Medii nutritive pentru cultivarea i diagnosticarea microorganismelor

Nr. Crt.
1.

Denumirea mediului
Bulion de carne cu
agar (BCA)

2.

Sabouraud

3.

Agar Endo

Compoziie
Mediu de cultur
universal, dens sau
semilichid, constituit din
bulion peptonat din carne
i agar
Mediu de cultur selectiv
pentru fungi i drojdii. Se
prepar din 1000 ml ap
distilat, 10 g pepton, 20
g glucoz i 20 g agar
Mediu de cultur selectiv,
n care se inhib
dezvoltarea bateriilor
gram-pozitive.

Scopul utilizrii
Cultivarea bacteriilor i
caracterizarea
morfologic a lor

Document normativ
GOST 10444-84

Cultivarea levurilor

GOST 10444.1-84

Identificarea bacteriilor
coliforme (E. coli)

Reactivi chimici i materiale de laborator

Nr. crt.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.

Reactivi i materiale
Ap distilat
Soluie KOH 0,1 n
Fenolftalein de 1%
Soluie de Na2S2O3-0,01 N
Iodur de potasiu (KI)
Acid acetic glacial
Soluie de NaOH 0,1 n
Amidon (C6H10O5)n
Alcool etilic 96%
Hexan
-brom-naftalin

Standard
GOST 6709-72
GOST 2463-80
GOST 11254-81
GOST 224-76
GOST 4232-74
GOST 5815-77
GOST 4328-77
GOST 10163-76
GOST 17300-72
2631-00205807999-98
2631-00205807999-98

Indice de peroxid
Principiul metodei
Se extrage grsimea din proba de analizat, la rece, cu cloroform i se trateaz un volum din extractul
cloroformic, n mediu de acid acetic, cu soluie de iodur de potasiu. Se titreaz iodul eliberat cu o soluie de
tiosulfat de sodiu cu titrul cunoscut.
Mod de lucru
Extracia grsimii
Din proba pregtit conform capitolului 5 se cntresc cu exactitate de 0,01 g, 30 g n cazul produselor cu un
coninut de grsime de pn la 10 % i 15 g n cazul produselor cu un coninut de grsime de peste 16 %. Se

introduce proba cntrit n vasul Erlenmeyer cu dop lefuit i se adaug 100 ml cloroform msurai cu cilindrul
gradat. Se nchide vasul i se agit puternic, mecanic sau manual timp de 10 min.
Suspensia astfel obinut se filtreaz imediat printr-un filtru cu porozitate mare avnd grij ca plnia s
fie acoperit cu o sticl de ceas n timpul filtrrii i colectnd extractul ntr-un vas Erlenmeyer.
Dup filtrare, se nchide imediat vasul Erlenmeyer cu extractul cloroformic astfel obinut.
Dozarea peroxizilor
Din extractul cloroformic obinut conform 6.1.2, se msoar 10 ml cu o pipet prevzut cu par de
cauciuc sau alt mijloc de suciune i se introduc ntr-un vas Erlenmeyer cu dop lefuit. Se adaug 15 ml acid
acetic i 1 ml soluie de iodur de potasiu.
Se nchide imediat vasul Erlenmeyer , se agit timp de un minut i se las n repaus timp de 5 min la
ntuneric. Timpul se msoar cu cronometrul. Dup ce au trecut cele 5 min se adaug 75 ml ap msurai cu
cilindrul gradat.
Se adaug 1 ml soluie de amidon i se titreaz iodul pus n libertate cu tiosulfat de sodiu, soluie 0,002
n, pentru indice de peroxid pn la 12 miliechivaleni la 1 kg sau cu soluie 0,01 n pentru indice de peroxid de
peste 12 miliechivaleni la 1 kg.
Dac se folosesc pentru titrare mai puin de 0,5 ml din soluia de tiosulfat de sodiu 0,01n, se repet
determinarea cu soluie de tiosulfat de sodiu 0,002 n.
Se efectueaz dou determinri paralele din aceeai prob pentru analiz.
n paralel se efectueaz o determinare martor cu aceeai reactivi, n aceleai condiii ca mai sus,
nlocuind extractul cloroformic, cu cloroform (10 ml).
Dac la determinarea martor se folosesc mai mult de 0,1 ml soluie de tiosulfat de sodiu 0,01 n trebuie
s se prepare noi reactivi.
Determinarea coninutului de grsime din extract
Din extractul cloroformic obinut conform 6.1 se msoar cu pipeta 10 ml i se introduc ntr-un pahar
Berzelius de 50 ml sau 100 ml, n prealabil splat i uscat n etuv la 103 2 C timp de o or, rcit n
exsicator la temperatura mediului ambiant i cntrit cu exactitate de 0,001 g. Se evapor cloroformul pe baia
de ap, departe de orice surs de nclzire cu flacr.
Paharul Berzelius cu grsime se usuc n etuv la 103 2 C, pn la mas constant (90 min) se rcete
n exsicator la temperatura mediului ambiant i se cntrete cu exactitate de 0,001 g.
Se efectueaz n paralel dou determinri din acelai extract.
Coninutul de grsime (m) se calculeaz fcnd media aritmetic a celor dou determinri.
Calculul i exprimarea rezultatelor
Indicele de peroxid, exprimat n miliechivaleni de oxigen activ la un kg grsime din produs, se
calculeaz cu formula:

IP =

( V 1V 0 )n
m

1000 [miliechivaleni/kg]

unde:
V1 este volumul soluiei de tiosulfat de sodiu utilizat la titrarea probei de analizat, n ml;
V0 este volumul soluiei de tiosulfat de sodiu utilizat la titrarea probei martor, n ml;
m este masa grsimii coninut n 10 ml extract cloroformic, n g;
n este normalitatea soluiei de tiosulfat de sodiu folosit la titrare (0,01 sau 0,002).
Rezultatul se calculeaz cu o zecimal.
Indicele de peroxid, exprimat n milimoli de oxigen activ la un kg grsime din produs sau n micrograme
de oxigen activ la un gram grsime din produs, se calculeaz prin nmulirea rezultatului obinut cu factorii de
transformare indicai n tabel.
Mod de exprimare
milimoli/kg
micrograme/g

Factor de transformare
0,5
8

Ca rezultat se ia media aritmetic a dou determinri efectuate n paralel, dac ndeplinesc condiiile de
repetabilitate.
Repetabilitate
Diferena dintre rezultatele a dou determinri efectuate n paralel, de acelai operator, din aceeai
prob, n cadrul aceluiai laborator nu trebuie s depeasc 0,5 miliechivaleni la 1 kg grsime din produs, n
cazul produselor cu indice de peroxid de pn la 12 echivaleni la 1 kg i 1,0 miliechivaleni la 1 kg grsime din
produs, n cazul produselor cu indice de peroxid mai mare de 12 miliechivaleni la 1 kg.

Indicele de aciditate
Principiul metodei
Se neutralizeaz acizii grai liberi, care se conin n proba de ulei vegetal / emulsie alimenar analizat cu
ajutorul soluiei etilice de hidroxid de potasiu n prezena indicatorului fenolftaleina .
Mod de lucru
ntr-o colb conic cu volumul de 250 ml se cntresc 5 g de prob cu precizia de 0,01 g. Apoi n proba
analizat se adaug 25 ml de cloroform i 25 ml alcool etilic. Coninutul colbei se amestec prin agitare, dup ce se

adaug cteva picturi de fenolftalein. Soluia obinut de ulei vegetal / emulsie alimentar analizat, agitate in
3

continuu, se titreaz cu soluie de hidroxid de potasiu cu concentraia molar de 0,1 moli/dm pn la apariia unei
nuane de culoare roz pal, stabil timp de 30 s.
Calculul rezultatelor
Indicele de aciditate (IA) se calculeaz dup formula:
V KOH N KOH 56,11
IA =
[mg KOH / 1 g ulei]
m
unde:
VKOH - volumul hidroxidului de potasiu consumat la titrare, ml;
3

NKOH - concentraia exact a soluiei standarde de hidroxid de potasiu folosit la titrare, mol/dm ;
3

56,11 - masa hidroxidului de potasiu, echivalent 1cm 1 mol/dm soluie de hidroxid de potasiu;
m - masa probei, g.
Rezultatul se calculeaz cu o zecimal.