Membrana celular

Celula este separat de mediul extracelular prin formaiuni nalt

difereniate care au rolul esenial de a menine n limite constante
structura sa complex. Avnd n vedere caracterul de sistem deschis al
celulei, structurile de la periferia sa asigur n mod selectiv i controlat,
schimbul de substane dintre mediul intra- i extracelular, precum i
stabilirea de relaii specifice cu alte celule.
Se poate afirma c membrana celular este componenta cea mai
important a celulei deoarece majoritatea structurilor celulare au la baza
organizrii lor membrane celulare, Este foarte sugestiv termenul folosit
tot mai frecvent de sistem de membrane celulare. n aceast noiune se
includ n principal, dou categorii de formaiuni membranare, i anume:
-membrana celular extern sau plasmalema, care este dispus
la periferia celulei, mrginind-o;
-endomembranele celulare, care intr n structura majoritii
organitelor citoplasmatice.
Att plasmalema ct i endomembranele, cu toate c au la baz o
organizare molecular identic, ndeplinesc o multitudine de funcii
eseniale pentru viaa celulei.

103

nveliul celular
Membrana celular nu este singura structur care se afl la
periferia celulei. La acest nivel exist un ansamblu molecular numit
nveli celular, alctuit din formaiuni complexe, ntre care se stabilesc
relaii structurale i funcionale.

Componentele nveliului celular

Se consider c nveliul celular este format din trei componente
principale:
Plasmalema sau membrana plasmatic are o compoziie
molecular lipidic i proteic complex. Structura sa molecular este n
general unitar la toate celulele, precum i la toate membranele
intracelulare (endomembrane).
Glicocalixul, se prezint ca un nveli de natur glucidic,
glicoproteic i glicolipidic, la suprafaa extern a plasmalemei.
Corticala celular este reprezentat de o zon cu grosimea de 12 mm din citoplasma celular din imediata vecintate a feei
citoplasmatice a plasmalemei (ectoplasma). La acest nivel exist
diferenieri fizico-chimice i structurale importante, care stabilesc relaii
ntre plasmalem i citoscheletul celular.
nveliul celular prezint la suprafaa celulei o serie de
diferenieri cu rol important n realizarea adeziunii intercelulare jonciuni celulare, n mrirea suprafeei celulare - microvili, i n
motilitatea celular - cili, flageli, pseudopode.
Toate formaiunile care intr n alctuirea nveliului celular
trebuie privite ca un tot unitar, ntre componente stabilindu-se relaii
structurale i funcionale complexe.

Funciile nveliului celular

Prin structura molecular i prin proprietile sale, nveliul
celular realizeaz separarea mediului intracelular de cel extracelular i
totodat permite efectuarea de schimburi de materie i energie ntre
aceste dou medii. El confer individualitate celulei, fiind indispensabil
vieii celulare prin funciile complexe i variate pe care le ndeplinete:
Funcia de barier fizic. Prin aceasta, se menine structurarea
mediului intracelular la un nalt nivel de organizare, stare care se
pstreaz, n anumite limite, indiferent de "gradul de dezordine" din
mediul extern. n plus, membranele intracelulare, care au o structur
similar cu cea a plasmalemei, realizeaz compartimentarea celulei,
asigurnd astfel desfurarea anumitor funcii n cadrul unor structuri
specifice (organitele celulare).
104

Funcia de transport. Plasmalema asigur desfurarea

schimburilor de energie i materie ntre cele dou medii pe care le
separ.
Funcia de a recepiona informaii. Plasmalema conine
receptori capabili de a capta foarte specific mesageri extracelulari,
receptori care apoi modific n mod adecvat anumite funcii ale celulei.
Prin aceasta, celula devine capabil s rspund prin modificri
funcionale, la aciunea diferitelor substane, de exemplu, hormoni,
medicamente etc.
Funcia de a asigura adeziunea intercelular. Printr-o serie de
diferenieri specifice (jonciuni celulare), nveliul celular particip la
realizarea conexiunilor dintre celulele aflate ntr-un esut.
Funcia de a asigura aprarea celulei. Se realizeaz mpotriva
unor factori care interacioneaz "agresiv" cu celula, plasmalema fiind
implicat n imunitatea celular a organismului.
Pe lng aceste funcii generale, exist tipuri particulare de celule
ale cror plasmalem are unele funcii specifice, ca de exemplu:
membrana neuronal conduce impulsul nervos i l transmite la nivelul
sinapsei, membrana celulelor fotoreceptoare retiniene capteaz i
transform radiaiile fotonice n poteniale de aciune etc.

105

Structura molecular a plasmalemei

Membranele celulare au o structur molecular unitar, comun
tuturor membranelor biologice. Componentele chimice care intr n
structura plasmalemei sunt lipidele i proteinele. Glucidele nu pot fi
considerate separat deoarece formeaz complexe macromoleculare cu
lipidele i proteinele (glicolipide i glicoproteine).

Tipurile de lipide membranare

Aportul lipidelor la constituirea membranei plasmatice este
nsemnat, avnd n vedere proporia de mas de 1:1 lipide/proteine n
plasmalema celulei animale. Principalele tipuri de lipide care intr n
alctuirea membranei sunt: fosfolipidele, colesterolul i glicolipidele.
Toate cele trei categorii de lipide membranare au moleculele
amfipatice sau amfifile, ceea ce nseamn c au un capt hidrofil i un
capt hidrofob. Aceast proprietate este extrem de important deoarece
asigur autoasamblarea moleculelor aflate n mediu apos n structuri
ordonate, ceea ce duce la formarea unui bistrat lipidic.

Fosfolipidele membranare
Fosfolipidele sunt de dou categorii:
fosfogliceridele i
sfingolipidele.
Fosfogliceridele au la baz o molecul de glicerol la care dou
grupri hidroxil sunt esterificate cu acizi grai de lungime variabil (1424 atomi de carbon). Aceste lanuri de acizi grai alctuiesc poriunea
hidrofob a moleculei. A treia grupare hidroxil a glicerolului este ocupat
(prin legtur fosfodiesteric) de o grupare chimic polar. Aceast
grupare alctuiete poriunea hidrofil a moleculei (Figura 4-1). La
majoritatea fosfogliceridelor membranare "coada" hidrofob conine un
acid gras saturat i unul nesaturat.
Gruprile organice polare sunt variabile, cele mai comune fiind:
colina, etanolamina, serina, inozitolul; rezult astfel fosfogliceride ca
fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina, fosfatidilserina i respectiv,
fosfatidilinozitolul.
Sfingolipidele, a doua clas de fosfolipide membranare, au
aceeai structur spaial cu a fosfogliceridelor, avnd o grupare polar,
hidrofil i dou lanuri hidrocarbonate hidrofobe. De exemplu, cel mai
rspndit sfingolipid, sfingomielina, are la baza structurii sale un
aminoalcool cu lan lung (sfingozina), ntotdeauna acelai, de care se
leag prin legtur amidic (-CO-NH-) un acid gras variabil. De gruparea
hidroxil terminal a sfingozinei, se leag, prin legtur fosfodiesteric,
colina, aceasta contribuind la formarea captului hidrofil (Figura 4-2).
106

Figura 4-1 Molecula celui

mai
comun
triglicerid,
fosfatidilcolina.

Glicolipidele membranare
Glicolipidele membranare au o structur molecular
asemntoare cu a sfingolipidelor, deosebindu-se de acestea prin faptul
c un locul gruprii polare fosforilcolinice, au radicali glucidici (de la 1
la 15). Aceti radicali glucidici sunt orientai ntotdeauna nspre faa
extern a plasmalemei, participnd la formarea glicocalixului.
Dup tipul glucidelor pe care le conin, glicolipidele sunt
clasificate n dou categorii: glicolipidele neutre i gangliozidele.
Glicolipidele neutre au radicali glucidici neutri, iar unul din cei
mai cunoscui este galactocerebrozida, fiind i cel mai simplu (Figura 43). Galactocerebrozida este componenta major, glicolipidic, a mielinei
ce formeaz teaca axonilor neuronali; teaca de mielin este alcatuit din
membrane concentrice ale celulelor Schwan.
Gangliozidele sunt cele mai complexe glicolipide. Conin
ntotdeauna, pe lng radicali glucidici neutri, i acid sialic (denumirea
sa prescurtat este NANA, de la N-Acetil-Neuraminic Acid) (vezi Figura
4-3). Gangliozidele alctuiesc 6% din lipidele membranei neuronale, dar
sunt prezente i n alte membrane.
Glicolipidele cu diferite structuri se afl pe suprafaa membranelor celulare
Glicolipidele sunt situate mai ales, dei nu exclusiv, pe suprafaa membranei
celulare, cu captul glucidic orientat spre exterior. Astfel, acidul sialic al
glicolipidelor face ca majoritatea celulelor animale s aib o ncrctur ionic
negativ pe suprafaa lor.
Glicolipide i glicoproteine umane importante sunt antigenele grupelor sanguine. La
om, ca i la unele animale, structura exact a unor oligozaharide legate de lipidele i
proteinele membranare este determinat genetic. Oligozaharidele care determin
grupele sanguine A, B, O, au fost studiate n detaliu. Antigenele A, B i O sunt
oligozaharide asemntoare structural, fiind legate de lipide sau proteine. Antigenul
O este un lan de fucoz, galactoz, N-acetilglucozamin i glucoz, legate la un
lipid ceramidic (sau la un radical hidroxil al unei proteine). Antigenele A i O sunt
identice exceptnd doar o N-acetilgalactozamin ataat la galactoza periferc;
antigenul B este i el foarte asemntor, avnd un radical galactozic ataat la ultima
galactoz a lanului oligozaharidic. Toi indivizii din populaia uman posed
enzimele care sintetizeaz antigenul O. Indivizii din grupa A au n plus enzima care
adaug la lanul oligozaharidic al antigenului O, N-acetilgalactozamina
suplimentar, iar cei cu grupa B au enzima care adaug n aceeai poziie a
antigenului O, galactoza. Indivizii cu grupa AB sintetizeaz att antigenele A ct i
antigenele B.

Figura 4-2
Molecula de sfingomielin.

Colesterolul membranar
Membrana celulelor eucariote conine cantiti nsemnate de
colesterol, pn la cte o molecul pentru fiecare molecul de fosfolipid.
i molecula de colesterol este amfifil, captul hidrofil, polar, fiind
reprezentat de gruparea hidroxil a inelului sterolic, iar captul hidrofob, Figura 4-3
de lanul hidrocarbonat ataat la acest inel (Figura 4-4). Pentru c n Un glicolipid membranar.

107

structura bistratului lipidic membranar se inser ntre moleculele

fosfolipidice, colesterolul influeneaz fluiditatea membranei; inelul
sterolic interacioneaz cu lanurile de acizi grai avnd tendina de a le
imobiliza. Efectul asupra fluiditii este variabil i depinde de compoziia
lipidic. Astfel, colesterolul mpiedic micarea liber a poriunilor
externe a lanurilor de acizi grai din bistrat dar, n acelai timp, desparte
i ndeprteaz regiunile interne ale acestora ceea ce face ca zona intern
a bistratului s devin mai fluid. La concentraiile mari existente n
membranele eucariotelor, colesterolul are tendina de a micora
fluiditatea la temperatura de 37oC. La temperaturi mai sczute de
temperatura de tranziie a bistratului, colesterolul menine membrana n
stare fluid mpiedicnd lanurile de acizi grai de a se mpacheta unul
lng altul. Pe lng faptul c influeneaz fluiditatea, colesterolul scade Figura 4-4
Molecula de colesterol.
n acelai timp permeabilitatea bistratului la molecule mici, hidrofile i,
de asemenea, crete flexibilitatea i stabilitatea fizic a acestuia. Acest
efect se datoreaz capacitii moleculelor de colesterol de a se distribui
de pe o fa pe alta a bistratului n funcie de aciunea forelor mecanice
exercitate asupra membranei.
Importana colesterolului n meninerea stabilitii mecanice a membranei celulelor eucariote, se evideniaz n cazul
celulelor animale mutante care sunt incapabile s sintetizeze colesterol. Aceste celule se lizeaz uor (se sparg) dac nu
se adaug colesterol n mediul lor de cretere. Dac se adaug colesterol, acesta este ncorporat n membran i celulele
pot supravieui.

Bistratul fosfolipidic
Datorit faptului c moleculele lipidice membranare au
proprietatea de a fi amfifile, ele se dispun n structura membranei
celulare intr-un dublu strat (bistrat lipidic), cu capetele hidrofile
orientate spre faa extern, respectiv spre faa citoplasmatic a bistratului,
iar cu capetele hidrofobe orientate spre interiorul bistratului. Aceast
dispoziie particular, cea mai posibil din punct de vedere termodinamic
deoarece pe ambele fee exist cte un mediu apos, confer bistratului
proprieti particulare; posibilitatea de autoasamblare, fluiditatea i
asimetria. Acestea, pe lng faptul c faciliteaz rolul de barier al
bistratului, i confer i caracteristici eseniale pentru exercitarea
funciilor membranei de ctre proteinele inserate n structura sa.
Astzi s-au acumulat un numr mare de date experimentale care
susin faptul c bistratul fosfolipidic este baza structural a tuturor
membranelor. Se poate pune ntrebarea: sunt lipidele singure responsabile
pentru structurarea membranei? n structura membranei nu intr doar
lipidele; n toate membranele purificate s-a constatat c exist i proteine.
Procentul i tipul de proteine variaz ns considerabil, n funcie de tipul
de membran. Dar, sunt proteinele o component esenial pentru
structurarea membranelor sau au ele doar un rol funcional? Datele
actuale sugereaz c n structura membranelor biologice, proteinele

108

ndeplinesc funciile specifice, iar fosfolipidele sunt responsabile pentru

integritatea structural.

Prima dovad experimental direct privind dispoziia lipidelor n membranele

biologice ntr-un dublu strat, dateaz din 1925 i a fost demonstrat de catre E.
Gorter i F. Grendel. Aceti cercettori au extras lipidele din membranele
eritrocitelor i le-au dispus pe suprafaa unui vas cu ap. Lipidele astfel dispuse
formeaz la suprafaa apei un strat monomolecular, cu moleculele avnd captul
hidrofil orientat spre ap i captul hidrofob nspre aer (Figura 4-5). Msurnd aria
acestui film monomolecular de lipide, Gortel i Grendel au ajuns la concluzia c
aceasta este dubl fa de suprafaa eritrocitelor folosite pentru extracia lipidelor.
Interesant este faptul c experimentul efectuat de cei doi cercettori conine dou
erori fundamentale. Prima eroare este aceea c nu au reuit s extrag absolut toate
lipidele din membranele hematiilor. A doua eroare provine din tehnica folosit
pentru msurarea suprafeei hematiilor; suprafaa a fost msurat n mod greit,
obinndu-se o valoare mai mic dect cea real. Aceste dou erori s-au compensat
ns reciproc, astfel c rezultatul experimentului a dus la o concluzie corect.

Autoasamblarea bistratului fosfolipidic

Moleculele lipidice, datorit caracterului amfifil, manifest
tendina de a forma bistraturi n mediu apos. Acest proces a fost studiat
intensiv pe membrane artificiale. Prepararea membranelor artificiale este
posibil deoarece moleculele fosfolipidice i glicolipidice, aflate ntr-un
mediu apos, tind s se orienteze n aa fel nct captul lor hidrofob s nu
vin n contact cu moleculele polare ale apei. Prin agitarea acestor
molecule n ap, se formeaz dou tipuri de agregate moleculare: micele
i respectiv, bistraturi (Figura 4-6). Dac se formeaz bistraturi (aceasta
depinde de concentraie), ele au tendina de a forma vezicule, nchiznd
n interior compartimente apoase, precum i de a reface continuitatea
bistratului ori de cte ori acesta este dezasamblat. Acest fapt st la baza
proceselor de refacere i rennoire a membranelor celulare.
O mare parte a proprietilor bistraturilor lipidice a fost elucidat
ca urmare a studiului membranelor artificiale. Astfel, se pot sintetiza pe
cale artifical dou tipuri de bistraturi lipidice: (1) bistraturi care
formeaz vezicule sferice, numite liposomi) i care pot avea un diametru
cuprins ntre 25 nm i 1 m, n funcie de procedura de preparare, i (2),
"membrane negre" "(black membranes"), care sunt bistraturi plane
formate pe suprafaa unui mic orificiu dispus n aa fel nct s separe
Figura 4-6 Agregate moleculare
dou medii apoase (Figura 4-7).
formate de lipide n mediu apos.

109

Veziculele fosfolipidice numite liposomi au fost descrise n anul 1965, iar astzi sunt extensiv folosite n cercetri din
domeniul farmacologiei. Astfel, deoarece delimiteaz un compartiment apos, liposomii pot fi considerai ca veritabile
"capsule farmacologice". n momentul preparrii, n veziculele liposomale se pot ncapsula diferite substane cu efect
terapeutic. Deoarece liposomii sunt mrginii de o membran-bistrat fosfolipidic, cu aceeai structur ca i membranele
biologice naturale, ei nu sunt toxici dac sunt administrai n organism. S-a demonstrat de asemenea, c liposomii
interacioneaz specific cu celulele, fiind captai de ctre acestea prin endocitoz sau fuziune. Toate aceste argumente
experimentale stau la baza speranelor ca liposomii n care se ncorporeaz medicamente s fie folosii n viitorul
apropiat, ca vectori farmacologici n administrarea dirijat a preparatelor terapeutice catre anumite celule int.

Fluiditatea bistratului fosfolipidic

Figura 4-7 Modele de membrane

artificiale
folosite
pentru
studierea
proprietilor
bistratului fosfolipidic.

Primele date cu privire la capacitatea moleculelor lipidice de a

difuza n planul bistratului au fost obinute tot pe membrane artificiale,
dup anul 1970. Ulterior, aceast proprietate a fost demonstrat i pe
membrane biologice izolate, precum i pe formaiuni celulare simple, ca
bacteriile i eritrocitele.
Micarea moleculelor n bistratul membranar este de trei tipuri:
(1) rotaia n jurul axului molecular; (2) difuziunea n planul stratului n
care se afl; (3) trecerea dintr-un strat n celallt (micare "flip-flop")
(Figura 4-8). Micarea de rotaie i difuzia lateral au loc frecvent, n
schimb, micarea "flip-flop" este foarte rar, dac nu chiar absent.
Factorii majori care determin gradul de fluiditate al membranei
celulare sunt: gradul de saturare al acizilor grai i lungimea lanului lor
de carbon, temperatura i proprietile particulare ale moleculelor de
colesterol. Sub o anumit temperatur, numit temperatur de tranziie,
structura de cristal lichid a bistratului trece ntr-o structur cristalin
rigid, de gel, ceea ce determin abolirea funciilor membranei. La
membranele biologice, temperatura de tranziie este mult mai sczut
dect temperatura fiziologic, ceea ce previne rigidizarea bistratului.
Figura 4-8 Micri posibile ale
Acizii grai cu lan lung i nesaturat mpiedic mpachetarea strns a moleculelor fosfolipidice n
moleculelor n bistrat, crescnd astfel fluiditatea sa. Celula posed bistrat.
mecanisme care i permit ajustarea compoziiei n acizi grai a
fosfolipidelor n aa fel nct s evite tranziia membranei din starea
110

fluid n starea rigid. O importan deosebit n pstrarea fluiditii

bistratului se acord colesterolului.
Meninerea fluiditii bistratului membranar este esenial pentru creterea i reproducerea celular normal. n
membranele biologice exist o mixtur de tipuri de acizi grai care au rolul de a menine fluiditatea la 37 oC. n cazul
organismelor poikiloterme, a cror temperatur variaz cu cea a mediului, membranele celulare i schimb compoziia
n acizi grai n aa fel nct fluiditatea s se menin n limite constante, indiferent de temperatura ambiant. De
exemplu, dac temperatura scade, se sintetizeaz n membrane fosfolipide n care predomin acizi grai nesaturai (cu
duble legturi), astfel c descreterea fluiditii, odat cu scderea temperaturii, este evitat.

Asimetria bistratului fosfolipidic

Asimetria este determinat de compoziia lipidic diferit a celor
dou jumti ale bistratului (Figura 4-9). Repartiia moleculelor lipidice
n cele dou jumti ale bistratului este urmtoarea:
n stratul extern predomin lipidele cu gruparea colinic
(neutre), toate glicolipidele i lipidele cu acizi grai nesaturai.
n stratul intern predomin lipidele cu sarcin electric
(fosfatidilserina negativ, fosfatidiletanolamina) i lipidele cu acizi grai
nesaturai.
Deoarece moleculele lipidice nu pot executa micri "flip-flop",
se consider c asimetria bistratului este determinat nc din momentul
biosintezei intracelulare a membranei, proces care are loc la nivelul
reticulului endoplasmic. Acest proces este asigurat de enzime asociate la
membran, numite translocatori fosfolipidici. Aceti translocatori
determin micarea de "flip- flop" a fosfolipidelor n cursul sintezei
membranelor, proces care este foarte specific i care st la originea
asimetriei. Asimetria bistratului are o importan funcional deosebit
deoarece determin orientarea proteinelor membranare, condiie esenial
pentru ndeplinirea funciilor acestora. O importan deosebit n
determinarea asimetriei bistratului o au glicolipidele. Acestea sunt
orientate exclusiv cu radicalii glucidici spre faa extracelular a
membranei. Se presupune c aceast dispoziie are un rol important n
stabilirea comunicrilor intercelulare. Totui, rolul glicolipidelor este nc
insuficient demonstrat. Gruprile oligozaharidice de pe faa extern a
membranei sunt de multe tipuri i se presupune c pot funciona ca
receptori.

Figura 4-9
Reprezentare
schematic
a
asimetriei bistratului fosfolipidic
membranar.

111

Glicolipidul numit GM1 acioneaz ca receptor de suprafa pentru toxina bacterian a holerei. Legarea toxinei la acest
receptor prezent pe membrana celulelor intestinale, determin boala diareic ce apare n holer. Prezena toxinei pe
celulele intestinale, determin o cretere prelungit a concentraiei intracelulare a AMP ciclic, ceea ce cauzeaz un masiv
eflux de Na+ i ap, n lumenul intestinal i deci, diaree sever. Cu toate c legarea toxinelor bacteriene nu este o funcie
normal a glicolipidelor membranare, aceste observaii sugereaz c glicolipidele membranare pot avea rol de receptor i
n semnalizarea celular n condiii normale.

Proteinele membranare
Cu toate c structura de baz a membranelor biologice o
constituie bistratul fosfolipidic, majoritatea funciilor specifice sunt
ndeplinite de proteine. Cu ct coninutul n proteine al unei membrane
este mai mare, cu att funciile sale sunt mai complexe. De exemplu,
membrana mielinic are doar rolul de a izola axonii neuronali i conine
numai 18% proteine; membranele mitocondriale, au rolul n producia
de energie celular i conin pn la 76% proteine (Tabel 4-1).
Tabel 4-1

Compoziia chimic a unor membrane purificate

Membrana
Procentaj din masa total
Proteine
Lipide
Glucide
Mielina
18
79
3
Membrane plasmatice
Eritrocit uman
49
43
8
Ficat de oarece
44
52
4
Amoeba
54
42
4
Cloroplaste
70
30
0
Membrana de Halobacterium
75
25
0
Membrana intern
76
24
0
mitocondrial
Dup: G. Guidotti, 1972, Ann. Rev. Biochem, 41, 731.

Tipurile de proteine membranare

Unele proteine membranare traverseaz bistratul fosfolipidic
odat sau de mai multe ori (Figura 4-10). La fel ca moleculele
fosfolipidice, aceste proteine, numite proteine transmembranare, sunt
amfipatice; ele conin regiuni hidrofobe care trec prin membran
interacionnd cu lanurile hidrofobe ale moleculelor fosfolipidice din
interiorul bistratului, precum i regiuni hidrofile, expuse la ap, pe
ambele fee ale membranei.
Caracterul hidrofob al proteinelor transmembranare poate fi
crescut prin ataarea la molecul a unui lan de acid gras care este inserat
n monostratul lipidic de pe faa citoplasmatic (vezi Figura 4-10,
exemplul 1).

112

Unele proteine membranare, se asociaz cu bistratul prin

intermediul unor lanuri hidrocarbonate (acizi grai) (vezi Figura 4-10,
exemplul 3 i 4). Aceste proteine legate de lipide sunt grupate n trei
clase:
Proteinele ancorate la glicozil-fosfatidilinozitol sunt
caracteristice pentru faa extern a membranei celulare. Ele se ancoreaz
la bistrat printr-un glicolipid complex. Acesta conine dou lanuri de
acizi grai i mai multe monozaharide printre care N-acetilglucozamina,
manoza i inozitolul (vezi Figura 4-10, exemplul 4).
Proteinele ancorate la miristat i proteinele ancorate la
farnezil se leag ntotdeauna pe faa citoplasmatic a membranei prin
intermediul acidului miristic sau respectiv printr-un lan policarbonat
nesaturat farnezil (vezi Figura 4-10, exemplul 3). Aceste proteine intr n
categoria proteinelor transformante deoarece sunt implicate mai mult sau
mai puin direct n procesele de transformare celular i diviziune
celular.
Alte proteine membranare nu ptrund n interiorul hidrofob al
bistratului, ci sunt legate pe o fa sau alta a membranei prin interaciuni
necovalente cu proteinele transmembranare (vezi Figura 4-10, exemplul
5). Unele dintre acestea pot fi eliberate de pe membran prin folosirea
unor proceduri de extracie relativ blnde, cum ar fi expunerea la soluii
cu concentraii ionice mari sau la pH-uri extreme. Aceti factori interfer
cu legturile protein-protein, ns nu distrug bistratul fosfolipidic.
Aceste proteine au fost denumite proteine membranare periferice.

Figura 4-10 Modalitile prin care

proteinele membranare se pot
asocia la bistratul fosfolipidic.
Explicaiile n text.

Proteinele membranare care care sunt ataate la bistrat prin intermediul unor lanuri hidrocarbonate (acizi grai), sunt
proteine membranare descrise relativ recent. Fosfataza alcalin este ancorat pe faa extern a membranei plasmatice prin
intermediul glicozil-fosfatidilinozitolului (vezi Figura 4-10). Dac suprafaa celulelor se trateaz cu fosfolipaz C, proteina
se elibereaz de pe suprafaa celular. Proteina v-src este o mutant a proteinei c-src i are capacitate transformant,
determinnd ca o celul normal s devin celul canceroas. n forma sa normal (c-src), este liber n citoplasam i nu

113

Mobilitatea proteinelor membranare

Mobilitatea proteinelor n bistrat a fost evideniat printr-o serie
de tehnici de mare acuratee. Astfel, s-a demonstrat c proteinele, ca i
moleculele fosfolipidice, pot prezenta micri de rotaie, n jurul unui ax
perpendicular pe planul membranei, i micri de difuziune lateral, n
planul membranei, dar nu sunt capabile s treac dintr-un strat n cellalt
(micri "flip-flop").
Difuziunea lateral a proteinelor, n planul membranei, este foarte
important pentru exercitarea funciilor acestor molecule. Celula posed
mecanisme complexe care asigur "dirijarea" moleculelor proteice
membranare n zonele necesare pentru desfurarea unei anumite

activiti fiziologice.

114
Figura 4-13 Experiena lui FRYE i
EDIDIN
care
demonstreaz
difuziunea proteinelor membranare.
Explicaiile n text.

Tehnicile de fuziune celular i de marcare cu anticorpi

fluoresceni, au permis evidenierea direct a mobilitii proteinelor
membranare. n acest context, este foarte cunoscut experimentul efectuat
de FRYE i EDIDIN n 1970 (Figura 4-13). Astfel, dou tipuri de celule,
de oarece i umane, avnd deci diferite antigene de suprafa, au fost
marcate cu anticorpi corespunztori, cuplai cu compui fluoresceni
diferii (fluorescein respectiv rodamin). Aceste celule au fost apoi
fuzionate. Dac la nceput, adic dup 5 minute de la fuziune, cele dou
suprafee celulare erau distincte la celulele hibride, avnd o fluorescen
verde, respectiv roie (fluoresceina - verde, rodamina - roie), dup 40 de
minute, suprafaa celulelor hibride avea o fluorescen uniform ca
urmare a difuziunii i amestecului n planul membranei a proteinelor
antigenice marcate, proteine care proveneau de la membranele celulelor
de origine.
n funcie de tipul de celul, sau de tipul proteinei, se consider c
o proporie de 30-90% din totalitatea proteinelor membranare, difuzeaz
lateral n planul membranei. S-a constatat ns c, n membranele
naturale, viteza de difuziune este de 10-30 de ori mai lent dect n
membranele artificiale (liposomi). Aceast scdere a mobilitii care
apare n plasmalema celulei vii, se datoreaz n primul rnd interaciunii
dintre faa citoplasmatic a proteinelor transmembranare i elementele
citoscheletului.
Nu toate proteinele membranare pot difuza liber n bistrat; unele sunt imobilizate prin contact cu alte proteine membranare
sau cu formaiunile filamentoase ale citoscheletului celular. Microfilamentele lungi de actin, component major al
citoscheletului, formeaz o reea pe faa citoplasmatic a membranei, reea care vine n contact cu proteinele membranare.
La reeaua citoscheletului particip i microtubulii i filamentele intermediare; s-a evidentiat c i filamentele intermediare
se ancoreaz la proteinele membranare.

Modelul de mozaic fluid al membranei

Prima imagine real despre arhitectura molecular a membranei
celulare a fost imaginat relativ trziu. Doar dup anul 1970, o serie de
date experimentale au sugerat c membrana este organizat dup modelul
de mozaic fluid (Figura 4-14). Acesta a fost descris detaliat de ctre
SINGER i NICOLSON n 1972. Astzi, acest model de organizare este
general acceptat.
Modelul de mozaic fluid postuleaz c:
-lipidele i proteinele transmembranare sunt dispuse n mozaic;
-membrana are o structur semifluid, att lipidele ct i
proteinele executnd micri de translaie n planul bistratului lipidic;
-fluiditatea implic existena ntre componentele moleculare, a
interaciunilor fizico-chimice slabe, necovalente;
-toate moleculele care intr n structura de baz a membranei sunt
amfifile (amfipatice);

115

-fluiditatea mozaicului este posibil doar n condiii de

temperatur superioar temperaturii de tranziie din faza de gel n faza de
cristal lichid, condiie realizat de nivelul temperaturii fiziologice;

Figura 4-14 Modelul de mozaic

fluid al membranei elaborat de
SINGER i NICOLSON n 1972.

-bistratul lipidic are o structur bidimensional, fapt ce decurge

din dispoziia asimetric a moleculelor n membran.
Astfel, membrana celular poate fi imaginat c fiind format
dintr-o "mare lipidic" n care plutesc c nite "iceberguri" moleculele
proteice.
Organizarea membranei celulare dup modelul de mozaic fluid a
fost probat astzi far echivoc printr-o serie de dovezi experimentale
obinute prin folosirea unor tehnici de mare acuratee.
Proteinele membranare pot fi vizualizate la microscopul electronic prin metoda criofracturrii
Prin microscopia electronic de transmisie este posibil studierea suprafeei unui preparat, putndu-se vizualiza chiar i
molecule individuale. Preparatul este metalizat sub un anumit unghi. Pulverizarea dintr-o direcie oblic a vaporilor de
metal pe suprafaa specimenului produce un efect de umbrire, ceea ce d imaginii un aspect tridimensional. Unele preparate
sunt att de subiri nct pot fi penetrate direct de ctre un fascicul de electroni; acesta este cazul moleculelor individuale, al
virusurilor sau al membranelor celulare. n cazul preparatelor mai groase, materialul organic este degradat cu acizi,
observndu-se doar replica. Pentru a se putea dispune pe o gril suport, replica trebuie acoperit la rndul ei, cu un film fin
de carbon. Principiul de mai sus este curent utilizat astzi n tehnica de criofracturare ("freeze-fracture"), care permite
vizualizarea interiorului membranelor celulare. Celulele sunt ngheate la temperatura azotului lichid (-196 oC) n prezena
unui crioprotectant, pentru a se preveni distorsiunile determinate de cristalele de ghea, i apoi sunt "lovite" cu un cuit,
ceea ce provoac o fractur a suprafeei preparatului ngheat. n unele zone planul fracturii trece prin interiorul hidrofob al
bistratului lipidic membranar, expunnd astfel interiorul membranei. Suprafeele de fractur sunt apoi metalizate (vezi mai
sus) i se observ la microscopul electronic de transmisie. Aspectul lor evideniaz prezena unor mici formaiuni globulare,
numite particule intramembranare, care reprezint de fapt proteinele membranare integrale ce strbat bistratul lipidic.
Exist astzi o serie de variante ale acestei tehnici ("etching"), toate prezentnd avantajul c permit observarea structurilor
subcelulare care nu au fost supuse fixrii chimice, ceea ce nltur riscul apariiei artefactelor.

116

Structurile specializate ale membranei

celulare
Spre deosebire de celulele sanguine, care n organism se afl n
suspensie, majoritatea celulelor animale sunt organizate n structuri
multicelulare care formeaz esuturile. Asemenea celule, dispuse n
straturi sau agregate multicelulare, i pot ndeplini funciile specifice
doar dac membrana lor este organizat n domenii distincte, fiecare
specializat pentru anumite funcii. Se spune c aceste celule sunt
polarizate funcional. De asemenea, pentru ca un esut s aib
consisten, celulele sale trebuie s fie capabile s stabileasc contacte
foarte strnse ntre ele. Acest lucru este asigurat de structuri specializate
numite jonciuni celulare.

Distribuia asimetric a proteinelor n domenii distincte ale

membranei
Descrierea aspectului fluid, bidimensional al membranelor
biologice, a contribuit n mod esenial la nelegerea structurii i
funciilor membranei. Astzi este evident faptul c imaginea membranei
ca o "mare lipidic" n care plutesc proteinele, este un mod simplist de a
privi lucrurile. Majoritatea celulelor sunt capabile s-i imobilizeze
proteinele membranare n zone specifice ale bistratului lipidic. De
exemplu, n celulele epiteliale, cum sunt cele din mucoasa gastric sau
117

Figura 4-19 Distribuia neomogen, asimetric a proteinelor

membranare. Difuziunea liber a
proteinei A, respectiv B, este limitat
n zone distincte datorit existenei
jonciunilor strnse.

cele din tubii uriniferi ai rinichiului, o serie de enzime membranare sau

proteine transportoare, sunt aglomerate la suprafaa apical a celulelor, pe
cnd alte proteine membranare, sunt imobilizate pe feele laterale i
bazale (Figura 4-19).
Distribuia asimetric a proteinelor membranare este esenial
pentru funciile unui epiteliu. Compoziia lipidic a celor dou domenii
membranare (apical i bazo-lateral) este de asemenea diferit, ceea ce
nseamn c celulele pot limita difuziunea liber nu numai a proteinelor,
ci i a lipidelor. Meninerea distribuiei separate a moleculelor lipidice i
proteice n membranele celulelor epiteliale este asigurat, cel puin n
unele cazuri, de existena unor bariere reprezentate de o categorie
specific de jonciuni intercelulare (numite jonciuni strnse).
Celulele pot crea domenii membranare distincte i far a utiliza
jonciuni intercelulare. Astfel, spermatozoidul mamiferelor este o celula
format din dou pri distincte, capul i coada, acoperite de o membrana
plasmatic continu. Dac aceste celule sunt privite la microscopul cu
fluorescen, prin utilizarea mai multor tipuri de anticorpi care
reacioneaz cu antigene de suprafa, membrana apare ca fiind format
din trei domenii (Figura 4-20). Antigenele, care sunt reprezentate de
proteine sau glicoproteine membranare, sunt capabile s difuzeze liber
doar n limitele domeniului lor; nu se cunoate cum se realizeaz
separarea celor trei domenii.
Modalitile cele mai comune de blocare a mobilitaii laterale a
proteinelor membranare se realizeaz prin legarea lor la ansamblul
molecular de pe suprafaa sau din interiorul celulelor. Am aratat mai sus
modul n care proteinele membranare ale eritrocitului sunt ancorate la
citoscheletul membranar; la alte tipuri de celule, proteinele membranare
pot fi ancorate la structurile matricei extracelulare. Cele patru mecanisme
de imobilizare a proteinelor membranare sunt reprezentate schematic n
Figura 4-21.

Figura 4-20 Cele trei domenii ale

membranei unui spermatozoid,
care pot fi evideniate prin
folosirea
anticorpilor
monoclonali.

Polarizarea funcional a membranei celulelor din

acinul pancreatic
Un acin pancreatic este o formaiune mai mult sau mai puin
sferic, format din aproximativ 20 de celule. Lumenul acinului
(cavitatea central) este conectat la canaliculi care se unesc cu
canaliculii altor acini, formnd canalele de secreie. n cele din urm,
produsul de secreie se vars n lumenul intestinal. Celulele acinare
sintetizeaz enzime (amilaze, proteaze, ribonucleaze etc.) care
degradeaz macromoleculele alimentare n intestin. n celule, aceste
enzime sunt stocate sub forma de precursori inactivi n vezicule secretorii
delimitate de membrane i aglomerate sub membrana apical
(membrana plasmatic adiacent la canalicul). Veziculele secretorii
fuzioneaz numai i numai cu aceast zona a membranei, determinnd
eliberarea enzimelor digestive n canalicul. Restul suprafeei celulare,

118

Figura 4-21 Modalitile de

imobilizare
ale
proteinelor
membranare. Proteinele se pot
asambla n agregate mari (A), pot fi
grupate prin interaciunea cu
molecule din exterior (B) sau din
interiorul celulei (C), sau pot
interaciona cu proteinele de pe
suprafaa altei celule (D).

numit membrana bazolateral, cuprinde membranele din partea bazal

i lateral a celulei. Substanele nutritive din snge sunt transportate n
celulele acinare la nivelul acestei regiuni a membranei. Membrana
bazolateral conine, de asemenea, receptori pentru hormonii eliberai de
duoden i stomac la contactul cu alimentele, hormoni care declaneaz
secreia de enzime digestive de ctre celulele acinare.

Polarizarea funcional a membranei enterocitului

Cele mai studiate celule epiteliale polarizate funcional sunt
celulele care cptuesc lumenul intestinal (enterocitele). Ele au dou
funcii majore: (1) absorb substanele nutritive provenite din digestia
alimentelor, din lumenul intestinal n citoplasm; (2) transfer substanele
absorbite, n snge.
Suprafaa luminal (apical) a acestor celule este puternic
specializat pentru absorbie. Aceast regiune, numit i "margine n
perie", datorit aspectului su, este format dintr-un mare numr de
prelungiri digitiforme (100 nm diametru) numite microvili. Aceste
extensii ale suprafeei celulare mresc foarte mult aria membranei, ceea
ce duce la creterea vitezei de absorbie (Figura 4-22). Membrana
microvililor conine proteine transportoare care permit intrarea n celule a
glucozei, aminoacizilor i a altor compui prezeni n alimente. De
asemenea, la suprafaa microvililor se afl legate o serie de enzime
digestive. Dup ce proteinele i polizaharidele sunt degradate de ctre
enzimele pancreatice din lumenul intestinal n peptide i oligozaharide,
acestea din urm trebuiesc degradate n continuare pn la monozaharide
(glucoz) i aminoacizi, pentru c altfel nu pot fi absorbite. Aceast
degradare final este realizat de ctre peptidazele i glicozidazele legate
pe suprafaa microvililor. La microscopul electronic, acest set de enzime
hidrolitice apare ca un "puf" pe suprafaa microvililor, formnd o
structur a suprafeei celulare numit glicocalix.

119

Figura 4-22 Polarizarea funcional a enterocitului.

Structura microvililor
La structurarea microvililor particip mai multe componente ale
membranei plasmatice i ale citoscheletului. Proteinele din structura lor,
O glicozidaz care intr n structura glicocalixului de pe suprafaa microvililor este sucraza-izomaltaza. Glucidul major din
alimentaia omului este sucroza (zaharoza), un dizaharid. Pentru a fi absorbit din intestin, sucroza trebuie hidrolizat n
cele dou monozaharide ale sale, glucoza i fructoza, de ctre sucraz-izomaltaz. Aceast enzim este format din dou
lanuri polipeptidice alungite pe suprafaa luminal a celulelor intestinale. Enzima este ancorat n membrana plasmatic
printr-o regiune hidrofob format din 30 de aminoacizi, iar cea mai mare parte a proteinei se ntinde la suprafaa extern a
membranei, avnd legate aici i lanuri oligozaharidice. Dispus astfel, sucraza-izomaltaza produce glucoz i fructoz,
foarte aproape de membrana celular, unde acestea se absorb.

le determin aspectul i diametrul uniform. n axul fiecrui microvil se

afl un mnunchi de filamente de actin. Filamentele se ancoreaz la o
extremitate de proteinele de pe faa citoplasmatic a membranei
microvilare, iar la baz se intersecteaz cu o reea de filamente ce conin
proteine de legare a actinei. Aceast reea traverseaz la nivelul bazei
microvililor toat celula (Figura 4-23).
Dispuse astfel, microfilamentele asigur rigiditatea microvililor,
dar, n acelai timp, pot determina micarea lor nainte i napoi.
Reeaua filamentoas situat n celul aproape de baza
microvililor, se inser pe faa citoplamatic a membranei laterale la un tip
special de jonciuni celulare (benzi de aderen).

120

Microvili cu aceast structur exist i n alte tipuri de celule. De

exemplu, n tubulii renali ei au rolul de a mri suprafaa de reabsorbie a
moleculelor, dinspre urin spre snge.

Figura 4-23 Structura

microvililor.

Jonciunile celulare
n organism, celulele individuale se afl agregate n esuturi.
Pentru ca ele s funcioneze n mod integrat, la suprafaa celulelor exist
formaiuni specializate care au primit denumirea de jonciuni celulare.
Jonciunile celulare pot fi clasificate n trei categorii funcionale:
-jonciunile de ocluzie, care leag celulele epiteliale ntr-un strat
continuu, n aa fel nct blocheaz trecerea moleculelor dintr-o parte a
stratului nspre cealalt parte; se mai numesc jonciuni strnse;
-jonciunile de ancorare, care ataeaz mecanic celulele i citoscheletul
lor, cu celulele vecine sau cu matricea extracelular; cuprind jonciunile
de aderen i desmozomii;

121

-jonciunile comunicante, care mediaz trecerea semnalelor chimice sau

electrice de la o celul la alta; cuprind jonciunile "gap" i sinapsele
chimice.
n afara zonelor de jonciune, spaiul dintre membranele celulelor
adiacente are o dimensiune de aproximativ 200 . Acest spaiu conine
glicoproteine extracelulare de suprafa care, probabil, au i ele un rol
important n adeziunea intercelular.

Jonciunile de ocluzie (strnse)

Jonciunile strnse ("tight junctions") sunt formate din benzi
subiri care nconjoar celulele de jur mprejur. Principala funcie a
tuturor epiteliilor este de a realiza o barier de permeabilitate selectiv,
separnd astfel lichidele de pe cele dou fee, care au o compoziie
chimic diferit. Aceast funcie este cel mai bine ilustrat n cazul
epiteliului care mrginete cavitatea intestinal. Jonciunile strnse
prezente la acest epiteliu sunt impermeabile pentru substanele prezente
n lumenul intestinal, astfel c acestea nu pot difuza prin spaiile
intercelulare pe faa opus. Din aceast cauz, substanele alimentare nu
pot trece n capilarele sanguine dect printr-un proces de transport
transepitelial.
Structura molecular a jonciunilor strnse este puin cunoscut,
ns prin microscopie electronic s-a observat c ele sunt formate dintr-o
reea de iruri de molecule proteice anastomozate care, toate, nconjoar
polul apical al fiecrei celule din epiteliu. Moleculele proteice care
formeaz aceste iruri pe membrana unei celule, vin n interaciune cu
irurile din membrana celulei adiacente (Figura 4-24). Aceast structur
nchide perfect spaiul intercelular, ceea ce blocheaz difuzia liber a
moleculelor prin acest spaiu. Capacitatea jonciunilor strnse de a bloca
trecerea ionilor prin spaiul dintre celule crete logaritmic cu numrul de
iruri proteice care formeaz jonciunea.
Unele cercetri au artat c aceste jonciuni i pstreaz
integritatea doar n prezena concentraiei fiziologice a Ca2+ din spaiul

122

Figura 4-24 Modelul structurii

unei jonciuni strnse.

intercelular. Cnd concentraia de Ca2+ din mediu scade, jonciunile

dezintegreaz, iar dac este readus la normal, aceste jonciuni
reagreg n maximum o or. De asemenea, tratamentul epiteliilor
tripsin (enzim proteolitic), distruge jonciunile strnse, ceea
demonstreaz c proteinele sunt componenta lor esenial.

se
se
cu
ce

Rolul jonciunilor strnse

Pentru ca celulele epiteliale polarizate funcional, cum sunt cele
din epiteliul intestinal, s funcioneze, suprafeele apicale i respectiv,
cele bazolaterale, trebuie s conin seturi diferite de proteine
membranare integrale:
-un set de proteine, localizat n membrana de pe suprafaa apical
(suprafaa dinspre lumen), pompeaz activ i selectiv moleculele din
lumenul intestinal n citoplasma celulelor epiteliale;
-un alt set de proteine, localizat n membrana de pe suprafaa
bazolateral, permite acelorai molecule s prseasc celulele prin
difuziune facilitat, nspre lichidele extracelulare de pe faa opus a
epiteliului (Figura 4-25). Pentru ca pomparea direcionat, ntr-un singur
sens, dinspre polul apical spre polul bazal, s fie meninut, setul apical
de proteine transportoare nu trebuie lsat s difuzeze spre polul bazal al
celulei, i invers, setul bazolateral s nu difuzeze spre polul apical.
Jonciunile strnse blocheaz aceast difuziune. Astfel, aceste jonciuni
funcioneaz ca o barier n calea difuziunii libere a proteinelor
membranare. Aceleiai reguli i se supun i lipidele membranare.
n concluzie, se poate spune c jonciunile strnse, numite i "de
ocluzie", au dou funcii importante:
(1) separ dou caviti prin legarea strns a celulelor epiteliale,
blocnd astfel difuziunea liber a moleculelor prin spaiile intercelulare;
(2) separ suprafaa celulelor epiteliale n pol apical i pol
bazolateral, prin blocarea difuziunii libere a moleculelor transportoare.
123

Figura 4-25 Dispoziia protei-nelor

transportoare din cele dou
regiuni distincte ale membranei
celulelor intestinale. Jonciunile
strnse opresc difuziunea liber a
moleculelor
transportoare
n
membrana celular.

Jonciunile de ancorare
Jonciunile de ancorare sunt foarte abundente n esuturile supuse
unor solicitri mecanice severe, cum sunt: muchiul cardiac, epidermul,
colul uterin. Aceste jonciuni constau din dou forme structural i
funcional diferite: jonciunile de aderen, care prezint n citoplasm
situsuri de conectare la filamentele de actin, i desmozomii i hemidesmozomii, care prezint n citoplasm situsuri de conectare la
filamentele intermediare.
Toate jonciunile de ancorare au la baza organizrii lor, dou
tipuri de proteine:
-proteine intracelulare de ataare, care conecteaz complexul
joncional la elementele specifice ale citoscheletului (filamentele de
actin sau filamentele intermediare);
-glicoproteine transmembranare de legare, al cror domeniu
intracelular se leag la una sau mai multe proteine de ataare
intracelulare, iar domeniul extracelular interacioneaz, fie cu matricea
extracelular, fie cu domeniul extracelular al glicoproteinelor
transmembranare de legare ale altei celule (Figura 4-26).

124

Figura 4-26 Principiile generale de

structurare a jonciunilor de
ancorare.

Interaciunea jonciunilor de aderen cu

filamentele de actin
Jonciunile de aderen pot fi clasificate n doua categorii:
jonciuni celul-celul i jonciuni celul-matrice. Caracteristic este
faptul c toate jonciunile de aderen au rolul dublu, de a asigura legarea
celulelor ntr-un esut, precum i de a implica n acest proces filamentele
de actin, deci componente ale citoscheletului celular. Astfel, rezistena
mecanic a unui esut nu este asigurat prin simpla aderen a suprafeei
membranelor celulelor adiacente la nivelul jonciunii, ci i prin
participarea citoscheletului celular, deci a unor componente
citoplasmatice.
n epitelii, jonciunile de aderen au forma unor benzi care
nconjoar, ca un cordon, polul apical al celulelor, imediat sub jonciunea
de ocluzie. Ele au fost denumite benzi de aderen. Celulele nvecinate
au benzile de aderen situate la acelai nivel, astfel c aici membranele
lor interacioneaz prin intermediul unor proteine cu afinitate pentru Ca2+,
numite cadherine (Tabel 4-2). Pn de curnd, benzile de aderen au
fost denumite "desmozomi n band", dar acest lucru a fost greit pentru
c benzile de aderen au o structur cu totul diferit fa de un
desmozom real (vezi mai jos). Pe faa citoplasmatic a membranei,
benzile de aderen prezint un cordon continuu de filamente de actin,
dispus paralel cu membrana plasmatic, la care se ataeaz prin
intermediul unui complex de proteine de ataare care conin vinculin.
Astfel, filamentele de actin formeaz prin intermediul glicoproteinelor
transmembranare din jonciune, o reea transcelular care este implicat
ntr-un proces fundamental al morfogenezei - plierea stratului de celule
epiteliale n tuburi (Figura 4-27).

125

Tabel 4-2
Principalele molecule de cadherine din celulele mamiferelor
Tipul de
Distribuia celular
cadherin
Cadherina E
Embrioni n stadiul de preimplantare
(uvomorulina)
Celule epiteliale (n particular, la benzile de
aderen)
Cadherina P
Trofoblast
Inim
Plmn
Intestin
Cadherina N
Sistemul nervos
Plmn
Inim
Cristalin
Mezodermul embrionar
ectodermul neural embrionar
Cadherina R
Nervii retinieni
Celulele gliale
Cadherina M
Mioblati
Celule musculare scheletice

Figura 4-27 Plierea unui strat

epitelial i formarea unui tub de
natur
epitelial
(formarea
tubului neural).

Dup: Lodish, H., Baltimore, D., Berk, A., Zipursky, S.L., Matsudaira, P., Darnell, J.
Molecular Cell Biology (Third Ed.), Scientific American Books, New York,
1995, pp.: 1151.

Jonciunile de aderen celul-matrice, conecteaz celulele i

filamentele lor de actin la matricea extracelular. i acest tip de
jonciuni trebuie deosebit de structurile numite hemidesmozomi, datorit
structurii moleculare complet diferite. Celulele din diferite esuturi, au pe
membran regiuni nalt specializate, numite contacte focale sau plci de
adeziune. Prin aceste regiuni, n care se termin reele de filamente de
actin, celulele ader la moleculele din matricea extracelular. La nivelul
plcilor de adeziune, relaia dintre filamentele de actin din citoplasm i
moleculele matricei extracelulare, este mediat de o glicoprotein
transmembranar cu funcie de receptor pentru fibronectin
(fibronectina este o glicoprotein major a matricei). Poriunea
extracelular a receptorilor pentru fibronectin se ataeaz la moleculele
de fibronectin din matricea extracelular, iar poriunea orientat spre
interiorul celulei, se ataeaz la o molecul numit talina care, la rndul
ei se leag la vinculin; vinculina se leag n continuare la alte dou
proteine care, n sfrit, fac contactul cu actina (Figura 4-28).
Receptorii pentru fibronectin fac parte dintr-o categorie de
glicoproteine transmembranare, numite integrine, toate avnd rolul de a Figura 4-28 Structura molecu-lar
conecta filamentele de actin la matricea extracelular
a unei plci de adeziune.

126

Structura desmozomilor
Desmozomii sunt puncte de contact intercelular sub form de
butoni, care leag strns celulele din diferite esuturi, n special epitelii.
Spre deosebire de jonciunile de aderen, care se conecteaz cu
filamentele de actin, desmozomii reprezint situsuri de ancorare ale
filamentelor intermediare care constituie o alt component a
citoscheletului celular. Astfel, filamentele intermediare ale celulelor
adiacente se interconecteaz indirect, prin intermediul acestor jonciuni,
formnd o reea continu n ntregul esut.
n funcie de tipul celulei, filamentele intermediare care se
ataeaz la desmozomi, pot fi: filamente de keratin n celulele epiteliale,
filamente de desmin n celulele musculare, filamente de vimentin n
celulele care intr n constituia meningelui.
n structura unui desmozom (Figura 4-29), intr dou categorii de
complexe moleculare:
-placa citoplasmatic, format dintr-un complex de proteine
intracelulare de ataare, care sunt responsabile pentru ataarea la
citoschelet;
-glicoproteine transmembranare de legare, care se conecteaz
la placa citoplasmatic i, prin poriunea lor extracelular, se asociaz cu
glicoproteinele transmembranare de la celula adiacent, legnd astfel
membranele laolalt.

Figura 4-29 Reprezentare schematic a structurii unui desmozom.

127

Hemidesmozomii
Hemidesmozomii sunt "jumti de desmozomi", asemntori
morfologic cu desmozomii, dar se disting de acetia, att funcional ct
i biochimic. n loc de a lega membranele celulelor adiacente,
hemidesmozomii conecteaz suprafaa bazal a celulelor epiteliale la
lamina bazal, o structur special a matricei extracelulare, dispus la
interfaa dintre epitelii i esutul conjunctiv. Filamentele de keratin, care
intr n mod obiuit n contact cu desmozomii, se pot ataa i la placa
citoplasmatic a hemidesmozomilor ntr-o manier asemntoare (Figura
4-30). Astfel, desmozomii i hemidesmozomii acioneaz c nite butoni
care distribuie forele de tensiune ce se exercit asupra epiteliului i
asupra esutului conjunctiv situat sub acesta.
Importana desmozomilor n legarea celulelor este demonstrat de unele forme, chiar letale, ale unei boli de piele, numit
pemphigus. Indivizii bolnavi produc anticorpi mpotriva unor glicoproteine transmembranare proprii. Autoanticorpii
produi se leag la domeniul extracelular al glicoproteinelor transmembranare, ceea ce determin ruperea desmozomilor
aflai ntre celulele epiteliale. Aceasta duce la pierderea masiv de lichide prin aceste epitelii afectate. De notat c
anticorpii dezintegreaz doar desmozomii din piele, ceea ce sugereaz c desmozomii din alte esuturi pot avea o
compoziie biochimic diferit.

Jonciunile comunicante
Aproape toate celulele animale care se afl n contact una cu
cealalt, au pe membrana lor regiuni joncionale specializate care se
caracterizeaz prin apropierea membranelor, ntre ele rmnnd totui un
spaiu de 15 nm. Aceste regiuni de pe suprafaa celular au fost numite

Figura 4-30 Distribuia desmozomilor i hemidesmozomilor n

celulele epiteliale ale mucoasei
intestinale.

128

jonciuni gap ( "gap" - gol, spaiu mic). La nivelul acestor zone se afl
aglomerate o serie de proteine caracteristice. Jonciunile gap mediaz
comunicarea dintre celule deoarece las s treac prin ele, direct din
citoplasma unei celule la celula vecin, ionii anorganici i alte molecule
hidrosolubile mici. Astfel se realizeaz cuplarea electric i metabolic a
celulelor vecine. Aceast modalitate de cuplare, are implicaii
funcionale deosebite, care au nceput s fie nelese doar n ultimul timp.
Comunicarea intercelular prin jonciunile comunicante a fost
pentru prima dat demonstrat prin metode fiziologice n 1958, dar au
trebuit sa treac nc 10 ani pentru a se demonstra c aceast cuplare
fiziologic este determinat de jonciunile gap. Cu toate c morfologii leau numit jonciuni gap, nu gap-ul (spaiul dintre membrane) este
principala lor caracteristic. O serie de particule cilindrice, numite
ulterior conexoni, fac ca aceste jonciuni s fie cu totul deosebite.
Conexonii dintr-o membran vin n contact cu conexonii din membrana
celulei adiacente, ceea ce determin realizarea unor canale extrem de fine
prin care se conecteaz citoplasma celulelor vecine. Jonciunile gap nu
sunt jonciuni de ocluzie; ele nu pot forma bariere n faa pasajului
fluidelor extracelulare prin spaiile intercelulare.
Diametrul canalelor intercelulare poate fi determinat prin
injectarea ntr-o celul a unui colorant fluorescent legat covalent la
molecule de diferite mrimi. Prin folosirea microscopului fluorescent se
poate urmri care molecule pot trece de la o celula la alta. Jonciunile gap
de la celulele de mamifere permit pasajul moleculelor cu diametrul
maxim de 2 nm. n general, moleculele cu o mas molecular mai mic
de 1200 D trec liber, pe cnd cele cu GM de peste 2000 D, nu pot trece
(Figura 4-31). Astfel, ionii i unele molecule mici, ca aminoacizii i
nucleozid fosfaii, pot trece de la o celul la alta.

Conexonii jonciunilor comunicante

Jonciunile gap sunt formate din proteine transmembranare care
formeaz structuri numite conexoni. Cnd conexonii din membrana
plasmatic a dou celule se suprapun, ei formeaz un canal care
conecteaz direct citoplasmele celor dou celule (Figura 4-32). Fiecare
jonciune gap conine la nivelul su cteva sute de conexoni.
Un conexon este format din 6 molecule proteice identice, numite
conexine, care alctuiesc un hexamer. Centrul structurii hexagonale
formeaz un canal care se contin cu canalul conexonului din membrana
celulei vecine.
Un aspect important al fiziologiei jonciunilor gap este acela c,
n prezena unei concentraii mai mari de ioni de Ca 2+, canalele
conexonilor se nchid (Figura 4-33). Concentraia ionilor de Ca 2+ din
lichidele extracelulare este mult mult mai mare (10 -3M) dect
concentraia din citoplasm (10-6M). Astfel, dac membrana unei celule

129

Figura 4-31 Greutatea molecular (GM) a moleculelor care pot

trece prin canalele jonciunilor
comunicante.

Figura 4-32 Modelul unei jonciuni comunicante (gap).

dintr-un epiteliu se rupe, Ca2+ intr masiv n aceasta, determinnd

creterea brusc a concentraiei din citoplasma celulei lezate. Aceasta
determin nchiderea conexonilor care asigur comunicarea cu celulele
vecine, mpiedicnd astfel propagarea leziunii n epiteliu. Scderea
permeabilitii jonciunilor gap este determinat i de scderea pH-ului
din citosol. Prin aceste mecanisme, celulele i pot modula gradul de
cuplare cu celulele vecine; mecanismul intim prin care se realizeaz
aceasta este nc n studiu.
Un compus important, transferat prin jonciunile comunicante, de la o celul la alta, este AMP ciclic (AMPc). Acesta
acioneaz ca un mesager intracelular, intervenind n reglarea unui mare numr de activiti metabolice celulare. Cantitatea
de AMPc crete n citoplasm dac celulele sunt tratate cu o serie de hormoni. De exemplu, hormonul secretin, are
receptori la nivelul membranei de la polul bazal al celulelor din acinul pancreatic. Legarea acestui hormon la receptorii si,
duce la creterea intracelular a concentraiei de Ca 2+ i a AMPc, substane care declaneaz secreia enzimelor pancreatice
i eliberarea lor la polul apical al celulelor acinare. Att calciul, ct i AMPc pot difuza prin jonciunile comunicante, astfel
c stimularea unei singure celule poate declana secreia celulelor din ntregul acin.

Semnificaia fiziologic a jonciunilor comunicante

n unele esuturi, cuplarea celulelor prin jonciunile gap, este
esenial. Muchiul cardiac este format din celule musculare
interconectate prin acest tip de jonciuni. Ca i n celelalte tipuri de celule
musculare, contracia celulei musculare cardiace este declanat de
creterea concentraiei Ca2+ din citosol. Difuzia ionilor de calciu prin
jonciunile comunicante coordoneaz contracia tuturor celulelor
miocardice; anomalii ale permeabilitii acestor jonciuni pot afecta
sincronizarea contraciei, cauznd fibrilaii.
Jonciunile gap particip i la cuplarea electric i contracia
muchilor netezi responsabili pentru micrile peristaltice ale intestinului.

130

Figura 4-33 Mecanismul ipotetic

al
deschiderii
i
nchiderii
conexonilor sub influena ionilor
de calciu.

Este nc neclar mecanismul molecular prin care este reglat

cuplarea metabolic sau electric a celulelor prin intermediul
conexonilor. Datele recente demonstreaz importana deosebit a
jonciunilor comunicante n embriogenez. La embrionul de la vertebrate
(nc din stadiul de opt celule la embrionul de oarece), celulele sunt
cuplate electric una cu alta. n momentul n care un grup specific de
celule i ncepe diferenierea spre o anume direcie, ele se decupleaz de
esutul din jur. De exemplu, cnd tubul neural se nchide, celulele sale se
decupleaz de celulele vecine din ectoderm. Cu alte cuvinte, toate
celulele dintr-un grup rmn cuplate una cu cealalt i tind s devin
astfel un ansamblu celular cooperativ, toate urmnd aceeai cale de
dezvoltare, ntr-o manier coordonat.
Importana comunicrii intercelulare n timpul dezvoltrii embrionare, prin intermediul jonciunilor gap, a fost demonstrat
prin injectarea de anticorpi preparai mpotriva conexinei, ntr-o singur celul a unui embrion de amfibieni, format din 8
celule. Anticorpii injectai ntrerup selectiv cuplarea electric dintre celulele fiice care rezult din diviziunea celulei
injectate (determinat dup dou cicluri celulare, n stadiul de 32 de celule al embrionului). Mai mult, se produc dereglri
grave ale dezvoltrii i diferenierii organelor la embrion. Nu este nc clar mecanismul prin care, inhibarea cuplrii
celulare n stadiile timpurii, poate provoca defecte ale dezvoltrii mai trzii a embrionului, experimentele de acest tip ns,
deschid o cale nou n studiul rolului jonciunilor comunicante n dezvoltarea embrionar.

131