Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Toxicologie
Claude Viau, Robert Tardif
Chapitre 5
Toxicologie
Claude Viau, Robert Tardif
1.
Historique de la toxicologie
2.
Dfinitions
3.
Principes de base
3.1 Intoxication aigu et intoxication chronique
3.2 Toxicit locale et toxicit systmique
3.3 Relation dose-effet et relation dose-rponse
3.4 Toxicocintique
3.5 Toxicodynamie
4.
4.1
4.2
4.3
4.4
4.5
5.
Bio-indicateurs
Surveillance biologique de l'exposition
Dpistage prcoce des effets toxiques
valuation de la susceptibilit
120
1. HISTORIQUE DE LA
TOXICOLOGIE
(Lauwerys, 1999; Gallo et Doull, 1991)
On s'accorde gnralement pour donner au mot
toxicologie une origine grecque, toxicon, dsignant un arc et surtout les flches empoisonnes
dont certaines peuplades faisaient usage pour tuer
efficacement leurs ennemis. D'autres croient que
le nom proviendrait de taxus, l'arbre qui servait
la fois la confection des flches et dont on
extrayait des baies toxiques un poison servant
enduire le bout de ces flches. D'une certaine
faon, on peut dire qu'il s'agissait donc, l'origine, de l'art de confectionner des poisons.
Progressivement, certains dvelopprent galement l'art de se prmunir contre les effets toxiques de ces poisons. On raconte ainsi que le roi
Mithridate consommait rgulirement des dcoctions contenant plusieurs dizaines de poisons afin
de se protger d'un attentat de ses ennemis. Il
aurait si bien russi que, fait prisonnier, il choua
dans sa tentative de se suicider l'aide de poisons.
Le mot mithridatisation dsigne aujourd'hui
l'accoutumance ou l'immunit acquise l'gard
des poisons par exposition des doses croissantes
de ces derniers. On connat aussi le pre de la toxicologie, Paracelse, et sa phrase clbre: C'est la
dose qui dtermine si une chose est un poison.
Un autre aspect du dveloppement de la toxicologie mrite un dtour. Le clbre physiologiste
Claude Bernard avait en effet observ que, en
plus de leur utilisation pour dtruire la vie ou
pour gurir, les poisons constituent un outil prcieux dans les mains des physiologistes. En permettant l'tude des phnomnes causant la mort,
ceux-ci permettaient en mme temps de comprendre les mcanismes physiologiques de la vie.
Ce bref voyage dans l'Histoire nous a donc
mens de l'art la science de la toxicologie.
Aujourd'hui, ces deux facettes, la science et l'art,
sont encore prsentes dans la dfinition de la
toxicologie. La science de la toxicologie est trs
largement empirique et s'appuie sur des observations factuelles. Elle tudie la toxicocintique,
la toxicodynamie et les mcanismes d'action.
L'art de la toxicologie, dont en particulier le
domaine de l'valuation du risque, nous amne
prdire la toxicit des substances dans des circonstances donnes. Le toxicologue doit souvent recourir l'une et l'autre de ces facettes,
mais viter de considrer comme des faits ce qui
TOXICOLOGIE
121
3. PRINCIPES DE BASE
122
TOXICOLOGIE
g/kg
Pour les composs absorbs par voie respiratoire, on peut dterminer de la mme faon la
concentration ltale 50 ou CL50. Selon le
contexte, il peut parfois tre utile de dfinir une
D L 5 , une D L 7 5 , une CL90 et ainsi de suite.
Supposons maintenant que les courbes A et
B de la figure 2 dsignent les relations obtenues
pour deux substances diffrentes, en examinant
cette fois le mme effet. On dira alors que l'efficacit de A est plus grande que celle de B, car
elle entrane une raction plus grande pour une
mme dose. Si on lve suffisamment les doses
de l'une et de l'autre, les deux peuvent cependant causer une rponse de tous les individus ou
organismes concerns.
3.4 Toxicocintique
(Rozman et Klaassen, 1996; Bend et Sinal,
1998; Brodeur et Tardif, 1998a, b, c)
L'intensit des effets toxiques exercs par des
xnobiotiques est lie la concentration de
l'espce toxique dans le tissu ou l'organe cible.
Dans bien des cas, la dure au cours de laquelle
ces effets se manifestent dpend de la priode
pendant laquelle l'espce toxique est en contact
avec ce tissu ou cet organe.
Par ailleurs, de nombreux exemples montrent
que l'administration d'une dose identique de
deux substances ayant le mme potentiel toxique ne se traduit pas ncessairement par des
concentrations quivalentes de chacune d'elles
au point d'action. Or, ce phnomne est souvent d au mtabolisme respectif des deux substances qui peut tre diffrent.
C'est le mtabolisme qui dtermine le
devenir d'une substance dans l'organisme, parce
qu'il est le rsultat des processus d'absorption,
de distribution et d'limination (biotransforma-
123
tion et excrtion) qui gouvernent son cheminement dans les divers compartiments du corps
humain. Par consquent, le mtabolisme joue
un rle cl dans la dtermination de la concentration et de la toxicit des espces toxiques aux
endroits cibles.
La toxicocintique peut tre dfinie comme
l'tude des mouvements dynamiques des xnobiotiques durant leur passage dans le corps
humain. En d'autres mots, la toxicocintique
renseigne sur la faon avec laquelle l'organisme
agit sur une substance par l'intermdiaire des
processus d'absorption, de distribution, de biotransformation et d'excrtion.
Passage transmembranaire
Ces processus d'absorption, de distribution, de
biotransformation et d'excrtion impliquent le
passage de substances travers des membranes
biologiques. Ce passage fait appel divers mcanismes que nous dcrirons sommairement. La
diffusion passive est le mcanisme par lequel les
molcules lipophiles et neutres (non charges)
traversent la membrane cellulaire. Le transfert se
fait en fonction du gradient de concentration,
c'est--dire du milieu le plus concentr vers le
moins concentr et n'implique pas de dpense
d'nergie. Les principaux facteurs pouvant i n fluencer la diffusion passive des molcules
sont: 1) leur caractre liposoluble, 2) leur degr
d'ionisation et 3) leur taille molculaire. La diffusion facilite ressemble la diffusion passive
l'exception qu'elle implique la participation de
transporteurs de nature protique incrusts dans
la membrane cellulaire et qui font en sorte que le
taux de transfert est plus rapide que dans la diffusion simple. Vu le nombre limit de transporteurs, ce mcanisme est sujet saturation et
au phnomne de comptition entre les substances. La filtration est le mcanisme utilis par
des molcules petites, hydrosolubles et charges
lectriquement (ionises). Le transfert se fait
travers des pores ou des canaux aqueux situs
dans la membrane cellulaire; il est sous l'influence
du gradient de pression osmotique et hydrostatique. Le transport actif est un mcanisme
requrant la participation de transporteurs spcialiss (protines) et une dpense d'nergie; il
permet un transfert contre un gradient de concentration. Il est donc saturable et assujetti au
phnomne de comptition. L'endocytose
(phagocytose pour les solides, pinocytose pour les
liquides) est une forme spcialise de transport
124
TOXICOLOGIE
125
126
Raction de phase I
Trois types de raction sont possibles: oxydation, rduction et hydrolyse. Les ractions
d'oxydation, les plus importantes, font intervenir principalement un groupe d'enzymes
appeles monooxygnases fonction mixte
(incluant le cytochrome P-450 et la N A D P H cytochrome-P-450 rductase) situes dans le
rticulum endoplasmique lequel, lorsque isol
en laboratoire, est dsign sous l'appellation de
microsomes. On parle alors d'oxydations microsomiques. Il existe plusieurs formes de
cytochromes P-450 (isoformes C Y P 2 E 1 ,
CYP1A2). Chacune de ces isoformes possde
une affinit pour des substrats ou des familles de
substrats particuliers. D'autres enzymes, galement impliques dans des ractions d'oxydation, sont prsentes dans les mitochondries ou
dans le cytosol. Les principales enzymes
impliques dans les raction d'oxydation de
phase I sont, en plus des monooxygnases
fonction mixte, les monooxygnases (indpendantes du P-450) faisant intervenir la flavine, les
monoamine-oxydases, les dshydrognases des
alcools et des aldhydes, et les peroxydases. Les
ractions de rduction, moins frquentes,
prsentent moins d'intrts que les prcdentes
sur le plan toxicologique. Finalement, certains
xnobiotiques (esters, amides) subissent des
ractions d'hydrolyse qui ont pour rsultat d'introduire des groupes fonctionnels polaires
( - O H , - S H , - C O O H ) augmentant ainsi la
polarit globale des molcules. Les enzymes
(microsomiques ou cytosoliques) qui assurent
ces ractions d'hydrolyse sont de deux types: 1)
les hydrolases des poxydes lesquelles, par exemple, transforment le benzo(a)pyrne 7-8
poxyde en benzo(a)pyrne trans- 7-8-dihydrodiol, et 2) les carboxylestrases et les amidases,
qui jouent un rle plus important dans le
mtabolisme de certains mdicaments.
Raction de phase II
Les ractions de phase II confrent galement
un caractre hydrosoluble aux molcules et
facilitent d'autant leur excrtion, sauf pour les
ractions d'actylation et de mthylation. Les
ractions de phase II ont souvent comme substrat un produit de biotransformation de la
phase I. Cependant, certains produits peuvent
tre directement impliqus dans une raction de
phase II. Ces ractions produisent des conjugus
suite au couplage entre un xnobiotique (ou un
TOXICOLOGIE
127
3.5 Toxicodynamie
Tous les effets toxiques dcoulent de l'interaction entre un xnobiotique (produit d'origine
ou mtabolite) et un constituant de l'organisme
(membrane biologique, enzyme, A D N ) .
L'analyse toxicodynamique s'intresse spcifiquement dcrire et comprendre la relation
qui existe entre la dose d'un xnobiotique et la
rponse toxique. Elle vise galement expliquer
les mcanismes d'action impliqus dans la production des effets toxiques qui se manifestent
dans diverses cibles biologiques (rcepteur, cellule, organisme, population).
En termes simples, l'analyse toxicodynamique concerne les phnomnes l'origine de
la production des effets (toxicit) exercs par les
xnobiotiques sur l'organisme alors que
l'analyse toxicocintique que nous aborderons
plus loin (section 5.5) concerne plutt les modifications (absorption, distribution, biotransformation, excrtion) exerces par l'organisme
expos sur les xnobiotiques eux-mmes.
4. FACTEURS MODIFIANT
LA TOXICIT
4.1 Mtabolisme
Les biotransformations des xnobiotiques
jouent souvent un rle cl dans la dtermination
du type et de la gravit des effets obtenus. Trs
souvent, ces biotransformations, en liminant la
substance mre laquelle un organisme est
expos, vont contribuer annuler ou faire disparatre l'effet, dans la mesure o c'est la substance initiale qui est effectivement l'origine
de la toxicit. Comme nous l'avons vu plus tt,
la biotransformation des substances organiques
rsulte souvent dans la production de mtabolites hydrophiles susceptibles d'tre excrts
dans la bile ou l'urine. Ainsi en est-il, par exemple, de l'exposition au tolune. Ce solvant
volatil atteint le systme nerveux central et
cause, selon la dose, une panoplie d'effets allant
128
TOXICOLOGIE
129
130
4.4 Hypersusceptibilit
Nous avons prfr hypersusceptibilit pour
dcrire l'augmentation de l'effet et de la rponse
toxique observe chez certains individus d'une
population, hypersensibilit qui renvoie
habituellement des mcanismes i m m u nologiques. L'hypersusceptibilit englobe ainsi
les phnomnes d'hypersensibilit. On peut
donc distinguer deux grands types d'hypersusceptibilit dcoulant de l'exposition des agents
environnementaux. D'abord, il y a les ractions
allergiques (Lauwerys, 1999) dans lesquelles on
distingue l'hypersensibilit immdiate (type I),
l'hypersensibilit cytolytique (type I I ) , l'hypersensibilit complexes immuns (type I I I ) et
l'hypersensibilit retarde (type I V ) . Le lecteur
intress par ce sujet devrait consulter un
manuel d'immunologie. Les allergnes qui
dclenchent ces ractions sont habituellement
des substances de masse molculaire leve ou
symptomatologie polysystmique;
absence de test fonctionnel connu des systmes biologiques touchs pouvant expliquer
la symptomatologie.
TOXICOLOGIE
4.5 Interactions
Le terme d'interaction en toxicologie dsigne
l'influence d'une substance sur la toxicit d'une
autre substance (Kiaassen et Eaton, 1991 ; Beck et
coll., 1994). Il y a additivit lorsque l'effet d'une
combinaison de substances correspond prcisment la somme des effets des substances individuelles. On parlera de supra-additivit l o
une exposition rsulte en un effet suprieur la
somme des effets attendus de la part de chaque
substance prise individuellement. Enfin, le terme
d'infra-additivit indique que l'interaction rsulte
en un effet infrieur la somme des effets individuels. Dans le cas de la supra-additivit, on distingue parfois la potentialisation lorsqu'une substance accrot la toxicit d'une autre substance
sans produire elle-mme l'effet toxique considr.
Ces interactions peuvent tre de nature toxicocintique ou toxicodynamique. On observe
une interaction toxicocintique lorsque la substance A modifie la distribution ou la biotransformation de la substance B. C'est le cas par
exemple de deux substances empruntant les
mmes voies enzymatiques de biotransformation
comme dans l'exposition simultane des concentrations leves de tolune et de xylne (Tardif
et coll., 1999). Dans le cas de l'interaction toxicodynamique, deux substances entrent en comptition pour le mme site de liaison molculaire
responsable de l'effet observ comme dans les
interactions entre certains BPC et la 2,3,7,8ttrachloro-dibenzodioxine ( T C D D ) (Carrier,
1991). Il se peut aussi que l'une de ces deux substances modifie la liaison de la seconde sur le
rcepteur. Dans ce dernier exemple, une substance pourrait avoir un effet allostrique sur la
molcule rceptrice, c'est--dire en modifier la
structure tridimensionnelle, de faon faciliter
ou empcher la fixation de la seconde molcule
sur son propre site de liaison.
5. SOURCES D'INFORMATION
ET PRDICTION DE LA TOXICIT
CHEZ L'HUMAIN
131
132
reoivent plusieurs doses d'un mme xnobiotique, selon des conditions d'exposition et des
dures qui peuvent tre trs variables. Ces tudes
ont pour objectif de renseigner sur la nature des
effets toxiques rsultant de ces expositions et sur
la relation quantitative entre les niveaux d'exposition et les effets mesurs (physiologiques,
biochimiques, morphologiques). En principe,
ces valuations doivent tre conduites chez les
espces les plus sensibles et faire appel aux techniques de mesures d'effets les plus performantes.
Ces valuations permettent de rcolter une foule
de donnes, et ce, dans des circonstances d'exposition o les doses et les conditions d'expositions
sont rigoureusement contrles.
L'valuation de la toxicit repose sur l'utilisation de paramtres ou d'indicateurs de toxicit
qui peuvent tre plus ou moins spcifiques et
qui sont associs des lsions organiques affectant certains tissus et organes (peau, foie, rein,
cerveau) ou systmes particuliers (immunitaire,
reproducteur). Plusieurs facteurs sont susceptibles d'affecter la toxicit d'un xnobiotique. Mis
part la dose qui, videmment, exerce un rle
majeur, on peut citer, titre d'exemples, la
nature du produit, le vhicule utilis pour l'administration, la voie d'administration, l'espce
animale teste, la dite et galement la dure
d'exposition plus ou moins longue. Il existe trois
catgories d'essais de toxicit qui diffrent en
fonction de la dure d'exposition: les essais de
toxicit aigu, les essais de toxicit subchronique et les essais de toxicit chronique.
Essais de toxicit aigu
Ces tests visent reconnatre les effets nfastes
(physiologique, biochimique, morphologique)
survenant aprs un dlai dtermin, suivant
l'administration de doses gnralement leves
de xnobiotiques; ces tests permettent parfois de
dceler les principaux organes cibles. Les voies
d'administration peuvent tre varies (cutane,
orale, inhalation). En rgle gnrale, les effets
mesurs sont proportionnels aux doses administres. En outre, ces preuves sont en principe
conduites chez des animaux des deux sexes. Les
valeurs de D L 5 0 ou de CL50 reprsentent des
indicateurs de toxicit aigu (voir section 3.3).
Les principales manifestations toxiques tudies
par ces tests sont la ltalit, le pouvoir irritant, la
sensibilisation et, parfois, des ractions photoallergiques ou phototoxiques.
TOXICOLOGIE
133
134
TOXICOLOGIE
135
136
E N V I R O N N E M E N T ET SANT PUBLIQUE
Biodisponibilit (F)
La biodisponibilit reprsente le pourcentage
(ou la fraction F) d'une dose administre
d'une substance qui atteint la circulation systmique sous forme inchange. La biodisponibilit est pratiquement de 100 % (F = 1) aprs
administration intraveineuse. La biodisponibilit peut cependant tre plus faible (F < 1) et,
dans certains cas, ngligeable selon la voie d'entre de la substance (orale, cutane, pulmonaire). Ceci dpend de la facilit avec laquelle une substance traverse les diverses membranes
biologiques (poumons, peau, estomac, intestin)
ou encore de la capacit de certains tissus
(poumon, peau, foie, intestin) biotransformer
une substance avant qu'elle n'atteigne la circulation systmique (effet de premier passage). La
biodisponibilit peut varier considrablement
d'une substance l'autre. Par exemple, on vrifie rgulirement la biodisponibilit d'une foule
de mdicaments afin de s'assurer que la fraction
absorbe d'une forme pharmaceutique donne
demeure dans des limites qui assurent des
niveaux sanguins thrapeutiques.
Aire sous la courbe (AUC)
L'aire ou la surface sous la courbe des concentrations sanguines d'une substance reflte la
quantit de substance ayant atteint la circulation systmique. Sa valeur est directement influence par la biodisponibilit d'une substance
et par la vitesse d'limination de celle-ci. La surface sous la courbe est un bon indicateur de l'exposition interne, dans la mesure o ce paramtre
tient compte la fois de la concentration sanguine et galement du temps pendant lequel
une substance est prsente dans le compartiment sanguin.
Les paramtres toxicocintiques que nous
venons de dcrire aident mieux comprendre le
comportement d'une substance, une fois celle-ci
prsente dans le corps. Ils renseignent notamment sur l'tendue de la distribution, les quantits disponibles pouvant exercer des effets ou
les quantits ventuellement limines, la contribution de diffrents organes l'limination et
le taux d'limination. Ces informations peuvent
s'avrer utiles pour prdire l'intensit et la dure
d'une contamination de l'organisme.
Modles base physiologique
Contrairement aux modles compartimentaux
qui sont des reprsentations mathmatiques
abstraites du corps humain, les modles TCBP
permettent de dcrire le devenir des substances
en faisant intervenir des considrations lies
l'anatomie, la physiologie et certains processus biochimiques du corps humain. Ces modles sont considrs comme plus ralistes,
puisqu'ils tiennent compte des relations entre
divers dterminants de nature biologique ou
TOXICOLOGIE
Les termes K m et V m a x dcrivent respectivement l'affinit d'une substance pour les enzymes
mtaboliques et la vitesse maximale d'une raction de biotransformation.
137
Les quations dcrites plus haut sont caractristiques des modles dbit-dpendants: on
suppose alors que le passage d'une substance
travers la membrane cellulaire se fait par diffusion passive et donne lieu un quilibre instantan entre le sang et les compartiments tissulaires. Cette hypothse est valable pour un grand
nombre de substances. Cependant, la cintique
de certaines autres substances ne peut tre
dcrite convenablement l'aide de ces modles
dbit-dpendants. Ceci est souvent d au fait
que ces substances traversent difficilement les
membranes cellulaires, ce qui oblige ajuster les
quations mathmatiques pour prendre en
compte cette ralit.
Une tape essentielle dans le dveloppement
d'un modle TCBP est la validation du modle.
Celle-ci se fait en comparant les donnes
prdites par un modle avec des donnes exprimentales (relles) observes chez l'humain ou
l'animal. Une fois valids, les modles TCBP
peuvent tre utiliss diverses fins. Par exemple,
ces modles permettent
- de dcrire le profil temporel de distribution
d'une substance (ou de ses mtabolites) dans
les diffrents compartiments du corps, incluant les tissus ou organes cibles;
138
Les modles T C B P sont de plus en plus u t i l i ss, particulirement en analyse de risque, tant
donn qu'ils facilitent grandement l'estimation
de la dose interne, contribuant ainsi rduire
l'incertitude lorsque l'on doit extrapoler des
humains (doses faibles) les rsultats provenant
des tudes faites chez des animaux (doses
fortes).
6. BIO-INDICATEURS
Tel que dfini au dbut de ce chapitre, un bioindicateur est un paramtre toxicologique pouvant servir montrer ou prdire un vnement
toxique chez un individu ou chez un animal et
qui peut servir de paramtre commun de toxicit entre espces. La sensibilit et la spcificit
d'un bio-indicateur, de mme que la priode
d'exposition prise en compte par sa mesure, sont
d'importants paramtres devant en guider le
choix dans un contexte donn (Hennekens et
coll., 1998; Zhitkovich et Costa, 1998). De
faon gnrale, un bio-indicateur d'exposition
possde une plus grande spcificit qu'un bioindicateur d'effet. Un effet a toujours plus de
chances d'avoir des causes multiples, indpendantes de l'exposition un contaminant spcifique, et ces chances augmentent avec le temps
qui s'coule entre l'exposition et la mesure du
bio-indicateur. Bien que plusieurs milieux
biologiques se prtent, en principe, la dtermination de bio-indicateurs varis, l'urine et le
sang demeurent de loin les milieux les plus
frquemment utiliss, avec une place particulire aux cheveux dans le cas de l'exposition
certains mtaux comme le mthylmercure. La
figure 5.5 montre le continuum d'vnements
TOXICOLOGIE
139
140
E N V I R O N N E M E N T ET SANT PUBLIQUE
Sensibilit
(%)
Spcificit
(%)
Valeur
prdictive
positive (%)
90
90
8,3
10
90
90
50,0
90
95
15,4
10
90
95
66,7
95
90
8,8
10
95
90
51,4
TOXICOLOGIE
141
142
Bibliographie
A n o n y m e . Dictionary of Toxicology,
London,
Macmillan Reference, 1998, p. 1-504.
Ecobichon, D. J. The Basis of Toxicity Testing, 2 e dit i o n , C R C press, Boca Raton, 1997, p. 1-220.
Basketter, D. et F. Reynolds. The use of human volunteers for hazard and risk assessement of skin
irritation, dans B. Close, R. Combes, A.
H u b b a r d et J. H o l l i n g w o r t h (rdacteurs)
Volunteers in Research and Testing, 1997, p. 117127, Taylor and Francis, London.
TOXICOLOGIE
143