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Son bacilos gram negativo, rectos o ligeramente curvados, por lo general mviles,
dispuestos en pareja.
Son aerobios estrictos (el oxgeno es el aceptor final de electrones), sin embargo
pueden crecer en forma anaerobia utilizando nitratos o arginina como aceptor de
electrones.
No presentan esporas.
Algunas cepas aparecen mucoides debido a la abundancia de una capsula de
polisacridos.
Algunas cepas producen pigmentos difundibles que explica el aspecto
caracterstico del cultivo.
Pseudomonas aeruginosa.
Suele producir el pigmento azulado no fluorescente piocianina, que se difunde hacia el agar.
Otras especies de Pseudomonas no producen piocianina. Muchas cepas de P. aeruginosa tambin
producen el pigmento fluorescente pioverdina, que le confiere un color verdoso al agar. Algunas
cepas producen el pigmento rojo oscuro piorrubina o el pigmento negro piomelanina. P.
aeruginosa se multiplica bien a una temperatura de 37 a 42C; su crecimiento a 42C ayuda a
distinguirla de otras especies de pseudomonas en el grupo fluorescente. Es oxidasa positiva.
La identificacin suele basarse en la morfologa de la colonia, la positividad para oxidasa, la
presencia de pigmentos caractersticos y su multiplicacin a una temperatura de 42C. Para la
diferenciacin de P. aeruginosa de otras pseudomonas basndose en la actividad bioqumica son
necesarios anlisis con un gran grupo de sustratos.
Estructura Antignica.
Se distinguen tres tipos de antgenos en P. aeruginosa: somtico (O). flagelar (H) y mucoide (M).
El antgeno O, lipopolisacarido y termoestable, es responsable de la especificidad de grupo y
esta constituido por varios componentes antignicos, mayores y menores. Los diversos autores
que han trabajado en los serotipos de la bacteria han propuesto diferentes nomenclaturas, pero
debe aceptarse la de la Asociacin Internacional de Sociedades de Microbiologa, que los
enumera del 1 al 17.Se demuestran por reacciones de aglutinacin, inmunofluorescencia y
precipitacin.
El antgeno H, termolbil, se considera que no est solo restringido al flagelo y seria tambin
antgeno de superficie. Dos bacterias con el mismo serotipo pueden diferenciarse por el antgeno
H, el cual a su vez puede ser de dos tipos, que se subdividen en ocho determinantes principales.
El antigeno mucoide M seria responsable de la inaglutinabilidad de algunas cepas a los antgenos
O y H, hecho similar al que sucede en algunas enterobacterias; se trata de acido poliurnico
secretado por ciertas cepas.
Accin Patgena.
El mecanismo por el que P. aeruginosa desarrolla los diversos cuadros clnicos depende de dos
factores: las sustancias que elabora la bacteria y la baja de defensas del husped.
Las sustancias que produce P. aeruginosa son de dos tipos: unas son vertidas al medio en que se
desarrolla y otras quedan total o parcialmente unidas a la celula.
Sustancias que se vierten al exterior
Son de cinco tipos diferentes:
1. Sustancias dializables, como los pigmentos. La piocianina, es soluble en agua y cloroformo y
qumicamente deriva de la a-oxifenazona, que posee accin bactericida; para algunos, esto
explicara la eliminacin de otras bacterias en los productos patolgicos y que quede solo el
bacilo piocianico. Otros pigmentos son la fluoresceina de color amarillo verdoso y soluble en
agua, pero no en cloroformo, la piorrubrina, el pigmento eritrogenico y el llamado
pigmento melanico de color marron, si bien su estructura no tiene similitud alguna con la
melanina.
2. Enzimas cuya accin patgena es discutida: proteasas (tres bien diferenciadas), elastasas,
colagenasas, fibrinolisina, fosfolipasa C, lecitanasa, creatinasa, catalasa, argininhidrolasa,
nitratorreductasa, ureasa (algunas cepas) y dos hemolisinas.
3. Exotoxinas, de las que se han descrito tres principales. Una enterotoxina responsable de
cuadros diarreicos experimentales y humanos, del tipo de enterocolitis pseudomembranosa. La
toxina eritrodermica.. La ms importante es la toxina A, encontrada en el 77 % de las cepas
patgenas y en el 11 % de las ambientales. Es un polipeptido de 71.500 daltons de peso
molecular, que solo se activa al ser escindido por una proteasa en dos fracciones: El fragmento
a es el componente activo y acta por una doble va, disminuyendo el consumo de oxigeno en
las mitocondrias e inactivando una transferasa, el factor de elongacin (EF-2) en el proceso de la
sintesis proteica; este mecanismo la hace semejante a la toxina difterica, si bien pierde sus
propiedades inmunolgicas al tratarla por formol a 40C. El fragmento b seria el responsable de
la unin y transporte de la toxina A en la superficie de la clula husped. La toxina induce la
formacin de anticuerpos especficos, si bien no son protectores.
4. Las bacteriocinas (piocinas) producidas por todas las cepas. Se distinguen dos tipos, unas que
son estructuras fgicas defectivas y otras no corpusculares, proteicas, de accin anloga a los
antibiticos polipeptdicos.
5. Las cepas mucosas secretan un polmero acetilado de los cidos d-manurnico y l-glucurnico,
con poder antifagocitario y que explica la capacidad protectora del slime.
Sustancias que se liberan par lisis
La endotoxina o complejo LPS-protena. La protena de este complejo es dbilmente txica y
capaz de estimular la inmunidad inespecfica y la produccin de interfern. La fraccin
polisacrida esta constituida, como en las enterobacterias, por el lpido A, el core y la cadena
lateral poliosdica, responsable de la especificidad antignica; los tres elementos constituyen un
monmero, el cual enlaza con otros por el lpido A. El complejo es antignico y produce
anticuerpos con capacidad protectora, del tipo de las opsoninas. Puede aceptarse que existen
dos tipos de cepas de P. aeruginosa, segun su poder patgeno: las cepas con virulencia exaltada
se denominan cepas V, mientras que cepas con virulencia menor se denominan cepas v.
Otros factores
La accin patgena esta influida no solo por las sustancias que elabora P. aeruginosa y los
factores inmunitarios del husped. Sino por las propiedades que aquella puede adquirir mediante
plsmidos que codifican factores tan importantes como la resistencia a los antibiticos
(betalactamicos y aminoglucosidos) y a los agentes fsicos y qumicos (borato. mercuriales.
hexaclorofeno. telurito y radiaciones ultravioletas). La produccin de bacteriocinas y lisis por
bacterifagos, etc.
Cuadros clnicos
Cualquier organo O tejido es susceptible de ser afectado por esta bacteria.
Los casos mas frecuentes son odos, aparato respiratorio, aparato circulatorio, ojos, sistema
urinario, sistema nervioso, sistema osteoarticular, piel.
Se describen casos fibrosis qustica infantil, y de sepsis en cualquier foco de infeccin por P.
aeruginosa.(Pumarola). Esto suele ocurrir en los pacientes con leucemia o linfoma que han
recibido antineoplsicos o radioterapia y en los pacientes con quemaduras graves.
Es muy poco frecuente que la Pseudomonas aeruginosa produzca trastornos en personas sanas.
P. aeruginosa es patgena slo cuando se introduce en zonas desprovistas de defensas
normales, por ejemplo, cuando hay solucin de la continuidad de mucosas y de la piel por lesin
directa del tejido; cuando se utilizan catteres intravenosos o sondas urinarias; o cuando hay
neutropenia. La bacteria se adhiere a las mucosas o la piel y las coloniza, produce invasin local
y enfermedad sistmica.
Sin embargo, el espectro clnico de las infecciones es muy cambiante y est influenciado por
factores dependientes del husped, el agente y el medio ambiente, por ello es importante revisar
peridicamente las caractersticas clnicas y microbiolgicas de las infecciones como parte de un
sistema de vigilancia epidemiolgica y control de las mismas.
Diagnostico.
A partir de cualquier producto patolgico, a ser posible, purulento: frotis, exudado, esputos,
orina, sangre, LCR, etc. La comprobacin de un pus azul verdoso har sospechar la infeccin por
Pseudomonas, pero la ausencia de este color no descarta su posible aislamiento.
Examen directo
En los exudados purulentos, sedimento de orina, LCR, etc., se puede realizar una tincin de
Gram y con anticuerpos fluorescentes. En la primera se observan unos bacilos delgados, algo
incurvados, gramnegativos, no esporulados ni capsulados, y resulta difcilmente demostrable por
tinciones especiales la presencia de nico flagelo polar; aparecen aislados o en parejas y
cadenas cortas. Es importante comprobar la presencia de piocitos abundantes, con o sin
bacterias en su interior. La observacin, previa tincin con anticuerpos fluorescentes, es una
tcnica rpida, pero que requiere siempre comprobacin por cultivo e identificacin.
Por ultimo, recordemos que la simple observacin de heridas, quemaduras, etc. a la lmpara de
luz ultravioleta permite demostrar directamente una fluorescencia tpica y nica de las
infecciones por Pseudomonas.
Puede cultivarse en los medios ms sencillos, pues sus requerimientos son mnimos y de ah que
crezca fcilmente en cualquier medio. Se suelen utilizar medios comunes (agar comn, agarsangre) y los medios de aislamiento de enterobacterias, pues con ellas tiene en comn los
diversos cuadros clnicos y, por ello, la misma marcha general de aislamiento.
Tratamiento.
Estas infecciones son difciles de tratar debido a que las cepas responsables pueden ser
resistentes a mltiples antibiticos, incluyendo cefalosporinas de tercera generacin. Puede
ocurrir resistencia antibitica durante o despus del tratamiento de las infecciones por P.
aeruginosa
Se necesita generalmente una combinacin de antibiticos activos para el xito en el tratam
iento de los pacientes con infecciones graves.
Se ha tenido xito con vacunas polivalentes (7 serotipos), en la prevencin de la infeccin en
quemados, sobre todo, si a la vez se administra suero hiperinmune de personas sanas
vacunadas con el mismo preparado. Sin embargo, la respuesta de anticuerpos protectores
aglutinantes, en enfermos de leucemia y fibrosis qustica inmunizados, no ha sido tan eficaz; en
otras neoplasias, los resultados son muy contradictorios.
Las prcticas eficaces para el control de la infeccin en hospitales se deben centrar en prevenir
la contaminacin de los equipos estriles, como los de terapia respiratoria o las mquinas de
dilisis, y la contaminacin cruzada de los pacientes por el personal sanitario. Tambin se debe
evitar el uso inadecuado de los antibiticos de amplio espectro, debido a que este uso puede
suprimir la flora microbiana normal y permitir el crecimiento excesivo de Pseudomonas.
Burkholderia
Este genero fue creado en 1992 a partir de el genero Pseudomonas, en funcin de los
datos de ARNr, es decir,
siete especies que se clasificaban previamente como
Pseudomonas fueron reclasificadas como miembros del nuevo gnero Burkholderia,
compuesto por: bacilos rectos; Gram negativos; Patogenos oportunistas, localizados en
una amplia variedad de superficies hmedas. Oxidasa y catalasa positivos; Son bacterias
mviles con un flagelo polar nico o bien con un penacho de flagelos polares segn las
especies. Tambin son mesfilos y no esporulados. Su metabolismo es aerobio. Como
sustancia de reserva utilizan el polihidroxibutirato.
Las bacterias de este gnero pueden ser patgenas para el hombre, plantas animales.
Especie tipo: B. Cepacia.
Posteriormente se apreci que la especie ms frecuente, B. cepacia, era en realidad un
complejo de nueve especies. Dado que la mayor parte de los laboratorios no consiguen
identificar las distintas especies, este conjunto se suele denominar complejo B. cepacia.
El complejo B. cepacia, Burkholderia gladioli y Burkholderia pseudomallei son
importantes patgenos humanos dentro de este gnero.
Complejo B. cepacia: oxidasa positivo, lisina descarboxilasa positivo, oxidador de
glucosa. B. cepacia tiene un gran genoma, que contiene el doble de la cantidad de
material gentico como E. coli.
B. cepacia
B. multivorans
B. cenocepacia
B. vietnamiensis
B. stabilis
B. ambifaria
B. dolosa
B. anthina
B. pyrrocinia
Los organismos CBC se que pueden multiplicarse comnmente en agua, suelo, plantas,
animales y materiales vegetales en descomposicin. Y pueden sobrevivir prolongados
periodos en ambientes hmedos. Causante frecuentemente de neumona en pacientes
con
enfermedades
debilitantes
pulmonares
como
la fibrosis
qustica o inmunocomprometidos como la enfermedad granulomatosa crnica (una
inmunodeficiencia primaria en la cual los leucocitos tienen una actividad microbicida
intracelular defectuosa).
La colonizacin del aparato respiratorio de los pacientes con fibrosis qustica por el
complejo B. cepacia tiene un pronstico tan malo que se considera una contraindicacin
para el trasplante pulmonar.
Este complejo tambin es responsable de las infecciones urinarias en pacientes
sondados, de septicemia (especialmente en pacientes con vas intravasculares
contaminadas) y otras infecciones oportunistas. Salvo las infecciones pulmonares, el
complejo B. cepacia muestra un nivel de virulencia relativamente bajo y estos
microorganismos no suelen culminar en la muerte del paciente.
La dispersin persona a persona est documentada; as, muchos hospitales, clnicas,
campos para pacientes con fibrosis qustica deben aislarse estrictamente, de infectarse
con CBC. Los individuos infectados deben tratarse en reas separadas de aquellos
pacientes no infectados para limitar la dispersin, por la extrema gravedad que pueden
ocasionar las infecciones a CBC, con rpida declinacin en pulmn y concluir en muerte.
Medios de Cultivo
B. cepacia se multiplica en casi todos los medios que se utilizan para el cultivo de
muestras para bacterias gramnegativas, a partir de muestras clnicas, tales como esputo
o sangre. Tambin se pueden utilizar los medios selectivos que contienen colistina. B.
cepacia se multiplica con ms lentitud que los bacilos gramnegativos intestinales y
pueden transcurrir tres das antes de que sean visibles las colonias.
Tratamiento
Los
organismos
bacteriales
CBC
son
naturalmente
resistentes
a
muchos antibiticos comunes, como los aminoglicsidos (gentamicina y tobramicina)
y polimixina B. Las bacterias son tan resistentes que se las ha encontrado en betadina
(un antisptico tpico comn hospitalario).
Burkholderia es una especie susceptible a trimetoprimsulfametoxazol, algo que les
diferencia de P. aeruginosa. Aunque los microorganismos parecen susceptibles in vitro a
piperacilina, cefalosporinas de amplio espectro y ciprofloxacino, la respuesta clnica es
mala en general.
El tratamiento suele incluir mltiples antibiticos y puede incluir ceftazidima, doxiciclina,
piperacilina, meropenem, cloranfenicol y trimetoprim/sulfametoxazol. Aunque el
cotrimoxazol ha sido generalmente considerado el frmaco de eleccin para las
infecciones por B. cepacia se considera que el resto de los antibioticos mencionados son
opciones alternativas viables en los casos en que el cotrimoxazol no puede ser
administrada a causa de reacciones de hipersensibilidad, intolerancia o resistencia.
Su resistencia se debe la produccin de enzimas con capacidad para inactivar las
sustancias que se utilizan en el tratamiento.
En abril de 2007, investigadores de la Escuela Schulich de Medicina y Odontologa de la
Universidad de Western Ontario, en colaboracin con un grupo de Edimburgo,
anunciaron que haban descubierto un mtodo potencial para destruir el organismo, que
implica la interrupcin en la biosntesis de la membrana de la clula esencial azcar.
Burkolderia gladioli.
Era conocido antes como Pseudomonas marginata. Crece sobre la pulpa de coco,
produce la toxina respiratoria bongkrek el cido que puede causar el envenenamiento
fatal en la gente.
Burkholderia gladioli en los seres humanos es un patgeno oportunista que es un agente
importante para el hospital asociado infecciones. Se ha aparecido recientemente como
un patgeno grave en pacientes con fibrosis qustica, causando infecciones pulmonares
graves. A pesar de que sigue siendo un patgeno bastante infrecuente, su presencia se
asocia con un mal pronstico. Tambin ha colonizado las vas respiratorias de pacientes
con enfermedad granulomatosa. En pacientes con trasplante de pulmn, la infeccin
puede ser fatal pues desarrollan bacteriemia y como resultado infecciones en heridas
esteriles.
B. gladioli son mviles, bacilos Gram negativos que pueden ser recta o ligeramente
curvada, no formadores de esporas, aerbicos. Catalasa positiva, ureasa positiva. B.
gladioli se puede distinguir de las otras especies de Burkholderia porque es oxidasa
negativo; es indol negativo, nitrato negativo y lisina descarboxilasa negativa.
Crecen en agar MacConkey , pero no fermentan la lactosa.
Se encuentra en el suelo, el agua, la rizosfera, y en muchos animales.
B. pseudomallei
B. pseudomallei es un bacilo pequeo, mvil, oxidasa positivo, aerobio y gramnegativo.
Se multiplica en medios bacteriolgicos usuales, formando colonias que varan desde
mucoides y lisas hasta irregulares y de color crema a naranja. Se multiplica a una
temperatura de 42C y oxida glucosa, lactosa y otros carbohidratos.
B. pseudomallei es un saprofito presente en la tierra, agua y la vegetacin. Es endmico
en el sudeste asitico, India, frica y Australia. Las infecciones se adquieren mediante
inhalacin o, con menos frecuencia, inoculacin percutnea. Este microorganismo est
presente sobre todo en regiones tropicales, tpicamente en el suelo o en aguas turbias
acumuladas en superficie, desde donde puede alcanzar las fuentes de agua bruta y
tambin los sistemas de abastecimiento de agua de consumo. No se conoce la
concentracin de microorganismos en el agua de consumo que supondra un riesgo
significativo de contagio.