ella
La disponibilidad de agua se expresa como: Aw y sus valores oscilan entre 0 y 1
(Ej.: agua pura 1, agua marina 0.9, chorizo 0.8, frutos secos 0.7, suelos agrcolas 0.9-1)

FACTORES AMBIENTALES Y CRECIMIENTO

PRESION OSMOTICA
LA PERDIDA OSMOTICA DE AGUA PRODUCE PLASMOLISIS
El aumento de la presin osmtica puede ser una manera de conservar alimentos.
Las altas concentraciones de sal y de azcar extraen el agua de cualquier clula microbiana
evitando as el crecimiento.
Algunas bacterias se han adaptado muy bien a ambientes con altas concentraciones de sal (NaCl):
halotolarentes, marinas, moderadas y extremas.

REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES
Son necesarios para la sntesis de material celular.

La sntesis de protenas requiere de N y S.

La sntesis de ADN y ARN requieren de N y P. Lo

mismo que la sntesis de ATP.

El conjunto NSP constituyen alrededor del 18% del

peso seco de la clula, de esta cantidad el 15% es
nitrgeno.
N es fijado simbiticamente y utilizado por las plantas
como por las bacterias, aumentando la fertilidad del suelo.
S es utilizado en la sntesis de aminocidos y vitaminas
como la tiamina y la biotina. El ion sulfato y el sulfuro de
hidrogeno son fuentes naturales importantes de azufre.
Oligoelementos: Son esenciales para la actividad de
determinadas enzimas, activando normalmente como
cofactores.

FACTORES AMBIENTALES Y CRECIMIENTO

OXIGENO
Presencia de O2

aerobios

obligados

aerotolerantes

anaerobios

microaerofilos

facultativos

Extrictos , obligados

FORMAS TOXICAS DEL OXIGENO:

A
A.
B.
C.
D.

AEROBIOS
ANAEROBIOS
FACULTATIVAS
MICROAEROFILAS

OXIGENO SINGLETE Oxigeno normal que ha pasado a un estado de alta

energia siendo extremadamente reactivo. Se suele formar por la accion de la
luz visible. Esta presente en las clulas fagocitarias, donde juega un papel en la
destruccin de clulas extraas una vez ingeridas por los fagocitos.
EL ION PEROXIDO: Forma toxica del oxigeno. Se genera en pequeas cantidades
durante la respiracin normal.

RADICAL LIBRE HIDROXILO (OH): Compuesto intermediario del oxigeno y

probablemente el mas reactivo. Se forma en el citoplasma celular por efecto de
radiaciones ionizantes.

FACTORES AMBIENTALES Y CRECIMIENTO

OXIGENO

Reduccin del oxgeno hasta agua mediante la incorporacin

secuencial de electrones. Todos los compuestos intermediarios
que se forman son altamente reactivos y txicos para las clulas

MATERIAL ACADMICO PROPIEDAD DE UDLA, ELABORADO Y/O MODIFICADO POR FELIPE

CONTRERAS