Sunteți pe pagina 1din 269

CRISTIAN TUDOSE

MARILENA MANIU

CLIN MANIU

GENETIC UMAN

2000

Refereni tiinifici
PROF. DR. I. GH . TUDOSE
PROF. DR. ION I. BRA

Tehnoredactare computerizat
MANIU CLIN LUCIAN
Grafica computerizat
MANIU CLIN LUCIAN
Coperta
MANIU CLIN LUCIAN

La realizarea capitolelor III i IV a colaborat


CERCETTOR T. MIHAELA IONELA TUDOSE

ISBN:973-8225-08-6

Cndva realizarea unui curs de Genetic


Uman a fost un vis al tatei...
Acum acest vis a devenit o realitate dedicat
memoriei sale.
Autorii

INTRODUCERE N
GENETICA UMAN

1.1. Genetica uman n contextul actual i importana


cercetrilor de genetic uman
Genetica este tiina care studiaz ereditatea, adic posibilitatea
fiinelor vii de a transmite la descendeni, toate caracterele i nsuirile lor,
referitoare la morfologia, anatomia, fiziologia, biochimia i comportamentul
ascendenilor i variabilitatea.
Ereditatea este procesul de realizare i transmitere a similitudinii
biologice n succesiunea generaiilor.
Variabilitatea este procesul de realizare a diferenelor genetice dintre
indivizi, precum i a diversitii genetice a populaiilor.
Genetica uman, ca ramur a geneticii generale, studiaz materialul
genetic (compoziia i structura lui), mecanismele i legile de baz care
asigur funcia genetic la om, adic realizarea caracterelor ereditare
normale i anormale n ontogenie i transmiterea lor la generaiile celulare i
individuale, precum i cauzele i mecanismele care determin variabilitatea

_____________________________________________________________
ereditar. Genetica uman permite explicarea i nelegerea modului n care
se realizeaz polimorfismul biologic n populaia uman, i n acest context,
individualitatea (unicitatea) genetic a fiecrui individ n parte.
Genetica uman studiaz omul ca rezultat al evoluiei, structura sa
normal i patologic, variabilitatea individual i a populaiei umane luat
ca ntreg. Succesele nregistrate de genetic, i de genetica uman n special,
sunt folosite n etapa actual n primul rnd n medicin, care a constatat c
singura realitate biologic este individul, c nu exist boli, ci numai bolnavi,
dup cum afirma Ambroise Parr (cf. Covic, 1981). S-a precizat c, din
punct de vedere genetic, fiecare individ este un unicat. Datorit
particularitilor ereditare i condiiilor de mediu n care triete, el se va
dezvolta ntr-un anumit fel, va reaciona caracteristic la jocul factorilor de
mediu, va da o coloratur specific bolilor sale.
Genetica a artat c o bun parte din patologia uman este de origine
ereditar i, de aceea, boala i pierde caracterul individual devenind o
problema care intereseaz generaii i, uneori, populaii ntregi.
Genetica uman urmrete nu numai destinul individual, ci i destinul
societii umane; aprnd individul, ea apr i generaiile urmtoare. Din
perspectiva geneticii umane moderne, conform afirmaiei lui Gedda (1967)
nu exist boli, ci familii de bolnavi (Maximilian, 1982).
Genetica, n general, i genetica uman, n special, ne-a apropiat de
nelegerea istoriei individului - naterea, mbtrnirea, moartea - care sunt
marile probleme ale biologiei i filozofiei. De exemplu, geneticienii au
precizat faptul c mbtrnirea se datoreaz, n esen, inactivrii genelor din
celulele somatice; dar modul n care are loc aceast inactivare nu este nc
cunoscut. Durata vieii fiecruia dintre noi ca individ, poate i ca specie, este
condiionat genetic, fiind rezultatul seleciei naturale.
tim c psihicul uman, viaa mental, raportul dintre sexe,
fecunditatea, precum i moartea sunt condiionate ereditar, cu alte cuvinte,
genetica a ptruns n toate domeniile existenei umane.
Prin munca asidu de cercetare depus n domeniul geneticii umane, sau descoperit cteva mii de maladii ereditare, s-a standardizat cariotipul
uman normal i s-au fcut mari progrese n elaborarea hrii genetice la om
(n luna iunie 2000 a fost anunat finalizarea secvenierii genomului uman,
realizndu-se astfel Proiectul Genomul Uman).
_____________________________________________________________

_____________________________________________________________

1.2. Omul - obiect de studiu al geneticii umane


Cercetrile de genetic la om prezint o serie de dificulti n
comparaie cu cele ntreprinse la plante, animale i microorganisme. Aceste
dificulti constau n:
a. La om, din motive etice i morale, nu se pot efectua experiene
de ncruciare dirijat, n vederea efecturii analizei genetice i studiului
statistic al descendenei. Cu mare regret, trebuie s amintim totui c
fascismul, prin "medicii" naziti, n lagrele de concentrare, avnd ca baz
teoria netiinific a rasismului i a darwinismului social, au nclcat aceste
norme strict umane, efectund ncruciri dirijate ntre indivizi umani n
vederea unor studii genetice. Din fericire, nu au avut la dispoziie un timp
mai ndelungat. Dup cum tim, fascismul a fost nvins la sfritul celui deal doilea rzboi mondial, i astfel de experiene au fost oprite; ele nu vor mai
fi reluate, credem noi, niciodat.
b. La om nu se poate realiza o consangvinizare strict i
ndelungat n vederea obinerii liniilor pure, homozigote, necesare n
analiza genotipului
c. La om se nasc, n mod normal, n condiiile actuale doar unul
sau civa copii n fiecare familie i aceasta abia ncepnd cu vrsta de 18
ani la brbai si de 16 ani la femei (vrsta legal a cstoriei). De asemenea,
diferena dintre generaii este destul de mare - aproximativ 30 de ani. La om
se poate obine numai F1, deoarece toi copiii unei familii, indiferent de
numrul lor, sunt de generaie F1. La om F2, FB i FT nu se pot obine,
deoarece ar presupune cstoria ntre frai pentru obinerea lui F2, sau ntre
copii i prini pentru obinerea lui FB i FT, generaii absolut necesare n
analiza genetic, i care, la plante, animale i microorganisme se obin uor
fiind folosite n mod curent pentru analiza genotipului. Totui, dac ne
raportm la un anumit caracter, prin cstorii naturale ntre indivizi
heterozigoi sau ntre heterozigoi i homozigoi dominani sau recesivi se
obin generaii F1 care corespund lui F2, FB sau FT.
d. Tot din motive etice, dar am aduga noi, i din necunoatere
datorat unui nivel sczut de cultur, la om nu pot fi nc oprii de la
reproducere indivizii care prezint diferite maladii ereditare, care n acest
mod rspndesc boala n populaia uman. Prin aceste cstorii ntre indivizi
purttori sau bolnavi de maladii ereditare, se pot obine copii bolnavi i/sau
_____________________________________________________________

_____________________________________________________________
copii sntoi, caz n care geneticianul poate judeca modul de transmitere a
maladiei ereditare date, poate localiza gena pe autosomi sau pe heterosomi,
i deci poate mbogi cunotinele de genetica uman. Cu toate acestea,
decizia acestor familii de a lsa urmai nu este de dorit att pentru familia n
cauz ct i pentru societate, deoarece n acest caz, frecvena maladiilor
ereditare crete mult n populaia uman, conducnd la o degradare genetic,
care este voit sporit. Din contr, dac indivizii tarai genetic nu ar lsa
urmai, populaia uman s-ar nsntoi ereditar n mod evident. n acest
caz, indivizii tarai i-ar duce tara pn la dispariia lor prin moarte natural
si odat cu ei ar dispare gena mutant provocatoare de maladii ereditare.
Aceasta este tocmai eugenia tiinific pozitiv, care, credem, se va instala
n mod contient n populaia uman n secolul XXI, cnd tiina i cultura
tuturor membrilor societii umane vor ajunge la un nalt grad, nct s
permit fiecrui om s decid singur i contient dac poate lsa urmai
sntoi genetic, caz n care va dori i va avea copii, sau dac nu poate lsa
urmai cu o ereditate normal, caz n care nu va mai procrea.
Cu toate aceste dificulti, n genetica uman s-au elaborat metode
specifice de studiu a fenomenului ereditar i de analiz a genotipului. Aceste
metode se bazeaz i pe unele avantaje pe care le ofer fiina uman ca
obiect de studiu: omul este cel mai aprofundat studiat organism att n ceea
ce privete caracterele normale ct i cele anormale; studiile populaionale
contrabalanseaz inconvenientele cauzate de numrul mic de membri ai unei
familii; mutaiile spontane aprute n populaia uman ajut la cercetarea
variabilitii genetice; gemenii au permis studierea mai bun a caracterelor
ereditare, iar limbajul este un mare avantaj pentru realizarea anamnezei
familiale.

1.3. Metode de cercetare n genetica uman


1.3.1. Metoda genealogic (a pedigriului)
Aceast metod se bazeaz pe cercetarea modului de transmitere la
descendeni a unor nsuiri si caractere i a unor maladii ereditare, pe
parcursul mai multor generaii, plecnd de la individul depistat, care se
numete proband i studiindu-i fraii, prinii, bunicii, strbunicii etc.(fig.
1). n felul acesta se alctuiesc arbori genealogici referitori la transmiterea
_____________________________________________________________

_____________________________________________________________
caracterului sau a maladiei date de la proband pe parcursul mai multor
generaii.
I

II

III

IV

Fig. 1. Pedigriul unei familii, la care strbunica a avut o gen recesiv a hemofiliei,
X-nlnuit - Xh, n stare heterozigot, deci purttoare, dar nemanifestat (sntoas) Xh+Xh. Numai bieii hemizigoi - X hY vor fi bolnavi. I - strbunici; II - bunici; III - prini;
IV - copii.

Pentru scrierea grafic prescurtat a arborilor genealogici (a


pedigriului) se folosesc o serie de simboluri (fig. 2).
Prin metoda pedigriului se pot studia maladii monogenice dominante,
cum ar fi: icterul hemolitic ereditar, hemeralopia, prognatismul, polidactilia,
brahidactilia, sindactilia etc., dar i maladii ereditare recesive, cum sunt:
hemofilia, daltonismul, albinismul, ihtioza (piele ngroat cu aspect de solzi
de pete), fenilcetonuria, etc. Astfel au fost studiate, prin metoda
pedigriului, familii care au intrat n analele geneticii; iat cteva exemple:
Hemeralopia, o maladie ereditar dominant, care se transmite
dominant i care const ntr-o diminuare a capacitii vizuale, n special n
timpul nopii, a fost studiat n Frana n familia NOUGARET, la care n
anul 1637 s-a nscut primul copil hemeralop. Familia a fost studiat pe
parcursul a nou generaii pn n secolul XIX, nregistrndu-se 134 de
cazuri, conchizndu-se c maladia este dominant.

_____________________________________________________________

_____________________________________________________________
b rb a t s n to s

n o u n s c u t m o rt

f e m e ie s n t o a s

s a r c in n e v o lu ie
( lu n a a d o u a )

b rb a t a fe c ta t
c u p lu f r c o p ii
f e m e ie a f e c t a t
b r b a t i f e m e ie n o r m a li, d e c e d a i

p ro b a n d

b r b a t i f e m e ie a f e c t a i, d e c e d a i
c s t o r ie ( c u p lu )

h e te r o z ig o i p e n tr u
c a r a c te r u l s tu d ia t

I, II, III ...


1 , 2 , 3 ...

r e la ie ile g it im

g e n e r a ii
in d iv iz ii u n e i g e n e r a ii

c s to r ie c o n s a n g v in

g e m e n i d iz ig o i

c o p il a d o p ta t

31

g e m e n i m o n o z ig o i
d iv o r i o n o u c s to r ie

LA 22

b rb a t s n to s ;
v rs ta - 3 1 a n i
b rb a t s n to s ;
in iia le le i v r s ta

d e s c e n d e n i
2

h e r m a fr o d it
d e s c e n d e n i m u lt ip li
( d o i f ii i t r e i f iic e )
in d iv id c u s e x n e c u n o s c u t

lip s a in f o r m a iilo r

a v o rt s p o n ta n

Fig. 2. Simboluri folosite la ntocmirea arborilor genealogici.

Prognatismul, o malformaie ereditara dominant, care const ntr-o


mrire anormal a nasului i a maxilarului inferior, cu aplatizarea
transversal a craniului, a fost remarcat prima dat la mpratul CAROL V
de HABSBOURG, fiind urmrit pe parcursul a trei secole (nou generaii).
_____________________________________________________________

10

_____________________________________________________________
Culoarea roie a prului este un caracter recesiv, determinat de gena
r i se transmite la descendeni mendelian ca n monohibridare; culoarea
neagr este determinat de gena R. Totui, dat fiind marea varietate de
nuane pe care le poate avea prul la om - de la negru la galben i rou -, cu
siguran acesta este un caracter polialelic; alelele aceleiai gene fiind
localizate pe o pereche de cromosomi la acelai locus, dar la indivizi diferii.
Culoarea ochilor este tot un caracter complex cu mari variaii, de la
negru intens la albastru pur intens, de aceea acest caracter este poligenic i
polialelic, determinat de dou gene cu mai multe alele, localizate n
cromosomi diferii.
Trebuie s remarcm i faptul c la determinarea culorii ochilor la om
intervine i o interaciune ntre genele alele, fenomen care poate explica
observaiile fcute n Danemarca de ctre WINGE i citate n 1962 de
C.O.CARTER care a constatat c prin cstoria unor parteneri cu ochi
albatri, se nasc copii cu ochi albatri n majoritate, dar i 2% cu ochi negri
i 1% cu ochi de culori intermediare, de la negru la albastru. Deci, n acest
caz, dominana i recesivitatea nu au un caractere absolut, ci intervine o
interaciune ntre polialele.
S-a descoperit n cele din urm, c asupra culorii ochilor la om are
influen o gen localizat pe cromosomul X, gen care intensific
pigmentaia ochilor mai mult la femei, care au doi cromosomi X i la care
gena se afl n stare homozigot sau heterozigot, pe cnd la brbai, care au
un singur cromosom X, gena se afl n stare hemizigot.
1.3.2. Metoda studiului gemenilor monozigoi
nc din 1876, F. GALTON a elaborat teoria studiului gemenilor
monozigoi, cu scopul de a stabili influena mediului asupra unor indivizi
identici din punct de vedere ereditar.
Gemenii pot fi de dou feluri:
a. monozigoi, provenii din segmentarea unui singur ou (zigot),
obinut din fecundarea unui singur ovul cu un singur spermatozoid, fiind
identici din punct de vedere genetic. Dac din primele dou blastomere ale
zigotului se nate cte un copil, atunci ei pot fi numai dou fetie sau numai
doi biei. teoretic i practic, din fecundarea unui ovul cu un singur
spermatozoid, pot lua natere doi, trei si mai muli gemeni monozigoi, toi
obligatoriu de acelai sex, dup cum se formeaz gemenii din primele dou
_____________________________________________________________

11

_____________________________________________________________
sau din trei, patru sau mai multe blastomere ale oului (zigotului) segmentat
n blastomere prin diviziuni mitotice succesive.
b. dizigoi, provenii din dou sau mai multe ovule fecundate fiecare
cu cte un singur spermatozoid, care dau dou sau mai multe ou (zigoi),
din care apoi se nasc fie numai fete, fie numai biei, fie i biei i fete
(fig.3).

Fig.3. Un exemplu de provenien a gemenilor: A - dizigoi; B - monozigoi.

Deosebirea ntre gemenii monozigoi i dizigoi este foarte mare,


deoarece gemenii monozigoi au acelai genotip, de aceea ei sunt foarte
asemntori anatomo-morfologic, fiziologic i comportamental, deosebirile
fiind date n special de aciunea diferit a mediului. Gemenii dizigoi au
genotipuri diferite i se aseamn ntre ei tot aa cum se aseamn ntre ei
fraii i surorile nscui la diferen de unul sau mai muli ani.
Trebuie s precizm faptul c atunci cnd se nasc mai mult de doi
copii odat, de exemplu trei - acetia pot fi doi monozigotici i al treilea
_____________________________________________________________

12

_____________________________________________________________
dizigotic fa de primii doi (n acest caz cei monozigotici s-au dezvoltat
dintr-un ovul fecundat care s-a segmentat n dou blastomere, din fiecare
dezvoltndu-se un copil, iar din alt ovul fecundat separat de un alt
spermatozoid s-a dezvoltat un alt copil, care este dizigotic fa de primii doi,
monozigotici ntre ei); toi dizigotici sau, foarte rar toi monozigotici.
n studiile care se efectueaz asupra gemenilor, n primul rnd trebuie
precizat dac gemenii analizai sunt monozigotici sau dizigotici. Separarea
gemenilor n mono- sau dizigotici se face clasic pe baza unor caractere
determinate genetic (metoda polisimptomatic): sexul, grupele sangvine,
particulariti serice i tisulare, culoarea i forma prului, culoarea ochilor,
nlimea i alte msurtori antropometrice; mai nou separarea gemenilor se
poate face prin analiza ADN-ului.
n concluzie, prin studiul gemenilor se poate preciza n ce msura un
caracter este determinat genetic i n ce msura depinde de condiiile de
mediu. Dac un caracter este ereditar, el va apare cu o mare frecven la
gemenii monozigoi.
1.3.3. Metoda studiului familiilor consangvinizate i a populaiilor
izolate endogame
Se tie, c din punct de vedere genetic, prin cstorii ntre rude mai
mult sau mai puin apropiate ( veri primari, unchi - nepoat, mtu - nepot
etc.) genele recesive existente n genotipuri heterozigote, unde nu se
manifest fenotipic, pot ajunge la descendeni n stare homozigot
determinnd fenotipizarea caracterului recesiv dat (normal sau anormal).
Prin observaii ndelungate omul a ajuns la interzicerea prin lege (cu
diferene de la stat la stat) a cstoriilor consangvine ntre rude de gradul I i
II, la nceput din motive religioase, iar apoi pe baze tiinifice.
n populaiile mici, separate de alte populaii umane prin bariere
geografice, religioase, sociale, rasiale, etc. are loc frecvent endogamia
(ncruciarea ntre indivizii aceleiai mici grupri) care conduce la
consangvinizare puternic. n populaiile endogame, spre deosebire de cele
exogame (ncruciarea se face la ntmplare ntre indivizi din populaii sau
chiar din rase diferite), maladiile i malformaiile ereditare prezint o
frecven mult mai mare, datorit gradului nalt de consangvinizare.
Astzi, n lumea modern, izolatele sunt pe cale de dispariie; n
populaiile umane are loc tot mai frecvent panmixia (ncruciarea la
_____________________________________________________________

13

_____________________________________________________________
ntmplare, pe baz de probabilitate a indivizilor care fac parte din populaii
diferite).
Prin studiul izolatelor s-a descoperit c, de exemplu, albinismul are n
general frecven redus (1:20.000), dar printre amerindienii Caribe-Cuna
din Panama i din unele state din SUA, albinismul apare cu o frecvena de
1:400, deoarece populaiile sunt relativ nchise.
n societatea modern, prin eliminare barierelor de ordin geografic,
social, economic i religios, izolatele aproape au disprut, crescnd foarte
mult gradul de heterozigoie, iar datorit recombinrii genetice, n populaia
uman care actualmente depete cinci miliarde de oameni, nu exist doi
indivizi identici genetic (n afara cazului gemenilor monozigoi).
La om exist 450.000 - 500.000 de gene, de aceea probabilitatea ca
dou genomuri de la doi indivizi oarecare s aib aceeai structur genetic
este practic imposibil.
1.3.4. Metode care aparin geneticii generale
n afar de aceste metode specifice geneticii umane, n studiul
ereditii la om se folosesc i alte metode, comune i altor organisme, ca de
exemplu:
- metoda citogenetic, folosit pentru studiul cromosomilor mitotici
i meiotici, a cromatinei sexuale etc.;
- metoda biochimic, pentru identificarea mutaiilor la nivelul
acizilor nucleici, pentru studiul unor maladii metabolice ereditare, etc.;
- metoda hibridrii somatice i moleculare, pentru localizarea
genelor pe cromosomi i alctuirea hrii genetice la om;
- metoda matematic, pentru determinarea frecvenei unor gene
normale sau mutante n populaia uman.
Ca urmare a folosirii acestor metode moderne de cercetare s-au
descoperit peste 4.000 de maladii ereditare la om. Cunoaterea
mecanismului de producere a acestor maladii, precum i a modului lor de
transmitere la descendeni, are o mare importan pentru luarea de msuri
medicale profilactice i terapeutice.

1.4. Scurt istoric


_____________________________________________________________

14

_____________________________________________________________
nc din antichitate, medicul i filosoful grec Hipocrate (460-377
.Hr.), ntemeietorul medicinii, a fcut primele observaii cu privire la
transmiterea ereditar a unor maladii i malformaii umane, remarcnd c n
unele familii acestea se ntlnesc cu o frecven mai mare. n anul 400 .Hr.,
n lucrarea "Corpus Hippocraticum" prezint unele date referitoare la
procesul ereditii (copii cu ochii albatri se nasc din prini cu ochii
albatri, brbaii cu alopecie au tai cu alopecie etc.). Considerat cel mai
mare medic al antichitii este, totodat autorul "teoriei pangenezei" sau
"panspermiei", dup care n ereditate intervin particule (germeni) existente
n toate celulele organismului i care, n momentul concepiei, se detaeaz
din corpul prinilor. Teoria pangenezei va fi acceptat i de Darwin, n
secolul al XIX-lea.
Pentru biologie, figura cea mai important a vechii Grecii rmne
Aristotel (384-322 .Hr.). n 360 . Hr., n lucrarea "Historia Animalium"
prezint observaii asupra ereditii, afirmnd c, n general, copiii
motenesc ceea ce este particular la prinii lor. Astfel, Aristotel arat c
din prini deformai se nasc copii deformai, ologi din ologi, orbi din orbi
i n general copiii motenesc adesea ceea ce este particular la prinii lor i
se nasc cu aceleai semne... Asemenea lucruri au fost vzute la trei generaii;
de pild, un anumit om are un semn pe bra pe care fiul su nu-l are, dar
nepotul lui l are n acelai loc, chiar dac nu este foarte clar(cf. Milcu i
Maximilian, 1966). Aristotel admite, de asemenea, c unele malformaii
sunt ereditare, dar pot fi determinate i de factorii de mediu, n care caz ns
nu se motenesc. A emis teoria hematogen a spermei, dup care sperma sar nate din snge ca rezultat al hrnirii, brbatul jucnd rol esenial n
ereditate, fiind oarecum sculptorul care modeleaz substana "marmora"
oferit de femeie.
Dintre nvaii romani, filosoful materialist Lucreiu (99-55 .Hr.) s-a
preocupat i de problemele ereditii. La el ntlnim, ca i la nvaii greci,
idea asemnrii dintre prini i copii i prerea c asemnarea mai mare cu
tatl sau cu mama se datoreaz seminei mai puternice a unuia sau altuia
dintre prini.
Primele secole ale erei noastre sunt ilustrate de Galen (130-200);
experimentator i observator atent, el a studiat legtura dintre constituie i
boal, a fcut numeroase disecii pe animale i a descris cteva malformaii
congenitale.
_____________________________________________________________

15

_____________________________________________________________
Evul Mediu nu a adus contribuii importante n cunoaterea ereditii.
Singurele cercetri valoroase sunt cele ale lui Albert Magnus (1193-1280).
El deosebete la om o parte ereditar i o parte influenat de mediu. Partea
ereditar asigur asemnarea cu ceilali membri ai speciei - ad naturam, i
asemnarea cu ceilali membri ai rasei i cu prinii - ad personam.
Caracterele ereditare provin astfel de la prini, de la ascendenii apropiai i
de la strmoii ndeprtai filogenetic. Dar, Magnus susine i transmiterea
ereditar a caracterelor dobndite i remarc motenirea unor boli. (cf.
Milcu i Maximilian, 1966).
W. Harvey, descoperitorul circulaiei sngelui, n 1651, afirm c
toate vieuitoarele, inclusiv omul, se nasc din ou fecundate, concepie
cristalizat n aforismul "omne vivum ex ovo".
n 1665 apare la Londra cartea lui Edmund de Meara, De Morbis
Hereditariis. Noiunea de boal ereditar nu era nc lmurit; se considerau
ca ereditare toate bolile care se transmiteau copiilor, inclusiv bolile
infecioase.
n 1667, A.Van Leuwenhoch descoper spermatozoizii la om, apoi la
cine i la iepurele de cas.
n secolul al XVIII-lea, lumea medical este preocupat de felul cum
se transmit bolile ereditare. n anul 1748, Academia din Dijon, reflectnd
interesul pentru problemele de eredopatologie, instituie un premiu pentru
cea mai bun lucrare despre felul cum se transmit bolile ereditare. Medicul
P. Maupertius observ c polidactilia are caracter familial.
La nceputul secolului al XIX-lea s-au pus bazele geneticii medicale.
n 1814 Joseph Adams public lucrarea "A treatise on the suposse
hereditary properties of diseases based clinical observations". El deosebete
bolile familiale (recesive) de bolile ereditare (dominante). Una dintre cele
mai importante observaii este aceea c aceleai tulburri clinice pot fi
determinate de tulburri genetice diferite.
n 1820, C.F.Nasse public un studiu asupra hemofiliei i confirm
ipoteza c boala este transmis numai de femei, manifestndu-se ns
exclusiv la brbai. (cf. Milcu i Maximilian, 1966).
Gregor Mendel (1822-1884) reuete s explice procesele
fundamentale ale ereditii, prin celebrele sale experimente la plante.
n 1863 F.Galton, vr cu Darwin, public prima lucrare de genetic
uman "Hereditary talent and character" n care susine transmiterea
nsuirilor intelectuale valoroase de la prinii dotai la copiii acestora. n
_____________________________________________________________

16

_____________________________________________________________
anul 1869, publica "Hereditary genius" n care, fundamentnd studiul
ereditii umane i propunnd practicarea unei ameliorri contiente a
calitii oamenilor introduce noiunea de eugenie. n 1876, public lucrarea
"The history of twins as a criterium of the relative powers of nature and
nurture" n care arat pentru prima dat nsemntatea studiului gemenilor
pentru genetica uman, elabornd metoda studiului gemenilor monozigoi,
pentru a deosebi maladiile ereditare de cele infecioase, precum i pentru
decelarea influenei ereditii i mediului asupra dezvoltrii organismului
uman. Deoarece a efectuat ample cercetri statistice asupra frecvenei unor
caractere normale, malformaii i maladii ereditare in populaia uman.
Galton este unul dintre fondatorii geneticii populaiilor.
n 1879, W.Fleming descoper fenomenele diviziunii longitudinale a
cromosomilor i separarea nucleelor rezultate n urma diviziunii nucleului
iniial n cele dou celule fiice, rezultate prin diviziunea celulei mame.
n 1883, E.van Beneden semnaleaz pentru prima dat c n celulele
germinale are loc reducerea la jumtate a numrului de cromosomi.
Landsteiner, n 1900, descoper sistemul ABO al grupelor de snge i
arat c tipurile respective sunt ereditare. Mai trziu, prin lucrrile lui
Landsteiner, Wiener i ale altor cercettori, s-a descoperit factorul sangvin
Rh, precum i faptul c boala hemolitic a nou-nscutului se datoreaz
incompatibilitii imunologice dintre mam i ft.
Prin redescoperirea legitilor lui Mendel, de transmitere a caracterelor
ereditare, la nceputul secolului XX, cercetrile de genetic uman s-au
intensificat evident, dovedindu-se c legile mendeliene sunt valabile i
pentru multe caractere ereditare umane. n ceea ce privete maladiile
metabolice ereditare o contribuie remarcabil a fost adus de A. E. Garrod
(1909), care a artat c maladiile ereditare ca alcaptonuria i albinismul nu
au caracter infecios , ci se datoreaz unor erori nnscute de metabolism, a
cii metabolice a aminoacizilor fenilalanina i tirozina. Cercetrile sale stau
la baza geneticii biochimice.
n prima decad a secolului XX, se dezvolt idea eugeniei n Europa i
SUA, prin care se consider c trebuie ncurajate cstoriile ntre persoane
cu caractere utile (eugenie pozitiv) i descurajate cele ntre persoane
bolnave, ntrziate mintal (eugenie negativ). n Germania, teoria a luat
denumirea de Rassenhygiene, provenind de la cartea cu acest titlu publicat
n 1895 de ctre Ploetz (concepia referitoare la superioritatea rasei nordice,
ce a dus la grave manifestri xenofobe i antisemite) (Raicu, 1997).
_____________________________________________________________

17

_____________________________________________________________
n 1921, R. B. Painter, cercetnd celulele germinale umane, obinute
prin biopsii testiculare, a descoperit cromosomul Y, stabilind formula
cromosomial 48 + X + Y. Dei acest numr de cromosomi stabilit de
Painter era eronat, cercetrile sale au avut un rol deosebit n dezvoltarea
citogeneticii umane.
n 1949, M. L. Barr i E. G. Bertram au descris deosebirea
morfologic ntre nucleii celulelor nervoase provenite de la pisica femel i
de la mascul. Diferena const n prezena la sexul femel a unui corpuscul
mic, care se coloreaz cu colorani nucleari. Acest corpuscul s-a numit
corpuscul Barr sau cromatin sexual.
n 1953, R. Gates relev c, n determinarea culorii pielii la om, sunt
implicate trei perechi de gene nealele. Tot n acest an, K. L. Moore, M. A.
Graham i M. L. Barr evideniaz cromatina sexual n preparate de piele
uman. Din acest an, testul cromatinei sexuale a devenit o metod de
cercetare n citogenetica uman, fiind aplicat n depistarea anomaliilor de
sex.
n 1954, R. G. Davidson i D. R. Smith au observat c n frotiurile de
snge, colorate prin tehnica May-Grundwald-Giemsa, c leucocitele PMN
neutrofile de la femele prezint un corpuscul, cu diametrul de 1,5
micrometri, care este ataat de un lob nuclear, printr-un filament de
cromatin, de o lungime variabil. Datorit formei sale, acest corpuscul a
fost numit "drumstick" (b de tob). Autorii afirm c, acest corpuscul are
aceeai semnificaie cu a corpusculului Barr.
n 1955, K. L. Moore i M. L. Barr au introdus n cadrul
metodologiei de studiere a cromatinei sexuale tehnica frotiului bucal,
facilitnd analiza genetic n anomaliile de sexualizare.
Dezvoltarea citogeneticii a condus la studiul detaliat al cariotipului
uman. n 1956, J. H. Tjio i A. Levan, n Suedia, utiliznd o cultur
celular de embrioni umani i recurgnd la tehnica ocului hipotonic, au
stabilit c celulele somatice umane conin 46 de cromosomi. Ei aduc astfel o
rectificare definitiv unei erori tiinifice care durase mai mult de 30 de ani.
n Anglia, C. E. Ford i J. Z. Hammerton, n urma efecturii unui
tratament hipotonic al materialului obinut din biopsii testiculare, au stabilit
c la om sunt 23 de bivaleni, confirmnd astfel observaiile lui Tjio i
Levan.
n 1959, I. Lejeune, M. Gautier i R. Turpin au descris la om prima
aberaie cromosomic numeric, trisomia 21, cunoscut i sub numele de
_____________________________________________________________

18

_____________________________________________________________
sindrom Down sau mongolism. Prima descriere clinic fusese fcut de
Seguin n 1846, apoi de Langdon Down n 1866, care o descrie sub numele
de "idioie mongoloid". Din acest moment citogenetica uman a devenit o
disciplina medical de diagnostic.
n acelai an, 1959, C. E. Ford, K. W. Jones, P. E. Polani, I. C. de
Almeida i I. H. Briggs au descris la om sindromul Turner (XO), iar P. A.
Jacobs i J. A. Strong au descris sindromul Klinefelter (XXY).
Anul 1960 este un an cu multiple realizri n domeniul geneticii
umane. P. C. Nowell, mpreun cu D. A. Hungerford, Donnelly i Beck,
menioneaz pentru prima dat c limfocitele umane din sngele periferic al
indivizilor normali sunt capabile de diviziune celular n cultur, dup
adugarea unei substane obinut prin extracie salin din Phaseolus
vulgaris, numit fitohemaglutinin. P. H. Moorhead, P. C. Nowell, W. J.
Meliman, D. A. Battips i D. A. Hungerford au descris tehnica preparrii
cromosomilor din culturi de limfocite umane, metod care a stat la baza
dezvoltrii Citogeneticii umane. Din acest moment s-a trecut la culturi de
snge periferic, metod rapid i eficient pentru studiul cromosomilor
umani.
n acelai an, la Denver (Colorado) a avut loc prima Conferin
Internaional la care s-a propus un sistem standard al nomenclaturii
cromosomilor mitotici umani. P. C. Nowell i D. A. Hungerford au descris,
n limfocitele de la doi bolnavi de leucemie granulocitar cronic, un
cromosom acrocentric foarte mic, iar A. G. Baikie, G. Court Brown i K.
E. Buckton au confirmat existena markerului i au propus s fie denumit
Philadelphia (Ph1), dup numele oraului n care a fost descoperit.
Cromosomul marker Ph1 este rezultatul unei translocaii 22-9 i este
specific leucemiei umane.
C. Stern, analiznd matematic transmiterea culorii pielii la om, afirm
c n acest proces sunt implicate 2-20 de gene.
n 1961, L. S. Penrose i J. D. A. Delhanty au semnalat, pentru prima
dat, un cariotip anormal la un fetus avortat. Aceti autori au inaugurat i
stimulat investigarea citogenetic n avorturile spontane. M. Gautier a
observat cromatina sexual n nucleul celulelor fibroblastice de femeie,
cultivate in vitro. Aceast constatare a condus la concluzia c exist o
corelaie ntre prezena corpusculului Barr i garnitura gonosomic a
cariotipului. Mary F. Lyon a formulat ipoteza inactivrii unui cromosom X
de la femelele mamiferelor i transformarea lui n cromatin sexual.
_____________________________________________________________

19

_____________________________________________________________
Ipoteza a fost dezvoltat n anii 1962 i 1963 i cuprinde trei pri: 1.
Postuleaz c genele ce se gsesc n cromosomul X condensat sunt inactive;
2. Postuleaz c inactivarea unuia din cei doi cromosomi X se face timpuriu,
n cursul dezvoltrii embrionare, iar toi cromosomii X care deriv din
cromosomul inactivat vor fi la fel ca cel parental; 3. Inactivarea unui
cromosom X se face la ntmplare, n unele celule fiind inactiv X matern, pe
cnd n altele, X patern. Afirmaia a constituit punctul de plecare pentru
conturarea ipotezei mecanismului "compensaiei de doz", dezvoltat n
1963 i numit i "ipoteza lionizrii".
n 1963, la Londra, a avut loc a II-a Conferin Internaional
consacrat cariotipului uman normal, n cadrul creia au fost aduse
mbuntiri sistemului de caracterizare a grupelor de cromosomi, acesta
fiind completat cu noi caractere morfologice (constriciile secundare din
regiunea proximal a braului lung la cromosomii 1, 9 i 16, care se pot
observa n anumite tipuri de preparate). Se remarc polimorfismul ereditar
al cromosomilor Y i 16, precum i al sateliilor; prin metodele
autoradiografice s-a stabilit timpul de ncorporare al timidinei tritiate n
diferii cromosomi i regiuni din complementul cromosomial uman.
n 1965, D. H. Carr, efectund cercetri citogenetice asupra
avorturilor spontane, relev rolul aberaiilor cromosomice n avorturi,
afirmaie pe care o confirm n anul 1967, n urma unui studiu mai amplu.
K. Patau elaboreaz o metod de reprezentare grafic a cariotipului care a
fost numit cariogram.
n 1966, la Chicago a avut loc a III-a Conferin Internaional de
standardizare n citogenetica uman. Raportul conferinei a prezentat
simbolurile care desemneaz complementul cromosomal normal ct i
pentru anomaliile de numr i structur. Sunt remarcate variaiile braului
scurt al cromosomilor din grupele D i G, precum i ale braului lung al
cromosomilor 16 i Y la indivizi normali. La Geneva a avut loc "Conferina
Internaional pentru standardizarea metodelor de cercetare a
cromosomilor n avorturi i n citogenetic" (Mohan et al.,1996).
n 1968, J. L. Hamerton a elaborat un model al determinismului
genetic al sexelor la om, care se rezum astfel: pe cromosomul X
heterocromatic de la femeie se gsesc gene reglatoare care comand
activitatea genei structurale feminizante de pe cromosomul X eucromatic i
blocheaz gena masculinizrii. La brbai, pe cromosomul Y, se afl gene
reglatoare care comand activitatea genei structurale masculinizante,
_____________________________________________________________

20

_____________________________________________________________
blocnd n acelai timp activitatea genei structurale feminizante (Mohan et
al., 1996).
n perioada 1968-1970 se pun bazele tehnicilor de bandare
cromosomial, devenind posibil identificarea precis a fiecrei perechi de
cromosomi umani, precum i a eventualelor restructurri cromosomiale care
sunt cauza unor maladii ereditare i malformaii congenitale.
n 1969, H. L. Nadler relev necesitatea diagnosticului prenatal al
bolilor genetice, iar mai trziu (1970), mpreun cu A. B. Gerble,
recomand ca prelevarea lichidului amniotic, prin tehnica numit
"amniocentez", s se efectueze ntre a 13-a i a 18-a sptmn de gestaie.
Lucrrile lor stau la baza diagnosticului prenatal. Tot n anul 1969, Ursula
Mittwoch a elaborat o ipotez referitoare la determinismul genetic al
sexelor la om, n care afirm c nu exist gene sexuale propriu-zise. Pe
cromosomul X eucromatic, la ambele sexe, se afl gene care dirijeaz
dezvoltarea gonadei primordiale nedifereniate. R. I. Huebner i G. L.
Todaro enun ipoteza oncogenei, dup care toate celulele conin n ADN-ul
lor informaia necesar spre a specifica partea din genomul virusului
oncogen (virogena) responsabil de malignizare i care, n mod normal este
represat. Cnd represia este deblocat, se exprim aceast informaie i se
determin malignizarea.
n 1970, T. Caspersson, G. Gahrton, I. Linsten i L. Zech, utiliznd
tehnica de bandare Q i P. Felix, J. Egosche, F. Forteza, F. Marco,
utiliznd tahnica autohistoradiografiei, au stabilit c markerul Ph, depistat
n leucemia granulocitar cronic, este un cromosom 22 care a pierdut o
parte din braul lung (22 q-) ce a fost translocat pe braul scurt al
cromosomului 9 (p+). P. L. Pearson, M. Bobrow i G. C. Vosa au descris
un corpuscul fluorescent n nucleele interfazice la brbat, n urma tehnicii de
colorare cu quinacrin. Acest corpuscul, cu diametrul de 0,2-1 mm,
corespunde celor 2/3 distale ale braului lung al cromosomului Y i a fost
numit corpuscul F, datorit afinitii sale pentru substanele fluorescente.
n 1971, A. T. Sumner, J. A. Robinson i H. J. Evans au identificat,
pentru prima oar, cromosomul Y n spermatozoizi, n urma colorrii cu
fluorocromi. F. E. Arrighi i T. C. Hsu au adaptat la cromosomii umani
tehnica colorrii heterocromatinei centromerice ("bandare C"). n acelai an,
la Paris, a avut loc a IV-a Conferin Internaional de standardizare n
citogenetica uman, n cadrul creia s-a adoptat modelul de benzi
cromosomale. Introducerea tehnicilor de marcaj n benzi a marcat un
_____________________________________________________________

21

_____________________________________________________________
moment important n dezvoltarea citogeneticii umane, ca i a citogeneticii
generale.
n 1973, J. D. Rawley, cu ajutorul tehnicilor de bandare, confirm c
segmentul terminal al braului q de la cromosomul 22 este translocat (22 q-)
pe braul lung al unui cromosom 9 (9 p+). I. Cervenka i L. Koulischer au
realizat o sintez a rezultatelor cercetrilor citogenetice privind modificrile
cromosomiale n cancer. W. Wray introduce o tehnic eficace de izolare i
purificare a cromosomilor metafazici prin ultracentrifugare n gradient de
sucroz.
n ultimele decenii ale secolului XX, s-au dezvoltat rapid cercetrile
de genetic molecular privind genomul uman i cele peste 4500 de maladii
genetice. A fost elaborat un proiect pentru studierea complet a genomului
uman, adic determinarea secvenei a cca. 3 miliarde de nucleotide din
ADN, precum i a celor cca. 50000 de gene plasate pe cei 23 de cromosomi
umani. Determinarea exact a secvenei celor cca. 3 miliarde de nucleotide
ale genomului uman este o problem extrem de dificil, dar de mare
importan teoretic i aplicativ. n SUA, din 1986, a fost elaborat un astfel
de proiect, costul su fiind de cca. 3 miliarde de dolari, deci, aproximativ un
dolar per nucleotid. Cu ajutorul enzimelor de restricie se poate segmenta
ADN-ul i se poate determina polimorfismul diferitelor segmente n
populaia uman prin metoda RFLPs (Restriction Fragment Length
Polymorphism). Pentru studiul fragmentelor de ADN a cror mrime este de
ordinul sutelor sau miilor de kb, s-a folosit metoda electroforezei n cmp
electric pulsat (1984); metoda amplificrii enzimatice a ADN cu ajutorul
polimerazei prin tehnica PCR (Polymerase Chain Reaction) a fcut posibil
multiplicarea rapid a unui segment de ADN n milioane de exemplare
(Raicu, 1997).
n 1990, E. J. Stanbridge, de la Universitatea California, analizeaz
genele supresoare de tumori la om, aducnd argumentele citogenetice i
moleculare pentru fenomenul de pierdere de gene n cancerul uman. El
susine c genele supresoare de tumori nu sunt antioncogene i pune
ntrebarea dac genele supresoare de tumori sunt responsabile pentru
egalarea expresiei unei clase noi de oncogene.
n 1992, Mary F. Lyon descrie cteva momente cruciale n istoria
studierii inactivrii cromosomului X, citnd anul 1980, cnd tehnologia
ADN recombinant permite stabilirea implicrii metilrii n procesul
inactivrii. Dup Riggs, Gartler, Grant i Chapmann, metilarea ADN ar
_____________________________________________________________

22

_____________________________________________________________
putea reprezenta mecanismul molecular care asigur ntinderea procesului
de inactivare de-a lungul cromosomului X, pornind dintr-un centru de
inactivare; n anul 1990, se reuete clonarea centrului de inactivare att la
om, ct i la oarece. Acest centru de inactivare reprezint o gen desemnat
XIST, localizat la om la banda X13. n 1992, Jeremy Nathans i
colaboratorii, de la Johns Hopkins University School of Meidine (SUA),
pun bazele geneticii moleculare a pigmenilor vederii la om.
n 1994, E. T. Stuart i colaboratorii de la Max Planck Institut,
Gotingen-Germania, stabilesc modul de organizare genomic a genelor pax
ce constituie o familie de gene nrudite, nalt conservate n evoluie i foarte
importante n dezvoltarea mamiferelor; mutaia lor determin sindroame
grave la mamifere i om, incluznd transformri maligne. F. H. Ruddle i
coloaboratorii si de la Yale University S.U.A., elaboreaz lucrarea
"Evolution of Hox genes" n care analizeaz distribuia genelor din aceast
familie de gene homeotice - Homeobox - care codific factori de transcrpie
ce regleaz "pattern - urile" de formare i diferitele aspecte de reglare
celular i difereniere n lumea animal, stabilind pe baza secvenierii lor
relaii filogenetice (Mohan et al., 1996).
n Romnia, primele lucrri de genetic au aprut n deceniile al
doilea i al treilea al secolului XX.
Dup 1930, genetica ptrunde din ce n ce mai mult n medicin. n
1934, la Cluj are loc un Congres de neurologie consacrat geneticii. O
contribuie important la dezvoltarea geneticii umane a avut-o Societatea de
genetic, creat n anul 1936, din iniiativa lui Gh. Marinescu. n literatura
medical apar numeroase lucrri de genetic scrise de C. I. Parhon, Gh.
Marinescu, t. Milcu, Ionescu-Siseti i Al. Caratzali.
nainte de cel de-al doilea rzboi mondial au nceput i primele
cercetri ample de antropologie contemporan. n cadrul acestor cercetri sa urmrit frecvena i distribuia ctorva caractere normale, cu mod de
transmitere cunoscut, cum sunt grupele sanguine (Rainer).
Datorit lui t. Milcu, n antropologie au nceput s fie folosite
metodele moderne ale geneticii populaiilor.
n 1964 are loc primul Congres Naional de Genetic, condus de t.
Milcu; se dezvolt genetica populaiilor i au loc numeroase cercetri n
izolate care subliniaz importana endogamiei pentru patologie (Milcu,
1966).S-au nfiinat laboratoare specializate la Institutele Academiei de
_____________________________________________________________

23

_____________________________________________________________
tiine Medicale i n centrele universitare efectundu-se studii de
citogenetic uman, diagnoz prenatal, maladii genetice etc.

1.5. Ramurile geneticii umane


Principalele ramuri ale geneticii umane sunt:
- Genetica biochimic (genetica molecular)uman
- Citogenetica uman
- Genetica dezvoltrii umane
- Imunogenetica
- Farmacogenetica
- Genetica comportamentului uman
- Genetica populaional
- Genetica celulelor somatice
- Genetica formelor, a caracterelor
- Genetica medical.

OMUL, EREDITATEA

I MEDIUL

_____________________________________________________________

24

_____________________________________________________________
La nceputul secolului al XX-lea se credea c una dintre cele mai
complicate probleme pe care genetica trebuie s o rezolve este aceea de a
stabili care caractere se datoreaz ereditii i care mediului. Totui,
problema nu a fost bine formulat: era necesar s se studieze n ce msur
un caracter are o origine ereditar i n ce msur se datoreaz mediului.

2.1. Individualitatea genetic i biologic uman


Omul, ca sistem biologic, este un sistem deschis, prezentnd o serie de
caracteristici specifice nivelului individual de organizare a materiei vii
(ereditatea, variabilitatea i reproducerea), precum i caracteristici generale
sistemelor biologice (programul, autoreproducerea, integralitatea, echilibrul
dinamic i autoreglarea) (Persec i Tudose, 1983).
Zigotul uman reunete "zestrea" ereditar (informaia genetic) a celor
doi prini ntr-o configuraie genetic nou (diferit de prini), unic i
constant. Gameii aduc n zigot o parte a genelor parentale, fiind n esen
singura legtur material ntre generaii.
Individualitatea genetic este configuraia genetic nou, unic i
constant ce se formeaz la zigot prin asocierea, combinarea specific a
genelor parentale provenite prin gamei. Individualitatea genetic este
sinonim cu genotipul.
Individualitatea genetic va determina programul genetic al
dezvoltrii ontogenetice a organismului i individualitatea biologic a
viitorului individ. Ambele fenomene sunt influenate de factorii mediului
extern, astfel c omul este rezultatul interaciunii permanente dintre ereditate
i mediu (Covic, 1981).
Individualitatea biologic este ansamblul de caractere manifeste
(observabile) i specifice (caracteristice unei persoane), rezultat al
interaciunii ereditate-mediu (individualitate genetic-mediu).

2.2. Determinismul caracterelor fenotipice umane


Omul este rezultatul interaciunii dintre ereditate i mediu, ce intervin
n proporii variabile n realizarea caracterelor normale sau anormale. n
_____________________________________________________________

25

_____________________________________________________________
funcie de participarea ereditii i mediului se disting trei categorii:
caractere "pur" ereditare, caractere determinate exclusiv de mediu i
caractere rezultate din interaciunea ereditate-mediu.

2.2.1. Caractere "pur" ereditare


Caracterele pur ereditare sunt determinate, aproape exclusiv, de
structura genetic, normal sau modificat a unui individ. Se disting trei
categorii de caractere ereditare:
- Caracterele de specie
- Caracterele normale (determinate de structura genetic unic i
constant) ce determin individualitatea biologic a fiecrei persoane. De
exemplu: grupele sangvine, grupele serice (haptoglobine, transferine,
imunoglobuline), grupe enzimatice (fosfataza acid). Valoarea practic a
studiului caracterelor ereditare normale const n: determinarea identitii
unei persoane, determinarea paternitii, determinarea filiaiei, transplantul
de organe i explicarea etiopatologiei unor maladii.
- Caracterele anormale sau bolile produse prin mutaii ce antreneaz
modificarea unor proteine de structur sau a unor enzime (de ex. lipsa unor
factori de coagulare - hemofilia, modificarea structurii hemoglobinei hemoglobine anormale, deficiena n G-6PD, incapacitatea transformrii
fenilalaninei n tirozin - fenilcetonuria care duce la oligofrenia fenil
piruvic etc.). Aceste caractere anormale ereditare, spre deosebire de
primele dou categorii, sunt prezente numai la unii indivizi.
Manifestarea unor aa-numite caractere pur ereditare poate fi totui
influenat de mediul ecologic i social. De exemplu, gemenii monozigoi,
cu ereditate identic nu sunt identici; ei se pot nate cu greuti diferite i pot
avea caractere morfologice foarte asemntoare, dar neidentice, iar crescui
n medii i condiii sociale diferite pot prezenta diferene somatice, psihice i
comportamentale.
Interaciunea ereditate-mediu este deosebit de clar i n patologia
genetic. Exist un grup de tulburri care se manifest n orice condiii de
mediu: anomalii cromosomice i cteva erori de metabolism, cum ar fi boala
Tay-Sachs.
Adesea, deficienele enzimatice devin evidente numai n circumstane
particulare. De exemplu, galactozemia este o eroare de metabolism relativ
_____________________________________________________________

26

_____________________________________________________________
rar, condiionat de o deficien a galactozo-1-fosfat-uridil-transferazei,
enzim necesar metabolizrii galactozei. Dar, galactoza sub forma lactozei
este unul dintre constituenii majori ai laptelui; astfel, copiii handicapai
genetic (cu deficien de galactozo - 1 - fosfat - uridil - transferaza), hrnii
cu lapte, prezint tulburri caracteristice, printre care i o napoiere mintal
sever. Este ns suficient ca galactoza s fie eliminat din alimentaie i
copilul se va dezvolta normal.
Fenilcetonuria este determinat de deficiena fenilalaninhidroxilazei,
astfel nct fenilalanina nu se mai poate transforma n tirozin, ci trece n
acid fenilpiruvic, toxic pentru creier, determinnd oligofrenia fenilpiruvic.
n condiii obinuite toi indivizii cu aceast deficien enzimatic se
mbolnvesc; dac nou-nscuilor afectai li se administreaz o diet
adecvat (fr fenilalanin), atunci efectul genei modificate nu se manifest.
Deficiena n G-6PD (enzim ce intervine n metabolismul aerob al
glucozei din eritrocit, asigurnd meninerea hemoglobinei n stare redus)
datorat unei mutaii genice scade capacitatea eritrocitului de a avea
hemoglobin redus i, n prezena unor ageni oxidani puternici se
formeaz methemoglobina i corpii Heinz ce vor distruge globulul rou
(hemoliz). Persoanele cu deficien de G-6PD sunt de obicei sntoase, dar,
n anumite condiii (administrarea unor medicamente - antimalarice,
sulfamide, unele analgezice, dup consumul de bob - Vicia faba sau prin
inhalarea polenului acestei plante se poate declana o anemie hemolitic
grav (favism).
Din aceste exemple se constat c multe caractere considerate pur
ereditare pot implica i participarea mediului, dup cum afirma J.Rostand
(citat de Covic, 1981) "...fiecare om este unic pentru c provine dintr-un
anumit ou (zigot) i fiindc a trit o anumit via; el este de dou ori unic,
att prin singularitatea originii sale, ct i prin singularitatea aventurii sale
personale".
2.2.2. Caractere determinate exclusiv de mediu
Mediul poate determina o serie de caractere normale sau anormale
(boli), aa-numitele caractere "pur ecologice". Aceste caractere sunt
determinate de diferite categorii de factori de mediu ce acioneaz asupra
organismului ntr-un anumit moment al dezvoltrii sale ontogenetice.
_____________________________________________________________

27

_____________________________________________________________
Cel mai frecvent este vorba de afeciuni determinate de ageni
infecioi sau de parazii, intoxicaii acute (accidentale) sau cronice
(profesionale), lipsa unor vitamine i iradiere.
Apariia, manifestarea i gravitatea bolii determinat de aciunea
agenilor externi este condiionat deseori de structura genetic a
individului. n general, nu este vorba de o aciune "exclusiv" a mediului, ci
de o interaciune ereditate - mediu. Fiecare individ prezint un mod
particular, specific, de rspuns la o agresiune extern; datorit acestei
individualiti determinate genetic, oamenii sunt inegali n faa bolii, unii
fiind rezisteni, alii vulnerabili i aceeai boal se poate manifesta cu
intensitate diferit la diferite persoane.
Din cele mai vechi timpuri, s-a constatat c n diferite epidemii sau n
contact cu ageni infecioi nu se mbolnvesc toate persoanele ce vin n
contact cu germenii patogeni, iar gravitatea bolii variaz de la un individ la
altul. Aceast rezisten diferit la infecie este determinat de constituia
genetic a fiecrei persoane i, n special, de structura proprie a sistemului
HLA- sistemul de supraveghere, alarm i aprare al organismului
(J.Dausset, 1965, 1978 cf. Covic, 1981). Diferenele de structur HLA
determin diferenele de rspuns la o agresiune microbian; fora de aprare
antimicrobian variaz de la o persoan la alta n funcie de structura sa
genetic.
Un alt exemplu l constituie reactivitatea genetic diferit a indivizilor
la agresiunea diferiilor compui chimici. Organismul i-a dezvoltat sisteme
specifice de aprare, de neutralizare, ns, uneori, toxicitatea crescut, sau
expunerea prelungit la un anumit compus, sau la diveri compui, perturb
echilibrul, genernd boal.
Hidrocarburile din fumul de igar nu sunt cancerigene ele nsele, ci
sunt transformate n organism ntr-un epoxid cancerigen. Gena ce determin
sinteza enzimei (alilhidrocarbon epoxilaza) ce intervine n reacia de
transformare este diferit, funcie de individ: unele persoane sintetizeaz
cantiti mari de enzim, iar alte persoane sintetizeaz cantiti mici. De
asemenea rezistena la beie este determinat genetic, de un complex
enzimatic hepatic (alcool dehidrogenaza hepatic), ce arde alcoolul etilic cu
eficiene diferite; alcool dehidrogenaza atipic produs prin mutaii va
induce transformarea alcoolului n aldehid (frecvent la populaiile
asiatice), determinnd nroirea imediat la fa.
_____________________________________________________________

28

_____________________________________________________________
Din aceste considerente, precum i din exemplele anterioare, putem
concluziona c, practic att caracterele pur ecologice, ct i cele pur
ereditare sunt, n general caractere determinate de interaciunea ereditatemediu. Difer doar cota de participare a mediului, sau a structurii genetice la
realizarea caracterului respectiv; la caracterele aa-zise pur ecologice,
ponderea cea mai mare o deine particularitatea de aciune a mediului, iar la
aa-numitele caractere pur ereditare, ereditatea deine rolul major.
2.2.3. Caractere determinate de interaciunea ereditate-mediu
Majoritatea caracterelor umane normale sau anormale sunt rezultatul
interaciunii ereditate-mediu, n proporii diferite, astfel nct caracterele
sunt predominant ereditare sau predominant ecologice. De exemplu, n
figura 4, extremele diagramei cuprind caracterele pur ereditare sau pur
ecologice, centrul reprezentnd caracterele condiionate de aciunea
combinat i n proporii variabile a ereditii i mediului. Ereditatea fixeaz
doar limitele n care se poate dezvolta un caracter. Fiecare organism
reacioneaz n mod propriu, funcie de aciunea mediului. Interaciunea
organism-mediu poate fi bogat exemplificat.

_____________________________________________________________

29

_____________________________________________________________
E R E D IT A T E
100%
g r u p e s a n g v in e
d e r m a to g life
c u lo a r e a p r u lu i
75%
t a lie

C a ra c te re
n o r m a le

C a ra c te re
a n o r m a le

0%

h e m o filie
f e n ilc e to n u r ie
s c h iz o fr e n ie

25%
lu x a ie c o n g e n ita l d e o ld

g re u ta te

50%
50%

h ip e r t e n s iu n e a r t e r ia l e s e n ia l
d ia b e t z a h a r a t

te n s iu n e a r te r ia l
d e z v o lt a r e m u s c u la r

25%

u lc e r g a s tr o - d u o d e n a l
75%
in fe c ii
in to x ic a ii, a v it a m in o z e

0%
100%

M E D IU
Fig. 4. Participarea ereditii i a mediului n realizarea unor caractere normale
i a unor caractere anormale (dup Covic, 1981).

2.2.4. Caractere normale


n producerea caracterelor normale ereditatea contribuie ntr-un
anumit procent la realizarea caracterului.
De exemplu, n realizarea taliei, ponderea ereditii este apreciat la
circa 67%, restul fiind determinat de aciunea mediului. Ereditatea
determin limita superioar pn la care poate fi dezvoltat un caracter n
condiiile unui mediu favorabil. Acest potenial sau norm de reacie
depinde de structura genetic proprie fiecrui individ.
nlimea speciei umane (caracter poligenic) variaz n limite foarte
largi: la o extrem sunt populaiile de pigmei din pdurile ecuatoriale ale
Zairului (nlime medie de 144 cm.), la cealalt extrem fiind nilotizii din
Sudan (nlimea medie de 185 cm.); nlimea medie a populaiilor
_____________________________________________________________

30

_____________________________________________________________
europene este de aproximativ 170 cm. Dup Hiernaux, exist o relaie ntre
temperatur, umiditatea ambiant i talie. Conform regulii lui Bergmann,
nlimea este mai mare n regiunile cu temperatur medie mai mic; n
Europa, America i China, nlimea crete de la sud spre nord. La fel de
important este i umiditatea. n pdurile ecuatoriale africane triesc
populaii cu talie mic, uneori extrem, ca pigmeii Mbuti din Zair.
Diminuarea masiv a nlimii are o explicaie fiziologic. Supravieuirea n
asemenea circumstane presupune meninerea constant a temperaturii
corpului, ce se poate realiza dac masa organismului este mic i suprafaa
de evaporare mare. La Mbuti raportul mas/suprafa este foarte mic. Se
pare c la baza acestui mecanism adaptativ st o deficien parial de
hormon de cretere (Maximilian, 1982).
Numeroase date demonstreaz c nlimea a crescut substanial n
secolul XX. Astfel, n Norvegia, din 1760, pn n 1830, nlimea recruilor
norvegieni nu s-a modificat. Ulterior a crescut cu 1,5 cm. pn n 1875 i cu
nc 4 cm. pn n 1935. n Belgia i Olanda nlimea a crescut cu 9 cm. n
90 de ani, ntre 1870 i 1960.
Un fenomen similar a avut loc n Romnia.
Creterea nlimii a fost favorizat i de accentuarea heterozigoiei
populaiilor umane, fenomen de heterozis. Fenomenul a fost bine studiat n
Tessin (Elveia), unde descendenii uniunilor endogame erau cu 2 cm. mai
scunzi dect descendenii cstoriilor exogame.
Talia este un caracter de specie; cnd este atins media stabilit
genetic, creterea nceteaz. Dovada a adus-o un studiu efectuat asupra
studenilor de la Universitatea Harvard. n 1958 ei aveau aceeai nlime pe
care au avut-o i studenii intrai n aceeai universitate n 1930.
n primele decenii ale secolului XX, Iyenaga i Sato au remarcat talia
mai nalt a copiilor japonezi nscui n America, n comparaie cu talia mai
joas a copiilor de aceeai vrst nscui n Japonia. Suski, a constatat c, la
copiii japonezi nscui n America, se modific greutatea, circumferina
toracic i lungimea relativ a picioarelor, odat cu modificarea taliei.
Cercetri asemntoare a ntreprins n 1939 i Shapiro. Urmrind
cca. 2500 de indivizi emigrai n Haway, precum i pe descendenii lor pe
care i-a comparat cu rudele familiilor cercetate rmase n Japonia, el a
remarcat c nu se modific numai caracterele considerate n general
variabile, ca talia i greutatea, ci i limea capului, nlimea feei i
_____________________________________________________________

31

_____________________________________________________________
limea nasului, caractere care, n general sunt stabile sau relativ stabile
fa de influena mediului.
n anul 1946, Lasker a remarcat c la chinezii emigrai n America,
dimensiunile capului sufer modificri importante. Procesul nu cunoate
deosebiri rasiale. Explicaiile ce pot fi aduse sunt multiple: modificarea
climei, a alimentaiei, a tipurilor de cstorii etc. De exemplu, Hulse, crede
c modificarea indicelui cranian la copiii elveienilor emigrai n America,
pare a fi un efect al heterozisului.
n realizarea caracterelor normale morfofuncionale i psihice
intervine att zestrea ereditar a unui individ, ct i mediul su extern
social i cultural. El determin o parte din caracter i permite sau nu
atingerea limitei superioare pn la care poate fi sau nu dezvoltat acel
caracter. De aceea, mediul determin realizarea diferit a unui anumit
potenial genetic, n condiii diferite de via.
2.2.5. Caractere anormale
O serie de observaii au artat c i manifestrile bolilor ereditare sunt
influenate de mediu. Astfel, interaciunea ereditate-mediu poate fi observat
i prin analiza cauzelor ce determin anumite caractere anormale (boli).
Astfel, Neel i Schull dau ca exemplu o boala a pielii xeroderma
pigmentosum (boal determinat de o mutaie recesiv). Att timp ct
indivizii respectivi evit soarele, boala nu se manifest; odat cu expunerea
la soare, pielea lor se umple de erupii caracteristice.
Un alt exemplu l constituie gua, care apare, de obicei, n regiunile
unde iodul se gsete n cantiti insuficiente. n aceast boal, ereditatea nu
pare s aib o importan prea mare. S-au descris totui indivizi la care, n
urma unei mutaii, una dintre enzimele necesare metabolismului hormonilor
tiroidieni este deficient. Att timp ct n mediul nconjurtor se gsete o
cantitate suficient de iod, tiroida poate funciona normal, chiar i cu
jumtate din cantitatea normal de enzime. Dac indivizii heterozigoi
triesc n regiuni unde iodul se gsete n cantiti sczute, atunci glanda
tiroid se mrete prin acumularea de coloid netransformat n hormoni
tiroidieni, dnd diverse tulburri metabolice.
Unele tulburri enzimatice ereditare se manifest clinic numai dac
intervine aciunea cu totul specific a mediului. De exemplu, boala Wilson
este determinat de incapacitatea organismului de a sintetiza o cantitate
_____________________________________________________________

32

_____________________________________________________________
normal de ceruloplasmin, existent n plasm. n acest caz, cuprul din
alimentaie este depozitat n diverse organe, mai ales n creier, ficat, rinichi.
Datorit acestor depuneri, apar manifestrile clinice.
Alt exemplu este caria dentar care apare prin aciunea bacteriilor
cariogene din placa dentar, favorizat, n special, de alimentaie.
Ereditatea intervine n acest proces, condiionnd prin morfologia, gradul de
mineralizare al dinilor i compoziia salivei rezistena la aciunea plcii
dentare.
Predispoziia la boal este determinat de constituia genetic
particular a fiecrui individ i condiionat de experiena sa de via.
Cele mai demonstrative exemple le-a adus farmacogenetica. Se tie
c medicamentele sunt transformate n organism cu ajutorul enzimelor.
Sinteza acestor biocatalizatori are o baz genetic, explicnd faptul c, n
unele cazuri, enzimele necesare transformrilor din organism lipsesc sau se
gsesc n cantiti insuficiente. n asemenea mprejurri, relativ rare,
medicamentele pot avea efecte brutale sau chiar mortale. Alteori,
medicamentele pot agrava boli latente sau pot favoriza apariia unor boli
necunoscute.
Aceste exemple oglindesc importana pe care o are mediul extern n
apariia i dezvoltarea caracterelor normale i patologice. La fel de
important este i mediul intern. Numeroase cercetri au artat c fiecare
caracter este adesea rezultatul interaciunii genice. S-au constatat cazuri de
dominan regulat, cnd o gen dominant se transmite din generaie n
generaie, fiecare afectat fiind nscut dintr-un printe afectat. Dar, se cunosc
i cazuri de dominan neregulat; ascendenii i descendenii unei persoane
sunt afectai, dar persoana a transmis gena, fr s manifeste efectele ei.
Pentru a marca prezena sau absena efectelor unei gene sub raport
cantitativ, Timofeev Resowsky a introdus termenul de penetran (complet
sau incomplet), prin care se nelege frecvena efectelor unei gene la nivel
fenotipic. Mutaiile cu penetran mare sunt condiionate uneori de mutaia
unei singure gene; mutaiile cu penetran mic sunt rezultatul cooperrii
mai multor mutaii, cu efect aditiv (Milcu i Maximilian, 1966).
Prezena unei gene poate fi analizat i prin diversitatea
transformrilor pe care le determin, studiind expresivitatea genic. Astfel,
ectrodactilia, caracterizat prin absena unuia sau mai multor degete, este
condiionat de o gen dominant cu penetran mare. Cercetarea familiilor
_____________________________________________________________

33

_____________________________________________________________
afectate a artat ns, c mutaia antreneaz o mare diversitate de forme, de
la o simpl sindactilie, pn la reducerea minii la numai dou degete.

2.3. Relaia genotip-fenotip-mediu


Interaciunea complex dintre ereditate i mediu, ce intervine n
realizarea caracterelor normale i anormale ale organismului se exprim prin
relaia:

G t

Ft

M
(dup Covic, 1981)

Genotipul determin caracterele fenotipice ereditare. Dei aceast


relaie este cauzal fiind explicat de expresia informaiei ereditare prin
transcripie i translaie, ea nu este total ntruct nu toate caracterele
fenotipice sunt determinate genetic, iar o mare parte din gene nu se
manifest fenotipic.
Mediul poate aciona asupra genotipului producnd mutaii
(modificri ereditare).
O parte din caracterele fenotipice sunt determinate de mediu
(modificaii); acestea nu se transmit n succesiunea generaiilor. Uneori
anumite caractere fenotipice anormale determinate de mediu (neereditare)
sunt asemntoare sau identice cu unele caractere produse de genotip i se
numesc fenocopii. Ex: microcefalia poate fi consecina unei mutaii genice
sau poate fi produs de aciunea unor ageni de mediu asupra embrionului.
Depistarea fenocopiilor este deosebit de important n cadrul consultului
genetic pentru a estima riscul de recuren al unor malformaii congenitale i
a acorda un sfat genetic ct mai corect
_____________________________________________________________

34

_____________________________________________________________
Mediul intervine n relaia genotip-fenotip, influennd (modulnd)
ntre anumite limite expresia fenotipic a genotipului, fiind aa-numita
"norm de reacie".
2.4. Importana teoretic i practic a conceptului de individualitate
biologic

Fiecare individ este un unicat, are o individualitate biologic precis,


determinat de ereditate i de mediu.
Pentru omul sntos, cunoaterea individualitii biologice permite
nelegerea capacitilor i limitelor individuale, a diferitelor reacii la
agresiunea mediului i vulnerabilitatea fa de boli.
Pentru omul bolnav, conceptul de individualitate biologic permite
nelegerea dictonului "nu exist boli, ci numai familii de bolnavi". O boal
poate fi determinat de o structur genetic ce se poate transmite n familie.
Importana practic a acestui concept const n special n activiti
profilactice primare care se ncadreaz n "medicina omului sntos" prin
avertizarea persoanelor asupra bolilor familiale i descoperirea formelor
incipiente de boal i activiti profilactice secundare adresate celor bolnavi
pentru a-i uura suferina i pentru a mpiedica rspndirea genelor afectate
n populaie.

_____________________________________________________________

35

_____________________________________________________________

STRUCTURA,
ORGANIZAREA I FUNCIA
ADN N CELULA UMAN
_____________________________________________________________

36

_____________________________________________________________

3.1. Particularitile structurii ADN la om


n anul 1953 J.Watson i F.Crick au descoperit structura ADN, format
din dou lanuri polinucleotidice (dublu helix) (fig. 5).
Structura primar a ADN
ADN-ul este un macropolimer de dezoxiribonucleotide (prescurtat
nucleotide), formate din pentoz (dezoxiriboza), baze azotate (purinice: A adenina i G - guanina sau pirimidinice: C - citozina i T - timina) i un
radical fosfat (radicalul acidului ortofosforic) (fig. 6).
Dintre formele tautomere ale bazelor azotate, n acizii nucleici sunt
prezente numai formele ceto - i amino -, care sunt mai stabile i menin
atomii de hidrogen necesari pentru mperecherea bazelor azotate
complementare. Prin nlocuirea unei baze normale cu forma sa tautomer
rar, pot s apar erori de mperechere (A cu C i C cu T), deci mutaii
punctiforme (Raicu, 1997).

_____________________________________________________________

37

_____________________________________________________________

L e g tu ri
z a h r -fo s fa t

L e g tu ri d e
h id r o g e n
B az
p ir im id in ic

B a z p u r in ic

P e re c h e d e
n u c le o t id e

Fig. 5. Dublul helix de ADN

Cele trei elemente ale unei nucleotide sunt unite prin legturi
covalente. La C1' al dezoxiribozei se leag o baz azotat rezultnd un
nucleozid, iar la carbonul 3' al dezoxiribozei se leag radicalul fosfat de
carbonul 5' al altei dezoxiriboze, realiznd legtura fosfodiesteric (fig. 7).
Se formeaz o caten liniar continu, cu o parte constant (axul
molecular format din dezoxiriboz i radical fosfat) i o parte variabil
(format din baze azotate perpendiculare pe ax). Catena polinucleotidic
este polarizat, primul nucleotid prezentnd carbonul 5' al dezoxiribozei
_____________________________________________________________

38

_____________________________________________________________
liber, iar ultimul nucleotid cu carbonul 3' liber. Polaritatea este 5' spre 3',
invers direciei de polimerizare (fig. 8).
NH2

O
H N
O C

C
N

C H

C H

O C

C
N

C H

H N

C H

O C

C
N

C CH3
C H

Uracil

Citozina

Timina

NH2
N
H C

C
N

C H
N H

Adenina
O
H N
NH2

C
N

C H
N H

Guanina

Fig. 6. Bazele azotate purinice i pirimidinice, din structura ADN

Prin studii cu raze X i electronomicroscopie, Chargaff a demonstrat


nonperiodicitatea aranjrii bazelor azotate n catena de ADN.
Structura secundar a ADN
Erwin Chargaff i colaboratorii, analiznd compoziia ADN - ului la
diferite organisme au constatat c, n ADN, concentraia de T este egal cu
cea de A, iar cea de C este egal cu cea de G. Studiile lor au relevat c, i
concentraia total a bazelor pirimidinice (T + C) este egal cu concentraia
total a bazelor purinice (A + G), dup cum se observ n tabelul 1. n
_____________________________________________________________

39

_____________________________________________________________
contrast, procentul de A (sau T), n comparaie cu G (sau C) variaz n
funcie de organism. Astfel, raportul T + A / C + G, variaz la diferite specii
(Snustad et al, 1997).
Nucleotide pirimidinice

O
H
O
-

CH3

O
-

H
H

P O CH2O
O

P O CH2O
O

OH

OH

dTMP

dCMP

Nucleotide purinice
H

H
H

N
H

O
H

H
N

H
O
-

P O CH2

P O CH2

OH
dAMP

OH
dGMP

Fig. 7. Structura dezoxiribonucleotidelor prezente n ADN

_____________________________________________________________

40

_____________________________________________________________
O
CH3

O P O CH2
-

H
H

H
N

H
N

O P O CH2
-

H
H

H
N

O
O P O CH2
-

O
N

H
N
O

H
N

O P O CH2
-

H
Lan polinucleotidic al ADN

Fig. 8. Structura primar a ADN

Tabel 1. Compoziia n baze azotate a ADN,

_____________________________________________________________

41

_____________________________________________________________
la diferite organisme (dup Snustad et al., 1997)

Specia

%A %G %C %G A+G / T+C A+T / G+C

I Virusuri
Bacteriofagul T2

32,6 18,1 16,6 32,6

1,03

1,88

II Bacterii
Escherichia coli

26,0 24,9 25,2 23,9

1,04

1,00

III Fungi
Saccharomyces
cerevisiae

31,7 18,3 17,4 32,6

1,00

1,80

IV Eucariote superioare
Homo sapiens

30,2 19,9 19,6 30,3

1,01

1,53

Una dintre premisele importante pentru elucidarea structurii secundare


a ADN a fost deducerea experimental a regulii lui Chargaff (1951),
conform creia:
A + G = T + C i A + C = G + T, iar A = T i G = C
A/T=G/ C=1
Pe baza datelor lui Chargaff i prin difracia n raze X utilizat de
Wilkins i Franklin, Watson i Crick au propus modelul dublul helixului de
dreapta al ADN, n care cele dou catene polinucleotidice se rsucesc,
formnd o spiral (vezi fig. 5).
Astfel, s-a dedus structura secundar a ADN, fiind reprezentat de 2
lanuri polinucleotidice legate prin puni de H ntre bazele azotate (legate pe
baz de complementaritate). A se mperecheaz cu T prin 2 puni de H
(A=T), iar G cu C prin 3 puni de H (GC) (fig. 9).
Raportul A + T / G + C are valori caracteristice pentru ADN-ul
provenit din surse diferite genetic i are valori apropiate la specii nrudite
filogenetic. La om raportul este egal cu 1,53 (Snustad et al, 1997). n
general, plantele superioare i animalele au un exces de A + T fa de G + C.
Cantitatea de material genetic variaz n limite mari n lumea vie, la om
mrimea genomului fiind de 3,3 x 109 p.b.(Raicu, 1997).
Structura bicatenar a ADN este foarte stabil datorit existenei
legturilor fosfodiesterice intercatenare i pe orizontal a legturilor de H
_____________________________________________________________

42

_____________________________________________________________
intercatenare. Cele dou catene sunt antiparalele, prezentnd polaritate
chimic diferit (fig. 10).
H

Timina
H
Zahar

C
N

H
C
C
C

H
C
N

O
H
H

N
H

Citozina

H
H

Zahar

C
N

C
C

N
C
N

Adenina

H
C
C

N
C H
N
Zahar

H
C

O
H

O
H

N
H

N
C

C
N

Guanina
C
C

N
C H
N
Zahar

Fig. 9. Legturile de hidrogen ntre bazele azotate purinice i pirimidinice.

Difracia cu raze X asupra fibrei de ADN arat existena a mai multor


tipuri distincte de structur (A, B, C, D i E), cu orientarea elicei spre
dreapta. n condiii fiziologice, (n soluie apoas, la concentraie sczut de
sruri, ADN-ul natural adopt conformaia B.

Tipul B-ADN
Acest tip de ADN este descris de modelul Watson - Crick.
Structura de dublu helix dextru cu orientare antiparalel a punilor
fosfodiesterice ce alctuiesc scheletul stabil al celor dou catene
polinucleotidice, legate prin puni de H stabilite ntre perechile de baze
complementare, confer fibrei un diametru de 1,9 nm (Snustad et al, 1997).
Perechile de baze azotate ale ADN - ului se succed la 0,34 nm., un tur
_____________________________________________________________

43

_____________________________________________________________
complet de 360 de grade fiind format din 10 perechi de baze. Deci, pasul de
nfurare complet a celor dou catene este de 3,4 nm.
HO

P
A

P
T

5'

3'
P

P
C

S
P

P
A

3'

5'
P

P
C
S
HO

G
S
P

Fig. 10. Schema dublului helix de ADN, ilustrnd cele patru tipuri de
perechi de nucleotide ale celor dou catene polinucleotidice.

Dezoxiribozele sunt perpendiculare pe bazele azotate, care fiind


hidrofobe sunt orientate ctre interiorul structurii, n timp ce lanurile
fosfodiesterice, cu un caracter hidrofil pronunat, rmn spre exterior,
protejnd astfel secvena de nucleotide de aciunea diferiilor ageni externi.
Datorit antiparalelitii, resturile de pentoz sunt orientate ntr-o caten cu
atomul de oxigen n jos i n cealalt caten n sus, astfel nct pentru a se
putea mperechea normal, bazele azotate legate la aceste zaharuri se nclin
_____________________________________________________________

44

_____________________________________________________________
cu cca. 10, n direcia acelor de ceas, ceea ce oblig ntreaga molecul de
ADN s se rsuceasc, formnd o spiral.
Prin spiralizarea coloanelor glucido - fosforice, apar, pe ambele pri
ale dublului helix, adncituri sau caviti mari i mici, alternante. Prezena
lor este esenial pentru ndeplinirea funciilor ADN - ului, deoarece la
nivelul lor bazele azotate sunt mai accesibile, putnd interaciona cu diferii
ageni specifici, n procesele de replicaie, transcripie etc. Astfel, prin nsi
conformaia lor, perechile de baze A - T stabilesc situsuri prefereniale de
legare a diferiilor ageni specifici la nivelul adnciturii mici, iar perechile
de baze C - G, la nivelul adnciturii mari (Raicu, 1997).
Tipul A-ADN
La concentraii saline mari, sau n stri de deshidratare parial, ADN ul este prezent sub forma A - ADN, un helix de dreapta ca i B - ADN, dar
care prezint 11 perechi de nucleotide per tur (Tabel 2). A - ADN - ul este
un dublu helix scurt, cu diametrul de 2,3 nm. Acesta prezint adncitura
mare strmt i adnc, iar adncitura mic, larg i superficial.
Tipul A - ADN nu este prezent in vivo, ns heteroduplexul ADN ARN i duplexul ARN - ARN exist in vivo, n structuri similare cu acesta.
Tabel 2. Tipuri de ADN (dup Snustad et al, 1997)

Tipul helixului
A
B
Z

Direcia helixului
Dreapta
Dreapta
Stnga

Perechi de baze per tur


11
10
12

Diametrul helixului
2,3 nm.
1,9 nm.
1,8 nm.

Tipurile suplimentare de dublu helix dextru de ADN (C, D i E) au


fost evideniate n condiii specifice de mediu (deshidratare etc.). Se pare c
acestea nu exist n celulele vii (Snustad et al, 1997).
Tipul Z-ADN
A. Rich i K. Itakura, n 1980 (cf. Raicu, 1997), au artat c molecula
de ADN cu secvene de tip CGCGCG prezint o rsucire spre stnga
(dublu helix de stnga), rsucire ce cuprinde 12 perechi de baze per tur;
_____________________________________________________________

45

_____________________________________________________________
diametrul helixului este de 1,8 nm. Tipul Z - ADN difer de tipul B - ADN
prin prezena unei singure adncituri profunde. n acest caz, bazele G i C
pierd echivalena i, n consecin, scheletul fosforilat nu se mai aliniaz sub
forma unui helix continuu, ci formeaz un zig-zag. De aici provine
denumirea de tip Z al ADN. Prezena unor perechi de baze G-C poate realiza
trecerea tipului B n Z. Aceast tranziie se realizeaz n condiiile unei
concentraii saline puternice sau prin fixarea unei grupri metil la citozin.
Tipul de ADN-Z se pare c intervine n reglajul genetic. G.Feldsenfeld
(1982) a artat c tipul Z fixeaz puternic histonele, avnd loc inactivarea
genelor. Tipul Z-ADN este mai expus la agenii mutageni i /sau
carcinogeni, datorit laxitii bazelor azotate. Existena formei Z - ADN n
celule este nc nesigur (Snustad et al, 1997).

3.2. Structura supramolecular a cromatinei


i a cromosomilor la om
Structura teriar a ADN
Structura teriar a ADN este reprezentat de configuraia
tridimensional caracteristic moleculelor circulare de ADN, n cazul crora
desfurarea spaial a dublului helix este ngrdit de forele de
contorsiune. Structura teriar nu este proprie ADN dublu catenar liniar,
ntruct capetele acestuia se pot desfura liber n spaiu.
n realizarea structurilor teriare ale ADN, un rol fundamental l
prezint enzimele denumite topoizomeraze, cu capacitatea de a cliva i apoi
de a reface o caten (topoizomeraza de tip I) sau simultan ambele catene ale
ADN (topoizomeraza de tip II). Efectul aciunii acestor enzime este
modificarea unei proprieti topologice caracteristic inelelor dublu catenare de ADN (Raicu, 1997).
Topoizomerazele au fost descoperite att la procariote, ct i la
eucariote, dar difer mult ntre ele. La eucariote, topoizomerazele acioneaz
asupra moleculelor circulare de ADN (ADN mitocondrial, ADN
cloroplastic) sau, n cazul replicrii, acioneaz ntre limitele unui replicon
pentru relaxarea structurii superspiralizate a ADN naintea furcii de
replicare, sau, n final, pentru separarea moleculelor fiice (fig. 11).
La eucariote structura ADN-ului este heterogen: ADN nerepetitiv
(aproximativ 30% din totalul ADN) care alctuiete genele de structur,
_____________________________________________________________

46

_____________________________________________________________
fiind codant i ADN repetitiv (moderat sau nalt repetitiv) care este inactiv
genetic, necodant, avnd roluri n arhitectura cromosomial i n reglarea
expresiei genice. De asemenea la eucariote ADN-ul se asociaz obligatoriu
cu proteinele pentru a forma cromatina i cromosomii.

T o p o iz o m e r a z a I
o

360

R o ta ie 3 6 0 o s t n g a ,
le g a r e

T ie r e a u n e i c a te n e

T ie r e a u n e i c a t e n e ,
r o t a ie 3 6 0 o d r e a p t a

L e g a re

C liv a r e a u n e i c a t e n e d in A D N
c ir c u la r r e la x a t ( s u b a c iu n e a
t o p o iz o m e r a z e i I )

A D N c ir c u la r r e la x a t

S u p e r r s u c ir e n e g a t iv a
A D N - u lu i c ir c u la r

T o p o iz o m e r a z a II
360

R o t a ie 3 6 0 o s t n g a ,
le g a r e

T ie r e a a m b e lo r
c a te n e

T ie re a a m b e lo r c a te n e ,
r o t a ie 3 6 0 o d r e a p t a

L e g a re

A D N c ir c u la r r e la x a t

C liv a r e a a m b e lo r c a t e n e d in A D N
c ir c u la r r e la x a t ( s u b a c iu n e a
to p o iz o m e r a z e i II )

S u p e r r s u c ir e n e g a tiv a
A D N - u lu i c ir c u la r

Fig. 11. Schema superrsucirii ADN.


_____________________________________________________________

47

_____________________________________________________________
Prin separarea unei catene din dublul helix circular de ADN i rotirea
cu 360 n jurul catenei complementare, se formeaz o superrsucire a
moleculei. Prin rotirea captului liber n aceeai direcie cu cea a dublul
helixului de ADN (spre dreapta), se formeaz o superrsucire pozitiv, iar
prin rotirea spre stnga a captului liber apare o superrsucire negativ a
ADN.
La toate organismele, moleculele de ADN din cele mai mici virusuri i
pn la cele mai mari eucariote prezint "in vivo" superrsucire negativ.
Multe funcii biologice ale cromosomilor pot fi ndeplinite doar prin
participarea moleculelor de ADN cu superrsucire negativ; aceast
supersucire negativ este implicat n replicare, recombinare, expresie
genic i reglarea expresiei genice.
Structura cuaternar (supramolecular) a ADN
Superspiralizarea este ntlnit i la moleculele de ADN dublu
catenare liniare de la eucariote, ns nu este rezultatul aciunii unor enzime
de tipul topoizomerazelor, ci apare ca efect al cuplrii fibrei de ADN cu
proteinele histonice; complexul ADN - histone dicteaz structura
fundamental a cromatinei la eucariote i joac un rol important n reglajul
genetic. Histonele sunt indispensabile pentru procesul de mpachetare a
ADN i, prin ataarea lor la fibra de ADN determin structura cuaternar a
acesteia, reprezentat de nucleosomi.
Cromatina este reprezentat de materialul genetic interfazic.
Compoziia chimic: nucleoprotein (ADN+histone+nonhistone), ARN,
lipide, ioni de Ca i Mg.
n timpul diviziunii nucleului fibra de cromatin se superrsucete i
se condenseaz formnd cromosomii.
Cromosomii sunt corpusculi colorai, ce poart genele. Numrul
cromosomilor n fiecare celul este caracteristic speciei. n evoluie, celula a
trebuit s mpacheteze ADN-ul. De exemplu, ADN-ul celulei umane are
lungimea de 2 metri (per celul diploid) i a trebuit mpachetat ntr-un
nucleu cu un diametru de 1 milion de ori mai mic dect lungimea ADN.
Aceast problem a fost rezolvat prin secionarea i condensarea ADN n
cei 46 de cromosomi. Acest ADN este divizat n cei 23 de cromosomi de
_____________________________________________________________

48

_____________________________________________________________
diferite dimensiuni i cu forme variabile, fiecare cromosom avnd ntre 15 i
85 mm de ADN (Snustad et al, 1997).
ntrebarea care se pune este: aceti cromosomi prezint fiecare o
molecul de ADN sau toi reprezint o macromolecul de ADN? Cum se
poate condensa att de mult, n metafaza mitotic, cel mai mare cromosom
uman (cu AND lung de 85 mm), la aproximativ 0,5 m n diametru i 10
m n lungime?
Prin studiul cromosomilor "lampbrush" s-a constatat c fiecare
cromosom conine o singur molecul gigant de ADN (de la un capt pn
la cellalt, trecnd prin centromer) (Snustad et al, 1997).
Prin izolarea cromatinei i examinarea sa la microscopul electronic s-a
constatat alctuirea din "serii de mrgele" elipsoidale, unite cu o "a" fin.
Astfel, cromatina este constituit din structuri repetitive, "mrgelele" fiind
subunitile cromatinei, denumite nucleosomi (cu diametrul de 11 nm i
nlimea de 6 nm), ca n fig. 12.

A D N lin k e r
(8 -11 4 p e re c h i
n u c le o t id e )

M ie z u l n u c le o s o m u lu i
( A D N c u 1 4 6 p e r e c h i n u c le o t id e )

Fig. 12. Schema structurii nucleosomale a cromatinei.

Dup digestia parial a ADN, cu endonucleaze, s-a observat c ADN


de 200 perechi de nucleotide este asociat cu fiecare nucleosom. Prin digestie
nucleazic extins, fiecare nucleosom prezint un segment de ADN de 146
de perechi de nucleotide. Aceast structur, rezistent la atacul nucleazelor,
este denumit miezul sau inima nucleosomului. Structura sa este constant
la toate eucariotele i const n: ADN de 146 perechi de baze i octamerul
histonic (H2a, H2b, H3 i H4, n doz dubl fiecare - H2a i H2b la exterior,
iar H3 i H4 la interior). Histonele protejeaz segmentul de ADN ce
_____________________________________________________________

49

_____________________________________________________________
nconjur miezul nucleosomului (de 146 perechi de nucleotide), de digestia
endonucleazic. Difracia n raze X a demonstrat c segmentul de ADN ce
nconjur octamerul histonic se nfoar pe o tur i 3/4. Cele patru tipuri
de histone s-au conservat n timpul evoluiei, fiind similare la toate
eucariotele. n contrast, fracia de proteine nonhistonice ale cromatinei este
heterogen. Compoziia proteinelor nonhistonice cromosomiale variaz
chiar la diferite tipuri de celule ale aceluiai organism. Aceste proteine nu
joac un rol major n mpachetarea ADN - ului, dar intervin n reglarea
expresiei genice (Snustad et al, 1997).
Subunitatea complet a cromatinei const n miezul nucleosomului, ADN - linker, n medie o molecul de histon H1 i proteinele
cromosomiale nonhistonice asociate (Snustad et al, 1997). Lungimea ADN
- linker variaz cu specia i cu tipul de celul, fiind cuprins ntre 8 i 144
perechi de nucleotide.
Conform Snustad et al, 1997, un nucleosom complet conine histona
H1, ce stabilizeaz cele dou tururi complete ale superhelixului de ADN
(166 perechi de nucleotide) de pe suprafaa octamerului histonic (fig. 13).
Filamentul de nucleosomi, de aproximativ 10 nm n diametru
(caracteristic fibrei de cromatin interfazice) se superrsucete formnd
solenoidul, cu diametrul de 30 nm (fibra de cromatin caracteristic
cromosomului mitotic sau meiotic). Proteina H1 contribuie la stabilizarea
fibrei de cromatin de 10 nm i are rol n formarea solenoidului, cu
aproximativ 6 nucleosomi per tur (fig. 14).
Prin spiralizarea i condensarea filamentului gros de cromatin
(favorizat de fosforilarea histonei H1) i prin cuplarea cu o matrice de
proteine externe nehistonice n profaza diviziunii celulare se formeaz
cromosomii.
Cromosomii umani
La om cromosomii ndeplinesc aceleai roluri ca la orice organism
eucariot. Cromosomii transmit materialul genetic, att de la o celul la alta
prin diviziunea mitotic, ct i de la prini la copii prin intermediul
gameilor (formai prin diviziune meiotic) i a fecundrii. Cromosomii
particip la recombinarea materialului genetic de la ascendeni prin
crossing-over (recombinare intracromosomic) n profaza meiozei I i prin
asortarea independent a perechilor de omologi sau "dansul cromosomilor
(recombinare intercromosomic) n anafaza meiozei I.
_____________________________________________________________

50

_____________________________________________________________
O c ta m e r h is t o n ic

2 nm

A D N (1 4 6 p e re c h i
d e n u c le o tid e )

11 n m
M IE Z U L N U C L E O S O M U L U I

O c t a m e r h is t o n ic

2 nm
H is t o n a H 1

A D N (1 6 6 p e re c h i
d e n u c le o t id e )
11 n m
NU C LEO SO M C O M PLET

Fig. 13. Schema structurii moleculare a nucleosomului.

_____________________________________________________________

51

_____________________________________________________________

S o le n o id

30 nm

N u c le o s o m c o m p le t

AD N

M ie z u l n u c le o s o m u lu i

O c t a m e r h is to n ic

6 nm

11 nm

Fig. 14. Alctuirea solenoidului.

_____________________________________________________________

52

_____________________________________________________________
Dei ndeplinesc aceleai roluri, la om studiul cromosomilor are o
importan practic neegalat de nici o alt specie. Cromosomii umani sunt
analizai pentru determinarea sexului genetic (att prenatal, ct i postnatal),
pentru investigarea mutagenezei datorate unor factori de mediu (n special
radiaii ionizante) i, mai ales, pentru diagnosticarea unor boli produse de
anomalii cromosomice de numr i de structur (sindroame
plurimalformative, tulburri de sexualizare i reproducere, hemopatii
maligne, tumori solide, sindroame cu ntrziere mental i/sau tulburri de
comportament etc.).
Din aceste considerente, dar i din interesul pentru studiul teoretic al
fiinei umane, analiza cromosomilor umani a fost un adevrat motor pentru
dezvoltarea unor noi metode n citogenetic. Astfel, dup primele tehnici de
citogenetic uman imaginate n anii 1950 de ctre Tjio, Levan i Lejeune,
n anii 1970 Casperson introduce tehnicile de marcaj n benzi care au
revoluionat studiul cromosomilor umani. n anii 1980 marcajul n benzi
este mbuntit prin apariia tehnicilor de nalt rezoluie care marcheaz
cromosomii n profaz n 850-1000 de benzi. Din anii 1990 au aprut
tehnicile de citogenetic molecular al cror principal reprezentant este
tehnica de hibridare in situ cu sonde moleculare marcate fluorescent- FISH
(Fluorescence In Situ Hybridisation).
Numrul, forma i mrimea cromosomilor umani n metafaz
(stadiul optim de studiu al cromosomilor) reprezint un caracter de specie.
La om setul diploid din celulele somatice este alctuit din 46 cromosomi
aflai n perechi de omologi (identici ca mrime, form, coninut genic, dar
de origine diferit, matern sau patern), 22 perechi de autosomi (perechile
1 - 22, numerotate n ordinea descresctoare a mrimii) i o pereche de
gonosomi ( XX la femeie i XY la brbat). n conformitate cu nomenclatura
cromosomilor umani, cariotipul uman normal este 46, XX la femeie i
46,XY la brbat. Setul haploid din celulele sexuale mature conine 23
cromosomi: 23,X n ovul i 23,X sau 23,Y n spermatozoid.
Numerotarea cromosomilor s-a fcut n ordinea descresctoare a
mrimii lor, astfel nct mrimea cromosomilor umani este cuprins ntre
9,08 microni (cromosomul 1) i 1,68 microni (cromosomul 22).
Din punct de vedere al morfologiei, se pot descrie caractere comune
tuturor cromosomilor umani (cromatidele, centromerul, constricia primar,
telomerele), caractere aparinnd doar unor cromosomi (constriciile
_____________________________________________________________

53

_____________________________________________________________
secundare, sateliii) i caractere specifice fiecrui cromosom n parte
(benzile).
Cromosomii umani sunt alctuii din dou cromatide, subuniti
longitudinale alctuite fiecare din cte o molecul identic de ADN rezultat
prin replicarea moleculei unice de ADN (care reprezint un cromosom
despiralizat) n faza S a interfazei. Cromatidele se unesc ntr-un punct numit
centromer. La om toi cromosomii prezint un singur centromer care
mparte cromosomul n dou brae notate cu literele p (braul scurt - aranjat
ntotdeauna n sus) i q (braul lung). La nivelul centromerului se afl o
ngustare numit constricie primar. La microscopul electronic s-a observat
c n centromer se gsesc doi kinetocori, cte unul pentru fiecare cromatid.
Kinetocorii sunt mase proteice care prezint dou benzi laterale
electronodense i o band central mai clar; pe ei se fixeaz filamentele
fusului de diviziune ceea ce a dus la concluzia c au rol n separarea i
migrarea spre poli a cromatidelor surori n timpul diviziunii celulare. Nu se
cunoate nc dac separarea kinetocorilor se datoreaz ruperii unor proteine
de legtur sau replicrii ADN-ului de tip satelit, nalt repetitiv, din
centromer.
n funcie de poziia centromerului (care este fix) cromosomii
umani sunt clasificai n: cromosomi metacentrici (braele sunt aproximativ
egale, indice centromeric: IC = p/p+q = 0,46-0,49), submetacentrici (p<q,
IC = 0,26 - 0,45) i acrocentrici (p<<q, IC = 0,17 - 0,25).
La capetele cromosomilor se gsesc telomerele, structuri specializate
alctuite dintr-un ADN repetitiv n care secvena TTAGGG se repet n
tandem de 100.000 de ori cuplat cu o "bonet" de proteine telomerice
numit cap. n interfaz, telomerele se fixeaz pe locuri precise ale
membranei interne a nucleului contribuind mpreun cu matricea nuclear la
realizarea arhitecturii nucleului; telomerele asigur mperecherea corect a
omologilor i menin integritatea cromosomilor, pierderea lor determinnd
apariia "capetelor lipicioase" care duc la anomalii cromosomice de
structur. De asemenea, telomerele contribuie la replicarea complet a
capetelor cromosomilor prin enzima telomeraza; deficitul n aceast enzim
ar fi implicat n procesele de mbtrnire i de malignizare.
Unii cromosomi (1, 9, 16, Y) prezint pe braele lungi mici ngustri
ale cromatidelor datorate unui tip aparte de heterocromatin. Aceste
ngustri se numesc constricii secundare.
_____________________________________________________________

54

_____________________________________________________________
Toi cromosomii umani acrocentrici cu excepia cromosomului Y
prezint la capetele braelor scurte mici mase dense de heterocromatin
numite satelii. Sateliii sunt ataai printr-un filament scurt numit peduncul
satelifer care constituie o constricie secundar. Pedunculul satelifer este
alctuit dintr-un filament de ADN (care este transcris n ARN nucleolar)
care formeaz regiunea organizatoare de nucleoli. Din aceast cauz
cromosomii cu satelii sunt numii organizatori nucleolari.
Dei neidentificabile prin tehnicile uzuale de citogenetic pe
cromatide se mai descriu situsurile fragile i secvenele autonome de
replicare. Situsurile fragile sunt constricii ale cromatidelor n care
cromosomii se pot rupe mai uor; n aceste situsuri pot exista gene pentru
debilitatea mintal (ex. situsul fra Xq 27 a crui ruptur produce sindromul
X fragil) sau protooncogene (a cror afectare poate fi responsabil de
producerea unor forme de cancer).
Prin tehnici citogenetice de marcare n benzi de-a lungul
cromatidelor apare o succesiune de benzi transversale alternative (pozitive i
negative). Cele mai cunoscute tehnici de bandare sunt: Q (colorare cu un
fluorocrom: quinacrina), G (tripsinizare i colorare cu Giemsa), R (reverse denaturare termic i colorare Giemsa), C (marcheaz heterocromatina
centromeric i din constriciile secundare), T (marcheaz telomerele) i N
(marcheaz organizatorii nucleolari).
Benzile au o dispoziie fix i specific fiecrui cromosom
constituind un important criteriu de identificare a cromosomilor umani.
Benzile reflect structura molecular heterogen a cromatidelor: benzile G +
i Q + marcheaz heterocromatina, mai bogat n timin i adenin, iar
benzile R+ marcheaz eucromatina, mai bogat n citozin i guanin. Din
aceast cauz ntre benzi exist o strict coresponden: benzile Q+
corespund benzilor G+ i celor R-, iar benzile Q- corespund celor G- i R+.
Toate caracteristicile morfologice i structurale descrise reprezint
criterii de identificare a cromosomilor umani. Pe baza lor cromosomii umani
au fost clasificai n 7 grupe, notate de la A la G.

Caracteristicile grupelor de cromosomi umani


Grupa A cuprinde primele trei perechi de cromosomi (1,2 i 3).
Sunt cromosomi mari (9,08 - 7,06 microni); perechile 1 i 3 sunt
metacentrice, pe cnd 2 este submetacentric.
_____________________________________________________________

55

_____________________________________________________________
Cromosomul 1 are trei regiuni pe braul scurt i patru pe cel lung (o
regiune este reprezentat de segmentul de cromatid cuprins ntre dou
repere: centromerul, telomerele, benzi mai importante i care cuprinde o
succesiune de benzi i de subbenzi); pe braul lung prezint o constricie
secundar marcat G+, C+ i R-.
Cromosomul 2 are dou regiuni pe braul scurt i trei pe cel lung.
Cromosomul 3 are cte dou regiuni pe ambele brae.
Grupa B cuprinde perechile 4 i 5. Sunt cromosomi mari (6,55 -6,13
microni) i submetacentrici; ambii cromosomi au o regiune pe braul scurt i
trei pe cel lung, dar braele scurte ale cromosomului 4 sunt mai lungi dect
ale cromosomului 5. Cromosomul 4 se replic precoce n faza S a interfazei,
deci este mai bogat n eucromatin, dect cromosomul 5 care se replic
tardiv; aceast caracteristic permite identificarea lor autoradiografic.
Grupa C conine perechile de cromosomi 6 - 12 i unul sau ambii
cromosomi X n funcie de sexul genetic. Grupa cuprinde 15 cromosomi la
brbat i 16 la femeie. Sunt cromosomi mijlocii (5,84 - 4,46 microni) i
submetacentrici (perechile 8,9,10 i 12 sunt submetacentrice, pe cnd
perechile 6,7,11 i X sunt aproape metacentrice). Cromosomul 9 are o
constricie secundar evident pe braul lung. Gonosomul X are 5,80
microni; n metafazele marcate prin tehnica R prezint dou benzi
pericentromerice marcate intens care delimiteaz un mic "x" n centrul
cromosomului.
Grupa D conine perechile de cromosomi 13, 14 i 15; sunt
cromosomi mijlocii (3,64 - 3,36 microni) i acrocentrici. Toi prezint
satelii pe braele scurte (13ps, 14ps, 15ps) i cte o regiune pe braele scurte
i trei pe cele lungi, cu excepia cromosomului 15 care are doar dou. Sunt
foarte asemntori din care cauz se difereniaz prin marcajul n benzi
diferit. Cromosomii 14 i 15 se replic precoce n faza S, pe cnd
cromosomul 13 se replic tardiv.
Grupa E conine perechile 16, 17 i 18. Cromosomul 16 este
mijlociu (3,23 microni) i este metacentric; prezint o regiune pe braul scurt
i dou pe cel lung. Cromosomii 17 i 18 sunt mici (2,85 2,76 microni) i
submetacentrici; sunt foarte asemntori (au cte o regiune pe braul scurt i
dou pe cel lung) din care cauz se difereniaz prin marcajul n benzi
diferit.
_____________________________________________________________

56

_____________________________________________________________
Grupa F conine perechile 19 i 20; sunt cromosomi mici (2,52 2,33 microni) i sunt metacentrici (au cte o singur regiune pe ambele
brae). Se deosebesc prin marcajul n benzi diferit (fig.15).
Grupa G conine perechile 21, 22 i gonosomul Y la brbat. Sunt
cromosomi mici (1,83 1,68 microni) i acrocentrici. Cu excepia
gonosomului Y (1,96 microni), prezint satelii pe braele scurte (21ps,
22ps). Avnd numr diferit de cromosomi la cele dou sexe (4 la femeie i 5
la brbat), numrarea cromosomilor din grupa G permite stabilirea sexului
genetic. Toi cromosomii au cte o regiune pe ambele brae i se deosebesc
doar prin marcajul n benzi (fig. 15).

Fig. 15: Distribuia benzilor cromosomilor umani metafazici (idiogram).


_____________________________________________________________

57

_____________________________________________________________

3.3. Evoluia cariotipului uman


Complementul cromosomial uman este produsul proceselor de
transmutaie. Studiul filogeniei cromosomilor umani se poate baza pe simpla
comparare morfologic a cromosomilor, n special a "patternurilor" de
benzi. Aceasta permite recunoaterea omologilor interspecifici (homeologi),
n compararea cromosomilor umani cu cromosomii altor specii de mamifere
(n special primate).
Studiile demonstreaz c, cu mici excepii a ctorva grupuri de giboni,
cromosomii primatelor s-au conservat (s-au identificat homeologi de la
prosimieni la om). O situaie diferit s-a petrecut n Ordinul Rodentia, unde
amestecul cariotipurilor a fost att de intens, nct, prin simpla comparare a
cariotipurilor bandate, este imposibil de stabilit homeologia cu cromosomii
umani. Oamenii i maimuele mari (antropoide) prezint similaritate din
punct de vedere biochimic, ca i cum ar fi specii ale aceluiai gen (Bruce
and Ayola, cf. Seunez, 1987). n proteinele cimpanzeului, 99% din
aminoacizi sunt omologi cu cei de la om (asemnare confirmat prin
electroforez) (Goldman et al, cf. Seunez, 1987).
Diferena imunologic mic dintre aceste specii a determinat
includerea maimuelor mari i a omului n aceeai familie Hominidae, cu 2
subfamilii: Ponginae (gen Pongo) i Homininae (gen Pan, Gorilla i
Homo). Studii ale ADN -ului nuclear au demonstrat similaritatea genomic.
De asemenea, i ADN -ul mitocondrial (extranuclear) prezint similitudini
(Seunez, 1987).
n 1981, A.C.Wilson (cf. Raicu, 1997) a studiat comparativ ADN-ul
mitocondrial al omului i maimuelor antropoide i a constatat c
urangutanul este specia cea mai deprtat de om i de celelalte dou
(cimpanzeul i gorila). De asemenea, acest studiu a demonstrat c, linia
uman s-a separat naintea bifurcaiei ntre cimpanzeu i goril, ceea ce
nseamn c cimpanzeul i gorila au avut un strmo biped, comun cu al
omului, i c au devenit patrupede. Se pare c mersul patruped al
cimpanzeului i gorilei este fenomenul cel mai nou al evoluiei (Raicu,
1997).
La populaiile africane, ADNmt prezint un grad de diversitate mai
mare n comparaie cu cel al altor populaii, ceea ce demonstreaz c ele au
o origine mai veche. S-a emis chiar ipoteza existenei unui ADNmt
_____________________________________________________________

58

_____________________________________________________________
aparinnd unei Eve ancestrale, care ar fi trit n Africa acum cca. 200. 000
de ani. S-a determinat i nivelul mediu de divergen al ADNmt, care este
ntre 2 i 4% per milion de ani, confirmndu-se astfel originea african a
omului modern (Raicu, 1997).
Conform teoriei neutraliste a evoluiei moleculare, nivelul mutaiilor
ADN este aproximativ constant, marea lor majoritate fiind neutre din punct
de vedere selectiv. Pe aceast baz s-a realizat un adevrat ceas molecular
al evoluiei, mai ales prin studierea ADNmt, care are un nivel mult mai
ridicat de mutaii n comparaie cu ADN - ul nuclear.
Studiul comparativ al ADN - ului mitocondrial a artat c, toi oamenii
provin dintr-o mam ancestral deoarece ADN-ul mitocondrial se transmite
exclusiv pe linie matern. Mitocondriile nu pot aprea de novo, ci numai din
organite preexistente. De aceea, se poate vorbi de o mam comun tuturor
oamenilor actuali, o adevrat Eva mitocondrial.
Trei cercettori britanici: P. Awadalla, A. Eyre - Walker i J. Maynard
Smith (*** Science et Vie, aprilie 2000) au adus o serie de argumente n
favoarea posibilitii de transmitere a ADNmt patern. Astfel, ovulul conine
peste 100 000 de mitocondrii, iar spermatozoidul conine cteva zeci de
mitocondrii. Aceste mitocondrii conin ADNmt, cu aproximativ 16 000 de
nucleotide. Dac ar fi pus cap la cap ADN-ul mitocondrial din toate
mitocondriile unui ovul, segmentul ar msura miliarde de nucleotide. Faptul
c ADNmt este prezent n mari cantiti n celule, explic de ce acest
ADNmt i nu ADN-ul nuclear este utilizat n studiile de genetic, arheologie
i paleontologie. ADN-ul mitocondrial se transmite viitorului embrion, ca
urmare a unirii dintre ovul i spermatozoid. Cnd capul spermatozoidului
penetreaz ovulul, se introduc nucleul i mitocondriile n gametul femel,
care posed deja propriile mitocondrii. Oul sau zigotul ncepe s se divid,
iar nainte de a patra diviziune celular mitotic (stadiul de 8 celule),
mitocondriile de origine patern au fost practic eliminate. Pn la aceast
eliminare, pot avea loc recombinri cromosomiale ntre ADNmt din
mitocondriile materne i paterne, formndu-se mitocondrii recombinate, ce
se vor menine n embrion. Astfel, teoria Evei mitocondriale ancestrale se va
modifica, dac se va dovedi existena recombinrii ADN - ului mitocondrial
matern i patern.
Deci, nu este surprinztor faptul c omul i maimuele mari
(antropoide) au un numr de cromosomi apropiat: omul (Homo sapiens
sapiens, 2n=46), cimpanzeul (Pan troglodytes), cimpanzeul pigmeu (Pan
_____________________________________________________________

59

_____________________________________________________________
paniscus), gorila (Gorilla gorilla) i urangutanul (Pongo pigmaeus) au
2n=48. Morfologic, se recunosc homeologii ntre specii, fiecare cromosom
uman avnd un cromosom similar la maimue (n cazul cromosomului 2,
braele cromosomiale sunt reprezentate de cte un cromosom la maimue).
Deoarece cariotipul este similar, dar nu identic, evoluia s-a realizat prin
rearanjamente cromosomiale. Cel mai frecvent rearanjament pare a fi
inversia pericentric, mai rar fuziunea cromosomilor acrocentrici neomologi
(probabil la cromosomul 2) (Seunez, 1987).
ntrebarea este cum au putut fi compatibile cu viaa i cu starea de
sntate a individului aceste rearanjamente, deoarece la om, majoritatea
rearanjamentelor cromosomiale implic stri patologice.
La dou specii de urangutani au fost identificate, cu frecven
polimorfic mare, inversii pericentrice ce intereseaz mari regiuni
eucromatice. O posibilitate ar fi ca acest cariotip ancestral s fi fost mai
plastic, mai tolerant la anumite rearanjamente dect complementul
cromosomial al omului modern.
Deosebirea ntre cariotipul uman i cel al celor dou specii de
cimpanzeu const ntr-o pereche n plus de cromosomi acrocentrici din
grupa D. La celelalte dou specii s-au identificat mai muli acrocentrici.
Studiul complementului cromosomial i cercetrile anatomomorfologice i biochimice au artat c cimpanzeul (genul Pan) este cel mai
nrudit cu genul Homo.(tabel 3 - exemple de deosebiri structurale ntre
cariotipurile acestor specii).
Tabel. 3. Exemple de deosebiri structurale ntre cariotipurile maimuelor antropoide
i cariotipul uman (dup Raicu, 1997).
Speciile comparate
Homo sapiens Pan troglodytes
Homo sapiens Pan paniscus
Homo sapiens Gorilla gorilla
Homo sapiens Pongo pygmaeus

Inversii
pericentrice

Inversii
paracentrice

Fuziuni
telomerice

Alte restructurri

1 (?)

1 translocaie

1 restructurare
complex

_____________________________________________________________

60

_____________________________________________________________
Probabil c restructurrile cromosomiale sub form homozigot nu
afectau fertilitatea, dar cele sub form heterozigot determinau o reducere a
fertilitii, fapt pentru care, n populaii relativ mici, cu un anumit grad de
consangvinizare se realiza homozigotarea acestor restructurri i se creau
bariere genetice ce au dus la apariia diferitelor specii.
Un eveniment major n istoria genetic a speciei umane l-a constituit
reducerea numrului de cromosomi de la 2n=48, la 2n=46.
Cercetrile recente au demonstrat c prin fuzionarea de tip
robertsonian a 2 cromosomi acrocentrici a aprut cromosomul uman
numrul 2 ce nu are corespondent la alte specii de primate. Se pare c
fuzionarea centromeric a 2 cromosomi acrocentrici s-a produs accidental
rezultnd un individ cu 2n=47. Prin ncruciarea cu 2n=48 a rezultat o
descenden 50% cu 2n=47. ncruciarea 2n=47 cu 2n=47 a dus la 25%
indivizi cu 2n=46. Astfel, doar n cteva generaii s-a produs reducerea
numrului de cromosomi, eveniment corelat probabil cu o adaptabilitate
mrit a organismelor cu 2n=46, fapt ce a permis rspndirea rapid n cazul
populaiilor respective a noului cariotip.
Cu ajutorul metodelor moderne de bandare s-au putut studia
comparativ cromosomii de la om i primatele nrudite (cimpanzeu, goril,
urangutan), evideniindu-se cele mai importante restructurri ce au afectat
fiecare cromosom (tabel 4). Similitudinile cromosomiale ntre om i
maimuele mari, la nivel morfologic, au fost confirmate n general prin
cartarea genic. Din datele tabelului se constat c 8 din cei 22 de autosomi
umani sunt asemntori cu corespondenii lor din cariotipul primatelor,
respectiv perechile 6, 11, 13, 14, 15, 19, 21, 22. n procesul de evoluie a
cariotipului uman s-au produs 14 inversii pericentrice, precum i multe alte
restructurri cromosomiale (Raicu, 1997).
Homeologia braului cromosomului uman 2 cu cromosomul
maimuelor nu este complet. De exemplu, braul 2p al cromosomului uman
conine loci ce au fost identificai n braul 2q la alte specii i viceversa.
Homeologul cromosomului uman 20 la maimuele antropoide, nu conine
locusul pentru inozin - trifosfat (ITPA), dup cum se observ n tabelul 5
(Seunez, 1987).
Tabel 4. Comparaia cromosomilor umani cu cromosomii ctorva specii de
primate nrudite: cimpanzeu, goril i urangutan (dup Raicu, 1997).
_____________________________________________________________

61

_____________________________________________________________

Cromosomul uman
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
X
Y

Caracteristici ale
homeologului la
cimpanzeu
absena constriciei
fuziune + pierdere
asemntor
inversie pericentric
inversie pericentric
asemntor
asemntor
asemntor
Absena constriciei
Asemntor
Asemntor
Inversie pericentric
Asemntor
Asemntor
Asemntor
Asemntor (?)
Inversie pericentric
Remaniere neidentificat
Asemntor
Asemntor
Asemntor
Asemntor
Asemntor
Talie mic

Caracteristici ale
homeologului la goril
absena constriciei
fuziune + pierdere
asemntor
inversie pericentric
inversie pericentric
asemntor
asemntor
inversie pericentric
remaniere neidentificat
inversie pericentric
asemntor
inversie pericentric
asemntor
asemntor
asemntor
inversie pericentric
inversie pericentric
remaniere neidentificat
asemntor
asemntor
asemntor
asemntor
asemntor
asemntor

Caracteristici ale
homeologului la
urangutan
absena constriciei
Fuziune
inversie pericentric
inversie pericentric
Asemntor
Asemntor
remaniere neidentificat
remaniere neidentificat
remaniere neidentificat
remaniere neidentificat
asemntor
asemntor
asemntor
asemntor
asemntor
asemntor (?)
inversie pericentric
remaniere neidentificat
asemntor
remaniere neidentificat
asemntor
asemntor
asemntor
asemntor

Tabel 5. Poziia cromosomial a locilor omologi la om, la maimuele


antropoide i la cteva maimue din Lumea Veche (dup O'Brien, cf.
Seunez, 1987).

Cromosomul
uman

Marker

Cromosomul
la
cimpanzeu

Cromosomul
la goril

Cromosomul
la urangutan

Cromosomul
la maimua
Rhesus

Cromosomul
la babuin

1p
1p
1p
1p
1p
1q
1q

PGM1
PGD
ENO1
AK2
FUCA
PEPC
FH

1
1
1
1
-

1
1
1
1
1

1q
1q
1q
1q
1
1p

1
1
1
1

1
1
1
1
-

Cromosom la maimua verde


African

1
1
1
1
6
6

_____________________________________________________________

62

_____________________________________________________________
1q
2p
2p
2q
3
4p
4p
5
6p
6p
6p
6q
6q
6q
7q
7
8p
9p
9p
9q
10p
11p
11p
12p
12p
12p
12q
12
13q
14q
14q
15q
15q
15q
15q
15q
17q
17q
18q
19
20p
20q
21q
22
X
X
X
X

GUKI
MDH1
ACP1
IDH1
GPX1
PGM2
PEPS
HEXB
GLO
MHC
HLA
PGM3
SOD2
ME1
GUSB
MDH2
GSR
ACO1
AK3
AK1
GOT1
LDHA
ACP2
GAPD
TPI1
LDHB
PEPB
CS
ESD
NP
CKBB
MPI
PKM2
HEXA
IDH2
SORD
TK
GALK
PEPA
GPI
ITPA
ADA
SOD1
NAGA
G6PD
HPRT
GLA
PGK

13 (12)
13 (12)
12 (13)
2
3
(4)
5
5
5
5
5
6
7
11
11
11
8
9
9
10
10
10
10
(14)
15
16
16
16
19
19
17
20
15 (21)
22
X
X
X
X

11 (12)
12 (11)
2
3
(4)
5
5
5
5
6
7
13
13
8
9
10
10
10
10
14
18
15
15
19
19
16
20
18 (21)
22
X
X
X

11 (12)
11 (12)
12 (11)
(2)
3
4
5
5
5
5
(10)
6
(13)
7
8
9
9
9
9
(14)
(15)
(16)
19
(17)
20
(21)
22
X
X
-

1
15
9
3
6
5
2
2
2
2
2
8
11
11
12
12
12
12
12
7
7
7
7
19
13
13
X
X
-

12
5
5
4
4
4
3
14
11
7
7
7
7
7
7
10
10
3
-

5
10
U1
U1
12
13
13
13
13
13
U2
U3
U2
U2
25
X
X
X

_____________________________________________________________

63

_____________________________________________________________
Cromosomul Y prezint un polimorfism accentuat att la om, ct i la
primate, astfel c este dificil de determinat modul cum a evoluat. n schimb,
cromosomul X pare s fie foarte stabil, el evolund foarte puin sau deloc
fa de cromosomul X ancestral. Astfel, un exemplu de conservatorism n
evoluia cariotipului uman este cromosomul X. Loci ai genelor pentru
G6PD,
PGK
(fosfogliceratkinaza),
HPRT
(hipoxantinfosforiboziltransferaza) i GLA (alfa galactozidaza) au fost
identificate pe cromosomul X la iepure, oaie, porc, vac, pisic, hamster,
oarece, obolan, cimpanzeu i om (tabel 6).
Tabel 6. Gene omoloage la nivelul cromosomului X, la diferite specii de
mamifere (dup Seunez, 1987).

Cromosomul
uman

Marker

Xq
Xq
Xq
Xq

G6PD
HPRT
GLA
PGK

Locusul
la
oarece
G6pd
Hprt
Ags
Pgk-1

Cromosomul
la pisic

Cromosomul
la iepure

Cromosomul
la cine

Cromosomul
la vac

X
X
X
-

X
-

X
X
X
-

X
X
X
X

Cromosomul
la oaie
X
X
X
X

n figura 16 se observ c la nivelul cromosomului 1 uman locii


linkai pentru ENO1 (enolaza 1), PGD (fosfogluconatdehidrogenaza),
PGM1 (fosfogluconatmutaza), FH (alfa fucozidaza) i PEP-C (peptidaza C)
se menin la maimuele mari i la maimua Rhesus i la babuin, dar nu i la
maimua verde African. Studiul morfologic al cromosomului 1, n
comparaie cu homeologii, demonstreaz c, doar cromosomul uman 1
prezint o constricie secundar proximal la nivelul braului lung. Absena
constriciei secundare la homeologii cromosomului 1 la maimue schimb
raportul braelor, astfel c, la om, braul scurt al cromosomului 1 (1p) este
homeolog cu braul lung al cromosomului 1 de la celelalte specii (1q) i
viceversa (Seunez, 1987).
Dup Seunez, 1987, exist 3 ipoteze ale evoluiei cromosomului 1 la
aceste specii dintr-un ancestor (fig. 17, 18 i 19).
Un alt exemplu, evideniaz un conservatorism perfect al
cromosomilor la Cercopitecidae. (ex. homeologii evideniate prin bandare G
_____________________________________________________________

64

_____________________________________________________________
la om i maimua Rhesus i babuin). Maimua Rhesus (Macaca mulatta) i
babuinul (Papio papio) prezint acelai cariotip, dar caracterele morfologice
diferite ale aceleiai specii alopatrice au dus la includerea lor n genuri
diferite.
E N O -1
E N O -1

E N O -1

E N O -1

PG D

PG D

PG D

P G M -1

P G M -1

P G M -1

P G M -1

FH

FH

P E P -C

P E P -C

FH
P E P -C
OM

M A IM U E
A N T R O P O ID E

B A B U IN

M A IM U A V E R D E
A F R IC A N

Fig. 16. Schema comparativ a distribuiei unor gene la nivelul cromosomului uman 1
i la homeologii de la maimuele antropoide, maimua Rhesus, babuin
i maimua verde African (dup Seunez, 1987).

_____________________________________________________________

65

_____________________________________________________________
M A IM U A V E R D E
A F R IC A N

f u z iu n e
B A B U IN

In v e r s ie p a r a c e n t r ic
i f u z iu n e

M A IM U E
A N T R O P O ID E

C A T A R IN E
ANCESTRALE

c o n s t r ic i e s e c u n d a r

OM

Fig. 17. Prima ipotez

fis iu n e

M A IM U A V E R D E
A F R IC A N

B A B U IN

I n v e r s ie p a r a c e n t r ic
M A IM U E
A N T R O P O ID E
C A T A R IN E
AN CESTRALE

c o n s tr ic ie s e c u n d a r

O M

Fig. 18. A doua ipotez

_____________________________________________________________

66

_____________________________________________________________
f i s iu n e

M A IM U A V E R D E
A F R IC A N

B A B U IN

In v e r s ie p a r a c e n tr ic

M A IM U E
A N T R O P O ID E
C A T A R IN E
ANCESTRALE

c o n s t r ic ie s e c u n d a r

O M

Fig. 19. A treia ipotez

Macaca i Papio 2n=42


Hylobates, Presbytes, Colobus 2n=44
Erythrocebus patas 2n=54
Cercopithecus sp. 2n=54, 60, 66, 72 (multiplu de 6)
Maimue antropoide 2n=48
S-au constatat o serie de similitudini ntre cromosomii umani i
cromosomii pisicilor domestice . Un procent de 20% din complementul
cromosomial uman este reprezentat de regiuni homeoloage ale
cromosomilor de om i pisic (fig. 20).

_____________________________________________________________

67

_____________________________________________________________
OM
1

P IS IC
C1

PG M 1
PG D

OM
9

PG M 1
PG D

A3
M DH 1
AC P1

H K

IT P A
AD A

IT P A
AD A

B1

PEPS
IL 2

PEPS
IL 2

15

LD H A
ACP2

12

U4
PEPA

19

B4

TPI
G APD
LD HB
PEPB

TPI
G APD
LD H B
PEPB

13
LO
G M 3
E1
O D 2

18

U2

G PI

B2
G
P
M
S

M PI
PKM 2
H EXA

PE PA

D1

LD HA
AC P2

N P

M PI
PKM 2
H EXA

H K

11

P IS IC
B3

N P

D4
PP

M D H 1
AC P1

20

LO
G M 3
E1
O D 2

AK1

ID H 1

OM
14

PP

ID H 1

G
P
M
S

AK1

10

P IS IC
U5

ESD

G PI

21

C2

SO D 1

SO D 1

8
G SR

A1
ESD

G SR

X
G 6PD
H PRT

X
G 6PD
H PRT

Fig. 20. Asociaii de nlnuire (linkage) la cromosomii umani i la


cromosomii de pisic domestic (schem dup Seunez, 1987).

n concluzie, comparaia cariotipurilor i a plasrii genelor pe


cromosomi la diverse mamifere demonstreaz o evoluie conservatoare.
Aceast situaie a permis realizarea filogeniei cromosomilor umani i
stabilirea asociaiilor de nlnuire (Seunez, 1987).
Complementul cromosomial al mamiferelor a suferit modificri
drastice de la apariia acestora pe Pmnt. Rearanjamentele cromosomiale sau produs cu rate diferite la diferite ordine de mamifere. Un exemplu de
cariotip cu rearanjamente cromosomiale majore este la Ordinul Rodentia, n
timp ce la Primate, cariotipul este mult conservat. n evoluia cariotipului
uman au alternat perioade de stagnare cu perioade de intense rearanjamente
_____________________________________________________________

68

_____________________________________________________________
cromosomiale. Cromosomii homeologi prezint asociaii similare de linkage
la genele structurale, cu excepii la nivelul secvenelor repetitive (ADN
satelit, la nivelul centromerului). Identificarea cromosomilor homeologi cu
cei umani trebuie extins la alte mamifere n afara primatelor (ex. pisica
slbatic). Anumite rearanjri cromosomiale s-au produs cu o frecven mai
ridicat n evoluia cariotipului.
Datorit migraiei pe suprafaa globului s-au produs unele diferenieri
genetice ale populaiei iniiale i au aprut rasele. O ras este considerat a fi
o populaie alctuit din indivizi cu numeroase gene n comun i care poate
fi deosebit de alte rase prin fondul ei de gene.
Deosebirea ntre rase se baza exclusiv pe diferene anatomomorfologice, dar recent se utilizeaz polimorfismul genetic i frecvena sa.
Se disting 3 rase: negroid, mongoloid, caucazoid. Mai exist i dou
grupe mai mici: capsoid (boimanii i hotentoii) i australoid (aborigenii
australieni i negritos) (Raicu, 1997). Majoritatea diferenelor dintre rase se
datoreaz izolrii produse ca rezultat al separrii prin migraie. ntre rasele
umane nu exist o separaie perfect i ele nu sunt entiti bine
individualizate, nct unii cercettori chiar neag existena raselor.
Majoritatea genelor sunt comune pentru toate rasele, cu unele mici
diferene cantitative. Exist i unele caractere genetice prezente numai la
una dintre rase i absente la celelalte dou. Frecvena genelor variaz ntre
populaii i rase, astfel c este dificil clasificarea diferenelor rasiale.
Frecvena diferit a unor gene n cadrul diverselor rase este
determinat de selecia natural, ce induce adaptarea la medii diferite.
Astfel, pigmentaia pielii i radiaiile UV au o strns dependen,
determinnd diferene rasiale importante. Exist excepii de la acest
fenomen: eschimoii i pigmeii africani. Ambele populaii sunt puternic
pigmentate, dar se pare c eschimoii obin vitamina D de la pete i din
ficatul unor animale marine, iar pigmeii din larvele unor insecte. Alt
exemplu este prezena enzimei lactaz n celulele epiteliale ale intestinului.
Aceasta metabolizeaz lactoza din lapte n glucoz i galactoz. Gena
respectiv este funcional la nou-nscui i funcioneaz doar n proporie
de 10% mai trziu. La triburile nomade de beduini din Africa, ce se hrnesc
aproape exclusiv cu lapte, gena este funcional, determinnd avantaje
selective.
Studiul comparativ al grupelor sangvine, al proteinelor i acizilor
nucleici a demonstrat c 85% din variabilitatea genetic caracterizeaz
_____________________________________________________________

69

_____________________________________________________________
indivizii fiecrei rase, n timp ce numai 10% este caracteristic grupelor
rasiale i 5-8% populaiilor aceluiai grup rasial. Distana genetic calculat
dup nivelul de nlocuire a alelelor nu este dect de 0,03% ntre grupe
rasiale, n timp ce ntre subspecii este de 0,17-0,22%, iar ntre om i
cimpanzeu de 0,62%. Este vorba de o difereniere minor ntre rase,
caracteristic populaiilor (Raicu, 1997).
Foarte interesant este studiul ADN mitocondrial. S-a demonstrat c
acesta este uniform n cadrul speciei umane, deosebirea ntre indivizi fiind
doar de 0,3% n ce privete secvena de nucleotide. La indivizii altor specii
diferena este de 3 pn la 30 de ori mai mare. Studiul ADN mitocondrial la
om i al frecvenei mutaiilor n genomul mitocondrial a relevat existena
unui grad mare de diversitate la populaiile africane fa de alte populaii,
ceea ce demonstreaz c ele au o origine mai veche. Se poate conchide c
nu exist argumente pentru o clasificare ierarhic a raselor umane. Termenul
de ras este preferabil a se nlocui cu cel de grup etnic sau populaie (Mange
& Mange, 1990).

3.4. Evoluia concepiei referitoare la structura genei


Concepiile clasice referitoare la structura i funcia genei au aprut pe
baza experimentelor lui Mendel i Morgan.
3.4.1. Concepia clasic despre structura genei
n concepia clasic, gena este un segment cromosomial bine
delimitat, indivizibil (continuu), ce ocup o poziie fix n cromosom (locus)
i determin un caracter specific.
n aceast concepie gena este o unitate structural.
Dac are loc o mutaie ntr-o gen normal, apare o form alternativ
(alel), ce ocup acelai locus i determin acelai caracter. n unele
populaii poate apare fenomenul de polialelie (ex. grupele sangvine), dar
locusul pe cromosomul omolog va fi ocupat de o singur alel, la un individ
putnd exista maxim dou dintre alele. Deci, gena este unitate mutaional.
_____________________________________________________________

70

_____________________________________________________________
n toate celulele somatice 2n cromosomii formeaz perechi de
omologi, locii cu aceeai poziie pe cromosomii omologi numindu-se loci
omologi. n anafaza meiozei I, alelele perechilor de omologi segreg.
Gameii sunt genetic puri. Un cromosom conine mii de gene nealele
nlnuite (dispoziie monomeric). Genele nlnuite se transmit n bloc,
fr a segrega n timpul meiozei. Deci nu exist segregare n transmiterea
genelor nlnuite de la prini la copii. Dar linkage-ul nu este absolut. n
profaza
meiozei
I
are
loc
crossing-overul
(recombinarea
intracromosomial). Deci gena este o unitate de recombinare genetic.
3.4.2. Concepia actual privind structura genei
Concepia actual este bazat pe descoperirile geneticii moleculare.
Gena este un segment polinucleotidic de ADN, ce determin sinteza
unui produs primar specific (biomolecul).
Genomul uman cuprinde doar 50 000 de gene structurale (ce codific
proteine), restul nucleotidelor alctuind ADN-ul noninformaional.
n aceast concepie gena nu mai este un segment cromosomial
continuu, ci este constituit dintr-o parte central ("cadrul de lectur") care
va fi transcris ntr-o molecul de ARNm precursor i din dou regiuni
laterale cu rol reglator. Zona central prezint dou tipuri alternative de
secvene polinucleotidice: exoni (secvene nucleotidice informaionale, ce
codific proteine) i introni (secvene noninformaionale, de lungimi
diferite, ce ncep cu G, T i se sfresc cu A, G). n ARNm precursor sunt
transcrii att exonii ct i intronii; n ARNm matur se afl doar exonii,
intronii fiind eliminai prin procesul de matisare (secionare la nivelul
nucleotidelor GT i AG). Rolul intronilor nu este precis cunoscut; probabil
au contribuit la evoluia genelor prin duplicare i asamblare n ordini
diferite.
naintea primului exon, n zona central se descriu, n ordinea 5'-3':
situsul de iniiere al transcripiei, o scurt regiune transcris, dar necodant
i codonul iniiator (ATG). Dup ultimul exon urmeaz, tot n ordinea 5'-3':
codonul stop (TAA, TGA sau TAG), o secven transcris, dar necodant,
situsul de terminare a transcripiei i situsul de poliadenilare (unde n
molecula de ARNm va fi adugat secvena poli-A).
Regiunile laterale nu sunt transcrise n ARNm precursor i au rol
reglator al procesului de transcripie. La captul 5' (n amonte) regiunea
_____________________________________________________________

71

_____________________________________________________________
lateral ncepe cu un situs la care se ataeaz o serie de activatori
(enhancers) sau moderatori (silencers) ai transcripiei, urmat de un situs de
reglare cu specificitate de esut i, lng regiunea central, de promotor. n
regiunea promotor se descriu dou situsuri: CCAAT spre 5' i TATA spre
partea central. La CCAAT se vor fixa factorii de transcripie, iar la TATA se
fixeaz transcriptaza. La genele domestice (active n toate tipurile celulare housekeeping genes) promotorul este mai simplu coninnd doar secvena
GCGC.
La captul 3' regiunea lateral conine o serie variabil de secvene
nucleotidice cu rol de procesare i stabilizare a ARNm.
codon
S TA R T
5'

RNA
p o l.

FT

C C A A T

T A T A

p ro m o to r

r e g iu n e a la te r a l 5 '

codon
STO P

Ex1

In 1
G T

Ex2

In 2

Ex3

3'

AG

r e g iu n e a c e n t r a l

r e g iu n e a la te r a l 3 '

Fig. 21: Gen ipotetic care ilustreaz concepia actual despre structura unei gene
care sintetizeaz proteine.

Genele sunt organizate n uniti mai mari (operoni), ns genele pot fi


alctuite din subuniti (cistroni). n ceea ce privete funcia sa, o gen poate
produce mai multe proteine (ex. gena proopiomelanocortinei) i, invers, mai
multe gene pot colabora la sinteza unei singure proteine ("minigenele"
imunoglobulinelor). n anul 1940, C. Olivier a publicat prima dovad a
existenei crossing - overului intragenic.
innd cont de toate acestea definiia genei devine: un ansamblu
linear de secvene de ADN care formeaz o unitate de transcripie.
Transpozonii
Unele gene i pot schimba locusul de la un cromosom la altul. Aceste
elemente genice mobile se numesc transpozoni. n condiii normale de
mediu, transpozonii se gsesc inserai, n mod stabil, n anumii loci n
genom. Sub aciunea unor factori inductori se produce o destabilizare a
genomului, avnd loc migrarea transpozonilor i inseria lor n diveri loci,
_____________________________________________________________

72

_____________________________________________________________
determinnd restructurri cromosomiale i inactivarea sau potenarea
genelor adiacente (Butnaru et al, 1999).
Elementele genetice mobile sau transpozabile au fost descoperite la
porumb, din 1940, de Barbara McClintock, care a observat fenomenul de
instabilitate somatic datorit cruia pe frunze, tulpini, inflorescene etc.,
apar pete de culoare; a demonstrat c, anumite elemente genetice din
genomul porumbului modific expresia altor gene din situsuri adiacente.
Transpozonii sunt segmente ale macromoleculei de ADN cu
dimensiuni de 750-40000 pb, capabile s circule n cadrul genomului i s se
insere n diveri loci fr a ine seama de omologie, adic de
complementaritatea nucleotidelor. Transpoziia se produce la nivelul ADN ului nuclear, dar i n ADN - ul mitocondrial i cloroplastic.
La om, ca i la alte eucariote, multe secvene de ADN moderat
repetitive aparin familiilor de elemente transpozabile. n genomul uman se
gsesc dou grupe importante de elemente genetice transpozabile: elemente
genetice din familia SINE (engl. Short Interspersed Nuclear Elements),
mai mici de 500 pb i din familia LINE (engl. Long Interspersed Nuclear
Elements), ntre 5 i 7 kb.
Familia SINE cuprinde familia Alu de la primate i din genomul
uman. Secvenele Alu din genomul uman au o mrime de cca. 300 pb, sunt
flancate de secvene direct repetate de 7 pn la 20 pb. i se gsesc n numr
de cca. 5 x 105 copii per genom, reprezentnd aproximativ 5% din cantitatea
total de ADN din genomul uman; sunt dispersate n ntreg genomul uman,
n medie o copie la fiecare 5000 pb.
n familia LINE de la primate se gsesc elemente genetice
transpozabile denumite Kpn, iar la roztoare exist o familie nrudit MIF1
sau B1. Aceste secvene de nucleotide de la om i oarece sunt nrudite,
fiind redenumite L1. Elementul transpozabil L1, de fapt retropozonul
(retrotranspozonul, ce se deplaseaz n molecula de ARN, revers transcris
n ADN) LINE - 1 sau L1 este singurul cunoscut a fi activ n genomul
uman; este prezent n 50 000 pn la 100 000 de copii per genom (Snustad
et al., 1997).

Transpozonii i unele maladii genetice umane


Transpoziia secvenei Alu n anumite gene i rearanjamente ale
macromoleculei de ADN, cauzate de recombinri ntre dou secvene Alu,
_____________________________________________________________

73

_____________________________________________________________
pot produce fenotipuri mutante. De exemplu, s-a constatat c, drept urmare a
inseriei secvenelor Alu n gene, apar alele mutante ce determin
acolinesterazemia (deficiena enzimei colinesteraza, inducnd o paralizie
trectoare) i neurofibromatoza (tumor a esutului nervos). Numeroase
cazuri de hipercolesterolemie (cantiti crescute de colesterol n snge,
datorate deficienei receptorilor de colesterol din celulele ficatului) i
talasemia (deficiena n hemoglobin) sunt rezultatul rearanjamentelor
genice, ca urmare a recombinrii ntre secvene strns linkate Alu. Aceste
rezultate demonstreaz c secvenele Alu au jucat i vor juca un rol major n
evoluia genomului uman (Snustad et al., 1997).
S-au descoperit dou cazuri de inserii ale elementelor L1 n gena
factorului VIII de coagulare la om, fapt ce determin apariia hemofiliei A.
Elementul L1 inserat pare a fi produs prin reverstranscripia ARN, realizat
de un element L1 din cromosomul 22. Curios este faptul c, la goril,
cromosomul homeolog cu cromosomul 22 uman, poart acest element L1,
sugernd faptul c, acesta a fost prezent naintea divergenei omului i
gorilei - cu aproximativ 6 milioane de ani n urm (Snustad et al., 1997).
Deci, hemofilia A este o maladie genetic ce poate aprea nu numai prin
motenirea genei mutante (X recesiv) de la genitori, ci i prin mutaii
determinate de fenomenul transpoziiei n generaia respectiv.
Au fost identificate trei cazuri de inserii ale retrotranspozonului L1
(mobilitatea se realizeaz prin intermediul ARN, se multiplic prin
transcripie, reverstranscripie i reintegrare ntr-un locus n genom) n gena
distrofinei, a crei inactivare determin distrofia muscular Duchenne
(maladie X recesiv).
Alt exemplu este un cancer de sn, la care s-a demonstrat inseria unui
retrotranspozon L1 n cel de-al doilea intron al protooncogenei c-myc, prin
care oncogena a fost activat. Secvenele nalt repetitive Alu i LINE
manifest preferin pentru integrarea n diverse regiuni ale genomului,
bogate n perechi de nucleotide A-T, determinnd astfel mutaii.
Transpoziia este indus de stress, radiaii, substane chimice, ocuri de
temperatur i are drept consecin destabilizarea genomului, mobilitatea
transpozonilor i o frecven mare a mutaiilor (Raicu, 1997).
Deci, transpozonii pot activa sau inactiva o gen: i pot schimba
poziia i se pot introduce ntr-o gen normal ce nu va mai funciona, sau
pot prsi locul de inserie i gena i reia activitatea. La locul de inserie n
_____________________________________________________________

74

_____________________________________________________________
genom se creeaz un punct fragil n care ADN se poate rupe, rezultnd
rearanjamente cromosomiale, cu importan n evoluie.
Elementele genetice transpozabile, din genomul uman, constituie o
surs curent de mutaii, n special prin inseria lor n exonii sau intronii
unor gene. Studii filogenetice comparative, la diferite specii de mamifere, au
demonstrat existena unor episoade n care numrul de transpozoni L1 crete
semnificativ, iar rata mutaiilor variaz considerabil n cursul evoluiei.
Raportul strns, dintre numrul de copii ale transpozonului i rata mutaiilor,
permite explicarea vitezei diferite a evoluiei, n cursul filogeniei.
Cercetri privind secvenele Alu i L1, la diferite specii de mamifere,
au artat c: au o structur nrudit, s-au multiplicat relativ recent ntr-un
numr mare de copii i s-au rspndit n diverse genomuri. Toate acestea au
avut rol n expresia genic, provocnd modificri fenotipice nsemnate, ce
au favorizat procesul de evoluie.
Referitor la maladiile genetice umane, existena transpozonilor i
circulaia lor n cadrul genomului constituie o surs important de mutaii.
Familiile de gene i pseudogenele
Familiile de gene sau familiile multigenice apar printr-un proces de
duplicaie a unei gene ancestrale, urmat de divergena structural i
funcional a celor dou copii, n cursul evoluiei.
n cultura de celule de mamifere, s-a demonstrat experimental c,
astfel de mutaii, pot fi evideniate n cazul tratamentului cu substane
citotoxice, care au rol selectiv i determin mrirea rezistenei celulare.
Acelai fenomen a fost evideniat i n cazul tumorilor maligne (Raicu,
1997).
La eucariote, genele ce codific proteine necesare n cantiti mari
sunt prezente ntr-un numr mare de copii. Familia genelor histonelor
conine 5 gene majore ce codific cele 5 histone (H1, H2a, H2b, H3 i H4).
Genele ce codific sinteza i globinei alctuiesc cele dou
familii de gene ale hemoglobinei, cu structur nrudit, provenind dintr-o
gen ancestral, prin duplicaie. Fiecare gen a suferit duplicaii ulterioare i
a acumulat mutaii pentru a forma cele dou familii genice actuale, situate
pe cromosomi diferii. n fiecare familie exist gene ce funcioneaz n
anumite etape ale ontogeniei. Genele pentru globine exist pe
cromosomul 16, iar pentru globine, pe cromosomul 11 uman. La om
_____________________________________________________________

75

_____________________________________________________________
genele globinei se gsesc dispuse pe braul scurt ntr-o regiune de 25 kb,
n care sunt incluse 4 gene: dou funcionale la embrion ( i 1) i dou la
adult 1 i 2. De asemenea familia genelor cuprinde i trei pseudogene
(care au acumulat mutaii i nu au funcionat niciodat): 1, 2 i .
Genele familiei globinei sunt incluse ntr-o regiune de 50 kb a braului
scurt i familia este alctuit din 5 gene: una embrionar (), dou fetale ( A
i G) i dou ale adultului( i ). i aceast familie conine dou
pseudogene: 1 i 2. Genele se amorseaz, se exprim i sunt represate
n diferite perioade ale vieii ontogenetice n conformitate cu programul
genetic, hemoglobinele rezultate prezentnd avantaje pentru embrion, fetus
sau adult avnd afiniti diferite pentru oxigen.
n general, la mamifere se observ c genele unei familii sunt
aliniate de-a lungul cromosomului, n ordinea n care vor funciona n cursul
dezvoltrii individuale. Acestea sunt familii multigenice nonrepetitive.
Familiile multigenice sunt utile pentru organism, deoarece, se poate
sintetiza o cantitate mai mare de proteine sau se pot sintetiza proteine foarte
nrudite, ce determin mrirea variabilitii i complexitii organismelor,
precum i adaptarea lor mai eficient la mediu.
n evoluie, s-a constatat c, are loc o cretere a numrului de gene
discontinue, spaiile intergenice devin mai mari, secvenele repetitive devin
mai numeroase i se ntlnesc mai des familii multigenice.
Existena familiilor multigenice constituie un motor evolutiv
puternic. Un exemplu, l constituie genele ce codific ARNr; astfel ntre
dou specii vecine exist diferene semnificative, ns, n cadrul aceleiai
specii exist cteva sute de gene identice, aprute prin fenomenul de
amplificare genic.

_____________________________________________________________

76

_____________________________________________________________

Fig. 22: Familiile genelor globinei i globinei

Familia multigenic a miozinei (superfamilia genic a miozinei),


aprut n cursul evoluiei eucariotelor, cuprinde cel puin 11 clase de gene
nrudite, ce determin sinteza unor proteine implicate n citochinez,
fagocitoz, micarea celular, contracia muscular etc. De exemplu,
modificri ale miozinei determin o form familiar de cardiomiopatie
hipertrofic (FHC) - maladie autosomal dominant, manifestat prin
hipertrofia inimii, dezordini ale miocitelor i riscul unei mori subite. Sunt
cunoscute mutaii ale acestor 5 gene diferite ce pot determina aceast
maladie, cum sunt: genele tropomiozinei, gena lanului greu al miozinei
cardiace, gena troponinei T i izoforma cardiac a miozinei ce leag
proteina C.
O mutaie produs n unul din cei 5 loci ai genelor miozinei,
determin sindromul Usher, cea mai comun cauz a pierderii auzului i
vederii la om. Persoanele ce prezint acest sindrom manifest modificri
profunde privind rspunsul vestibular i o degenerare a retinei (retinitis
pigmentosa) (Raicu, 1997).
Pseudogene
_____________________________________________________________

77

_____________________________________________________________
n familiile multigenice exist i pseudogene, gene nefuncionale,
dar nrudite ca structur cu cele funcionale; ele sunt dnumite (psi). De
exemplu, n familia globinei umane exist pseudogenele 1, 2 i ,
nrudit structural cu cele funcionale. Pseudogenele includ numeroase
mutaii punctiforme, deleii etc., ce determin nefuncionalitatea lor. S-au
identificat pseudogene i n familia genic a globinei (1 i 2).
Pseudogenele reprezint adevrate relicte ale procesului de evoluie,
ele fiind de fapt gene silenioase nefuncionale; prezint o omologie de 7080% cu genele funcionale.
Dei fapt dovedit iniial la plante, i n diviziunea mitotic uman pot
aprea schimburi i ntre cromatidele surori "sister chromatid exchange".

3.5. Evoluia concepiei despre funcia genei


n concepia clasic, conform experimentelor lui Gr. Mendel,
"factorii ereditari" (actual gene) controleaz trsturile fenotipice. O pereche
de gene determin un caracter, deci gena este o unitate funcional.
S-au descris dou abateri de la conceptul "o gen - un caracter":
poligenia (ex.dermatoglifele) i pleiotropia (ex sindromul Marphan).
Expresia genic poate fi influenat de interaciunile alelice
(dominan/recesivitate i codominana), de interaciunile nealelice
(epistazia) sau de factorii de mediu (dominana neregulat).
Un numr mare de mutaii induse demonstreaz c modificrile
genelor determin modificri n formele de manifestare ale caracterelor (ex.
mutaia genei localizate pe cromosomul X ce codific sinteza factorului VIII
de coagulare, induce hemofilia).
n jurul anilor 1900, A. Garrod a studiat cteva maladii metabolice
umane, printre care alkaptonuria, albinismul, cistinuria, pentozuria i
porfirinuria.
Alkaptonuria este determinat de prezena n urin a acidului
homogentisic, numit i alkapton, un intermediar al degradrii aminoacizilor
aromatici tirozin i fenilalanin (fig. 20). Garrod a presupus c, prezena
respectivului compus n urina bolnavilor, se datoreaz unui blocaj survenit
n calea normal de metabolizare a acestuia. Studiul pedigriului, l-a condus
pe Garrod la concluzia c, aceast maladie este transmis de o singur gen
recesiv. n anul 1902, el scria "exist motive ntemeiate pentru a crede c
_____________________________________________________________

78

_____________________________________________________________
alkaptonuria nu este manifestarea unei boli, ci mai degrab, natura unui curs
alternativ al metabolismului, nevtmtor, i, de obicei, congenital i pe
toat durata vieii". Dei detaliile privind calea metabolic afectat de gena
recesiv ce induce alkaptonuria au fost depistate mult mai trziu, Garrod a
dedus existena relaiei dintre gene i metabolism, concepia sa putnd fi
redat sub forma "o gen recesiv - un blocaj metabolic". (cf. Bra, 1999).
Beadle i Tatum, corelnd analizele genetice cu datele oferite de
studii biochimice asupra diverselor tulpini mutante de Neurospora crassa,
au demonstrat c, o mutaie are drept rezultat pierderea activitii unei
enzime. Astfel, conceptul "o gen - o enzim" a devenit un aspect central al
geneticii moleculare. Studiile realizate ulterior, au dovedit c multe enzime
i proteine structurale sunt constituite din dou sau mai multe lanuri
polipeptidice diferite, codificate de gene separate. Din acest motiv,
conceptul "o gen - o enzim" a fost modificat n forma "o gen - o
polipeptid" (Snustad et al., 1997).
Avnd n vedere c moleculele de ARNt i ARNr sunt sintetizate, la
rndul lor, pe baza informaiei deinute de gene, concepia clasic privind
funcia genei a fost nlociut cu conceptul actual "o gen - o biomolecul".
Gena are un efect primar (o protein sau o molecul de ARN),
controlnd secvena aminoacizilor ntr-o protein. Acest efect primar induce
un efect secundar (la nivel celular) i un efect teriar (la nivel tisular, de
organ, organism). Deci, calea de realizare a expresiei fenotipice a unei gene
este complex (fig. 24).
De exemplu, gena ce codific lanul al hemoglobinei A1 prezint n
poziia a 6-a codonul CTC. Acesta determin al 6-lea aminoacid (acid
glutamic) n lanul . Prin mutaia T n A codonul devine CAC ce determin
aminoacidul valina. nlocuirea acidului glutamic cu valina determin
hemoglobina S (anormal) ce determin anemia falciform (sicklemia).
Hemoglobina S este efectul primar al mutaiei genice, iar forma de
secer a hematiilor este efectul secundar. Hematiile n form de secer
hemolizeaz rapid producnd anemia (efect teriar).

_____________________________________________________________

79

_____________________________________________________________
NH2
CH2CHCOOH
Fenilalanina
Hidroliza
NH2
HO

CH2CHCOOH
Tirozina

HO
CH2COOH
OH
Acid homogentisic
Oxidaza acidului homogentisic

Alcaptonuria

O
CH3CCH2COOH +

HOOCHC

Acid acetoacetic

CHCOOH

Acid fumaric

CO2 + H2O

Fig. 23. Calea metabolic de formare a acidului homogentisic i apariia


alkaptonuriei prin blocarea catabolismului fenilalaninei datorat mutaiei
genei ce codific enzima acid oxidaza homogentisic(modificat dup
Snustad et al, 1997).

_____________________________________________________________

80

_____________________________________________________________

NUCLEU
G EN

Exon

In tro n

E xon

ADN
T r a n s c r ip ie

ARNm
p re c u rs o r
M a tu r a re A R N

ARNm
m a tu r M G --

C IT O P L A S M
ARNm

-(A )n

T ra n s p o rt
n c ito p la s m

M G --

-(A )n
T r a n s la ie

P r o te in

Fig. 24. Calea de exprimare fenotipic a unei gene.

Relaia "o gen - o protein" a fost modificat, ca urmare a


cercetrilor din ultimii douzeci de ani i n sensul "o gen - dou sau mai
multe polipeptide" (ex. calcitonina i parathormonul), "o gen - un precursor
polipeptidic mare - mai multe polipeptide" (ex. gena proopiomelanocortinei), "o secven nucleotidic unic - dou gene cu suprapunere limitat
- dou polipeptide distincte" i "mai multe gene - o protein complex" (ex.
genele pentru regiunile constant i variabil a imunoglobulinelor).

3.6. Mecanisme moleculare ale expresiei genice


_____________________________________________________________

81

_____________________________________________________________

(transcripia, translaia)
Conform dogmei centrale a biologiei moleculare, informaia genetic
se transmite de la ADN la AD - de la o generaie la alta i de la ADN la
proteine - prin expresia fenotipic (fig. 25).

Fig. 25. Dogma central a biologiei moleculare

Transferul informaiei genetice de la ADN la proteine (decodificarea


informaiei genetice) implic dou procese:
Transcripia (transferul informaiei genetice de la ADN la ARN)
Translaia (transferul informaiei de la ARN la proteine).
Informaia genetic trece de la ARN la ADN, n timpul conversiei
materialului genetic al virusurilor tumorale ARN, la forma proviral ADN
(n celulele infectate cu anumite virusuri ARN).
n prima etap (transcripia), o secven de baze din ADN este
transcris ntr-o secven complementar n ARN. La eucariote, ARN - ul
este sintetizat n nucleu, apoi este transferat n citoplasm, pentru etapa a
doua de translaie (fig. 26)
Transcripia (ADN ARN)
Procesul de transcripie este similar cu cel de replicaie ADN, cu
excepia complementaritii ARN, ce conine riboza (n locul dezoxiribozei)
i uracilul (n locul timinei). De regul, la eucariote, spre deosebire de
procariote, ARNm copie informaia genetic a unei singure gene (ARNm
_____________________________________________________________

82

_____________________________________________________________
monogenic). Recent, s-a constatat c ARNm poate copia informaia genetic
a mai multor gene, fiind aa - numitul ARNm multigenic (Snustad et al.,
1997).
T e r m in a to r

ADN

NUCLEU

P ro m o to r
U1
T r a n s c rip ia

C o m p le x d e
jo n c iu n e

U6
U2

U5

ARN
ARN

ARNm

ARNt

ARNr

A R N sn
P o r n u c le a r

M e m b r a n n u c le a r

R ib o z o m
P

5'

ARNm

A la
Leu
A la

Phe

M et

S u b u n it i r ib o z o m a le

ARNt

Lan
p o lip e p t id ic

C IT O P L A S M

Fig. 26. Etapele sintezei proteice la eucariote.

_____________________________________________________________

83

_____________________________________________________________
Transcripia este controlat de ARN polimeraza, ce leag
ribonucleotidele ntr-o secven complementar cu secvena de baze a unei
catene de ADN. La eucariote, au fost identificate trei tipuri de ARN
polimeraze (tabel 7), ce catalizeaz transcripia a trei clase diferite de gene
(Snustad et al, 1997):
- ARN polimeraza I - localizat n nucleol i catalizeaz sinteza
ARNr, cu excepia ARN 5S.
- ARN polimeraza II - transcrie gene nucleare, ce codific proteine.
- ARN polimeraza III - catalizeaz sinteza ARNt, ARN 5S, ARNsn.
Tabel 7. Caracteristicile celor trei tipuri de ARN polimeraze, prezente la
eucariote.

Enzima
ARN polimeraza I
ARN polimeraza II
ARN polimeraza III

Localizare
Nucleol
Nucleu
Nucleu

Produsul
ARNr (fr ARN 5S)
ARNm precursor
ARNt, ARN 5S, ARNsn

La eucariote, iniial se formeaz un ARNm precursor, ce va suferi


trei modificri majore pn la transformarea n ARNm matur, de pe care se
va realiza translaia. Modificrile ARNm precursor sunt (Snustad et al.,
1997):
1. "Bonetarea" captului 5' al ARNm precursor cu 7 metil guanozin.
2. Adugarea de secvene poli (A) la captul 3' al ARNm.
3. Eliminarea intronilor.
Secvena "cap" 5', la majoritatea eucariotelor este reprezentat de 7
metil guanozina, adiionat la primul nucleosom al ARNm precursor, printro legtur fosfat 5' - 5'. Secvena "coad" 3', poli (A), prezint o lungime de
20 - 200 nucleotide.
La eucariote, toate moleculele de ARNm precursor (pre - ARNm) de
diferite lungimi formeaz ARN - ul nuclear heterogen (ARN hn).

_____________________________________________________________

84

_____________________________________________________________

Iniierea formrii ARNm


Locul de ataare al ARN polimerazei este reprezentat de o
succesiune de baze denumit promotor. Promotorii variaz funcie de gen
i de organism, dar conin secvene n comun. De exemplu, la eucariote este
comun secvena de 7 baze T i A (TATAAAA), aa - numitul element
TATA box. S-a constatat c, toi promotorii activi pot conine i alte
elemente comune (obligatoriu unul dintre ele): elementul CAAT box (cu
secvena GGCCAATCT), GC box (cu secvena GGGCGG) i octamer
box (cu secvena ATTTGCAT), n diferite locuri, n una sau mai multe
copii. Acestea influeneaz eficiena promotorului n iniierea transcripiei;
ele au fost ntlnite frecvent n promotori recunoscui de ARN polimeraza II.
Transcripia ncepe de la promotor, prin adugarea de ribonucleotide
la captul 3'.
Cele trei tipuri de ARN polimeraze necesit prezena unui factor
proteic de transcripie pentru iniierea sintezei ARNm. Factorii de
transcripie trebuie s interacioneze cu promotorii la secvena corect
pentru a iniia transcripia.
Fiecare factor de transcripie pentru polimeraza II se noteaz TFIIX
(factor de transcripie pentru polimeraza II, X reprezentnd litera de
identificare pentru factorul de transcripie). Locul de legare al factorului de
transcripie cu promotorul a fost stabilit prin determinarea segmentelor de
ADN protejate la digestia nucleazic, la adugarea unui factor specific la
complexul de iniiere.
De exemplu, TFIID este primul care interacioneaz cu promotorul.
El conine proteina de ataare TATA (proteina de legare la elementul TATA
box) i mai multe proteine mici asociate cu aceasta. Apoi, se ataeaz
TFIIA, urmat de TFIIB, TFIIF (acesta din urm mai nti se ataeaz de
ARN polimeraza II). Factorul TFIIE se ataeaz la complexul de iniiere, la
punctul de iniiere a transcripiei (fig. 27). Ali doi factori: TFIIH i TFIIJ
se ataeaz la acest complex, ns nu se cunoate locul (Snustad et al.,
1997).
Transcripia iniiat de ARN polimeraza I i III necesit cte un
complex similar (factor de transcripie - promotor). ARN polimeraza I i III
utilizeaz factori de transcripie comuni cu polimeraza II, dar i factori
specifici; promotorii, ns, sunt destul de diferii.
_____________________________________________________________

85

_____________________________________________________________
Elongarea ARNm
Dup eliberarea polimerazelor din complexul de iniiere, ele vor
cataliza elongarea catenei de ARN.
La nceputul elongrii, se "boneteaz" captul 5' cu 7 metil
guanozina. Acest proces are loc atunci cnd ARN prezint o lungime de
aproximativ 30 de nucleotide. Acest "cap" de 7 meetil-guanozin conine o
legtur trifosfat 5' - 5'. i dou sau mai multe grupri metil; el este
recunoscut de factorii de transcripie i are rol n protejarea lanului de ARN
mpotriva degradrii nucleazice.

_____________________________________________________________

86

_____________________________________________________________
P u n c t u l d e i n i ie r e
a tr a n s c rip ie i

T F IID
T F IIB

ATATTT
TATA A A

T F IIB
T F IIA

ATATTT
TATA A A

T F IIB
T F IIA

ATATTT
TATA A A

T F IIB
T F IIA

ATATTT
TATA A A
T F IIF

P o lim e r a z a II

T F IIB

ATATTT
T F IIA

T F IIE

TATA A A
T F IIF

P o lim e r a z a II

Fig. 27. Formarea complexului de iniiere a transcripiei.

Terminarea formrii ARNm


Terminarea transcripiei se produce n situsuri multiple, localizate la
1000 - 2000 de nucleotide de la locul ce va deveni captul 3' al ARNm
matur, sintetizat de ARN polimeraza II.
ARNm se elibereaz prin clivarea endonucleolitic. Aceast clivare
se produce la captul 3', la 11 - 30 de nucleotide de la secvena constant
_____________________________________________________________

87

_____________________________________________________________
AAUAAA (localizat lng captul 3' terminal al ARNm). Dup clivare,
enzima poli (A) polimeraza va aduga, la captul 3' al ARNm, "coada" poli
(A), alctuit dintr-o succesiune adenozinmonofosfatic, de aproximativ 200
de nucleotide (fig. 28). acest fenomen este numit poliadenilare.

5'
3'

5 ' 7 -M G

C a te n a A D N s e n s

AAU AAA

C liv a j e n d o n u c le o litic

5 ' 7 -M G

3'

AAU AAA
P o lim e r a z P o li( A )

A A A A A (A )195 3 '

5 ' 7 -M G

AAU AAA
C o a d a P o li( A )

Fig. 28. Clivarea endonucleolitic i poliadenilarea.

Terminarea transcripiei necesit prezena unui component de


specificitate, ce va recunoate secvena AAUAAA, se va lega la aceasta i
va direciona clivarea i poliadenilarea.
"Coada" poli (A) induce stabilitatea ARNm i joac un rol important
n transportul ARNm matur din nucleu, n citoplasm.
n contrast cu ARN polimeraza II, ARN polimeraza I i III rspund
la semnale discrete de terminare.
ARN polimeraza I termin transcripia, ca rspuns la o secven de
18 nucleotide ce este recunoscut de o protein asociat, de terminare a
transcripiei.
ARN polimeraza III rspunde la semnalul de terminare similar cu cel
de la Escherichia coli (Snustad et al., 1997).
_____________________________________________________________

88

_____________________________________________________________
Eliminarea intronilor prin matisare ("ARN splicing")
Majoritatea genelor nucleare ce codific proteine conin introni. Prin
numeroase experimente s-a constatat existena a trei tipuri diferite de
eliminare a intronilor din ARN-ul transcris:
- Intronii din ARNt precursor sunt eliminai prin clivaj
endonucleolitic, iar legarea exonilor este catalizat de endonucleaze de
mbinare ("splicing") i de ligaze.
- Intronii din ARNr precursor sunt eliminai autocatalitic printr-o
reacie unic, mediat de molecula de ARN.
- Intronii din ARNm precursor (ARNhn) sunt eliminai n dou
etape, prin participarea componentelor complexului ribonucleoproteic
nuclear mic (RNPsn) denumite spliceosomi (engl. spliceosomes). Acest
complex conine 5 molecule (U1, U2, U4, U5 i U6) de ARN nuclear mic
(ARNsn) i un set de proteine ce nu sunt nc complet cunoscute. La
mamifere, acest ARNsn variaz n lungime, de la 100 de nucleotide la U 6, la
215 nucleotide la U3.
Caracterizarea complexului RNPsn a fost posibil datorit
descoperirii c anumii pacieni cu maladia lupus sistemic eritematos produc
anticorpi ce reacioneaz cu proteinele complexului RNPsn. Aceti anticorpi
sunt autoanticorpi, deoarece reacioneaz doar cu proteinele complexului
RNPsn, din organismul pacientului respectiv.
Prima etap n procesul de "ARN splicing" implic clivarea la
captul 5' al intronului i formarea unei legturi fosfodiesterice ntre
carbonul 5' al guaninei de la locul de clivare i carbonul 2' al adeninei, la
captul 3' al intronului. Acest proces necesit legarea RNPsn U 1 la captul
5', naintea iniierii clivrii.
A doua etap const n legarea RNPsn U2 la captul 3' al intronului,
ce conine adenina. Ulterior se leag (la acelai capt 3') RNPsn U 5 i RNPsn
U4 / U6 (fig. 28). n momentul clivrii captului 5' al intronului (n prima
etap), ARNsn U4 este eliberat din spliceosom. n etapa a doua, se cliveaz
captul 3' al intronului i are loc legarea celor doi exoni printr-o legtur
fosfodiesteric 5' - 3'. Astfel, se formeaz ARNm matur, ce va fi transferat n
citoplasm, pentru translaia la nivelul ribosomilor.

_____________________________________________________________

89

_____________________________________________________________

Fig. 29. Eliminarea intronilor prin "ARN splicing"


Coninutul informaional al ARNm la unele eucariote este alterat de
procesul de "editare" al ARN, ce produce schimbarea secvenei nucleotidice
din ARNm. Aceast modificare de informaie are loc prin dou modaliti:
_____________________________________________________________

90

_____________________________________________________________
- prin substituia unei baze azotate
- prin inserarea sau eliminarea de uridinmonofosfat.
Prima modalitate a fost constatat prin studiul genelor
apolipoprotein-B (apo-B) i a ARNm la iepure i la om. Apolipoproteinele
sunt proteine sangvine ce transport anumite tipuri de grsimi n sistemul
circulator. n ficat, ARNm apo-B codific o apolipoprotein mare, de 4563
aminoacizi, iar n intestin, codific sinteza unei proteine de 2153
aminoacizi. n ARN-ul mesager din celulele intestinale, citozina este
nlocuit cu uracilul, genernd un codon UAA de terminare a translaiei,
astfel nct se formeaz o apolipoprotein trunchiat (fig. 30).
C A A

3'

ADN

ARNm

C A A

3'

In te s tin

T ra n s c r ip ie

F ic a t

5'

5'

G T T

5'

3'

5'

ARNm

C A A

3'

A R N d e z a m in a z

E d ita r e a A R N
(d e z a m in a r e a o x id a tiv
a c ito z in e i)

A R N m e d ita t
5'

U A A

3'

T r a n s la ie

CO OH
CO OH
H 2N
H 2N
A p o lip o p r o t e in
( 4 5 6 3 a m in o a c iz i)

A p o lip o p r o te in
t r u n c h ia t (2 1 5 3 a m in o a c iz i)

Fig. 30. "Editarea" ARNm apo-B n intestin, la mamifere.


A doua modalitate de editare a ARN a fost evideniat n
mitocondrii, la Trepanosoma (protozoar flagelat ce produce boala somnului
_____________________________________________________________

91

_____________________________________________________________
la om). n acest caz, uracilul este inserat sau deletat din ARNm,
determinnd schimbri majore n polipeptidele codificate.
La eucariote, se cunosc o serie de gene, de dimensiuni foarte mari,
ce conin muli introni. De exemplu, la Drosophila melanogaster, gena Ubx
(Ultrabithorax) cuprinde un intron de aproximativ 70 000 perechi de
nucleotide.
La om, gena DMD (devenit nefuncional prin mutaie) ce
determin distrofia muscular Duchenne este format din 2,5 milioane
perechi de nucleotide i cuprinde 78 de introni. Cu toate acestea, importana
intronilor nu a fost nc elucidat (Snustad et al., 1997).
Translaia ARN proteine (sinteza proteinelor)
Translaia este procesul prin care informaia genetic din ARNm este
decodificat, n conformitate cu codul genetic, n secvena de aminoacizi din
polipeptide. Acest proces este complex, necesitnd funcionarea unui numr
mare de macromolecule (Snustad et al., 1997):
- peste 50 de polipeptide i ntre 3 i 5 molecule de ARN prezente n fiecare
ribosom (variabil n funcie de specie);
- cel puin 20 de enzime ce activeaz aminoacizii;
- ntre 40 i 60 de molecule diferite de ARNt;
- numeroase proteine solubile implicate n iniierea, n elongarea i
terminarea sintezei lanului polipeptidic.
Deoarece multe dintre aceste macromolecule sunt prezente n
cantiti mari n fiecare celul, translaia reprezint o mare parte a
metabolismului celular (fig. 31).
Translaia are loc la nivelul ribosomilor, localizai n citoplasm.
Translaia implic trei tipuri de ARN (transcrise de pe macromolecula de
ADN): ARNm, ARNr i ARNt. Moleculele de ARNt funcioneaz ca
adaptori, mediind ncorporarea aminoacizilor n polipeptide, n conformitate
cu secvena nucleotidic din ARNm. Aminoacizii se ataeaz de moleculele
corespunztoare de ARNt, datorit unui set de enzime de activare denumite
aminoacil ARNt sintetaze.
Secvena nucleotidic din ARNm este translat n secvena
corespunztoare de aminoacizi, n conformitate cu codul genetic.
_____________________________________________________________

92

_____________________________________________________________
ADN

AR N
p o lim e r a z a

T r a n s c r ip ie
5S

16S

23S

AR N r

AR N m

ARN t

T r a n s la ie
P r o t e in e
r ib o z o m a le

S u b u n it i
r ib o z o m a le

F a c to r i d e e lo n g a r e
e n z im e d e t r a n s f e r,
G TP
D e g ra d a re p n
la m o n o n u c le o t id e

A m in o a c il ~ A R N t

P e p t id
A m in o a c il ~ A M P

E n z im e d e
a c tiv a r e

A m in o a c id + A T P

Fig. 31. Schema sintezei proteice.

Fiecare aminoacid este codificat de unul sau mai muli codoni, iar
fiecare codon conine 3 nucleotide. Din cei 64 de codoni, 61 codific
aminoacizi, iar 3 sunt STOP (dicteaz terminarea formrii lanului
polipeptidic).
Moleculele de ARNt conin triplete de nucleotide numite anticodoni,
ce formeaz perechi de baze cu codonii din ARNm, n timpul translaiei.
Fiecare molecul de ARNm este translat simultan de numeroi
ribosomi, formnd complexul denumit poliribosom sau polisom.
_____________________________________________________________

93

_____________________________________________________________
Translaia unei secvene de nucleotide din ARNm ntr-o secven de
aminoacizi dintr-un polipeptid, const n 3 etape:
- Iniierea
- Elongarea
- Terminarea
Iniierea
Iniierea translaiei include toate evenimentele ce preced formarea
legturii peptidice ntre primii doi aminoacizi ai unui lan polipeptidic.
Iniierea translaiei la eucariote este mai complex dect la
procariote, implicnd i unii factori solubili de iniiere. n principiu
procesul este asemntor, cu deosebirile:
- grupul amino- al metioninei al iniiatorului ARNt (ARNtMet) nu este
formilat, ca la procariote;
- complexul de iniiere se formeaz la captul 5' al ARNm i nu la
situsul start de translaie Shine-Dalgarno / AUG, ca la Escherichia coli. La
eucariote, complexul de iniiere scaneaz ARNm de la captul 5', n cutarea
codonului de iniiere a translaiei (AUG).
Iniiatorul ARNtMet interacioneaz cu un factor solubil de iniiere i
ocup situsul P n timpul procesului de iniiere, ca i la E. coli. O protein
de legtur a capului (CBP - engl. cap binding protein) se leag la capul
de 7 metil guanozin, de la captul 5' al ARNm. Apoi, ali factori de iniiere
se leag la complexul CBP-ARNm, urmai de subunitatea mic a
ribosomului. Este necesar i prezena GTP-ului. Complexul de iniiere se
deplaseaz n direcia 5' - 3', de-a lungul moleculei de ARNm, n cutarea
unui codon AUG. La gsirea acestui codon se disociaz factorii de iniiere
din complex, iar subunitatea mare (60S) se leag la complexul ARNtMet /
ARNm / 40S, formnd ribosomul complet (80S) (fig.30). Complexul 80S /
ARNm / ARNt este pregtit pentru nceperea etapei a doua a translaiei elongarea.
Elongarea
Acest proces este identic la procariote i la eucariote. Adiia fiecrui
aminoacid la lanul polipeptidic se realizeaz n trei faze:

_____________________________________________________________

94

_____________________________________________________________
A R N tM et

A C

S u b u n ita te
r ib o z o m a l 4 0 S

IF -2
IF -3
5'

ARNm

3'

M et

C o m p le x IF - 3 /A R N m /4 0 S
C o m p le x IF -2 /A R N tM et
U

S u b u n ita te
r ib o z o m a l 4 0 S

A C

IF -3
5'

M et

3'

G TP

IF -1

C o m p le x d e in iie r e

IF -3
5'

IF -1

3'

A C

60S

M et

IF -3
IF -2

G TP

IF -1

5'

A
G

A C

3'

C o m p le x r ib o z o m 8 0 S /A R N m /A R N t

M et

Fig. 32. Schema iniierii sintezei proteice.


_____________________________________________________________

95

_____________________________________________________________
- legarea unui aminoacil - ARNt la situsul A (aminoacil) al
ribosomului. naintea atarii la situsul A, complexul se combin cu o
protein din clasa factorilor de elongare. Aceti factori de elongare sunt
cuplai cu GTP-ul.
- transferul lanului polipeptidic n formare, de la ARNt din situsul P
(peptidil), la ARNt n situsul A, prin formarea unei noi legturi peptidice.
Reacia este catalizat de peptidil transferaza, o ribozim (molecul de ARN
cu proprieti catalitice) (Bra, 1999).
- translocarea ribosomului de-a lungul ARNm pentru poziionarea
urmtorului codon n situsul A. ARNt cu polipeptida n formare din situsul
A i ARNt din situsul P sunt transferate n situsul P, respectiv situsul E
(exit, ieire) (fig. 33). Aceste trei faze se repet ciclic.
Terminarea
Elongarea lanului polipeptidic se termin atunci cnd unul dintre cei
trei codoni STOP (de terminare a lanului polipeptidic): UAA, UAG sau
UGA, intr n situsul A (fig. 34).
Aceti codoni STOP sunt recunoscui de proteine solubile denumite
factori de eliberare (Rfs - engl. release factors). La eucariote, un singur
factor de eliberare (Rfe) recunoate toi codonii. Prezena unui factor de
eliberare n situsul A perturb activitatea peptidil transferazei, astfel nct
aceasta va aduga o molecul de ap la carboxilul terminal al polipeptidei n
formare. Aceasta elibereaz polipeptida din molecula de ARNt a situsului P
i deplaseaz ARNt n situsul E. Terminarea translaiei este complet la
eliberarea ARNm din ribosom i disocierea ribosomului n subuniti.
Subunitile ribosomale sunt pregtite s iniieze o nou sintez proteic
(Snustad et al., 1997).

3.7. Reglarea expresiei genelor.


Genetica dezvoltrii umane.
Spre deosebire de organismele procariote, la care este valabil
modelul lui Jacob i Monod, reglarea activitii genelor la eucariote, i mai
ales la om, are un caracter mult mai complex din multiple cauze: mrimea
genomului uman, cuplarea ADN-ului cu histonele i compactarea sa n
_____________________________________________________________

96

_____________________________________________________________
cromatin, existena genelor discontinue i realizarea sintezei polipeptidelor
n citoplasm.
Din aceste cauze, dar mai ales datorit faptului c, la om, numai 7
10% din genom este transcris n ARNm reglajul genetic se face, cel mai
adesea, prin activarea genelor (cu ajutorul unor proteine activatoare) i nu
prin inhibarea lor. Fiind mult mai economic, acest reglaj genetic pozitiv este
specific eucariotelor.
3.7.1 Tipuri i mecanisme de reglaj genetic la om
Ca la toate eucariotele i la om reglarea activitii genelor este de
dou tipuri:
- reglarea adaptativ, numit i reglare genetic pe termen scurt care
modific prin mecanisme moleculare reversibile expresia genelor i sinteza
de proteine n funcie de necesitile de adaptare la mediu, deci n funcie de
tipul i de intensitatea unui stimul;
- reglarea programat, numit i reglare genetic pe termen lung,
ireversibil care modific expresia genelor, intrarea i ieirea lor din activitate
n funcie de necesitile programului de dezvoltare ontogenetic.
Reglarea activitii genetice implic mai multe mecanisme
moleculare care acioneaz la diferite nivele: pretranscripional,
transcripional, posttranscripional, translaional i posttranslaional
Reglarea pretranscripional
Se realizeaz prin mai multe mecanisme moleculare la nivelul
fibrelor de cromatin:
- modificarea structurii primare a ADN-ului fie prin apropierea sau
ndeprtarea unor gene (ex. reconfigurarea genomului n cazul minigenelor
pentru sinteza imunoglobulinelor umane) sau inactivarea transcripiei prin
metilarea citozinei n regiunea reglatoare din amonte a genei;
- trecerea de la forma B (activ) la forma Z (inactiv) a ADN-ului;
- modificarea conformaiei spaiale (condensare /relaxare) a fibrei de
cromatin fcnd anumite gene mai mult sau mai puin accesibile pentru
transcripie.
_____________________________________________________________

97

_____________________________________________________________
C
C

5'

P
A

3'

E F -T u

G TP
A la
A la

E F -T s

A m in o a c il- A R N t
o c u p s it u s u l A

M et

Phe

G D P +

G TP

Leu

M et

E F -T u
E

5'

5'

3'

G DP

T r a n s fe r u l p o lip e p tid e i
d e la A R N t d in s itu s u l P
la A R N t n s itu s u l A

Leu

A la

M et

Phe
M et

G G

E F -G

G TP

3'

5'

A la

3'

E F -G

M et

A la

5'
U

T r a n s lo c a ia p o lip e p tid e i
d in s itu s u l A n s it u s u l P
i t r a n s fe r u l A R N t n s itu s u l E

M et

Phe
Leu

M et

A C

A
C

3'

E F -G

GTP

P
M et
M et

A la

Phe

Fig. 33. Schema elongrii lanului polipeptidic.


_____________________________________________________________

98

_____________________________________________________________

5'

A
U

3'

Codon
STO P

G ly

RFe

A ta a r e a fa c to r u lu i
R F e la s it u s u l A

Phe
A la
M et
Phe
Leu

H 2N

A rg

M et

5'

A
C

3'

E lib e r a r e a p o lip e p t id e i
i t r a n s f e r u l A R N t d in
s it u s u l P n s itu s u l E

G ly
Phe
A la
M et
Phe
Leu

H 2N

M et

A rg

5'

E
G

P
C

3'

RFe

CO OH

D is o c ie r e a c o m p le x u lu i
8 0 S /A R N m /A R N t

P o lip e p t id

5'

ARNm

3'

Fig. 34. Schema terminrii sintezei lanului polipeptidic.


_____________________________________________________________

99

_____________________________________________________________
Reglarea transcripional
Principalele mecanisme moleculare care regleaz formarea preARN-ului mesager implic participarea unor proteine de control care se
fixeaz n regiunea reglatoare din amonte a genei numite factori de
transcripie. Factorii de transcripie determin modificarea configuraiei
spaiale a ADN-ului favoriznd legarea ARN polimerazei II. Dintre factorii
de transcripie amintim: proteinele de atingere cu zinc (zinc finger proteins
care se fixeaz n marea incizur a ADN-ului), proteinele elice-cot-elice,
receptorii hormonilor steroizi (care dup cuplarea cu hormonul ptrund n
nucleu i se fixeaz pe regiunea reglatoare a genei) i proteine reglatoare cu
specificitate de organ.
Reglarea posttranscripional
Dup translaie pre-ARNm este maturat prin matisare; excizia
intronilor se poate face cu asamblarea n ordini diferite a exonilor ducnd la
formarea mai multor ARNm maturi, deci la sinteza unor proteine diferite.
Un alt mecanism de reglare posttranscripional presupune
intervenia unor proteine reglatoare n regiunea lateral din aval a genei care
vor modifica durata de via i capacitatea de stocare a ARNm.
Reglarea translaional
Se realizeaz prin mecanisme moleculare puin cunoscute care
acioneaz n timpul adugrii aminoacizilor n polipeptid (ex sinteza
globinei n funcie de cantitatea de hem existent n celul.
Reglarea posttranslaional
Mecanismele de reglare posttransalional constau fie n activarea
sau inhibarea (prin retroinhibiie) a unor ci metabolice de ctre
polipeptidul sintetizat prin translaie sau n modificarea structurii
secundare sau teriare a proteinelor dup translaie
3.7.2. Genetica dezvoltrii embrionare umane
Datele de embriologie uman provin din studiul avorturilor spontane
n diferite stadii de dezvoltare i din fotografiile embrionilor i fetuilor n
_____________________________________________________________

100

_____________________________________________________________
uter. Stadiile timpurii de dezvoltare naintea atarii embrionului n uter pot
fi studiate n laborator, n cultura in vitro.
Dup fecundare, n partea superioar a oviductului, zigotul se
divide, migrnd ncet spre uter. Dup 3 zile, n stadiul de 16 celule,
migreaz n cavitatea uterului. A 4-a zi se formeaz blastocistul asimetric,
cu maxim 100 de celule; se difereniaz masa celular inelar ce va forma
embrionul.( Fig. 35).
M a s c e lu la r
in e la r

C a v ita te a
b la s to c is tu lu i

Fig. 35. Schema blastocistului uman (n a patra zi de la fecundare).

Dup nc 2 zile, blastocistul se ataeaz de uter. La sfritul celei


de-a doua sptmni implantarea este complet. n interiorul blastocistului,
embrionul n formare ncepe s absoarb nutrieni prin difuzie, din esutul
matern. n a 3-a sptmn, masa celular inelar devine embrion, n form
de par turtit.
n regiunea central se gsete esutul neural primitiv - notocordul,
care va forma tubul neural. Pe ambele pri se dezvolt somite, ce se vor
diferenia n muchi, schelet, esut dermic. (fig. 36). Apar vasele de snge i
celulele sangvine, ce vor forma sistemul cardiovascular. Schimburile
_____________________________________________________________

101

_____________________________________________________________
materno-fetale se realizeaz la nivelul placentei, situat n peretele uterin.
Sngele matern rmne separat de sngele fetal, prin membranele celulare.
n a 4-a sptmn apar organele sexuale externe i celulele
germinale primordiale ce se dezvolt n peretele cavitii primare denumit
sac vitelin. Aceste celule, ce vor deveni ovule sau spermatozoizi, migreaz
n timpul sptmnii a 5-a n crestele gonadice interne.
ntre sptmna a 4-a i a 7-a se formeaz organele majore; aceast
perioad este crucial, impactul agenilor mutageni chimici, fizici sau
biologici ducnd la apariia de malformaii grave. n a 7-a sptmn, ochi
rudimentari, urechi, nas, gur, inim, ficat i intestine sunt vizibile, alte
structuri ca: plmni, rinichi, organe sexuale i schelet fiind, de asemenea,
bine conturate. La sfritul sptmnii a 7-a, embrionul prezint peste 30
mm. n lungime i o greutate mai mic de 5 g.; coada a disprut, minile i
picioarele (cu degete) sunt bine formate, iar capul constituie aproximativ
jumtate din lungimea total a embrionului. Embrionul este n ntregime
nconjurat de dou membrane: amnios i chorion, fiind legat de placent
prin cordonul ombilical, ce permite micarea sa lejer n lichidul amniotic.

C a v ita te
a m n io tic

N o to c o rd
S o m ite
S a c v ite lin

Fig. 36. Schema embrionului uman de 3 sptmni.

Din sptmna 8-a i pn n a 38-a sptmn (la natere) fetusul


crete de aproximativ 650 de ori n greutate i de aproximativ 17 ori n
_____________________________________________________________

102

_____________________________________________________________
lungime. n aceast perioad se finalizeaz dezvoltarea organelor. Deoarece
sistemul respirator se dezvolt ultimul, funcionalitatea plmnilor limiteaz
viabilitatea.
Cu posibilitile tehnice moderne, un fetus de 26 de sptmni va
supravieui unei nateri premature, chiar dac el prezint doar 30% din
greutatea normal a unui nou-nscut. Prin tehnici superioare, cu cheltuieli i
eforturi imense, uneori un nou-nscut de mai puin de 26 de sptmni va
supravieui, dar se ridic problema anilor urmtori, cnd pot aprea
probleme serioase (Mange & Mange, 1990).
Cum este posibil ca dintr-o singur celul (zigotul) s se formeze un
organism? Cum se organizeaz celulele i esuturile n organism, n
pattern-uri diferite fiecrei specii?
Efectul matern
S-a constatat c zigotul conine substanele nutritive necesare
viitorului embrion, coninnd informaia genetic pentru formarea
embrionului. De exemplu, la melc direcia formrii cochiliei (dextr sau
senestr) este controlat de genotipul matern - ce determin poziia fusului
de diviziune i planul de separare al celulelor n zigot i n embrion
(Sturtevant, 1923, cf. Mange & Mange, 1990).
Studii ulterioare au demonstrat faptul c efectul matern implic
prezena n celula ou a nucleotidelor i enzimelor necesare replicrii ADN i
a tubulinei pentru formarea fusului de diviziune. Alte rezerve sunt
reprezentate de constituenii necesari sintezei proteice, sintezei ribozomilor
i ARNm. Repartizarea acestor componente necesare dezvoltrii n celula ou
poate fi n gradient de concentraie sau n mozaic (Mange & Mange, 1990).
Studii moleculare au evideniat existena a 3 niveluri ierarhice de
familii de gene ce controleaz dezvoltarea embrionilor de Drosophila
melanogaster: genele efectului matern, genele segmentaiei i genele
formrii tiparelor ("pattern-urilor") sau genele homeotice (Mange &
Mange, 1990).
Genele efectului matern intervin n direcionarea coordonatelor axei
antero-posterioare i dorso-ventrale ale viitorului embrion.
Un argument n favoarea ipotezei gradientului de concentraie este
dat de o gen mutant a efectului matern, denumit bicoid (bcd). Celula ou
bcd/bcd se va dezvolta ntr-un embrion fr cap i fr torace, demonstrnd
faptul c genele normale determin sinteza elementelor necesare formrii
_____________________________________________________________

103

_____________________________________________________________
capului i toracelui. n celula ou cu o gen normal n stare homozigot sau
n stare heterozigot, proteina sintetizat se distribuie n gradient de
concentraie, ce scade spre captul posterior (Mange & Mange, 1990).
Segmentaia i formarea "pattern-urilor"
ntr-un anumit moment, greu de precizat, genele embrionului sunt
activate. Activarea este timpurie la mamifere, fa de animalele mai puin
complexe. La om, activarea se produce n stadiul de 4 i 8 celule (Brande,
1988, cf. Mange & Mange, 1990).
Studii detaliate ale multor mutante de dezvoltare la Drosophila au
artat c stabilirea planului de dezvoltare al corpului se realizeaz prin dou
evenimente: unul este funcionarea genelor de segmentaie ce determin
diviziunea blastodermului n uniti metamerice i altul este activarea
genelor homeotice ce induc o caracteristic regional fiecrui domeniu nou
format.
Studiul regiunilor n care genele de segmentaie sunt active, precum
i analiza consecinelor mutaiilor (fig. 37) demonstreaz c genele
interacioneaz una cu alta n "cascada dezvoltrii", pentru a subdivide
embrionul n regiuni mai mici. Din trei clase de gene de segmentaie, genele
gap acioneaz primele ca rspuns la produsele genelor cu efect matern
menionate anterior; apoi se exprim genele polaritii segmentului i ale
dispoziiei pereche, formnd o serie de "pattern-uri" repetate de-a lungul
embrionului.
Cap
T1
T2
T3
A1
A2
A3
A4
A5
A6
A7
A8
A9

_____________________________________________________________

104

_____________________________________________________________
Fig. 37. Schema segmentaiei la Drosophila melanogaster
(larva - n stnga i adultul - n dreapta)

Formarea pattern-urilor ncepe prin activarea locilor homeotici


(William Bateson, n 1894, definea homeoza, ca asumarea de ctre un
membru al unei serii segmentale a unui caracter sau a unei forme proprii
altui membru al seriei), ce realizeaz structura unic a fiecrui metamer.
Aceste gene au fost rapid identificate deoarece musculiele cu mutaii ale
genelor homeotice prezentau efecte bizare: picioare nmugurite din regiunea
antenar sau din regiunea armturii bucale, aripi formate n regiunea ochilor
etc. Deci, cnd funcionarea normal este perturbat de mutaii, rolul
anumitor componente nu concord cu localizarea lor. Genele homeotice
importante sunt localizate n dou grupuri genice ("clusters") bine studiate.
Complexul Bithorax controleaz dezvoltarea toracelui posterior i a
segmentelor abdominale, iar complexul Antennapedia controleaz
segmentul toracic anterior i regiunea capului (Mange & Mange, 1990).
Prin tehnici moleculare, geneticienii au izolat i secvenializat gene
i produse ale activitii genelor din anumii loci segmentali i homeotici.
Primele studiate au fost genele dispoziiei pereche - gena fushi tarazu (ftz),
n japonez nsemnnd segmente insuficiente - i genele homeotice Ultrabithorax (Ubx) i Antennapedia (Antp), ce sunt uriae. Toate aceste
gene sunt complexe i interrelaionate; ele prezint o secven similar de
ADN de 180 pb i sunt denumite homeobox. n produsele proteice ale
acestor gene, cei 60 de aminoacizi codificai de secvenele homeobox
constituie homeodomeniul. Studii ulterioare au relevat faptul c numeroase
alte gene materne, segmentale sau homeotice sunt gene homeobox (Mange
& Mange, 1990).
Aceste gene homeobox sunt prezente i la alte organisme: unele
molute, anelide, amfibieni, psri i mamifere, incluznd oarecele i omul.
Chiar dac "pattern-urile" lor de segmentare nu sunt att de evidente ca cele
ale insectelor, aceste organisme sunt ntr-un anumit fel segmentate,
incluznd structura SNC, a musculaturii i, acolo unde exist, a coloanei
vertebrale.
Genele homeobox i secvenele de homeodomeniu sunt puternic
conservate (neschimbate) n evoluie. De exemplu, unele homeodomenii la
om i la oarece difer printr-un singur aminoacid din cei 60 sintetizai
datorit aciunii genei Antp la Drosophila. Aceast asemnare demonstreaz
_____________________________________________________________

105

_____________________________________________________________
c anumite mecanisme ale dezvoltrii genetice sunt rspndite n regnul
animal (Mange & Mange, 1990).
Acumularea dovezilor dezvoltrii genetice i moleculare sugereaz
c genele homeobox funcioneaz ca reglatoare ale propriilor expresii
genice, intervenind i n reglarea expresiei altor gene importante ale
dezvoltrii. Ca o consecin, toate proteinele de homeodomeniu sunt
localizate n nucleu. ntre secvenele homeodomeniului organismelor
studiate se afl o secven scurt, de 9 aminoacizi, identic, ce funcioneaz
n legtur direct cu ADN-ul. Domenii similare regleaz transcripia
anumitor gene la bacterii i la drojdii. Experimentele prin care au fost
testate, la Drosophila, efectele locilor de legtur a homeodomeniului pentru
gena ftz a dispoziiei pereche i gena engrailed (en) a polaritii segmentului
(testate individual sau n combinaie) sugereaz c locii intr reciproc n
competiie pentru site-urile ADN de legtur.
n acest sistem, proteina ftz activeaz transcripia ADN, n timp ce
proteina en este represat n competiia pentru site-urile de legtur.
Multiplele pattern-uri ale expresiei genice pot fi generate prin competiia
ntre reglatorii pentru legtura la diferite site-uri, n special depinznd de
afinitatea relativ a proteinelor homeodomeniului pentru fiecare site ADN
de legtur (Mange & Mange, 1990).
Proteinele de homeodomeniu asociate cu formarea "pattern-ului" au
fost identificate i la vertebrate.
La mamifere a fost identificat o clas de gene homeobox.
Proteinele homeobox asemntoare (oct-1, oct-2 i GHF-1/Pit-1)
codificate de aceste gene, prezint cel puin 21 de aminoacizi (din cei 60)
prezeni i la alte proteine homeobox. Proteinele oct acioneaz probabil
prin legtura cu o secven de 8 baze ale ADN (ATTTGCAT), denumit
octamer, descoperit lng multe gene la mamifere. Proteina homeobox
GHF-1 poate lega secvene specifice ale genei hormonului de cretere din
glanda pituitar.
S-au mai descoperit alte dou tipuri de proteine de homeodomeniu
cu rol major n dezvoltare. Unele gene gap de la Drosophila ce codific aa
numitele proteine de atingere (finger proteins), ce se aseamn cu
proteinele de atingere zinc de la amfibieni, oareci i om. Unele gene ale
distribuiei pereche la Drosophila codific de asemenea aa-numitele
domenii box pereche, descoperite la oareci, aparent implicate n formarea
coloanei vertebrale (Mange & Mange, 1990).
_____________________________________________________________

106

_____________________________________________________________

Necesitatea participrii genomului matern


i a celui patern n descenden, la mamifere
Multe nevertebrate i unele vertebrate se nmulesc prin
partenogenez. La mamifere, genomul matern i cel patern, motenite de
descenden, funcioneaz echivalent. n anul 1977, Hoppe i Illmensee
(Mange & Mange, 1990), au anunat naterea unui oarece uniparental
homozigot diploid, obinut prin eliminarea unui pronucleu dintr-un zigot de
oarece i dublarea numrului de cromosomi din nucleul haploid.
Experimentele ulterioare au euat. Studii ale zigoilor obinui prin unirea a
doi pronuclei femeli sau a doi pronuclei masculi au evideniat oprirea
dezvoltrii.
La zigotul uman, o astfel de sarcin ocazional, n locul dezvoltrii
unui fetus normal, duce la o excrescen uterin, la un neg "hidatiform". O
asemenea mas placentar, coninnd membrane extraembrionare, dar nu
esut fetal, este n ntregime patern (probabil rezultat prin fecundarea unui
ovul fr pronucleu i dublarea cromosomilor provenii din spermatozoid)
(Mange & Mange, 1990).
S-a presupus c, n gametogenez, anumite gene sunt transmise
difereniat, datorit "pattern-urilor" diferite de metilare (ataarea unei
grupri metil la citozin n ADN). n unele cazuri, anumite gene devin mai
puternic metilate n ovul, n comparaie cu sperma. Aceast diferen se va
estompa n timpul dezvoltrii embrionare. Metilarea difereniat este
implicat i n inactivarea cromosomului X, ce se produce n celulele
femelelor.
Relaia ntre activitatea genic i metilare a fost studiat la puii de
gin, la oareci, la iepuri i la om. Studiul producerii de hemoglobin
demonstreaz c, o cretere a activitii genelor globinei este asociat cu o
metilare inferioar a citozinei, n timp ce n esuturile n care genele sunt
inactive, citozina este frecvent metilat (Mange & Mange, 1990).
3.7.3. Genetica dezvoltrii sexuale normale
Multe plante i animale, dar mai ales omul prezint, n mod normal
cele dou sexe separate i bine difereniate. Totui, exist indivizi cu aspect
_____________________________________________________________

107

_____________________________________________________________
fizic sau cu comportament ce nu pot fi clasificate drept masculin sau
feminin. n aceste cazuri, indivizii sunt hermafrodii - termen provenit de la
Hermaphroditus, fiul lui Hermes (zeul comerului la greci) i Aphrodita
(zeia dragostei la greci). Conform mitului, Hermaphroditus a crescut
mpreun cu nimfa Salmacis, astfel reunind ntr-un corp caractere masculine
i feminine. Zei hermafrodii abund n arta i miturile din India i Persia
(Mange & Mange, 1990).
n anul 1950 s-au nfiinat primele clinici pentru studiul nounscuilor cu organe sexuale anormale, iniiindu-se astfel primul studiu
amnunit al comportamentului sexual normal (Mange & Mange, 1990).

Dezvoltarea prenatal:
Factori genetici i
hormonali
Primul pas n determinismul sexual se realizeaz n timpul
fecundrii, atunci cnd un spermatozoid cu un cromosom X sau cu un
cromosom Y fecundeaz ovulul. Aceasta este etapa genetic sau
cromosomial. Zigotul, din momentul formrii va avea sex genetic (XX sau
XY).
n a 6-a sptmn de dezvoltare, embrionii XX, ct i cei XY
prezint o pereche de gonade nedifereniate denumite creste genitale,
precum i dou sisteme de canale primitive - tipul masculin - canalul Wolff
i tipul feminin - canalul Mller (fig. 38).
La exterior, embrionii prezint tuberculul genital i sinusul
urogenital - mrginit de pliurile uretrale i labioscrotul, astfel nct, la
nceputul dezvoltrii, organele genitale externe ale embrionului, sunt
echipate att pentru sexul masculin, ct i pentru cel feminin.
Spre sfritul celei de-a asea sptmni de dezvoltare embrionar,
pentru formarea sexului masculin este necesar prezena genei TDF (factor
de dezvoltare testicular). Pe lng gena TDF sunt implicate i gene
autosomale i gene X- nlnuite (Mange & Mange, 1990). Gena TDF este
_____________________________________________________________

108

_____________________________________________________________
situat pe braul scurt al cromosomului Y, iar n anul 1987, E. Simpson i
colaboratorii (cf. Mange & Mange, 1990) au constatat c TDF este complet
separat de gena localizat lng centromer, pe braul lung al cromosomului
Y, ce induce formarea antigenului H-Y. Aceasta este etapa gonadic (sexul
gonadic).
Un pas important n determinismul sexual este atunci cnd, cele
dou tipuri de celule din testiculele fetusului ncep producerea a dou tipuri
de hormoni. Hormonul inhibitor Mllerian induce regresia canalelor
Mlleriene, n timp ce testosteronul (hormonul masculin) se produce i
determin dezvoltarea canalelor Wolffiene. Aceste schimbri se produc n
sptmna a aptea, cnd canalul Mller ncepe s degenereze. Sub influena
testosteronului, canalul Wolff ncepe formarea prostatei, a veziculelor
seminale i a canalelor deferente. La embrionii masculi, se inactiveaz
centrii hipotalamici ce controleaz ciclul menstrual la femei.
R in ic h i
C r e a s t g o n a d a l
D u c tu l M u e lle r ia n
U re te r
D u c tu l W o lffia n

T u b e r c u l g e n ita l
a n u r o g e n ita l
Rect

U re te r

O v id u c t
O var
U re te r
V e z ic u r in a r

V e z ic u r in a r

V a s d e fe re n t

U te r

V e z ic u la s e m in a l

U re tr

C lito r is
V a g in

P ro s ta t

P e n is

Rect

R ect

L a b ii

T e s tic u l
S c ro t

_____________________________________________________________

109

_____________________________________________________________
Fig. 38. Schema dezvoltrii organelor genitale interne - la un embrion uman
de ase sptmni.

n final, un metabolit al testosteronului (dihidrotestosteronul) va


media dezvoltarea organelor genitale externe. Tuberculul genital i pliurile
uretrale formeaz penisul, iar labioscrotul formeaz scrotul.
La embrionul femel, funcionarea diferitelor gene induce dezvoltarea
ovarelor, n cea de-a 20-a sptmn. Canalele Wolffiene regreseaz
(datorit lipsei secreiei testosteronului) i canalele Mlleriene formeaz
ducturile femele (n absena hormonului inhibitor Mllerian): oviductele,
uterul i partea superioar a vaginului. Se dezvolt i organele genitale
externe: clitorisul (din tuberculul genital) i labiile (din pliurile uretrale i
labioscrotale); din sinusul urogenital se va forma partea inferioar a
vaginului.
n concluzie, sexul ftului este evident la sfritul lunii a patra.
Dezvoltarea postnatal: Factori de mediu
La natere, n funcie de aspectul organelor genitale externe se
stabilete sexul noului-nscut. Acesta este sexul civil. Copilul va avea un
nume specific sexului, haine i jucrii adecvate. De asemenea, s-a constatat
un comportament diferit la biei i la fete. n dezvoltare, un loc important l
ocup factorii culturali, politici, religioi etc.
Dezvoltarea postnatal: Factori psihologici
La vrsta de 10-15 ani, datorit producerii anumitor hormoni se
ajunge la maturitatea sexual. Aceasta este etapa hormonal (sexul
somatic).
Determinat genetic i influenat de factorii de mediu, pubertatea
ncepe cu secreia hormonilor gonadotropi (dirijat de hipotalamus). Aceti
hormoni stimuleaz anumite celule gonadice pentru secreia hormonilor
sexuali, ce vor induce caracterele sexuale secundare. ambele sexe produc
aceeai hormoni, dar n proporii diferite. Calea de sintez este: colesterol
progesteron androgeni estrogeni. Hormonii feminini variaz
considerabil n timpul ciclului menstrual. Deoarece, la fetuii masculi, calea
_____________________________________________________________

110

_____________________________________________________________
nervoas este modificat, ciclul de producere a hormonilor gonadotrofici
este redus puternic.
La femei, sunt doi hormoni gonadotropi: FSH (hormonul
foliculostimulant), ce activeaz unii foliculi ovarieni pentru a ajunge la
maturitate n fiecare lun i LH (hormonul luteinizant), ce stimuleaz
eliberarea unui ovul din folicul i formarea corpului galben (corpus luteum).
naintea ovulaiei foliculul matur secret estrogeni, care vor permite
dezvoltarea endometrului. La pubertate, estrogenii induc finalizarea
dezvoltrii organelor sexuale i apariia caracterelor sexuale secundare
feminine. Corpul galben secret estrogenii i progesteronul. Al treilea
hormon gonadotrofic - prolactina este secretat dup sarcin i stimuleaz
producia lactat. Mici cantiti de prolactin sunt secretate permanent, la
ambele sexe.
Att la brbai, ct i la femei, la pubertate, glandele suprarenale
secret androstenodionul, din care aproximativ 10% se transform n
testosteron. La femei este rspunztor de creterea prului pubian i axilar i
de dezvoltarea glandelor sebacee i sudoripare. Un exces de androgeni la
femei va induce dezvoltarea unor caractere sexuale secundare masculine.
La pubertate, la brbai, FSH i LH stimuleaz maturarea celulelor
germinale la spermatozoizi, n tubii seminiferi. Testiculele produc mici
cantiti de estrogeni ce nu au efect evident n prezena unei cantiti
normale de hormoni masculini. Predominarea estrogenilor conduce la
apariia caracterelor sexuale secundare feminine. La brbai, progesteronul
se produce ca un precursor pentru testosteron; concentraii mari de
testosteron sunt necesare pentru maturarea spermei. La pubertate,
testosteronul rspunde de caracterele sexuale secundare masculine i
acioneaz asupra glandei hipofizare i a hipotalamusului pentru inhibarea
producerii de LH i FSH.
3.7.4. Genetica imunitii
Anticorpii, denumii imunoglobuline (Ig) reprezint 20% din
proteinele plasmatice. Anticorpii sunt molecule n form de Y, compuse din
2 lanuri polipeptidice grele (lungi) i 2 lanuri uoare (scurte), unite prin
legturi covalente ntre atomii de sulf; prezint o regiune constant i
regiuni variabile, acestea din urm capabile de a se lega specific cu
_____________________________________________________________

111

_____________________________________________________________
antigenele. Se disting 5 clase de imunoglobuline: G, A, M, D i E, n ordinea
concentraiei n plasm. Imunoglobulinele G sau gamma globulinele (Ig)
reprezint 80% din moleculele de imunoglobuline; ele traverseaz placenta,
protejnd noul-nscut pn la dezvoltarea propriului sistem imun.
Imunoglobulinele A se gsesc n plasm i n alte secreii (saliv, lapte
matern, lacrimi, secreii nazale etc.). Imunoglobulinele M sunt
macroglobuline i prezint afinitate pentru antigeni; fiecare IgM prezint 10
situsuri de combinare. Funcionarea IgD nu este cunoscut, iar IgE sunt
implicate n reacii alergice.
Limfocitele B ale unui individ pot sintetiza peste 1 milion de
anticorpi diferii, caracterizai prin aminoacizi diferii n regiunile variabile.
Ca orice proteine anticorpii sunt codificai de gene. Genele responsabile
pentru producerea celor cinci tipuri de imunoglobuline sunt unice ntruct
ilustreaz un mod de interaciune ntre proteine nemaintlnit n alt parte.
Ar trebui s existe 106 gene care s codifice secvena de aminoacizi din
infinitatea de anticorpi existeni, ns s-a descoperit c doar cteva sute de
gene sunt responsabile de sinteza varietii moleculare de imunoglobuline.
n 1959, Poter i Edelman au descoperit c prin proteoliza cu
papain i pepsin a imunoglobulinelor se obin dou lanuri uoare ( i )
i cinci tipuri de lanuri grele (, , , , i ). Gena pentru lanurile se afl
pe cromosomul 22, gena pentru lanul k se afl pe cromosomul 2 i gena
pentru polipeptidul lanului greu se afl pe cromosomul 14. Dei sunt
descrise ca entiti, aceste gene sunt de fapt seturi de fragmente genice
numite i minigene. Prin rearanjarea minigenelor se produc o infinitate de
posibiliti de reconfigurare genomic care duce la posibilitatea producerii
unei infiniti se anticorpi diferii capabili s cupleze infinitatea de antigene
prin care mediul atac organismul. Cu alte cuvinte fragmentele de gene
pentru producerea unui anumit anticorp nu sunt aranjate n forma lor final
n celulele embrionare; abia n momentul n care un limfocit B vine n
contact cu un anume antigen, un anumit set de minigene de pe cei trei
cromosomi se va rearanja astfel nct s codifice anticorpul adecvat.
Anticorpii monoclonali
Un singur antigen injectat ntr-un oarece va genera un amestec de
anticorpi, fiecare capabil s recunoasc aspecte diferite ale antigenului pe
suprafaa celular. Dac antigenul este complex (virus sau o celul cu
proteine, lipide, carbohidrai etc.) se vor forma zeci sau sute de anticorpi. In
_____________________________________________________________

112

_____________________________________________________________
vivo, anticorpii sunt amestecai n plasma sangvin i n alte lichide, de unde
nu se pot separa din punct de vedere chimic. A fost elaborat o metod in
vitro special pentru sinteza anticorpilor omogeni, cu abilitate de combinare
predeterminat. Fiecare anticorp pur i uniform este numit anticorp
monoclonal, fiind secretat de o clon de celule ce pot fi crescute n numr
nelimitat. O clon aparte de celule secretoare de anticorpi deriv din
fuziunea unei celule din plasm ( plasmocit.- limfocit B secretoar de
anticorpi) cu o celul canceroas. Combinaia rezultat n urma hibridrii
ntre celula plasmatic i celula canceroas este numit hibridoma (din
fuzionarea parial a cuvintelor englezeti hybrid i myeloma), ce
sintetizeaz mari cantiti de anticorpi specifici sau monoclonali i se
nmulete la infinit, fiind practic nemuritoare.
Tehnica producerii anticorpilor monoclonali
Un oarece este imunizat cu un antigen n scopul proliferrii
celulelor plasmatice productoare de anticorpi specifici. La repetarea
injeciei se produce un al doilea rspuns imun. Splina prezint un amestec
de limfocite; astfel, se extirp splina de oarece i se realizeaz o suspensie
de celule splenice n combinaie cu celule tumorale de mielom. Mielomul
este o tumoare a mduvei osoase caracterizat prin proliferarea malign a
celulelor ce sintetizeaz imunoglobulinele. Celulele tumorale de mielom au
fost izolate dintr-o tumor de mduv osoas i, iniial, produceau anticorpi
proprii. Prin transferul n cultur, celulele de mielom au fost selectate s fie
deficiente n producerea de anticorpi. Pe un mediu special vor supravieui
doar celulele hibride. Din splina unui oarece se pot forma cteva sute de
celule hibride. Clona celular rezultat dintr-o celul hibrid este izolat i
testat pentru prezena anticorpilor specifici antigenului original. Liniile
pozitive sunt ngheate, propagate n cultur sau injectate n oareci ca
tumori de mielom. Fiecare clon hibridoma va secreta un singur anticorp
specific.
Anticorpii monoclonali se pot utiliza n identificarea celulelor
canceroase la copiii bolnavi de leucemie. Deoarece limfocitele sunt
vulnerabile atacului imunologic, s-a ncercat cuplarea anticorpilor
monoclonali cu antigenele tumorale printr-o toxin chimic, genernd
imunotoxina, care va ucide doar celulele maligne (Collier i Kaplan, 1984).
O problem este ridicat de faptul c cei mai buni anticorpi
monoclonali sunt sintetizai de celulele de oarece, nu de celulele umane. Se
_____________________________________________________________

113

_____________________________________________________________
ncearc producerea de anticorpi monoclonali derivai din celule ale plasmei
umane, prin fuziune cu celule umane din tumori de mielom. O limitare este
reprezentat de faptul c nu pot fi injectai oameni cu antigen, n scopul
prelevrii ulterioare a splinei.

_____________________________________________________________

114

_____________________________________________________________

C e lu le
m ie lo m a
d in c u lt u r

C e lu le
d in s p lin

F u z iu n e
c e lu la r

C lo n a 1

C lo n a 2

C lo n a 3

C lo n a n

n e g a tiv

n e g a tiv

p o z itiv

n e g a tiv

n g h e a r e

d e z g h e a re

In je c ta r e n
o a re c e

C u lt u r
d e c e lu le

A n tic o r p i
m o n o c lo n a li

A n t ic o r p i
m o n o c lo n a li

Fig. 39 Schema metodei standard de producere a anticorpilor monoclonali


cu specificitate predeterminat (modificat dup Mange & Mange, 1990).
_____________________________________________________________

115

_____________________________________________________________
Sistemul HLA
Primele noiuni referitoare la antigenele de transplant au fost relatate
n 1940, ca urmare a grefelor de piele ntre rase diferite de oareci. Soarta
esuturilor transplantate depinde de aa-numitele antigene de
histocompatibilitate. Respingerea se produce n cazul n care esutul donor
posed antigeni de histocompatibilitate diferii de esutul receptor. S-a
descoperit implicarea multor gene diferite, strns nlnuite, ce codific
antigene puternice de suprafa.
Jean Dausset (Premiu Nobel, 1981) a descoperit c serul imun al
ctorva pacieni ce au suferit multiple transfuzii aglutineaz leucocitele la
anumite persoane. Astfel s-au descoperit zeci de antigene n leucocite.
Antigenele cele mai puternice sunt controlate de o serie de gene plasate pe
cromosomul 6 uman, cuprinznd cel puin 7 loci (figura 40).
Genele i antigenele de suprafa codificate sunt cunoscute ca MHC
(complex major de histocompatibilitate - la vertebrate) i HLA (sistemul
antigenelor leucocitare umane). Produsele activitii genelor sunt
polipeptide, care n combinaie cu carbohidraii formeaz glicoproteine de
suprafa celular.
Dou clase de antigene de suprafa celular sunt codificate de
sistemul genelor HLA: clasa I - antigene codificate de genele B, C i A i
clasa II - antigene codificate de gene din regiunea D (DP, DQ, DR).
Clasa I de antigene se ntlnete pe suprafaa tuturor celulelor
nucleate din organismul uman, iar clasa II la celulele sistemului imun.(fig.
40) Prin clonare i secveniere de ADN de la indivizi diferii s-a dedus c
regiunea distal a polipeptidelor sistemului HLA prezint regiuni polimorfe
codificate de diferite alele ale fiecreia din cele trei gene. S-au identificat 15
alele n locusul A, 37 n locusul B, 8 n locusul C i 10 n locusul DR.
Polimorfismul sistemului HLA este foarte mare, numrul de combinaii
posibile fiind imens, astfel nct, nu exist doi oameni cu un sistem HLA
identic, existnd o variabilitate imens a antigenelor de histocompatibilitate.
Numai gemenii monozigoi prezint un sistem HLA identic.
Genele sistemului HLA sunt aparent neutre, dar n anumite condiii
unele combinaii se pot dovedi utile; genele nu sunt exclusiv bune sau rele,
ci pot fi folositoare n anumite condiii i duntoare n altele. Antigenele
pot suferi modificri i ca urmare celulele ce le poart vor fi eliminate de
_____________________________________________________________

116

_____________________________________________________________
organismul respectiv, deoarece devin nonself. Fiecare formul HLA a unui
individ prezint avantaje i dezavantaje.

1
C e n tro m e r

u n it i d e h a r t g e n e t ic
0 ,7
0 ,1

G ene D

T r a n s c r ip ie
i tr a n s la ie

Lan

Lan

Lan

m ic r o g lo b in

m e m b r a n c e lu la r

C L A S A II
m o le c u le d e
s u p r a fa c e lu la r
(p e lim fo c ite i m a c r o fa g e )

CLASA I
m o le c u le d e
s u p r a fa c e lu la r
(p e to a te c e lu le le n u c le a te )

Fig. 40 Genele i antigenele sistemului HLA.

Sistemul HLA nu este numai n centrul aprrii individului, dar chiar


a speciei. Datorit combinaiilor particulare de alele, fiecare individ uman
are o ans diferit de supravieuire, fiecare individ prezentnd o
individualitate imunologic.
_____________________________________________________________

117

_____________________________________________________________
Antigene i alele ale locilor BCA i implicaiile lor n transplantul
de organe
Prin numrul mare de alele, genele sistemului HLA sunt cele mai
polimorfe. Alelele genelor B, C i A controleaz prezena a 68 de antigene
leucocitare.
De exemplu, haplotipul cromosomului 6 uman, la un individ dintr-o
populaie este 7 4 3, reprezentnd alelele B7, C4 i A3. Genotipul HLA al
unei persoane const n dou haplotipuri - unul pentru fiecare cromosom 6.
Datorit diversitii mari de haplotipuri, de multe ori transplantul de organ
eueaz.
Datorit distanei foarte mici dintre genele BCA, crossing-overul se
produce foarte rar n aceast regiune. Astfel, haplotipul BCA este motenit
identic de la tat i de la mam, conform transmiterii n bloc a genelor
nlnuite (fig. 41).
F E N O T IP
= a n t ig e n p r e z e n t

G E N O T IP

= a n t ig e n a b s e n t
B
7 35 44 58

A
3 23 30

35

23

44

30

58

44

30

58

35

23

58

TATA

M AM A

C O P IL I

C O P IL II

C O P IL III

Fig. 41 Motenirea haplotipului de histocompatibilitate ntr-o familie


ipotetic.
_____________________________________________________________

118

_____________________________________________________________
Pe lng sistemul HLA, pentru reuita unui transplant este necesar
compatibilitatea sistemului ABO sangvin i a antigenelor sistemului minor
de histocompatibilitate.
De exemplu, leucemia este o boal datorat proliferrii maligne a
unei limfocite imature, a unei mielocite sau altei celule albe sangvine.
Tratamentul se realizeaz prin transplant de mduv osoas de la un individ
cu sistem HLA identic. O metod modern ce elimin consecinele
imunologice ale transplantului este terapia genic.
Un alt aspect al sistemului genic HLA este asocierea statistic ntre
diferitele alele i unele maladii.
Tiwari i Terasaki (1985, cf. HG, 1990) au semnalat diferite antigene
HLA corelate cu sute de maladii. De exemplu, apariia spondilitei
anchilopoetice - o inflamaie cronic cu fenomene degenerative a
articulaiilor - este corelat cu prezena antigenului B27. Dar frecvena
apariiei maladiei este de 1/2000 i multe persoane cu antigenul B27 sunt
sntoase. Din aceast cauz s-au emis dou ipoteze:
a. Ipoteza nlnuirii
Susceptibilitatea la apariia spondilitei anchilopoetice este dat de o
alel Ank a unei gene strns nlnuite locusului HLA-B (haplotipul
cromosomului 6 este Ank B27).
b. Ipoteza efectului antigenic
Polipeptida codificat de alela B27 determin susceptibilitatea la
aceast boal. Probabil antigenul B27 este un receptor de suprafa pentru
un virus sau pentru un alt agent patogen.
Un alt exemplu este lupusul eritematos sistemic, maladie asociat cu
antigenul B8 al HLA; n aceast boal autoanticorpii acioneaz mpotriva
componentelor membranei celulare, a substanei nucleare, a organitelor
citoplasmatice afectnd mai multe organe.
Diabetul juvenil (insulino - dependent) este asociat cu antigenele de
histocompatibilitate DR3 i DR4. n cazul acestei maladii, celulele beta
productoare de insulin, din insulele Langerhans ale pancreasului, sunt
distruse de autoanticorpi.

_____________________________________________________________

119

_____________________________________________________________

Transmiterea
informaiei ereditare

La om, ca la toate organismele eucariote transmiterea informaiei


ereditare se face n dou etape: replicarea semiconservativ a ADN-ului care
_____________________________________________________________

120

_____________________________________________________________
duce la dublarea materialului genetic i distribuirea materialului genetic
dublat prin diviziunea celular.

4.1. Replicarea ADN-ului uman


Replicarea poate fi definit ca fiind procesul de biosintez pe baz
de complementaritate dintr-o molecul mam de ADN a dou
molecule fiice, identice ntre ele i cu molecula mam. Mecanismul
replicrii a fost descris de Watson i Crick, care au emis ipoteza
replicrii semiconservative, ipotez confirmat prin studii ulterioare;
astfel fiecare molecul fiic conine o caten polinucleotidic veche de
la molecula mam i o caten nou sintetizat pe baz de
complementaritate.
Mecanismul replicrii la om este similar cu al eucariotelor i se
desfoar n etape:
- decondensarea fibrei de cromatin cu derularea filamentului
nucleosomal, proces catalizat de topoizomeraze;
- aciunea helicazelor care desfac, pe anumite poriuni, catenele
ADN-ului;
- fixarea unor proteine SSB (single strand binding proteins) care
stabilizeaz i protejeaz catenele;
- aciunea enzimei primaza care va aranja pe baz de
complementaritate ribonucleotide formnd un ARN primer cu rol de
amorsare a replicrii, care va fi ulterior nlocuit cu
dezoxiribonucleotidele corespunztoare;
aezarea
pe
baz
de
complementaritate
a
dezoxiribonucleotidelor ce vor forma catena nou n dreptul catenei
vechi care joac rolul de matri;
- polimerizarea nucleotidelor noii catene de ctre ADN polimeraza
III care nainteaz ntotdeauna n direcia 5-3 (din aceast cauz
polimerizarea se face continuu pe catena 3-5 numit caten
conductoare i discontinuu, pe fragmente mici fragmentele Okazaki
pe catena 5-3 numit i caten ntrziat(fig.42).
_____________________________________________________________

121

_____________________________________________________________
Una din particularitile de replicare a ADN-ului la eucariote este
prezena a dou subtipuri de ADN polimeraz: alfa pentru catena
ntrziat i delta pentru catena conductoare. De asemenea n procesul
replicrii la eucariote intervin i factorul de replicare C i antigenul
nuclear de proliferare celular. La eucariote fragmentele Okazaki sunt
mai scurte, iar replicarea ncepe n mai multe puncte de pe un
cromosom i se propag n ambele sensuri pn la punctele de
terminare formnd secvenele autonome de replicare (repliconi).
Spre deosebire de procariote la care replicarea se desfoar
continuu, la eucariote replicarea ADN-ului se desfoar ntr-o
perioad strict delimitat a ciclului celular, numit faza S.
Segmentele terminale ale cromosomului (telomerele) nu pot fi
replicate de polimeraz, aici acionnd enzime specifice denumite
telomeraze (vezi i cap. III); fr activitatea telomerazelor cromosomii
eucariotelor ar deveni tot mai scuri i pe msura pierderii de material
genetic ar deveni letali. n cazul progeriilor, boli ereditare caracterizate
prin mbtrnire prematur, a fost demonstrat scurtarea telomerelor
ca factor cauzal, ceea ce confirm ipoteza implicrii telomerazelor n
procesul de mbtrnire fiziologic.

_____________________________________________________________

122

_____________________________________________________________

Fig. 42. Replicarea ADN-ului la eucariote

4.2. Bazele celulare ale ereditii


i ale variabilitii umane
Fiecare individ uman provine dintr-o singur celul diploida (2n =
46) - oul (zigotul), rezultat n urma fecundrii unui gamet femel haploid
(n=23) - ovulul de ctre un gamet mascul haploid (n=23) - spermatozoidul.
Prima celula diploid - oul (zigotul) - se divide i se difereniaz, dnd o
nou fiin uman unic din punct de vedere genetic, compus din
aproximativ 100 de miliarde de celule. Celulele umane sunt foarte diferite ca
mrime, dimensiunea celulelor depinznd de localizarea n esuturi i de
funciile lor; dar, n medie, celulele umane au aproximativ 20 de microni n
_____________________________________________________________

123

_____________________________________________________________
diametru. Nucleul celular are 5 - 10 microni n diametru. Alte organite
celulare au dimensiuni de la un micron pn la nanometri i Angstromi.
Toate celulele umane au nucleu, cu excepia globulelor roii mature
din snge; deci fiecare celul nucleat, conine aceeai informaie genetic.
Fiecare celul diploid are 46 de cromosomi, care conin informaia genetica
necesar pentru a da o nou fiin uman. De fapt, n fiecare celul uman
exist n stare activ, sau inactiva la un moment dat, peste 100.000 de gene
care asigura n viaa prenatal toate procesele de difereniere celular,
dezvoltare i cretere.
Din 1940, de cnd se folosete microscopia electronic, s-a
descoperit ultrastructura celulei, adic organitele care nu au fost evideniate
la microscopul optic i citoscheletul (microscopul electronic realiznd mriri
de peste 200.000 X comparativ cu 2.000 - 3.000 X realizate cu cele mai
bune microscoape optice). Teoretic, capacitatea de rezoluie a microscopului
electronic este de 0,25 Angstromi, n timp ce microscopul optic poate
distinge mrimi de 0,2 - 0,3 microni.
Cu ajutorul microscopului electronic s-a descoperit c celula are o
structura interna nalt organizata, cu interconexiuni membranare, coninnd
numeroase organite i incluziuni celulare, precum i numeroase
microfilamente i microtubuli care formeaz citoscheletul.
Nucleul celular la toate organismele eucariote, deci i la om, conine
aproape tot materialul ereditar constituit din ADN, un mic procent (2%) din
ADN-ul uman aflndu-se localizat n mitocondrii. Fiecare celul uman
conine aproximativ 180 cm de filamente de ADN puse cap la cap, iar corpul
unui om adult are cteva mii de miliarde de filamente de ADN.
n interfaz, dup replicarea ADN-ului din faza S, filamentele de
ADN intr n interaciune cu cele cinci tipuri de proteine histonice
nucleare, formnd nite corpusculi sub form de bastonae numii
cromosomi. n cromosomi filamentele de ADN sunt nalt spiralizate,
compacte, avnd acum o lungime de 1:8.000 din lungimea iniial.
n interfaz cromosomii sunt despiralizai, fiind vizibili la microscopul optic
sub form de cromatin. Prin colorarea celulei cu colorani specifici pentru
ADN, n timpul interfazei, unele regiuni din lungul cromosomilor se
coloreaz mai intens. Aceste regiuni sunt constituite din heterocromatin,
fiind formate din ADN inactiv genetic. Celelalte regiuni, colorate mai slab,
_____________________________________________________________

124

_____________________________________________________________
sunt constituite din eucromatin, formate din ADN activ genetic. Regiunile
eucromatice conin genele care codific sinteza proteinelor.
n nucleu se afl si un corpuscul dens, mic, colorat diferit de restul
nucleului, numit nucleol, compus din ARN, ADN i proteine nucleare.
Nucleolul este locul de producere al precursorilor ribosomali. La
formarea nucleolului particip regiuni specifice ale unor cromosomi,
numite regiuni organizatoare de nucleoli (NOR). NOR conin ADN sau
informaia genetic necesar pentru sinteza ARN ribosomal (ARNr). n
celulele umane NOR sunt asociate cu braul scurt al fiecrui cromosom
din cele cinci perechi de cromosomi acrocentrici (subtelocentrici), cu
centromerul localizat aproape de captul unui bra al cromosomului
(Evans et al., 1974). n cariotipul uman, perechile de cromosomi
acrocentrici sunt: 13, 14, 15 (mijlocii) i 21 i 22 (mici); acestea prezint
si satelii mici la braele scurte (detalii sunt prezentate n capitolul III).
Ribosomii produi de NOR migreaz din nucleu n citoplasm; o
parte din ei rmn liberi, iar alt parte se ataeaz de reticulul
endoplasmatic.
Majoritatea celulelor umane prezint un singur nucleol; celulele care
produc o cantitate mare de proteine, conin doi sau mai muli nucleoli, de
exemplu celulele insulare din pancreas, care sintetizeaz o mare cantitate de
protein - insulina (Anthony i Thibodeau, 1983).
Pentru ereditate prezint importan i mitocondriile aflate n
citoplasm. Mitocondria, i n particular mitocondria uman, dei se afl sub
controlul genelor nucleare, este un organit destul de independent deoarece
are un ADN circular propriu, similar cu cel bacterian, format din
aproximativ 17.000 pb, care sunt suficiente pentru a codifica aproximativ 20
de proteine ( Anderson et al, 1981). Mitocondria, conine de asemenea tipuri
proprii de ARN i ribosomi de dimensiuni mai mici; ea are capacitatea de
diviziune (Strickberger, 1985). Mitocondria cu materialul genetic propriu
este sediul ereditii extranucleare din celulele umane.
Este cunoscut faptul c mitocondria provine dintr-un organism
procariot ancestral anaerob de tipul bacteriilor - protomitocondria - (Lynn
Margulis, 1981), care a stabilit o relaie de simbioz cu un alt procariot
aerob - gazd, formnd astfel celula eucariot cu mitocondrii. Aceast teorie
explic faptul c aparatul mitocondrial nu a suferit schimbri de mai bine de
un miliard de ani (Pines, 1978) avnd o mare stabilitate att la plante ct i
la animale. n acest sens, n 1978 trei cercettori au sugerat idea c ADN-ul
_____________________________________________________________

125

_____________________________________________________________
mitocondrial al femeilor din toat lumea provine de la o singur femel
ancestral (Wilson et al., 1978). Datorit faptului c mitocondria din
celulele umane are o ereditate care se transmite pe linie matern, aceti
cercettori au examinat ADN-ul mitocondrial de la 147 de femei
reprezentnd cinci mari regiuni geografice. Analiza pe computer a acestui
ADN a permis construirea unui "arbore familial"; diferenele dintre
moleculele de ADN mitocondrial erau extrem de mici, ceea ce a ntrit
concluzia anterioar.

Importana genetica a diviziunii celulare


La om i la alte specii cu reproducere sexuata se cunosc dou tipuri
de diviziune celulara indirecta: mitoza si meioza.
Mitoza este n acelai timp caracteristic reproducerii asexuate
pentru toate speciile de vieuitoare, fiind cel mai comun mijloc de
reproducere celular. Mitoza este mecanismul prin care se asigura
transmiterea fidel a genelor la toate celulele somatice, care provin de la o
celul originara unic - zigotul. n mitoz, materialul nuclear se divide,
astfel c rezult celule fiice, care sunt genetic identice.
Meioza are loc numai n cazul formarii gameilor, ducnd la
mprirea materialului genetic parental pe parcursul formrii gameilor, care
se vor uni n procesul fecundaiei.
Mitoza si meioza cuprind doua procese: diviziunea nucleara sau
cariochineza i diviziunea citoplasmei sau citochineza.
Mitoza la om
Actul fecundrii, adic unirea celulelor sexuale umane - a unui
singur spermatozoid cu un ovul, conduce la formarea primei celule a noii
generaii - zigotul. Cromosomii zigotului conin informaia ereditara pentru
dezvoltarea unei noi fiine umane. Zigotul format trebuie s se divid; n caz
contrar potenialul uman i unicitatea ereditii lui este pierduta din
patrimoniul genelor umane (n cazul eliminrii zigotului dup fecundare).
Imediat ce ncepe mitoza, mii de gene individuale trebuie s intre n
funciune ( sa fie amorsate) n acord complet cu timpul vieii umane, pentru
a facilita continuarea diviziunii celulare si dezvoltarea normal.
Funcia esenial a mitozei este asigurarea distribuirii egale a ADNului cromosomial n fiecare din celulele noi, ncepnd cu prima diviziune a
_____________________________________________________________

126

_____________________________________________________________
zigotului, pn la formarea miliardelor de celule care constituie corpul
uman.
Atunci cnd o celul primete propriul semnal genetic de a se pregti
pentru diviziune, se iniiaz un ntreg lan de evenimente care includ sinteza
ADN-ului, ARN-ului si a proteinelor. n timpul fazei S a ciclului celular, n
celulele umane i ale tuturor eucariotelor, ADN-ul din cromosomii nucleului
se duplic cu mare precizie; la sfritul mitozei cte un set complet de
cromosomi identici este distribuit n fiecare din celulele fiice.
Pentru a demonstra c fiecare celul somatic conine informaia
genetica necesar producerii unui nou organism identic cu cel din care
provine aceast celula (adic este totipotent), F. C. Steward, de la
Universitatea Cornell din SUA a folosit celule individuale din rdcina
matur de morcov (un explant de floem), pe care le-a cultivat pe medii
artificiale, reuind sa obin o nou planta de morcov, identic cu cea
parental. Acest procedeu se numete clonarea organismelor, care la plante
s-a realizat pn acum pentru multe specii; metodele de clonare la animale
sunt foarte diferite de cele folosite la plante (aceste metode vor fi prezentate
mai departe).

Importana mitozei n repararea esuturilor


n caz de accidente, care duc la lezarea esuturilor prin rnire,
procesul de reparare si cretere a esuturilor lezate se face prin diviziune
mitotic prelungit. Celulele din vecintatea ariei lezate sunt stimulate prin
comanda venit de la ADN-ul celular pentru a rencepe diviziunea celulelor,
necesar reparrii ariei lezate. La o repetare a leziunii, celulele sunt din nou
chemate pentru diviziunea mitotic de refacere. Dup repararea leziunii,
celulele i nceteaz diviziunea, de obicei prin inhibiia celular de contact
sau printr-o inhibiie feed-back mediat, iar genele care au iniiat diviziunea
celular devin silenioase, adic sunt represate pn la un nou semnal, cnd
vor fi din nou activate.
De exemplu, n cazul eliminrii prin biopsie a unei poriuni mici din
ficat, poriunea nlturat va fi refcuta prin diviziunea celulelor de
regenerare a ficatului. Acest proces se poate repeta de mai multe ori cu
acelai rezultat, deoarece celulele normale ale ficatului sunt capabile s
rspund la schimbrile nconjurtoare.
_____________________________________________________________

127

_____________________________________________________________
Trebuie menionat ca nu toate esuturile sunt capabile de reparare; de
exemplu repararea esutului nervos se face doar pe seama diviziunii
celulelor gliale, neuronii fiind lipsii de capacitatea de diviziune.

Regula lui Hayflick: limitare numrului de diviziuni celulare


Leonard Hayflick a descoperit faptul ca celulele normale n
cultura nu se divid mitotic indefinit; de exemplu, fibroblatii prelevai
din tegumentul uman i crescui pe un mediu special, se vor divide n
timp numai de un anumit numr de ori. Deci, aparatul celular al unei
celule dintr-un esut dat posed o limitare a numrului de diviziuni
mitotice.
Numrul de diviziuni de care este capabila o linie celulara n cultur
descrete cu vrsta celulei donor; de exemplu, celulele prelevate din
embrionul uman au o limit de aproximativ 50 de dublri, dar limita se
reduce la numai 20 de dublri pentru celulele prelevate de la un om n vrst
de 30 de ani.
Speciile cu un maximum diferit de via au un potenial diferit de
dublare n culturile celulare. La broasca estoas din Galapagos, unul din
cele mai longevive animale (peste 150 de ani), fibroblatii embrionari trecui
n cultur pot suferi 125 de dublri. La oarece care de obicei triete numai
2-3 ani, fibroblatii embrionari sunt capabili s sufere n cultur doar 14 - 28
de dublri.
Teoria mbtrnirii poate fi dedus din regula lui Hayflick referitoare
la diviziunea celular: adic numrul limitat de dublri celulare este corelat
cu maximum de longevitate. Pentru om teoretic vrsta maxim, programat
genetic, este de aproximativ 110 ani.
n concluzie existena unei limite a numrului de dublri celulare
corelat cu durata vieii este o caracteristic fundamental, controlat
genetic, a organismelor vii. Este clar c limita lui Hayflick referitoare la
numrul maxim de diviziuni celulare este diferit la diferite specii, dar
ntrebarea este "de ce?". Rspunsul nu este nc cunoscut, dar se poate
afirma c el se afl nscris n programul genetic al speciilor.

Diviziunea celulara i sindroamele ereditare ale mbtrnirii


Sindromul Hutchinson - Gilford (progeria) i sindromul lui
Werner sunt dou boli ereditare caracterizate printr-o mbtrnire rapid si o
_____________________________________________________________

128

_____________________________________________________________
scurtare a vieii. Indivizii afectai de aceste boli arat de aproximativ zece
ori mai n vrst dect cei normali. Copii progerici dezvolt o serie de
simptome cum ar fi: calviia, artroza, zbrcirea pielii, boli cardio-vasculare
nc de la vrsta de apte ani; decesul survine de obicei nainte de vrsta de
15 ani, fiind cauzat n general de infarctul miocardic sau de stopul cardiac.
n cazul sindromului Werner, simptomatologia se manifest la aproximativ
15 ani, decesul survenind la 25 de ani.
Celulele cultivate din esuturi provenite de la indivizii bolnavi sunt
capabile s se dubleze de 2 - 10 ori, ceea ce sugereaz o schimbare n
mecanismul controlului mitozei. Este clar ca extinderea mediei de viaa a
omului si calitatea vieii se datoreaz limitelor de rennoire a organelor, de
reparare a esuturilor i de nlocuire a celulelor moarte; deci ele rezida n
nelegerea mecanismului molecular al mitozei.

Dereglarea mitozei si cancerul


Celulele diferitelor esuturi ale corpului uman se caracterizeaz
printr-o anumit rat a diviziunii celulare; aceast rat se afl sub control
genetic.
Alterarea sau pierderea controlului genetic al mitozei va determina
apariia unor schimbri morfo-funcionale n celulele afectate: transformarea
malign. Aceste schimbri se transmit la celulele fiice n procesul mitozei.
O caracteristic important a celulelor canceroase este metastazarea:
capacitatea de a migra pe cale sangvin sau limfatic n alte organe unde se
pot stabili, prin diviziune iniiind o nou tumor.
Meioza n reproducerea uman i semnificaia ei
pentru evoluie
Deoarece numrul de cromosomi umani 2n = 46 rmne constant
de la o generaie la alta, dublarea n continuare a cromosomilor este
imposibil. Acesta este rezultatul evoluiei, care const n aceea c la
organismele cu reproducere sexuat a aprut un mecanism de
producere a gameilor cu un numr de cromosomi redus la jumtate haploid (n), fa de numrul dublu de cromosomi - diploid (2n) al
organismului. Acest mecanism este asigurat de diviziunea meiotic.
_____________________________________________________________

129

_____________________________________________________________
Meioza este o reducere cantitativ a numrului de cromosomi i a
dozei genelor, dar cu o prezervare calitativ a genomului. Meioza este un
proces foarte exact care conduce la reducerea numrului diploid de
cromosomi (2n) din celulele mam ale gameilor, la un numr haploid n
celulele sexuale mature, la toate speciile cu reproducere sexuat. Unele
abateri ale meiozei (referitoare la plus sau minus de cromosomi n gamei)
sunt, de obicei, mici, dar letale pentru zigot.
n meioz au loc dou diviziuni nucleare succesive: meioza I si
meioza II. Asemntor mitozei, n meioz sunt tot patru faze: profaza,
metafaza, anafaza i telofaza.
Un eveniment important n meioz este formarea perechilor de
cromosomi omologi. Al doilea eveniment important al meiozei este
reducerea la jumtate a numrului de cromosomi, iar un al treilea eveniment
este producerea variabilitii datorit recombinrii genetice intra- i
intercromosomiale i prin conversie genic, fenomene care au loc n cursul
meiozei.
n comparaie cu mitoza, n meioz cromosomii omologi formeaz n
metafaza I (M I) bivaleni tetracromatidici, care n anafaza I (A I) se separ
la polii celulei, iar n telofaza I (T I) se formeaz dou celule fiice cu
numrul de cromosomi redus la jumtate. Fiecare din celulele fiice din T I
conin n nucleele lor numai cte un cromosom - matern sau patern - din
fiecare pereche iniial de cromosomi bivaleni, spre deosebire de mitoz
cnd, n metafaz, n placa ecuatorial se aeaz cromosomii univaleni , iar
n anafaz fiecare cromosom se divide n cele doua cromatide care migreaz
una la un pol si alta la cellalt pol , astfel nct n telofaz se formeaz
nuclee fiice care au fiecare cte o cromatid din fiecare cromosom.
n profaza I (P I) a meiozei, n diploten cromosomii bivaleni sau "n
tetrad" au n total cte patru cromatide i acum ncepe chiasmarea lor n
lungul cromatidelor, care se unesc n anumite puncte (se "ncalec", se
"ncrucieaz") i are loc schimbul egal i reciproc de segmente ntre
cromatidele nesurori, numit crossing - over. Nu toate chiasmele vor duce la
schimburi genetice sau crossing - over; dar chiasmele dintre cromatide sunt
necesare fizic pentru a se realiza schimburile de segmente dintre cromatide.
Numai schimburile dintre cromatidele nesurori conduc la noi combinaii de
gene. Crossingover-ele dintre cromatidele surori nu pot fi puse n eviden
experimental deoarece cromatidele sunt identice - au gene de acelai fel,
deci n stare homozigot (AA sau aa). n concluzie, crossingover-ul care
_____________________________________________________________

130

_____________________________________________________________
are loc n meioz ntre cromosomii omologi conduce la recombinarea
genelor i, n final, dup telofaza II la formarea gameilor recombinai. Fr
crossing-over genele din cromosomi rmn neschimbate indefinit, cu
excepia unor mutaii ocazionale.
A doua diviziune meiotic, care pleac de la dou celule haploide (n)
din telofaza I, este o diviziune ecvaional, ca o mitoz, dar la nivel haploid.
Ea conduce, n final, n telofaza II, la formarea a patru celule haploide (n),
care au n nucleele lor numai cte o cromatid din cele patru ale unui
cromosom bivalent din meioza I; aceste celule vor deveni gamei: patru
spermatozoizi - n cazul spermatogenezei, i un ovul i trei globule polare n cazul ovogenezei.
Crossing-overul ntre cromatidele cromosomilor matern i patern ai
unei perechi omoloage, produce cromosomi recombinai care conin att
gene materne, ct si paterne. n fiecare meioz are loc att crossingover-ul
ntre diferii cromosomi omologi, ct si segregarea independent a
cromosomilor recombinai (dansul cromosomilor). Numai datorit dansului
cromosomic, fr a considera crossing-over-ul, numrul (probabilitatea) de
gamei recombinai care s aib toi cei 23 de cromosomi de la un singur
printe este foarte mic: 1 la 4.194.304. De aceea meioza este o surs de
variabilitate genetic, care constituie substratul biologic asupra cruia
acioneaz selecia natural.
O alt sursa de variabilitate genetic o constituie mutaiile care pot
avea loc n molecula de ADN, precum i variabilitatea datorat ansei de
unire a gameilor parentali n timpul fecundarii.
Aceste mecanisme ale variabilitii genetice produc un numar
astronomic de combinaii. Primul dintre mecanisme, recombinarea
intercromosomial (dansul cromosomilor) este urmat de formarea gameilor
recombinai i de unirea lor aleatorie (la ntmplare) n timpul fecundrii.
Omul are 23 perechi de cromosomi n setul diploid i 23 cromosomi n
fiecare gamet haploid. n meioz, prin recombinarea intercromosomial,
cele 23 perechi de cromosomi se pot asorta probabilistic n gamei, conform
formulei 223, adic 8.388.608 posibiliti; iar prin fecundare, la care particip
gameii de la doi indivizi de sexe diferite, posibilitile de recombinare a
cromosomilor sunt mai mari de 17 bilioane, adic 246 (8.388.608 x
8.388.608).
_____________________________________________________________

131

_____________________________________________________________
Daca la recombinarea intercromosomial se adaug crossingover-ul
i mutaiile genetice, atunci numrul de gamei diferii posibili este
inimaginabil de mare.
Avnd n vedere acest fapt se poate deduce c o femeie, care produce
aproximativ 480 de ovule n timpul vieii ei reproductive, va avea o
probabilitate infinit de mic de a produce dou ovule cu acelai potenial
genetic. Un brbat este capabil s produc aproximativ un bilion de
spermatozoizi n timpul vieii sale reproductive, din care , de asemenea, nici
doi spermatozoizi nu au aceeai constituie genetic.
Avnd n vedere numrul enorm de combinaii genetice posibile, este
de neles cum fiecare din cei peste cinci miliarde de oameni care populeaz
planeta Terra poate fi un unicat genetic. Existena unei multitudini de
genotipuri n specia uman face posibil supravieuirea n condiii foarte
diferite de mediu.
n final, trebuie amintit c unele cercetri au demonstrat faptul c
dispunerea cromosomilor umani nu se face la ntmplare n profaza
timpurie; citologii furnizeaz acum date despre dispunerea ordonat a
cromosomilor, ntr-o configuraie prestabilit n nucleu. S-a observat c, de
exemplu, cromosomii din nucleul haploid sunt unii unul de altul, dup tipul
lor, ntr-o ordine specific, i c ei sunt ataai de membrana nuclear
(Lewin, 1981). nseamn oare c prin rotaia si plierea membranei nucleare
n momente specifice, distanta dintre cromosomii omologi se micoreaz,
permind mperecherea lor? Viitoarele cercetri vor clarifica
comportamentul cromosomilor n timpul meiozei si mitozei.

4.3. Noiuni privind reproducerea uman


Spermatogeneza
Spermatogeneza are loc n gonadele masculine - testicule, n epiteliul
germinal al tubilor seminiferi format din timpul embriogenezei. Celulele
primordiale, celule mam ale gameilor, se divid mitotic i formeaz o
populaie de spermatogonii diploide(2n = 44 + XY); acestea se difereniaz
apoi n spermatocite primare (de ordinul I) diploide (2n = 44 + XY), care
intr n meioz i dau cte dou spermatocite secundare (de ordinul II)
_____________________________________________________________

132

_____________________________________________________________
haploide (n = 22 + X i n = 22 + Y) din care, dup nc o diviziune mitotic
la nivel haploid (meioza II), rezult patru spermatidii (din care dou au n =
22 + X si dou au n = 22 + Y). Dezvoltarea complet a spermatidelor se face
n 64 pn la 72 de zile. Din cele patru spermatide, prin procese
morfofiziologice iau natere patru spermatozoizi maturi (gameii masculi),
din care doi au n = 22 + X i doi au n = 22 + Y cromosomi.
Spermatozoizii produi n tubii seminiferi sunt reinui n
epididim unde sunt inclui ntr-un fluid secretat de celulele specializate
ale tubilor colectori. nainte de a ptrunde n epididim, spermatozoizii
sunt incapabili de a fecunda ovulul; ei sunt activai numai dup ce au
trecut prin epididim. Sperma poate rmne viabil sptmni sau chiar
luni n epididim.
Pentru ca spermatogeneza sa aib loc, testiculele trebuie s fie
meninute la o temperatur mai joas cu 3-4 grade Celsius fa de
temperatura normal de 370C a corpului (Grollman, 1969), de aceea, n
embriogenez testiculele coboar n afara corpului, n scrot.
Spre deosebire de femeie care produce ovule numai la fiecare ciclu
menstrual, o dat pe luna pn la menopauza, un brbat sntos produce
continuu un numr mare de spermatozoizi de la vrsta de aproximativ 12 ani
pn la moarte.

Bncile de sperm i utilitatea lor


n 1866, Montegazza a sugerat faptul c un brbat muribund pe
cmpul de lupt poate lsa n mod legal motenitori cu sperma lui, dac
aceasta va fi ngheata i pstrat. n 1945, Parkes revizuiete lucrarea lui
Montegazza i susine ca nghearea nu este un pericol care s determine
modificri genetice ale spermei. n 1953, Scherman demonstreaz c sperma
uman ngheat i apoi dezgheat este capabil de fecundare i de inducere
a dezvoltrii embrionare normale. Tot n 1953, Bunge raporteaz prima
graviditate obinuta cu sperma ngheat i dezgheat pentru fecundare.
Sperma uman se pstreaz acum n azot lichid la temperaturi de
-1960C. S-a raportat naterea unui copil normal prin folosirea inseminrii
artificiale cu sperm pstrata n azot lichid mai mult de 10 ani. La bovine sau nscut milioane de viei normali folosind sperma pstrat artificial mai
mult de 20 de ani.
_____________________________________________________________

133

_____________________________________________________________
n 1960, Muller a recomandat c, pentru pstrare, sperma s fie
colectat de la brbai care au demonstrat caliti excepionale, care au o
sntate buna, precum si toate calitile cerute n societate. n 1980, un om
de afaceri din California a deschis o banc de sperm de nalt selecie de la
donatori cu un QI (coeficient de inteligen) excepional (oameni de tiin,
laureai Nobel, etc.). Datele celor care au contribuit cu sperm la aceast
banc sunt secrete. n 1982, s-a nscut primul copil prin fecundare cu
sperm depozitat n aceast banc.
Astzi muli brbai devin sterili dup tratamente chirurgicale,
proceduri de chimio- i radioterapie pentru diverse boli; alii lucrez n
condiii de expunere la substane mutagene sau cancerigene. n aceste cazuri
se poate recurge la prelevarea spermei de la acetia (nainte ca ei s fie
expui) i la pstrarea ei artificial, pentru a putea fi folosita n vederea
naterii unor copii lipsii de risc genetic.

Cauzele infertilitaii masculine


Cnd numrul de spermatozoizi anormali ntrece 30%, brbatul este
de obicei steril. Aproape n patru din zece cazuri infertilitatea este primar,
dat de sperma anormal, cauzat de un numr sczut de spermatozoizi (2030 milioane/ml), de o slab motilitate a spermatozoizilor (50-80% din
spermatozoizi au o motilitate de numai o or dup ejaculare) sau de o
morfologie anormal a spermei (spermatozoizi macrocefalici, microcefalici,
bicefalici, de form ascuit sau conic, imaturi). ntr-o mostr "normal" de
sperm, 70-80% din spermatozoizi au capul de form oval.
Alte cauze ale infertilitii masculine sunt: testiculul necobort
congenital (criptorhidie), deficiene hormonale (care afecteaz
spermatogeneza), unele boli infecioase (parotidita epidemic, tuberculoza,
malaria, boli venerice), drogurile (citostaticele, aspirina, marijuana - reduc
numrul de spermatozoizi sau determina formarea de spermatozoizi
anormali), cauze imunologice (formarea de autoanticorpi pentru sperm),
varicocelul (genereaz 33% din cazurile de infertilitate), defecte genice cum
ar fi: mucoviscidoza, anemia falciform caracterizate prin azoospermie,
sindromul Cartagener caracterizat prin imobilitatea spermatozoizilor, sau
anomalii cromosomiale - de exemplu sindromul Klinefelter caracterizat prin
disgenezie gonadic cu azoospermie.
_____________________________________________________________

134

_____________________________________________________________

Ovogeneza
De la pubertate organele reproductive feminine ncep ritmul sexual
de circa 28 de zile, adic ciclul menstrual, care normal continu nc 30 - 40
de ani. O femeie la care pubertatea a nceput la vrsta de 12 ani i ovuleaz
12 ovule mature pe an va realiza, n 40 de ani de via reproductiv, 12 x 40
= 480 de oocite. Estimativ, o femeie se nate cu aproximativ 500.000 oocite
primare; cele care nu vor fi utilizate n timpul vieii reproductive (eliminate
sau fecundate la fiecare ciclu) vor degenera pe parcursul menopauzei.
Procesul de ovogenez are loc aproximativ la mijlocul perioadei
dintre nceputul i sfritul unui ciclu menstrual, cnd se produce un singur
ovul n ovar - n mod normal, alternativ, n ovarul drept sau n cel stng.
Uneori se poate produce cte un ovul, simultan de ctre ambele ovare, sau
un singur ovar poate produce mai mult dect un ovul; n aceste cazuri pot
rezulta nateri multiple (gemeni dizigoi - 2,3 sau mai muli copii deodat).
Deci, ovogeneza are loc n gonadele femele - ovare, unde se afl esutul
germinativ cu celule foliculare primare diploide cu 2n = 46 cromosomi, care
se divid mitotic i dau oocite primare (ovocite de ordinul I) cu 2n = 44 +
XX. Oocitele primare intra n meioza I i dau un oocit secundar (ovocite de
ordinul II) i un globul polar, fiecare cu un numr de cromosomi redus la
jumtate - n = 22 + X. n meioza II, oocitul secundar se divide din nou,
mitotic la nivel haploid, dnd un ovul cu n = 22 + X i un alt globul polar cu
n = 22 + X. La fel i globulul polar, rezultat din meioza I sufer meioza II,
deci se divide mitotic la nivel haploid, dnd dou globule polare fiecare cu n
= 22 + X.
n urma celor dou diviziuni meiotice (I i II) rezult un gamet femel
- ovulul cu n = 22 + X i trei globule polare, fiecare cu cte n = 22 + X , care
nu particip la fecundare fiind eliminate. Numai ovulul se va uni cu
spermatozoidul n procesul fecundrii i va da oul (zigotul), care reface
numrul diploid de cromosomi, 2n = 44 + XX n cazul sexului femini, sau
2n = 44 + XY n cazul sexului masculin.

Cauzele genetice ale sterilitii feminine


Cea mai frecvent cauz a sterilitii feminine ereditare este
anovulaia (incapacitatea de a produce ovule mature). Anovulaia poate fi
dat de un dezechilibru hormonal, care poate fi cauzat de o diet improprie,
droguri, infecii, stres sau de boli cronice. n asemenea cazuri infertilitatea
_____________________________________________________________

135

_____________________________________________________________
poate fi tratat cu medicamente care induc ovulaia, provocnd o ovulaie
multipl.
Cauzele genetice ale sterilitii feminine sunt: anomalii
cromosomiale care produc disgenezii gonadice cum ar fi monosomia X sindromul Turner (45,X0), mozaicisme cromosomiale (46,XX/45,X0),
trisomia X (47,XXX) sau mutaii genice cum ar fi sindromul Kaufman McKusick (sept vaginal transversal), sindromul Rokitanski - Kuster Hauser (absena uterului/vaginului), displazia mna - picior - uter
(duplicarea parial a tractusului genital), etc.
Bncile de ovule. Pentru a ajuta femeile care sunt incapabile de a
produce ovule mature, Fundaia Clinic din Cleveland a deschis, n 1988,
prima banc de ovule din SUA. Banca de ovule funcioneaz la fel ca i cea
de sperm: donatoarele de ovule nu cunosc femeile primitoare; donatoarele
sunt n prealabil testate pentru boli genetice sau transmisibile sexual, etc.
Studiile efectuate pe femei la care nu a fost identificat cauza
sterilitii i care au solicitat inseminarea artificial, nscnd apoi copii
sntoi, au sugerat existena unor alte cauze, genetice sau nu, ale sterilitii
feminine, cauze care vor trebui identificate ulterior.

Fecundarea
Actul sexual, inseminarea artificial i fecundarea in vitro (IVF) sunt
mijloacele prin care sperma ajunge la ovul pentru a avea loc fecundarea. n
mod natural, sperma este depus n vagin n urma actului sexual i trece n
canalul cervical al colului uterin. O mic cantitate din aceast sperm
continu drumul spre ovul, ajungnd n partea superioar a trompelor
uterine. Un singur spermatozoid penetreaz ovulul, toi ceilali rmai fiind
exclui n mod fiziologic.
n procesul fecundrii nucleul spermatozoidului cu n = 22 + X sau n
= 22 + Y cromosomi fuzioneaz cu nucleul ovulului, care are n = 22 + X
cromosomi, rezultnd o celul diploid - oul sau zigotul cu 2n = 44 + XY
sau 2n = 44 + XX cromosomi.
Penetrarea ovulului de ctre spermatozoid i formarea zigotului se
face n aproximativ 12 ore. n timpul fecundrii ovulul i spermatozoidul
contribuie n egal msura la formarea zigotului cu materialul ereditar
nuclear, fiecare donnd 23 cromosomi.
_____________________________________________________________

136

_____________________________________________________________
Dat fiind faptul c toate mitocondriile oului provin numai de la ovul
(numai nucleul spermatozoidului ptrunde n ovul), nseamn c tot ADN ul mitocondrial (ADNmt), cu genele lui, provine de la ovul.
n primele ore ale existenei zigotului are loc sinteza de ADN i
prima diviziune a zigotului, care produce dou celule diploide. Dup cteva
ore ncepe a doua diviziune, care produce patru celule; diviziunile continu
pn la stadiul de blastocist, cnd oul ncepe s coboare prin trompa uterin
(oviduct), ajunge n uter i se implanteaz n peretele uterin. Aceast
"cltorie" dureaz 5 - 7 zile.
Dac spermatozoidul nu penetreaz ovulul cnd el se afl n oviduct,
ovulul nefecundat i continu drumul pn n uter, unde este dezintegrat i
eliminat cu sngele menstrual.
Opiuni pentru fecundarea artificial: manipularea spermei i a
ovulului uman
n American Medical News din 1985 se apreciaz c un cuplu din
ase, deci aproape 3,5 milioane de cupluri sunt sterile (sterilitatea de cuplu
se definete prin lipsa procrerii dup un an de convieuire, cu activitate
sexual normal, fr folosirea metodelor contraceptive). Astzi, opiunile
artificiale care pot s rezolve aceast problem sunt: inseminarea artificial,
multiple variante de fecundare in vitro i transferul intrafalopian de gamei.
Inseminarea artificial
Inseminarea artificial const n introducerea cu ajutorul unei seringi
a cteva picturi de sperm, prelevate de la donor, n orificiul cervical al
colului uterin n timpul ovulaiei. Apoi sperma rmas n sering se pune
ntr-o cup cervical, care se fixeaz pe colul uterin, unde va rmne timp de
24 ore.
Cnd se folosete sperm de la so procedeul este numit inseminare
omoloag(AIH), iar cnd se folosete sperm de la un alt donor, se numete
inseminare neomoloag (diferita) (AID).
n SUA se fac anual aproximativ 10.000 - 12.000 de inseminri
neomoloage; acestea sunt cele mai numeroase fiind solicitate fie n cazul n
care soul este steril ntruct sperma lui conine un numr sczut de
spermatozoizi, fie n cazul n care sperma sa conine un factor Rh de
incompatibilitate sever, sau poate purta gene mutante care produc grave
boli ereditare.
_____________________________________________________________

137

_____________________________________________________________
Pentru a preveni naterea unui copil malformat dup inseminare
artificial, bncile de sperm demne de ncredere, efectueaz periodic
analize cromosomiale (analiza cariotipului) la donorii de sperm i limiteaz
n timp numrul surselor de donori singulari de la care este prelevat
sperma. Din aceast cauz, prin inseminare artificial cu sperm donor de la
bncile de sperm, s-au nregistrat n medie 1,7% nateri anormale, fa de 2
- 3% nregistrate n mod natural (Verp, 1983).
La temperatura camerei sperma piere n cteva ore. Pentru a putea fi
prezervat n scopul inseminrii artificiale ulterioare, sperma trebuie
pretratat cu 10% glicerol i pstrata n containere n azot lichid la -196 0C.
Rata de graviditate obinut prin inseminarea cu sperm pstrat la -196 0C
este de 50%, fa de 70 - 75% n cazul n care se folosete sperm proaspt
(McLaren, 1973).
Multe cupluri doresc sa aib un al doilea sau chiar al treilea copil, tot
prin inseminare artificial, cu sperm de la acelai donor; de aceea rezervele
de sperm sunt pstrate ntr-o strict ordine pentru a putea fi utilizate la
cerere. Mai mult, unii brbai care recurg la vasectomie, i pot depune,
anterior vasectomiei, o rezerv de sperm n banc, rezerv pe care o vor
putea utiliza dac se vor rzgndi i vor dori s mai aib copii.
Fecundarea in vitro (IVF)
Fecundarea in vitro const n fecundarea ovulului cu sperma soului,
a altui brbat sau cu un amestec de sperm provenit de la mai muli brbai
(pentru a nu se cunoate paternitatea) n laborator, ntr-o cutie Petri (de la
lat. in vitro = "n sticla"). Embrionul va crete cteva zile n mediu de
cultur artificial, iar apoi va fi implantat fie n uterul femeii donoare a
ovulului, fie n uterul (pregtit hormonal n prealabil) al unei femei aleas ca
mam purttoare (mam surogat). Copilul care se nate prin IVF va avea din
punct de vedere genetic numai doi prini - donorii de ovul sau/i de sperma,
cu toate c, biologic, au fost implicai mai muli "prini".
Pentru fecundarea in vitro se procedeaz la prelevarea unui ovul
direct din ovar (prin laparoscopie dup anestezie general), dup ce femeia a
fost tratata n prealabil hormonal cu gonadotropin corionic (hormon de
reproducere) care induce ovulaia. nainte de aceasta, se recolteaz o
cantitate de sperm de la so sau de la alt brbat, prin folosirea unui vagin
artificial special. Sperma se spal, se dilueaz i se pune ntr-o soluie de ap
srata, care simuleaz tractusul reproductiv femel, astfel nct n decurs de
_____________________________________________________________

138

_____________________________________________________________
cteva ore spermatozoizii sufer procesul de capacitaie (modificri
chimice care i fac capabili de a fertiliza ovulul). Din aceast soluie care
conine spermatozoizi se pun cteva picturi ntr-o cutie Petri, ntr-un mediu
de ulei inert; picturile se vor depune pe fundul vasului.
Apoi, un ovul este pipetat ntr-o pictura de sperm. Dup cteva
ore, n acest mic volum are loc fecundarea, adic penetrarea ovulului de
ctre un singur spermatozoid. Dup 12 ore de la fecundare, zigotul este
transferat ntr-o alt soluie pentru a-i continua dezvoltarea.
Dup nc 48 de ore zigotul formeaz, prin diviziuni mitotice, opt
celule embrionare; dup 96 de ore se formeaz aproximativ 1000 de celule
embrionare, stadiu numit blastocist.
Dificultatea tehnicii nu const n fecundare, ci n implantarea
embrionului astfel obinut n uter (Kieffer, 1980). n perioada cuprins
ntre 48 i 96 de ore de la fecundare, oul este prelevat cu o canul i
introdus n uterul unei femei care a fost, n prealabil, pregtita
hormonal pentru ca uterul s ofere condiii de implantare.
La 25 iulie 1978, la Oldham Memorial Hospital, lng Mancester
(Anglia), s-a nscut primul copil conceput prin tehnica IVF: o feti de
2,535 kg, Louise Joy Brown. Aceast natere a marcat debutul unei noi ere
n reproducerea uman. Pe plan mondial ntre 1978 - 1988 au luat fiin
peste 250 de clinici de fecundare in vitro i s-au nregistrat peste 1000 de
copii nscui vii. n SUA, din 100 de nateri ca urmare a IVF, 56 au fost cu
gemeni dubli, 8 cu gemeni tripli i 2 cu cvadrupli.
Numrul de embrioni transferai influeneaz rata de graviditate:
20% pentru un singur embrion, 27% pentru doi i 40% pentru trei embrioni
transferai. Totui transferul a mai mult de doi embrioni prezint un risc
crescut de nateri multiple care implica dezavantaje att obstetricale, ct i
sociale.
Crioprezervarea embrionilor umani i transferul de embrioni
Pstrarea prin ngheare (crioprezervare) a embrionilor umani
confer avantajul de a permite femeii acceptoare de a ajunge, n nod natural
sau prin tratament hormonal, la acel stadiu al ciclului reproductiv care s
permit o ans maxim de implantare i de graviditate. Un alt avantaj este
posibilitatea de a prezerva mai muli embrioni "de rezerv"(rezultai prin
fecundarea mai multor ovule recoltate printr-o singur laparoscopie): dac
_____________________________________________________________

139

_____________________________________________________________
transferul unui embrion nu reuete, atunci un nou embrion poate fi
"dezgheat" i folosit la ciclul urmtor.
Exist totui unele piedici de procedur care au dus la o eficien
sczut a metodei: din 1985, timp de cinci ani, s-au nscut doar opt copii
prin aceast tehnic. Un alt dezavantaj const n posibilitatea formarii de
cristale de ghea n interiorul embrionului, care ar putea deteriora
membranele i organitele celulare. n acelai timp, fusul mitotic poate suferi
modificri la nghe, ceea ce poate duce la apariia de anomalii
cromosomiale (dup nghe - dezghe, numai 40% din embrioni pot fi
"salvai" pentru transplantare, iar 50% dintre acetia au prezentat blastomere
modificate).
Copulare sau fecundare in vitro
Rezultatele cercetrilor recente demonstreaz, fr echivoc,
succesele tehnicii IVF: ea asigur o rat de fertilizare de 80 - 90% i
aproximativ 31% din embrionii implantai duc, n final, la nateri cu copii
vii.
Prin comparaie, s-a estimat c la fiecare 100 ovule expuse la
sperm, n mod natural, prin copulaie se nasc 31 de copii. Din aceste 100
ovule, 16 nu sunt fecundate, 15 dispar la o sptmn dup concepie,
nainte de implantare, 27 dispar n sptmna urmtoare, a implantrii, i
alte 12 dispar n luna urmtoare. Aproape jumtate din aceti embrioni
pierdui se datoreaz unor importante anomalii cromosomiale (Keiffer,
1980).
Aceasta comparaie sugereaz c, depind unele inconveniente,
tehnica fertilizrii in vitro ar putea ajunge sa surclaseze eficiena naturii n
ceea ce privete numrul de copii nscui din ovule fecundate.
Transferul intrafalopian de gamei
n ultimii ani se practic tot mai des unele alternative ale tehnicii
IVF cum ar fi transferul de embrioni de la voluntare fertile donoare la
recipiente sterile prin prelevarea prin aspiraie direct din uter a embrionului
i transferul lui n uterul femeii receptoare, pregtit hormonal n prealabil.
Mai nou, se practica tehnica transferului intrafalopian de gamei
(GIFT)P: un ovul matur este prelevat din ovarul unei femei i se introduce
mpreun cu sperma soului sau a altui brbat n trompa uterin a
_____________________________________________________________

140

_____________________________________________________________
receptoarei. n acest fel fecundarea se face natural n trompa uterin,
migrarea si implantarea oului fcndu-se n mod natural.

4.4. Clonarea
Clona este un grup de celule rezultate din diviziunea unei singure
celule iniiale. n urma diviziunilor repetate ale celulei iniiale, se obine un
numr mare de celule, adic o clon, format din celule identice din punct
de vedere genetic. Clonarea, pentru biologi, ofer posibiliti de testare ale
unor ipoteze interesante; pentru zootehnie, clonarea deschide posibilitatea
producerii de copii ale unui animal cu caliti ieite din comun; n schimb,
pentru netiutori, clonarea duce n mod frecvent la crearea unor imagini de
spaim.
Clonarea la om va fi o form de reproducere asexuat, prin
diviziunea mitotic a unei singure celule diploide parentale, care conine
toate genele n doz dubl sau n raport alelic, provenite de la ovulul i
spermatozoidul care au dat natere prin fecundare la individul dat. Deci,
clona uman va conine o copie duplicat a tuturor genelor de la celula unui
singur printe.
Concepia popular referitoare la clonarea uman const n aceea c,
prelevnd o celul diploid de oriunde din corpul uman, cultivnd-o pe
medii speciale, ea va da o clon de celule duplicate i, n final, chiar o copie
a persoanei de la care provine celula iniial. Aceasta posibilitate este
ndeprtat, deoarece nu se cunoate modul n care este controlat expresia
fiecrei gene in celul.

Clonarea prin transferul nucleului la amfibieni


Transferul nucleului este o tehnic de clonare la vertebrate, care
consta n enuclearea (eliminarea nucleului) unei celule i renuclearea
(introducerea unui alt nucleu de la alta celul) n celula enucleat.
n esen, este vorba de transferul nucleului de la o celul matur
difereniat, de exemplu, din intestin n citoplasma unui ovul enucleat,
care este o celul tnr. Aceast celul renucleat se divide mitotic, dnd o
clon de celule identice, iar in final se dezvolt ntr-un individ - copie a
individului de la care a provenit nucleul.
_____________________________________________________________

141

_____________________________________________________________
Pentru prima dat, n 1952, Robert Briggs i Thomas King au reuit
s transfere nuclee de la celule embrionare tinere n ovule enucleate de
Rana pipiens. Un numr de ovule de broasc renucleate s-au comportat ca i
cum ar fi fost fecundate i s-au dezvoltat n mormoloci normali. i n cazul
transferului de nuclee de la celule embrionare aflate in stadii mai trzii ale
dezvoltrii embrionului, n ovule enucleate, s-au obinut, de asemenea,
mormoloci normali. n 1962, John Gurdon repeta procedeul de transfer de
nuclee la broasca cu gheare (Xenopus laevis), dar folosete nuclee prelevate
din celule genetic i fiziologic difereniate, din esutul epitelial al
intestinului de mormoloc, pe care le transfer n citoplasma ovulelor
enucleate (nucleul ovulului a fost distrus prin iradiere cu raze ultraviolete).
Aproximativ 1% din celulele cu nucleu transplantat s-au dezvoltat n broate
adulte.
Aceste experiene au demonstrat c n nucleul celulelor somatice
tinere sau mature este coninut toat informaia genetic pentru dezvoltarea
unui nou individ adult, celulele fiind totipotente.
Transfer de nuclee la mamifere

n 1975, Bramhall efectueaz o experien la iepure, transfernd


nuclee din celule embrionare n ovule nucleate; el constata c numai patru
ovule din aproape 700 au inserat nucleul transplantat i au devenit triploide
(n de la ovul i 2n de la nucleul transplantat din celula embrionar diploid).
Din aceste patru celule, nici una nu a ajuns s se multiplice mai mult de
stadiul de 26 de celule.

Obinerea femelelor homozigote pentru toate genele


Clement Markert a prelevat zigoi, imediat dup fecundare, de la
femele de oarece; zigoii au fost prelevai n stadiul n care nucleul
spermatozoidului nu se unise nc cu nucleul ovulului (pronuclee). Prin
microchirurgie s-a eliminat un pronucleu, iar cel rmas n zigot a fost
stimulat pentru replicare (dublarea numrului de cromosomi), dnd natere
la o celula diploid, cu toate genele n doz dubl, deci homozigot pentru
toate genele. Acest zigot a fost cultivat in vitro pn la stadiul de blastocist,
apoi a fost plasat n uterul unei mame adoptive de oarece, pregtita n
_____________________________________________________________

142

_____________________________________________________________
prealabil hormonal, pentru a se dezvolta pn la natere. Zigotul s-a
dezvoltat i s-a nscut o femel identic genetic cu oarecele care a donat
nucleul, fiind homozigot pentru toate genele.
Prin aceasta tehnic nu pot fi produi masculi, deoarece pronucleul
mascul are cromosomul sexual Y, iar prin dublarea numrului de cromosomi
ia natere un zigot YY, care este letal.
Femelele complet homozogote nu sunt clone deoarece nu conin un
set complet de gene ca la o celul diploid normal, ci au dou jumti
identice ale unui singur set de gene de la un printe. Cu alte cuvinte,
genotipul acestor femele este unic, provenit din dublarea setului haploid de
gene ale pronucleului haploid femel. Dac de la aceste femele se vor obine
mai departe descendeni prin aceeai tehnic, atunci descendenii ntre ei i
fa de mama lor vor fi clone, deoarece nucleele celulelor lor sunt identice,
homozigote pentru toate genele, ca i mama lor, care a furnizat pronucleul
iniial (Hoppe i Illmenesee, 1977). Aceast tehnic de homozigotare nu va
putea fi utilizat pentru om, deoarece la om exist o "ncrctur genetic"
sau un numr de gene rele (4-8), care atunci cnd se fenotipizeaz, cauzeaz
malformaii genetice severe, boli i moartea.

Clonarea la oareci
n 1983, James McGrath i Davor Solter au efectuat clonarea la
oareci, reuind s transfere cu succes 68 din 73 de nuclee (93%) din celule
embrionare n ovule enucleate de oarece; 64 dintre ele au ajuns, in vitro, n
stadiul de blastociste, iar apoi au fost transferate n uterul unor femele
(mame adoptive) pregtite n prealabil hormonal. Mamele adoptive au
nscut apoi zece pui vii din care apte au ajuns la maturitate, avnd o blan
colorat identic cu a printelui donator de nucleu; cinci dintre ei erau fertili.
Aceste experiene demonstreaz c gene silenioase (inactive) din
celulele difereniate, pot s devin din nou active, determinnd o nou
dezvoltare. Succesele nregistrate la mamifere pot fi utilizate pentru
mbuntirea sntii umane, fie prin activarea unor gene specifice n
anumite celule, sau prin determinarea unui grup de celule s se diferenieze
dnd un anumit organ care va reface un organ pierdut sau va putea fi
transplantat.
_____________________________________________________________

143

_____________________________________________________________
Producerea prin microchirurgie a unor serii de mamifere genetic
identice
Tehnica microchirurgical folosete embrioni n diviziune prelevai
din uterul animalelor gestante sau produi in vitro, din care se separ
celulele individuale i se transfer n uterul unor animale recipient, unde i
urmeaz dezvoltarea embrionar, dnd natere unor descendeni identici,
copii ale animalului donor. Aceasta tehnic este o nou direcie n clonarea
animalelor (Seidel, 1983). n SUA s-au nregistrat succese importante cu
aceast tehnica n clonarea vitelor i cailor. Caii i vitele genetic identice se
folosesc pentru studiul sensibilitii i rezistenei genetice fa de agenii
mediului nconjurtor.
Este nc o enigm cunoaterea momentului n care celulele
embrionare nceteaz diviziunile simple i ncepe diferenierea lor, formnd
esuturi si organe. Ca si celulele canceroase, celulele embrionare se divid
indefinit dac sunt scoase din zona pelucida (un nveli protector care
nconjoar blastocistul) i puse ntr-un mediu de cultura. Aceasta ar conduce
la ipoteza c zona pelucida ar avea un rol chimic n diferenierea celulelor.
Poate n viitorul apropiat, prin microchirurgie se vor putea separa
celule din blastocistul uman n vederea obinerii de gemeni, deoarece
aceasta nu va afecta coninutul genetic al embrionului, prin faptul c fiecare
celul embrionar conine un complement ntreg de cromosomi de la ambii
prini. Tehnica separrii celulelor embrionare va permite obinerea de copii
(gemeni monozigoi) la animale, plecnd de la un singur embrion, chiar la
intervale de mai muli ani ntre ei.
Separarea celulelor individuale din embrionul uman va permite,
teoretic, obinerea de dublei, triplei, cvadruplei, etc. perfect identici. Prin
acest procedeu se vor putea obine chiar mai multe generaii de gemeni.
Embrioni umani ntregi pot fi pstrai prin ngheare pentru a fi folosii
ulterior, n timp ce jumti de embrion, deocamdat, nu rezist la astfel de
variaii de temperatur.
Cnd tehnica va avansa i vor putea fi pstrate jumti de embrion,
atunci se vor putea obine gemeni, unul din prima jumtate de embrion i al
doilea, de exemplu, cnd primul a ajuns la pubertate. Aceast direcie de
cercetare n dezvoltarea uman pare acum bizar.
_____________________________________________________________

144

_____________________________________________________________

4.5. Transmiterea caracterelor monogenice.


Legile lui Mendel la om
Multe caractere umane normale i patologice determinate monogenic
(monomeric, unifactorial) se transmit la copii conform legitilor stabilite de
Mendel, fiind denumite caractere mendeliene (Coprean, 1998).
Aceste caractere sunt determinate de o gen specific, ce ocup un
locus unic pe unul sau pe ambii cromosomi omologi.
Variaiile ereditare din genomul uman sunt temelia geneticii umane
i medicale. Formele alternative (normal sau mutant) ale informaiei
genetice pentru un anumit locus genic se numesc alele.
Multe gene mutante prezint doar o form, forma normal numit i
slbatic. Majoritatea genelor umane prezint ns polimorfism, n populaie
existnd dou sau mai multe alele normale pentru acelai locus genic. Pe
lng alela sau alelele normale, majoritatea genelor prezint i alele
mutante, anormale, ce determin aberaii fenotipice, semnificative clinic
(Coprean, 1998).
4.5.1. Monohibridarea la om
Transmiterea caracterului
gusttor- negusttor la feniltiocarbamid
Caracterul gusttor - negusttor este reprezentat de sensibilitatea
gustativ la feniltiocarbamid (PTC). Feniltiocarbamida este o substan
alb, cristalin, solubil n ap, cu gust amar.
Anumite persoane percep gustul amar al PTC, deci sunt sensibile la
PTC, fiind denumite gusttoare.
Persoanele care nu percep gustul amar al PTC, deci insensibile la
PTC sunt denumite negusttoare.
n populaiile umane circa 70% din indivizi sunt "gusttori", iar 30%
sunt "negusttori" (Covic, 1981). Tipul gusttor este determinat de o gen
autosomal dominant G (n doz dubl, homozigot - GG sau heterozigot
- Gg), tipul negusttor fiind determinat de alela recesiv n doz dubl - gg
(homozigoie).

_____________________________________________________________

145

_____________________________________________________________
Din cstoria unei persoane gusttoare - homozigote dominante
(femeie sau brbat)cu una negusttoare (brbat sau femeie), rezult numai
descendeni (generaia F1) gusttori, genotipic heterozigoi.
P: GG x gg
gP: G x g
F1:
Gg
Din cstoria a doi indivizi gusttori heterozigoi se va obine
generaia F2, care va prezenta fenotipuri de gusttor i de negusttor, n
raport de 3 gusttori : 1 negusttor (raport mendelian de segregare n
ncrucirile monohibride); raportul de segregare genotipic va fi: 1
homozigot dominant (Hd) : 2 heterozigoi (Hetero): 1 homozigot recesiv
(Hr).
P:
Gg x Gg
gP: G g x G
g
F1: GG Gg Gg
gg
Sf: 3 gusttori : 1 negusttor
Sg: 1 HD : 2 Hetero : 1 Hr
Indivizii negusttori (homozigoi recesivi), prin cstoria cu indivizi
asemntori (negusttori) var da numai descendeni negusttori (homozigoi
recesivi).
P: gg x gg
gP: g x g
F1:
gg

Prin cstoria unui individ gusttor din F 1 (heterozigot) cu un


negusttor (gg), ncruciare de tip retroncruciare F T, se va obine o
descenden de gusttori hetrozigoi 50% i negusttori 50%, raportul de
segregare fenotipic fiind de 1 gusttor : 1 negusttor i raportul de
segregare genotipic 1 Hetero : 1 Hr.
_____________________________________________________________

146

_____________________________________________________________
P:
Gg x gg
gP:
G g x g
F1:
Gg
gg
Sf: 1 gusttor : 1 negusttor
Sg: 1 Hetero : 1 Hr
Din ncruciarea ntre indivizi gusttori rezult o descenden de
gusttori 100%. Dac ambii prini sunt homozigoi dominani, atunci
descendenii vor fi toi homozigoi dominani. Atunci cnd un printe este
homozigot dominant i unul heterozigot (ncruciare de tip FBback-cross),
descendenii vor fi 100% gusttori, ns genotipic 50% homozigoi
dominani i 50% heterozigoi.
P: GG x GG
gP: G x G
F1:
GG
Sf: 100%
Sg: 100% HD

P:
gP:
F1:
Sf:
Sg:

Gg x GG
G g x G
GG
Gg
100%
1 HD : 1 Hetero

Transmiterea pigmentaiei pielii


Pigmentaia pielii este determinat de pigmentul melanin. n
absena pigmentului, pielea apare nepigmentat, aparinnd tipului albinos.
Albinismul apare att n populaiile umane, ct i n cele animale, printr-o
eroare nnscut de metabolism; se produce prin absena tirozinazei, enzim
ce catalizeaz formarea DOPA kinonei din 3,4 dihidroxifenilalanina DOPA,
ce provine din tirozin. Blocarea formrii DOPA kinonei determin
imposibilitatea sintezei indol-5,6 kinonei, care prin polimerizare cu o
protein formeaz granulele de melanin. Melanocitele nu pot fabrica
pigment i structurile, de obicei, colorate (piele, pr, iris) au aspect albinos.
Fiind determinat de o gen autosomal recesiv (a), maladia apare
n majoritatea cazurilor la descendenii (aa) indivizilor heterozigoi (Aa),
aparent sntoi.
_____________________________________________________________

147

_____________________________________________________________
Cstoriile ntre albinoi dau numai descendeni albinoi.
P:
gP:
F1:

aa x aa
a x a
aa

Dac o persoan normal, dintr-o familie care nu a avut niciodat


albinism, se cstorete cu un albinos, toi descendenii (generaia F1) vor fi
normali. Deci, pigmentaia normal este dominant, fiind determinat de
gena A, iar tipul albinos este determinat de prezena n doz dubl a genei
recesive a.
P:
AA x aa
gP:
a x a
F1:
Aa
Sf: 100% normali
Sg: 100% heterozigoi
Din cstoria ntre persoane normal pigmentate, dar heterozigote
(indivizi de tip F1) se va obine o descenden de tip normal i albinotic, n
raport de 3:1, iar segregarea genotipic n raport de 1 HD: 2 Hetero: 1 Hr.
P:
Aa x Aa
gP:
A a x A a
F1:
AA Aa Aa aa
Sf: 3 normali : 1 albinos
Sg: 1 HD : 2 Hetero :1 Hr
Din cstoria ntre indivizi cu pigmentaie normal va rezulta o
descenden 100% cu pigmentaie normal. Dac ambii prini sunt
homozigoi dominani, descendena va fi 100% heterozigot; dac un printe
este homozigot dominant i unul heterozigot (ncruciare de tip F B),
descendena va fi genotipic, n raport de 1 heterozigot : 1 homozigot
dominant.
P: AA x AA
P: AA x Aa
gP: A x A
gP: A x A a
_____________________________________________________________
F1:
AA
F1: AA Aa
Sf: 100% normali
Sf: 100% normali
Sg: 100% HD
Sg: 1 HD : 1 Hetero

148

_____________________________________________________________

Prin cstoria unei persoane normale din F1 (heterozigot) cu un


individ albinos, descendena va fi 50% cu pigmentaie normal i 50% de tip
albinos.
P: Aa x aa
gP: A a x a a
F1: Aa
aa
Sf: 50% normali: 50% albinoi
Sg: 1 Hetero : 1 Hr
Din modalitile de transmitere a celor dou caractere, descrise
anterior, se observ c legile mendeliene sunt universale, aplicndu-se i la
om. ncrucirile sunt de tip monohibridare, persoanele deosebindu-se prin
dou forme contrastante de manifestare ale unui caracter (gusttor negusttor; pigmentaie normal-tip albinos).
Indivizii din generaia parental sunt "puri" genetic, fiind homozigoi
dominani sau homozigoi recesivi (cu gena sau cu alela n doz dubl);
gameii sunt puri din punct de vedere genetic, adic conin unul din factorii
ereditari pereche (G sau g, respectiv A sau a). Descendenii din F1 sunt
heterozigoi, fiind uniformi (identici fenotipic), manifestndu-se gena
dominant (G sau A), gena recesiv fiind acoperit de gena dominant.
4.5.2. Dihibridarea la om
Cea de-a doua lege mendelian (legea segregrii independente a
perechilor de caractere), conform creia factorii ereditari pereche segreg
independent de alte perechi de factori ereditari, poate fi demonstrat prin
ncruciri ntre organisme diferite ntre ele prin dou caractere
(dihibridare). Cele dou caractere se transmit independent, deoarece genele
ce determin aceste caractere sunt plasate pe cromosomi diferii
_____________________________________________________________

149

_____________________________________________________________
Transmiterea caracterului gusttor negusttor
la feniltiocarbamid i a sistemului sangvin ABO
Un exemplu de dihibridare la om este cstoria ntre o persoan
gusttoare i cu grupul sangvin A, cu o persoan negusttoare i cu grupul
sangvin O. Descendenii (F1) vor fi gusttori i cu grupul sangvin A (fig.).
Pentru caracterul sensibilitatea la feniltiocarbamid, forma gusttoare este
dominant (determinat de prezena genei G, n doz simpl sau dubl), iar
forma negusttoare este recesiv (determinat de prezena n doz dubl a
alelei g), iar pentru sistemul sangvin ABO, grupa A este determinat de
prezena genei dominante LA n doz dubl sau simpl, iar grupa O este
determinat de alela recesiv l, n doz dubl.
P: GGLALA x ggll
gP: GLA
x
gl
F1:
GgLAl
Din cstoria ntre indivizi gusttori i cu grupa sangvin A
(heterozigoi din generaia F1) se vor obine patru tipuri fenotipice de
descendeni: gusttori cu grupa A, gusttori cu grupa O, negusttori cu
grupa A i negusttori cu grupa O, n proporie de 9:3:3:1 (raport de
segregare fenotipic), raportul de segregare genotipic fiind de
1:1:2:2:4:2:2:1:1. Astfel, pe lng cele dou tipuri parentale apar i dou
fenotipuri recombinate.
F
P (F1): GgLAl x GgLAl
F1(F2):
gP
GLA
Gl
gLA
Gl

GLA
GGLALA
GGLAl
GgLALA
GgLAl

Gl
GGLAl
GGll
GgLAl
Ggll

gLA
GgLALA
GgLAl
ggLALA
ggLAl

gl
GgLAl
Ggll
ggLAl
ggll

Transmiterea pigmentaiei pielii i a gropielor n obraji


Din exemplul de la monohibridare se observ c pigmentaia pielii
este determinat de o gen autosomal dominant A. Formarea gropielor n
obraji este un caracter determinat de o gen autosomal dominant B
(plasat pe un cromosom diferit de cel purttor al genei A), iar lipsa
_____________________________________________________________

150

_____________________________________________________________
gropielor n obraji este determinat de prezena n doz dubl a unei gene b
recesive.
Astfel, ncruciarea de tip dihibridare ntre un printe (brbat sau
femeie) cu piele normal pigmentat i gropie n obraji (formele dominante
ale caracterelor) i un printe (femeie sau brbat) de tip albinotic i fr
gropie (cu formele recesive ale caracterelor) va duce la o descenden
100% cu pigment normal i gropie n obraji, genotipic indivizii fiind dublu
heterozigoi.
Din cstoria ntre doi indivizi heterozigoi AaBb, ce manifest
formele dominante ale caracterelor se va obine o descenden (F2) de 4
tipuri: 2 parentale i 2 recombinate, n raport fenotipic de 9:3:3:1, raportul
genotipic fiind de 1:1:2:2:4:2:2:1:1.
P (F1): AaBb x AaBb
F1 (F2):
G
P
AB
Ab
AB
Ab

AB

Ab

aB

ab

AABB
AABb
AaBB
AaBb

AABb
AAbb
AaBb
Aabb

AaBB
AaBB
aaBB
aaBb

AaBb
AaBb
aaBb
aabb

4.5.3. Alte tipuri de segregare


n afar de dominana complet i recesivitate, s-au descoperit i
abateri de la dominana complet, au fost evideniate interaciuni ale genelor
n ncrucirile mono- i dihibride.
Interaciunea genelor n cazul ncrucirilor monohibride
Dominana incomplet (semidominana)
Dominana incomplet este fenomenul de interaciune ntre genele
alele, n care fenotipul formelor heterozigote (Aa) este intermediar ntre
genitorii homozigoi (AA i aa).
Anemia falciform (sicklemia)
Anemia falciform este cea mai cunoscut hemoglobinopatie,
rspndit n special n Africa, Asia, Oceania i regiunea mediteranean a
Europei, avnd o distribuie geografic particular, legat de regiunile n
care bntuie malaria. Bolnavii prezint hematii n form de secer (spre
deosebire de cele normale sfero-discoidale) i hemoglobin anormal HbS,
_____________________________________________________________

151

_____________________________________________________________
datorit unei mutaii genice punctiforme (a unei perechi de nucleotide), ce
determin nlocuirea, n poziia 6 a lanului al hemoglobinei, a acidului
glutamic cu valina. Prezena hemoglobinei S determin apariia anemiei
falciforme. Maladia este determinat de o gen semidominant autosomal,
care n stare homozigot sksk (engl. sickle = secer) este letal, indivizii
murind imediat dup natere sau, cel trziu la pubertate, cnd organismul nu
mai poate fi oxigenat satisfctor, datorit anemiei hemolitice severe. n
condiiile unei presiuni sczute de oxigen, HbS formeaz agregate
caracteristice paracristalizate, ce determin curbarea eritrocitului, lund
forma de secer. Prin unirea acestor hematii falciforme iau natere obstrucii
n vasele sanguine, cu gravitate mare cnd apar n creier (Tudose, 1993).
La microscopul electronic s-a constatat c HbS dezoxigenat
formeaz fibre rigide foarte lungi, reunite n fascicule formate din cte 14
fibre (deoarece valina intr n contact cu ali doi aminoacizi - leucina, n
poziia 88 i fenilalanina, n poziia 85, de la o alt molecul de Hb). Se
stabilesc astfel legturi hidrofobe, apa din regiunea de contact se elimin, iar
moleculele de HbS polimerizeaz.
Polimerizarea dispare atunci cnd hematia se ncarc cu oxigen;
uneori polimerizarea HbS se produce cnd hematia se afl n capilare,
circuitul sangvin fiind ntrerupt, aprnd crizele de anemie falciform. Se
produce astfel, n anumite organe, blocarea circulaiei, moartea individului
survenind n adolescen. Anemia falciform poate fi definit ca o maladie
ereditar, caracterizat prin polimerizarea specific a Hb anormale, ce
survine dup eliberarea oxigenului.
Pentru tratament se ncearc folosirea unor medicamente care, n
mod constant diminueaz polimerizarea Hb anormale. Aceste medicamente
trebuie ns folosite toat viaa. O alt ncercare de tratament const n
inducerea activitii genelor ce produc Hb fetal i, care, la adult sunt
represate (Raicu, 1997).
Indivizii heterozigoi Sksk, datorit fenomenului de semidominan,
prezint ambele tipuri de hemoglobin - normal (HbA) i mutant (HbS),
fiind viabili (cantitatea de 60% HbA, fa de 40% HbS asigur oxigenarea
organismului n condiii satisfctoare pentru indivizii ce triesc ntr-un
mediu deschis i neviciat. Deci, indivizii heterozigoi supravieuiesc i, n
plus, maladia le confer un avantaj selectiv, n sensul c ei prezint o
rezisten mrit la malarie (provocat de parazitul Plasmodium falciparum
_____________________________________________________________

152

_____________________________________________________________
ce infecteaz eritrocitele normale i nu poate infecta eritrocitele falciforme).
Avnd n vedere c se produc ambele tipuri de hemoglobin (normal i
anormal), fenomen perfect explicabil la nivel molecular, unde noiunile de
dominan i recesivitate nu au valabilitate i analiznd proporia n care se
sintetizeaz, se poate spune c fenotipul pentru indivizii Sksk este
codominant (Stine, 1989).
Indivizii heterozigoi prezint forme mai uoare de malarie, n
comparaie cu indivizii normali. De aceea, frecvena acestei gene sk se
menine la un nivel destul de ridicat n populaiile expuse la acest agent
patogen. De exemplu, n unele ri mediteraneene i africane, numrul
heterozigoilor poate atinge 20% in populaie (Raicu, 1997).
Din cstoria unei persoane normale (brbat sau femeie) homozigote
dominante cu una afectat (femeie sau brbat), viabil heterozigot, vor
rezulta n descenden 50% indivizi normali homozigoi dominani i 50%
indivizi bolnavi heterozigoi viabili.
P: SKSK x Sksk
gP: SK
x SK sk
F1: SKSK
Sksk
Dac se cstoresc doi indivizi bolnavi heterozigoi, descendena va
fi reprezentat de indivizi sntoi homozigoi dominani (25%), bolnavi
viabili heterozigoi (50%) i bolnavi (letali la pubertate) homozigoi recesivi
(25%).
P:
Sksk
x
Sksk
gP: SK sk x SK sk
F1: SKSK Sksk Sksk sksk
n mod identic cu anemia falciform se transmit multe alte maladii
umane, cum ar fi o alt boal a sngelui - -talasemia. n generaia F2 , din
raportul de segregare fenotipic i genotipic de 1:2:1, o parte vor fi
homozigoi dominani sntoi, 2 pri heterozigoi cu talasemie minor i o
parte homozigoi recesivi, ce manifest talasemia major sau anemia Cooley
(anemie hipocrom grav, cu hematii mici, neregulate, cu prezena HbF
(fetal - cu 2 catene i 2 catene ) i HbA2 (2 catene i 2 catene , n
cantitate de 5% sau mai mult). n cazul existenei i a unei gene semiletale,
_____________________________________________________________

153

_____________________________________________________________
indivizii homozigoi recesivi, bolnavi de anemie Cooley, mor n proporie de
50% din cazuri, de regul, nainte de pubertate (Tudose, 1993).
Supradominana
Supradominana este un fenomen de interaciune genic; genele n
stare heterozigot (Aa) determin o sporire a manifestrii caracterului, n
comparaie cu prinii homozigoi (AA sau aa). Supradominana se
manifest n cazul caracterelor ce privesc vitalitatea, fertilitatea, talia etc.
Supradominana prezint importan n apariia heterozisului (vigoarea
hibrid).
Schematic, supradominana poate fi exprimat prin formula:
AAAaaa. La om, copiii care sunt hibrizi de F1 motenesc de la prini
caractere ce se manifest mai intens. De aceea, de multe ori, copiii sunt mai
nali, mai detepi, mai frumoi etc. dect prinii.
Codominana
n cazul codominanei, ambele gene sunt n stare funcional, ele
manifestndu-se mpreun, cu aceeai frecven, dnd un fenotip distinct,
nou.
Exemplul clasic de codominan este cel care se refer la genetica
grupelor de snge (sistemul ABO).
Sistemul ABO a fost descoperit n anul 1900 de Karl Landsteiner.
Grupul sangvin este determinat de prezena pe suprafaa hematiilor a unor
substane antigenice (aglutinogene). Un antigen nu trebuie s ntlneasc
anticorpul (aglutinina) corespunztor (tabel). Dac se ntlnesc, aglutineaz
i hemolizeaz (fig.43).
Diferenele ntre antigenele sistemului sangvin ABO sunt asociate cu
diferene n susceptibilitatea la un numr de boli. De exemplu, persoanele cu
grupul sangvin A sunt predispuse la cancer de stomac, iar persoanele cu
grupa O i nesecretoare sunt predispuse la ulcer (Mange & Mange, 1990).
Sistemul ABO a fost studiat de timpuriu, datorit necesitii
realizrii transfuziilor.
Dup cum se observ n tabel, cele patru grupe sanguine sunt
determinate de genele LA, LB i l. Genele LA i LB sunt dominante fa de l,
aceasta fiind recesiv, iar LA este n raport de codominan cu LB.
_____________________________________________________________

154

_____________________________________________________________
A g lu tin a r e

N e a g lu tin a r e
a n tig e n A

a n tic o r p i
a n ti - A

a n tic o r p i
a n ti - B

Fig. 43 Reacia hematiilor unei persoane cu grupul sangvin A la contactul cu


ser sangvin coninnd anticorpi anti-A (cazul A) sau anti-B (cazul B).

n 1910 von Dungren i Hirshfield au descris dou subgrupe pentru


grupul sangvin A (A1 i A2), cu frecvena n populaie de 85% pentru A1 i
15% pentru A2. LA1 este dominant fa de LA2; LA2 este dominant fa de l
i recesiv fa de LA1. Se pot obine genotipuri diferite: LA1LA1, LA1LA2 i
LA2LA2. Mai trziu s-au identificat 20 de subgrupe ale grupului sangvin A,
dar cu frecvene sczute (determinate de alele diferite: L A1, LA2, LA3 etc.). Sau descoperit i alele ale genei LB: LB1, LB2 etc. (Stine, 1989).
Tabel. 8 Determinismul sistemului sangvin ABO
Fenoti
p

Genotip

Antigen
e

Anticorp
i
(IgM)

Pot prim
snge de la

Pot
dona
snge la

_____________________________________________________________

155

_____________________________________________________________
A
B
AB
O

LALA LAl
LBLB LBl
LALB
ll

A
B
A,B
-

B
A
A,B

A, O
B, O
Toate
O

A, AB
B, AB
AB
Toate

Toate alelele sunt localizate pe braul scurt al cromosomului 9 (9p).


Sistemul antigenic ABO este reprezentat de antigenele A i B
(determinate de genele LA i LB) de la suprafaa hematiilor. De exemplu, o
persoan cu grupul sangvin A, prezint antigen A i o persoan cu grupul
sangvin B, prezint antigen B, ns o persoan cu grupul O nu prezint nici
antigen A, nici B. Din aceste considerente sistemul antigenic sangvin trebuie
denumit sistemul antigenic AB. Totui, mai exist un antigen, prezent pe
suprafaa hematiilor la grupul sangvin O, antigenul H. Deci, sistemul
antigenic sangvin este, de fapt, sistemul ABH (Stine, 1989).
Este cunoscut faptul c molecula de baz a antigenelor pentru
sistemul ABO se formeaz de la un singur precursor oligozaharidic, la care
se adaug enzimatic, diferite zaharuri. Tipul de zahr care se adaug la
molecula de baz este determinat de alela LA, LB sau LH. Gena LH codific o
enzim ce ataeaz fucoza la galactoza terminal a lanului oligozaharidic
(fig.44).

Fig. 44. Schema biosintezei antigenelor grupale ABo

Antigenul H este caracteristic tuturor grupelor sangvine (A, B, AB i


O). Dar persoanele cu gena LA sintetizeaz o enzim ce ataeaz Nacetilgalactozamina la galactoza terminal a lanului oligozaharidic.
Persoanele cu gena LB produc o enzim ce ataeaz galactoza la galactoza
terminal a lanului oligozaharidic. Chiar persoanele cu genotip L ALA i
LBLB nu convertesc total substana H n antigene A sau B. Astfel, conform
regulii, anticorpii anti-H nu vor fi prezeni n plasm atunci cnd antigenul
_____________________________________________________________

156

_____________________________________________________________
este prezent. Persoanele cu ambele gene LA i LB, fiind codominante, produc
ambele antigene. Persoanele cu grupa O produc doar antigenul H. Deci, la
om, sistemul sangvin antigenic este ABH, ns, deoarece toi indivizii
prezint cantiti mici de antigen H pe suprafaa hematiilor, s-a pstrat
nomenclatura de sistem sangvin antigenic ABO (Mange &Mange, 1990).
S-au identificat foarte puine persoane genotipic hh, homozigote
recesive. Aceste persoane nu-i pot exprima grupul sangvin ABO. Probabil
c alelele LA i LB sunt prezente, dar nu se exprim, deoarece, galactoza nu a
fost adugat la precursorul oligozaharidic. Genotipul homozigot hh
mascheaz adevratul fenotip ABO (efectul unei gene din sistemul ABO
este mascat de alelele hh, la alt locus), fiind un proces epistatic (Stine,
1989). Acest caz rar se refer la fenotipul Bombay (numele provine de la
oraul n care a fost identificat prima dat).
De exemplu, un copil cu fenotip Bombay poate proveni din prini
cu grupul sangvin O i B. Astfel, printele cu grupul sangvin O genotipic
este llHh, iar printele cu grupul sangvin B, genotipic este L BLBHh, copilul
cu fenotip Bombay fiind genotipic Lblhh.
Persoanele cu gene pentru antigenele A i B nu pot fi deosebite prin
metode de laborator obinuite de persoanele cu grupul sangvin O. Copilul
unui printe hh care a primit gena H de la cellalt printe va aparine
sistemului sangvin ABO.
n serul persoanelor cu fenotip Bombay au fost identificai anticorpi
anti-H. n literatur este citat cazul a dou persoane, ce au fost diagnosticate
iniial cu grupul sangvin O, dar la transfuzia sangvin s-a constatat c serul
lor aglutineaz celulele roii ale tuturor celor 115 potenial donori cu grupul
sangvin O. Realizndu-se doar transferul de plasm sanguin, pacienii i-au
revenit. Mai trziu, aceti pacieni au fost identificai ca avnd fenotipul
Bombay, prezentnd n ser o mare cantitate de anti-H ce va aglutina toate
eantioanele de tip O utilizate (Stine, 1989).
Deoarece persoanele cu fenotip Bombay prezint anticorpi anti-A i
anti-B, par a aparine grupului sangvin O, dar pentru c hematiile lor nu sunt
aglutinate de anti-H, se deosebesc de grupa O. Explicaia genetic este c, la
majoritatea persoanelor, gena H dominant codific o transferaz ce va
adiiona fucoza la precursorul oligozaharidic. Dar, persoanele cu fenotip
Bombay sunt hh i vor codifica pentru o transferaz defect. Aceasta va
cauza un blocaj al cii metabolice de formare a substanei H , iar fr
substana H, enzimele codificate de alelele sistemului ABO nu mai au
_____________________________________________________________

157

_____________________________________________________________
substratul, asupra cruia s acioneze. Astfel, hematiile persoanelor cu
genotip hh nu vor fi aglutinate nici de anti-A, nici de anti-B sau anti-H
(tabel ).
Tabel. 9 Tipurile de anticorpi prezeni la indivizii cu grupul sangvin O i fenotipul Bombay.
Fenotip
O
Bombay

Antigen
e
H
-

Anticorpi
anti-A, anti-B
anti-A, anti-B, anti-H

Polialelia
O gen, ocupnd un locus pe un anumit cromosom, poate prezenta
alele multiple n populaie (datorit schimbrilor produse la nivelul ADN).
Toate aceste alele determin acelai caracter, dar fiecare genereaz alte
forme de manifestare a caracterului dat.
Majoritatea genelor mane sunt polialelice (datorate mutaiilor
produse n evoluie). De exemplu, gena responsabil pentru sinteza lanului
a hemoglobinei umane prezint peste 100 de alele.
Alt exemplu este cel al seriei de alele pentru o gen ce determin
sistemul sangvin ABO. De exemplu, alelele: LA1, LA2, LA3 etc., LB1, LB2 etc.
i L0 (l). Grupul sangvin se stabilete n funcie de alelele prezente n
perechea de cromosomi. De exemplu, din cstoria unui brbat cu grupul
sangvin LA1LA1, cu o femeie LB1LB1, copiii vor avea grupul sangvin LA1LB1.
Dominana complet, incomplet i codominana
Exist numeroase cazuri de boli ereditare, cnd se manifest toate
tipurile de dominan enunate. Un exemplu, este motenirea fenilcetonuriei, o boal metabolic ce duce la retardare mintal. Ea se transmite ca o
maladie recesiv, dar, n funcie de cantitatea de enzim activ fenilalaninhidroxilaza, boala se manifest semidominant, iar n funcie de
prezena enzimei fenilalaninhidroxilaza activ i inactiv, la aceeai
persoan, se poate vorbi de un fenomen de codominan.
De exemplu: indivizii AA (dominan complet) sunt normali
(prezint numai enzima activ); indivizii Aa sunt semidominani sau
codominani, n funcie de cantitatea de enzim activ i inactiv, iar
indivizii aa (recesivi) sunt bolnavi (prezint numai enzim inactiv). Aceste
_____________________________________________________________

158

_____________________________________________________________
fenomene observabile la nivel fenotipic se explic la nivel molecular prin
faptul c i alela recesiv determin sinteza unei mici cantiti de produs.
Gene letale
Genele letale sunt gene mutante care, n stare homozigot determin
moartea individului, pe parcursul ontogeniei. Genele letale pot determina
avortarea zigotului, embrionului sau ftului.
De exemplu, n nanismul acondroplazic homozigoii dominani (AA)
mor, n timp ce heterozigoii Aa triesc. Homozigoii AA, n cazul n care se
nasc, vor muri imediat dup natere sau n primii ani de via datorit unor
probleme respiratorii (Stine, 1989).
Toi piticii acondroplazici viabili sunt heterozigoi Aa i, dac sunt
fertili, vor da , prin cstoria ntre ei, copii normali i pitici, n raport de 2:1
(fig.), deoarece homozigoii dominani (AA) mor, de obicei, nainte de
natere.
P:
Aa x
Aa
gP: A a x A a
F1: AA
Aa Aa
aa
Sf: 2 acondroplazici : 1 normal
Sg: 2 Hetero- : 1 Hr
Datorit genelor letale, n multe alte boli raportul de segregare
fenotipic este de 2:1, avnd n vedere letalitatea homozigoilor dominani
(AA). De exemplu: sindromul Treacher Collins (disostoza mandibulofacial), n care pacienii sufer de malformaii faciale severe i surditate. n
cazul maladiei scleroza tuberoas sau epiloia, chiar i o singur gen letal
(E) induce letalitatea. Heterozigoii Ee prezint o sever retardare mintal i
multiple tumori la cap i la gt. Subiecii mor, n general, la vrste tinere.
Alt exemplu, este prezena unei gene dominante ce induce letalitatea
la brbai. Este cazul genei legate de X, ce induce sindromul oro - facio digital I (OFD - I). Acesta se manifest prin anomalii faciale, anomalii ale
degetelor i ale gurii.
n literatur exist o discrepan n nelegerea termenilor letal i
semiletal. Majoritatea autorilor consider c genele letale sunt acele gene ce
_____________________________________________________________

159

_____________________________________________________________
se exprim de la concepie, pn n prima zi a naterii, iar genele semiletale
se exprim dup prima zi de via a nou-nscutului (Stine, 1989).
Pleiotropia
Pleiotropia este opusul polialeliei, fiind expresia fenotipic multipl
a unei gene. Astfel, o gen determin modificarea mai multor caractere. n
cazul pleiotropiei gena mutant d o succesiune de efecte secundare i
teriare, ce pot nsuma mai multe defecte dect n cazul unui defect specific
nnscut.
De exemplu, n maladia mucopolizaharidoz, n care este
incriminat o singur gen recesiv, efectul este amplu, afectnd formarea
cartilagiilor din tot corpul. Pleiotropia este demonstrat i n cazul anemiei
falciforme, care, uneori poate fi asociat cu pn la 25 de anomalii fizice.
Scleroza tuberoas se caracterizeaz prin dificultate de nvare,
epilepsie, angiokeratoame i facies caracteristic.
Sindromul Marfan se caracterizeaz prin malformaii scheletice
(arahnodactilie), cardiovasculare (coarctaie de aort) i miopie grav
(datorat subluxaiei de cristalin); defectul molecular este n structura
primar a fibrilinei, componenta esenial a esutului conjunctiv (Coprean,
1998).
Abateri de la raportul mendelian de segregare fenotipic de 3:1,
obinut n monohibridare
Dintre factorii care pot determina schimbarea raportului mendelian
de segregare de 3:1 n monohibridare, amintim: genele letale, mutaiile noi,
penetrana incomplet i expresivitatea variabil (Stine, 1989). Dintre
acestea genele letale au fost tratate anterior.
Mutaii noi
n meioz, la formarea gameilor sau n celulele somatice, n mitoz,
genele pot suferi mutaii cu o probabilitate foarte sczut, pentru cele 30 000
- 35 000 de gene din celula uman (Chauvard, 2000). Cu toate acestea este
ateptat producerea unei serii de mutaii cu modificri fenotipice.
De exemplu, ntr-o familie foarte numeroas, pe parcursul a 5
generaii nu a aprut nici un caz de acondroplazie (nanism genetic produs
_____________________________________________________________

160

_____________________________________________________________
de o gen dominant). Toi membrii familiei aveau nlime normal, dar, pe
neateptate s-a nscut n aceast familie un pitic. Cu mare probabilitate,
noua mutaie a aprut n unul din gameii prinilor. Deci, aceast mutaie
unic a aprut de novo, fiind o abatere de la rata fenotipurilor normale care
se ateptau n aceast familie, n care nu existau gene mutante pentru
acondroplazie (Stine, 1989).
Penetrana i expresivitatea genelor
Unele boli ereditare dominante, care trebuie s apar la toi
descendenii, ca n dominana regulat, uneori lipsesc o generaie (boala nu
se manifest la un descendent). n acest caz, se presupune c descendentul a
primit gena dominant, dar nu se manifest, fiind vorba de o dominan
neregulat.
Pentru a explica acest fenomen, Timofeev Ressovski a introdus
noiunea de penetran, prin care se nelege frecvena efectelor unei gene la
nivel fenotipic. Se poate vorbi de o penetran complet i de o penetran
incomplet, n funcie de manifestarea genei (Stine, 1989).
De exemplu, ectrodactilia (lipsa unuia sau mai multor degete) este
determinat de o gen dominant, cu penetran mare. n practic, se
ntlnesc familii la care manifestarea bolii are o mare variabilitate: de la o
simpl sindactilie, pn la reducerea minii la dou degete. Aceast
variabilitate a fost denumit expresivitate i reflect gradul de realizare a
unui caracter.
Penetrana i expresivitatea, ca i dominana i recesivitatea, nu sunt
proprieti intrinsece ale genei sau funcii specifice ale unor gene; ele sunt
rezultatul fenotipic al interaciunilor posibile a genelor specifice cu toate
celelalte gene i cu mediul nconjurtor. Dac penetrana este mare, ca n
cazul bolii Huntington (o degenerare a sistemului nervos central, ce
conduce la moarte) sau n sindromul Waardenburg (ce duce la surzenie),
gradul de expresivitate n aceste cazuri este sever. n schimb, o slab
penetran, este, n general, asociat cu lipsa severitii de expresie a bolii
i, probabil, cu o mare variabilitate de expresie. Penetrana este calculat
numai pentru bolile ereditare dominante, deoarece pentru cele recesive este
dificil de calculat, deoarece, n familiile mici, bolile recesive nu apar n mod
curent n succesiunea generaiilor. Totui, trebuie s precizm c,
expresivitatea este prezent i variabil n toate bolile ereditare, fiind o
proprietate a ereditii dominante, recesive sau legate de X (Stine, 1989).
_____________________________________________________________

161

_____________________________________________________________
Penetrana genelor
Dup cum am precizat mai sus, sunt cazuri n care exist gene pentru
un anumit caracter, dar nu se exprim. De exemplu, n ptozisul pleoapei,
care este o boal autosomal dominant ce cauzeaz cderea paralitic a
pleoapei. Penetrana pentru ptozis este de 60%, deoarece la 40% din
descendeni gena nu se manifest fenotipic, dei ea este prezent n
genotipul tuturor descendenilor. Deci, 2 din fiecare 5 copii nu manifest
gena dat, deoarece penetrana este redus la 60%; cu alte cuvinte, fiecare
descendent al persoanei afectate are un risc de numai 30% de a manifesta
ptozisul (0,6 x 0,5 = 0,3) (Stine, 1989).
Expresivitatea genelor
Expresia unor boli genetice este diferit la indivizi diferii.
Simptomele unor boli determinate monogenic pot fi diferite chiar la gemenii
monozigoi. Condiiile de mediu i particularitile genetice individuale
influeneaz n mod specific manifestarea unor boli, dndu-le o tent
individual. Totui, sunt suficiente simptome similare n cazul bolilor
genetice, pentru ca ele s fie recunoscute.
Un exemplu de expresivitate variabil este cel al bolii von
Willebrand, determinat de o gen mutant dominant, ce induce
deficien n factorul VIII de coagulare a sngelui, un factor antihemolitic
necesar pentru coagularea normal a sngelui (aceast boal nu trebuie
confundat cu hemofilia A clasic, determinat de o gen recesiv Xnlnuit, care este un defect mult mai sever al imposibilitii coagulrii
sngelui, asociat cu lipsa total a factorului activ VIII de coagulare a
sngelui). Boala von Willebrand, frecvent nu poate fi diagnosticat,
deoarece are o variabilitate de expresie foarte mare. Variabilitatea se
msoar prin cantitatea existent de factor sangvin VIII. La bolnavii de
aceast boal, nivelul factorului sangvin VIII se poate schimba sptmnal,
sau n fiecare zi, de la o cantitate foarte mic, pn la cantitatea normal.
Dac bolnavilor de aceast boal li se fac transfuzii cu plasm
normal, se observ o cretere mare a cantitii de factor sangvin VIII.
Variabilitatea manifestrii bolii la diferii pacieni este o particularitate
ereditar, transmis prin natere (Stine, 1989).
Fenocopiile
_____________________________________________________________

162

_____________________________________________________________
Fenocopiile sunt fenotipuri cauzate de mediu, care mimeaz pe cele
produse de obicei de genotip. Fenocopiile umane pot fi cauzate de
malformaii prenatale, modificri sau ntreruperi ale proceselor dezvoltrii
n perioada embrionar sau fetal.
De exemplu, focomelia este o anomalie a dezvoltrii care poate fi
indus de droguri (talidomida) sau poate fi dat de o gen mutant. Este
foarte greu de dovedit cnd un pacient este o fenocopie sau un mutant
genetic. Dac printele este ntr-adevr o fenocopie, acesta nu este un risc
adiional adugat riscului general, deoarece aceast fenocopie nu va fi
transmis la descendeni. Totui, dac este implicat gena mutant, sporete
riscul de motenire la descendeni (Stine, 1989).

4.6. Transmiterea caracterelor poligenice la om


Pentru multe boli umane s-a constatat c exist o segregare
familial, care nu se conformeaz legilor mendeliene, de exemplu, n
malformaiile congenitale comune i n multe boli comune ale adultului;
incidena la rude a acestor boli se situeaz ntre 2-4%. Acest tip de
transmitere a fost denumit multifactorial pentru c, n realizarea unui
caracter fenotipic sunt implicate mai multe gene, precum i factorii de
mediu. Deci, n ereditatea multifactorial exist o interaciune ntre factorii
de mediu adveri i susceptibilitatea determinat de efectul aditiv al mai
multor gene.
Poligenia (gene multiple sau polimeria) este fenomenul de
interaciune a mai multor gene nealele (poligene) ce concur la determinarea
aceluiai caracter, avnd efect cumulativ, i care, acioneaz independent
unele de altele. De regul, caracterele cantitative msurabile, caractere
normale ca: nlimea, greutatea, dermatoglifele, pigmentaia pielii,
tensiunea arterial, inteligena etc. i unele boli sunt determinate de mai
multe gene nealele. Caracterele umane determinate poligenic au o distribuie
continu n populaie, fiind o distribuie gaussian (fig.45), spre deosebire
de caracterele monogenice calitative, cu distribuie discontinu: clase
distincte fenotipice determinate de segregarea net i de efectul propriu al
fiecrei gene (Covic, 1981; Coprean,1998).
n realitate, caracterele umane ca inteligena i nlimea sunt
influenate de factorii ecologici i de relaiile intergenice. Este posibil s se
_____________________________________________________________

163

_____________________________________________________________
estimeze ce proporie dintr-un caracter se datoreaz factorilor genetici n
raport cu factorii ecologici. Aceasta este heritabilitatea.

m e d ia

Fig. 45 Distribuia gaussian (normal) a caracterelor la nivelul unei populaii


(dup Coprean, 1998)

Heritabilitatea poate fi definit i ca proporia de variaie determinat


genetic din totalul variaiilor fenotipice ale unui caracter condiionat
multifactorial, poligenic. Estimarea heritabilitii unui caracter normal este
important pentru stabilirea contribuiei factorilor genetici n producerea
caracterului; cu ct valoarea heritabilitii este mai mare, cu att este mai
important rolul factorilor genetici n determinarea caracterului respectiv.
Heritabilitatea poate fi estimat dup gradul de asemnare ntre rude,
folosind metodele statistice ale distribuiei normale. Heritabilitatea se mai
poate calcula folosind datele ratelor de concordan a bolii la gemenii monoi dizigoi. Cunoaterea valorii heritabilitii este important pentru
stabilirea susceptibilitii i pentru prevenirea bolilor multifactoriale cu
heritabilitate mare.

Poligenia cumulativ la om
Acest tip de poligenie se ntlnete n cazul transmiterii caracterelor
ereditare cantitative, cnd se nsumeaz sau se cumuleaz aciunea a dou
_____________________________________________________________

164

_____________________________________________________________
sau mai multe gene nealele, dar cu aciune identic, ceea ce conduce la
intensificarea caracterului dat.

Transmiterea culorii pielii la om


C. D. Davenport a studiat transmiterea culorii pielii la om n Jamaica
i insulele Bermude, unde frecvena cstoriilor ntre rase umane diferite
este foarte mare.
Culoarea pielii la om este dat de pigmentul melanin, care variaz
cantitativ la rase diferite, fiind de: 0-11% la rasa alb; 12-25% la mulatri
deschii; 26-40% la mulatri propriu-zii; 41-55% la mulatri nchii i 5678% la rasa neagr (Tudose, 1993).
Davenport, n urma studiilor efectuate, a ajuns la concluzia c
determinarea culorii pielii la om este realizat de mai multe gene nealele (26 gene), dar, pentru explicarea fenomenului este suficient folosirea a dou
gene nealele, notate P1 i P2, gene dominante, ce determin pigmentaia
pielii; alelele recesive sunt p1 i p2 (Covic, 1981). Conform ipotezei lui
Davenport, cantitatea de pigment din piele este dat de efectul cumulativ al
genelor dominante P1 i P2, care la rasa neagr se afl n 4 doze, la mulatrii
nchii n 3 doze, la mulatrii obinuii n 2 doze, la mulatrii deschii ntr-o
singur doz, iar la albi sunt prezente doar genele recesive.
R. P. Gates, n 1953, arta c, la om, culoarea pielii este determinat
de 3 gene nealele, iar C. Stern, n 1960, considera c, n determinarea culorii
pielii la om intervin 20 de gene nealele, fapt care ar permite clasificarea
fenotipic mai larg a acestui caracter att de variabil n populaia uman.
De exemplu, prin cstoria unei negrese (P1P1P2P2) cu un alb
(p1p1p2p2) sau invers, deci ncruciare reciproc, toi copiii rezultai (F 1) vor
avea pielea de culoare intermediar ntre negru i alb, deci vor fi mulatri
propriu-zii sau obinuii (P1p1P2p2). Prin cstoria unei mulatre obinuite cu
un mulatru obinuit, la copiii rezultai (n cazul n care familia este
numeroas) se va nregistra o segregare fenotipic de: 1 negru (P 1P1P2P2): 4
mulatri nchii (P1P1P2p2 sau P1p1P2P2): 6 mulatri obinuii (P1p1P2p2): 4
mulatri deschii (P1p1p2p2 sau p1p1P2p2): 1 alb (p1p1p2p2), putnd aprea copii
cu cinci fenotipuri diferite ale culorii pielii , raportul de segregare genotipic
fiind: 1: 1: 2: 2: 4: 2: 2: 1: 1
_____________________________________________________________

165

_____________________________________________________________
Conform raportului de segregare fenotipic se realizeaz o distribuie
continu (gaussian) (fig.46). n realizarea culorii pielii intervin, n afar de
pigmeni i ali factori ce in de individ (sex, vrst, grosimea pielii, stratul
de grsime) sau de mediu (alimentaie, lumin solar). De aceea,
determinismul acestor caractere este multifactorial (Covic, 1981).

P:
P1P1P2P2 x p1p1p2p2
gP:
P1P2
x
p1p2
F1:
P1p1P2p2
P (F1): P1p1P2p2 x P1p1P2p2
F1 (F2):
GP
P1P2
P1p2
p1P2
p1p2

P1P2
P1P1P2P2
P1P1P2p2
P1p1P2P2
P1p1P2p2

P1p2
P1P1P2p2
P1P1p2p2
P1p1P2p2
P1p1p2p2

p1P2
p1P1P2P2
P1p1P2p2
p1p1P2P2
p1p1P2p2

p1p2
P1p1P2p2
P1p1p2p2
p1p1P2p2
p1p1p2p2

_____________________________________________________________

166

_____________________________________________________________

P
n e g ru

a lb

F1

m u la tr u d e s c h is
a lb

n e g ru

F2

m u la tr u o b i n u it

m u la tr u n c h is

m u la tru
o b i n u it

Fig. 46 Reprezentarea diagramatic a transmiterii culorii pielii la om.

_____________________________________________________________

167

_____________________________________________________________

VARIABILITATEA

EREDITAR LA OM

Sensul larg al noiunii de ereditate cuprinde nu numai determinarea


i conservarea similitudinii biologice n succesiunea generaiilor, ci i
variabilitatea, realizat prin recombinare i mutaii (Covic, 1981).

5.1. Recombinarea genetic


Recombinarea genetic este procesul prin care materialul genetic
transmis de la ascendeni la descendeni formeaz, prin rearanjare
(reasortare, redistribuire) combinaii genetice noi, ce determin manifestri
fenotipice diferite (recombinani).
Recombinarea genetic la eucariote se realizeaz ntre uniti
genetice de mrime variat: genom, cromosom, gen. Ele se asociaz prin:
fuziune nuclear n cursul fecundrii (hibridare sexuat) n cazul
recombinrii genomice sau prin fenomenele genetice specifice meiozei,
pentru recombinarea cromosomial i genic (Covic, 1981).
_____________________________________________________________

168

_____________________________________________________________
a. Recombinarea genomic
Recombinarea genomic se realizeaz n procesul sexual, prin
asortarea genomurilor din gameii masculi i femeli. Reproducerea sexuat
asigur nu numai continuitatea, ci i pstrarea genelor i caracterelor de la
prini la copii, ct i creterea variabilitii urmailor. Prin fecundarea a doi
gamei provenii de la indivizi diferii genetic, descendenii vor prezenta o
vitalitate sporit, caliti noi, fertilitate crescut. Aceast vigoare hibrid
sau heterozis, la hibrizii rezultai prin ncruciarea unor organisme
nenrudite i diferite ca structur genetic, este consecina heterogenitii
genetice a descendenilor (Covic, 1981) (fig. 47).

A B C

a b c

A B C
a b c

g a m e to g e n e z

A a A A
B B b B
C C C c

Aa
Bb
Cc

a A a a
b b B b
c c c C

Fig. 47 Variabilitatea genotipic produs prin asortarea independent a cromosomilor


omologi, n metafaza i anafaza meiozei I, la un organism ipotetic cu 3 perechi de
cromosomi 2n=6).

n cazul ncrucirii unor indivizi apropiai sau nrudii


(consangvinitate), gradul de heterogenitate se reduce i sporete fenomenul
de omogenitate genetic (homozigoie). Deci, recombinarea genomic este
_____________________________________________________________

169

_____________________________________________________________
o surs de variabilitate, cu condiia ca genomurile ce se combin s fie ct
mai diferite.
b. Recombinarea cromosomial
Recombinarea cromosomial se produce n cursul gametogenezei (n
meioza I) ntre cromosomii omologi, putnd fi recombinare
intercromosomial i intracromosomial.
Recombinarea intercromosomial
Recombinarea intercromosomial se realizeaz prin disjuncia
cromosomilor n timpul diviziunii meiotice, asigurndu-se repartiia
independent n gamei, a cromosomilor omologi, de origine matern i
patern. Disjuncia cromosomilor dintr-o pereche este independent de
separarea cromosomilor din alte perechi (fig. 47). Ca urmare, n gamei se
realizeaz combinaii aleatorii ale cromosomilor, obinndu-se genotipuri
distincte. Rata combinaiilor posibile n gamei, prin disjuncia independent
a cromosomilor omologi, depinde de numrul perechilor cromosomiale. La
om se formeaz 223 combinaii, deci peste 8 milioane de gamei diferii (cifr
valabil pentru situaia n care cromosomii se deosebesc printr-o singur
gen). Dup fecundare, vor rezulta 246 combinaii, valoare ce depete de 8
mii de ori populaia globului. De aceea, se poate afirma c fiecare persoan
are o structur genetic unic i nerepetabil.
Ca urmare a producerii recombinrii intercromosomiale (n metafaza
i anafaza meiozei I), la indivizii heterozigoi se formeaz i gamei
recombinai, pe lng gameii normali.
De exemplu, un individ dublu heterozigot pentru 2 gene plasate pe 2
perechi de cromosomi A/a B/b (provenit din prini A/A B/B i a/a b/b) va
produce 2 tipuri de gamei nerecombinai A B i a b, dar i 2 tipuri de
gamei recombinai A b i a B.
n cazul n care individul dublu heterozigot este genotipic A/a b/B
(provenind din prini A/A b/b i a/a B/B) acesta va putea produce 2 tipuri
de gamei nerecombinai A b i a B i 2 tipuri de gamei recombinai A B i
a b.
Deci, clasificarea tipurilor de gamei produi n gamei
nerecombinai i recombinai depinde de combinarea genelor nealele la
indivizii parentali. Procentul gameilor nerecombinai i al celor recombinai
este variabil i n funcie de cele 2 gene implicate.
_____________________________________________________________

170

_____________________________________________________________
Un exemplu este cazul transmiterii caracterelor n ncruciarea
dihibrid de motenire a 2 caractere: nanismul hipofizar i sistemul ABO.
Nanismul hipofizar (piticismul) este determinat de o gen recesiv
autosomal d . Astfel, indivizii dd sunt afectai, iar cei cu genotipul DD sau
Dd prezint nlime normal.
Sistemul ABO de determinism sangvin implic alele multiple
(polialelie): LA, LB i L0 (l), determinism detaliat la capitolul........
De exemplu, un brbat dublu heterozigot DdLALB (nlime normal
i grup sangvin AB) va produce 4 tipuri de gamei: DL A, dLB, DLB, dLA.
Conform legii a IIa mendeliene, fiecare pereche de alele segreg
independent de alte perechi de alele. Astfel, jumtate din gamei vor fi
purttori ai genei D, iar jumtate vor prezenta gena d, iar pentru perechea de
alele LALA, tot jumtate din gamei vor prezenta gena L A i jumtate gena LB
(tabel).
Tabel. 9 Schema legii a II-a mendeliene.

Alele pentru
nanism
1/2 D
1/2 d

Alele pentru sistemul


ABO
1/2 LA
1/2 LB
1/2 LA
1/2 LB

Gamei
1/4 DLA
1/4 DLB
1/4 dLA
1/4 dLB

Deci 50% din gamei sunt recombinai i 50% nerecombinai.


Din cstoria unui brbat DdLALB (ce va produce 4 tipuri de
spermatozoizi) cu o femeie Ddll (ce va produce 2 tipuri de ovule - tabel),
copiii posibili ai acestui cuplu vor prezenta combinaiile genotipice redate n
tabelul , segregarea fenotipic fiind de 3/8 indivizi normali, cu grupa A; 3/8
indivizi normali, cu grupa B; 1/8 pitici, cu grupa A i 1/8 pitici, cu grupa B.
Tabel. 10 Tipurile de gamei produse de o femeie Ddll.

_____________________________________________________________

171

_____________________________________________________________
Alele pentru
nanism
1/2 D
1/2 d

Alele pentru sistemul


ABO
100% l
100% l

Game
i
1/2 Dl
1/2 dl

Tabel. 11 Combinaiile genotipice posibile la generaia F1.


Gamei
1/4 DLA
1/4 DLB
1/4 dLA
1/4 dLB

1/2 Dl
DDLAl (1/8 normali, grupa A)
DDLBl (1/8 normali, grupa B)
DdLAl (1/8 normali, grupa A)
DdLBl (1/8 normali, grupa B)

1/2 dl
DdLAl (1/8 normali, grupa A)
DdLBl (1/8 normali, grupa B)
ddLAl (1/8 pitici, grupa A)
ddLBl (1/8 pitici, grupa B)

Genele ce determin nanismul hipofizar i cele implicate n sistemul


ABO sangvin sunt plasate pe perechi diferite de cromosomi. Gena ce induce
nanismul hipofizar este plasat pe cromosomul 17, la mijlocul braului lung,
iar genele pentru sistemul ABO sunt localizate pe cromosomul 9, spre
captul braului lung (fig.48) (Mange & Mange, 1990).
D
17

A
9

Fig. 48 Reprezentarea schematic a genelor pentru nanismul hipofizar


i pentru sistemul ABO.

Recombinarea intracromosomial (crossing - over)


Variaiile genotipice individuale produse de recombinarea
intercromosomial sunt amplificate prin fenomenul de schimb reciproc de
gene ntre cromosomii omologi sau recombinare intracromosomial
(crossing - over).
Crossing over-ul este procesul prin care se realizeaz schimbul de
material genetic ntre cromosomi omologi, n timpul diviziunii meiotice (P I
- pachiten). Fenomenul presupune ncruciarea cromosomilor omologi,
ruperea cromatidelor la nivelul chiasmelor, schimbul reciproc de fragmente
ntre cromatide i reunirea fragmentelor ntr-o configuraie genic nou. Prin
crossing - over se formeaz cromatide recombinate genetic. Crossing
over-ul poate fi:
_____________________________________________________________

172

_____________________________________________________________
egal - cnd are loc schimbul reciproc de fragmente cromatidice
egale (caz general)
inegal - cnd ntre segmentele cromatidice omoloage nu exist
coresponden, ceea ce genereaz o recombinare nereciproc (unul dintre
cromosomi va avea o duplicaie, iar cellalt o deleie a aceleiai gene),
rezultnd gamei anormali. (Coprean, 1998).
Crossing over-ul inegal
n cazul n care nu se realizeaz sinapsarea precis a regiunilor
omoloage, se va produce un crossing - over inegal ntre poriunile nealiniate,
realizndu-se o rearanjare a secvenelor de ADN, deci o modificare a
structurii polipeptidelor codificate de aceste secvene.
Un exemplu, l reprezint hemoglobina Lepore, ce conine catene
normale, asociate cu catene anormale; acestea ncep cu o secven de
aminoacizi identic cu catena i se continu cu o secven a catenei
normale (fig.49). Hibridul - (Lepore) rezult printr-un crossing - over
inegal.

CO

Fig. 49 Model de producere a Hb Lepore prin crossing - over inegal.

Alt exemplu l constituie Hb Kenya, n care catena anormal rezult


dintr-o fuziune a unor pri din catenele i .
_____________________________________________________________

173

_____________________________________________________________
Crossing over-ul inegal se poate realiza n zonele cu gene
duplicate, cu segmente nucleotidice similare, de exemplu genele pentru
vederea colorat rou i verde (gene localizate pe cromosomul X i Xq28).
Pentru culoarea roie exist o gen i 1 - 3 gene pentru culoarea verde.
Nucleotidele acestor gene sunt omoloage n proporie de 96%.
Crossing over-ul inegal poate determina pierderea funciei unui tip
de gene sau formarea de gene hibride alterate (Coprean, 1998).
Crossing over-ul egal
Pentru demonstrarea crossingover-ului egal se aleg dou perechi de
gene legate de X: G-gena dominant pentru vederea normal, colorat; g alela recesiv pentru absena vederii colorate pentru verde (deuteroanopie)
i H - gena dominant pentru coagularea normal a sngelui; h - alela
recesiv pentru hemofilia A.
De exemplu, dou femei sntoase, dublu heterozigote GgHh pot
prezenta genotipuri diferite ca "faz": o femeie poate avea genele plasate n
poziia "cis" (cele dou alele recesive pe acelai cromosom omolog) sau
"trans" (cele 2 alele recesive plasate opus pe cromosomi omologi), ca n
fig.50.
g

h
X p a te rn

c is
X m a te rn
G

H
X p a te rn

tra n s
X m a te rn
G

Fig. 50 Reprezentarea schematic a poziiilor "cis" i "trans" ale genelor legate de


X: G i H, cu alelele corespunztoare.

Femeia cu genotipul "cis" va forma 2 tipuri de gamei: gh i GH


(gamei nerecombinai, parentali) i 2 tipuri de gamei: gH i Gh (gamei
recombinai, ca urmare a unui crossing - over ntre genele g i h). Gameii
_____________________________________________________________

174

_____________________________________________________________
recombinai se obin cu o frecven sczut (1,5% pentru fiecare, deci 3% n
total), n comparaie cu gameii parentali (48,5% pentru fiecare i 97% n
total).
Femeia cu genotipul "trans" va forma aceleai 4 tipuri de gamei, cu
deosebirea c gameii nerecombinai (parentali) sunt gH i Gh (n procent
total de 97%), iar gameii recombinai sunt gh i GH (n procent total de
3%) (fig.51).

G am et m ascul

G a m e t fe m e l

M E IO Z

M E IO Z

4 8 ,5 %

4 8 ,5 %

G a m e i n e re c o m b in a i
97%
97%
4 8 ,5 %

1 ,5 %

4 8 ,5 %

1 ,5 %

1 ,5 %

G a m e i r e c o m b in a i
3%
1 ,5 %

3%

Fig. 51 Reprezentarea schematic a tipurilor i procentelor de gamei


recombinai i nerecombinai, produi de indivizi cu 2 gene X- nlnuite n
poziia "cis" i "trans".
_____________________________________________________________

175

_____________________________________________________________
Din totalul tipurilor de gamei formai de un organism, procentele
cuprinse ntre 0% (linkage complet) i 50% (segregarea independent a
perechilor de cromosomi) gameii recombinai se datoreaz formrii
chiasmelor ntre cromosomii omologi. Fiecare chiasm reprezint locul
unde cromatidele nesurori se rup i apoi se unesc n manier criss - cross (n
form de X). Acest schimb reciproc de segmente ntre cromatidele nesurori
este crossingover-ul, iar cromatidele rezultate sunt cromatide cross-over
(recombinate) (fig.52).
c r o m a tid e
s u ro ri
c r o m a tid e
s u ro ri

g
G

h
H

g
G

h
H

g
G

h
H

2
3
4

1
R u p tu r i n
c r o m a tid e
n e s u ro ri

2
3
4

1
2
C r is s -C r o s s
3
4

G a m e i

Fig. 52 Schema producerii unui crossing - over simplu ntre 2 gene X nlnuite
(G i H, respectiv alelele g i h).

_____________________________________________________________

176

_____________________________________________________________
Chiasmele au fost observate la microscopul optic, n celulele
meiotice colorate (prin diverse metode de colorare nuclear), la diferite
organisme. S-a constatat c se pot forma numeroase chiasme pentru o
pereche de cromosomi omologi ("tetrad"), ns sunt dificil de evideniat (n
principal datorit dimensiunilor mici ale cromosomilor). Studiul celulelor
meiotice umane a demonstrat existena, n general, a 1-4 chiasme (uneori 5
sau 6) la "tetradele" autosomale la brbat (media fiind de 2 chiasme per
pereche de cromosomi omologi). Se pare c, perechea de cromosomi XY nu
formeaz chiasme. referitor la numrul chiasmelor meiotice la femei, sunt
foarte puine informaii (Mange & Mange, 1990).
Crossing-over-ul se produce n profaza meiozei I, n pachiten,
naintea condensrii cromosomilor n maniera n care devin vizibili la
microscopul optic.
Pentru exemplul de mai sus (fig. 52), n celulele meiotice ale unei
femei dublu heterozigote pentru genele ce determin daltonismul i
hemofilia, se poate produce crossing - over ntre cromatidele nesurori 2 i 3
(ca n figur) sau 1 - 3, 1 - 4 i 2 - 4, obinndu-se acelai rezultat (n
realitate toate cele 4 cromatide se ating tridimensional). Ca urmare a
crossingover-ului, viitorul ovul va conine la nivelul cromosomului X
asociaii parentale de gene gh i GH sau asociaii recombinate gH i Gh.
Alegerea cromosomului (din cei 4 cromosomi) ce va fi inclus n ovulul
funcional este aleatorie; ceilali 3 cromosomi vor sfri n corpii polari.
Atunci cnd crossing over-ul se produce la un genotip homozigot
(gghhh; GGHH; ggHH sau Gghh) nu are loc recombinarea, gameii formai
fiind doar de tip parental.
n cazul genelor adiacente nu se produce crossing - over deoarece,
practic nu exist distan ntre gene, astfel nct procentul de recombinare
prin crossing - over este zero (genele fiind absolut nlnuite - cazul IV din
tabelul nr.**).
Atunci cnd genele sunt foarte departe (spre capetele cromosomilor)
se va produce crossing - over. Deoarece din cele 4 cromatide ale unei tetrade
din profaza meiozei I doar 2 vor fi implicate n crossing - over, celelalte 2
rmnnd parentale, procentul maxim de gamei recombinai ce se poate
forma este de 50% (din procentul de 100% gamei), 50% fiind gamei
parentali (cazul II din tabel**).
_____________________________________________________________

177

_____________________________________________________________
Genele plasate la o distan ce permite realizarea crossingover-ului
(nici prea aproape, nici la capete) conduc la frecvene ntre 0 - 50% crossing
- over (frecvena crossingover-ului crete cu creterea distanei ntre gene).
innd cont de faptul c procentele de recombinare sunt egale cu
unitile de hart genetic, la exemplul descris anterior, la procentul de 3%
crossing - over sunt 3 uniti de hart genetic.
Atunci cnd genele sunt plasate pe cromosomi diferii va avea loc
recombinarea intercromosomial, segregarea fiind conform legii a II-a
mendeliene: 50% gamei recombinai i 50% gamei parentali, rezultnd n
final 4 tipuri de gamei, n procent de 25% fiecare (cazul I din tabel**)
(Mange & Mange, 1990).
Tabel 12. Tipurile de gamei formai de o persoan rezultat din unirea gameilor AB i ab.
Localizarea genelor
A i B
I. Pe cromosomi
diferii (neomologi)
II. Pe acelai
cromosom, ns
foarte departe
III. Pe acelai
cromosom, nici
prea aproape, nici
prea departe
IV. Pe acelai
cromosom, foarte
aproape

Gametul AB
% (parental)

Gametul ab %
(parental)

Gametul Ab %
(recombinat)

Gametul aB %
(recombinat)

Procentul de
recombinare

25

25

25

25

50

25

25

25

25

50

100-x / 2

100-x / 2

x/2

x/2

x = 0-50%

50

50

Crossing over-ul somatic (sister chromatid exchange)


Fenomenul de crossing - over se poate produce i n mitoz
(crossing - over somatic), ntre cromatidele surori ale unui cromosom,
explicnd fenomenul de mozaicism. Acesta a fost evideniat prin
autoradiografie (cu T cu 3H) de Taylor, n 1957 (cf. Mange & Mange, 1990),
iar mai recent, prin ncorporarea de BdU (bromdeoxiuridin) i coloraie cu
acridin - orange, sub form de schimburi ntre cromatidele surori. Numrul
de schimburi ntr-o metafaz (la aceeai doz de BdU) este relativ constant,
putnd ns crete semnificativ, sub aciunea agenilor mutageni (Covic,
1981).
Crossing over-ul somatic este un test citogenetic (efectuat n
metafaza mitotic), cu sensibilitate mare la concentraii sczute de mutageni
_____________________________________________________________

178

_____________________________________________________________
chimici. Deoarece cromatidele surori sunt copii exacte (cea de-a doua
cromatid se formeaz n faza S a ciclului celular mitotic, prin duplicarea cu
precizie a unei cromatide), schimbul reciproc de segmente cromatidice ntre
cromatidele surori nu prezint consecine genetice, fiind imposibil de
determinat. Crossingover-ul somatic poate fi evideniat la microscopul
optic prin marcarea chimic a cromatidelor, celulele fiind supuse la dou
replicri, n mediu de 5-bromuracil (5-BU), ca n fig. 53 i fig. 54 (Mange &
Mange, 1990).

P r im a
r e p lic a r e
a ADN
tt

M ito z
A doua
r e p lic a r e
a ADN

tb tb

tb

tb b b

Fig. 53. Schema replicrii ADN, n mediu de 5-BU, fr crossing - over


mitotic (tt = ADN dublu catenar, cu timin; tb = ADN cu timin i ADN cu
5-BU; bb = ADN cu 5-BU).

_____________________________________________________________

179

_____________________________________________________________

P r im a
r e p lic a r e
a AD N
tt

M ito z

A doua
r e p lic a r e
a AD N

tb tb

bb

tb

tb

bb

bb

tb

tb

Fig. 54. Schema replicrii ADN, n mediu de 5-BU, cu dou crossing


overe mitotice (tt = ADN dublu catenar, cu timin; tb = ADN cu timin i
ADN cu 5-BU; bb = ADN cu 5-BU).
n cultura de celule, n scopul testrii producerii crossingover-ului
somatic, se pot utiliza leucocitele unei persoane expuse la diferii mutageni.
Testarea se realizeaz n medii cu 5-BU, un analog al timinei; pentru
testarea in vivo se injecteaz 5 BdU (5-bromdeoxiuridin).
Prin tehnica in vitro, s-a constatat c, fumtorii prezint o frecven
mai mare a crossingover-ului somatic, n celulele albe sangvine (Mange &
Mange, 1990).
Pentru evidenierea crossingover-ului se poate folosi un colorant
(de exemplu Giemsa sau un colorant fluorescent) ce va colora mai intens
cromatidele cu mai mult timin. Astfel, cromatida tb se va colora mai
intens fa de cromatida bb. Atunci cnd se produc crossing-overe somatice,
n cromosomii metafazici vor aprea segmente cromatice alternante, nchise
i deschise la culoare (fig.55). Astfel de cromosomi au fost denumii
cromosomi arlechin (Mange & Mange, 1990).

_____________________________________________________________

180

_____________________________________________________________
A

Fig. 55. Cromosomi metafazici: A) normali cu cromatidele marcate (negru =


cromatid cu timin; gri = cromatid cu 5-BU); B) cu schimburi de
segmente cromatidice ntre cromatidele surori (cromosomi arlechin).

5.2. Mutaii genice umane


O alt surs de variabilitate, alturi de recombinarea genetic, o
constituie mutaiile.
Prin mutaii se nelege o modificare anormal i ereditar a
materialului genetic, ce poate produce o schimbare detectabil a fenotipului
unei celule sau unui individ. Celula sau organismul cu informaia genetic
modificat, ca urmare a unei mutaii, se numete mutant.
Mutaiile genice pot interesa ntreaga gen, mai multe nucleotide sau
unul singur (mutaii punctiforme); perechea de nucleotide este cea mai mic
unitate de mutaie sau muton (Covic, 1981). Gena a crei structur i
funcie sunt modificate este denumit gen mutant (de fapt, alela genei
iniiale). Mutaiile genice pot interesa genele structurale (modific structura
polipeptidului sintetizat dup informaia genei), genele operatoare
( determin blocarea sau activarea continu a transcripiei) sau genele
reglatoare (schimb ritmul, cantitatea sau tipul de protein sintetizat).
Mutaiile produse n genele operatoare determin, prin blocarea
transcripiei, deficiena concomitent a mai multor enzime, controlate de
_____________________________________________________________

181

_____________________________________________________________
genele incluse n acelai operon. De exemplu, n intolerana la sucroz
(boal recesiv caracterizat prin pusee severe de diaree) se observ o lips
a sucrozei, maltozei i izomaltozei intestinale.
Un exemplu de mutaii produse n genele regulatoare l constituie talasemiile (anemii hemolitice cronice produse prin apariia unor Hb
anormale, ca urmare a unor defecte n sinteza lanurilor (fig.56).
s u b s t itu ia u n e i p e r e c h i d e b a z e
1

exon

in tro n

exon

in tro n

exon

a d i ie s a u d e le ie

Fig. 56. Gena -globinei, cu cele 8 posibile mutaii ce produc -talasemia,


cu forme de manifestare de la foarte sever pn la mai puin severe.

-talasemiile sunt relativ frecvente n rile mediteraneene, fiind


produse printr-o mutaie ce determin sinteza de lanuri sau , n locul
catenelor . Astfel, se produce HbF (2 i 2 ) i o cantitate mare de HbA2
(2 i 2 ). Homozigoii (talasemie major sau anemie Cooley) prezint
anemie sever deoarece nu posed HbA, ce a fost nlocuit cu HbF.
Heterozigoii (talasemie minor) sunt aparent sntoi, dar prezint anomalii
ale morfologiei eritrocitelor i o cantitate dubl de HbA2. Aceste cazuri de
-talasemie pot fi explicate printr-o tulburare a tipului i / sau ritmului de
sintez a unor polipeptide, determinat de modificarea genelor reglatoare ce
controleaz sinteza normal a Hb.
Un alt exemplu de mutaie n genele reglatoare este porfiria acut
intermitent, boal recesiv n care, printr-o tulburare a metabolismului
porfirinelor se produce un exces de porfirine (secundar - fotosensibilitate a
_____________________________________________________________

182

_____________________________________________________________
pielii etc.). Explicaia poate fi producerea unui represor inactiv ce nu
blocheaz gena operatoare sau mutaia acestei gene - insensibil la represor.
Mutaia genic poate apare spontan, n absena unei cauze
determinabile, sau poate fi indus de o serie de ageni mutageni fizici,
chimici sau biologici.
La om, mutaiile se pot produce n oricare din cele 30 000 - 35 000
de gene din cei 46 de cromosomi. Dac mutaia se produce n celulele
somatice, atunci va afecta doar individul respectiv; atunci cnd mutaia se
produce n esutul germinal ce formeaz gameii, va fi transmis la
generaiile urmtoare (cu excepia cazurilor cnd mutaiile induc letalitate).
Muli cercettori consider c fiecare persoan conine ntre 4 - 8
gene recesive ce pot produce fenotipuri letale i, probabil, un numr mult
mai mare de gene recesive, care, cnd se homozigoteaz determin o larg
varietate de boli ereditare.
La om, determinarea ratei mutaiilor este dificil, ns se estimeaz
c rata mutaiilor punctiforme este de 10-5 sau o mutaie la 100 000 de
gamei. Probabil c aceeai rat de mutaie se produce i la celulele somatice
(Stine, 1989).
n anul 1962, J. V. Neel (cf. Stine, 1989), analiznd datele din
diferite surse referitoare la 9 maladii ereditare umane, a estimat o medie a
ratei de mutaie per gen de 4 mutaii la 100 000 de gamei, astfel nct
sperma unei ejaculri conine 12000 de spermatozoizi mutani. Mutaiile pot
fi recesive sau dominante. Majoritatea mutaiilor recesive nu se manifest
datorit strii de heterozigoie. Excepie fac mutaiile recesive gonosomale,
ce se manifest totdeauna la brbai, datorit strii de hemizigoie. Mutaiile
letale gonosomale recesive vor modifica sex ratio, deoarece indivizii
hemizigoi purttori ai mutaiei letale nu vor supravieui (fig.57).

_____________________________________________________________

183

_____________________________________________________________

Y
L e ta l

Fig. 57 Modificarea sex ratio, datorit unei mutaii recesive letale


gonosomale.

M u ta ie

G e n a s lb a tic

A le la m u t a n t
C r o m o s o m i m ito tic i
s a u m e io tic i

ADN

G A G

A G

C T C

T C

T r a n s c r ip ie

T r a n s c r ip ie

G A G

ARNm

A G

T r a n s la ie

P o lip e p tid a a

aa2

g lu

P r o d u s a c tiv a l g e n e i s lb a tic e

T r a n s la ie

aa

aa1 aa2

aan

P r o d u s in a c tiv a l a le le i m u ta n te

Fig. 58. Substituie prin tranziie cu schimbarea aminoacidului codificat

_____________________________________________________________

184

_____________________________________________________________
i produs polipeptidic inactiv.

Mecanismele de producere a mutaiilor genice sunt:


substituiile, ce se pot realiza prin:
- tranziie, cnd o baz purinic este nlocuit cu o baz pirimidinic
i invers: CT; AG (fig. 58). Tranziiile CT, reprezint 35-50% din
toate mutaiile punctiforme.
- transversie, cnd o baz purinic este nlocuit cu o baz
pirimidinic. Substituiile pot fi sinonime (conservative) sau nonsinonime.
Din circa 130 de variante anormale ale Hb umane determinate
genetic, 120 sunt produse prin substituie.
Substituia unui codon sens poate determina efectele:
- schimbarea aminoacidului codificat de codonul iniial prin alt
aminoacid codificat de codonul substituit (de ex. HbS - fig.59), tabel...........

M u ta ie
HbA

HbS

ADN

G A G

C T C

T r a n s c r ip ie

T r a n s c r ip ie

G A G

ARNm

T r a n s la ie

P o lip e p t id a a 1 a a

g lu
L a n u l b e ta n o rm a l a l H b A

T r a n s la ie

a a 146

aa1 aa2

a a 146

L a n u l b e ta m o d if ic a t a l H b S

Fig.59. Schema originii mutaionale a sicklemiei (producerea HbS).


_____________________________________________________________

185

_____________________________________________________________
Tabel 13. Substituiile unor aminoacizi n lanurile -globinei umane.

HbA
Tokuchi
HbS
HbC
HbG
J Baltimore
Savannah
HbE
J Bangkok
Zurich
M Saskatoon
N Baltimore
Yoshizuka
Khartoum
Olmsted

1
Val

2
His+

6
Glu-

7
Glu-

16
Gli

Poziia aminoacizilor
24
26
56
63
Gli
Glu- Gli
His+
Variante ale Hb

95
Lis+

108
Asn

124
Pro

141
Leu

Tir
Val
Lis+
Gli
AspVal
Lis+
AspArg+
Tir
GluAspArg+
Arg+

- oprirea sintezei proteinei, n cazul n care noul codon format prin


substituie este un codon nonsens sau STOP (fig.60).
- pstrarea structurii iniiale a proteinei deoarece codonul rezultat
prin substituie este "sinonim" cu cel modificat; n acest caz, uneori se
reduce rata de sintez a proteinei deoarece translaia necesit un alt tip de
ARNt izoacceptor, dar disponibil ntr-o cantitate mai mic n celul.
Substituia poate interesa uneori i un codon nonsens sau STOP
(terminator): UAA sau UAG pot deveni CAA sau CAG, codoni ce codific
glutamina. Astfel, sinteza polipeptidului continu pn la un nou codon
STOP. Un exemplu de "elongaie a catenei" l constituie o alt Hb anormal
- HbCS (Hb Constant Spring) a crei caten conine 172 aminoacizi, n
loc de 141; secvena adiional de 31 de aminoacizi ncepe ntr-adevr cu
glutamina.
deleiile i inseriile de:
- nucleotide ce sunt multiplu de 3 (ce formeaz 1 sau mai muli
codoni), conduc la deleii sau inserii de aminoacizi n lanul polipeptidic.
_____________________________________________________________

146
His+

186

_____________________________________________________________
De exemplu, n Hb Gun - Hill sunt abseni 5 aminoacizi din catena
(91-95).
- nucleotide ce nu sunt un multiplu de 3 (nu formeaz un codon),
modific cadrul de citire din macromolecula de ADN (mutaii "frame-shift")
i secvena aminoacidului n molecula proteic (fig.); frecvent se genereaz
un codon STOP ce induce sinteza unei proteine trunchiate, nefuncionale.
C T A G C A T G T A T A G G G
G A T C G T A C A T A T C C C

ADN

C U A G C A U G U A U A G G G

ARNm

L eu

A la

C is

I le

P o lip e p tid

G li

M u ta ie c u s e n s g r e it

M u ta ie n o n -s e n s

G -C n lo c u it c u A -T

T -A n lo c u it c u A -T

C T A G C A T A T A T A G G G
G A T C G T A T A T A T C C C

C T A G C A T G A A T A G G G
G A T C G T A C T T A T C C C

ADN

C U A G C A U A UA U A G G G

C U A G C A U G A A U A G G G

ARNm

S e m n a l s to p (U G A )
L eu

A la

T ir

I le

G li

L eu

P o lip e p tid

A la

M u ta ie c u s c h im b a r e a c a d r u lu i d e c itir e
A d u g a re G -C i T -A
C T A G G T C A T G T A T A G G G
G A T C C A G T A C A T A T C C C

ADN

C U A G G U C A U G U A U A G G G

ARNm

L eu

G li

H is

Val

P o lip e p tid

_____________________________________________________________

187

_____________________________________________________________
Fig. 60. Reprezentarea schematic a mutaiilor nonsens, mutaii cu sens greit
i mutaii cu schimbarea cadrului de citire.

Microdeleiile pot afecta o pereche de baze azotate (1 pb) sau cteva


milioane (Mb), implicnd una sau mai multe gene. n -talasemii nu se
produc lanurile ale Hb pentru c gena corespunztoare lipsete din
genom. n locul lor, se sintetizeaz alte tipuri de lanuri, de exemplu Hb H =
4 sau Hb Bart = 4 .
Deleiile extinse, care implic cteva Mb, antreneaz pierdierea mai
multor gene adiacente. n patologia uman, deleiile extinse determin
sindroamele contigue. De exemplu, un biat are mai multe boli cu
transmitere recesiv legat de cromosomul X: hemofilia A, daltonism,
deficit glucozo-6-fosfatdehidrogenaza.
Inseria (adiia) reprezint introducerea unui nucleotid n mesajul
unei gene, din punctul de inserie lectura codonilor se va face decalat, fals,
realizndu-se o protein cu secven anormal.
ADN
C

A la

A la

A la

A la

A la

A la

A la

A la

a d iia u n e i b a z e
C

A la

A la

C is

C is

C is

C is

C is

C is

d e le ia u n e i b a z e
C

G
A la

G
A la

G
A la

G
A la

G
A la

A
Leu

G A

Leu

Fig. 61 Adiia i deleia unei baze

Inseriile pot fi reprezentate i de transpoziiile unor secvene


formate din ADN nalt repetitiv (familiile L 1 i Alu). Astfel de inserii au
fost identificate la pacienii cu hemofilie A, hemofilie B i
neurofibromatoz I.
_____________________________________________________________

188

_____________________________________________________________
inversia unui nucleotid cu alt nucleotid duce la modificarea unui
codon i lectura sa n sens invers (fig.62). Consecinele inversiei sunt
aceleai cu cele ale substituiei.

C is

Tri

Ser

A C G

A C C

A G G

A C G

C C A

A G G

C is

G li

Ser

Fig. 62 Inversie nucleotidic.

crossing - over inegal ce se produce n profaza meiozei I (vezi


mai sus)
reversia (mutaia supresiv)
Reversia este o mutaie ce intereseaz o alt mutant, determinnd
revenirea la fenotipul normal (slbatic). Reversia adevrat transform
codonul mutant n codon normal, iar reversia supresiv produce o a doua
mutaie, diferit ca poziie de prima, dar care cauzeaz efectul ei (fig.63).
De exemplu, Hb Harlem prezint prima mutaie n catena (6 Glu
Val), ca i Hb S, dar efectul ei de transformare a hematiilor "n secer"
este anulat de o a doua mutaie: 73ASPAsm.
duplicaii i hiperduplicaii
Catenele polipeptidice , , i ce se gsesc n Hb normale A1, A2
i F au o secven de aminoacizi asemntoare i apropiat cu mioglobina.
Se presupune c genele ce determin aceste proteine provin dintr-o gen
"ancestral" printr-o serie succesiv de duplicaii genice (fig.64), urmate n
_____________________________________________________________

189

_____________________________________________________________
fiecare caz de o evoluie divergent a produselor formate. Duplicaia este
rezultatul unui crossing - over inegal.
F e n o tip

G e n o tip
+

T ip s lb a tic
M u ta ie

m
T ip m u t a n t
M u ta ie n a p o i

M u ta ie s u p r e s o a r e
R e v e r s ie
fe n o tip ic

+
T ip s lb a tic (1 )

(2 )

n c r u c i a r e d e tip F B (b a c k c r o s s )
c u tip u l s lb a tic
+
(1 )

T ip s lb a t ic

(a )
T ip s lb a t ic

m
(2 )

+
(b )

F e n o tip m u ta n t
(r e c o m b in a t)

(c )

S
(d )

F e n o tip n e c u n o s c u t
(r e c o m b in a t)

Fig. 63 Revenirea la fenotipul original, slbatic prin:


1) mutaie napoi (back mutation); 2) mutaie supresoare.

Genomul omului actual prezint cele 4 gene: , , i aprute


succesiv prin duplicare; recent s-a demonstrat c populaia Malaeziei are un
singur locus pentru catena , n timp ce europenii i americanii au 2 loci
_____________________________________________________________

190

_____________________________________________________________
distinci. Alte exemple de duplicaii au fost descrise n cazul haptoglobinelor
i -globinelor, iar pentru unele gene (ce controleaz sinteza ARNr,
histonelor etc.) s-au descris hiperduplicaii sau duplicaii seriale repetate.
Toate aceste fenomene prezint importan evolutiv (Covic, 1981).
m io g lo b in

c a te n a a lp h a H b
g lo b in a
a n c e s tr a l

c a te n a g a m m a H b

c a te n a b e ta H b
c a te n a d e lta H b

Fig.64 Evoluia genelor mioglobinei i catenelor , , i a Hb.

n funcie de efectul produs, se cunosc urmtoarele tipuri de mutaii


genice:
silenioase (sinonime, mute) - cnd mutaia punctiform poate
avea efecte variate asupra proteinei codificate fr s-i modifice funcia
biologic. Astfel poate rezulta un codon sinonim ce codific acelai
aminoacid, ca i codonul normal, fr a fi alterate proprietile proteinei
(degenerarea codului genetic). Din totalul mutaiilor punctiforme, 25% sunt
silenioase (Coprean, 1998).
cu sens greit (missens) - 70% din mutaiile punctiforme au ca
rezultat codificarea unui aminoacid diferit. Proteina sintetizat va avea
structura molecular modificat, iar activitatea ei biologic va fi deficient
sau absent. Multe hemoglobine anormale sunt consecina unor mutaii cu
sens greit. Aceste mutaii pot fi:
- conservative (nlocuirea unui aminoacid cu altul similar, cu efect
minim asupra funciei biologice);
- nonconservative (cu modificarea funciei biologice a proteinei).
_____________________________________________________________

191

_____________________________________________________________
nonsens (nonsinonime) - aproximativ 2 - 5% din mutaiile
punctiforme sunt mutaii nonsens. Modificarea unui nucleotid determin
apariia unui codon STOP, n locul unui codon ce codific un aminoacid
corect. Proteina rezultat va avea dimensiuni reduse i va fi nefuncional,
mai ales dac nu este sintetizat un domeniu important din structura ei; sunt
asociate frecvent cu fenotipuri severe. n unele cazuri, efectul produs asupra
expresiei genice poate fi redus prin pierdierea exonului ce conine mutaia
nonsens.
cu schimbarea cadrului de citire ("frame-shift") - prin deleia
sau inseria unor nucleotide ce nu sunt un multiplu de 3, se va determina
modificarea cadrului de citire (ordinea codonilor n regiunea din dreapta
mutaiei); secvena de aminoacizi de dup situsul mutaiei este incorect.
Proteina rezultat este nefuncional.
mutaii produse prin splicing (jonciune) alternativ al
exonilor. La nivelul a numeroase gene s-a constatat prezena jonciunii
alternative a exonilor, n timpul procesrii posttranscripionale, ceea ce
permite acestor gene s codifice mai multe produse genice. Pot aprea i
forme aberante ale jonciunii exonilor n ARNm, ce se traduc prin
schimbarea cadrului de citire. Jonciunea aberant a exonilor poate genera:
pierdierea unor exoni, deleia parial a unor exoni sau formarea unor exoni
hibrizi.
mutaii la nivelul dinucleotidelor invariabile GT i AG
localizate la nceputul (donor splice) i, respectiv, la sfritul unui intron
(acceptor splice). Mutaiile ce modific aceste secvene pot avea consecine
diferite n funcie de eecul jonciunii exonilor sau de utilizarea unui situs de
jonciune aberant. Mutaiile la nivelul acestor dinucleotide pot conduce i la
introducerea unei secvene intronice n ARNm matur i la schimbarea
cadrului de citire.
mutaii produse prin crossing - over inegal i conversie genic
a genelor active i a pseudogenelor din aceeai familie de gene. Crossing
over-ul inegal ntre o gen funcional i o pseudogen din aceeai familie
de gene, poate determina deleia genei funcionale sau fuziunea genelor,
rezultnd o gen hibrid. Pseudogena, prin introducerea unor mutaii novice
n gena funcional, poate aciona ca secven donatoare, n procesele de
conversie genic. De exemplu, conversia genei 21 hidroxilazei active (21
CYPB) n pseudogena 21 CYPA.
_____________________________________________________________

192

_____________________________________________________________
mutaii letale - sunt mutaiile care se produc la nivelul genelor
eseniale; ele produc moartea organismului. n boala Tay - Sachs, deficiena
hexosaminidazei A cauzeaz moartea copiilor la vrsta de 3 - 4 ani.
mutaii supresoare - sunt mutaii secundare care anuleaz sau
diminueaz efectele altei mutaii (mutaia primar). Ele sunt de 2 tipuri:
- intragenice, cnd se produc n aceeai gen cu mutaia primar,
afectnd alte perechi de baze;
- intergenice, cnd se produc ntr-o gen supresoare, gen diferit de
cea n care s-a produs mutaia primar. Aceste mutaii anuleaz efectul
produs prin mutaiile nonsens, cu sens greit sau prin schimbri n cadrul de
citire al mesajului genetic. Dac mutaia primar modific un codon din
ARNm, acesta nu va fi recunoscut de ARNt, rezultnd o protein
incomplet. O mutaie secundar la nivelul genei ARNt poate produce o
modificare n anticodon. Acest anticodon anormal poate recunoate codonul
mutant din ARNm. Funcionarea proteinei rezultate depinde de efectul
aminoacidului integrat.
mutaii dinamice (instabile) - au fost recent descoperite i sunt
responsabile de unele boli ereditare umane. Ele sunt reprezentate de
repetarea de zeci, pn la sute de ori a unor triplete de nucleotide din
structura unei gene. Acest fenomen este numit amplificarea sau expansiunea
tripletelor.
n genomul uman sunt cunoscute trei tipuri de mutaii dinamice:
- expansiunea CAG la nivelul exonilor unor gene umane, codific
formarea la nivelul produsului genic a insulelor poliglutamice (coreea
Huntington);
- expansiunea CGC de la nivelul intronilor afecteaz metilarea ADN
i structura cromatidei, genernd situsurile instabile fragile i inhibarea
expresiei genei adiacente (sindromul X fragil);
- expansiunea tripletelor CTG din regiunea 3' a genei miotoninei.
Amplificarea tripletelor are loc pe parcursul mai multor generaii i
este baza fenomenului de anticipaie, de exemplu: distrofia miotonic
Steinert, coreea Huntington, sindromul X-fragil, unele forme de cancer. n
distrofia miotonic Steinert, defectul molecular const n repetarea a 50
pn la 1000 de ori a unei secvene de 3 nucleotide CTG, n apropierea
captului 3' al genei. La persoanele sntoase, acest triplet se repet
secvenial de 5 pn la 35 de ori; cu ct numrul de repetri este mai mare,
_____________________________________________________________

193

_____________________________________________________________
cu att boala este mai grav. n sindromul X-fragil este depit numrul
normal de secvene CGC din primul exon. Numrul repetrilor crete n
generaiile urmtoare, fiind nsoit de agravarea bolii.
Practic, dup valoarea adaptativ i consecinele mutaiilor genice
asupra structurii i funciei organismului, ele se pot mpri n mai multe
grupe (dup Covic, 1981):
mutaii neutre - produc polimorfismul biologic intraspecific
(variantele);
mutaii deviante (defavorabile) - ce antreneaz un handicap mai
mult sau mai puin sever i creeaz o predispoziie la boal, uneori fiind
mutaii letale sau subletale, deoarece influeneaz decisiv viabilitatea i
reproducerea individului;
mutaiile evoluante - cu valoare adaptativ mai mare.
Efectul mutaiilor genice depinde i de tipul de celul afectat germinal sau somatic. Mutaiile germinale se transmit, prin gamei la
descendeni, iar cele somatice nu se transmit la urmai.
Mutaiile somatice determin apariia unor clone anormale; n cazul
n care persist i evolueaz vor modifica structura i funcia unui esut sau
organ. De exemplu: zonele albstrui din iris la persoanele cu ochi cprui sau
bruni (heterocromie irian parial). Acestea par a fi implicate n geneza
cancerului i n mbtrnirea organismului.

5.3. Mutaii cromosomice umane


Mutaiile cromosomice umane, numite i anomalii sau aberaii
cromosomice sunt modificri ale numrului sau structurii cromosomilor.
Anomaliile cromosomice sunt relativ frecvente afectnd aproximativ
0,7% din nou nscuii vii, 2% din produii de concepie ai femeilor cu vrsta
de peste 35 de ani i ntlnindu-se la peste 50% din produii de avort
spontan n trimestrul I de sarcin.
Exist mai multe clasificri ale anomaliilor cromosomice:
- dup momentul apariiei anomaliile cromosomice sunt
constituionale (prezente la natere) sau dobndite (aprute n
timpul vieii);
_____________________________________________________________

194

_____________________________________________________________
- dup gradul de afectare al materialului genetic sunt anomalii
cromosomice de numr i de structur;
- dup tipul de cromosom implicat anomaliile cromosomice sunt
autosomale i gonosomale;
- dup numrul de celule afectate anomaliile cromosomice sunt
omogene (prezente n toate celulele) sau n mozaic (coexist linii
celulare normale i anormale);
- dup consecine anomaliile cromosomice sunt echilibrate
(modificri ale poziiei genelor pe cromosomi, care nu au
consecine fenotipice, dar pot produce anomalii cromosomice
neechilibrate la descendeni, de exemplu translocaiile reciproce
i robertsoniene, inversiile, inseriile) i neechilibrate (modificri
cantitative ale materialului genetic care duc la modificri
fenotipice, de exemplu anomaliile numerice i, dintre anomaliile
de structur, deleiile, cromosomii inelari, izocromosomii i
cromosomii dicentrici);
- dup asocierea cu anomalii de structur sunt anomalii
cromosomice libere (neasociate cu anomalii de structur) i prin
translocaie.

Etiologia
anomaliilor
cromosomice
Etiologia anomaliilor ale cromosomice este explicat prin:
- vrsta matern avansat: riscul de nedisjuncie crete exponenial
cu vrsta matern;
- prezena unor anomalii cromosomice echilibrate (ex. translocaie
echilibrat prin fuziune centric) la un printe;
- aciunea unor factori mutageni (fizici, chimici sau biologici) care
fie produc rupturi ale ADN-ului, fie afecteaz replicarea ADN
sau inhib reglarea mitozei.
Anomaliile cromosomice de numr sunt de dou tipuri:
_____________________________________________________________

195

_____________________________________________________________
- poliploidii caracterizate prin prezena n plus a unui sau mai
multor seturi haploide complete, de exemplu triploidie (3n cariotip 69, XXX; 69,XXY sau 69, XYY), tetraploidie (4n cariotip 92,XXXX sau 92,XXYY), pentaploidie etc.
- aneuploidii caracterizate prin prezena n plus sau n minus a 1, 2
sau 3 cromosomi fa de setul diploid normal (euploidie), de
exemplu monosomie (2n-1), dubl monosomie (2n-1-1),
nulisomie (2n-2), trisomie (2n+1), dubl trisomie (2n+1+1),
tetrasomie (2n+2).
Aneuploidiile pot fi complete, dac este afectat un cromosom ntreg
sau pariale dac lipsete sau este n plus un segment de cromosom.

Mecanismele
de
producere
ale
anomaliilor
cromosomice numerice
Triploidiile (3n) se produc fie prin fecundarea unui gamet diploid
(2n) anormal cu unul haploid (n) normal (numit diginie dac ovulul este
diploid i diandrie dac spermatozoidul este diploid), fie prin dispermie
(fecundarea unui ovul de ctre doi spermatozoizi simultan).
Tetraploidiile (4n) se produc fie prin erori de clivaj n prima
diviziune a zigotului, fie prin fecundarea a doi gamei diploizi. Triploidiile
umane nu sunt viabile.
Aneuploidiile omogene iau natere n urma fecundrii unui gamet
normal cu un gamet care prezint cromosomi n plus sau n minus aprut ca
o consecin a erorilor de distribuie a materialului genetic n meioz
(nedisjuncie, ntrziere anafazic, vezi fig. 65).
_____________________________________________________________

196

_____________________________________________________________

Fig. 65. Mecanismul de producere al anomaliilor cromosomice de numr omogene prin erori de distribuie a
materialului genetic n meioza I sau II.

Aneuploidiile n mozaic apar prin erori de distribuie a materialului


genetic n mitoz (nedisjuncie cromatidic, ntrziere anafazic, clivare
transversal a centromerului) (fig.66).

_____________________________________________________________

197

_____________________________________________________________

Fig. 66 Mecanismul de apariie a anomaliilor cromosomice de numr (n


mozaic)
prin erori de distribuie a materialului genetic n mitoz:
nedisjuncie cromatidian i ntrziere anafazic.

Consecinele aneuploidiilor la om sunt n funcie de tipul de


anomalie, de mrimea dezechilibrului genetic, de coninutul genic i de
activitatea cromosomului implicat i de tipul i numrul de celule implicate.
_____________________________________________________________

198

_____________________________________________________________
n general monosomiile sunt mai grave dect trisomiile; singura
monosomie uman viabil este monosomia X. Trisomiile cromosomilor
mari produc avorturi spontane sau duc la deces neonatal; trisomiile
cromosomilor mici i bogai n heterocromatin pot supravieui ducnd la
sindroame plurimalformative (ex. trisomiile 21, 22, 13, 18, 8).
Anomalii de structur ale cromosomilor umani
Anomaliile structurale ale cromosomilor constau n modificri ale
structurii cromatidelor. Aceste mutaii se produc n faza G1 a ciclului celular
(cnd cromosomii sunt monocromatidici), avnd loc pierderi sau ctiguri
de segmente cromosomiale; au loc procese de rupere i reunire (n ordinea
iniial sau ntr-o ordine nou), realiznd un rearanjament sau o remaniere
cromosomial.
Anomaliile cromosomice de structur sunt:
o Deleii
o Duplicaii
o Inversii
o Translocaii
o Izocromosomi
Deleiile
Deleiile sunt pierderile de fragmente cromosomiale, ce pot fi:
terminale (deficiene), reprezentnd o ruptur la unul din capete,
sau la ambele capete cte o ruptur; la om se ntlnete frecvent deleia
terminal ca urmare a unei rupturi , fragmentul deletat metabolizndu-se
(fig. 65A).
intercalare (interstiiale), ce afecteaz segmente din interiorul
cromosomului (implic 2 rupturi), iar fragmentul intercalar este dislocat. Pot
fi:
- pericentrice, cnd cuprind i centromerul n segmentul
deletat, rezultnd deci un fragment cu centromer i un fragment
acentric (fig.65 D). Atunci cnd deleia afecteaz telomerele unui
cromosom lung, extremitile segmentului cu centromer se pot uni i
formeaz un cromosom inelar (fig. 65C).
_____________________________________________________________

199

_____________________________________________________________
- paracentrice, ce afecteaz poriunile din interiorul
cromosomului i formeaz un cromosom scurtat i un fragment
acentric, ce se va pierde (fig 65B).
Dac prin deleie sunt ndeprtate regiunile telomerice de la 2 sau
mai muli cromosomi, acetia pot fuziona realiznd structuri dicentrice sau
policentrice. Aceste structuri sunt instabile i pot genera alte restructurri
cromosomiale, dar cel mai frecvent, determin moartea celulelor (Coprean,
1998).
Exceptnd cromosomul X, deleia unor segmente cromosomiale mari
(ce cuprind mai multe gene) este, n general, letal, sau este asociat cu
defecte fenotipice severe. Deleiile braelor cromosomiale: 4p, 5p, 9p, 11p,
11q, 13q, 18p i 18q sunt cel mai frecvent ntlnite. Cromosomii perechilor
4 i 5 par a fi cei mai susceptibili la rupere (Mange & Mange, 1990). Toate
deleiile ce afecteaz cromosomii umani genereaz variate sindroame
plurimalformative congenitale, a cror caracteristici generale sunt tratate la
capitolul VI.

Duplicaiile
Duplicaiile reprezint adugarea prin dublare a unui segment
cromosomial (fig. 65E).
Duplicai rezultat prin 2 rupturi ntr-un cromosom (n faza G1) duce
la replicarea fragmentului cuprins ntre punctele de rupere ale unei
cromatide i inseria fragmentului pe cealalt cromatid (fig. 65F).

Translocaiile
Rupturile de segmente n unul sau mai muli cromosomi neomologi,
urmate de rearanjamente (noi combinaii) reprezint translocaiile.
Translocaiile pot fi:
- reciproce, constnd n schimbul reciproc de segmente
cromosomiale ntre 2 cromosomi neomologi.
- inserii - un fragment dintr-un cromosom se inser la punctul de
ruptur a altui cromosom
- transpoziii un fragment dintr-un cromosom se inser la un punct
de ruptur din acelai cromosom
- robertsoniene, numite i fuziune centric, rezultate prin rupturi
produse n apropierea centromerului cromosomilor acrocentrici cu unirea
_____________________________________________________________

200

_____________________________________________________________
ulterioar a braelor lungi i formarea unui cromosom mai mare metacentric
sau submetacentric.
Izocromosomii
Izocromosomii rezult prin clivarea transversal a centromerului
n anafaza mitozei sau a meiozei II; ei conin dou brae p sau dou
brae q.
Inversiile
Inversiile se produc ca urmare producerii a dou rupturi pe un
cromosom urmate de rotirea segmentului dintre rupturi i sudarea la
loc a capetelor. Dac segmentul inversat conine centromerul, inversiile
se numesc pericentrice, iar dac este exterior centromerului,
paracentrice.
(A )

(B )

C D E F G

C D E F G

C D

F G H

C D F G

(D )

(E )

(F )

C D

C D

F G

F G

D +
F

C D

C D E F G

p ie r d e r e

A E F G H
p ie r d e r e

C D E D E F G

A
A

G 1

p ie rd e r e

+
A

p ie r d e r e

p ie r d e r e

H
+

B
(C )

H
+

B B C
C

T e lo fa z a
m ito z e i

Fig. 67. Modaliti de producere ale anomaliilor cromosomice de structur

_____________________________________________________________

201

_____________________________________________________________

NOIUNI DE

GENETIC MEDICAL

Genetica medical este ramura geneticii umane care studiaz relaia


dintre ereditate i boal, deci rolul factorilor genetici n rspunsul diferit al
fiecrei fiine umane la agresiunea mediului.
_____________________________________________________________

202

_____________________________________________________________
Obiectul de studiu al geneticii medicale este reprezentat de bolile
genetice - boli determinate n mod predominant de factori genetici.
Obiectivele geneticii medicale sunt: diagnosticul, tratamentul i profilaxia
bolilor genetice.
Dei primele concepte de genetic medical sunt enunate de Galton
i, n special, de Garrod (acesta putnd fi considerat chiar ntemeietorul
geneticii medicale), iar mai apoi istoricul geneticii medicale se suprapune pe
cel al geneticii umane, genetica medical se impune ca specialitate de sine
stttoare n anii 1960-1970 odat cu dezvoltarea metodelor citogenetice de
diagnostic i cu rspndirea sfatului genetic. Alte repere deosebit de
importante n dezvoltarea geneticii medicale au fost descoperirea structurii
ADN-ului i a codului genetic care au deschis calea studiului direct al
genelor, perfecionarea tehnicilor de diagnostic prenatal i, mai nou, a
tehnicilor de terapie genic.
ntruct bolile genetice sunt astzi o problem de sntate public,
rolul geneticii medicale n medicina actual devine tot mai important; acest
rol a fost recunoscut i n ara noastr prin recenta introducere a geneticii
medicale n nomenclatorul specialitilor medicale al Ministerului Sntii,
dar aceast recunoatere ar trebui urmat de nfiinarea unor centre regionale
de patologie genetic dotate corespunztor.

6.1. Conceptul de boal genetic


Orice boal determinat predominant de factori genetici poate fi
definit ca boal genetic, cu alte cuvinte orice tulburare a structurii i/sau a
funcionrii normale a organismului datorat unei modificri a informaiei
ereditare.
Caracteristicile bolilor genetice:
- bolile genetice sunt determinate de modificri ale materialului
genetic care duc la sinteza unor proteine sau enzime anormale (efect primar)
care vor afecta structura sau funcia celular (efect secundar) i, n final, vor
perturba funcionarea organelor sau a ntregului organism (efect teriar boal);
- bolile genetice sunt determinate antenatal, pot fi congenitale
(manifeste la natere) sau pot deveni manifeste la diferite vrste postnatal;
_____________________________________________________________

203

_____________________________________________________________
- dac nu afecteaz funcia de reproducere, bolile genetice se pot
transmite la descendeni (pot fi ereditare);
- bolile genetice pot fi boli familiale (pot afecta mai muli membri
dintr-o familie);
- de obicei bolile genetice se agraveaz cu vrsta;
- bolile genetice au frecvene diferite n populaii diferite;
- din punct de vedere al manifestrii clinice, bolile genetice pot fi
asimptomatice (ex. pentozuria), se pot manifesta doar n anumite condiii de
mediu (ex. deficitul de G6PD), pot fi moderate ca severitate (ex. diabetul
insulino-dependent) sau pot fi foarte severe (trisomiile neletale).
Metodele de studiu ale bolilor genetice cuprind: anamneza familial
(care stabilete caracterul ereditar i modul de transmitere al bolii), studiul
gemenilor (pentru determinarea procentului cu care ereditatea particip n
determinismul unei boli), studiul unor caractere normale asociate unor boli
genetice (ex. dermatoglifele, antigenele HLA etc.), metode citogenetice
(studiul cromosomilor, al cromatinei sexuale, metode de citogenetic
molecular), analiza genic (metode de biologie molecular), studii de
nlnuire i asociere genic, studiul efectului primar al genelor, studii
populaionale i experimentale.
Pe baza acestor metode se va aprecia caracterul genetic al bolii. n
general, pentru bolile genetice factorii genetici au o pondere mai mare de
50%; bolile n care factorii genetici reprezint sub 50% se numesc boli cu
predispoziie genetic.
Frecvena bolilor genetice n populaia general este de circa 2-3%.
Clasificarea bolilor genetice. n funcie de cantitatea de material
genetic afectat bolile genetice se clasific n: boli monogenice, boli
poligenice (multifactoriale) i boli cromosomice. n funcie de leziunile
produse, bolile genetice se pot clasifica n: displazii morfologice, displazii
histologice i displazii moleculare.
n cele ce urmeaz vom folosi o clasificare actual care reunete mai
multe criterii: boli monogenice, boli multifactoriale, boli cromosomice,
anomalii congenitale, tulburri de sexualizare.

6.2. Bolile monogenice


_____________________________________________________________

204

_____________________________________________________________
Bolile monogenice pot fi definite ca boli produse de mutaia unei
singure gene. Mutaia va determina un efect primar (o protein anormal),
care va determina un efect secundar la nivel celular sau tisular i apoi un
efect teriar la nivelul unui sau mai multor organe i n final al ntregului
organism.
Acele boli monogenice pentru care s-a identificat efectul primar
(deci pentru care a fost descris proteina anormal) se numesc boli
moleculare. Primele boli moleculare au fost descrise de Garrod n 1902 sub
numele de erori nnscute de metabolism. De asemenea, datorit noilor
tehnici de biologie molecular, pentru multe din aceste boli a fost
identificat i localizat pe cromosom gena mutant.
Bolile moleculare sunt clasificate n funcie de tipul moleculei
afectate:
- Deficite enzimatice (enzimopatii) care afecteaz funcionarea
normal a unor ci metabolice prin: absena produsului final
(pigmentul melanic n albinism), acumularea de precursori
(galactozemia, mucopolozaharidozele), cantitatea crescut a unui
metabolit (sindromul adrenogenital datorat produciei excesive
de androgeni prin absena 21-hidroxilazei) sau devierea unei ci
metabolice (ex. producerea de acid fenilpiruvic n
fenilcetonurie);
- boli prin anomalii ale proteinelor de structur, de exemplu
sindromul Marfan (afectarea fibrilinei), osteogenesis imperfecta
(afectarea colagenului de tip I i II), microsferocitoza ereditar
(afectarea spectrinei);
- boli prin anomalii ale receptorilor, de exemplu testiculul
feminizant (receptor anormal pentru androgeni), rahitismul
rezistent la vitamina D (receptor anormal pentru vitamina D);
- boli prin anomalii ale proteinelor de transport (ex. proteina canal
pentru ionul de clor n fibroza chistic);
- boli prin absena unor proteine de importan vital (de exemplu
imunoglobulinele n agamaglobulinemie, factorul VIII al
coagulrii n hemofilia A, hormonul somatotrop n nanismul
hipofizar etc.).
Astzi se cunosc peste 4500 de boli monogenice. Frecvena lor n
populaia general este de aproximativ 1%, din care 0,9% sunt boli
_____________________________________________________________

205

_____________________________________________________________
determinate de mutaia unei gene autosomale (dominante n 60% din cazuri
sau recesive n 40% din cazuri) i doar 0,1% de mutaia unei gene legate de
X. ntruct majoritatea sunt boli grave, cu o morbiditate i mortalitate (mai
ales infantil) mare, implicnd costuri sociale mari, bolile monogenice
reprezint o problem de sntate public.
Caracteristica principal a bolilor monogenice este transmiterea lor
ereditar n conformitate cu tipurile mendeliene, fapt pentru care au mai fost
numite i boli mendeliene. Aceast caracteristic reprezint un mare avantaj
pentru acordarea sfatului genetic ntruct este posibil calcularea cu
exactitate a riscurilor de recuren a bolii n familie.
Din punct de vedere al mecanismului de producere, circa 75% din
bolile monogenice se datoreaz transmiterii mutaiei n succesiunea
generaiilor, dar trebuie inut cont i de faptul c o parte din aceste mutaii
sunt letale sau purttorii lor nu se mai reproduc. Restul de 25% reprezint
mutaii germinale aprute "de novo".
Studiul bolilor monogenice urmrete diagnosticarea foarte precis a
afeciunii, stabilirea modului ei de transmitere, calcularea riscului de
recuren, depistarea persoanelor cu forme fruste de boal i a
heterozigoilor purttori sntoi de gen mutant recesiv; pentru aceasta
bolile monogenice sunt studiate la nivel fenotipic prin ancheta familial, la
nivelul efectului primar sau secundar prin metode biochimice i histologice
i la nivelul ADN-ului prin analiza genei mutante.
Dezvoltarea dup 1980 a biologiei moleculare a permis detecia i
analiza genelor mutante prin diverse tehnici: analiza polimorfismelor de
lungime a fragmentelor de restricie (RFLPs),analiza conformaional i a
nemperecherii catenelor ADN, hibridarea cu sonde oligonucleotidice cu
specificitate alelic, electroforeza ADN-ului n gel cu gradient denaturant
sau secvenializarea direct a genei. Pentru obinerea unei cantiti suficiente
de ADN se folosete amplificarea sa enzimatic prin reacia n lan a
polimerazei (tehnica PCR - polimerase chain reaction)
Detecia mutaiilor prin tehnicile de biologie molecular se aplic n
special pentru diagnosticul prenatal, pentru depistarea heterozigoilor i
pentru depistarea persoanelor afectate, dar care nc nu manifest boala, n
cazul acelor afeciuni care se manifest doar dup o anumit vrst (ex.
boala Huntington, boala Alzheimer).
_____________________________________________________________

206

_____________________________________________________________

Boli cu transmitere autosomal dominant


Gena mutant este dominant (A), pe cnd gena normal este
recesiv (a). Bolnavii prezint de obicei genotipul heterozigot (Aa),
genotipul homozigot (AA) fiind n multe cazuri letal. Indivizii sntoi sunt
recesivi (aa).
Criteriile de stabilire pe arborele genealogic a transmiterii autosomal
dominante sunt:
- continuitatea n succesiunea generaiilor, adic boala apare n
fiecare generaie - orice bolnav are un printe afectat
transmitere vertical (cu excepia cazurilor de mutaie aprut
"de novo" sau de transmitere neregulat datorit nepenetranei
sau a expresivitii sczute a genei mutante);
- persoanele sntoase nu pot transmite boala (ambii prini
sntoi au numai copii sntoi, cu excepia cazurilor n care un
printe este de fapt purttor inaparent de gen mutant);
- bolnavii pot fi de ambe sexe i transmit boala la copii indiferent
de sex (este posibil transmiterea bolii de la tat la fiu, tatl
bolnav poate avea fiice sntoase, iar doi prini bolnavi heterozigoi pot avea i copii sntoi de ambe sexe);
- riscul de recuren este de 75% pentru doi prini afectai (n
cazul n care genotipul AA nu este letal), 50% dac doar un
printe este afectat i, teoretic, 0% pentru un cuplu sntos.
Dintre aceste boli enumerm: hipercolesterolemia familial (FHC boal relativ frecvent-0,2%, datorat unui defect molecular al receptorului
pentru lipoproteinele cu densitate sczut - LDL, care duce la creterea
colesterolului sangvin),boala Huntington (boal neurologic caracterizat
prin micri coreiforme i demen), neurofibromatoza de tip I (boala von
Recklinhausen - pete cutanate colorate "cafea cu lapte" i tumori
fibromatoase n piele i pe traiectul nervilor), boala Marfan (defect
molecular al unei proteine a matricei extracelulare - fibrilina -manifestat
prin talie nalt, arahnodactilie, coarctaie de aort, subluxaie de cristalin),
microsferocitoza ereditar (boala Minchovski-Chauffard), boala polichistic
renal a adultului (ADPKD), polipoza rectocolic (mici i frecvente tumori
benigne ale colonului i rectului, dar cu potenial mare de malignizare),
acondroplazia (piticism dizarmonic cu membre scurte datorit displaziei
_____________________________________________________________

207

_____________________________________________________________
cartilajelor de cretere), osteogenesis imperfecta (boala oaselor de sticl )
etc.

Boli cu transmitere autosomal recesiv


Gena mutant autosomal este recesiv (a), iar alela sa slbatic,
normal, este dominant (A). Bolnavii vor avea genotipul aa, iar persoanele
sntoase AA - homozigoii i Aa- heterozigoii, numii i purttori
sntoi.
Criteriile de diagnosticare a transmiterii autosomale recesive sunt:
- discontinuitatea n succesiunea generaiilor (boala are transmitere
"orizontal" - doar ntr-o generaie, apoi poate sri peste unadou generaii i reapare n alt generaie);
- n familiile cu persoane afectate se ntlnete frecvent
consangvinitatea;
- doi prini sntoi, dac sunt heterozigoi, pot avea copii
afectai: Aa X Aa AA; 2Aa; aa; deci riscul de recuren este
de 25% de unde i importana depistrii heterozigoilor;
- doi prini bolnavi (caz rar ntlnit n practic) au numai copii
bolnavi (exceptnd cazurile de heterogenitate genetic a bolii
cum ar fi cazul a doi prini cu surditate produs de gene mutante
diferite care au copii sntoi);
- copii afectai sunt i fete i biei;
- tatl sntos poate avea i fiice bolnave, iar mamele bolnave pot
avea i biei sntoi.
Exemple de boli autosomal recesive: fenilcetonuria, beta-talasemia
(prezentate mai sus), fibroza chistic de pancreas (mucoviscidoza - boal
determinat de mutaia genei de pe braul lung al cromosomului 7 care
codific proteina-canalului de transport transmembranar al ionului de clor),
deficitul de alfa-1 antitripsin, deficitul de 21 hidroxilaz, surditatea i multe
alte deficiene enzimatice.

Bolile legate de X (gonosomale) dominante


Reprezint un procent foarte mic din bolile legate de X, de exemplu
rahitismul hipofosfatemic rezistent la vitamina D. Termenul de boal sau de
transmitere legat de X este preferabil celui de gonosomal fiind mai exact,
dei se cunosc foarte puine caractere somatice legate de Y.
_____________________________________________________________

208

_____________________________________________________________
Femeile bolnave au genotipurile XAXA (homozigote, frecvent letale)
i XAXa (heterozigote); brbaii bolnavi au genotipul XAY (mai sever afectai
ca femeile heterozigote, uneori letal). Femeile sntoase au genotipul X aXa,
iar brbaii sntoi XaY.
Criteriile de diagnosticare a transmiterii legate de X dominante:
- - continuitatea n succesiunea generaiilor;
- persoanele sntoase nu pot transmite boala (ambii prini
sntoi au numai copii sntoi, cu excepia cazurilor n care
mama este de fapt purttoare inaparent de gen mutant;
- ambii prinii bolnavi (caz rar) pot avea i copii sntoi, dar
numai de sex masculin (XAXa x XAYXAXA; XAXa, XAY; XaY);
- tatl bolnav va avea toate fetele bolnave, iar mama sntoas are
toi bieii sntoi;
- dac doar un printe este afectat, riscul de recuren este de 50%.

Boli legate de X recesive


Reprezint marea majoritate a celor 500 de boli legate de X. Femeile
sntoase au genotipurile XAXA (homozigote) i XAXa (heterozigote purttoare sntoase), iar femeile bolnave XaXa (caz rar ntlnit n practic,
genotipul fiind de obicei letal). Brbaii sntoi au genotipul XAY, iar cei
bolnavi XaY.
Criteriile de diagnosticare a transmiterii legate de X recesive:
- discontinuitatea n succesiunea generaiilor;
- n familiile cu persoane afectate se ntlnete frecvent
consangvinitatea;
- doi prini sntoi, dac femeia este heterozigot, pot avea copii
afectai, dar numai biei (XAXa x XAYXAXA; XAXa, XAY;
XaY); riscul de recuren este de 25% dac nu se cunoate sexul
genetic al copilului - el este 50% pentru biei i teoretic 0 pentru
fete;
- doi prini bolnavi (caz rar ntlnit n practic) au numai copii
bolnavi;
- gena mutant se transmite de la brbaii bolnavi prin fetele lor
purttoare sntoase la nepoii de sex masculin: "transmitere
oblic";
_____________________________________________________________

209

_____________________________________________________________
- tatl sntos are ntotdeauna fete sntoase, iar mama bolnav
are toi bieii bolnavi.
Datorit rolului lor n transmiterea bolii depistarea femeilor
heterozigote este esenial, fapt uurat de posibilitatea lor de a manifesta n
diferite grade unele semne de boal datorit inactivrii aleatorii a
cromosomului X normal sau a celui purttor de gen mutant n celulele
corpului.
Exemple de boli legate de X recesive: hemofilia A, distrofia
muscular Duchenne, distrofia muscular Becket, daltonismul, deficitul de
G6PD etc.

6.3.Bolile multifactoriale (poligenice)


Termenul de boli multifactoriale este de preferat celui de boli
poligenice ntruct n determinismul acestor boli intervin n proporii diferite
factori multipli, genetici i ecologici (Covic,1981).
Implicarea factorului genetic n aceste boli este cert fiind
demonstrat de caracterul familial al bolii i de incidena crescut la gemenii
monozigoi.
Factorii genetici particip n proporii diferite la producerea bolilor
multifactoriale: 80% pentru astmul bronic i schizofrenie, 70% pentru
diabetul zaharat insulino-dependent, 60% pentru hipertensiunea arterial i
boala coronarian, 50% pentru artrita reumatoid i 40%pentru ulcerul
peptic (vezi i tabelul 14).
Factorii genetici sunt motenii, n proporii diferite, de la ambii
prini. n ceea ce privete mecanismul molecular al producerii bolilor
poligenice exist dou ipoteze:
- ipoteza poligeniei care presupune c boala este determinat de un
numr mare de gene nealele numite gene de risc care au efecte
cantitative, mici, i aditive; activitatea acestor gene este
influenat de factorii de mediu.
_____________________________________________________________

210

_____________________________________________________________
- Ipoteza oligogeniei care presupune c n populaie exist doar
cteva variante alelice cu efecte calitative slabe, a cror prezen
n genotip determin doar predispoziia genetic la boal.
Bolile comune cu predispoziie genetic (diabetul zaharat, ulcerul
duodenal, hipertensiunea arterial, artrita reumatoid, obezitatea) sunt
determinate multifactorial. Unele malformaii congenitale comune (piciorul
strmb congenital, luxaia congenital de old, stenoza piloric,
megacolonul, atrezia esofagian, piciorul equin, spina bifida) sunt, de
asemenea, condiionate multifactorial.
Referitor la bolile condiionate poligenic se tie cu certitudine c:
au caracter familial, dar nu se transmit mendelian; totui aceste
boli nu prezint distribuie continu n populaie, deoarece exist 2 clase
distincte de indivizi (bolnavi i sntoi);
incidena bolii este mai mare pentru rudele pacienilor sever
afectai;
riscul recurenei este mai mare printre rudele apropiate i scade
rapid la rudele ndeprtate. De exemplu, n spina bifida, riscul rudelor de
gradul I, II i III este de 4%, 1% i 0,5%
dac exist mai multe rude apropiate afectate de o boal
poligenic, riscul pentru alte rude este crescut. De exemplu, dac doi frai au
spina bifida, riscul pentru urmtorii frai este de 10%; dac unul din prini
are luxaie congenital de old, riscul de a avea un copil afectat este de 4%,
pentru urmtorul copil riscul fiind tot de 4%, iar dup al doilea copil afectat
riscul pentru alt copil este de 8%.
dac afeciunea este mai frecvent la un anumit sex, atunci rudele
persoanei ce aparine sexului mai puin afectat au un risc al recurenei mai
mare. De exemplu, n stenoza piloric, sex ratio este de 5B: 1F. Bolnavii de
sex masculin au un risc de 5,5% pentru fii i 2,4% pentru fiice, iar bolnavii
de sex feminin au un risc de 19,4% pentru fii i de 7,3% pentru fiice.
Explicaia const n faptul c brbaii sunt mai susceptibili de a face aceast
boal.
bolile poligenice prezint gravitate variabil n cadrul aceleiai
familii;
n bolile multifactoriale riscul recurenei crete paralel cu numrul
rudelor afectate, pe cnd n bolile monogenice riscul rmne constant,
_____________________________________________________________

211

_____________________________________________________________
indiferent de numrul persoanelor afectate. De exemplu, riscul recurenei n
bolile autosomal recesive este de 1 la 4 (25%) pentru fiecare sarcin.
Dei susceptibilitatea pentru o anumit boal nu poate fi msurat,
totui este posibil s se estimeze ce proporie din etiologie se datoreaz
factorilor genetici n raport cu factorii ecologici. Aceasta este
heritabilitatea.
Heritabilitatea poate fi definit i ca proporia de variaie determinat
genetic din totalul variaiilor fenotipice ale unui caracter condiionat
multifactorial, poligenic. Estimarea heritabilitii unei boli este important
pentru stabilirea contribuiei factorilor genetici n producerea bolii (tabelul
14). Cu ct valoarea heritabilitii este mai mare, cu att este mai important
rolul factorilor genetici n determinarea bolii respective.
Cunoaterea valorii heritabilitii este important pentru stabilirea
susceptibilitii sau a predispoziiei genetice la boal i pentru prevenirea
bolilor multifactoriale cu heritabilitate mare.
Tabel. 14. Valorile estimative ale heritabilitii n diferite boli multifactoriale
(dup Coprean, 1998).
Boala
Schizofrenia
Astmul
Cheiloschizis i palatoschizis
Stenoza piloric
Spondilita anchilozant
Piciorul ecvin
Boala coronarian
Hipertensiunea esenial
Luxaia congenital de old
Anencefalia i spina bifida
Ulcer pectic
Boala congenital cardiac

Frecvena %
1
4
0,1
0,3
0,2
0,1
3
5
0,1
0,5
4
0,5

Heritabilitatea
85
80
76
75
70
68
65
62
60
60
37
35

Discordana dintre natura poligenic i distribuia discontinu este


numai aparent. Factorii genetici sunt reprezentai prin mai multe gene de
risc, cu efecte minore i aditive; numrul lor variaz de la o persoan la alta,
determinnd o susceptibilitate diferit la boal.
Determinismul multifactorial presupune, deci, o component
ereditar poligenic (mai multe gene de risc) i o component de mediu.
Componenta ereditar are o pondere diferit de la o boal la alta (vezi
_____________________________________________________________

212

_____________________________________________________________
tabelul de mai sus). Boala apare atunci cnd o persoan cu un numr
important de gene de risc triete n condiii defavorabile de mediu, care
transform predispoziia genetic n boal.
Atingerea i depirea pragului de risc depinde de numrul de gene
mutante pe care o persoan le motenete de la prini. Acest lucru explic
urmtoarele consecine, deosebit de importante n practica sfatului genetic
(Covic, 1981):
riscul pentru o boal poligenic difer de la o familie la alta;
prinii bolnavului pot fi sntoi;
un individ afectat are un risc mai mare (2-5%) de a avea descendeni
bolnavi, n comparaie cu indivizii din populaia general;
dac doi prini sntoi, fr antecedente familiale, au un copil
afectat, riscul de recuren la sarcinile urmtoare este de 2 - 5%;
riscul de mbolnvire la descendeni crete (peste 5%) dac:
exist mai multe persoane afectate printre rudele de gradul I sau II;
bolnavul prezint o form mai grav de boal sau aparine unui sex
care, de regul, este mai puin afectat de boli cu preponderen la
unul din sexe;
au loc cstorii ntre persoane nrudite;
cu ct afeciunea este mai rar n populaie, cu att boala este mai
frecvent printre rude;
riscul de recuren este valabil pentru un defect similar sau
asemntor, ce intereseaz acelai organ sau esut.
De exemplu, n despicturile labiale, riscul unui bolnav de a avea un
copil afectat este de 3-4%; dup naterea unui copil bolnav, riscul pentru
urmtorul copil este de 10%, iar dup 2 copii afectai, riscul este de 12%.
Un bolnav cu despictur labial unilateral are un risc de a avea un copil
afectat de 2,5%; pentru despictura labial bilateral, riscul este de 4%, iar
pentru despictura labial combinat cu despictura palatin, riscul este de
6%.

6.4. Bolile cromosomice


Bolile cromosomice sunt boli genetice produse prin anomalii de
numr i de structur a cromosomilor umani. Sunt boli relativ frecvente
afectnd n jur de 1% din nou-nscui, dar aceasta reprezint doar "vrful
_____________________________________________________________

213

_____________________________________________________________
icebergului" deoarece 8% din produii de concepie umani prezint o
anomalie cromosomic. Att datorit frecvenei lor relativ mari, ct mai ales
datorit consecinelor lor severe, bolile cromosomice pot fi considerate o
problem de sntate public.
n majoritatea cazurilor, bolile cromosomice nu sunt ereditare
deoarece altereaz funcia reproductiv sau afecteaz sever supravieuirea.
Anomaliile cromosomice reprezint cea mai important cauz de
deces prenatal, 99,4% din zigoii cu anomalii cromosomice fiind avortai.
Din cei 0,6% produi de concepie care supravieuiesc dup natere 35%
prezint aneuploidii gonosomale, 25% prezint trisomii autosomale (n
principal trisomia 21) i aproximativ 40% au anomalii cromosomice de
structur. De asemenea 5% din nou nscuii mori i acelai procent din
decesele neonatale se datoreaz anomaliilor cromosomice.
Clasificarea anomaliilor cromosomice i mecanismele lor de
producere au fost prezentate n capitolul V.
Etiologia bolilor cromosomice
Etiologia bolilor prin anomalii de numr ale cromosomilor umani
este explicat prin trei factori etiologici principali:
- vrsta matern avansat: riscul de nedisjuncie crete exponenial
cu vrsta matern (dup 35 de ani riscul este de circa 6 ori mai
mare, iar dup 40 de ani de 16-20 de ori mai mare ca nainte de
30 de ani);
- prezena unor anomalii cromosomice echilibrate (ex. translocaie
echilibrat prin fuziune centric) la un printe;
- aciunea unor factori mutageni (fizici, chimici sau biologici).
Deoarece riscul de nedisjuncie crete i la femeile la care s-a
extirpat chirurgical un ovar se presupune c s-ar datora statusului hormonal
caracteristic femeilor dup 35 de ani n care predomin creterea exagerat a
hormonului foliculostimulant hipofizar (Freeman et al, 2000); ali autori
aduc ipoteza existenei unor gene de nedisjuncie care ar deveni active cu
naintarea n vrst, iar ali autori chiar neag creterea riscului de
nedisjuncie cu vrsta.
n statele dezvoltate orice sarcin aprut dup vrsta de 38 de ani
este considerat sarcin cu risc de sindrom Down la care se indic
obligatoriu diagnosticul prenatal cu analiza cromosomilor fetali.
_____________________________________________________________

214

_____________________________________________________________
Etiologia anomaliilor cromosomice de structur se explic prin
prezena situsurilor fragile pe cromosomi i prin aciunea factorilor
mutageni.
Consecinele anomaliilor cromosomice umane
Anomaliile cromosomice neechilibrate au ntotdeauna consecine
fenotipice n concordan cu mrimea i cu activitatea genetic (cantitatea
de eucromatin) a cromosomului implicat.
Dac cromosomul implicat este un autosom, att aneuploidiile, ct i
anomaliile de structur vor duce la:
- avorturi spontane precoce (n primele dou luni de sarcin) i
recurente. Se consider c aproximativ 50-60% din embrionii
umani avortai precoce prezint anomalii cromosomice din care:
52% sunt trisomii autosomale, 18% prezint monosomie X, 17%
triploidii, 6% tetraploidii i 7% alte anomalii cromosomice.
- Nou nscui mori (s-a demonstrat c 5 pn la 20% din toi nou
nscuii mori prezint anomalii cromosomice);
- Sindroame plurimalformative la nou nscuii care supravieuiesc
perioadei
neonatale.
Caracteristicile
comune
tuturor
sindroamelor
plurimalformative
cauzate
de
anomalii
cromosomice autosomale sunt: prematuritatea, greutatea i talia
la natere sunt mai mici dect ale prematurilor fr anomalii
cromosomice, dezvoltarea psihomotorie postnatal este
ntrziat, fenotipic prezint numeroase malformaii, prezint
ntrziere mintal n diverse grade, creterea postnatal este
ntrziat i prezint un "sindrom" dermatoglific caracteristic.
n cazul n care cromosomul implicat este un gonosom sindromul
plurimalformativ este mai puin sever sau chiar inaparent, apare disgenezia
gonadic care duce la sterilitate i tulburri de sexualizare, ntrzierea
mintal este mai uoar sau chiar lipsete, n schimb pot apare tulburri de
comportament.
Sterilitatea i tulburrile de sexualizare pot fi ntlnite i n unele
anomalii neechilibrate autosomale, de exemplu brbaii cu sindrom Down
sunt sterili, trisomiile 18, 13, i sindromul 4p- pot cauza intersexualitate a
organelor genitale externe.
Anomaliile cromosomice echilibrate sunt caracterizate printr-un
fenotip normal, dar procesul de gametogenez este afectat; producerea de
_____________________________________________________________

215

_____________________________________________________________
gamei aneuploizi va duce la sterilitate, avorturi spontane i, dup procreere,
la apariia de descendeni cu anomalii cromosomice neechilibrate.
Anomaliile cromosomice ctigate postnatal pot s nu se manifeste
fenotipic sau, sub influena diferitor condiii de mediu, pot duce la apariia
de clone de celule anormale care vor duce la dezvoltarea unor cancere.
Diagnosticul bolilor cromosomice se bazeaz pe diagnosticul clinic
i paraclinic, ancheta familial, dar mai ales pe diagnosticul citogenetic
(pentru identificarea ct mai precis a anomaliei se recomand folosirea
unor tehnici adecvate de analiz a cromosomilor, ct mai performante
posibil, cel puin a marcajului n benzi).
n concluzie, studiul cromosomilor umani se indic n urmtoarele
circumstane (Covic,1981):
- nou nscuii vii cu sindroame plurimalformative;
- debilitile mintale de cauz neprecizat;
- tulburrile de comportament de cauz neprecizat;
- tulburrile de sexualizare i de reproducere (sterilitate, avorturi
spontane, nou nscui mori);
- unele cancere, n special leucemiile acute;
- evaluarea efectului mutagen n urma expunerii la diveri
mutageni (n special radiaii ionizante);
- diagnosticul prenatal n cazul sarcinilor cu risc pentru boli
cromosomice;
- diagnosticul prenatal al sexului genetic n cazul bolilor legate de
X (ex. hemofilia la care doar feii masculi pot fi afectai).
Studiul cromosomilor umani este inutil pentru diagnosticarea bolilor
monogenice i poligenice.
Tratamentul bolilor cromosomice va fi tratat n subcapitolul 6.7.
n cele ce urmeaz vom descrie cele mai importante caracteristici ale
principalelor sindroame produse prin anomalii cromosomice de numr.
Trisomia 21 (Sindromul Langdon Down)
Descris de Down ca "idioie mongoloid" n 1866, sindromul este
din punct de vedere citogenetic, n 92-95% din cazuri, o trisomie liber
omogen (cariotip 47, XX, +21 sau 47, XY, +21), n 5% din cazuri sunt
_____________________________________________________________

216

_____________________________________________________________
translocaii ntre cromosomii grupelor G-D sau G-G, iar n 3% din cazuri
sunt mozaicuri (ex. 47,XX,+21/46,XX).
Incidena este de 1 la 650 de nou nscui vii (1,5%o) cu o uoar
predominan la sexul masculin (sex ratio 3/2).
Principalele criterii de diagnostic la nou nscut sunt:
- greutatea, talia, i perimetrul cranian sub media vrstei;
- hipotonie muscular, hipolaxitate ligamentar, hiporeflexie
piele plicaturat
-dismorfie cranio-facial (fig. 68) - brahicefalie, occiput plat, facies
cu profil plat, fante palpebrale oblice (mongoloide - nclinate n sus i n
afar), hipertelorism, epicantus, gur mic cu limb mare, protruzionat,
urechi mici, jos implantate, fr lobul;
- minile sunt late, cu degete scurte, cu clinodactilia degetului V;
- spaiul I interdigital de la picior este larg
- malformaii viscerale multiple: cardiace (defect septal atrial, defect
septal ventricular, tetralogie Fallot etc.), digestive (stenoz piloric,
imperforaie anal), renale etc.
- sindrom dermatoglific specific (pliu palmar unic transvers
numit i pliu simian, triradius axial ascensionat, bucle cubitale pe toate
degetele, indice de transversalitate crescut, un singur pliu de flexie pe
degetul V)
- ntrziere n dezvoltarea psihomotorie.

Fig. 68. Copil cu sindrom Down: dismorfia craniofacial i aspectul minii


(dup Smiths Recognizable Patterns of Human Malformation, K. Lions Jones, 1988)

_____________________________________________________________

217

_____________________________________________________________
La copilul mai mare se ntlnesc aceleai semne, la care se adaug
retardul mintal moderat (copilul totui progreseaz atingnd la vrsta adult
performanele unui copil de 7-8 ani). Sunt copii iubitori, crora le place
muzica ritmat i care pot fi integrai n familie i, cu ngrijiri speciale, chiar
n societate. La vrsta adult brbaii sunt sterili, dar femeile pot fi fertile.
Prognosticul vital este rezervat, 25-30% mor n primul an de via
n special datorit malformaiilor cardiace i a infeciilor respiratorii,
50% mor n primii 5 ani de via, iar 2-6% pot supravieui peste vrsta
de 50 de ani. La pacienii cu sindrom Down s-a observat o frecven a
leucemiilor peste media din populaia general.

Trisomia 18 (sindromul Edwards)


Descris n 1960 de Edwards et al., trisomia este mai puin frecvent
(0,03% de nou nscui), iar sex ratio este de 3F:1B. Din punct de vedere
citogenetic n majoritatea cazurilor este o trisomie liber omogen (cariotip
47, XX, +18 sau 47, XY, +18), n mai puine cazuri apare prin translocaii
ntre cromosomii grupelor G-E sau E-D sau ca mozaicuri (ex. 47,XX,
+18/46,XX).
Nou nscuii cu trisomie 18 au capacitate sczut de
supravieuire, majoritatea murind n primele dou luni de via, doar
10% supravieuiesc primului an de via. Dintre caracteristici
enumerm prematuritatea, creterea prenatal ntrziat, hipertonie,
dismorfia cranio-facial, cu occiput proeminent, micrognaie, ureche
jos implantat i cu ax nclinat, aspect de cap de pasre, mn
ncletat, multiple malformaii scheletice i viscerale, sindrom
dermatoglific specific (exces de arcuri), ntrziere foarte sever a
dezvoltrii psihomotorii.
Trisomia 13 (sindromul Patau)
Sindromul a fost descris pentru prima oar de Bartholin n 1657,
iar etiologia sa trisomic a fost descoperit de Patau et al n 1960.
Incidena acestui sindrom este de 1 la 5000 de nou nscui. Din
punct de vedere citogenetic n majoritatea cazurilor este o trisomie liber
omogen (cariotip 47, XX, +13 sau 47, XY, +13), n mai puine cazuri apare
_____________________________________________________________

218

_____________________________________________________________
prin translocaii ntre cromosomii grupelor D G sau D-E, sau sunt
mozaicuri (ex. 47,XX,+13/46,XX).
Nou nscuii cu trisomie 13 sunt foarte sever afectai i aproape
jumtate nu supravieuiesc primei luni de via; doar 18% ating vrsta de un
an.
Dintre caracteristici enumerm: prematuritatea, creterea prenatal
ntrziat, dismorfia cranio-facial cu microcefalie moderat, frunte teit,
microftalmie, despictur labio-maxilo-palatin, malformaii auriculare,
holoprosencefalie, malformaii ale membrelor, hexodactilie, malformaii
cardiace i viscerale, intersexualitate, ntrziere sever a dezvoltrii
psihomotorii.

_____________________________________________________________

219

_____________________________________________________________

Fig.69. Nou nscut cu sindromul Edwards (dup Smiths Recognizable


Patterns of Human Malformation, K. Lions Jones, 1988)

_____________________________________________________________

220

_____________________________________________________________

Fig.70. Nou nscut cu sindrom Patau (dup Smiths Recognizable Patterns


of Human Malformation, K. Lions Jones, 1988)
Monosomia X (sindromul Turner)
_____________________________________________________________

221

_____________________________________________________________
Monosomia X este singura monosomie uman viabil; descris de
Turner n 1938, incidena sa este de aproximativ 1% de nou nscui vii.
Din punct de vedere citogenetic n 55% din cazuri se ntlnete trisomia
liber omogen (cariotip 45,X), n 10% din cazuri se ntlnesc
mozaicuri (45,X/46,XX), iar n restul cazurilor se descriu trisomii
pariale prin deleii ale braului lung, ale braului scurt, cromosomi
inelari sau isocromosomi. ntruct prezint un singur cromosom X
testul cromatinei sexuale este negativ.
La un nou nscut de sex feminin, cu talie mic, limfedem al
extremitilor, gt scurt cu un repliu tegumentar al cefei numit pterigium
coli, torace lat cu mameloane ndeprtate se poate suspiciona un sindrom
Turner; n acest caz se indic efectuarea testului cromatinei sexuale,
confirmat apoi de cariotip.
La copil i apoi la adolescent se menine hipostatura, apare o discret
dismorfie cranio-facial cu aspectul mbtrnit al feei, inseria joas a
prului pe ceaf, aspect android al corpului (distana biacromial mai mare
ca distana bitrohanterian).
La nivelul membrelor prezint cubitus valgum, scurtarea
metacarpienelor IV i V, genu recurvatum; de asemenea, mai prezint
multipli nevi cutanai pigmentari i un sindrom dermatoglific specific
(pliu palmar transvers, vrtejuri frecvente, triradius axial ascensionat,
suma crestelor digitale crescut peste medie).
De la adolescen apar manifestrile disgeneziei gonadice:
impuberism (organe genitale externe infantile dezvoltarea redus a
caracterelor sexuale secundare), amenoree primar, deci sterilitate. Ovarele
sunt hipoplazice, fibrozate, uterul este infantil. Datorit disgeneziei
gonadice, nivelele sangvine de estrogeni i progesteron sunt foarte sczute
(rmn la nivele prepubertare), iar FSH i LH cresc foarte mult. Testul cu
LHRH este negativ.
Diagnosticarea precoce este deosebit de important pentru aplicarea
ct mai precoce a tratamentului hormonal substitutiv: hormoni de cretere i
mici cantiti de hormoni sexuali (proporional cu naintarea n vrst) la
copil i terapie de substituie cu hormoni sexuali de la pubertate pentru
obinerea de cicluri artificiale i pentru dezvoltarea i meninerea
caracterelor sexuale secundare.
Deoarece dezvoltarea psihic este aproximativ normal ncadrarea n
societate a persoanelor cu sindrom Turner este foarte bun. Dac nu prezint
_____________________________________________________________

222

_____________________________________________________________
malformaii viscerale asociate, durata supravieuirii nu este afectat de
aceast monosomie.
Sindromul XXY (sindromul Klinefelter)
Sindromul, descris iniial de Klinefelter et al. n 1942, este cea mai
frecvent cauz de hipogonadism i sterilitate la brbai (frecven 1 la 1000
de nou nscui vii, deci 1 la 500 de nou nscui de sex masculin).
Din punct de vedere citogenetic n 80% din cazuri cariotipul este
47,XXY; n restul cazurilor s-au descris mozaicisme 47,XXY/46,XY sau
cariotipuri de forma 48,XXXY i 49,XXXXY.
Att testul cromatinei sexuale X, ct i cel al cromatinei sexuale Y
sunt pozitive.
La copil sindromul este greu de depistat fiind caracterizat doar
printr-un aspect longilin, tulburri de comportament i dermatoglife
specifice (predominana arcurilor, suma crestelor digitale sczut sub
medie); n toate suspiciunile de sindrom Klinefelter bazate pe
elementele enumerate se indic testul cromatinei sexuale, confirmat
apoi de cariotip, pentru a putea ncepe un tratament hormonal de
substituie precoce.
Postpubertar se pstreaz aspectul longilin, talia nalt (mai ales pe
seama creterii distanei pubis-sol) i apare aspectul ginoid (eunucoid) distana bitrohanterian mai mare dect cea biacromial. Disgenezia
testicular (orhitic) duce la azoospermie cu sterilitate primar, secreie de
testosteron sczut la nivele prepubertare, slaba dezvoltare a caracterelor
sexuale secundare, ginecomastie i disociaie peno-scrotal (penis de
dimensiuni normale, testicule mici, fibrozate, insensibile.
Dezvoltarea intelectual i supravieuirea sunt normale, n schimb
prezint o tendin spre dezvoltarea tulburrilor de comportament.

_____________________________________________________________

223

_____________________________________________________________

Fig. 71. Fetie de diferite vrste cu sindrom Turner Patau (dup Smiths
Recognizable Patterns of Human Malformation, K. Lions Jones, 1988)

_____________________________________________________________

224

_____________________________________________________________

Fig. 72. Sindromul Klinefelter la diverse vrste (dup Smiths Recognizable


Patterns of Human Malformation, K. Lions Jones, 1988)

6.5. Abateri de la procesul normal


de sexualizare uman. Strile intersexuale.
Procesul normal de sexualizare poate fi definit ca ansamblul de
caractere morfologice, funcionale, psihice i comportamentale care fac
organismul capabil de a produce gamei, de a contribui la fecundarea lor i
la naterea unui copil. n anul 1985, Polani (cf. Mange & Mange, 1990)
sugereaz existena a peste 48 de gene "sexuale", din care 20 gene legate de
X, dou (TDF i H-Y) localizate pe Y i restul autosomale.
_____________________________________________________________

225

_____________________________________________________________
Clasificarea deficienelor de dezvoltare sexual este diferit n
funcie de autor. O clasificare general acceptat este urmtoarea:
1. Mutaii heterosomale (ale cromosomilor sexuali)
a. Mutaii numerice cromosomiale (1, 3 sau mai mult de 3
cromosomi sexuali);
b. Mutaii structurale cromosomiale (rearanjamente
cromosomiale), ce duc la apariia de brbai XX i femei XY.
2. Hermafroditismul adevrat.
3. Pseudohermafroditismul
a. Pseudohermafroditismul masculin.
b. Pseudohermafroditismul feminin.
Mutaiile numerice i structurale heterosomale au fost studiate
anterior.
Hermafroditismul adevrat
Hermafroditismul adevrat este o anomalie a diferenierii sexuale
caracterizat prin bisexualitate gonadic (prezena esutului ovarian i a
esutului testicular). Organele genitale externe sunt ambigue; de regul dou
treimi sunt masculine, indiferent de sexul cromosomial. n majoritatea
cazurilor, hermafrodiii sunt sterili, uneori producnd ovule i foarte rar,
spermatozoizi.
Majoritatea hermafrodiilor adevrai sunt 46, XX, dar se cunosc i
cazuri de mozaicisme 46, XX / 46, XY, precum i cariotipuri 46, XY. Modul
n care esutul testicular permite dezvoltarea unui individ XX nu este nc
elucidat, dar sunt cteva posibiliti (Mange & Mange, 1990):
1. n timpul dezvoltrii embrionare, unele celule XY dispar.
La un caz de mozaicism 46, XX / 46, XY, analiza detaliat a grupei
sangvine a demonstrat c individul s-a format datorit unei duble
fecundri (dou ovule au fost fecundate de doi spermatozoizi,
genetic diferii).
2. Poriuni din cromosomul Y au fost translocate pe
cromosomul X sau pe un autosom. De exemplu, la brbaii XX, ca
urmare a unui crossing-over inegal ntre Xp i Yp n timpul meiozei
paterne, braul scurt al cromosomului X va conine factorul TDF
(factorul diferenierii testiculare).
_____________________________________________________________

226

_____________________________________________________________
3. Cazuri foarte rare par a fi maladiile autosomale dominante
sau cele autosomale recesive (ca urmare a mutaiilor genice).
"Factorul determinant masculin" dominant determin transformarea
gonadei iniiale a unui pacient cu sex genetic feminin (46, XX) n
testicul.
A fost semnalat un caz de mozaicism al heterosomilor (Miller, 1964,
cf. Stine, 1989), cu testul de cromatin X pozitiv i organe genitale ambigue.
Acest hermafrodit prezenta complementul cromosomial XX, XXY i
XXYYY n leucocite, celule XX i XXY n testicule i celule XX n piele.
Formarea unui astfel de mozaicism individual este dificil de explicat.
n anul 1982, Simpson (cf. Mange & Mange, 1990) a semnalat cazul
unui pacient cu hermafroditism adevrat (genetic 46, XX) ce a dat natere
unui copil.
Dup topografia bisexualitii gonadice, hermafroditismul adevrat
se clasific (Tudose, 1993):

Hermafroditism alternant (lateral)


Hermafroditismul alternant se caracterizeaz prin prezena unui ovar
pe o parte i un testicul pe partea opus; conductele genitale sunt feminine
pe partea ovarului i masculine pe partea testiculului. Organele genitale
externe sunt, frecvent, de tip masculin.
Hermafroditism bilateral
Hermafroditismul bilateral se caracterizeaz prin prezena unui
ovotestis plasat n poziie pelvian simetric, cu canale vectoare masculine
i feminine. Organele sexuale externe, n general sunt de tip masculin.
Frecvena acestui tip de hermafroditism este de 20% dintre hermafrodii.
Hermafroditism unilateral cu ovar
Hermafroditismul unilateral cu ovar se caracterizeaz prin prezena
unui singur ovar, iar n 20% din cazuri prezint un ovotestis pe o parte i un
ovar pe partea opus. Conductele genitale sunt de tip feminin, iar organele
genitale externe, n majoritatea cazurilor, sunt de tip feminin.
Hermafroditism unilateral cu testicul
_____________________________________________________________

227

_____________________________________________________________
Hermafroditismul unilateral cu testicul se caracterizeaz prin
prezena unui singur testicul, iar n 20%din cazuri prezint un ovotestis pe o
parte i un testicul pe partea opus. Conductele genitale sunt feminine pe
partea ovotestisului i masculine pe partea testiculului; organele genitale
externe sunt aproape masculine.
Cauzele hermafroditismului adevrat
Principalele cauze ale apariiei hermafroditismului adevrat (Tudose,
1993) sunt:
- variaiile numerice ale cromosomilor sexuali (gonosomopatiile)
- restructurrile cromosomiale (cromosomopatiile).
Frecvent, mozaicismele duc la apariia hermafroditismului adevrat.
Se disting tipurile:
1. 46, XY / 45, X0, indivizi ce prezint dou populaii celulare
simetrice, provenite prin pierderea unui cromosom Y, ncepnd cu primele
mitoze ale segmentrii zigotului. Cele dou blastomere, una cu XY i
cealalt cu X0, rmn asociate i dau natere la un hermafrodit lateral
(alternant).
2. 46, XX / 46, XY, indivizi ce rezult dintr-o dubl fecundare a unui
ovul cu dou nuclee (la care al doilea globul polar nu a fost expulzat n
meioz), cele dou nuclee fiind fecundate de spermatozoizi genetic diferii
(unul cu un cromosom X, iar cellalt cu un cromosom Y). Se formeaz un
hermafroditism lateral (alternant).
3. 46, XX / 47, XXY sau 46, XX / 47, XXY / 48, XXYY, ce conduce
la bisexualitate de tipul hermafroditismului gonadic cu malformaii
turneriene i klinefelteriene.
Pseudohermafroditismul (hermafroditismul fals)
Spre deosebire de hermafroditismul adevrat (esut gonadic mixt),
pseudohermafroditismul se caracterizeaz prin difereniere gonadic
normal, ns diferenierea conductelor genitale i a organelor genitale
externe nu este n acord cu sexul gonadic sau este ambigu.
Se pot diferenia dou clase de pseudohermafrodii: masculini i
feminini, n conformitate cu sexul genetic i gonadal(tabel 15).
Tabel. 15. Tipuri de pseudohermafroditism

_____________________________________________________________

228

_____________________________________________________________
Tipul
Masculin
Feminin

Sex genetic
Masculin
feminin

Gonada
Testicule
Ovare

Organele genitale externe


De tip feminin sau ambiguu
De tip masculin sau ambiguu

Disgenezia gonadic
Digenezia gonadic se refer la indivizii 46, XX sau 46, XY, ce
prezint o dezvoltare deficitar a gonadelor. Indivizii cu ambele tipuri
cromosomiale prezint organe sexuale genitale externe de tip femeiesc.
deoarece gonadele lor sunt incapabile de a produce hormoni, indivizii
respectivi nu vor ajunge la pubertate. n cazul unui subiect cu cariotipul 46,
XY, disgenezia gonadic va fi parial i gradul de masculinizare va depinde
de procentul de esut testicular. Subiecii de sex feminin 46, XY au motenit
o gen legat de X, iar cei 46, XX o gen autosomal recesiv, ce a
determinat disgenezia gonadic (Mange & Mange, 1990).
n anul 1972, De la Chapelle (cf. Mange & Mange, 1990) a descris
40 de cazuri de "sex invers", adic indivizi 46, XX cu testicule i organe
genitale externe masculine, dar caractere sexuale secundare masculine i
feminine. Aceste cazuri sunt rezultatul pierderii unui cromosom Y din
cariotipul iniial 47, XXY sau a translocaiei genei TDF de pe cromosomul
Y pe un cromosom X sau pe un autosom.
Cauza absenei unuia sau ambelor testicule la indivizii masculi 46,
XY este, de asemenea incomplet clarificat. Aceste testicule trebuie s fi
existat n stadii timpurii de dezvoltare; deoarece astfel de cazuri au fost
ntlnite la mai muli membri ai unei familii, se pare c exist o component
genetic.
Sindromul testiculului feminizant (sindromul Morris)
La ft, hormonii androgeni produi de testicule permit dezvoltarea
canalelor Wolffiene, dar n cazul deficienei receptorilor esutului asupra
cruia acioneaz, conduc la erori de dezvoltare.
Subiecii cu sindromul testiculului feminizant sunt 46, XY (sex
genetic masculin), la care cantitatea de androgeni induce dezvoltarea unui
fenotip femel (sex civil femeiesc), deci este o form de
pseudohermafroditism masculin. Ei prezint testicule funcionale (care
trebuiesc extirpate chirurgical datorit posibilitilor de degenerare
malign), dar se dezvolt canalele Mlleriene i organele genitale externe
_____________________________________________________________

229

_____________________________________________________________
feminine cu vagin n fund de sac. Deci, la aceti indivizi, sexul genetic este
masculin, iar sexul civil este feminin. Deoarece aspectul exterior este perfect
feminin sindromul a mai fost denumit i "femeia manechin"
Acest sindrom se ntlnete cu frecvene de 1 la 65 000 de indivizi
cu sex genetic masculin i este produs de o gen legat de X recesiv (gena
receptorilor hormonilor androgeni), localizat n apropierea centromerului,
pe braul lung al cromosomului X.
Un sindrom asemntor este cel al sensibilitii androgene
incomplete, determinat de o gen legat X recesiv (Mange & Mange,
1990).
Indivizii 46, XY prezint testicule necoborte i nivel normal de
testosteron. esutul gonadic manifest un rspuns parial la androgeni,
inducnd o mare variabilitate fenotipic; se pot dezvolta i canale Wolffiene
i Mlleriene, organele genitale externe fiind n totalitate feminine sau
parial masculine (clitoris mare i pliuri labioscrotale parial fuzionate).
Fenotipul este mai mult feminin, toi subiecii fiind sterili.
Hiperplazia congenital a glandelor suprarenale
Unele cazuri de pseudohermafrodii feminini sau masculini prezint
deficiene de biosintez a testosteronului n testicule sau a
androstendionului, n glandele suprarenale, sau a ambilor hormoni. La aceti
subieci, glandele suprarenale se dezvolt excesiv.
O mutaie recesiv autosomal afecteaz diferite enzime ce intervin
n calea biochimic de formare a hormonilor (Mange & Mange, 1990).
Pseudohermafroditismul masculin
Atunci cnd la un fetus 46, XY este blocat calea a, nu se va mai
produce testosteron i se va forma un pseudohermafrodit de tip masculin
(gonada de tip masculin i organele genitale externe cu grade variate de
intersexualitate). Acest copil va suferi pierderi severe de sare i ap, datorate
absenei cortizolului i aldosteronului, ceea ce va determina moartea n
cteva sptmni.
colesterol

a. Produi intermediari
steroidici

b. androstenodion
sau testosteron
c. cortizol
d. aldosteron

_____________________________________________________________

230

_____________________________________________________________
Dac blocajul intervine n etapele ulterioare, de exemplu la nivelul
cii b, se va produce totui o cantitate mic de testosteron. Indivizii
respectivi vor prezenta organe genitale parial masculine i vor suferi de
hipertensiune arterial, cauzat de pierderea de ap i de acumularea de sare.
n cazul blocrii cii c sau d la un fetus 46, XY, unii produi
intermediari se vor transforma suplimentar n testosteron, formndu-se
testosteron n exces. Copilul apare normal la natere, dar va prezenta o
pubertate precoce.
Pseudohermafroditismul feminin
Pseudohermafroditismul feminin este ntlnit prin blocarea cii c sau
d, sau a ambelor ci, la un fetus 46, XX. n perioada intrauterin se va forma
testosteron n exces, astfel nct organele genitale externe vor fi de tip
masculin, dar organele genitale interne sunt de tip feminin. Excesul de sare
i pierderea de ap pot crea probleme serioase, ducnd uneori la decesul
timpuriu.
Cazul clasic de pseudohermafroditism feminin a fost descris n anul
1865 de ctre Luigi de Crecchio (Mange & Mange, 1990).
Deficiena de 21-hidroxilaz (enzim cunoscut i ca P450c21, ce
catalizeaz transformarea progesteronului n doxicorticosteron) este cazul
comun de hiperplazie congenital corticosuprarenal. Aceste forme apar att
la indivizi cu cariotip 46, XX, ct i la cei 46, XY, cu frecvene de 1 la 500010000 la populaiile caucaziene i reprezint 90-95% din toate cazurile de
hiperplazie congenital suprarenal. La eschimoii din Alaska, frecvena
este de 1 la 700 (Mange & Mange, 1990). Gena CA21H este localizat pe
cromosomul 6, foarte aproape de complexul HLA ce produce substane de
suprafa celular importante n transplanturi. Subiecii afectai prezint o
alel mutant, n stare homozigot sau pot fi heterozigoi pentru diferite
alele mutante. La alelele mutante ale genei CA21H s-au identificat deleii
sau mutaii punctiforme (Mange & Mange, 1990).
Hiperplazia congenital corticosuprarenal apare i datorit
deficienei n alte enzime necesare sintezei cortizolului, cum ar fi: 11hidroxilaza (P450c11), 17-hidroxilaza (P450c17), 3- hidroxisteroid
dehidrogenaza i colesterol desmolaza (P450scc). Toate aceste deficiene
_____________________________________________________________

231

_____________________________________________________________
sunt rare, cu excepia deficienei n 11-hidroxilaza, ce apare cu o frecven
de 1 la 100 000 n populaiile caucaziene, reprezentnd aproximativ 5-8%
din cazurile de hiperplazie congenital corticosuprarenal. Gena pentru
sinteza de enzim este localizat pe braul scurt al cromosomului 8. Aceast
deficien prezint forme de manifestare heterogene, dar n forma clasic,
indivizii prezint organe genitale ambigue i hipertensiune arterial.
n anul 1950 s-a constatat c administrarea de corticosteron inhib
aciunea
testosteronului,
fiind
eficient
n
tratamentul
pseudohermafroditismului masculin i feminin. Dac sindromul hiperplaziei
congenitale suprarenal este diagnosticat la vrste timpurii, tratamentul va
preveni masculinizarea. Atunci cnd organele genitale sunt corectate
chirurgical i se administreaz, la pubertate, hormoni feminini, subiecii cu
sex genetic feminin se vor dezvolta normal, devenind femei fertile.
Pseudohermafroditismul feminin apare i ca urmare a tratamentului
suferit de mam n timpul sarcinii, cu anumii hormoni (de ex. progesteron
natural, care are i slabe aciuni androgenice). Uneori organismul matern
produce un exces de androgeni, ca urmare a existenei unei tumori
suprarenaliene sau ovariene. n funcie de stadiul de dezvoltare al
embrionului i de cantitatea de hormoni la care a fost expus acesta,
masculinizarea poate varia de la subdezvoltare pn la dezvoltarea
exagerat. Dup natere, nivelul hormonal devine normal i nu va mai fi
necesar terapia cu cortizon. Prin intervenie chirurgical, copilul se va
putea dezvolta ntr-o femeie normal.
n faa unei stri intersexuale observate la natere necesare naintea
afirmrii diagnosticului examinarea clinic complet cu stabilirea gradului
de intersexualitate (clasificarea Prader: de la tipul I - simpl hipertrofie
clitoridian cu orificii uretrale i vaginale distincte i labii mari normale,
pn la tipul V - cu penis i prepu complet, orificiu uretral i vaginal unic i
scrot plat fr gonade), explorri paraclinice (radiografic, ecografic,
uretroscopie, dozri hormonale) i diagnosticarea sexului genetic prin testul
cromatinei sexuale, confirmat obligatoriu de cariotip.
Abia dup evaluarea tuturor datelor se stabilete sexul civil pentru
nou nscut sau se evalueaz care va fi sexul funcional pentru copilul mai
mare. Se elaboreaz un plan terapeutic de comun acord cu prinii care
include corecia chirurgical ntre vrsta de 1-4 ani , urmrirea pn la
pubertate i apoi tratamentul hormonal adecvat.
_____________________________________________________________

232

_____________________________________________________________
Variaii ale identitii sexuale
Unele dificulti n gsirea identitii sexuale sunt nc greu de
neles. Procesul prin care un individ se identific a fi femeie sau brbat este
complex, fiind influenat hormonal i de ctre mediu.
Influena hormonal
n comportamentul sexual uman, hormonii induc diferena de baz
ntre sexe: capacitatea organismului masculin de a produce spermatozoizi i
de a insemina i capacitatea organismului feminin de a produce ovule, de a
nate copii i de a-i alpta.
De exemplu, n anul 1987, Rose Mulaikal i colaboratorii (cf. Mange
& Mange, 1990) au efectuat un studiu asupra unui lot de 80 de femei ce
prezentau sindromul displazieie congenitale suprarenale, datorat deficienei
n 21-hidroxilaza. Din acestea, 46 au fost heterosexuale active (total 25 de
sarcini i 20 de copii normali), 4 homosexuale sau bisexuale i 30 nu au avut
experiene sexuale. Deci, activitatea heterosexual pare a depinde mai mult
de reconstituirea chirurgical, dect de influena hormonal prenatal. n
acelai an, Federman (cf. Mange & Mange, 1990) sugera c funcionalitatea
psihosexual a indivizilor cu sindromul hiperplaziei congenitale suprarenale
tratat, poate fi influenat de aciunea androgenilor n perioada de dezvoltare
a creierului fetal.
Influena mediului
Foarte interesante s-au dovedit a fi cazurile de hermafrodii cu
organe genitale ambigue. n anul 1972, J.Money i A. Ehrhardt (cf. Mange
& Mange, 1990) au descris dezvoltarea a 6 pseudohermafrodii ce au
prezentat la natere organe genitale ambigue, ca urmare a sindromului
hiperplaziei congenitale suprarenale. toi subiecii erau 46, XX, prezentnd
aceleai organe genitale interne i externe. Dintre acetia 3 au devenit
brbai i 3 femei, ca urmare a interveniilor chirurgicale, a tratamentului i
a modului de via.
Un alt exemplu evident de influen a mediului n realizarea
identitii sexuale individuale este cazul unei perechi de gemeni biei, care
au suferit circumcizia la 7 luni. Ca urmare a unei erori medicale, un biat a
rmas fr penis i 10 luni mai trziu a fost transformat n fat. Ca urmare a
primit un nume caracteristic, a fost mbrcat adecvat, a primit jucrii
specifice fetielor i a fost tratat diferit de fratele su. S-a constatat c, n
_____________________________________________________________

233

_____________________________________________________________
timp, a adoptat comportament feminin i a devenit contient de apartenena
la sexul femeiesc.
Dintre tulburrile de identitate sexual enumerm:
Travestiii
Travestiii sunt frecvent brbai care se mbrac, periodic, n haine de
femeie, avnd identiti alternative de brbat i de femeie. Ei nu sunt
neaprat homosexuali, unii prefernd femeile drept partenere sexuale.
Transsexualii
Transsexualii sunt normali din punct de vedere sexual, dar psihic
aparin sexului opus. De exemplu, identitate de femeie n corp de brbat i
vice versa. Ei i neag contient sexul, se comport conform sexului opus
(chiar din perioada copilriei) i cer s fie transformai sexual. Dup
operaia de schimbare a sexului i acomodarea cu apartenena la noul sex,
subiecii sunt mulumii.
Transsexualitatea este o problem psihic. Orientarea psihic a
sexului este dirijat nervos de hipotalamus, care sub influena hormonilor
secretai de testicule, n primele zile dup natere se masculinizeaz,
inducnd reacia psihic. n lipsa hormonilor masculinizani, hipotalamusul
se feminizeaz.

Homosexualii
Homosexualii i menin identitatea sexual n conformitate cu
organele sexuale, dar sunt atrai erotic de indivizi de acelai sex. studiile
cauzelor homosexualitii sunt contradictorii i greu de interpretat. Totui,
din vremuri strvechi, anumite culturi acceptau homosexualitatea, iar pentru
altele era un subiect tabu.

6.6. Anomaliile congenitale


Anomaliile congenitale sunt modificri ale morfologiei unui segment
anatomic, a unui organ sau a unei pri de organ determinate de o tulburare
n dezvoltarea prenatal (n morfogenez) prezent la natere. Termenul
congenital nseamn prezent la natere, dar nu implic manifestarea
_____________________________________________________________

234

_____________________________________________________________
anomaliei la natere, aceasta se poate manifesta oricnd n viaa postnatal.
Termenul de anomalie congenital nlocuiete astzi termenul mai vechi
"malformaie congenital", fiind mai cuprinztor. (Covic, 1981)
Frecvena lor este de 3% de nou nscui.
Se descriu trei tipuri de anomalii congenitale:
- malformaiile congenitale
- deformrile congenitale
- disrupiile congenitale.
Malformaiile congenitale
Sunt anomalii congenitale produse printr-un proces primar, intrinsec
de dezvoltare anormal a unei structuri nedifereniate (ex. primordiu de
organ), care se produce n perioada embrionar a dezvoltrii intrauterine.
Exemple de malformaii congenitale: despicturile labio-maxilo-palatine,
polidactilia, defectele septale atriale i ventriculare, spina bifida, anencefalia
etc.
Malformaiile congenitale pot fi clasificate n majore i minore.
Malformaiile congenitale minore nu prezint importan medical
(ex. urechi jos implantate, fante palpebrale oblice, bolt palatin ogival);
dac la un individ se descoper mai mult de trei astfel de malformaii,
trebuie cutat o malformaie major, care probabil nc nu este manifest.
Malformaiile congenitale majore pot fi unice, dac afecteaz un
singur organ sau multiple. Cele unice au o frecven de 2%, au prognostic
vital bun i risc de recuren mic (2-5%); cele multiple sunt mai rare (1%),
dar sunt mult mai severe, iar riscul lor de recuren este n funcie de
etiologie (monogenic, poligenic, cromosomial, teratogenez).
Deformaiile congenitale
Au o frecven de 2% de nou nscui i reprezint deformarea unui
segment corporal normal format anterior, deci se produc n perioada
dezvoltrii fetale. Exemple: luxaia congenital de old, piciorul strmb
congenital, plagiocefalia, micrognaia etc.
Principala cauz este limitarea micrilor fetale prin diverse
compresiuni intrauterine cum ar fi oligohidramniosul, anomalii ale uterului,
prezentaia pelvin, sarcinile gemelare, insuficiena circulaiei uteroplacentare.
_____________________________________________________________

235

_____________________________________________________________
Ele au un prognostic foarte bun i se corecteaz spontan sau prin
tratament ortopedic. Riscul de recuren este foarte sczut.
Disrupiile congenitale
Disrupiile sau distrugerile sunt anomalii congenitale care se produc
prin alterarea, n perioada fetal, unui segment normal format. Sunt rare, de
exemplu amputaiile congenitale datorate bridelor amniotice sau prin oprirea
fluxului sangvin ntr-un segment.
O problem deosebit de important n practic este stabilirea
etiologiei anomaliilor congenitale. O treime din anomaliile congenitale au
cauze genetice (mutaii monogenice, poligenice sau cromosomice), 5% sunt
produse de factori de mediu (agenii teratogeni mecanici, fizici, chimici i
biologici), o alt treime se datoreaz interaciunii factorilor genetici cu cei
de mediu (etiologie multifactorial), iar pn la 25% din anomaliile
congenitale au cauz necunoscut.
Producerea anomaliilor congenitale depinde de mai muli factori:
stadiul dezvoltrii embrionare (perioada critic este organogeneza - ntre a
III-a i a X-a sptmn de sarcin), constituia genetic a embrionului,
starea fiziologic sau bolile mamei, natura i doza agentului teratogen.
Profilaxia i tratamentul anomaliilor congenitale vor fi prezentate n
subcapitolul urmtor.

6.7. Genetica cancerului


Dei din punct de vedere medical boala canceroas cuprinde un
ansamblu de boli diferite etiologic, ca localizare i ca evoluie, genetica
uman consider neoplaziile ca o singur boal care afecteaz aparatul
genetic al celulei. Fiind boli comune cu predispoziie genetic, cancerele
sunt produse, n marea lor majoritate, de factori genetici (de obicei
poligenici) i, concomitent, de factori de mediu.
De mult timp s-a observat prezena unor cancere ereditare i
familiale ceea ce susine implicarea factorilor genetici; aproximativ 25% din
_____________________________________________________________

236

_____________________________________________________________
cancere au o component ereditar; 6% din aceste cancere prezint o
transmitere monogenic de exemplu retinoblastomul, neurofibromatoza,
polipoza rectocolic etc.
n alte cancere s-au pus n eviden anomalii cromosomice specifice
cum ar fi cromosomul Philadelphia n leucemia mieloid cronic,
translocaia 8/21 n leucemia mieloid acut i translocaia 8/14 n limfomul
Burkit. S-a observat c doar 10 perechi de cromosomi umani sunt implicate
n cancere, datorit bogiei lor n situsuri fragile.
Dup 1980 a fost evideniat participarea unor gene n cancerizare,
genele "v-onc" - oncogene virale din retrovirusuri; concomitent au fost
descoperite corespondentele lor celulare umane numite "c-onc". De
asemenea, au fost descoperite gene umane normale foarte asemntoare cu
c-onc care prin mutaii se pot transforma n oncogene; acestea au fost
numite protooncogene. Protooncogenele produc malignizarea prin
intermediul proteinelor anormale pe care le codific, dar pentru producerea
unui cancer este necesar cooperarea ntre mai multe oncogene.
De dat relativ recent este descoperirea antioncogenelor gene care
au rolul de a bloca protooncogenele dup terminarea rolului lor n
dezvoltarea embrionar. Teoria actual susine c neoplaziile se produc prin
dezechilibrul activitii protooncogenelor i al oncogenelor.

6.8. Profilaxia i tratamentul bolilor genetice


Profilaxia bolilor genetice este deosebit de important ntruct
bolile genetice sunt o problem de sntate public. Ea urmeaz trei direcii
majore:
- prevenirea apariiei i propagrii mutaiilor, ceea ce presupune
cunoaterea i evitarea agenilor mutageni, scderea vrstei
reproductive a prinilor i mijloace de mpiedicare a transmiterii
mutaiei prin anchet familial, depistarea heterozigoilor i
acordarea de sfat genetic;
_____________________________________________________________

237

_____________________________________________________________
- prevenirea apariiei bolii la indivizi cu predispoziie genetic prin
depistarea i contientizarea lor pentru a evita factorii nocivi de
mediu;
- prevenirea naterii unui copil cu genotip anormal prin evitarea
concepiei, prin inseminare artificial, diagnostic prenatal i, n
ultim instan, prin avort terapeutic;
- Prevenirea manifestrilor sau a complicaiilor bolilor genetice
deja aprute, prin diagnostic precoce prin consult genetic i
tratament genetic;
- Acordarea sfatului genetic n toate cazurile indicate.
Tratamentul bolilor genetice
Orice procedeu medical care are ca efect reducerea manifestrilor
sau chiar vindecarea unei boli genetice poate fi definit ca tratament genetic.
Astzi dispunem de patru clase de mijloace terapeutice:
- terapia genetic de clas I care presupune o terapie simptomatic
adresat efectelor secundare sau teriare ale bolii (ex. dietetic,
medicaie simptomatic, chirurgie paliativ, transplante)
- terapia genetic de clas II care presupune administrarea
proteinelor normale care nu pot fi produse de genele mutante;
este o terapie de nlocuire (ex. hormoni sexuali, hormon de
cretere i mai recent enzime administrate prin intermediul
liposomilor);
- terapia genetic de clas III care vizeaz modificarea
mecanismelor de expresie a genei (molecule anti ADN, anti
ARNm, inhibitori ai factorilor de transcripie);
- terapia genetic de clas IV numit i terapie genic care
presupune utilizarea de ADN fabricat artificial pentru a nlocui
gena mutant (din 1990 s-au efectuat mai multe experimente de
inserie a unor gene normale la bolnavi cu diverse leucemii).
De aceste clase terapeutice beneficiaz toate bolile monogenice i o
parte din bolile poligenice. Tratamentele din clasele superioare sunt
costisitoare i, multe dintre ele, nc n stadiu experimental.

_____________________________________________________________

238

_____________________________________________________________

PERSPECTIVELE
GENETICII UMANE
_____________________________________________________________

239

_____________________________________________________________

N SECOLUL XXI

Muli autori i exprim opinia c dac secolul care se sfrete acum


a fost dominat de descoperirile fizicii atomice, ale electronicii i ale
informaticii, secolul viitor va fi, n schimb, unul al biologiei i al medicinei.
Genetica, n general, i genetica uman, n special, vor fi n fruntea
disciplinelor care vor contribui la imensul progres al biologiei i medicinei.
Pe plan teoretic, genetica va acumula cunotine noi cu privire la structura i
mecanismele moleculare de funcionare a materialului genetic, n special n
domeniul interrelaiilor genice.
Din punct de vedere practic, genetica uman i, n particular,
genetica medical vor utiliza tehnici tot mai avansate de analiz a
genomului la nivel molecular. Ingineria genetic va implementa tehnici tot
mai performante pentru producerea de gene i biomolecule umane care vor
fi folosite n terapia genetic. Aceasta va duce la imensa dezvoltare a unei
ramuri de abia aprute n industria farmaceutic.
Cunoaterea mai bun a elementelor individualitii genetice i
biologice vor duce la adaptarea mai bun a indivizilor la condiiile de munc
i via pentru a putea fi atinse capacitile lor fizice i intelectuale maxime,
deci o mai bun selecie i utilizare a valorilor.
Terapia genetic de clas IV (terapia genic) va fi aplicat pe scar
mai larg, probabil, cu rezultate spectaculoase. Terapia genetic va ncerca,
poate cu succes, rezolvarea dificilelor probleme de tratament ale cancerelor,
ale bolilor autoimune i SIDA. Profilaxia bolilor genetice va fi aplicat pe
scar larg, iar tehnicile de diagnostic prenatal vor fi mult mbuntite, ceea
ce va duce la scderea frecvenei bolilor genetice.
_____________________________________________________________

240

_____________________________________________________________
Toate aceste progrese vor ridica multiple probleme tehnice cum ar fi
securitatea laboratoarelor de inginerie genetic, dar i de etic medical
(probleme puse n special de eugenia pozitiv i de clonare).

3.1. Particularitile structurii ADN


n anul 1953 J.Watson i F.Crick au descoperit structura ADN, format din
dou lanuri polinucleotidice (dublu helix) (fig. 5).
Structura primar a ADN
ADN-ul este un macropolimer de dezoxiribonucleotide (prescurtat
nucleotide), formate din pentoz (dezoxiriboza), baze azotate (purinice: A adenina i G - guanina sau pirimidinice: C - citozina i T - timina) i un
radical fosfat (radicalul acidului ortofosforic) (fig. 6).
Dintre formele tautomere ale bazelor azotate, n acizii nucleici sunt
prezente numai formele ceto - i amino -, care sunt mai stabile i menin
atomii de hidrogen necesari pentru mperecherea bazelor azotate
complementare. Prin nlocuirea unei baze normale cu forma sa tautomer
rar, pot s apar erori de mperechere (A cu C i C cu T), deci mutaii
punctiforme (Raicu, 1997).

_____________________________________________________________

241

_____________________________________________________________

L e g tu ri
z a h r -fo s fa t

L e g tu ri d e
h id r o g e n
B az
p ir im id in ic

B a z p u r in ic

P e re c h e d e
n u c le o t id e

Fig. 5. Dublul helix de ADN

Cele trei elemente ale unei nucleotide sunt unite prin legturi
covalente. La C1' al dezoxiribozei se leag o baz azotat rezultnd un
nucleozid, iar la carbonul 3' al dezoxiribozei se leag radicalul fosfat de
carbonul 5' al altei dezoxiriboze, realiznd legtura fosfodiesteric (fig. 7).
Se formeaz o caten liniar continu, cu o parte constant (axul
molecular format din dezoxiriboz i radical fosfat) i o parte variabil
(format din baze azotate perpendiculare pe ax). Catena polinucleotidic
este polarizat, primul nucleotid prezentnd carbonul 5' al dezoxiribozei
_____________________________________________________________

242

_____________________________________________________________
liber, iar ultimul nucleotid cu carbonul 3' liber. Polaritatea este 5' spre 3',
invers direciei de polimerizare (fig. 8).
NH2

O
H N
O C

C
N

C H

C H

O C

C
N

C H

H N

C H

O C

C
N

C CH3
C H

Uracil

Citozina

Timina

NH2
N
H C

C
N

C H
N H

Adenina
O
H N
NH2

C
N

C H
N H

Guanina

Fig. 6. Bazele azotate purinice i pirimidinice, din structura ADN

Prin studii cu raze X i electronomicroscopie, Chargaff a demonstrat


nonperiodicitatea aranjrii bazelor azotate n catena de ADN.
Caracteristicile structurii primare a ADN
- rezult din polimerizarea unitilor: dezoxiribonucleotide BN
dR P
- BN : purine (A,G) i pirimidine (C,T)
- polimerizarea se face n direcia 3 -5
- este monocatenar
_____________________________________________________________

243

_____________________________________________________________
- polaritatea este 5-3
- bazele azotate se dispun fr nici o constrngere
- conine ntreaga informaie ereditar a celulei
- la nivelul ei au loc mutaiile
Structura secundar a ADN
Erwin Chargaff i colaboratorii, analiznd compoziia ADN - ului la
diferite organisme au constatat c, n ADN, concentraia de T este egal cu
cea de A, iar cea de C este egal cu cea de G. Studiile lor au relevat c, i
concentraia total a bazelor pirimidinice (T + C) este egal cu concentraia
total a bazelor purinice (A + G), dup cum se observ n tabelul 1. n
contrast, procentul de A (sau T), n comparaie cu G (sau C) variaz n
funcie de organism. Astfel, raportul T + A / C + G, variaz la diferite specii
(Snustad et al, 1997).
Nucleotide pirimidinice

O
H
O
-

CH3

O
-

H
H

P O CH2O

P O CH2O
-

OH

OH

dTMP

dCMP

Nucleotide purinice
H

O
H

H
N

H
N

H
O
-

P O CH2

P O CH2

OH
dAMP

OH
dGMP

Fig. 7. Structura dezoxiribonucleotidelor prezente n ADN

_____________________________________________________________

244

_____________________________________________________________
O
CH3

O P O CH2
-

H
H

H
N

H
N

O P O CH2
-

H
H

H
N

O
O P O CH2
-

O
N

H
N
O

H
N

O P O CH2
-

H
Lan polinucleotidic al ADN

Fig. 8. Structura primar a ADN

Una dintre premisele importante pentru elucidarea structurii secundare


a ADN a fost deducerea experimental a regulii lui Chargaff (1951),
conform creia:
A + G = T + C i A + C = G + T, iar A = T i G = C
A/T=G/ C=1
Pe baza datelor lui Chargaff i prin difracia n raze X utilizat de
Wilkins i Franklin, Watson i Crick au propus modelul dublul helixului de
dreapta al ADN, n care cele dou catene polinucleotidice se rsucesc,
formnd o spiral (vezi fig. 5).
Astfel, s-a dedus structura secundar a ADN, fiind reprezentat de 2
lanuri polinucleotidice legate prin puni de H ntre bazele azotate (legate pe
baz de complementaritate). A se mperecheaz cu T prin 2 puni de H
(A=T), iar G cu C prin 3 puni de H (GC) (fig. 9).
_____________________________________________________________

245

_____________________________________________________________
Raportul A + T / G + C are valori caracteristice pentru ADN-ul
provenit din surse diferite genetic i are valori apropiate la specii nrudite
filogenetic. La om raportul este egal cu 1,53 (Snustad et al, 1997). n
general, plantele superioare i animalele au un exces de A + T fa de G + C.
Cantitatea de material genetic variaz n limite mari n lumea vie, la om
mrimea genomului fiind de 3,3 x 109 p.b.(Raicu, 1997).
Structura bicatenar a ADN este foarte stabil datorit existenei
legturilor fosfodiesterice intercatenare i pe orizontal a legturilor de H
intercatenare. Cele dou catene sunt antiparalele, prezentnd polaritate
chimic diferit (fig. 10).
H

Timina
H
Zahar

C
N

H
C
C
C

H
C
N

O
H
H

N
H

Citozina

H
H

Zahar

C
N

C
C

N
C
N

Adenina

H
C
C

N
C H
N
Zahar

H
C

O
H

O
H

N
H

N
C

C
N

Guanina
C
C

N
C H
N
Zahar

Fig. 9. Legturile de hidrogen ntre bazele azotate purinice i pirimidinice.

Difracia cu raze X asupra fibrei de ADN arat existena a mai multor


tipuri distincte de structur (A, B, C, D i E), cu orientarea elicei spre
dreapta. n condiii fiziologice, (n soluie apoas, la concentraie sczut de
sruri, ADN-ul natural adopt conformaia B.

Tipul B-ADN
Acest tip de ADN este descris de modelul Watson - Crick.
Structura de dublu helix dextru cu orientare antiparalel a punilor
fosfodiesterice ce alctuiesc scheletul stabil al celor dou catene
_____________________________________________________________

246

_____________________________________________________________
polinucleotidice, legate prin puni de H stabilite ntre perechile de baze
complementare, confer fibrei un diametru de 1,9 nm (Snustad et al, 1997).
Perechile de baze azotate ale ADN - ului se succed la 0,34 nm., un tur
complet de 360 de grade fiind format din 10 perechi de baze. Deci, pasul de
nfurare complet a celor dou catene este de 3,4 nm.
HO

P
A

P
T

5'

3'
P

P
C

S
P

P
A

3'

5'
P

P
C
S
HO

G
S
P

Fig. 10. Schema dublului helix de ADN, ilustrnd cele patru tipuri de
perechi de nucleotide ale celor dou catene polinucleotidice.

Dezoxiribozele sunt perpendiculare pe bazele azotate, care fiind


hidrofobe sunt orientate ctre interiorul structurii, n timp ce lanurile
fosfodiesterice, cu un caracter hidrofil pronunat, rmn spre exterior,
protejnd astfel secvena de nucleotide de aciunea diferiilor ageni externi.
Datorit antiparalelitii, resturile de pentoz sunt orientate ntr-o caten cu
atomul de oxigen n jos i n cealalt caten n sus, astfel nct pentru a se
putea mperechea normal, bazele azotate legate la aceste zaharuri se nclin
cu cca. 10, n direcia acelor de ceas, ceea ce oblig ntreaga molecul de
ADN s se rsuceasc, formnd o spiral.
_____________________________________________________________

247

_____________________________________________________________
Prin spiralizarea coloanelor glucido - fosforice, apar, pe ambele pri
ale dublului helix, adncituri sau caviti mari i mici, alternante. Prezena
lor este esenial pentru ndeplinirea funciilor ADN - ului, deoarece la
nivelul lor bazele azotate sunt mai accesibile, putnd interaciona cu diferii
ageni specifici, n procesele de replicaie, transcripie etc. Astfel, prin nsi
conformaia lor, perechile de baze A - T stabilesc situsuri prefereniale de
legare a diferiilor ageni specifici la nivelul adnciturii mici, iar perechile
de baze C - G, la nivelul adnciturii mari (Raicu, 1997).
Caracteristicile structurii secundare a ADN
helix bicatenar
structur regulat (360 = 10 nucleotide = 34 Angstromi
lungime), coaxial
strict complementaritate
mare stabilitate
antiparalel
plectonemic
dextrogir
explic funciile ADN-ului
heterogenitate: tipuri A,B,C,D,E,Z. (B 10 nucl/rotaie
semnificaie biologic, ADN Z, senestra, levogir, 6
nucl/rotaie)
- repetitiv (moderat, nalt, n palindrom)
- nerepetitiv

Cap 6. CODUL GENETIC I SINTEZA PROTEINELOR


_____________________________________________________________

248

_____________________________________________________________
6.1. CODUL GENETIC I CARACTERISTICILE SALE.
n anul 1944 O.T. Avery i colaboratorii, au demonstrat rolul ADN
n transformarea genetic la bacterii. n anii 1944 si 1945, fizicianul german
Erwin Schrdinger, n lucrrile Ce este viaa? i Spirit i materie, a emis
ipoteza existenei unei relaii ntre acizii nucleici i proteine, relaie realizat
prin funcionarea unui cod genetic. n cadrul codului genetic, elementele
codificrii ar fi cele patru baze azotate din structura ADN.
Dup 1948, ciberneticianul american George Gamow a presupus
existena codonilor, pornind de la ipoteza c n macromolecula acizilor
nucleici se afl codificat biochimic informaia genetic necesar sintezei
moleculelor de proteine (1948 1954).

Tabelul 6.1.
Relaia dintre numrul de baze azotate ntr-un grup de determinism i
numrul de aminoacizi proteici
Numrul de baze azotate
Numrul de combinaii posibile
Numrul de amino
implicate n stabilirea
determinat de existenta a 4 tipuri
proteici
poziiei unui aminoacid
de baze azotate
1
41 = 4
<20
2
42 = 16
<20
3
3
4 = 64
>20
tiind c n molecula de ADN se afl patru tipuri de baze azotate, iar
molecula proteic este constituit din 20 tipuri de aminoacizi, el a cutat s
stabileasc, pe baze logice, numrul de baze azotate (nucleotide) necesare
pentru determinarea poziiei unui aminoacid n molecula proteic. A ajuns la
concluzia c un grup de trei baze azotate alturate, reprezint o unitate de
codificare a unui aminoacid n molecula proteic.
Codon-ul reprezint un grup de trei baze alturate (trei nucleotide)
care determin poziia unui aminoacid n molecula de protein.
Caracteristicile codului genetic
_____________________________________________________________

249

_____________________________________________________________
n prezentarea caracteristicilor codului genetic, se obinuiete s fie
utilizai codonii din molecula de ARN-m.
Codonul este unitatea funcional a codului genetic. El const dintro secven de trei nucleotide alturate, care determin poziia unui
aminoacid n catena polipeptidic. Codul genetic este alctuit din 64 de
codoni. Acetia reprezint probabilitatea combinaiilor n grupe de cte trei a
celor 4 tipuri de nucleotide (baze azotate).
Fenomenul de colinearitate, reprezint corespondena dintre
secvena nucleotidelor din molecula de ADN sau ARN-m i secvena
aminoacizilor din molecula proteic.
Codul genetic este nesuprapus i fr virgul, adic ntre doi
codoni alturai nu exist nucleotizi comuni (cod nesuprapus), sau nucleotizi
fr sens (cod fr virgul).
Codul genetic este degenerat, adic un aminoacid poate fi codi- ficat
de doi sau mai muli codoni. Astfel, aminoacidul fenilalanina este codificat
de secvena UUU sau UUC (cod genetic ARN-m) (Tab. 6.3).
Tabelul. 6.3
Aminoacizii i codonii care i codific
Nr.crt
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14

Aminoacizi
Alanina
Cisteina
Acid aspartic
Acid glutamic
Fenilalanina
Glicina
Histidina
Isoleucina
Lisina
Leucina
Metionina
Asparagina
Prolina
Glutamina

Simbol
Ala
Cys
Asp
Glu
Fen
Gly
His
Ile
Lys
Leu
Met
Asp
Pro
Glu

Codoni
GCA, GCC, GCG, GCU
UGC, UGU
GAC, GAU
GAA, GAG
UUC, UUU
GGA, GGC, GGG, GGU
CAC, CAU
AUA, AUC, AUU
AAA, AAG
UUA, UUG, CUA, CUC, CUG,CUU
AUG
AAC, AAU
CCA, CCC, CCG, CCU
CAA, CAG

_____________________________________________________________

250

_____________________________________________________________
15
Arginina
Arg
AGA, AGG, CGA, CGC, CGG,CGU
16
Serina
Ser
AGC, AGU, UCA, UCC, UCG,UCU
17
Treonina
Thr
ACA, ACC, ACG, ACU
18
Valina
Val
GUA, GUC, GUG, GUU
19
Triptofan
Trp
UGG
20
Tirosina
Tyr
UAC, UAU
Codoni stop. Exist trei codoni stop (UAA, UGA, UAG), care
determin sfritul mesajului genetic i nu poziia unui aminoacid n catena
polipeptidic.
Codoni ambigui. Exist doi codoni ambigui (AUG si GUG), care
dependent de poziia lor n molecula de ARN-m, determin poziia unor
aminoacizi diferii. Ambii codoni se pot gsi la nceputul moleculei de
ARN-m sau n interiorul acesteia. Astfel, codonul AUG aflat n prima
poziie, determin includerea aminoacidului metionina-formiat, pe cnd,
atunci cnd este situat n interiorul moleculei de ARN-m, determin
includerea metioninei. Codonul GUG aflat n poziie iniial, determin
includerea metioninei formiate, n timp ce atunci cnd se afl n interiorul
moleculei de ARN, determin includerea valinei.
Codul genetic este universal i are origine foarte veche. Aceeai
codoni determin poziia aceluiai aminoacid la organisme diferite, cu
vechime filogenetic diferit.
Codul genetic a evoluat n timp, dovad fiind unele excepii de la
codul genetic, excepii ntlnite la organisme foarte vechi filogenetic. Aceste
excepii se refer n special la codonii tip stop, care inial au avut rol n
determinismul unui anumit aminoacid. Astfel, la procariotul Mycoplasma
capricolum, codonul UGA determin poziia triptofanului. De asemenea, la
unele ciliate (Tetrahymena sp. sau Paramoecium sp.), codonii UAA i UAG
determin poziia glutaminei.
6.2. BIOSINTEZA PROTEIC.
Biosinteza proteinelor are loc n dou etape principale, transcripia
i translaia, la nivelul crora pot aciona diferite mecanisme de control
(Fig. 6.1).
_____________________________________________________________

251

_____________________________________________________________

Fig. 6.1. Sinteza proteic: transcripia i translaia informaiei genetice

_____________________________________________________________

252

_____________________________________________________________
6.2.1. Transcripia informaiei genetice
Transcripia informaiei genetice const n transferul informaiei
genetice din secvena de nucleotide a uneia din catenele de ADN (de obicei
din catena 3 5), sau din catena de ARN viral, n catena de ARN-m. Deci
informaia genetic se transcrie dintr-o secven de nucleotide n alt
secven de nucleotide. Procesul de transcripie se realizeaz cu ajutorul
enzimei ARN-polimeraza. Codonul de iniiere a sintezei unei uniti de
transcripie (a unei molecule de ARN-m) se afl n general pe catena 3 5,
fiind de obicei TAC (mai rar CAC). Codonul care indic sfritul procesului
de transcripie, este un codon complementar codonilor stop din codul
genetic al ARN-m, respectiv ACT, ATT sau ATC. Mrimea unei uniti de
transcripie difer la procariote de eucariote. La procariote, o unitate de
transcripie conine informaia genetic a mai multor gene, fiind deci
implicat n sinteza mai multor catene polipeptidice. n acelai timp,
unitatea de transcripie de la procariote, conine numai secvene
informaionale (v. Fig. 5.12a). La eucariote, o unitate de transcripie conine
informaia genetic a unei singure gene, fiind deci implicat n sinteza unei
singure catene polipeptidice. La nivelul moleculei de ADN, ntr-o unitate de
transcripie se afl att secvene informaionale (exoni), ct i secvene noninformaionale (introni). Astfel, n urma procesului de transcripie, la
eucariote rezult un ARN-precursor care conine secvene informaionale
(exoni), ce alterneaz cu secvene
non-informaionale (introni)(v.
Fig.5.12b). naintea nceperii celei de-a doua etape a sintezei proteice (a
procesului de translaie), este necesar maturarea ARN-m.
Procesul de maturare al ARN-m are loc prin eliminarea intronilor
i asamblarea exonilor, cu ajutorul unor enzime, din care fac parte
endonucleazele i ligazele. Procesul prezint importan n reglajul genetic
al sintezei proteice la eucariote (v.Fig. 5.12b).
6.2.2. Translaia informaiei genetice
Translaia informaiei genetice const n transferul informaiei
genetice din secvena de nucleotide a ARN-m n secvena de aminoacizi din
catena polipeptidic. Are loc deci traducerea mesajului genetic, dintr-o
secven de nucleotide ntr-o secven de aminoacizi.
_____________________________________________________________

253

_____________________________________________________________
n acest proces sunt descrise trei reacii principale:
(a)

(b)

(c)

E1
AA1 + ATP AA1AMP + P P
Aminoacid activat
E1
AA1 AMP + ARN-t1 AA1 ARN-t1 + AMP
Complex aminoacil-ARN-t
E2
AA1ARN-t1 + AA2 ARN-t2 AA1 AA2 + ARN-t1 + ARN-t2.
Legtura dipeptidic

Descris pe larg, procesul de translaie a informaiei genetice are loc


dup urmtorul program (Fig. 6.2):
n citoplasm se afl molecule de ATP (adenosintrifosfat,
substana macroergic), cele 64 tipuri de ARN-t, cele 20
tipuri de aminoacizi proteici, ARN-m i ribosomi. ARN-m se
ataeaz pe suprafaa ribosomului, primul codon, respectiv
codonul de iniiere (AUG sau GUG), fiind poziionat n
dreptul locusului A de pe subunitatea mica a ribosomului.
n citoplasm se produc relativ concomitent primele dou
reacii, sub aciunea enzimei E1, aminoacil-sintetaza.
n dreptul codonului de iniiere AUG din molecula de ARNm, situat n dreptul locusului A, va veni complexul ARN-t 1
AA1 cu secvena anticodon UAC care poart aminoacidul
metionina-formiat. Imediat, are loc deplasarea relativ a
ARN-m fa de ribosom cu o distan de un codon. n acest
fel, primul complex aminoacil ARN-t1 (care a transportat
metionina-formiat), ajunge n locusul P de pe suprafaa
ribosomului, locusul A devenind liber. Aici va veni acel
complex ARN-t2 AA2, al crui anticodon este
complementar codonului ARN-m din locusul A.
Dup aducerea unui nou aminoacid n locusul A, se
formeaz o legtur dipeptidic ntre primii doi aminoacizi,
_____________________________________________________________

254

_____________________________________________________________
apoi ribosomul se mic relativ fa de ARN-m cu o distan
de un codon i locusul A devine liber pentru a primi un nou
aminoacid. Procesul are loc n acest fel, cu decodificarea
informaiei genetice din molecula de ARN-m, pn ce se
ajunge la ultimul codon, unul din codonii stop. Dup aceasta
nu mai are loc ataarea nici unui aminoacid.
Atunci cnd codonul stop ajunge n dreptul locusului Ex, are
loc desprinderea catenei polipeptidice sintetizate de pe
suprafaa ribosomului. Ulterior are loc desprinderea primului
aminoacid (metionina-formiat) i formarea structurii
secundare a moleculei de protein. Pe suprafaa unei
molecule de ARN-m se ataeaz de obicei mai muli
ribosomi, care formeaz aa numiii poliribosomi sau
polisomi, avnd loc astfel sinteza mai multor catene polipeptidice pe baza aceleiai informaii genetice.

Fig. 6.2. Translaia informaiei genetice ( dup Hartl, Freifelder & Snyder,1989)

6.3. REGLAJUL GENETIC AL SINTEZEI PROTEICE


_____________________________________________________________

255

_____________________________________________________________
ntr-un organism, procariot sau eucariot, unicelular sau pluricelular,
sinteza proteic nu are loc tot timpul. O anumit gen funcioneaz
discontinuu, pn cnd n celul se acumuleaz o anumit cantitate dintr-o
substan, dup care sinteza proteic nceteaz. Aceast sintez este reluat,
atunci cnd n celul scade concentraia din substana respectiv.
6.3.1. Reglajul genetic al sintezei proteice la procariote
ntr-o celul bacterian, care are 2000 3000 gene, acestea
funcioneaz discontinuu, dependent de necesitile celulei. S-au emis mai
multe ipoteze care explic mecanismul prin care o celul bacterian i
regleaz activitile metabolice de sintez.
A. Teoria operonului. Represia enzimatic. Teoria operonului,
numit i teoria reglajului genetic a activitii celulare, a fost elaborat n
anul 1961 de ctre F. Jacob si J.L. Monod, pe baza cercetrilor lui A. Lwff
(premiul Nobel pentru medicin i fiziologie n anul 1965). Conform acestei
teorii, la bacterii exist trei tipuri de gene:
- gene structurale, conin informaia genetica pentru sinteza unei
catene polipeptidice;
- gene operatoare, funcioneaz ca nite comutatori chimici,
declannd sau nu activitatea mai multor gene structurale aflate n
subordine ntr-o unitate de transcripie (ntr-o molecula de ARN-m)
- gene reglatoare, regleaz activitatea genelor operatoare prin
intermediul unui semnal chimic numit represor (de obicei o
molecul proteic). n mod normal, represorul acioneaz asupra
genei operatoare, pe care o inhib, neavnd astfel loc sinteza
proteic.
naintea genei operatoare, se afl promotorul, respectiv o secven
de ADN la nivelul creia acioneaz enzima ARN-polimeraza, care
determin sinteza unei uniti de transcripie, respectiv a unei molecule de
ARN-m. Aceasta va conine informaia genetic aflat n genele structurale
dintr-un operon. Operonul (unitatea de operare) este alctuit din
promotor, gena operatoare i genele structurale din sub-ordinea
acesteia (Fig. 6.3a) . n cadrul sintezei proteice sunt implicate de asemenea
substana, care trebuie metabolizat (inductor), produ-sul final al sintezei
proteice (co-represor), precum i diferite sisteme enzimatice.
_____________________________________________________________

256

_____________________________________________________________

Fig. 6.3. Reglajul sintezei proteice la procariote. Teoria operonului: A. Schema operonului
lac de la Escherichia coli; B. Schema operonului lac represat (I) i n faza de sintez (II),
(dup Hartl, Freifelder & Snyder,1989)

Declanarea sintezei proteice. Declanarea sintezei proteice (Fig.


6.3bII), este precedat de ptrunderea n celul i mrirea cantitii de
_____________________________________________________________

257

_____________________________________________________________
substan care trebuie metabolizat, respectiv de inductor. Atunci cnd
concentraia inductorului depete o anumita limit, acesta se combin cu
represorul pe care l inactiveaz. Gena operatoare devine liber, iar enzima
ARN-polimeraza acioneaz asupra promotorului, declannd sinteza
proteic. n urma procesului de transcripie, are loc sinteza unei molecule de
ARN-m care copiaz informaia genelor structurale din operon. Urmeaz
procesul de translaie care conduce la sinteza enzimelor corespunztoare.
Acestea acioneaz pe rnd asupra produsului iniial, determinnd
metabolizarea (transformarea) sa n produs final, prin mai multe stadii
intermediare. Procesul are loc, pn cnd n celul va scdea cantitatea de
produs iniial (inductor) i va crete cantitatea de produs final (co-represor).
Sistarea sintezei proteice. n urma sintezei proteice, n celul scade
cantitatea de inductor i crete cantitatea de produs final (co-represor).
Atunci cnd cantitatea de produs iniial scade sub o anumita limit, acesta se
desprinde de pe represor, care devine liber. Represorul liber, se cupleaz cu
produsul final al sintezei proteice, devenind represor activ. Represorul
activat, se cupleaz cu gene operatoare, pe care o inactiveaz, inactivnd
ntreaga cale metabolic (Fig. 6.3bI). Procesul de sintez se va relua, atunci
cnd n celul va scdea cantitatea de produs final i va crete cantitatea de
inductor.
Procesul de reglaj al sintezei proteice dup acest mecanism, poart
numele de represie enzimatica. n acest proces, produsul final al sintezei
proteice regleaz propria sinteza, prin cuplarea sa cu represorul i
inactivarea genei operatoare.
B. Reglajul sintezei proteice prin retroinhibiie (feed-back).
Retroinhibiia enzimatica. Reglajul genetic al sintezei proteice dup teoria
operonului a fost demonstrat experimental n numeroase cazuri. Analiznd
ns numrul de gene dintr-o bacterie i numrul de substane implicate n
sinteza proteic, s-a ajuns la concluzia c acest tip de reglaj nu poate explica
activitatea tuturor genelor, fiind necesar un numr prea mare de gene i
substane fa de volumul mic al unei bacterii. De aceea s-a emis ipoteza
existenei, n paralel, a unui alt tip de reglaj mai simplu, care s implice un
numr mai mic de substane i gene. Conform reglajului genetic prin
retroinhibiie (feed-back), nu este necesar existena genelor reglatoare,
operatoare i a represorului. Produsul final al sintezei proteice ajuns la o
anumit concentraie, va bloca propria sa sintez prin cuplarea sa cu
_____________________________________________________________

258

_____________________________________________________________
una din primele enzime ale cii metabolice. Procesul de sintez se va
relua la scderea concentraiei de produs final din celul (Fig. 6.4).

Fig. 6.4. Reglajul genetic prin retroinhibiie (feed-back), exemplu: metabolizarea treoninei
( dup Raicu, 1997)

Metabolizarea (transformarea) treoninei n izoleucin, are loc sub


aciunea a cinci enzime diferite (E1 E5), a cror sintez are loc prin
activitatea a cinci gene structurale (GS1 GS5). Acest proces este reglat, la
diferite specii de bacterii, prin cele dou tipuri de reglaj genetic, respectiv
prin represia enzimatica (conform teoriei operonului) sau retroinhibiia
enzimatica (conform teoriei feed-back).
n cazul represiei enzimatice (Fig. 6.4), iso-leucina acumulat n
cantitate mare n celul, se va cupla cu represorul, l activeaz i blocheaz
astfel mpreun activitatea genei operatoare. Procesul de transformare al
treoninei n iso-leucin se va relua atunci cnd n celul va scdea cantitatea
de iso-leucin i va crete cantitatea de inductor (treonina).
n cazul retroinhibiiei enzimatice, iso-leucina acumulat n cantitate
mare, se cupleaz cu prima enzim a cii metabolice (treonin-dezaminaza)
pe care o inactiveaz, blocnd astfel ntreaga cale metabolic (Fig. 6.4).
Procesul de transformare al treoninei n iso-leucin, se va relua atunci cnd
_____________________________________________________________

259

_____________________________________________________________
n celul va scdea cantitatea de iso-leucin. Aceasta se decupleaz de pe
prima enzim care devine iari activ i va aciona asupra treoninei
provocnd dezaminarea acesteia, urmat de metabolizarea ei integral n
iso-leucin.
6.3.3. Reglajul genetic la eucariote.
Toate celulele somatice al unui organism eucariot conin acelai
numr de cromosomi, respectiv aceeai cantitate de ADN. Cu toate acestea,
n fiecare tip de esut sau celul, sunt active numai anumite gene (respectiv
anumite ci metabolice), n urma diferenierii i specializrii celulelor i
esuturilor. n acelai timp, activitatea genelor nu are loc tot timpul ntr-un
anumit esut sau celul, ci numai atunci cnd este nevoie de sinteza unei
anumite substane. Reglajul genetic la eucariote este mult mai complex i se
realizeaz prin diferite mecanisme.
6.3.3.1. Reglajul genetic la nivelul fibrelor de cromatin;
diferenierea i specializarea celulelor i esuturilor.
Acest tip de reglaj genetic se realizeaz n cursul dezvoltrii
embrionare la eucariote, fiind implicat n diferenierea i specializarea
structural i funcional a celulelor i esuturilor unui organism pluricelular.
Dei toate celulele somatice ale unui organism conin aceeai cantitate de
ADN, respectiv aceleai gene, n anumite celule sunt active numai anumite
gene, respectiv anumite ci metabolice. Aceast specializare structural i
funcional a celulelor i esuturilor, se realizeaz la nivelul fibrelor de
cromatina (v. Fig. 5.11).
Genele active metabolic, se afl numai n
regiunile cu eucromatin. n aceste regiuni, fibrele de cromatin sunt relativ
laxe, putnd fi copiat prin transcripie, informaia genetic de la nivelul
moleculei de ADN. Structura lax a fibrelor de cromatin, este datorat
prezenei, n aceste regiuni, a unor proteine non-histonice specifice care
mpiedic mpachetarea fibrelor de cromatin. n plus, n aceste regiuni nu
are loc metilarea bazelor azotate.
n regiunile cu heterocromatin, se afl gene inactive metabolic
(dar active n celulele unor alte esuturi ale organismului), precum i ADN
repetitiv, non-informaional). n aceste regiuni, fibrele se cromatin sunt
puternic mpachetate. fcnd imposibil procesul de transcripie i
formarea moleculelor de ARN-m. Procesul de heterocromatinizare este
_____________________________________________________________

260

_____________________________________________________________
determinat de absena proteinelor non-histonice (care mpiedic procesul de
mpachetare a fibrelor de cromatin, deci procesul de
heterocromatinizare), precum i prin metilarea bazelor azotate, care
favorizeaz acelai proces. Astfel, n regiunile cu heterocromatin, s-a
constatat nlocuirea citozinei cu 5-metil-citozina, la gru, mamifere, s.a. S-a
constatat c genele inactive metabolic sunt puternic metilate, n comparaie
cu genele active metabolic.
6.3.3.2. Reglajul genetic prin inactivarea unor segmente de
cromosomi, a unor cromosomi sau genomuri.
A. Reglaj genetic prin inactivarea unui cromosom.. Cel mai
cunoscut caz de reglaj genetic de acest tip, are loc prin inactivarea unui
cromosom X la femelele de mamifere. Determinismul sexului la mamifere
este de tip Drosophila, femele sunt homozigote avnd doi heterosomi
identici, cromosomii XX, pe cnd masculii sunt heterozigoi, avnd formula
genetic XY. Cromosomul X este unul din cei mai vechi cromosomi aprui
filogenetic. El este de dimensiuni mari, este eucromatic avnd numeroase
gene, multe implicate n metabolismul general al organismului, necesare att
la femele, ct i la masculi. Cromosomul Y la mamifere este mic,
heterocromatic, avnd puine gene implicate n determinismul unor
caractere particulare prezente la masculi. Astfel, cromosomul Y de la brbat,
posed cteva gene, implicate n apariia pleuviei, a tricomilor n nas i
urechi (pr abundent la baza narilor i n regiunea conductului auditiv), gene
pentru nlime (caracter poligenic, brbaii fiind n general, mai nali dect
femeile), gene implicate n dispoziia musculaturii i a stratului adipos pe
corp, s.a. La brbat, care prezint heterosomii XY, sunt active genele de pe
ambii cromosomi ai sexului. Femeile nu prezint cromosomul Y, neavnd
genele plasate pe acest cromosom i nici caracterele pe care acetia le
determin. Astfel, ele sunt mai scunde (n general), au o alt dispoziie a
musculaturii i a stratului adipos, nu au tricomi sau pleuvie s.a. Dac ar fi
active toate genele de pe ambii cromosomi X, ntre cele dou sexe ar fi mari
diferene datorate genelor implicate n metabolismul general al corpului,
care ar fi n stare dubl la organismul femel. Pentru a se stabili un echilibru
ntre cele dou sexe, unul din cromosomii X este inactivat la femeie,
respectiv la femela de mamifere n general. Inactivarea ntregului cromosom
_____________________________________________________________

261

_____________________________________________________________
X, are loc prin heterocromatinizarea acestuia. Astfel, el apare sub forma unei
mici regiuni heterocromatice situate pe faa intern a nveliului nuclear. n
diferitele celule somatice ale organis-mului femel, este inactivat
cromosomul X de origine matern sau de origine patern, astfel nct
organismul femel se prezint sub forma unui mozaic pentru genele plasate
pe aceti cromosomi.
B. Reglaj genetic prin heterocromatinizarea ntregului genom, a
fost raportat la masculii de Planococcus citri (2n = 10). n stadiul de
blastul al dezvoltrii embrionare, are loc heterocromatinizarea ntregului
set de cromosomi (genom) de origine patern. Genele de pe aceti
cromosomi nu vor fi deci transcrise n timpul dezvoltrii embrionare la
mascul. n timpul meiozei, nu are loc procesul de mperechere al
cromosomilor, diviziunea fiind de tip mitotic.
C. Reglaj genetic prin pierderea sau amplificarea unor segmente
cromosomale. Pierderea sau amplificarea unor segmente cromosomale,
conduce de obicei la dezvoltarea unor organisme anormale. n unele cazuri
ns, aceste fenomene reprezint mecanisme de reglaj genetic. La unele
copepode (crustacee), dup primele diviziuni ale oului n majoritatea
celulelor are loc eliminarea unor segmente heterocromatice specifice din toi
cromosomii, acestea devenind celule somatice. Celulele n care nu are loc
eliminarea segmentelor heterocromatice, vor conduce la formarea liniei
germinale.
Un proces similar a fost descoperit de ctre Auguast Weissmann,
nc din anii 80 ai secolului XIX. Studiind dezvoltarea embrionar la
Ascaris megalocephala var. univalens (Parascaris equorum), A.
Weissmann a constatat c zigotul posed 2 cromosomi relativ lungi, care
sunt multicentrici (cu patru centromeri). Dup prima diviziune a zigotului,
rezult dou celule, o celul avnd 2 cromosomi lungi, multicentrici, iar
cealalt celul cu 8 cromosomi scuri, cu un singur centromer. Dup a doua
diviziune, din celula care a prezentat cromosomii lungi, multicentrici, au
rezultat 2 celule, una cu cromosomi lungi multicentrici, cealalt cu 8
cromosomi scuri, cu un singur centromer. Dup a treia diviziune, 7 celule
au prezentat cromosomi scuri, cu un singur centromer i o singur celul a
prezentat cromosomi lungi, multicentrici. n urma celei de a patra diviziuni,
raportul ntre cele dou tipuri de celule a fost de 14:2. Dac n faza de 2 sau
4 celule, este distrus celula cu cromosomi lungi, multicentrici, n una din
celulele rmase are loc fuziunea cromosomilor, rezultnd o celul cu
_____________________________________________________________

262

_____________________________________________________________
cromosomi lungi, multicentrici, iar ulterior un organism normal. Dac n
faza de 8 celule, este distrus celula cu cromosomi lungi, multicentrici, n
nici una din celulele rmase nu mai are loc fenomenul de fuziune
cromosomal, iar n final va rezulta un organism fr glande sexuale. Astfel
August Weissmann a descoperit nc din secolul trecut, un mecanism al
diferenierii celulare, pe care l-a denumit (la nivelul cunotinelor din timpul
su), teoria plasmei germinative, care const n separarea liniei somatice
de linia germinal, nc de la primele diviziuni ale oului. Cercetri recente
au confirmat aciunea acestui proces de difereniere celular n timpul
dezvoltrii ontogenetice la organisme, inclusiv la mamifere.
La vertebrate, la nivelul limfocitelor (celule implicate n sinteza de
anticorpi), are loc o eliminare difereniat a regiunilor heterocromatice,
fenomen care conduce la specializarea limfocitelor n sinteza a diferite tipuri
de anticorpi.
D. Reglaj genetic prin amplificarea selectiv a unor secvene de
ADN n diferite tipuri celulare, exemplificat cel mai bine prin amplificarea
secvenelor implicate n sinteza de ARN-r. n aceste celule are loc o sintez
proteic intens, n cazuri normale sau patologice. Procesul este nsoit de
formarea unei structuri nucleare denumite NABs (nucleolar associated
bodies), implicat n sinteza intens a ARN.
6.3.3.3. Reglajul genetic la nivelul transcripiei i translaiei
informaiei genetice
Prin acest tip de reglaj genetic, se asigur funcionarea sau nu a
genelor din regiunile eucromatice ale nucleului, dependent de nevoile
celulei i organismului. Reglajul genetic se realizeaz n cinci etape i are
loc sub aciunea mai multor enzime.
A. Reglajul genetic la nivelul procesului de transcripiei, prin
care sunt selectate genele pe baza crora se va sintetiza un ARN-precursor.
B. Reglajul genetic la nivelul maturrii ARN, prin care sunt
selectate moleculele de ARN precursor care vor parcurge procesul de
maturare (eliminarea intronilor i asamblarea exonilor)
C. Reglajul genetic la nivelul transportului, prin care sunt
selectate moleculele de ARN-r care vor fi transportate prin porii nveliului
nuclear, din nucleu n citoplasm.
_____________________________________________________________

263

_____________________________________________________________
D. Reglajul genetic la nivelul translaiei informaiei genetice, n
urma cruia are loc declanarea sintezei proteice.
E. Reglajul genetic la nivelul degradrii moleculei de ARN-m,
care acioneaz la sfritul sintezei proteice, cnd n celul s-a acumulat o
cantitate suficient de protein, iar molecula de ARN-m utilizat n procesul
de translaie este degradat.
6.3.3.4. Reglajul genetic prin hormoni, la nivelul transcripiei
Hormonii sunt substane extracelulare, care sunt transportate de la
celulele productoare la celulele target. Muli dintre hormonii steroizi
(estrogen, progesteron, aldosteron, glucocorticoizi, hormonii androgeni,
s.a.), precum i unii hormoni din metabolismul bazal (insulina, s.a.),
acioneaz n mod obinuit asupra transcripiei. Deoarece unii hormoni
regleaz transcripia, ei sunt probabil un semnal pentru ADN, n procesul de
reglaj fiind prezent i un receptor citoplasmic.
Hormonii steroizi (H) sunt substane hidrofobe care trec n mod liber
prin plasmalem. Ajuni n citoplasm, ei se combin cu un receptor
citoplasmic specific R, formnd complexul H-R. Dup formarea acestui
complex, receptorul se poate modifica structural, rezultnd complexul H-R.
Complexul H-R, poate trece prin nveliul nuclear. Ajuns n nucleu,
complexul H-R, sau numai hormonul (H) se leag de cromatin i ncepe
fenomenul de transcripie. Aceast legare este probabil mediat de proteine
specifice linkate de ADN (n dreptul secvenelor de iniiere a unei uniti de
transcripie a informaiei genetice), sau direct de ADN.

6.3.3.5. Reglajul genetic la nivelul maturrii ARN-precursor.


n celulele glandelor salivare i n hepatocitele de la oarece, are loc
producerea a dou molecule distincte de ARN-m, pornind de la aceeai gen
iniial care conine informaia genetic pentru sinteza -amilazei (Fig. 6.5).
n glanda salivar se produce mai mult enzim dect n ficat, dei sunt
transcrise aceleai secvene de codoni. Molecula de ARN precursor,
_____________________________________________________________

264

_____________________________________________________________
sintetizat n urma procesului de transcripie, posed aceeai structur n
cele dou organe. Secvenele din constituia sa sunt: I (iniiator), exonul S,
intron 1, exon L, intron I2, exon E2, intron I3, exon E3, intron I4, exon E4.
Secvena codificatoare ncepe cu 50 p.b. din exonul 2, unit cu exonul 3 (50
p.b.) i cu exonul 4. n glanda salivar, n procesul de maturare, pe lng
introni i secvena I (eliminate n ambele organe, glanda salivar i ficat),
este eliminat i secvena L, pe cnd n ficat este eliminat secvena S
(alturi de introni i secvena I). n urma procesului de maturare, ARN-m
pentru -amilaza are secvena S-E2-E3-E4 n glanda salivar i secvena LE2-E3-E4 n ficat, dei secvena regiunilor din ARN precursor a fost
identic n ambele organe. n acest fel, n urma procesului de maturare al
ARN-m, exonii S i L, devin alternativ iniiatori ai genei ARN-m pentru
sinteza -amilazei, care se sintetizeaz la rate diferite n cele dou organe.

Fig. 6.11. Reglajul genetic la nivelul maturrii ARN-m. Producerea de ARN-m amilaza prin
dou tipuri diferite de maturare n celulele glandei salivare sau ale ficatului la Mus
musculus. Secvena de codare ncepe cu codonul AUG n exonul 2. (dup Hartl, Freifelder
& Snyder,1989)

6.3.3.6. Reglarea expresiei genelor la plante, prin lumin


Celulele multor specii de plante superioare, pierd clorofila i
culoarea verde atunci cnd sunt inute la ntuneric timp de mai multe zile
(fenomenul de etiolare). Procesul de etiolare este cauzat de lipsa enzimei
care catalizeaz sinteza clorofilei. Dac plantele etiolate sunt reexpuse la
_____________________________________________________________

265

_____________________________________________________________
lumin, n cteva ore are loc sinteza a mai mult de 60 enzime fotosintetice,
ARN-r cloroplastic i clorofil. A fost studiat n detaliu. sinteza uneia din
subunitile enzimei fotosintetice, ribulose-diphosphat-carboxylase (RDC).
Sinteza acestei subuniti este mediat de o molecul de fitocrom sau o
protein purtnd un pigment echivalent, care acioneaz n prezena luminii.
La ntuneric fitocromul este inactiv, ns la lumin acesta este convertit ntro form activ, care particip la inducerea transcripiei genei care are
modificat mica subunitate RDC i alte cteva gene. Dei mecanismul de
transcripie nu este cunoscut, se pare c lumina acioneaz ca un factor
activator al transcripiei. Sinteza subunitii mai mari, este de asemenea
reglat de fitocrom, fiind ns implicate mai multe proteine, fenomenul fiind
puin cunoscut.
Fitocromul regleaz de asemenea propria sa sintez (autoreglare).
Gena fitocromului este transcris la ntuneric, ns atunci cnd lumina
activeaz proteina, transcripia este inhibat. Acest rol al luminii este contrar
activrii induse prin lumin n cazul sintezei enzimelor fotosintetice.
Expresia genei este de asemenea reglat prin lumin la alga coloniala
Volvox sp. Populaia de molecule de ARN-m prezent la ntuneric, este n
principiu aceeai cu cea prezent la lumin. Totui, o trecere de la ntuneric
la lumin, este nsoit de o cretere exponenial a translaiei informaiei
genetice. Acest mecanism, precum i alte fenomene similare sunt ntlnite la
diferite specii de alge.
n afara acestor mecanisme de reglaj genetic, la alte specii au fost
descrise diferite alte mecanisme.

BIBLIOGRAFIE

2.

ALBERTS B., BRAY D., ROBERTS K., WATSON J., RAFF M., LEWIS J., 1989,
Molecular Biology of the Cell, Second edition, Garland Pub. N.Y.
BRA I.., 1999, Genetica, Ed. Corson, Iai.

3.

BENGA G., 1985, Biologie celular i molecular, Ed. Dacia, Cluj-Napoca

1.

_____________________________________________________________

266

_____________________________________________________________
4. BENSON P. F., FENSON A. H., 1985, Genetic biochemical disordes, Oxford Uni-

8.

versity Press, Oxford.


BERRY REBECCA, SCHROEDER J. J. et al, 2000, Evidence for a prostate cancer
susceptibilitz locus on chromosome 20, Am J Hum Genet, 67,1:82-91.
BIANCO P. R., KOWALCZYKOWSKI S. C., 2000, Translocation step size and
mechanism of the RecBC DNA helicase, Nature, vol. 405: 368 - 372.
BUTNARU GALLIA, NICOLAE I., TMA ELENA, 1999, Genetica molecular,
Ed. Mirton, Timioara.
CRLAN M., 1996, Elemente de genetic animal normal, Ed. Polirom, Iai.

9.

CHAMBON P.H., 2000, Des genes, pour quoi faire?, Science & Vie, N0993:56-60.

10.
11.
12.
13.
14.

CHAMBON P.H., 2000, Vers la mdicine individualise, Sci & Vie, N0993:62-68.
CHAUVARD SANDRINE, 2000, Ils ont squenc l'homme, Sci & Vie, N0993: 48-55.
CHITAO., ROGOS I., 1998, Ghid de citogenetic uman, Ed. Scrisul Romnesc, Craiova.
COMAN N., 1991, Genetica, Litografia Univ. Babe-Bolyai, Cluj-Napoca.
COPREAN DINA, 1997, Distrofii musculare progresive, Ed. Risoprint,
Cluj-Napoca.
COPREAN DINA, 1998, Genetic medical, Ed. Risoprint, Cluj - Napoca.
COVIC M., 1981, Biologie i genetic medical, Ed. Did. i Ped., Bucureti.
CRCIUN O., 1982, Curs de biologie i genetic uman, Litografia UMF,
Cluj-Napoca.
CROCE C., KLEIN G., 1985, Chromosomal translocations and human cancer.
Scientific American 252, 54-60
DARNELL J., LODISH D., BALTIMORE D., 1990, Molecular Cell Biology, 2nd ed.
Freeman, N.Y.
DAVIES K. E., 1985, Molecular genetics of the X chromosome, J. Med. Genet.,
22, 243-249.
DE GROUCHY J., 1984, Clinical Atlas of Human Chromosomes, N.Y. Wiley.
DE GROUCHY J., TURLEANU C., FINAZ C., 1978, Chromosomal phylogeny of the
primates, Ann. Rev. Genet. 12, 289-328.
EMERY A. E. H., 1986, Methodology in Medical Genetics, second edition,
Churchill Livingstone, Edinburg.
EMERY A. E. H., MUELLER R. F., 1992, Elemets of Medical Genetics, eight edition,
Churchill Livingstone, Edinburg.
EMERY A. E. H., RIMOIN D. I., 1990, The Principles and Practice of Medical
Genetics, second edition, Churchill Livingstone, Edinburg.
FOX C.J., PATERSON A.D., et al, 2000, Two genetic loci regulate T-cell-Dependent
Islet inflammation and drive autoimmune diabetes pathogenesis, Am J Hum
Genet, 67, 1:67-81
FREEMAN S.B., YANG Q., et al, 2000, Women with a reduced ovarian complement

5.
6.
7.

15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.

_____________________________________________________________

267

_____________________________________________________________
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.
37.
38.
39.
40.
41.
42.
43.
44.
45.
46.
47.
48.
49.

may have an increased risk for a child with Down syndrome, Am J Hum Genet,
66, 5:1680 1683.
FUHRMANN W., VOGEL F., 1983, Genetic Counseling, 3nd. Ed. Springer Verlag.
N.Y.
GIANELLI F., GREEN P.M., 2000, The chromosome X and the rate of deleterious
mutations in humans, Am J Hum Genet, 67, 2:515-517.
HAMERTON J: L:, 1971, Human cytogenetics-General cytogenetics, Academic
Press, New York.
HARPER P.S., 1993, Practical genetic connselling fourth edition, Buttlerworth,
Heinemann, Oxford.
HARTL D.L., FREIFELDER D:, SNYDER L.A., 1988, Basic genetics, Jones and
Bartlett Publishing, Boston.
HATTORI M., FUJIYAMA A., TAYLOR T. D., WATANABE H., YADA T., ET AL.,
2000, The DNA sequence of human chromosome 21, Nature, vol.405: 311-319.
HERTZOG ZORICA, 1996, Elemente de genetic molecular, Ed. Did. i Ped. Buc.
ISVOREANU M. 1993, Genetic uman, Ed. Did i Ped R.A., Bucureti.
JONES K. L., 1988, Smith's recognizable patterns of human malformation, W.B.
Saunders Company, Harcourt Brace Jovanovich, Inc. Philadelphia.
KAVASLAR G.N., ONENGUT S. et al, 2000, The novel genetic disorder microhydranencephaly maps to chromosome 16 p13.3-12.1, Am J Hum Genet, 66,
5:1705-1709.
KIEFFER G.H., 1980, IVF - In vitro fertilization, The American Biology Teacher
42: 211 - 218.
LEHMANN O.J., EBENEZER N,D. et al, 2000, Chromosomal duplication involving
the forkhead transcription factor gene FOXC1 causes iris hypoplasia and
glaucoma, Am J Hum Genet. 67, 5:1129-1135
LEWIN B:, 1997, Genes VI, Oxford University Press, Inc. New York.
MANGE A: P:, MANGE ELAINE JOHANSEN, 1990, Genetics: Human aspects,
Sinauer Associates, Inc. Publishers, Sunderland, Massachusetts.
MAXIMILIAN C., 1982, Genetica uman, Ed. tiinific i Enciclopedic, Buc.
MAXIMILIAN C., DROGHIA R., BELENGEANU V., 1994, Diagnosticul prenatal.
Probleme actuale n pediatrie. Ed. Inedit, Tulcea.
MAXIMILIAN C., IOAN DOINA, 1986, Genetica medical, Ed. Medical, Buc.
McKUSICK V.A., 1994, Mendelian inheritance in man, 11th edition, John Hopkins
University Press, Baltimore.
MILCU T. M., MAXIMILIAN C., 1966, Genetica uman, Ed. tiinific, Bucureti.
MOHAN GH., GAVRIL L., ARDELEAN A., PRVU C., 1996, Istoria biologiei n
date, Ed. All, Bucureti.
MOORE D. H., CARRANO A. V., 1984, Statistical analysis of high SCE frequency
cells in human lymphocytes, In: Sister Chromatid Exchanges, Ed. by Tice R.,
Hollaender A., Plenum Press, New York.
MORLE L., BOZON M., et al, 2000, A locus for autosomale dominant colobomatous
microphtalmia maps to chromosome 15q12-q15, Am J Hum Genet, 67, 6.

_____________________________________________________________

268

_____________________________________________________________
50. MUELLER R.F., YOUNG I.D. 1995, Emerys Elemets of Medical Genetics, ninth
51.
52.
53.
54.
55.
56.
57.
58.
59.
60.
61.
62.
63.
64.
65.
66.
67.
68.

edition, Churchill Livingstone, Edinburg.


RAICU P., 1992, Genetica, ed a 5-a, Ed. Did. i Ped., Bucureti
RAICU P., 1997, Genetic general i uman, Ed. Humanitas, Bucureti.
RAICU P., STOIAN V., 1989, Gene i cromosomi, Ed. tiinific, Bucureti.
SEUANEZ H. N., 1987, The chromosomes of Man: Evolutionary Considerations,
In: Cytogenetics (Basic and Applied Aspects), Ed. by Gnter Obe and Armin
Basler, Springer - Verlag, Berlin, Germany: 65 89.
SNUSTAD D. P., SIMMONS M. J., JENKINS J. B:, 1997, Principles of genetics, John
Wiley & Sons, Inc., New York.
STINE G.J., 1989, The new human genetics, Wm. C. Brown Publishers, Dubuque,
Iowa.
STRACHAN T., 1992, The human genome. Bios Scientific Bublishers, Oxford.
STRACHAN T., READ A., 1996, Human molecular genetics. Bios Scientific
Bublishers Oxford.
TEFNESCU D., CLIN G., 1996, Genetica i cancerul, Ed. Didactic i
Pedagogic, R.A., Bucureti.
TEODORESCU FLORIN, 1996, Introducere n genetica psihopatologiei, Ed.
Neuron, Focani.
THOMPSON MCINNES WILLART, 1991, Genetics in medicine. Ann H. B. J.,
International edition, WB Saunders.
TRAUT W., 1991, Chromosomen - Klassische und molekulare Cytogenetik,
Spriger-Verlag, Berlin, Germany.
TUDOSE I. GH:, 1992, Genetica, vol. I, Ed. Universitii, Iai.
TUDOSE I. GH:, 1993, Genetica, vol.II, Ed. Universitii, Iai.
WATSON J. D., HOPKINS N. H., ROBERTS J. W., STEITZ J. A., WEINER A. M., 1987, Molecular biology of the gene, The Benjamin/Cummings Publishing Company Inc.
WEAVER R. F., HEDRICK P. H. W., 1991, Basic genetics, Wm. C. Brown Publishers,
Dubuque.
WPONG K., 2000, Asthma and the twin effect, Scientific American, September 25.
YUAN B., NEUMAN R. et al, 2000, Linkage of a gene for familial hypobetalipoproteinemia to chromosome 3p21.1-22, Am J Hum Genet, 66, 5:1699-1704

_____________________________________________________________

269

_____________________________________________________________

_____________________________________________________________

S-ar putea să vă placă și