Facultad de Ciencias Farmacuticas, Bioqumicas y Biotecnolgicas.

UCSM
EP de Ing. Biotecnolgica
Operaciones Unitarias II

UNIVERSIDAD CATLICA
DE SANTA MARIA

FACULTAD DE CIENCIAS
FARMACUTICAS, BIOQUMICAS Y
BIOTECNOLGICAS
ESCUELA PROFESIONAL DE
INGENIERA BIOTECNOLGICA

OPERACIONES UNITARIAS II
Guadalupe Daz Valdivia
Brenda Nez Lozada
Brenda Nuez Mork
Derly David Ortiz Romero
Angiela Zea Neira

DEXTRANO

SEMESTRE VIII
Docente: Ing. Cinthia Crdova Barrios

AREQUIPA PER
2016

Facultad de Ciencias Farmacuticas, Bioqumicas y Biotecnolgicas. UCSM

EP de Ing. Biotecnolgica
Operaciones Unitarias II

1. INTRODUCCIN
Dextrano es el nombre que colectivamente se le da a un gran grupo de exopolisacridos
bacterianos. Qumicamente son -D glucanos con predominio de enlaces glucosdicos
1-6 (Figura 1). La estructura, el peso molecular y otras propiedades de los dextranos son
muy especficas de acuerdo al microorganismo utilizado para su obtencin.
Los dextranos son producidos por accin de la enzima dextransacarasa, que acta sobre
la sacarosa generando glucosa, y que se enlaza mediante radicales libres con la
consiguiente liberacin de la fructosa. Microbiolgicamente son producidos por
bacterias de los gneros Leuconostoc, Streptococcus y Lactobacillus y por algunos
hongos del gnero Penicillium.
Este tipo de material es ampliamente usado en el tratamiento clnico-teraputico de
animales y humanos y en la industria alimenticia y farmacutica. Los altos precios en
los mercados internacionales convierten a estos productos en una lnea importante de
desarrollo, sobre todo si la materia prima a utilizar es un desecho.
1.1. BIOGNESIS: El dextrano es sintetizado por ciertas bacterias acidolcticas a
partir de la sacarosa, de la que se rompe el enlace glicosdico entre glucosa y fructosa,
producindose acto seguido la polimerizacin de estas glucosas en largas cadenas de
alto peso molecular.

Puede producirse industrialmente mediante dos tcnicas biotecnolgicas:

Fermentacin: A partir de sacarosa y mediante la fermentacin de la bacteria

Leuconostoc Mesenteroides B512, se obtiene para formar largas cadenas de este
polisacrido como dextrano nativo o crudo, que luego son hidrolizadas para
obtener fragmentos ms pequeos.
Sntesis enzimtica: Se realiza el cultivo de un microorganismos que produce la
enzima de inters especfica llamada dextranasa dextrasucarasa (obtenida a

Facultad de Ciencias Farmacuticas, Bioqumicas y Biotecnolgicas. UCSM

EP de Ing. Biotecnolgica
Operaciones Unitarias II

partir de un microorganismo), cuando se obtiene la cantidad deseada de esta

enzima se adiciona la sacarosa al medio para que esta la polimerice, formando el
dextrano.

2. IMPORTANCIA Y APLICACIONES BIOTECNOLGICAS

2.1. CRIOPRESERVACIN
La criopreservacin es el proceso en el cual clulas o tejidos son congelados a muy
bajas temperaturas, de manera que disminuyen las funciones vitales de la clula u
organismo en cuestin y se puede mantener en condiciones de vida suspendida. Los
dextranos pueden ser empleados como criopreservantes en combinacin con dimetil
sulfxido (DMSO), glicerol u otras sustancias. Son usados para la criopreservacin de
preparaciones biolgicas en general. Se piensa que este criopreservante contribuye a una
formacin de cristales de agua ms controlada, lo cual implica un menor perjuicio a las
membranas celulares y orgnulos.
2.2. EXPANSOR DEL PLASMA SANGUNEO
Los de elevado peso molecular ejercen un efecto coloidosmtico necesario para
asegurar un volumen plasmtico adecuado y as garantizar la perfusin tisular. Su
funcin inicial, pues, es resustituir temporalmente la volemia. Se emplean para ayudar a
mantener la circulacin en estados hipovolmicos, en el shock, para corregir la
oligoemia en el shock del quemado y para mantener temporalmente la presin
coloidosmtica durante ciertos tipos de ciruga cardiovascular. El dextrano 40 se emplea
tambin, solo o como aditivo, para primar las bombas oxigenadoras de la circulacin
extracorprea, para prevenir las trombosis venosas y la tromboembolia. En el shock, la
dosis de dextrano 40 es de 10 mg/kg de una solucin al 10 %, infundida primero con
rapidez hasta conseguir el efecto y despus en infusin ms lenta; es conveniente
controlar la presin venosa central. En las primeras 24 horas no conviene pasar de los
20 ml/kg; si se ha de continuar ms de 24 horas, la dosis diaria total no debe exceder de
10 ml/kg, ni prolongarse ms de 5 das. El dextrano 70 en solucin al 6 % se emplea a la
dosis de 500 ml (20-40 ml/min), sin pasar de los 20 ml/kg en las primeras 24 horas.
No se trata de un sustituto de la sangre, pero se utiliza en situaciones de emergencia
cuando no hay sangre entera o productos sanguneos disponibles.
2.3. LGRIMAS ARTIFICIALES
Son comnmente utilizados como ingrediente activo en lgrimas artificiales u otras
soluciones de aplicacin oftalmolgica debido a sus propiedades lubricantes. Su
principal efecto es el alivio de la sequedad e irritacin de los ojos causado por
condiciones ambientales, prolongado uso de ordenador o lectura y efectos secundarios
de ciertos medicamentos.

Facultad de Ciencias Farmacuticas, Bioqumicas y Biotecnolgicas. UCSM

EP de Ing. Biotecnolgica
Operaciones Unitarias II

3. SUSTRATOS:
Soluciones de sacarosa del 5% al 20%
Residuos de cscaras de naranja, pia, cachaza
Residuos con contenido en sacarosa, e incluso con contenido de celulosa

4. ACTIVACIN DE LA CEPA:
MEDIOS DE CULTIVO: K2HPO4, KH2PO4, NH4Cl, MgSO4, glucosa,
extracto de levadura, acetato sdico, aminocidos, purimas y pirimidinas,
vitaminas, y Hierro, cobalto, Manganeso, Zinc, Cobre, Niquel,
Molibdeno,(neutralizan exceso de cido formado en fermentacin)
CONDICIONES: Conservacin : 20% de glicerol a -20C;

Incubacin: pH 6,7, 27C, condiciones aerobias, en

agitador orbital a 150 rpm, por 24 horas

Facultad de Ciencias Farmacuticas, Bioqumicas y Biotecnolgicas. UCSM

EP de Ing. Biotecnolgica
Operaciones Unitarias II

4. MICROORGANISMOS IMPLICADOS
ORGANISMO
Leuconostoc
Mesenteroides
Streptococcus mutans
Leuconostoc
dextranicum
Acetobacter
Leuconostoc
Streptococcus

Bacteria

TECNICA
Fermentacin

PRODUCTO
Dextrano

Bacteria
Bacteria

Fermentacin
Fermentacin

Dextrano
Dextrano

Bacteria

de Dextrasucarasa
dextranasa
de Dextrasucarasa
dextranasa
de Dextrasucarasa
dextranasa
Dextrano
de Dextrasucarasa
dextranasa
Dextrano
Dextrano
Dextrano
Dextrano
Dextrano
Dextrano
Dextrano
Dextrano

Gluconobacter

Bacteria

Lactobacteriaceae
Laminaria digitate

Bacteria
Alga unicelular

Botryosphaeria rhodina
Alcaligenes faecalis
Lasiodiplodia
theobromae
Aconitum kusnezoffii
Ganoderma lucidum
Dictyophora indusiata
Paenibacillus polymyxa
Agaricus bisporus

Fungi
Bacteria
Fungi

Sntesis
enzimas
Sntesis
enzimas
Sntesis
enzimas
Fermentacin
Sntesis
enzimas
Fermentacin
Fermentacin
Fermentacin

Bacteria
Fungi
Fungi
Bacteria
Fungi

Fermentacin
Fermentacin
Fermentacin
Fermentacin
Fermentacin

Bacteria

5. UPSTREAM PROCESING

Facultad de Ciencias Farmacuticas, Bioqumicas y Biotecnolgicas. UCSM

EP de Ing. Biotecnolgica
Operaciones Unitarias II

I.

Materia prima:
-

Sistema Biolgico: Leuconostoc mesenteroides (ATCC 10830)

Produccin de enzima de inters: Dextransacarasa.
Eficiencia en produccin de Dextrano.
Sencillo de conseguir y econmico.
Seguro.
Genticamente estable.

Sustrato: residuos agroindustriales de cscara de pia y corazn de la

pia.
Azucares: Sacarosa.

II.

Banco de clulas:
- Ubicacin: Superficie de las tinas (clarificador) donde cae la melaza o
costra de sacarosa de la caa de azcar.
- Medio especfico: Mayeux.
- Identificacin: Pruebas bioqumicas.
- Purificacin: banco de clulas de trabajo.

III.

Inculo:
- Cultivo artificial: Para 1 L de agua: 20 g de triptona, 4 g de cloruro de
sodio, 1,5 g de acetato de sodio, 0,5 g de cido ascrbico, elementos
traza (Ca, Mn, Fe, Mg), 15 g de sacarosa y 8,76 g de extracto de
levadura.
- Pretratamiento: El jugo de la cscara y corazn de la pia; se le regula
a pH 5.5 posteriormente una pasteurizacin calentndolo a 61C por 3
minutos y enseguida enfrindolo hasta la T inicial, realizado por 3
veces.
- Cepa pura: Leuconostoc mesenteroides.
- Incubacin: Incubar 18 horas a 29C; pH 5.5.

IV.

Escala: Piloto
Biorreactor de 10 litros.

6. DOWNSTREAM PROCCESING.
Consta de las etapas necesarias para la separacin, concentracin, purificacin y
formulacin de dextrano por medio de una secuencia de operaciones como:
precipitacin en alcohol etlico, lavado, re-precipitacin, disolucin, secado, molinado y
envasado; cuyas condiciones y repeticiones variarn segn sustrato usado, los cuales
pueden ser jugos residuales de la agroindustria de pia, naranjas, caa de azcar,
cachaza, entre otros; y del grado de dextrano al que se quiere llegar, los cuales pueden
ser de grado industrial o de grado clnico.

Dextrano de grado indutrial: El dextrn crudo se purifica con una mezcla 1:1
de cido clorhdrico y etanol al 95% para reducir el contenido de cenizas. El

Facultad de Ciencias Farmacuticas, Bioqumicas y Biotecnolgicas. UCSM

EP de Ing. Biotecnolgica
Operaciones Unitarias II

producto contiene ms del 80% de dextranas y el resto de azcares reductores, lo

cual es adecuado para uso industrial.

Dextrano de grado clnico: Separacin por centrifugacin, concentracin por

precipitacin (Centrifugacin de Sobredanate:etanol 95% (1:1), centrifug a
5000 rpm por 30 minutos, disolucin en agua del precipitado blanco),
purificacin o segunda concentracin por re-precipitacin, formulacin del
producto mediante secado y caracterizacin del mismo (viscosidad, peso
molecular, grupos funcionales, hidrlisis cida)

7. CONCLUSIONES

El
dextrano
se
puede
obtener
biotecnolgicamente
por:
- Fermentacin, el uso de bacterias (Leuconostoc mesenteroides con mayor
importancia industrial) que utilizan como sustrato la Sacarosa.
- Sntesis enzimtica, por obtencin de la enzima Dextranasa y/o
Dextransacarasa a partir de microorganismos la cual acta sobre la sacarosa
polimerizando.
Debido a la cantidad de desechos generados por la industria alimentaria, en los
ltimos aos gracias a estudios e investigaciones, se empieza a usar estos
residuos como fuentes de obtencin para dextranos con valor comercial
favoreciendo as al medio ambiente.
L. mesenteroides se clasifica como bacteria acidolctica gram positiva, es
facultativa y se encarga de la produccin de dextrano a partir de sacarosa, esta
cepa es la ms utilizada para obtencin a nivel comercial aunque tambin puede
obtenerse dextrano a partir de especies como L. citrum, Streptococcus mutans,
Klebsiella, Lactobacillus, Klebsiella.
El inters creciente por el dextrano es parcialmente acreditado a sus
propiedades: versatilidad, hidrofilia y alta solubilidad en agua, pureza y la
capacidad para crear soluciones estables, compatibilidad con nuestro organismo,
siendo su principal caracterstica su obtencin por fuentes renovables y
degradacin por sistemas biolgicos.
Dextrano tiene aplicaciones en distintas reas como la medicina, industria
farmacutica, cosmtica, alimentaria, y aplicaciones potenciales como agentes
espesantes y emulsionantes, gomas floculantes, recubrimiento de petrleo,
material quirrgico, etc.
Se aprecia en todos los papers de biosntesis de dextrano, que se cumple las
etapas de upstream, para as realizar con xito el downstream.

Facultad de Ciencias Farmacuticas, Bioqumicas y Biotecnolgicas. UCSM

EP de Ing. Biotecnolgica
Operaciones Unitarias II

8. BIBLIOGRAFA
ECHEVERRA, E. (2006). PRODUCCIN DE DEXTRN, A NIVEL LABORATORIO,COMO DERIVADO
DE LA SACAROSA, USANDO JUGO DE CAA. Guatemala: Universidad de San Carlos de
Guatemala.
Rodrguez, O. (Junio 2007). OBTENCIN DE DEXTRANO Y FRUCTOSA, UTILIZANDO RESIDUOS
AGROINDUSTRIALES CON LA CEPA Leuconostoc mesenteroides NRRL B512-F. Revista
EIA, ISSN 1794-1237 Nmero 7, 159-172.
Sarwat, F. (2008 Oct 15). Production & Characterization of a Unique Dextran from an
Indigenous Leuconostoc mesenteroides CMG713. International journal of biological
sciences, 379386.
Vega Baudrit, J. R. (2012). Biosntesis de dextranos de alto peso molecular mediante la
inoculacin con Leuconostoc mesenteroides, var. mesenteroides (ATCC 10830) de
jugos residuales de la agroindustria de la pia: sntesis y caracterizacin de hierrodextranos. REVISTA DEL LABORATORIO TECNOLGICO DEL URUGUAY.