UNIVERSITATEA DE TIINE AGRICOLE I

MEDICIN VETERINAR
"ION IONESCU DE LA BRAD"
IAI

Gheorghe rdea

Lucian Creu

GENETICA

2001

CUPRINS
CAPITOLUL 1
BAZELE CELULARE ALE EREDITII I VARIABILITII
(CITOGENETICA).... 1
1.1. Structura celulei procariote.... 1
1.2. Structura celulei eucariote. 3
1.3. Organizarea genomului la eucariote...... 11
1.3.1. Morfologia cromozomilor....... 11
1.3.2. Structura molecular a cromozomului. 18
1.3.3. Tipuri particulare de cromozomi. 19
1.4. Organizarea genomului la procariote (bacterii i virusuri). 22
1.5. Reproducerea celulei...23
1.5.1. Mitoza.. 23
1.5.2. Meioza..27
CAPITOLUL 2
BAZELE MOLECULARE ALE EREDIT|}II....
34
2.1. Dovezi privind rolul genetic al ADN.. 34
2.1.1. Transformarea la procariote. 35
2.1.2. Transfec]ia la procariote.. 36
2.1.3. Transformarea la eucariote.. 37
2.1.4. Materialul genetic al ribovirusurilor 38
2.2. Acizii nucleici [i roul lor genetic 38
2.2.1. Structura molecular\ a acidului dezoxiribonucleic (ADN). 38
2.2.2. Acidul ribonucleic (ARN)....41
2.2.3. Denaturarea [i renaturarea ADN.. 44
2.2.4. Replica]ia ADN....44
2.3. Codul genetic.. 46
2.4. Biosinteza proteinelor. 49
2.4.1. Transcrip]ia informa]iei genetice. 49
2.4.2. Transla]ia informa]iei genetice 50
2.5. Recombinarea genetic\ la bacterii.. 53
CAPITOLUL 3
EREDITATEA MENDELIAN 57
3.1. Terminologia folosit n genetica mendelian 57
3.2. Legile mendeliene ale ereditii.. 59
3.2.1. Legea segregrii caracterelor (legea puritii gameilor). 59
3.2.2. Legea segregrii independente a perechilor de caractere 62
3.3. ncruciarea analizatoare.64
CAPITOLUL 4
TEORIA CROMOZOMIC A EREDITII. 66
4.1. Gene i cromozomi. 66
4.2. Plasarea liniar a genelor pe cromozomi 68
4.3. Transmiterea nlnuit a genelor (linkage) 68
4.4. Schimbul reciproc de gene ntre cromozomii omologi (crossing-over). 70
4.5. Hrile cromozomice... 71

4.6. Hrile citologice.72

CAPITOLUL 5
DETERMINISMUL GENETIC AL SEXULUI.... 74
5.1. Generaliti..74
5.2. Determinismul cromozomic al sexelor... 75
5.3. Sexul n cazul nmulirii partenogenetice... 78
5.4. Determinismul genetic al sexului la plante. 78
5.5. Ereditatea caracterelor legate de sex...80
CAPITOLUL 6
EREDITATEA EXTRANUCLEAR... 84
6.1. Metode de evideniere a ereditii extranucleare.... 84
6.1.1. Fenomenul merogoniei.... 84
6.1.2. Ereditatea extranuclear n hibridarea reciproc..86
6.1.3. Testul heterocarion...86
6.2. Manifestarea ereditii extranucleare.. 87
6.2.1. Ereditatea prin plastide 87
6.2.2. Ereditatea mitocondrial.. 88
6.2.3. Androsterilitatea citoplasmatic i nucleo-plasmatic.89
CAPITOLUL 7
MUTAII GENETICE... 92
7.1. Clasificarea mutaiilor.92
7.2. Mutaiile spontane...93
7.3. Mutaiile artificiale..94
7.3.1. Radiaiile mutagene. 95
7.3.2. Temperatura. 96
7.3.3. Substanele chimice mutagene. 96
7.3.4. Factorii mutageni biologici.. 97
7.4. Mecanismul molecular al mutaiilor... 98
PARTEA II: AMELIORAREA PLANTELOR 100
CAPITOLUL 8
NOIUNI INTRODUCTIVE
8.1. Obiectul, coninutul i importana ameliorrii plantelor..
8.2. Legtura ameliorrii plantelor cu alte discipline..
8.3. Scurt istoric al ameliorrii plantelor.

100
100
101
102

CAPITOLUL 9
OBIECTIVELE AMELIORRII PLANTELOR.. 104
9.1. Ameliorarea capacitii de producie. 104
9.2. Ameliorarea calitii.. 105
9.3. Ameliorarea rezistenei la boli i duntori 106
9.4. Ameliorarea precocitii. 108
9.5. Ameliorarea rezistenei la cdere i scuturare 108
9.6. Ameliorarea rezistenei la iernare i la ngheurile trzii de primvar. 109
9.7. Ameliorarea rezistenei la secet i itvire. 109
9.8. Ameliorarea reaciei favorabile la irigare i mecanizare 109

CAPITOLUL 10
MATERIALUL INIIAL DEAMELIORARE 110
10.1. Importana materialului iniial. 110
10.2. Formele materialului iniial.. 110
CAPITOLUL 11
METODELE DE AMELIORARE A PLANTELOR AGRICOLE 113
11.1. Alegerea metodei de ameliorare.. 113
11.2. Clasificarea i caracterizarea metodelor de ameliorare 114
11.3. Selecia n procesul de ameliorare 114
11.3.1. Efectul seleciei n funcie de modul de reproducere al plantelor. 117
11.3.2. Metodele de selecie.. 118
11.3.3. Clasificarea metodelor de selecie. 119
11.4. Hibridarea ca metod de ameliorare. 127
11.4.1. Importana i baza teoretic a hibridrii 127
11.4.2. Clasificarea metodelor de hibridare.. 128
11.5. Consangvinizarea la plante.. 131
11.5.1. Efectele consangvinizrii.. 131
11.6. Mutaiile n ameliorarea plantelor 133
11.6.1. Definiie i clasificare 133
11.6.2. Selecia mutantelor 133
11.6.3. Utilizarea mutaiilor n ameliorare 134
11.7. Poliploidia (mutaiile de genom).. 134
11.7.1. Definiie i clasificare 134
11.7.2. Obinerea poliploizilor.. 136
11.7.3. Folosirea mutaiilor de genom n ameliorare 137
11.8. Metode moderne utilizate n ameliorarea plantelor.. 138
BIBLIOGRAFIE SELECTIV. 140

Prefa
nceputul mileniului trei se poate caracteriza printr-o explozie de
nouti n toate domeniile tiinifice, inclusiv n cel al biologiei. Genetica,
tiina ereditii i variabilitii lumii vii, nu putea s nu ofere la rndul ei, prin
problemele ce le ridic omenirea, o serie impresionant de realizri n
domeniul vegetal, animal i nu n ultimul rnd, n domeniul uman.
Succesiunea problemelor prezentate n lucrare a avut n vedere
programele analitice actuale ale cursului de Genetic vegetal predat
studenilor Facultilor de Agricultur i Horticultur.
Am fost tentai s abordm principalele aspecte de genetic ntr-o
form aproximativ cronologic, dar analiznd noiunile de genetic predate
la liceu, am considerat c este mai util ca studenii s ia contact mai nti cu
bazele celulare i moleculare ale ereditii i variabilitii, iar apoi s
revenim la aspectele geneticii clasice.
Elaborarea unui manual universitar de genetic vegetal este o
problem dificil, deoarece ntr-un volum limitat, am cutat s analizm,
succint, un numr ct mai mare de aspecte ale ereditii.
Lucrarea se adreseaz tuturor celor care se intereseaz de tainele
acestei tiine, dar n mod deosebit studenilor care urmeaz forma de
nvmnt la distan, pentru care am prezentat materialul ntr-un mod mai
concis.

CAPITOLUL 1
BAZELE CELULARE ALE EREDITII I VARIABILITII
(CITOGENETICA)
Motto:
"Precum istoria Pmntului este nscris n straturile sale geologice,
tot astfel istoria unui organism este nscris n cromozomii si"
H. Kihara

1.1. STRUCTURA CELULEI PROCARIOTE

Procariotele sunt organisme cu o structur simpl, ce cuprind vieuitoare acelulare, din
care fac parte viroizii, virusurile i micoplasmele i vieuitoare celulare, bacteriile i algele
albastre-verzi (cianoficeele).
Materialul genetic este reprezentat de o molecul de ADN sau ARN, necomplexat cu
proteine histonice sau nehistonice. Cromozomul procariotelor se gsete n contact direct cu
citoplasma, deoarece compartimentarea celular i specializarea membranelor este abia schiat.
Viroizii sunt ageni infecioi reprezentai de o molecul scurt de ARN, lipsii de nveli
proteic. Primii viroizi au fost identificai ca ageni ce produc boala cartofilor fuziformi sau
stelarea cartofilor, ulterior identificndu-se n cazul mai multor boli grave. Majoritatea viroizilor
se gsesc n nucleul celulei gazd, replicarea ARN viroidal depinznd strict de complexul
enzimatic al celulei gazd.
Virusurile sunt particule infecioase acelulare, submicroscopice, care produc bolile
cunoscute sub denumirea de viroze. Virusurile atac toate organismele, de la bacterii
(bacteriofagi), pn la celulele animale i vegetale.
Virusurile sunt lipsite de complexul enzimatic necesar sintezei de substane energetice i
reproducerii. De aceea, virusurile folosesc mecanismele i organitele celulei gazd pentru
reproducere, fiind considerate organisme parazite obligatoriu sau, altfel spus, parazite la nivel
genetic. Celula gazd produce i furnizeaz precursorii necesari replicrii moleculei de acid
nucleic viral i a proteinelor virale, care apoi se asambleaz, rezultnd o nou particul viral.
Particulele virale, de obicei, lizeaz (distrug) membrana celulei gazd, putnd produce noi
infecii.

Structura particulei virale a fost descoperit de A.D. Hershey i M. Chase, n anul 1952.
Particula viral este alctuit dintr-un nveli proteic, denumit capsid, format dintr-o singur
protein sau din mai multe proteine stratificate, iar la virusurile mai mari se adaug lipide i
glucide. Capsida poate avea diverse forme, n funcie de natura subunitilor proteice, care au fost
denumite capsomere. La unele virusuri (R17, F2, virusul herpesului), capsida poate fi nconjurat
de un nveli proteic extern (anvelop extern) cu ajutorul cruia fagul ader pe membrana celulei
gazd.
n interiorul capsidei se gsete materialul genetic reprezentat de o molecul de ADN
(dezoxiribovirusuri) sau o molecul de ARN (ribovirusuri), de mrimi diferite, specifice fiecrui
tip de virus.
La unii bacteriofagi (virusuri ale bacteriilor) capsida se continu cu o coad cu simetrie
elicoidal, la ale crei extremiti sunt prezente mai multe filamente codale, ce asigur contactul
cu celula parazitat (figura 1.1.).

Fig. 1.1. Structura celulei la procariote:

A-dezoxiribovirus; B-micoplasm; C-bacterie; D-cianoficee
(mz-mezozom, rb-ribozom, p-peretele celular, pl-plasmalema,
r-produs de rezerv, t-tilacoid) (dup Roland i Szllsi)

Micoplasmele sunt organisme extrem de simple, care nu au perete celular fiind

delimitate de plasmalem, n interiorul creia se gsesc cteva sute de ribozomi i un cromozom
reprezentat de o molecul de ADN (figura 1.1.). Dei au o structur foarte simpl, sunt capabile
s-i sintetizeze n mod independent proteinele i ATP necesare metabolismului. Micoplasmele
produc o serie de boli att la animale (pleuropneumonia taurinelor), ct i la plante (stolburul
solanaceelor, cloroza asterului, nanismul porumbului etc.).
Celula bacterian. Este delimitat la exterior de un perete celular rigid, alctuit din
glicoproteine complexe (de tipul mureinelor), care, n funcie de structura chimic, confer
acesteia caracteristicile de imunitate i patogenitate. Plasmalema, de natur lipo-proteic este

situat pe faa intern a peretelui celular, delimitnd citoplasma (figura 1.1.). Citoplasma nu este
omogen din punct de vedere structural, nglobnd o serie de vezicule membranoase,
microfibrile, ribozomi, glucide de rezerv etc. Zona central a citoplasmei cuprinde o mas dens
de microfibrile, reprezentnd molecula de ADN, ce constituie materialul genetic. ADN este
bicatenar, circular, necomplexat cu histone, cu o lungime de aproape 1 mm. Aceast molecul de
ADN constituie cromozomul sau genoforul bacterian. n jurul su citoplasma este mai dens,
rezultnd aa numitul nucleoid, care este lipsit de membran i nucleol.
Cercetarea electronomicroscopic a bacteriilor a evideniat o serie de invaginri tubulare
sau lamelare ale plasmalemei, denumite mezozomi. Mezozomii sunt accesorii ale genoforilor
implicai n activitatea respiratorie, replicarea semiconservativ a ADN i diviziunea celulei (F.
Jacob, 1966).
Cianoficeele (algele albastre-verzi) sunt cele mai vechi organisme cunoscute,
unicelulare, de form filamentoas (Oscillatoria), globuloas (Spirulina), care au o organizare
destul de apropiat celei bacteriene. La cianoficee, invaginaiile plasmalemice au forme
aplatizate, grupate n pachete de vezicule membranoase, denumite tilacoide, ce conin pigmeni
fotosintetizatori (figura 1.1.).

1.2. STRUCTURA CELULEI EUCARIOTE

Celula eucariot, vegetal sau animal, delimitat de membrana celular este alctuit
din protoplasm, care conine dou componente fundamentale: citoplasma i nucleul.
Citoplasma are o compartimentare strict, coninnd organite citoplasmatice lipsite de
membran (microtubuli, centrioli, microfilamente, ribozomi), cu membran simpl (reticul
endoplasmic, aparatul Golgi, lizozomi, peroxizomi, glioxizomi, lomazomi) i cu membran dubl
sau anvelop (nucleu, plastide, mitocondrii) (Toma C. i colab., 1995).
Membrana celular. Constituie nveliul extern al celulei i are rol de efector al
controlului schimburilor de substane dintre coninutul celulei i mediul ambiant. Ea este
reprezentat de stratul bimolecular fosfolipidic, care poart pe faa sa extern un strat proteic
bogat n hidrai de carbon, iar pe faa sa intern un singur lan proteic. La microscopul electronic
apare format din dou straturi, fiecare de cte 20 grosime, ntre care se afl un spaiu clar de
35 .

La animale, celula are la exterior doar membrana plasmatic. La plante, celulele sunt
nvelite n plus, la exterior, de un perete celular impregnat cu celuloz, lignin, sruri sau alte
substane. Aceasta prezint o mare importan economic, cum ar fi de exemplu n cazul
plantelor textile, de la care se obin fibre pentru industria textil.
Citoplasma. Reprezint partea celulei situat ntre membrana plasmatic i membrana
nuclear. Este alctuit dintr-o matrice citoplasmatic i organite citoplasmatice.
Matricea const dintr-o plasm coloidal, reprezentnd un sistem heterogen format din
lanuri macromoleculare i agregate moleculare, precum i enzime, substane metabolice de
rezerv etc.
Organitele citoplasmatice, caracteristice principial pentru toate celulele sunt: reticulul
endoplasmic, mitocondriile, ribozomii, corpusculii Golgi (prezente n toate celulele),
cloroplastele (la speciile vegetale fototrofe), centriolii (n celulele animale, la unele alge i
ciuperci), lizozomii (n celulele animale i, probabil, ale unor plante).
Reticulul endoplasmic. La microscopul electronic n citoplasm a fost descoperit un
sistem de cisterne, vezicule i canalicule, denumite de K. Porter (1953) reticul endoplasmic.
Canaliculele au un diametru de 500 , iar cisternele pn la 1500 . Starea n care la plante i
animale ribozomii sunt ataai de reticulul endoplasmic s-a numit ergastoplasm.
Mitocondriile. Sunt organite citoplasmatice care se gsesc n mod obinuit n toate
celulele. Ele au fost studiate la animale mai mult dect la plante, dei, n general, au aceeai
structur i funcie.
Mitocondriile variaz ca mrime, de la 0,2 (limita de rezoluie a microscopului
obinuit) pn la civa . Mitocondriile au diferite forme, dup celulele din care fac parte
(bastonae, filiforme, sferice etc.). n celula vie ele apar mobile, fiind antrenate de micrile
citoplasmice. Numrul acestor organite variaz de la un esut la altul; astfel, se gsesc n numr
mare n celulele ce aparin unor esuturi cu activitate intens (celulele meristematice, miofibrile,
tuburile renale etc.).
Mitocondriile sunt nconjurate de o membran dubl, asemntoare aceleia de la
exteriorul celulei. Membrana intern formeaz numeroase invaginri (criste mitocondriale), care
mresc foarte mult suprafaa activ a mitocondriilor. Aceste organite constituie centrul unor
trepte ale procesului de respiraie aerob. Ele posed enzimele necesare cu rol n oxidarea
grsimilor i de fosforilare.
Studiul complex al mitocondriilor a relevat existena unui ADN mitocondrial i a unui
aparat enzimatic propriu, ce permite sinteza unor proteine caracteristice. ADN din mitocondrii

este bicatenar, circular, asemntor ADN bacterian. Pe aceast baz s-a tras concluzia c
mitocondriile (ca i plastidele) deriv din organisme procariote, care au invadat celulele
eucariotelor i s-au subordonat nucleului acestora.
Aparatul genetic mitocondrial explic localizarea unor nsuiri la nivelul citoplasmic,
deoarece astzi se tie precis c mitocondriile au proprietatea de a crete, de a se divide i posed
continuitate celular i genetic. Genele mitocondriale se transmit pe cale citoplasmatic, pe linie
matern. Mutaiile care apar la nivelul mitocondriilor afecteaz n primul rnd funciile de
respiraie. Aceste mutaii pot s apar cu o frecven relativ mare i se transmit pe linie matern
la descendeni.
Ribozomii. Sunt corpusculi submicroscopici cu dimensiuni cuprinse ntre 50-200 ,
care se gsesc n citoplasm, cloroplaste, mitocondrii.
Ribozomii conin acizi ribonucleici ribozomali i proteine ribozomale n proporie de
aproximativ 1:1. Din cauza coninutului ridicat n acid ribonucleic ribozomal (ARNr), G. E.
Palade (1953), descoperitorul acestor particule, le-a denumit ribozomi. Ei se gsesc liberi n
citoplasm sau fixai de reticulul endoplasmic.
n celul, ribozomii ndeplinesc un rol deosebit de important, prin participarea lor la
sinteza proteinelor. Ei se gsesc n cantitate mare n esuturile cu diviziuni celulare intense, n
care sinteza proteic se realizeaz, de asemenea, intens. n sinteza proteic, ribozomii devin activi
prin asocierea lor cu moleculele de acid ribonucleic mesager (ARNm) mpreun cu care formeaz
poliribozomi.
Ribozomii liberi particip la sinteza proteinelor necesare proceselor de difereniere
celular, a unor proteine cu funcii specifice i de formare a organitelor citoplasmatice, n timp ce
ribozomii ataai reticulului endoplasmic particip la sinteza proteinelor destinate secreiei
celulare i depozitrii proteinelor sintetizate la nivelul celulei.
n ceea ce privete originea ribozomilor, cercetrile au artat c la nivelul nucleolului se
produce sinteza componentelor de baz ale acestora (ARNr i proteine ribozomale), care la
nivelul citoplasmei se asambleaz n proporie egal.
Ribozomii au mrimi diferite i se pot clasifica dup constanta de sedimentare (S) la
ultracentrifugare n: categoria de 70 S (140-180 ) prezeni la bacterii i alge verzi i de 80 S
(260-300 ) prezeni n celulele eucariotelor (plante superioare, criptogame i animale).
Cloroplastele. Sunt organite prezente n citoplasma celulelor vegetale. Ele conin
clorofil ce imprim culoarea verde esutului n care se gsesc, iar prin implicarea lor n procesul
de fotosintez dein rolul de productori primari.

Prezena cloroplastelor n celule nu este permanent, ele se formeaz, ca i

mitocondriile, cu care au trsturi comune, din formaiuni submicroscopice, cu dimensiuni de
aproximativ 500 , numite proplastide.
Studiile de microscopie electronic au evideniat 3 componente structurale ale
cloroplastului: membrana dubl la exterior, stroma sau substana fundamental a cloroplastului i
grana, un ansamblu de structuri bogate n clorofil.
Membrana cloroplastului este dubl, ntre cea extern i cea intern fiind un spaiu liber.
Membrana extern este neted, iar cea intern prezint o serie de cute duble, care mresc
suprafaa funcional a acesteia.
Stroma este alctuit din substana fundamental i o serie de incluziuni, cum ar fi:
granule de amidon, nucleotide grupate n fibrile de ADN, ribozomi, plastoglobule osmiofile.
Substana fundamental este constituit din proteine, n mare parte enzime ce particip la
replicarea ADN cloroplastic, sinteza ARNm (transcripie) i a moleculelor specifice fotosintezei.
Pe lng proteine, substana fundamental conine un numr mare de molecule organice, din
grupa zaharurilor, aminoacizilor, nucleotidelor, dar i ioni de Mg2+ i PO3-.
Grana este un sistem membranar complex alctuit din particule verzi denumite granum,
bogate n clorofil, de diferite tipuri, implicat n fotosintez.
Prin constana i continuitatea celular, cloroplastul ndeplinete caracteristicile de baz
ale materialului genetic. ADN cloroplastic este o molecul bicatenar, circular, cu o
circumferin de 40-50 , ataat de membrana cloroplastului asemntor cromozomului
bacterian. Pe lng ADN, ce stocheaz informaia genetic, cloroplastul posed ntregul complex
macromolecular necesar replicaiei, transcripiei i translaiei acesteia. O caracteristic important
a plastidelor, i deci i a cloroplastelor, este aceea c, de regul, se transmit pe cale
citoplasmatic, cel mai frecvent pe linie matern.
Aparatul Golgi. A fost descoperit de Camillo Golgi (1844-1926), n anul 1898, mai
nti n celulele nervoase animale. Ulterior, s-a evideniat n toate celulele animale i vegetale.
Aparatul Golgi este bine dezvoltat n toate celulele active, reducndu-i extinderea n
celulele aflate n repaus i dispare n celulele btrne. Este alctuit din uniti morfologice i
structurale denumite dictiozomi, complexate cu vezicule golgiene.
Dictiozomii sunt formai din elemente de form tubular sau vezicular, aplatizate,
curbate i dilatate la capete, delimitate de o membran lipoproteic. Veziculele golgiene,
delimitate de membrane lipoproteice rezult din dictiozomi, printr-un proces de nmugurire
lateral a tuburilor sau veziculelor.

Complexul Golgi este localizat n apropierea nucleului, avnd un rol deosebit de

important n transformarea unor substane sintetizate la nivelul reticulului endoplasmic i
orientarea acestora spre plasmalem, pentru a fi utilizate n alte sinteze sau pentru a fi eliminate
n exteriorul celulei.
n afara rolului deinut de aparatul Golgi n procesele de secreie, la plante, veziculele
golgiene particip la formarea fragmoplastului i a lamelei mediane n citokinez i chiar n
regenerarea plasmalemei. Dup Fain-Maurel, 1992, aparatul Golgi, prin interaciunile sale cu
reticulul endoplasmic granular (ergastoplasma), unde are loc sinteza i descompunerea
proteinelor de secreie i biogeneza membranelor celulare, constituie "placa turnant a
metabolismului celular i a traficului membranar" (Toma, C. i colab., 1997).
Centrozomul. Este o formaie citoplasmic ce se gsete n apropierea nucleului i care
apare la microscop sub forma unei zone clare, luminoase, omogene, cu un centru granular opac,
alctuit din doi centrioli. El este prezent n toate celulele animalelor i la plantele inferioare
(lipsete la angiosperme). n jurul centrozomului se observ filamente radiare ce formeaz aanumitul aster, precum i tubulii fusului de diviziune. Acestea apar numai n timpul diviziunii
mitotice.
Centrozomul joac rol important n diviziunea celular. El se divide n doi centrozomifii, numii sfere directrice. n jurul fiecruia se formeaz cte un aster. Sferele directrice se
deplaseaz apoi spre cei doi poli ai celulei. Datorit autoreplicrii, n fiecare centrozom se gsesc
doi centrioli. Acetia sunt nzestrai, n general, cu continuitate genetic. Centriolii se separ n
structuri duplex la nceputul fiecrei noi diviziuni (profaza urmtoare).
n citoplasm se afl factorii ereditari responsabili pentru ereditatea extranuclear plasmagenele.
O schem general a structurii celulei, alctuit dup imaginile obinute la microscopul
electronic este prezentat n figura 1.2.

Fig. 1.2. Schema unei celule alctuit dup datele obinute

cu microscopul electronic (dup Brachet, 1961)

NUCLEUL
Datorit componentelor sale principale, cromozomii, nucleului i s-a acordat o deosebit
atenie n cercetrile de genetic. De peste 100 de ani de cnd se studiaz acest principal element
al celulei s-au acumulat multe date n legtur cu structura lui fizic, chimic i funcional.
La organismele eucariote, n majoritatea cazurilor, nucleul are o form ovoid i ocup
poriunea central a celulei. La celulele cu metabolism intens, nucleul ia contururi foarte
neregulate. De exemplu, nucleii din celulele endospermului leguminoaselor au form spiralat.
Forme neregulate iau i nucleii unor esuturi bolnave, a cror activitate metabolic se mrete
(celula canceroas).
Nucleul ocup, de obicei, 10-20% din volumul celulei i conine 15-25% din azotul
acesteia. Excepie fac spermatozoizii i anterozoizii, la care citoplasma ocup un volum foarte
mic.
Nucleul conine 14% ADN, 12% ARN, 22,5% proteine bazice i 51,5% proteine stabile.
Din proteinele bazice fac parte protaminele i histonele, bogate n aminoacizii lizin, histidin i,
mai ales, arginin. ADN se gsete n structurile cromatice, n timp ce ARN mai ales n nucleoli.
n nucleu se mai gsesc enzime, lipide, ioni de Ca, Mg, Cu etc.

Nucleul este delimitat la exterior de o membran nuclear i conine n interior

nucleoplasma, cromatina i nucleolii.
Aa cum s-a precizat, la procariote, reprezentate de organisme unicelulare, nucleoidul
este difuz i fr membran. Nucleoidul nu este complexat cu proteine bazice de tipul histonelor.
Acesta se divide prin amitoz.
Membrana nuclear. Datele actuale cu privire la membrana nucleului au fost obinute
cu ajutorul microscopului electronic. Ea apare format din 2 membrane cu o grosime de 75 ,
separate de un spaiu de 100-300 .
Structura membranei nucleare este foarte asemntoare cu aceea a membranei
mitocondriilor i are o compoziie lipoproteic. Spre deosebire de aceasta, ea este prevzut cu un
sistem de pori ce permite schimbul de substane ntre nucleu i citoplasm i chiar direct cu
exteriorul celulei.
Cromatina. Este un complex biochimic constituit din fibre nucleoproteice (proteine i
ADN) n proporie de aproximativ 96%, mai multe tipuri de holoproteine i fosfolipide. Unitile
structurale ale cromatinei sunt nucleosomii, alctuii din molecule de ADN i 4 fracii de proteine
histonice (H2A, H2B, H3 i H4). La fiecare nucleosom se asociaz fracia histonic H1, care joac
un rol important n spiralizarea fibrelor de cromatin.
Cariolimfa. n interiorul nucleului se gsete un lichid n stare de sol numit cariolimf,
nucleoplasm sau suc nuclear. El conine proteine, lipoizi, enzime, acizi nucleici, o serie de
cationi (Na, Ca, Mg) .a.
Se cunosc puine date n legtur cu structura filamentului de cromatin, deoarece este
prea fin pentru puterea de mrire a microscopului obinuit i prea mare pentru aceea a
microscopului electronic.
Nucleolul. Nucleolii sunt globuli refringeni, vizibili la microscopul obinuit sau cu
contrast de faz, n interfaz. Numrul lor variaz n funcie de specie, fiind ns constant n
celulele aceleiai specii. Dimensiunile nucleolilor depind de mrimea nucleului, durata interfazei,
funcia celulelor .a.
Nucleolii se formeaz n zona constriciei secundare a cromozomilor, asociai cu o
anumit regiune denumit organizator nucleolar.
n timpul diviziunii mitotice, nucleolii sufer un ciclu de transformri inverse acelora
prin care trec cromozomii. Ei sunt vizibili n interfaz, dispar n profaz i reapar la sfritul
anafazei.

Din punct de vedere chimic nucleolii cuprind dou grupe de substane (proteine i acid
ribonucleic), care formeaz un complex ribonucleoproteic. Pe lng aceste substane, nucleolul
mai conine i o cantitate mare de fosfolipide i alte lipide. El sintetizeaz o mare cantitate de
ARN care migreaz n citoplasm.

1.3. ORGANIZAREA GENOMULUI LA EUCARIOTE

Cromozomii sunt structuri permanente n nucleul celulei i constituie materialul genetic
de baz. n cromozomi sunt localizate genele. La microscopul fotonic cromozomii devin vizibili
numai n timpul diviziunii celulare. Cu ajutorul unor tehnici perfecionate de investigaie s-a
stabilit c ei sunt prezeni tot timpul n celul, dar sufer unele schimbri n diferitele etape care
se succed n viaa celulei. Numrul i structura lor genetic rmn ns constante de-a lungul
generaiilor.

1.3.1. Morfologia cromozomilor

Aspectul cromozomilor poate fi bine studiat n cursul diviziunii celulare mitotice, n
metafaz, cnd se coloreaz foarte intens. Ei sunt constituii din perechi identice, dar diferii ca
mrime i form de la pereche la pereche. La speciile dioice exist o pereche de cromozomi, care
difer morfologic de la un sex la altul, denumii heterozomi sau cromozomi ai sexului, avnd un
rol special n determinarea sexului. Celelalte perechi de cromozomi, care alctuiesc majoritatea
cromozomilor poart numele de autozomi. Segmentul cromozomic situat terminal fa de
constricia secundar a cptat denumirea de satelit. Satelitul servete la identificarea
cromozomilor cu organizator nucleolar. Deci, numrul nucleolilor dintr-un nucleu este egal cu
numrul cromozomilor cu satelit.
Fiecare cromozom este format din dou cromatide unite printr-o formaie cu diametrul
mai mic numit centromer. Deoarece n zona centromerului cromozomul are diametrul mai mic,
acestei zone i s-a dat denumirea de constricie primar (spre deosebire de constricia secundar
din regiunea organizatorului nucleolar).
Centromerul are un rol important n timpul diviziunii celulare deoarece servete la
ataarea cromozomilor de fibrele fusului nuclear, este considerat motorul neurochimic ce
determin deplasarea cromozomilor n mixoplasma celulei n diviziune, iar n meioz determin
sinapsa cromozomilor omologi i constituie locul ce marcheaz separarea cromatidelor la
sfritul metafazei i nceputul anafazei.

Poziia centromerului n cromozom determin formarea a dou brae egale sau inegale,
prin urmare existena mai multor tipuri morfologice de cromozomi:
- metacentrici, centromerul este plasat la jumtatea distanei dintre cele dou capete,
braele fiind egale;
- submetacentrici, centromerul este localizat submedian, braele fiind inegale;
- acrocentrici, centromerul este localizat subterminal, braele fiind accentuat inegale
(fig. 1.3.).
Cromozomii telocentrici, cu centromerul situat strict terminal, nefiind stabili, s-a
renunat la aceast grup morfologic (Swanson i colab., 1981, citai de Crlan, M.,1996).

Fig. 1.3. Tipuri de cromozomi:

a-metacentric; b-submetacentric; c-acrocentric; d-cromozomi de Lilium;
P-constricie primar; S-constricie secundar, zona organizatorului nucleolar

Extremitile cromatidelor sunt delimitate de formaiuni denumite telomere. Telomerele

reprezint zone n care cromatina este puternic condensat, asigurnd stabilitatea i
individualitatea cromozomilor pe parcursul diviziunii celulare. Telomerele mpiedic fuzionarea
cromozomilor cap-la-cap n metafaz i anafaz.
Forma cromozomilor. Este caracteristic fiecrei specii, dar poate varia i n funcie de
specializarea celulei n esut, de starea fiziologic a celulei i de influena diferiilor factori
externi. O celul somatic are patru perechi de cromozomi i anume: dou perechi de forma
literei V, o pereche de form sferic i o pereche heteromorf: la masculi, alctuit dintr-un
cromozom sub form de bastona i unul sub form de crlig, n timp ce la femel ambii
cromozomi ai perechii sunt identici. Aceti cromozomi au rol n determinarea sexului (fig. 1.4.).
n celulele somatice cromozomii sunt perechi. Cromozomii unei perechi au aceeai
form, mrime i aceleai gene alele i se numesc cromozomi omologi. n fiecare pereche de
cromozomi omologi, unul este de provenien matern, iar cellalt, patern, caracteristic

determinat de faptul c celula-ou (zigotul), rezultat al fecundrii, cumuleaz setul haploid de

cromozomi ai mamei i ai tatlui.

Fig. 1.4. Cromozomii somatici

la Drosophila melanogaster ()

Mrimea cromozomilor. Variaz n funcie de specie i, ntr-o msur foarte mic, de

unele condiii de mediu. Ca lungime, pot atinge valori cuprinse ntre 1-25 , iar ca grosime valori
de 0,1-2 . S-ar prea, n general, c mrimea lor este proporional cu mrimea celulei i invers
proporional cu numrul lor. De asemenea, cercetrile arat c lungimea cromozomului este, n
general, proporional cu numrul de gene pe care le conine.
Anumii factori de mediu pot influena mrimea cromozomilor. De exemplu, scderea
temperaturii face ca n celulele vegetale n plin diviziune s apar cromozomi mai contractai,
mai scuri. Prezena alcaloidului colchicin, n timpul diviziunii celulare, scurteaz, de asemenea,
cromozomii.
Numrul de cromozomi. Este relativ constant pentru indivizii ce alctuiesc o specie de
plante sau animale. Acest numr variaz n limite mari la diferite specii, de la doi ci ntlnim n
celulele somatice la Ascaris megalocephala, pn la cteva sute (Amoeba proteus).
n celulele somatice numrul lor este dublu (diploid) i se noteaz cu 2n, iar n celulele
sexuale este redus la jumtate (haploid) i se noteaz cu n. n tabelul 1.1. se indic la cteva
specii de plante i animale numrul n i 2n de cromozomi.
Simbolul x indic numrul haploid de cromozomi ai speciilor diploide strmoeti
denumit numr de baz, numr monoploid sau genom.
Dei numrul cromozomilor reprezint un caracter de specie, se pot ntlni specii cu
acelai numr de cromozomi, cu toate c aparin unor grupe ndeprtate din punct de vedere
sistematic. Acest numr nu este legat deci de poziia sistematic a speciei n lanul filogenetic.

Tabelul 1.1.
Numrul de cromozomi la diferite specii de plante i animale
Plante
Triticum monococcum
Triticum durum
Triticum aestivum
Zea mays
Oryza sativa
Secale cereale
Hordeum sativum
Medicago sativa
Trifolium pratense
Trifolium repens
Vicia faba
Pisum sativum
Solanum tuberosum
Helianthus annuus
Beta vulgaris
Cannabis sativa
Vitis vinifera
Pyrus communis
Malus baccata
Neurospora crassa
Escherichia coli

n
99

2n
99

Animale
Drosophila melanogaster
Culex pipiens
Bombyx mori
Plasmodium malariae
Ascaris megalocephala
Cyprinus carpio
Musca domestica
Blatta orientalis
Apis melifera
Rana esculenta
Gallus domestica
Columba liva
Lepus cuniculus
Mus musculus
Cannis familiaris
Capra hircus
Equus caballus
Sus scrofa
Ovis aries
Bos taurus
Homo sapiens sapiens

n
99

2n
99

Constana numrului de cromozomi este totui relativ. Starea organismului i condiiile

externe pot produce modificri asupra numrului de cromozomi n celul. Numrul de
cromozomi poate varia n funcie de esutul n care se afl celula. Astfel, n ficatul animalelor
numrul garniturilor de cromozomi este un multiplu al numrului de cromozomi din celulele
sexuale ale aceluiai organism (4x, 8x etc.). La speciile de plante angiosperme, nucleii din
celulele endospermului, datorit fenomenului dublei fecundri, conin trei garnituri de
cromozomi, fiind simbolizat 3n.
Numrul, forma i mrimea cromozomilor n metafaz, din celulele somatice ale unui
organism, sunt indicate prin noiunea de cariotip. n figura 1.5. sunt redate cariotipurile la diferite
specii.

Fig. 1.5. Cariotipul la diferite specii de plante

Structura cromozomului. Cromozomii sunt formai din dou uniti alipite n lungul
lor numite cromatide. Cu ajutorul microscopului electronic s-a descoperit c aceste uniti se
compun, la rndul lor, din cte dou subuniti numite cromoneme. n fiecare cromozom, dou
cromoneme alctuiesc cte o cromatid. n preajma diviziunii celulare, cromonemele se
spiralizeaz i se scurteaz. Spiralizarea este inegal, aa c exist zone cu spire mai dense i mai
puin dense. La microscopul optic aceste poriuni apar ca o succesiune de granule, nirate ca
mrgelele ntr-un irag, denumite cromomere.
S-a crezut mult timp c aceste cromomere ar reprezenta uniti funcionale - genele. n
realitate, aceste ngrori vizibile sunt poriuni de spirale mai dense, ce dau aspectul de granule de
culoare mai nchis. Cromomerele includ un numr variabil de gene.
O structur important care joac un rol n evoluia cromozomului este heterocromatina.
n legtur cu particularitile ei s-au adunat multe date, unele contradictorii, aa nct, pn n
prezent, nu s-a cristalizat o concepie unitar asupra acestei formaiuni. Se tie ns precis c n
toate stadiile ciclului mitotic unele sectoare ale cromozomului se coloreaz intens. Acestea s-au
denumit sectoare heterocromatice, spre deosebire de altele eucromatice, care se coloreaz mai
slab. Sectoarele cu heterocromatin se gsesc, n general, n apropierea centromerului. Ele ns,
ca localizare, sufer variaii determinate de influena diferiilor factori externi. Se consider c
regiunile eucromatice conin, n general, marea majoritate a genelor, n timp ce regiunile
heterocromatice sunt practic lipsite de gene.
O schem general privind structura microscopic a cromozomului este prezentat n
figura 1.6.
Compoziia chimic a cromozomilor. Analiza chimic a cromozomilor a relevat faptul
c ei sunt constituii din macromolecule de ADN i ARN, proteine cu nsuiri bazice (histone),
proteine acide (nehistone), alturi de alte substane n cantiti mai mici: lipide, magneziu, calciu,
enzime. Complexul ADN-histone constituie substana structural fundamental a cromozomului,
n timp ce ARN, care se formeaz la nivelul cromozomului, este transferat n citoplasm, avnd
rol n procesul de biosintez a proteinelor.

Fig. 1.6. Morfologia i structura unui cromozom

Dintre toi componenii cromozomilor, ADN se gsete n cantitate constant. n celulele

somatice cantitatea lui este dubl fa de cantitatea din celulele sexuale ale aceluiai organism,
variind ns de la specie la specie. ARN se gsete n cromozomi n cantiti foarte variabile, de
la 3 la 35%. La fel de variabil este i cantitatea de proteine nehistonice, aceasta fiind sub
dependena activitii genelor.
n tabelul 1.2. este prezentat compoziia chimic a cromozomilor.
Tabelul 1.2
Compoziia chimic a cromozomilor (%)
Sursa

ADN

Histone

Embrion de pasre
Mugure de mazre
Cotiledon de mazre
Ficat de obolan
Timus de viel
Blastul de arici de mare
Larv de arici de mare

39,0
40,0
43,5
47,0
40,2
39,0
33,4

40,0
52,0
34,5
37,0
46,0
41,0
29,0

Nehistone
11,0
4,0
16,0
15,0
13,0
19,0
35,0

1.3.2. Structura molecular a cromozomului

ARN
10,0
4,0
6,0
1,0
0,3
1,0
2,6

ADN activ n
transcripie
12,0
6,0
32,0
20,0
15,0
10,0
20,0

S-au acumulat multe date n legtur cu compoziia chimic a cromozomilor. Nu acelai

lucru se poate afirma despre structura molecular a cromozomilor de la organismele eucariote, a
configuraiei structurale a elementelor ce alctuiesc aceast compoziie chimic.
Din aceast cauz, s-a ncercat a se crea diferite modele de structur, care s in seama
de prezena unui numr mare de molecule de ADN, de dispunerea unui numr mare de gene pe
cromozomi, de posibilitatea dublrii unei singure cromatide, de stabilirea structurii cromozomice
i de replicaia ADN. Pn n prezent, s-au conturat mai multe ipoteze privind modelul de
structur molecular al cromozomului: ipoteza polifibrilar, ipoteza structurii monofibrilare,
ipoteza fibrei cutate, modelul nucleosomului .a. Dintre toate aceste modele, cel mai acceptat
pn la ora actual este cel al nucleosomului.
Modelul nucleosomului a fost conceput pe baza cercetrilor de biochimie, de
microscopie optic, electronic i de difracie n raze X.
n alctuirea cromozomului de tip eucariot ADN este n cantitate de 13-15%, ARN 1213%, iar proteinele de 68-72%. Aceste procente difer de la specie la specie. La aceeai specie
ns, mrirea cantitii de ADN se poate realiza prin multiplicarea numrului de garnituri
cromozomale, adugarea unui anumit numr de cromozomi, duplicaia genelor i mrirea
cantitii de ADN repetitiv.
ADN din cromozomii de tip eucariot este format din gene structurale (secvene unice de
nucleotide) i poriuni care nu dein informaie genetic i au rolul de a ocupa spaiul dintre gene.
A doua categorie sunt secvenele de nucleotide intermediar repetitive i care se gsesc n mai
multe copii. A treia categorie sunt secvenele de nucleotide nalt repetitive ce se repet ntr-un
numr mare de copii i sunt localizate n heterocromatin.
Dintre aceste categorii variaia cantitii de ADN din genom este datorat secvenelor de
nucleotide repetitive, care n cea mai mare msur sunt nefuncionale.
n afar de aceste categorii de secvene mai exist formaiunile denumite palindroame.
Ele sunt formate din secvene inversate dnd natere la nite bucle.
Privit la microscopul electronic, cromatina apare format din granule cu diametrul de
70-100 , legate ntre ele cu o fibr de 20 . O granul este de fapt un nucleosom, care cuprinde
un cilindru turtit de natur histonic n jurul cruia se nfoar un filament de ADN format din
100-140 nucleotide.
n nucleu, cromatina formeaz un filament de 100 , alctuit din aranjarea liniar a
nucleosomilor i un filament cu diametrul de 200-300 format din rsucirea filamentului subire
(fig. 1.7.).

Fig. 1.7. Modelul nucleosomului

1.3.3. Tipuri particulare de cromozomi

n afara tipului obinuit al cromozomilor din celulele somatice (autozomi i heterozomi),
au fost descoperii n anumite celule i alte tipuri de cromozomi: cromozomi uriai, cromozomi
tip "perie de lamp" i cromozomi accesorii sau de tip "B".
Cromozomii uriai au fost pui n eviden de Balbiani (1881) n glandele salivare ale
larvelor de Chironomus. Ulterior, au fost evideniai i la Drosophila melanogaster, n glandele
salivare, n celulele intestinului i a tuburilor lui Malpighi.
Aceti cromozomi s-au format prin multiplicarea cromatidelor de peste 1000 de ori, care
au rmas ns alipite, neseparate (sinaps mitotic) i despiralizate, fr ca nucleul s se divid.
Din cauza numrului mare de cromatide, aceti cromozomi se mai numesc i politeni.
Structura cromozomilor politeni este aceeai ca a celorlali cromozomi somatici,
deosebindu-se de acetia prin lungimea i grosimea lor mult mai mari. Dimensiunile lor foarte
mari permit cercetarea unor detalii de structur.
Configuraia cromozomilor uriai este alta comparativ cu aceea a cromozomilor somatici
obinuii. De exemplu, la Drosophila melanogaster formeaz cinci brae lungi i unul scurt, unite
ntr-un singur punct, numit cromocentru. Cromozomii sexului sunt n prelungire formnd un
singur bra, cromozomii perechii a doua i a treia formeaz alte patru brae, iar cromozomii
perechii a patra un singur bra, foarte scurt (figura 1.8.).
De-a lungul lor, aceste brae formeaz benzi (discuri) ntunecoase, care alterneaz cu
alte benzi, luminoase. Unii autori au presupus c aceste discuri ("discurile lui Balbiani") ar
reprezenta locul genelor. Sunt aproximativ 6000 asemenea discuri ntunecoase. n anumite locuri,
structura dens a lor se deslneaz formnd funde n jurul cromozomului, crora li s-a dat

denumirea de "puff"-uri sau "bulbi" (figura 1.8.). Aici are loc sinteza ARN, sugernd activitatea
intens a genelor ce se gsesc n aceste segmente.

Fig. 1.8. Cromozomii uriai din glandele salivare ale larvelor de

Drosophila melanogaster i formarea "puff"-urilor:
1-cromozomii sexului; 2-cromozomii II; 3-cromozomii III; 4-cromozomii IV;
a-un disc; b-formarea inelului lui Balbiani; c-un "puff";
d-ipoteza lui Beerman despre structura unui "puff".

Cromozomii lampbrush (perie de lamp) au fost pui n eviden n ovocitele

vertebratelor n timpul profazei meiozei. Ating lungimea de peste 1000 i sunt considerai cei
mai lungi cromozomi care se cunosc pn n prezent.
Spre deosebire de cromozomii uriai, ei sunt foarte subiri, ajungnd uneori la limita
vizibilitii microscopice. Cromozomii perie de lamp posed un ax central, n lungul cruia sunt
nirate cromomerele, din care ies lateral perechi de bucle filiforme, dnd aspectul firelor de pr

ale unei perii de lamp (fig. 1.9.). Aceste bucle se presupune c sunt spirale ale cromonemei,
active din punct de vedere genetic. Ele cresc n profaza I i descresc ctre metafaza I a meiozei.
Nu se cunosc cum au aprut aceti cromozomi. Noua configuraie corespunde unei
activiti intense, care contribuie la formarea de rezerve viteline n citoplasma ovocitelor.

Fig. 1.9. Cromozomii tip "perie de lamp" (lampbrush)

a-schema unui bivalent; b-seciune printr-un cromozom;
c-structura unei bucle i a cromonemelor

Cromozomii accesorii se gsesc n plus fa de cromozomii autozomi i ai sexului. Spre

deosebire de cromozomii obinuii, notai cu "A", cromozomii accesorii se mai numesc i
"cromozomii B". Numrul lor difer de la un organism la altul i de la un esut la altul i nu sunt
omologi nici ntre ei i nici cu cromozomii obinuii pe lng care se gsesc. Sunt
heterocromatici, mici i ineri din punct de vedere genetic. n meioz i mitoz nu se distribuie n
mod egal n celulele n care se formeaz. Nu se cunoate nc originea lor, dar dup toate
probabilitile s-au format din poriunile mijlocii ale cromozomilor normali, ale cror extremiti
s-au ataat altor cromozomi.
Nici rolul lor nu este cunoscut. Ei pot lipsi fr a perturba viaa organismelor. Mai
curnd s-ar putea considera pgubitoare existena lor. Astfel, la secara tetraploid, atunci cnd
cromozomii "B" sunt prezeni, scade fertilitatea polenului i viabilitatea plantelor. Cromozomii
suplimentari au fost pui n eviden la insecte, psri, porumb, secar .a.

1.4. ORGANIZAREA GENOMULUI LA PROCARIOTE

(BACTERII I VIRUSURI)

Spre deosebire de eucariote, la procariote cromozomul are o organizare mai simpl, nu

ns n ceea ce privete i structura lui molecular, care este aceeai la toate organismele. Aceasta
a favorizat cercetrile de genetic, virusurile i bacteriile constituind materialul de baz pentru
genetica molecular.
Virusurile, care sunt cele mai simple forme de via, conin ca material genetic un
singur cromozom, n care genele sunt dispuse liniar. Cu unele excepii, numrul de gene este
destul de mic. La bacteriofagul T4, de exemplu, sunt prezente cca 200 de gene, n timp ce la fagul
2 numrul lor este de 4-5.
La virusuri genomul viral este destul de variat fiind alctuit fie din ADN, fie din ARN
(fig. 1.10.). Aceti acizi pot fi monocatenari sau bicatenari. Volumul moleculei este aproximativ
egal cu volumul particulei virale, ceea ce denot c ea este foarte strns torsionat. Virusurile se
reproduc pe seama celulei gazd i din aceast cauz manifest o strict specificitate.

Fig. 1.10. Cromozomul (ADN)

fagului

Lungimea moleculei de acid nucleic poate fi foarte diferit. La fagul T2 masa este de 1,3
x 108 dal, iar lungimea 56 (2 x 105 perechi de nucleotide). La fagul masa este de 3,2 x 107 dal,
iar lungimea 17 (47000 nucleotide).
La bacterii, cromozomul este format din ADN. El este circular i nu este separat de
citoplasm printr-o membran, nct relaiile lui cu citoplasma sunt directe. Cromozomul
bacterian reprezint cea mai mare molecul cu rol genetic i conine 2000-3000 de gene. La
bacteria Escherichia coli masa moleculei este de 2 x 109 dal, iar lungimea de 1 mm. Genele
situate n molecul constituie un grup de nlnuire.
Tot la bacterii, pe lng cromozomul circular, mai pot exista i alte molecule de ADN,
tot de form circular, de dimensiuni mult mai mici, localizate n citoplasm sau ataate
cromozomului, numite plasmide. Acestea reprezint un material genetic accesoriu.
Exist i o clasificare a materialului genetic accesoriu n mai multe categorii:

- plasmide propriu-zise, constituite din uniti genetice cu replicaie (reproducere)

autonom, cum ar fi factorul col (care determin sinteza de colicine, cu aciune bactericid),
factorul F (care determin sexualitatea la bacterii i asigur capacitatea lor de conjugare),
factorul R (care transfer rezistena la antibiotice prin conjugare) etc.
- plasmide care pot funciona fie sub form autonom, fie integrate n cromozomi.

1.5. REPRODUCEREA CELULEI

Una din caracteristicile materialului genetic este continuitatea lui celular. Aceasta este
asigurat prin reproducerea sa cu mare fidelitate, transmindu-se de la celul la celul, de la
prini la urmai. La eucariote, materialul din cromozomi care dicteaz aceast reproducere este
ADN. Procariotele conin n cromozomul lor fie ADN, fie ARN. Reproducerea acestor acizi
nucleici dicteaz, n ultim instan, reproducerea materialului genetic, a celulelor organismului.

1.5.1. Mitoza
Reproducerea cromozomilor are loc odat cu reproducerea celulelor. Dintre formele de
reproducere celular, mitoza ocup cea mai important cale i cuprinde duplicarea cromozomilor
i a centrilor mitotici i separarea cromozomilor la cei doi poli ai celulei, n vederea formrii a
dou celule fiice. Dintr-o celul iniial, prin diviziuni repetate mitotice, se formeaz n mod
succesiv 2, 4, 8, 16 celule cu acelai numr de cromozomi care exist n celula iniial. Prin
mitoz, materialul genetic, cromozomii, se menin n structur i numr constant. n procesul
mitozei se desprind dou etape de baz: diviziunea nucleului (kariokineza) i diviziunea
citoplasmei (citokineza). n perioada dintre dou diviziuni succesive, nucleul se afl n
interkinez (interfaz).
Interfaza. n interfaz nucleul crete i se pregtete de o nou diviziune. Cercetrile
efectuate cu izotopi radioactivi i puse n eviden prin autoradiografiere au demonstrat c, n
interfaz, la nceput, cromozomii sunt monocromatidici, iar apoi, fiecare cromatid i
reconstituie cromatida pereche, n urma unui proces de sintez a elementelor ce o compun. Dup
unele observaii, aceast faz se mparte n trei perioade: G1, n care are loc sinteza proteic, S, n
care se produce dublarea cantitii de ADN din celul i G2, n care nceteaz sinteza ADN i se
desfoar kariokineza. n interfaz cromozomii sunt despiralizai i conin gene active.

Profaza. Este prima faz a mitozei. n nucleu, structura lui reticular se transform n
filamente vizibile, ncolcite sub forma unui ghem numit spirem. Filamentul, prin rsucire
(spiralizare) n jurul axei sale, se scurteaz, se ngroa i, prin fragmentare, d natere la
cromozomi. nc de la nceputul profazei se observ natura dubl a lor. Prin dizolvarea
membranei nucleului, cromozomii rmn liberi n citoplasm. Se disting bine cele dou
cromatide ca nite benzi longitudinale, paralele sau ncolcite. De asemenea, se distinge i
centromerul, ca un segment ce unete printr-o singur structur, cele dou cromatide. Ctre
sfritul profazei, n celul se formeaz un fus central filamentos, orientat ctre cei doi poli ai
celulei.
Terminarea profazei este indicat de dizolvarea nucleolilor i a membranei nucleare.
Apariia fusului constituie cea mai important schimbare structural a celulei de la
sfritul profazei. Fusul acromatic este format din fibrile care, privite la microscopul electronic,
alctuiesc microtubuli cu diametrul de 200 i din fibre cromozomice ce unesc centromerii de
polii fusului. Mitocondriile, microzomii i alte organite citoplasmice nu ptrund n zona din
interiorul fusului.

Metafaza. Cromozomii se inser pe filamentele fusului de diviziune prin cte un punct

de inserie din regiunea centromerului. Ei se dispun pe un plan perpendicular la mijlocul fusului,
formnd placa ecuatorial.
n metafaz, planul ecuatorial se mrete, iar odat cu el i fusul. n acest timp,
cromozomii se ndeprteaz uor unul de altul i manifest tendina de a-i orienta braele paralel
cu lungimea axului fusului. ntotdeauna ei rmn n interiorul fusului, fr a-l depi spre
citoplasm. n metafaz, cromozomii pot fi bine studiai la microscop, deoarece sunt spiralizai la
maximum, compaci i se coloreaz intens.
Anafaza. Cromozomii i despart cromatidele prin clivarea n lungul lor, dup ce, n
prealabil, s-a produs diviziunea centromerilor. Ei devin cromozomi monocromatidici i alunec
pe fusul nuclear ctre cei doi poli ai si. Simultan cu deplasarea cromozomilor, fusul se
stranguleaz n partea de mijloc, grbind astfel alunecarea cromozomilor ctre polii celulei.
Centromerii nainteaz spre poli i trag dup ei braele cromozomilor. n cazul n care un
cromozom i pierde centromerul, el rmne dezorientat i produce o deviere a mitozei de la
mersul normal. Un astfel de cromozom se poate pstra i poate participa la mitoz numai dac se
aloc altui cromozom ce posed centromer.

Nu se cunoate astzi precis care este cauza i mecanismul de micare al cromozomilor

spre cei doi poli ai celulei. n legtur cu explicaia acestor fenomene exist diferite ipoteze,
dintre care unele pot fi luate n seam. Astfel, se consider c fiecare cromozom se deplaseaz n
urma unei atracii dintre poli i centromeri, altele c ar exista o extindere i apoi o contracie a
fibrelor fusului, ceea ce ar contribui la deplasarea cromozomilor. Contractarea fibrelor a fost
comparat de unii cercettori cu contracia fibrelor musculare.
Telofaza. n cursul telofazei, aparatul mitotic se transform. Fibrele fusului dispar, iar
cromozomii ajung la cei doi poli, se despiralizeaz, reconstituind filamentele de cromatin, care
se subiaz, se alungesc i iau forma unui ghem. Fragmentele membranei nucleare migreaz spre
poli, se agreg n jurul filamentelor de cromatin, dnd natere cte unei membrane pentru fiecare
din cei doi nuclei care se formeaz. n timpul acesta are loc procesul de reconstituire a nucleolilor
n numrul n care au fost prezeni n nucleul iniial. Totodat, corpul celulei se gtuie i, prin
formarea unui perete despritor numit fragmoplast, iau natere dou celule.
n figura 1.11. este redat schema mitozei.

Fig. 1.11. Reprezentarea schematic a mitozei la un organism

cu 2n=4 cromozomi
A-profaz timpurie; B-profaza; C-metafaza; D-anafaza; E-telofaza
F-interfaza.

Timpul n care are loc mitoza depinde de esutul n care se gsete celula, de starea
fiziologic a organismului i de anumii factori externi. Ea poate dura de la cteva minute pn la
200 minute. S-a stabilit, de asemenea, c mitoza este mai activ n timpul odihnei i somnului la
animale sau ntunericului la plante.
Dintre toate fazele din tot ciclul mitotic, profaza este cea mai lung (cca 60%), telofaza
mai scurt (cca 30%), iar metafaza i anafaza sunt i mai scurte (cca 5%).

1.5.2. Meioza
Meioza reprezint o form de diviziune celular caracteristic organismelor ce se
nmulesc pe cale sexuat i n urma creia din celulele somatice cu 2n cromozomi se formeaz
celulele sexuale cu n cromozomi. Reducerea numrului de cromozomi este fenomenul invers
procesului de dublare al lor, care are loc n urma fecundrii. Dac organismele ar forma celule
sexuale cu acelai numr de cromozomi ca n celulele somatice, cu fiecare generaie numrul de
cromozomi din celulele organismelor s-ar dubla.
Meioza asigur, deci, meninerea constant a numrului de cromozomi de-a lungul
generaiilor la organismele ce se nmulesc sexuat.

Meioza cuprinde dou diviziuni succesive: meioza primar, numit i heterotipic sau
reducional, n care din celulele diploide se formeaz celule haploide i meioza secundar sau
homeotipic, n care din celulele haploide se formeaz tot celule haploide.
n meioza primar, fazele prin care trece diviziunea celular sunt aceleai ca la
diviziunea mitotic, numai c profaza este mult mai complex i cuprinde mai multe stadii:
leptonem, zigonem, pachinem, diplonem i diachineza.
Profaza I. n stadiul de leptonem, nucleul se mrete n volum. Cromozomii apar iniial
sub forma unor filamente foarte fine, n lungul crora se pot distinge nite ngrori,
cromomerele, ca urmare a unor zone mai dense de spiralizare a lor. Aparent, filamentul este
format dintr-o singur cromatid, din care cauz cromozomii se numesc monovaleni, iar numrul
lor este egal cu 2n.
Stadiul de zigonem corespunde cu mperecherea cromozomilor omologi, doi cte doi,
formnd perechi sau cromozomi bivaleni. Fenomenul de alturare a celor doi cromozomi n
lungul lor poart numele de sinaps. n fiecare pereche se gsete un cromozom de origine
matern i unul de origine patern.
Sinapsa ncepe ntr-un anumit punct de pe lungimea cromozomului i se continu apoi n
tot lungul acestuia, fiind att de perfect, nct toate segmentele omoloage se altur fa n fa.
Prin omologie se nelege similitudinea structural i funcional a cromozomilor. Dac dintr-un
cromozom lipsete un segment, poriunea corespunztoare a cromozomului pereche face o bucl,
asigurnd sinapsa pentru celelalte regiuni ale cromozomilor.
n stadiul de pachinem, cromozomii se scurteaz, se ngroa, iar legtura dintre perechi
devine din ce n ce mai intim, fapt care a determinat denumirea de gemeni cromozomali.
n stadiul de diplonem, la fiecare dintre membrii bivalentului se pot observa cte dou
cromatide surori, astfel c perechea de cromozomi este constituit din patru cromatide care
alctuiesc aa numita tetrad cromozomic. Cromozomii omologi au tendina de a se ndeprta
unul de altul; cromatidele nesurori sunt ns reinute n mai multe puncte de contact numite
chiasme. Chiasma este considerat ca reprezentnd manifestarea citologic a crossing-over-ului.
Acest fenomen va fi analizat ntr-un capitol urmtor, el prezentnd o mare importan n studiul
ereditii.
n stadiul de diachinez, cromozomii ce alctuiesc perechile se ndeprteaz, scurtarea
lor devenind i mai accentuat. Spaiile dintre chiasme se lrgesc, acestea se deplaseaz ctre
extremitile perechilor de cromozomi, aa nct, la sfritul acestui stadiu, ei apar conectai
numai la extremitile lor. Cu aceasta se ncheie profaza primar.

Metafaza I. Membrana nuclear dispare i se formeaz fusul de diviziune. Tetradele

cromozomice se repartizeaz n planul ecuatorial al celulei. Fiecare cromozom omolog alctuit
din dou cromatide surori se ataeaz la nivelul centromerului de firele fusului, pentru a conduce
cromozomii la polii celulari. Odat cu ndeprtarea lor dispar i ultimele chiasme.
Anafaza I. Cromozomii bicromatidici migreaz la polii celulei. Ei pot ns diferi din
punct de vedere genetic, n urma schimbului de segmente care a avut loc n stadiile anterioare.
Telofaza I. Cromozomii ajuni la cei doi poli ai celulei formeaz cte un nucleu cu un
numr haploid de cromozomi. Fenomenul care duce la separarea celor dou celule poart numele
de plasmodierez, iar cele dou celule haploide formeaz o diad.

Odat cu ncheierea acestei faze nucleii intr n interchinez. Cromozomii prezint

cromatidele perechi separate, dar unite numai prin centromeri, aspect caracteristic numai meiozei.
Dup un interval scurt ncepe a doua faz a diviziunii meiotice, homeotipic, care cuprinde
urmtoarele faze:
Profaza II i metafaza II. Cromozomii apar formai din cromatide surori, care se
orienteaz n planul ecuatorial al fusului de diviziune, ce apare la sfritul profazei secundare.
Cromozomii se cliveaz imediat dup clivarea centromerilor.
Anafaza II i telofaza II. Cele dou cromatide se ndeprteaz spre cei doi poli, unde
constituie doi nuclei. Din diada iniial cu celule haploide s-au format, deci, patru celule haploide
ce formeaz o tetrad celular.
Aceste celule, n urma unor procese, vor da natere la gamei.
n figura 1.12. este redat schema general a meiozei.

Test de autoevaluare
1.

Dezoxiribovirusurile au un cromozom reprezentat de o molecul de:

a.
ARNm ?
b.
ARNs ?
c.
ARNt ?
d.
ADN ?

2.

Ribovirusurile au un cromozom reprezentat de o molecul de :

a.
ADN ?
b.
ARNv ?
c.
ARNt ?
d.
ARNm ?

3.

Cromozomul bacterian (genoforul) este reprezentat de:

a.
o molecul de ADN, bicatenar, circular, cu lungimea de 1000 ?
b.
o molecul de ADN monocatenar, liniar ?
c.
mai multe molecule scurte de ADN ?

4.

Mezozomul este un accesoriu al cromozomului bacterian implicat n:

a.
infecia bacterian ?
b.
recombinarea bacterian ?
c.
activitatea respiratorie ?
d.
replicarea semiconservativ ADN ?
e.
diviziunea celulei bacteriene ?

5.

Celula eucariot, vegetal sau animal, posed:

a.
nucleu delimitat de membran ?
b.
nucleoid ?
c.
mai muli nuclei poliploizi ?

6.

O celul vegetal creia i s-a ndeprtat membrana pecto-celulozic, poart numele de :

a.
oosfer ?
b.
anterozoid ?
c.
protoplast ?
d.
meiocit ?
Mitocondriile sunt organite citoplasmatice cu rol n:
a.
reproducere ?
b.
poliploidizare ?
c.
respiraie ?
d.
fotosintez ?

7.

8.

Ribozomii sunt corpusculi submicroscopici alctuii din:

a.
ADN ?
b.
ARNv ?
c.
proteine ribozomale ?
d.
ARNr i proteine ribozomale (50:50) ?

9.

Nucleolul este un corpuscul refrigerent, vizibil la microscopul obinuit n:

a.
metafaz ?
b.
telofaz ?
c.
profaz ?
d.
interfaz ?

10. Cromozomul eucariot poate fi de mai multe tipuri, n funcie de poziia centromerului:
a.
policentric ?
b.
metacentric ?
c.
submetacentric ?
d.
subtelocentric ?
e.
metafazic ?
11. Numrul, forma i mrimea cromozomilor unei specii vegetale sau animale, poart numele de:
a.
haplofaz ?
b.
condriom ?
c.
cariotip ?
d.
plasmotip ?
12. n celulele somatice i respectiv, n cele sexuale, numrul cromozomilor este:
a.
2n i n ?
b.
4x i 2x ?

c.
d.

n i 2n ?
n i n ?

13. Mitoza este diviziunea specific celulelor:

a.
poliploide ?
b.
sexuale ?
c.
meristematice ?
d.
somatice ?
14. n interfaz, replicarea materialului genetic are loc n subfaza :
a.
G1 ?
b.
G2 ?
c.
F2 ?
d.
S?
15. Cantitatea de ADN ( 2c ) se dubleaz ( 4c ) n urma:
a.
sintezei proteice ?
b.
replicrii de tip semiconservativ ?
c.
anafazei ?
d.
gametogenezei ?
16. Cromozomii se ataeaz de fibrele fusului nuclear cu ajutorul :
a.
telomerilor ?
b.
centromerilor ?
c.
regiunii eucromatice ?
17. n anafaza timpurie a mitozei, cromozomii sunt :
a.
bicromatidici, n numr 2n ?
b.
monocromatidici, n numr n ?
c.
monocromatidici, n numr 4n ?
d.
bicromatidici, n numr 4n ?
18. n care dintre cele cinci stadii ale profazei primare are loc recombinarea genetic intercromosomic:
a.
leptonema ?
b.
zigonema ?
c.
pachinema ?
d.
diplonema ?
e.
diachineza ?
19. ntre anafaza mitozei i anafaza meiozei primare exist o diferen major, sub aspectul structurii
cromozomilor care migreaz spre cei doi poli ai celulei:
a.
bicromatidici n mitoz i monocromatidici n meioz ?
b.
bicromatidici n mitoz i bicromatidici n meioz ?
c.
monocromatidici n mitoz i bicromatidici n meioz ?
d.
monocromatidici n mitoz i tetracromatidici n meioz ?
20. La sfritul meiozei primare, rezult:
a.
dou celule fiice cu n cromozomi n nucleu ?
b.
patru celule fiice cu 2 n cromozomi n nucleu ?
c.
patru celule fiice cu n cromozomi n nucleu ?
d.
dou celule fiice cu 2 n cromozomi n nucleu ?
21. La sfritul diviziunii homeotipice rezult:
a.
dou celule fiice cu 2 n cromozomi ?
b.
dou celule fiice cu n cromozomi ?
c.
patru celule fiice cu 2 n + 1 cromozomi ?
d.
patru celule fiice cu n cromozomi ?

Fig. 1.12. (partea I) - Schema meiozei la un organism cu 2n=4 cromozomi

A-leptonem; B-zigonem; C-pachinem; D-diplonem
E-metafaza I; F-anafaza I.

Fig. 1.12. (continuare) - Schema meiozei la un organism cu 2n=4 cromozomi

G-telofaza I; H-interfaza; I-profaza II; J-metafaza II;
K-anafaza II; L-telofaza II

CAPITOLUL 2
BAZELE MOLECULARE ALE EREDITII
Motto:
"Genetica molecular a luat natere cnd s-a recunoscut c gena este
subdivizibil"
Salvador Luria
"Structura ADN trebuie neleas n raport cu toate funciile sale, aa
cum nelegerea funciei necesit o cunoatere a structurii. Fiecare
funcie trebuie descompus, apoi reconstituit n detaliile sale
moleculare i, n final, orientat n arhitectura i economia celular"

Progresele nregistrate n genetica clasic au ridicat, ulterior, numeroase probleme legate

de natura biochimic a materialului genetic, respectiv a genelor.
Identificarea i studierea aprofundat a materialului genetic ridicau numeroase
probleme, de aceea nu au putut fi rezolvate dect prin cercetri interdisciplinare de genetic,
biochimie, medicin, fiziologie, fizic, matematic i altele.
Aceste cercetri constituie realizrile cele mai importante ale tiinei contemporane i au
pus bazele geneticii moleculare, care studiaz ereditatea i variabilitatea organismelor la nivelul
moleculelor.

2.1. DOVEZI PRIVIND ROLUL GENETIC AL ADN

Teoria cromozomic a ereditii a atribuit cromozomilor i genelor rolul principal n
ereditate, dei nu se cunoteau nc prea multe despre structura chimic a materialului genetic.
Identificarea materialului genetic constituie imperativul geneticii n perioada de la
mijlocul secolului nostru. Pentru aceasta trebuiau descoperite i dovedite structurile chimice care
dein caracteristicile de baz ale materialului genetic: de a stoca i transmite informaia ereditar
i de a-i menine stabilitatea cantitativ i calitativ pe parcursul diviziunii celulare.
Prima ipotez a legturii dintre o gen i sinteza unei enzime a fost elaborat n anul
1908 de ctre medicul englez Garrod care a studiat maladiile ereditare umane ce afecteaz
metabolismul intermediar al fenilalaninei.

2.1.1. Transformarea la procariote

n anul 1928, bacteriologul englez F. Griffith a efectuat mai multe experiene cu
pneumococi (Diplococcus pneumoniae), o bacterie care produce la mamifere boala numit
pneumonie. Virulena ei este determinat de existena unei capsule format din polizaharide care
mpiedic fenomenul de fagocitoz. Coloniile acestor bacterii sunt netede i vscoase, motiv
pentru care s-au notat cu S (engl. smooth = neted). Dup reacia imunologic, determinat de
tipul de polizaharide ce alctuiesc capsula, exist mai multe tipuri de pneumococi S: SI, SII, SIII
etc. Tipul S poate da natere prin mutaii spontane la forme lipsite de capsul, a cror colonii au
suprafaa rugoas, notat cu R (engl. rough = aspru, rugos), care sunt nevirulente. Pneumococii
de tip R pot fi: RI, RII, RIII, n funcie de tipul S din care provin. F. Griffith a injectat la oareci
pneumococi neviruleni de tip RII mpreun cu pneumococi viruleni de tip SIII, ns acetia din
urm fuseser omori prin cldur. Surprinztor a fost faptul c oarecii au murit de pneumonie,
iar din acetia s-au separat att pneumococi de tip RII ct i pneumococi de tip SIII. Concluzia
care s-a desprins a fost c pneumococii de tip RII s-au transformat n pneumococi de tip SIII.
Mutaia este exclus n acest caz deoarece tipul RII ar fi trebuit s muteze n tipul SII.
Cauza transformrii pneumococilor necapsulai i neviruleni n pneumococi capsulai i
viruleni a rmas necunoscut pn n anul 1944, cnd un grup de cercettori americani, O.T.
Avery, C.M. Mac Leod i M. Mc. Carty, au reluat experienele fcute de Griffith cu scopul de a
identifica substana chimic ce induce transformarea. Ei au extras ADN de la pneumococii de tip
SIII i l-au introdus n mediul de cultur al pneumococilor de tip RII. n cultur, pe lng
pneumococii de tip RII au aprut i un numr mic de pneumococi de tip SIII, dovedindu-se c
agentul transformator este ADN de tipul donor. Aceast experien poate fi redat sintetic astfel:
RII + ADN de la SIII

`n vitro
24 ore

RII + SIII

nsuirea de virulen sau nevirulen este legat de prezena sau absena capsulei
polizaharidice ce nconjoar pneumococul. ADN transformator a indus pneumococilor
neviruleni, acapsulai, nsuirea de virulen, de formare a acestei capsule.
Frecvena transformrilor genetice depinde de cantitatea de ADN utilizat i starea
fiziologic a bacteriei, denumit i starea de competen a acesteia. Cercetrile recente au
demonstrat c starea de competen a celulelor bacteriene depinde de numrul de celule n mediu
i nu de rata nmulirii bacteriilor. Starea de competen este maxim cnd n mediu, concentraia

atinge 10 milioane celule/cm3. Aceast stare de competen este indus de o protein care,
probabil, modific ntr-un anumit fel membrana celular, fcnd posibil ptrunderea ADN
exogen.

2.1.2. Transfecia la procariote

Rolul genetic al ADN a fost pus n eviden i printr-o serie de experiene cu
bacteriofagi (virusuri ce atac i distrug bacteriile). Importante n acest sens sunt experienele
efectuate de A. Hershey i M. Chase (1952) privind infecia viral, constituind i primele
experiene de transfecie, care const n introducerea de ADN exogen n celule receptor. Ei au
folosit bacteriofagii din seria T i n special bacteriofagul T2, unul din cei mai mari bacteriofagi
(2400-2500 ). Bacteriofagul este constituit din cap i coad. Capul conine n interior ADN iar
nveliul (capsida) i coada sunt constituite din proteine (figura 2.1). Fagii se reproduc numai n
celulele bacteriene cu ajutorul aparatului enzimatic al acestora.
Infecia viral are loc astfel: fagul se prinde cu
filamentele codale de membrana bacteriei. Enzimele fagului
dizolv n acest punct membrana bacteriei, iar ADN fagic
este introdus prin coada acestuia n celula bacterian. ntr-un
interval de timp destul de scurt, n interiorul bacteriei se
formeaz cteva sute de bacteriofagi, bacteria fiind distrus
(liza bacteriei) i fagii sunt eliberai putnd infecta alte
celule.

Faptul
c bacteriofagii
Fig. 2.1.
Structura
fagilor de tip T se reproduc n interiorul bacteriei, denot c ADN fagic are
capacitatea de a se autoreproduce (funcia autocatalitic) i n acelai timp deine informaia
genetic necesar sintezei proteinelor proprii necesare constituirii capsidei pe baza aminoacizilor
liberi din celula bacterian (funcia heterocatalitic).
Se pune ntrebarea dac, pe lng ADN fagic, n interiorul bacteriei nu ptrund i
proteinele virale. Pentru a clarifica acest aspect A. Hershey i A. Chase au folosit izotopii
radioactivi P32 i S35. Fosforul radioactiv marcheaz molecula de ADN iar sulful radioactiv
marcheaz proteinele.
S-au cultivat bacterii E. coli pe un mediu la care s-a adugat fosfor radioactiv (P32). Dac
se infecteaz cultura cu bacteriofagi T2, vor rezulta bacteriofagi marcai radioactiv, deoarece

ADN fagic incorporeaz izotopul P35. Cu aceti bacteriofagi marcai s-au infectat alte bacterii
neradioactive. ADN fagic radioactiv a ptrund n interiorul bacteriilor, n timp ce capsida fagilor,
nemarcat, a rmas la nivelul peretelui celular bacterian.
Dac bacteriile au fost infectate cu bacteriofagi marcai cu S35, bacteriile nu devin
radioactive pentru c n acest caz izotopul S35 s-a localizat numai la nivelul proteinei din capsid.
i ntr-un caz i n altul capsidele au rmas aderente de suprafaa bacteriei, putnd fi izolate prin
agitare. n interiorul bacteriei ptrunde numai ADN fagic, care realizeaz procesul de transfecie.

2.1.3. Transformarea la eucariote

Transformarea genetic la organismele superioare a evideniat rolul genetic al ADN.
Primele experiene de transformare genetic la eucariote au fost realizate n anul 1959 de J.
Benoit, P. Leroy, R. i C. Vendreley. S-a extras ADN din spermatozoizii i eritrocitele masculilor
din rasa de rae Khaki Campbell i s-a introdus intraperitoneal la bobocii de rae din rasa Pekin.
Adulii din rasa Pekin, rezultai din bobocii tratai au prezentat o serie de modificri morfologice
privind culoarea penajului, a ciocului i picioarelor, a taliei, realizndu-se un nou tip de ras
denumit Blanche-neige.
n anul 1971, C.R. Merril i colab. au transferat gene de la Escherichia coli n celulele
umane. Astfel, gena ce metabolizeaz galactoza la E. coli a fost preluat de fagul lambda i apoi
transferat de acesta n celulele fibroblastice umane ce proveneau de la un bolnav de
galactosemie (nu putea metaboliza galactoza).
Fenomenul de transformare a fost realizat i la alte organisme superioare: Drosophila
melanogaster, Bombyx mori, Petunia hybrida, Hordeum vulgare .a.
La noi n ar, P. Raicu i colab. (1963), au introdus prin vacuum infiltraie ADN de la
Triticum durum n boabe de gru de la specia Triticum aestivum. Plantele rezultate din boabele
tratate cu ADN exogen prezentau modificri privind culoarea i ritmul de cretere.
La plante, obinerea protoplatilor (celulele lipsite de membrana rigid pecto-celulozic)
deschide noi ci pentru introducerea ADN n celule.

2.1.4. Materialul genetic al ribovirusurilor

Astzi se consider c virusurile constituie sisteme complexe alctuite din dou
componente: nveliul proteic care nu are rol genetic i ADN sau ARN ce dein mesajul genetic.
nveliul proteic denumit i capsid conine uniti mai simple denumite capsomere.

Exist dou categorii de virusuri, unele au ca material genetic ADN i sunt denumite
dezoxiribovirusuri, iar altele conin ARN i sunt denumite ribovirusuri. Ribovirusurile cele mai
cunoscute sunt: virusul mozaicului tutunului (VMT), poliomielitei i encefalitei i altele.
Rolul genetic al ARN a fost pus n eviden la virusul mozaicului tutunului de C.P.
Conrat i R. Williams (1955) i A. Gierer i G. Schranm (1956). Virusul mozaicului tutunului
conine aproximativ 6% ARN i 94% proteine. Ei au izolat ARN de proteina viral i au fcut
infecii cu ambele componente pe frunze sntoase de tutun. S-a constatat c boala denumit
mozaicul sau arsura frunzelor de tutun s-a manifestat numai la frunzele infectate cu ARN. Se
poate afirma c la ribovirusuri, ARN este deintorul informaiei genetice necesare sintezei
proteinelor virale proprii i transmiterii ei prin replicaie.

2.2. ACIZII NUCLEICI I ROUL LOR GENETIC

2.2.1. Structura molecular a acidului dezoxiribonucleic (ADN)
Structura molecular a acidului dezoxiribonucleic (ADN) a fost descoperit n anul 1953
de cercettorii J.D. Watson i F.H.C. Crick care au studiat structura ADN prin difracie n raze X,
reuind s precizeze poziia atomilor. Cei doi cercettori au studiat ADN "in vitro", netiindu-se
dac structura lui corespunde cu cea existent n materia vie. Tot n anul 1953, M. Wilkins i
colab. au efectuat cercetri asupra ADN "in vivo" confirmnd structura stabilit de Watson i
Crick.
n anul 1962, cei trei cercettori Watson, Crick i Wilkins au fost distini cu premiul
Nobel pentru medicin i biologie, pentru contribuiile aduse la elucidarea structurii moleculare a
materialului purttor al informaiei genetice.
Structura chimic a moleculei de ADN
Molecula de ADN este format din uniti simple denumite nucleotide. n componena
unei nucleotide intr urmtoarele tipuri de molecule: o baz azotat, un zahar i un radical
fosforic (figura 2.2.).
Bazele azotate ce intr n alctuirea de ADN sunt de dou tipuri: baze purinice i
pirimidinice.

Purina este o baz azotat alctuit dintr-un heterociclu ce cuprinde cinci atomi de C i
patru atomi de N iar pirimidina este o baz ce deriv din inelul benzenic, cuprinznd patru atomi
de C i doi atomi de N.
Bazele azotate purinice care intr n constituia moleculei de ADN sunt adenina (A) i
guanina (G), iar bazele pirimidinice sunt citozina (C) i timina (T).
Zaharul se numete dezoxiriboz ( - D - 2 dezoxiribofuranoz), fiind o pentoz.
Radicalul fosforic ce intr n alctuirea acizilor nucleici are trei hidroxili liberi care pot
fi esterificai. n cazul acizilor nucleici se esterific doi hidroxizi, deci acizii nucleici sunt
fosfodiesteri:
OH
O=P

OH

OH
O=P

OR2

OH
Radical fosforic

OR1
Fosfodiester

Fig. 2.2. Bazele azotate, zaharurile i radicalul fosforic din acizii nucleici

Prin unirea unei baze azotate purinice sau pirimidinice cu un zahar rezult un
dezoxiribonucleosid iar prin ataarea la acesta a unui radical fosforic rezult un
dezoxiribonucleotid. Ataarea radicalului fosforic se face n mod obinuit prin intermediul
carbonului 5' al dezoxiribozei, prin pierderea unei molecule de ap.
Radicalul fosforic al unui nucleotid, prin gruprile acide libere, poate s se lege fie cu
ali radicali fosforici, fie cu alte nucleotide prin carbonul 3' al dezoxiribonucleotidului. Dac
gruprile libere ale radicalului fosforic se leag de ali radicali fosforici, dezoxiribonucleotidele
pot apare sub form de monofosfat, difosfat sau trifosfat, purtnd urmtoarele denumiri: adenozin
5'-fosfat (AMP), guanozin 5'-fosfat (GMP), citidin 5'-fosfat (CMP), timidin 5'-fosfat (TMP),
ADP, GDP, CDP, TDP, ATP, GTP, CTP, TTP.
Cnd nucleotidele (dezoxiribonucleotidele) se leag unele de altele, aceast legtur se
realizeaz astfel: un nucleotid se leag de nucleotidul vecin inferior prin C 3', iar de nucleotidul
vecin superior prin C 5'.
Se realizeaz un lan polidezoxiribonucleic, cu o form de zig-zag, ce constituie
structura primar sau monocatenar a moleculei de ADN.
La majoritatea organismelor molecula de ADN este constituit din dou lanuri (catene)
polinucleotidice complementare, aceasta fiind structura secundar a ADN stabilit de ctre J.D.
Watson i F.H.C. Crick. Rsucirile pe care le sufer o caten sau molecula bicatenar alctuiesc
structura teriar iar interaciunea dintre dou sau mai multe molecule bicatenare alctuiesc
structura cuaternar a acizilor nucleici.
Watson i Crick au stabilit c macromolecula de ADN este alctuit din dou catene
polinucleotidice, paralele, nfurate elicoidal n jurul unui ax comun imaginar, o caten avnd un
sens ascendent (3'

5') iar cealalt un sens descendent (5'

3').

Distana dintre dou nucleotide succesive este de 3,4 iar pasul elicei este de 34 ,
ceea ce corespunde la 10 nucleotide. Diametrul macromoleculei de ADN este de 20 (figura
2.3.).
Molecula de ADN are dimensiuni foarte mari fiind cea mai mare molecul biologic, cu
o mas molecular ce poate ajunge la 12-16 x 106 daltoni (1 dalton = 1/12 din masa atomului de
C).
Cele dou catene din molecula de ADN se leag ntre ele prin puni de hidrogen ce se
realizeaz ntre o baz azotat purinic de pe un lan i o baz azotat pirimidinic de pe cellalt
lan. Prin urmare n macromolecula de ADN exist urmtoarele tipuri de legturi: adenin-timin
(A-T), timin-adenin (T-A), guanin-citozin (G-C) i citozin-guanin (C-G).
Cele dou catene polinucleotidice din molecula de ADN sunt complementare, n sensul
c ordinea nucleotidelor de pe o caten determin ordinea nucleotidelor de pe cealalt caten.
Legturile de hidrogen dintre bazele azotate, duble, ntre adenin i timin (A = T) i triple ntre
guanin i citozin

(G C), dei sunt legturi slabe, sunt destul de numeroase de-a lungul

macromoleculei de ADN pentru a-i asigura stabilitatea i coeziunea. Macromolecula de ADN

este stabil la temperaturile fiziologice, datorit att numrului mare de legturi chimice, ct i
faptului c moleculele de baze azotate se gsesc n interiorul moleculei i contactul lor cu apa
este limitat.

2.2.2. Acidul ribonucleic (ARN)

Structura chimic a moleculei de ARN. Acidul ribonucleic (ARN) are o structur
chimic asemntoare cu cea a acidului dezoxiribonucleic (ADN). n structura chimic a ARN
intr trei componente: bazele azotate, zaharul i radicalul fosforic. Bazele azotate sunt: purinice,
adenina (A) i guanina (G) i pirimidinice, citozina (C) i uracilul (U). Deci, o prim deosebire

structural ntre ADN i ARN este prezena uracilului n locul timinei. Uracilul are o structur
destul de apropiat de cea a timinei (fig. 2.2.).
Zaharul care intr n structura moleculei de ARN este riboza care are o form ciclic.
Combinarea unei baze azotate cu zaharul d natere unui ribonucleosid iar prin adugarea unui
radical fosfat rezult un ribonucleotid.
O alt deosebire important ntre ADN i ARN este faptul c macromolecula de ARN
este monocatenar, fiind format dintr-un singur lan poliribonucleotidic. Acest fapt face ca
bazele azotate purinice s nu fie n cantitate egal cu cele piridimice.
innd seama de rolul pe care l ndeplinete ARN se apreciaz c sunt dou categorii:
acidul ribonucleic viral (ARNv) i acidul ribonucleic celular, implicat n sinteza proteinelor.
Acidul ribonucleic celular este de trei tipuri: acidul ribonucleic mesager (ARNm), acidul
ribonucleic de transport sau solubil (ARNt) i acidul ribonucleic ribozomal (ARNr).
Acidul ribonucleic viral (ARNv) constituie materialul genetic al unor ribovirusuri cum
ar fi: virusul mozaicului tutunului (VMT), virusul gripal, virusul poliomielitei, virusul stomatitei
veziculare, bacteriofagii F2, R17, QB i altele.
Studiindu-se molecula de ARNv de la virusul mozaicului tutunului s-a determinat c este
alctuit din aproximativ 6.000 ribonucleotide, ntr-o anumit ordine, determinnd coninutul
mesajului genetic. La mai multe virusuri molecula de ARNv este format din dou catene
complementare nfurate elicoidal n jurul unui ax imaginar. Molecula de ARNv este n general
liniar, cu excepia virusului encefalomielitei oarecilor, la care molecula de ARNv este circular.
Acidul ribonucleic mesager (ARNm). A fost descoperit n celulele bacteriene infectate
cu bacteriofagi, apoi n toate celulele organismelor. A.D. Hershey i colab. (1953) au ajuns la
concluzia c sinteza ARNm este dependent de ADN. Ei au identificat ntr-o celul bacterian
infectat, pe lng ADN i o mic cantitate de ARN, care era complementar ADN. Acest tip de
ARN are rolul de a copia informaia ereditar de pe o poriune din molecula ADN i de a o
transmite n citoplasm la ribozomi, organite citoplasmatice la nivelul crora are loc sinteza
proteinelor. De aceea, acest tip de acid ribonucleic a fost denumit ARN mesager (messenger
ARN), prescurtat ARNm (F. Jacob i J. Monod, 1961).
Acidul ribonucleic mesager se sintetizeaz n procesul de transcripie a informaiei
genetice.
Acidul ribonucleic solubil sau de transfer (ARNs sau ARNt). Acest tip de acid
ribonucleic are o structur chimic asemntoare cu a celorlalte tipuri de ARN. Are o greutate

molecular mic i anume 25.000 daltoni, avnd 75-90 nucleotide, este solubil n soluie de NaCl,
de aceea i s-a dat numele de ARN solubil.
Rolul ARNs este de a transporta aminoacizii din citoplasm la ribozomi, n procesul de
sintez a proteinelor.
Molecula de ARNs are la un capt tripleta citozin-citozin-adenin (CCA), iar la
cellalt capt are un nucleotid ce conine guanina (G). Molecula ARNs este monocatenar, dar are
i poriuni bicatenare datorit legturilor de hidrogen dintre A-U i G-C, dndu-i forma
caracteristic a unei frunze de trifoi.
R.W. Halley de la Universitatea Cornell (SUA) a determinat, n anul 1965, ordinea
nucleotidelor unui ARNs care transport alanina la ribozomi, la drojdia de bere (Saccharomyces
cerevisiae) (figura 2.4).

Fig. 2.4. Structura ARNs ce transport alanina la ribozomi

la drojdia de bere (Saccharomyces cerevisiae)

Macromolecula de ARNs are trei regiuni distincte pentru recunoaterea moleculelor sau
structurilor celulare:
a) Regiunea pentru recunoaterea aminoacidului este situat pe braul cu codonul CCA
de la un capt al moleculei. Aminoacidul se fixeaz de aceast regiune cu ajutorul enzimei
aminoacil - ARNs - sintetaza, care are o structur foarte variat de la un organism la altul,
existnd cte o enzim pentru fiecare aminoacid.
b) Regiunea anticodonului este format dintr-o triplet de nucleotide complementar
unui codon din ARNm. Numrul anticodonilor este egal cu cel al codonilor.
c) Regiunea pentru recunoaterea ribozomului este alctuit dintr-o secven de cinci
nucleotide: G-T-P-C-G (P-pseudouracilul). Aceast regiune realizeaz legtura cu ribozomul n
timpul procesului de sintez a proteinelor.
Sinteza ARNs este determinat de genele din cromozomi, gene care se gsesc ntr-un
numr mare de copii. Teoretic ar trebui s existe attea tipuri de ARNs cte tipuri de codoni

exist, dar, n realitate, numrul lor este mai mic deoarece sunt i codoni care servesc pentru
punctuaie sau sunt sinonimi.
Acidul ribonucleic ribozomal (ARNr). Acidul ribonucleic ribozomal (ARNr) reprezint
aproximativ 85% din cantitatea total a ARN din celul, fiind localizat numai n ribozomi. O
caracteristic important a ARNr este aceea c se gsete ntotdeauna asociat cu proteinele. ARNr
a fost izolat din ribozomii purificai de Escherichia coli i s-a stabilit c are o greutate molecular
de 5 x 106, nefiind purttor al informaiei genetice.
Acidul ribonucleic ribozomal are o structur bicatenar n proporie de 60-70% iar restul
are o structur monocatenar.
Sinteza ARNr se realizeaz prin genele din ADN specializate n acest sens i a cror
numr este foarte mare datorit necesitii de a se sintetiza o cantitate mare de ARNr ntr-un timp
scurt.

2.2.3. Denaturarea i renaturarea ADN

nclzirea unei soluii de ADN la temperaturi de peste 65C, determin ruperea
legturilor de hidrogen dintre bazele azotate, cele dou catene se separ rezultnd un ADN
monocatenar, iar fenomenul se numete denaturare.
Temperatura la denaturare variaz de la o specie la alta, de exemplu la Drosophila
melanogaster este de 86C, la Escherichia coli 90C, Mycobacterium phlei 97C. Dac soluia
respectiv este rcit brusc, ADN rmne monocatenar, fiind numit ADN denaturat. Dac soluia
se rcete treptat, legturile de hidrogen se refac, rezultnd un ADN renaturat, iar fenomenul se
numete renaturare.
Aceste dou fenomene au o importan deosebit pentru realizarea de hibrizi moleculari
ADN-ADN sau ADN-ARN.
Hibrizii moleculari ADN-ADN, dar de la specii diferite, ne dau informaii despre gradul
de nrudire al speciilor respective. Hibridarea ADN-ARN permite localizarea pe cromozomi a
genelor ce intervin n sinteza diferitelor tipuri de ARN.

2.2.4. Replicaia ADN

Una dintre nsuirile de baz ale macromoleculei de ADN este cea de replicaie sau
autoreplicaie, constituind funcia autocatalic a materialului genetic. La eucariote replicarea

ADN i deci a genelor care nu sunt dect segmente de ADN, are loc n timpul diviziunii mitotice,
asigurndu-se transmiterea exact de la o generaie la alta a caracterelor ereditare.

J.D. Watson i F.H. Crick (1953) n urma elaborrii modelului structural al moleculei de
ADN au emis i ipoteza replicrii acestuia dup tipul semiconservativ. Acest tip de sintez
const n ruperea punilor de hidrogen dintre cele dou catene complementare. Fiecare caten
servete ca matri pentru sinteza unei catene noi. n final, dintr-o molecul veche de ADN vor
rezulta dou molecule, dar care sunt noi numai pe jumtate.
Modelul replicrii dup tipul semiconservativ, asigur o mare fidelitate n sinteza noilor
molecule de ADN. Termenul de replicaie deriv de la faptul c n acest proces fiecare caten
servete ca matri pentru catenele noi sintetizate, informaia genetic fiind transmis fidel noilor
molecule.
Sinteza ADN dup tipul semiconservativ se realizeaz astfel: la o extremitate sau ntr-un
punct oarecare al macromoleculei de ADN, punile de hidrogen se rup, fenomen ce continu pe
toat lungimea moleculei, asemntor desfacerii unui fermoar. Fiecare caten se rsucete n
spaiu cu 180, prin rotirea nucleotidelor n planul exterior, n jurul radicalului fosforic. n
citoplasm se gsesc sintetizate cele patru tipuri de nucleotide, care conin bazele azotate purinice
i pirimidinice: adenin, guanin, citozin i timin. Pe baza fenomenului de complementaritate
dintre bazele azotate purinice i pirimidinice, o nucleotid care conine adenin se va lega prin
puni de hidrogen de una ce conine timin, iar una ce conine guanin se va lega de una ce
conine citozin. n final, paralel cu catenele vechi s-au sintetizat dou catene noi, rezultnd dou
molecule fiice, identice cu molecula mam (figura 2.5.).
Replicarea macromoleculei de ADN se realizeaz n trei
etape:
- n prima etap are loc sinteza precursorilor nucleotidelor ce
intr n alctuirea ADN de tipul acidului uridilic i acidului
inosinic;
- n etapa a doua are loc sinteza nucleotidelor propriu-zise ce
intr

structura

dezoxiguanozintrifosfat,
dezoxitimidintrifosfat;

ADN:

dezoxiadenozintrifosfat,

dezoxicitidintrifosfat

Fig. 2.5. Modelul replicrii semiconservative a macromoleculei de ADN

- n etapa a treia are loc polimerizarea nucleotidelor sub controlul enzimei ADNpolimeraza.
Enzima ADN-polimeraza determin esterificarea oxidrilului de la carbonul 3' al catenei
polinucleotidice de ctre fosfatul ce esterific oxidrilul de la carbonul 5' al nucleotidei, aa nct
dac catena veche are polaritatea 5' - 3', catena nou sintetizat va avea polaritatea invers 3' -5'.

2.3. CODUL GENETIC

Dup descoperirea structurii macromoleculei de ADN i a nsuirii ei de a se replica cu
mare fidelitate, muli geneticieni i-au pus ntrebarea dac informaia genetic nu este codificat
ntr-un anumit fel prin secvena de nucleotide, ce relaii se stabilesc ntre cele patru tipuri de
nucleotide i aminoacizii din lanurile polipeptidice.
Ciberneticianul G. Gamow (1954) este primul care a descoperit legtura dintre secvena
de nucleotide din ADN i ordinea aminoacizilor, emind ipoteza c n macromolecula de ADN
se gsete codificat biochimic informaia genetic, necesar sintezei moleculelor proteice.
Prin schem teoretic a unui cod genetic a fost elaborat de G. Gamow (1954). Potrivit
concepiei acestuia, codificarea celor 20 de aminoacizi nu se poate realiza de un singur nucleotid
(41=4) i nici de grupe formate din cte dou nucleotide (42=16), pentru c, n ambele cazuri,
numrul total de combinaii este mai mic dect numrul aminoacizilor. Ca urmare, el a considerat
c numai secvene de cte trei nucleotide (43=64) pot realiza codificarea celor 20 de aminoacizi
(Tabelul 2.1.). Grupul de trei nucleotide care codific un aminoacid a primit denumirea de codon.
n cazul codului de tip triplet, numrul codonilor este 64, depind de trei ori numrul
aminoacizilor, fapt ce confer o mare eficien i plasticitate n recunoaterea aminoacizilor.
n perioada care a urmat, o serie de geneticieni au adus numeroase dovezi experimentale
privind codificarea informaiei ereditare, deci a relaiei nucleotide-aminoacizi, culminnd cu
descifrarea n totalitate a codului genetic.
Descifrarea codului genetic a fost posibil i prin folosirea unor ARNm sintetizai
artificial, care conineau o secven cunoscut de nucleotide, pe baza crora au fost sintetizate
proteine. Experiene de acest fel au fost realizate de M.W. Nirenberg i J.H. Matthey (1961). Ei

au reuit s sintetizeze o caten de polifenilalanin, folosind un ARNm artificial care coninea

numai nucleotide cu uracil (U), dovedind c tripleta (UUU) codific aminoacidul fenilalanin.
Tabelul 2.1.
Diferite tipuri teoretice de coduri
Codul
monotipic
(4 combinaii)
A
G
C
U

Codul cu dublete
(16 combinaii)
AA
GA
CA
UA

AG
GG
CG
UG

AC
GC
CC
UC

Codul cu triplete
(64 combinaii
AU
GU
CU
UU

AAA
AGA
ACA
AUA
GAA
GGA
GCA
GUA
CAA
CGA
CCA
CUA
UUA
UGA
UCA
UUA

AAG
AGG
ACG
AUG*
GAG
GGG
GCG
GUG*
CAG
CGG
CCG
CUG
UAG
UGG
UCG
UUC

AAC
AGC
ACC
AUC
GAC
GGC
GCC
GUC
CAC
CGC
CCC
CUC
UAC
UGC
UCC
UUC

AAU
AGU
ACU
AUU
GAU
GGU
GCU
GUU
CAU
CGU
CCU
CUU
UAU
UGU
UCU
UUU

* codoni iniiatori ai sintezei unei catene polipeptidice

codoni nonsens, care nu codific nici un aminoacid reprezentnd
codonii terminali ai sintezei unei catene polipeptidice
S-au folosit apoi ARNm artificiali ce conineau o secven de dou nucleotide cunoscute.
De exemplu ARN artificial ce conine secvena UGUGUG, determin sinteza unui lan
polipeptidic n care alterneaz cisteina i valina, deci cisteina este codificat de codonul UGU iar
valina de GUG (figura 2.6.).
Prima
nucleotid a
codonului 5'

U
UUU

C
A

A treia
nucleotid a
codonului 3'

A doua nucleotid a codonului

UUC
UUA
UUG
CUU
CUC
CUA
CUG
AUU
AUC

C
Fen
Leu

Leu
Ileu

UCU

UAU

UCC

UAC

UCA
UCG
CCU
CCC
CCA
CCG
ACU
ACC

Ser

Pro
Tre

G
Tir

UGU
UGC

Cis

UAA

Non 2

UGA

Non 3

UAG
CAU
CAC
CAA
CAG
AAU
AAC

Non 1

UGG
CGU
CGC
CGA
CGG
AGU
AGC

Tri

His
Glu
Asp

U
C
A
G

Arg

U
C
A
G

Ser

U
C

AUA
AUG
GUU
GUC
GUA
GUG

Met
Val
f-Met

ACA
ACG
GCU
GCC
GCA
GCG

Ala

AAA
AAG
GAU
GAC
GAA
GAG

Liz
Ac.asp
Ac.glu

AGA
AGG
GGU
GGC
GGA
GGG

Arg

A
G

Gli

U
C
A
G

Fig. 2.6. Codul genetic

Problema cea mai grea, ce a trebuit rezolvat, a fost precizarea poziiei nucleotidelor n
cadrul codonului, pentru c cele dou nucleotide pot forma trei combinaii: GUU, UGU i UUG.
Exist mai multe ci pentru precizarea ordinii nucleotidelor n cadrul codonului, cea mai folosit
fiind studiul mutaiilor de substituie a unor aminoacizi din unele proteine mai bine cunoscute:
hemoglobina, proteina virusului mozaicului tutunului, triptofan-sintetaza din Escherichia coli .a.

Caracteristicile codului genetic

Informaia genetic este codificat n acidul dezoxiribonucleic (ADN) sau n acidul
ribonucleic viral (ARNv) la unele virusuri, sub forma unor secvene de trei nucleotide (codoni).
Informaia genetic este copiat prin procesul de transcripie de ctre ARNm iar apoi tradus, prin
procesul de translaie, ntr-o secven de aminoacizi, n catena polipeptidic.
n prezent sunt cunoscui toi codonii de ARNm, care codific diferii aminoacizi (fig.
2.6). Codul genetic cuprinde 64 de codoni. Doi codoni marcheaz nceputul sintezei unei catene
polipeptidice i anume AUG i GUG iar trei codoni sunt nonsens: UAA (ocru), UAG (ambr) i
UGA (azur). Aceti codoni au rolul de a marca terminarea sintezei unei catene polipeptidice
(codoni stop).
Codul genetic are urmtoarele caracteristici: este universal, degenerat, ambiguu,
neacoperit i fr virgule.
Prin universalitatea codului genetic se nelege faptul c un anumit codon, codific
acelai aminoacid la orice organism, indiferent de gradul su de evoluie. Dovada cea mai
evident a universalitii codului genetic a fost urmtoarea: s-a izolat ARNm ce rspunde de
sinteza hemoglobinei la iepure i s-a injectat n ovocitele de broasc. S-a constatat c n ovocitele
de broasc se sintetizeaz hemoglobina, dei n mod normal, ovocitele nu sintetizeaz niciodat
hemoglobin.
Codul genetic este degenerat, n sensul c mai muli codoni codific acelai aminoacid.
De exemplu, arginina este codificat de urmtoarele triplete: GGU, GGC, GGA, AGA i AGG.

n ceea ce privete importana nucleotidelor din codon s-a constatat c primele dou sunt
cele mai semnificative, n timp ce a treia poate fi uor nlocuit. Dac cea de a treia nucleotid
este o baz purinic ea poate fi nlocuit tot cu o baz purinic sau dac este o baz pirimidinic,
poate fi nlocuit tot printr-o baz pirimidinic. Diferii codoni, care au primele dou nucleotide
identice, pot codifica acelai aminoacid. Numai metionina i triptofanul sunt codificai de cte un
singur codon (AUG i respectiv UGG).
n mod obinuit fiecare codon (triplet) codific un singur aminoacid. S-a constatat, n
unele cazuri, c un codon poate codifica mai muli aminoacizi. Aa este cazul codonilor GCG
care codific alanina i arginina; CGG-prolina i arginina; GGA-glicerina i acidul glutamic;
AGG-glicina i fenilalanina. Se afirm c aceast nsuire reprezint un avantaj evolutiv,
deoarece nlocuirea unui aminoacid cu altul printr-o mutaie, ntr-o caten polipeptidic este mai
puin duntoare, dac cei doi aminoacizi au proprieti asemntoare, conferindu-i codului
genetic caracterul de ambiguu.
Codul genetic este neacoperit n sensul c doi codoni vecini nu au nucleotide comune i
este fr virgule, ntre doi codoni nu exist spaii sau ali codoni care s joace rolul unor semne
de punctuaie.
S-a demonstrat c citirea mesajului genetic ncepe dintr-un punct fix, se realizeaz ntrun singur sens, astfel c, absena unui nucleotid (deleie) sau adugarea altuia (adiie), schimb
sensul mesajului.

2.4. BIOSINTEZA PROTEINELOR

Procesul de biosintez a proteinelor este mult mai complex dect cel de sintez a acizilor
nucleici i cuprinde dou etape importante: transcripia informaiei genetice i translaia
informaiei genetice.

2.4.1. Transcripia informaiei genetice

Transcripia constituie fenomenul prin care informaia genetic de pe o poriune din
catena de ADN este transcris (copiat) ntr-o molecul de ARNm. Transcripia mesajului genetic
din molecula de ADN pe cea din ARNm se face ntr-o form care servete ca matri pentru
sinteza proteinelor. Sinteza ARNm este catalizat de enzima ARN-polimeraza, enzim universal
ce a fost identificat n celulele bacteriene, vegetale i animale.

Mecanismul propriu-zis al transcripiei informaiei genetice din ADN n molecula de

ARNm se realizeaz astfel: enzima ARN-polimeraza se leag specific ntr-o poziie a moleculei
de ADN, ce corespunde cu nceputul unei gene. Legturile de hidrogen se rup pe poriunea genei
respective, segmentul respectiv de caten se rotete cu 180 n spaiu, servind ca matri pentru
sinteza catenei de ARNm.
ARN-polimeraza asigur ncatenarea corect a ribonucleotidelor existente n nucleu.
Dup ce s-a realizat transcripia, se refac legturile de hidrogen ntre catenele moleculei de ADN.
De o foarte mare importan este descoperirea c procesul de transcripie la nivelul unei
gene se realizeaz pe o singur caten de ADN. Aa se explic faptul c o gen deine informaia
genetic necesar sintezei unei singure proteine.
n sens mai larg, transcripia se refer i la sinteza celorlalte dou tipuri de ARN
implicate n procesul de biosintez a proteinelor.
Acidul ribonucleic solubil sau de transfer (ARNs) se sintetizeaz tot pe o matri de
ADN. Fiecare tip de ARNs este codificat de cte o singur secven de nucleotide din ADN, deci
de cte o gen. Acidul ribonucleic ribozomal (ARNr) este produsul direct al mai multor gene.
Detalii despre ARNs i ARNr au fost precizate ntr-un paragraf anterior.

2.4.2. Translaia informaiei genetice

Translaia este mecanismul prin care secvena codonilor din ARNm este tradus ntr-o
anumit succesiune de aminoacizi ce intr n constituia unui lan polipetidic. Realizarea
procesului de translaie implic participarea mai multor componente celulare ce alctuiesc un
aparat de translaie. Aparatul de translaie cuprinde urmtoarele elemente: diferite tipuri de ARNs
corespunztoare tipurilor de aminoacizi, aminoacizii, ribozomii, enzimele activatoare ale
aminoacizilor, cofactorii energetici, ATP i GTP, factori de iniiere, alungire i terminare a
sintezei lanului polipeptidic.
Pentru sinteza celular a proteinelor este necesar o anumit cantitate de energie,
formarea unei singure legturi peptidice necesitnd 0,5 kcal/mol. Aceast energie este asigurat
de acidul adenozintrifosforic (ATP) care, prin hidroliz, pune n libertate unul sau doi radicali
fosforici elibernd energia corespunztoare:
ATP + H2O

AMP + P P + 8 kcal/mol.

Sinteza proteic se desfoar concomitent cu hidroliza ATP i AMP i doi radicali

fosforici din care rezult 8 kcal/mol din care 0,5 kcal/mol sunt folosite pentru realizarea legturii

peptidice iar restul de 7,5 kcal/mol pentru meninerea echilibrului reaciei n favoarea sintezei
proteice i nu a hidrolizei.
O prim etap n sinteza proteinelor o constituie activarea aminoacizilor i formarea
complexului aminoacil-ARNs. Activarea aminoacizilor se realizeaz cu ajutorul energiei rezultate
din hidroliza ATP i n prezena enzimei aminoacilsintetaza (E). Reacia de activare a
aminoacizilor poate fi redat astfel:
AA1 AMP E + P

AA1 + ATP + E

Aminoacizii, dup ce au fost activai, se pot ataa de molecula unui ARNs specific:
AA1 AMP E + ARNs1

AA1 - ARNs1 + AMP + E

Cele dou reacii au loc succesiv, sunt catalizate de aceeai enzim (aminoacilsintetaza)
i ca atare se poate scrie reacia general:
aminoacilsintetaza
AA1 - ARNs1 + AMP + P P

AA1 + ATP + ARNs1

n urmtoarea faz complexul aminoacil-ARNs se ataeaz de poliribozomi, la nivelul

crora are loc iniierea sintezei lanului proteic. Ribozomul asigur de aa manier asocierea
acestor elemente nct zona anticodon a ARNs s poat recunoate codonul corespunztor din
ARNm, ducnd astfel la o descifrare corect a mesajului genetic. Dup fixarea aminoacidului,
ARNs devine liber putnd transporta alte molecule de aminoacid la nivelul ribozomului.
ncatenarea aminoacizilor se realizeaz de ctre enzima peptidiltransferaza i const n realizarea
legturilor peptidice ntre gruparea carboxil a unui aminoacid i gruparea aminic a celuilalt
(figura 2.7.).
Reacia de ncatenare a aminoacizilor poate fi redat astfel:
peptidiltransferaza
AA1 - ARNs1 + AA2 - ARNs2 + AA3 - ARNs3 +
AA1 - AA2 - AA3 + ARNs1 + ARNs2 + ARNs3 +

Fig. 2.7. Reprezentarea schematic a procesului de translaie

(dup Kimball, 1978)

ncheierea sintezei catenei polipeptidice se realizeaz cu ajutorul a doi factori proteici

care sunt activai n prezena codonilor de ncheiere UAA, UAG i UGA. Ca urmare, catena
polipeptidic se detaeaz de ribozomi i de ARNs care a adus ultimul aminoacid. n prezent s-a
reuit sinteza unor substane proteice ntr-un sistem celular liber (populaii de celule la care s-a
distrus membrana celular), folosind ARNm artificial (M.W. Niremberg, 1961).

Test de autoevaluare
1. Transcripia constituie fenomenul prin care informaia genetic de pe o poriune dintr-o caten de ADN
este transcris (copiat) ntr-o molecul de:
a.
ADN monocatenar ?
b.
ARN viral ?
c.
ARN solubil ?
d.
ARN mesager ?
e.
ARN ribozomal ?
2.

Transcripia mesajului genetic se realizeaz cu ajutorul unei enzime universale denumit:

a.
ARN polimeraza ?
b.
ADN polimeraza ?
c.
reverstranscriptaza ?
d.
aminoacil - ARNs - sintetaza ?
e.
fosforilaza ?

3. Enzima aminoacilsintetaza intervine, cu rol catalitic, n urmtoarele etape ale translaiei informaiei
genetice:
a.
legarea amioacidului de ARNs specific ?
b.
activarea aminoacidului de o molecul de ATP ?
c.
polimerizarea aminoacizilor n cadrul lanului polipeptidic ?
4.

Enzima peptidiltransferaza catalizeaz urmtoarele etape ale translaiei informaiei genetice:

a.
activarea aminoacidului de o molecul de ATP ?
b.
polimerizarea aminoacizilor ntr-un lan polipeptidic ?
c.
ataarea aminoacidului de un ARNs specific ?

5. ncheierea sintezei lanului polipeptidic se realizeaz cu ajutorul a doi factori proteici, activai n prezena
codonilor STOP. Acetia sunt:
a.
CAA, CUA, CGG ?
b.
UAA, UAG, GUG ?
c.
CAC, UAG, GUG ?
d.
UAA, UAG, UGA ?
6.

n molecula de ADN, cele patru tipuri de baze azotate se gsesc n urmtoarele combinaii corecte:
a.
A=T
b.
A=A
c.
T=A
d.
GC
e.
GG
f.
CC

7.

Bazele azotate pirimidinice din ADN sunt ?

a.
Adenina i Timina ?
b.
Citozina i Timina ?
c.
Adenina i Guanina ?

d.
e.
8.

Adenina i Uracilul ?
Citozina i Guanina ?

O nucleotid este alctuit din:

a.
o baz azotat, un radical fosforic i un aminoacid ?
b.
un zahar, un radical fosforic i o baza azotat ?
c.
un radical fosforic, o capsomer i un aminoacid ?
d.
un zahar, un aminoacid i radical fosforic ?

9. Denaturarea i renaturarea ADN sunt determinate de un anumit factor de mediu extern; s se precizeze
acest factor:
a.
radiaia electromagnetic ?
b.
colchicina ?
c.
substanele chimice alkilante ?
d.
temperatura ?
e.
acidul nitros ?
10. ARNs are trei regiuni distincte; care dintre acestea este responsabil de recunoaterea unui anumit codon
din molecula de ARNm:
a.
regiunea pentru recunoaterea ribozomului ?
b.
regiunea anticodon ?
c.
regiunea pentru recunoaterea aminoacidului ?
d.
regiunea nodoc ?
11. n sinteza replicativ a ADN este implicat enzima:
a.
ARN polimeraza ?
d.
ARN fosforilaza ?
b.
ADN polimeraza ?
e.
transcriptaza invers ?
c.
ARN replicaza ?
12. O molecul de ARNm, format numai din uracil (UUUUUU..) codific aminoacidul:
a.
Triptofan ?
b.
Arginin ?
c.
Fenilalanin ?
d.
Serin ?
e.
Tirozin ?
13. O molecul de ARNm, format din dou nucleotide, uracil (U) i guanin (G), (UGUGUG..) codific
aminoacizii:
a.
Fenilanalina i Leucina ?
b.
Tirozina i Histidina ?
c.
Metionina i Valina ?
d.
Cisteina i Valina ?
e.
Serina i Lizina ?
14. n codul genetic, trei codoni nu codific aminoacizi ci marcheaz sfritul unui mesaj genetic (codoni
STOP); acetia sunt:
a.
UUU, UAA, UAG ?
b.
UAA, UAA, UGA ?
c.
UAA, UAG, UGG ?
d.
UAG, UAC, UCC ?
e.
UAA, UAG, UGA ?

2.5. RECOMBINAREA GENETIC LA BACTERII

Recombinarea genetic la bacterii se realizeaz pe urmtoarele ci: transformare,

conjugare, sex-ducie i transducie.
Transformarea. Prin transformare se nelege transferul intracelular al unui segment de
ADN de la o bacterie donor, n genomul unei bacterii receptor. Frecvena cu care se realizeaz
transformarea este foarte redus, sub 1%, iar dimensiunea minim a segmentului de ADN
transformat este de 450 perechi de nucleotide.
Procesul de transformare se realizeaz atunci cnd este o cantitate mare de ADN
implicat n proces i n starea de competen a celulelor bacteriene (modificri ale membranei
ce permit ptrunderea ADN).
Dup ce ADN exogen de la tipul donator a ptruns n bacteria receptoare are loc un
fenomen de sinaps ntre cele dou molecule de ADN, n zona complementar, apoi ADN
exogen se integreaz n cromozomul bacteriei receptor, n procesul de replicaie al acestuia.
Transformarea realizeaz, de obicei, transferul unei singure gene, iar n cazuri mai rare,
dou sau trei gene linkate, n cel din urm caz dovedindu-se c genele respective sunt dispuse
alturat pe cromozom.
Transformarea genetic se realizeaz cu o frecven mai mare la sue diferite ale
aceleiai specii de bacterii i mai rar ntre specii diferite, dar nrudite.
Conjugarea. Fenomenul de conjugare a fost descoperit n anul 1946 de J. Lederberg i
E. L. Tatum, fiind considerat un fenomen de parasexualitate, similar oarecum cu reproducerea
sexuat de la organismele eucariote. Conjugarea se realizeaz numai ntre dou bacterii de sex
opus, iar sexul este determinat de o plasmid, denumit factor de fertilitate sau sex-factor, notat
cu F. Celulele care posed acest factor sunt "mascule", notate cu F+, iar cele ce nu posed acest
factor sunt "femele", F-. Factorul de fertilitate se poate gsi liber n citoplasm i n acest caz se
replic independent de cromozomul bacteriei, dar n acest caz fenomenul de conjugare se produce
cu o frecven destul de redus i anume de 10-5. n unele cazuri, factorul de fertilitate poate fi
integrat n cromozomul bacterian, iar aceste celule mascule au fost notate cu Hfr (high frequency
of recombination). ntre celulele Hfr i celulele F-, conjugarea are loc cu o frecven mult mai
mare i anume 10-1.
Conjugarea a fost studiat la microscopul electronic, descoperindu-se c bacteriile Hfr i
F+ posed un apendice filamentos, denumit F-pilus care este absent n celulele femele (F-). Aceti
F-pilus (sau sex-pili) realizeaz legtura dintre dou bacterii de sex opus, fiind un fel de tuburi
prin care materialul genetic al unei bacterii (F+ sau Hfr) trece total sau parial n celulele F-.
Fenomenul de conjugare este strns legat de sinteza ADN.

Sex-ducia (F-ducia sau transducia F-mediat) este o alt cale de recombinare genetic
la bacterii, descoperit de F. Jacob i E.L. Wollman (1960).
Cercetrile care au dus la descoperirea acestui tip de recombinare s-au fcut la E. coli, la
o su Hfr, care avea factorul de fertilitate inserat lng gena lac+. n procesul de conjugare dintre
o bacterie Hfr lac+ i alta F-lac- ar fi trebuit s apar recombinani pentru gena lac+, foarte trziu,
aproape de sfritul transferului de material genetic. S-a constatat c au aprut civa
recombinani lac+, foarte devreme. Concluzia a fost urmtoarea: factorul F este eliberat din
cromozomul bacterian, dar printr-un proces de crossing-over, ntre cromozom i factorul F are loc
un schimb de material genetic, rezultnd un factor de fertilitate recombinat, notat cu F'.
Prin trecerea factorului F' ntr-o celul F-, el poate fi inclus n cromozomul bacterian
ntr-o regiune omoloag cu regiunea cromozomal pe care o poart, orientnd procesul de
conjugare la fel ca n cazul bacteriei Hfr iniiale.
Sex-ducia poate fi definit ca fiind procesul prin care gene ale cromozomului bacterian
sunt ncorporate n factorul de fertilitate F i pe care le transfer la celulele F- prin procesul de
conjugare.
n factorul F pot fi incluse diferite gene, deoarece factorul F poate fi integrat n diferite
regiuni ale cromozomului.
Celulele bacteriene ce prezint factorul F' pot fi transformate n celule Hfr, prin inseria
factorului F' n cromozomul bacterian.
Transducia este procesul prin care bacteriofagii temperai realizeaz transferul de
informaia genetic de la o bacterie la alta. Acest fenomen a fost descoperit de N.D. Zinder i J.
Lederberg n anul 1952, la bacteria Salmonella typhimurium, cu ajutorul bacteriofagului P32.
Experiena efectuat de cei doi cercettori a constat n urmtoarele: ntr-un tub Davis, separat la
mijloc printr-un filtru de sticl poroas ce permite trecerea bacteriofagilor dar nu i a bacteriilor,
a introdus n cele dou brae dou sue bacteriene diferite (figura 2.8).

Fig. 2.8. - Evidenierea transduciei bacteriene

Sua LA22 este auxotrof dar cu genotipul fen-tri-met+hia+, deci prezint concomitent
dou mutaii biochimice, neputnd sintetiza aminoacizii fenilalanin i triptofan, iar sua LA2
este tot auxotrof dar cu genotipul fen+tri+met-his- pentru alte dou gene, neputnd sintetiza
aminoacizii metionin i histidin. Sua LA22 este lizogen, n sensul c, n cromozomul su era
integrat profagul P22. Unii bacteriofagi sunt eliberai din cromozomul bacteriei i produc liza
acesteia. Bacteriofagii pot trece prin filtrul de sticl, produc liza bacteriei LA2, apoi pot reveni n
tubul n care se gsete bacteria LA22 cu care pot stabili din nou relaii lizogene n urma crora
pot apare indivizi recombinai prototrofi (de tip slbatic) pentru toate cele patru gene,
fen+tri+met+his+.
Explicaia acestui fenomen este urmtoarea: bacteriofagul P22 producnd liza bacteriei
LA2 include, cu o mic frecven, 1 la 105-107, segmentul de cromozom cu genele fen+tri+ de la
aceast su. Stabilind relaii lizogene cu sua LA22, bacteriofagul P22 transfer acest segment n
cromozomul acestuia rezultnd recombinani genetici de tip slbatic (fen+tri+met+his+).
Cercetrile privind transducia au artat c de obicei se transfer o singur gen, n
cazuri rare dou gene i niciodat trei gene. n cazul transferului a dou gene, se demonstreaz c
cele dou gene sunt foarte apropiate pe cromozomul bacteriei, servind la stabilirea precis a
locilor acestora, deci la alctuirea hrilor genetice cu ajutorul transduciei.
Transferul concomitent a dou gene prin fenomenul de transducie a fost denumit
cotransducie.
Transducia este de dou tipuri: transducie specializat, cnd un bacteriofag transfer
numai o anumit gen i generalizat cnd un bacteriofag poate transfera oricare gen dintr-un
cromozom bacterian.
n cazul transduciei generalizate se poate realiza transferul oricrei gene de la o bacterie
donor la o bacterie receptor, deci bacteriofagul transductant poate ncorpora oricare gen i o
transfer altei bacterii.

CAPITOLUL 3
EREDITATEA MENDELIAN
Motto:
"Gregor Mendel, o figur cu care se poate mndri ntreaga
omenire
C. Sandu Aldea
Odat cu Mendel, fenomenele biologiei au dobndit dintr-o dat
rigoarea matematicienilor. Metodologia, tratarea statistic i
reprezentarea simbolic, impun ereditii o ntreag logic intern

Francois Jacob

Apariia lucrrii Versuche ber Pflanzenhybriden n 1866, a naturalistului i

matematicianului ceh Gregor Johhan Mendel (1822 1884) a constituit un moment important n
istoria biologiei. Gregor Mendel este considerat unul din fondatorii geneticii, datorit teoriei
factorilor ereditari, sintez a celor dou legi ale ereditii: legea segregrii caracterelor (legea
puritii gameilor) i legea segregrii independente a perechilor de caractere (legea liberei
combinaii a factorilor ereditari).

3.1. TERMINOLOGIA FOLOSIT N GENETICA

MENDELIAN
n cercetrile sale, G. Mendel a folosit n mod deosebit mazrea, Pisum sativum, plant
autogam, care prezint caractere distincte de la o varietate la alta. Caracterele luate n studiu au
fost urmtoarele: talia plantelor (nalt sau pitic), culoarea pstilor nemature (galben sau
verde),culoarea cotiledoanelor (verde sau galben), suprafaa seminelor (neted sau zbrcit),
culoarea tegumentului boabelor (alb sau cenuie), poziia florilor (axial sau terminal), forma
pstilor (dreapt sau gtuit ntre semine). Aceste perechi de caractere au fost numite mai trziu
alelomorfe (W. Bateson i E. R. Saunders, 1902), din care a rezultat termenul de alele.
Determinanii ereditari au fost numii i factori ereditari (indicai ulterior prin noiunea de
gen).

nainte de a analiza mecanismul de transmitere a caracterelor n procesul de hibridare este

necesar s fie definite cteva noiuni de baz, care vor servi pentru nelegerea lui.
Hibridarea este ncruciarea dintre doi indivizi, care se deosebesc prin una sau mai multe
perechi de caractere. Prinii (genitorii) care particip la hibridare se noteaz cu P (lat. parentes
prini) iar urmaii (descendenii) se noteaz cu F (lat.-fillii-copii).
n funcie de numrul de perechi de caractere prin care se deosebesc prinii, exist mai
multe tipuri de hibridare: monohibridarea (o pereche de caractere), dihibridarea (dou perechi de
caractere) etc.
n concepia lui G. Mendel, determinanii genetici au fost numii factori ereditari , n
genetica modern fiind nlocuii prin termenul de gene. Gena este unitatea elementar ce deine
informaia genetic a unui caracter ereditar, transmis de la prini la urmai. Gena ocup un loc
precis n cromozom (locus). n celulele somatice, cromozomii omologi, unul de origine matern,
cellalt de origine patern, vor avea i loci omologi, ocupai de gene alele. Dac alelele sunt
identice (AA sau aa) indivizii se numesc homozigoi pentru aceast pereche de gene, iar cnd
alelele sunt diferite (Aa) indivizii sunt considerai heterozigoi. Ereditatea mendelian presupune,
n principal, interaciunea dominan-recesivitate ntre genele alele: alela care se manifest
fenotipic la hibrizii F1 este dominant, iar perechea sa, care nu se exteriorizeaz prin caracterul
respectiv, este recesiv.
Hibridrile de orice nivel, ofer posibiliatea unei duble analize: sub aspect genotipic i
sub aspect fenotipic.
Genotipul reprezint totalitatea genelor unui individ sau constituia genetic a acestuia.
Noiunea de genotip se utilizeaz ns i n sens restrns, numai pentru una sau cteva perechi de
gene alele (AA, Aa, aa, AABB, AaBb etc).
Fenotipul reprezint totalitatea caracterelor morfologice, fiziologice, biochimice i
comportamentale ale individului, care rezult din interaciunea genotipului cu mediul.

3.2. LEGILE MENDELIENE ALE EREDITII

n lucrrile i manualele care s-au ocupat de opera lui Mendel, rezultatele la care a ajuns
el au fost prezentate de diferii autori n mod diferit. n legtur cu legile lui Mendel sunt
menionate diferite formulri: legea uniformitii hibrizilor n prima generaie, legea dominanei,
legea puritii gameilor, legea segregrii caracterelor, legea liberei combinri a caracterelor
numit i legea independenei caracterelor. Dup prerea noastr din lectura lucrrii lui Mendel
Experiene asupra hibrizilor de plante, se desprind dou legi:
1. Legea segregrii sau a disjunciei caracterelor n generaia a doua hibrid (F2)
(datorit separrii sau segregrii n meioza hibridului F1 a alelelor dominante i recesive i unirii
ntmpltoare a gameilor pentru formarea generaiei F2).
2. Legea combinrii libere a caracterelor sau a segregrii independente a acestora
(apariia la ncruciarea polihibrid, n urma segregrii i combinrii libere a caracterelor, a unor
noi combinaii la descendeni).

3.2.1. Legea segregrii caracterelor (legea puritii gameilor)

Gregor Mendel a efectuat un numr impresionant de mono, di i trihibridri la mazre
(Pisum sativum L.) i la alte specii din genurile: Phaseolus, Mirabilis, Cirsium, Melandrium, Zea,
Antirrhinum, Hieracium etc.
Segregarea caracterelor ereditare a fost formulat, n urma analizei fenotipice i
genotipice a unor monohibridri, dei poate fi demonstrat i n cazul celorlalte tipuri de
hibridare.
Monohibridarea este ncruciarea ntre indivizi ce se deosebesc printr-o singur pereche
de caractere.
G. Mendel a ncruciat o varietate de mazre cu semine galbene, cu o varietate cu
semine verzi, ambele homozigote (pure din punct de vedere genetic). n generaia F1, au rezultat
numai plante cu semine galbene.
Caracterul culoare galben a fost numit dominant, iar perechea sa, culoare verde, recesiv
(lat. recesere ascuns).
n urma autofecundrii plantelor din generaia F1, a rezultat generaia F2, n care, s-au
obinut dou grupe fenotipice: (75%) semine galbene i (25%) semine verzi, prin urmare,
un raport de segregare fenotipic de 3:1.
Notnd caracterul culoare galben cu A, iar verde cu a, n figura 3.1. se pot analiza sub
aspect fenotipic i genotipic, prinii, generaiile F1, F2 i F3.

Fig. 3.1. Structura genotipurilor i a fenotipurilor n cazul monohibridrii

G. Mendel a explicat segregarea factorilor ereditari astfel: n celulele somatice, factorii
ereditari se gsesc sub form de pereche (AA, Aa, aa). n urma meiozei, factorii ereditari segreg,
astfel c, gameii vor avea numai cte un singur reprezentant din fiecare pereche (A sau a), deci
sunt puri din punct de vedere genetic.
Prinii sunt homozigoi (AA i aa) i vor produce cte un singur tip de gamei (A sau a).
n generaia F1 toi indivizii sunt identici fenotipic (semine galbene) i genotipic (Aa). Indivizii
generaiei F1, heterozigoi, vor forma dou tipuri de gamei pentru fiecare sex: 50% A i 50% a.
Combinarea probabilistic a gameilor de sex diferit, face ca n F2 s rezulte trei combinaii
genotipice, (25%) AA, 2/4 (50%) Aa i (25%) aa (raportul de segregare genetic 1:2:1) i
dou grupe fenotipice semine galbene i (25%) semine verzi (raportul de segregare
fenotipic 3:1).
R. R. Punnett imagineaz un ah de combinaii a gameilor celor dou sexe, dnd
posibilitatea identificrii rapide a tuturor genotipurilor i fenotipurilor din generaia F2:

Gamei
50% A
50% a

Gamei
50% A
25% AA
25% Aa

50% a
25% Aa
25% aa

Gregor Mendel a efectuat monohibridri i cu alte perechi de caractere, constatnd acelai

lucru: n generaia F1 au rezultat indivizi asemntori unui printe, iar n generaia F2, segregarea
s-a realizat ntr-un raport foarte apropiat de 3:1 (tabelul 3.1.).
Tabelul 3.1.
Rezultatele monohibridrilor la mazre (obinute de G. Mendel)
Caracterul
Forma seminelor
Culoarea cotiledoanelor
Culoarea tegumentului
Consistena pstilor
Culoarea pstilor
Dispoziia florilor
Forma plantei
Total

Dominante
(D)
Neted
Galben
Colorat
Tare
Verde
Axilar
nalt
-

nsuiri
Recesive
Dominante
(r)
Zbrcit
5.474
Verde
6.022
Alb
705
Moale
862
Galben
428
Terminal
651
Pitic
187
14.949

Recesive

Raportul
D/r

1.850
2.001
224
299
152
207
277
5010

2,98:1,01
3,01:0,99
3,03:0,96
2,98:1,02
2,95:1,05
3,03:0,96
2,95:1,04
2,99:1,01

Monohibridrile efectuate de Gr. Mendel, au fost denumite mai trziu monohibridri de

tip Pisum.
Dup redescoperirea legilor mendeliene, imediat dup anul 1900, s-au realizat
monohibridri i la diferite specii de animale. Obinndu-se rezultate asemntoare celor de la
plante, s-a demonstrat, universalitatea legilor mendeliene.
n anul 1901, Bateson W. a ncruciat diferite rase de gini, care se deosebeau prin forma
crestei: mazre, trandafir i simpl. Formele de creast mazre i trandafir sunt
dominante fa de forma "simpl", iar n generaia F2 segregarea s-a produs n raportul 3:1 (Raicu
P. 1980).
Zoologul francez Cunot L. (1902) a ncruciat oareci cu blana de culoare gri cu oareci
de culoare alb, obinnd n generaia F1 oareci gri, iar n generaia F2 segregarea s-a produs n
raportul 3:1.
Experiene similare s-au fcut apoi la foarte multe specii de animale, ntrind ideea de
universalitate a legilor mendeliene.

3.2.2. Legea segregrii independente a perechilor de caractere

Cea mai simpl form de polihibridare este dihibridarea, denumire introdus pentru prima
dat de ctre Hugo de Vries (1900). n acest caz, sunt urmrite dou perechi de caractere.
La ncruciarea a dou soiuri de mazre: plante cu semine galbene i netede x, plante cu
semine verzi i zbrcite, n F1, G. Mendel a obinut plante cu semine galbene i netede. n F2,
perechile de caractere analizate separat, au segregat dup raportul de 3:1 i anume: 75% semine

galbene i 25% semine verzi, precum i 75% semine netede i 25% semine zbrcite. Analiznd
ns modul cum apar mpreun cele dou perechi de caractere, G. Mendel a constatat c raportul
dintre ele este:
56,25% semine galbene i netede;
18,75% semine galbene i zbrcite;
18,75% semine verzi i netede;
6,25% semine verzi i zbrcite.
Din aceast analiz, ajunge la concluzia c pentru fiecare pereche de caractere segregarea
se produce independent, iar raportul fenotipic pentru ambele caractere este de 9:3:3:1. Caracterele
s-au separat n timpul formrii gameilor i s-au combinat n timpul fecundrii n toate modurile
posibile, formnd cele patru grupe fenotipice.
Aceste rezultate i-au permis lui Mendel s emit legea independenei caracterelor sau a
liberei combinri a factorilor ereditari. Dup prerea lui, cei doi gamei care particip la
fecundare nu-i contopesc caracterele n hibrid, ci ele stau alturate unele de altele, pentru ca apoi
s se despart din nou n meioz spre a produce, prin fecundare, generaia a doua (F2).
Pe baza celor artate la monohibridare se poate alctui n mod analog, un ah de
combinaii lund n considerare, de data aceasta, dou perechi de caractere care se pot nota cum
urmeaz:
A = neted

a = zbrcit

B = galben

b = verde

Mecanismul ahului devine simplu dac se are n vedere faptul c n gamei numrul de
cromozomi, respectiv de caractere alele, este pe jumtate dect n celulele somatice.
Pentru ncruciarea mazrii cu semine netede i galbene cu mazre cu semine zbrcite i
verzi, avnd n vedere c individul este rezultatul fecundrii a doi gamei, formula prinilor va fi:
AABB x aabb.
Gameii prinilor formai prin reducerea cromatic vor avea formula: AB i ab. Din
combinarea lor se va nate generaia F1, cu formula AaBb.
Hibridul F1 formeaz patru tipuri de gamei pentru fiecare sex, din combinarea crora, doi
cte doi, rezult generaia F2. Gameii se formeaz n numr egal att pentru sexul femel, ct i
pentru sexul mascul. Din combinarea ntmpltoare a celor patru grupe de gamei, apar 16
combinaii de caractere, 9 genotipuri i 4 fenotipuri (fig. 3.2.).
Fenotipurile apar n raportul de 9:3:3:1, adic:

9/16 indivizi neted galben (AABB, AABb, AaBB, AaBb, AABb, AaBb,
AaBB, AaBb, AaBb);
3/16 indivizi verde neted (AAbb, Aabb, Aabb);
3/16 indivizi zbrcit galben (aaBB, aaBb, aaBb);
1/16 indivizi zbrcit verde (aabb).
Din analiza celor 16 combinaii de caractere rezult c acestea reprezint 9 genotipuri,
care segreg n raportul: 1/16 AABB:2/16 AABb:2/16 AaBB:4/16 AaBb:1/16 AAbb:2/16
Aabb:1/16 aaBB:2/16 aaBb:1/16 aabb (sau 1:2:2:4:1:2:1:2:1)

Fig. 3.2. Dihibridare ntre un soi de mazre cu bobul galben-rotund i unul cu bobul verde-zbrcit

Ceea ce i atrage atenia lui G. Mendel n mod deosebit n aceast experien, este apariia
combinaiilor noi de caractere AAbb i Aabb (semine netede i verzi) precum i aaBB i aaBb
(semine zbrcite i galbene). Acesta este motivul care l conduce la formularea celei de a doua
legi cu privire la independena caracterelor sau combinarea liber a caracterelor.
Aceleai constatri se pot face analiznd i o trihibridare. Dac se consider, de exemplu,
c prinii au genotipurile AABBCC i aabbcc, hibridul din F1 cu genotipul AaBbCc va forma 8
tipuri de gamei: ABC, ABc, AbC, aBC, Abc, aBc, abC, abc.
Grupnd combinaiile hibride n F2 se constat c cele 64 de combinaii genotipice
segreg n opt grupe fenotipice, dup cum urmeaz:
27 posed trei caractere dominante (A,B,C)
9 posed dou caractere dominante i unul recesiv (A,B,c)

9 posed dou caractere dominante i unul recesiv (A, b, C)

9 posed dou caractere dominante i unul recesiv (a, B, C)
3 posed un caracter dominant i dou recesive (A, b, c)
3 posed un caracter dominant i dou recesive (a, B, c)
3 posed un caracter dominant i dou recesive (a, b, C)
1 posed trei caractere recesive (a, b, c)
Rezult deci opt fenotipuri, repartizate n raportul: 27:9:9:9:3:3:3:1.
Rezultatele obinute n urma trihibridrii de tip Pisum, confirm legea segregrii
independente a caracterelor.

3.3. NCRUCIAREA ANALIZATOARE

n experienele pe care le-a executat G. Mendel la ncruciarea mazrei cu semine de
culoare galben cu mazrea cu semine de culoare verde s-au obinut n F2, aa cum s-a artat,
semine de culoare galben i semine de culoare verde n raportul 3:1. Seminele de culoare
galben din F1 au produs, deci, n F2 plante cu semine att de culoare galben ct i de culoare
verde. Aceasta dovedete c ele aveau structur genetic heterozigot. Pentru a analiza structura
genetic a descendenilor hibrizi cu fenotip dominant se folosete retroncruciarea sau
backcrossarea cu printele recesiv sau cu un tester recesiv, metod care poart numele de
testcross. n fond, testcross-ul ajut la descoperirea felurilor de gamei formai de un individ
dominant, precum i dac el este homozigot sau heterozigot pentru anumite caractere.
Homozigoii dominani produc o descenden cu fenotipul parental, n timp ce
heterozigoii dominani n descendena testcross segreg (figura 3.3).

Fig. 3.3. Schema segregrii n cazul testcross-ului unor descendeni hibrizi cu fenotip dominant

(AA sau aa)

CAPITOLUL 4
TEORIA CROMOZOMIC A EREDITII

4.1. GENE I CROMOZOMI

Elaborarea teoriei celulare de ctre M. J. Schleiden i T. Schwann (1838) a marcat
nceputul unor noi descoperiri la nivel celular. Dup descoperirea i descrierea mecanismului
mitozei (W. Fleming, 1882) i a meiozei (E. van Beneden, 1883), W. Waldeyer (1888), descoper
c n momentul diviziunii nucleului, acesta se mparte ntr-un anumit numr de corpusculi pe care
i-a numit cromozomi.
Cercetrile efectuate de W. S. Sutton (1902) la cosa (Brachystola magna), aduc
dovada localizrii factorilor ereditari mendelieni pe cromozomi, constatnd c fiecare cromozom
are o anumit caracteristic, care se pstreaz constant n timpul mitozei i meiozei. Sutton a
fost primul citolog care a atras atenia asupra asemnrii dintre disjuncia cromozomilor n
meioz i segregarea caracterelor alelomorfe n procesul de formare a gameilor.
n 1902, T. Boveri face aceleai constatri la ariciul de mare (Paracentrotus lividus). El
studiaz i evoluia ovulelor fecundate concomitent de 2 spermatozoizi din care rezult gamei
triploizi (2n=54), constatnd c numai indivizii diploizi (2n=36) sunt normali. Boveri ajunge la
concluzia c dezvoltarea normal a indivizilor este condiionat de prezena unor garnituri
complete de cromozomi, pe care se afl localizai factorii ereditari.
E. B. Wilson (1905) studiind meioza la insectele din genul Protenor, constat c la
masculi 2n=13 cromozomi, iar femelele posed n celulele somatice 2n=14 cromozomi. Femelele
vor produce gamei identici cu n=7, n timp ce masculii vor avea dou tipuri de gamei, cu n=7 i
n=6. Dac un ovul va fi fecundat de un spermatozoid cu 7 cromozomi, va rezulta o femel, iar
cnd spermatozoidul are n=6 cromozomi va rezulta un mascul.
Aceste constatri au dovedit c sexul organismelor este determinat ereditar, de gene
localizate n anumii cromozomi.
T.H. Morgan i coala sa a preluat aceast ipotez, dezvoltnd-o i aprofundnd-o,
formulnd o teorie unitar denumit teoria cromozomic a ereditii.

n concepia lui Morgan, genele sunt plasate n cromozomi n anumite poziii denumite
loci (singular locus), sub form de pereche, determinnd nsuiri contrastante ale aceluiai
caracter.
Prin mutaia unei gene normale (sau de tip slbatic) a aprut o gen nou, dar care ocup
acelai locus n cromozomii omologi. Acest cuplu de gene ce determin nsuirea normal i cea
mutant a unui caracter, a primit denumirea de gene alele. Genele ce determin caracterul normal
se noteaz cu liter mare sau cu liter mic i cu semnul + (de exemplu A sau a+ ) iar gena alel
cu liter mic (a).
Gena este considerat unitate ereditar funcional, mutaional i de recombinare
genetic. Studiind un numr mare de masculi i femele de Drosophila melanogaster, Morgan a
artat c femelele au o pereche de cromozomi identici (XX) iar masculii, un singur cromozom X
sub form de bastona i unul neomolog numit cromozom Y sub forma unui bastona frnt.
Descoperirea cromozomilor sexului constituie o alt dovad c genele sunt plasate n cromozomi.
Tot la Drosophila melanogaster, s-a constatat c la unii indivizi poate lipsi un
cromozom sau poate exista un cromozom n plus. Aceasta fiind corelat cu absena unui caracter
sau prezena unui caracter , constituie nc un argument c genele sunt plasate n cromozomi (C.
B., Bridges, 1921).
n urma acestor rezultate experimentale s-au elaborat cele trei teze ale teoriei
cromozomice a ereditii:
1. - plasarea liniar a genelor pe cromozomi;
2. - transmiterea nlnuit a genelor( linkage);
3. - schimbul reciproc de gene ntre cromozomii omologi (crossing-over).

4.2. PLASAREA LINIAR A GENELOR PE CROMOZOMI

n experienele sale, Mendel a analizat, n mod ntmpltor, caractere ce erau localizate

n perechi diferite de cromozomi, fapt ce permite segregarea i combinarea independent a
caracterelor. Morgan a urmrit ntr-un numr foarte mare de ncruciri, transmiterea de la o
generaie la alta a unor gene localizate n acelai cromozom.
S-a constatat c exist un numr mult mai mare de gene dect cromozomi, chiar dac n
unele cazuri, o gen poate determina mai multe caractere. Rezultatele analizelor genetice nu se
pot explica dect dac se admite c genele sunt plasate linear n cromozomi, ocupnd un loc
precis denumit locus.

4.3. TRANSMITEREA NLNUIT A GENELOR (LINKAGE)

Segregarea independent a caracterelor i libera combinare a acestora rezult din faptul
c n timpul meiozei cromozomii omologi se despart i se distribuie ntmpltor, ntr-un gamet
sau altul. Potrivit acestor legi genele alele sunt localizate n perechi diferite de cromozomi.
T. H. Morgan i colaboratorii si au efectuat o experien la Drosophila melanogaster
(fig. 4.1). S-a ncruciat o femel cu corp gri i aripi normale (b+vg+/b+vg+) cu un mascul ce
prezenta caractere mutante, corp negru i aripi vestigiale (bvg/bvg) n prima generaie au rezultat
indivizi cu corp gri i aripi normale.
Dac un mascul heterozigot din generaia F1 este retroncruciat cu o femel homozigot
dubl mutant, n generaia F2 au rezultat numai dou grupe fenotipice de indivizi, ca n cazul
unei monohibridri, n raport de 1:1 i nu patru cte ar fi trebui sa apar, n raport de 1:1:1:1.
Rezultatele acestei experiene au artat c genele ce determin culoarea corpului i forma aripilor
sunt plasate pe acelai cromozom i se transmit mpreun la descendeni, fenomen pe care n
denumete linkage
n acest exemplu se poate vorbi de un linkage complet fenomen rar ntlnit n natur. La
Drosophila melanogaster, la mascul, fiind sexul heterogametic (XY) ,nu are loc recombinarea
genetic deoarece cromozomii X i Y nu sunt omologi iar ntre ceilali cromozomi somatici nu se
realizeaz n profaza meiozei chiasme (C. D. Darlington, 1935).
Fenomenul acesta se mai ntlnete i la alte specii de diptere la care sexul mascul este
heterogametic sau la unele specii de lepidoptere, la care sexul femel este heterogamet.

Fig. 4.1. nlnuirea complet a genelor la Drosophila melanogaster

Studiul linkage-ului la cele 500 de mutante de la Drosophila, studiate de T. Morgan,
manifest tendina de a se grupa n patru grupe: grupa I 141 mutante; grupa II 228 mutante;
grupa III 156 mutante i grupa IV 12 mutante.
Existena a patru grupe de nlnuire este nc o dovad c genele sunt plasate n
cromozomi i n plus, exist o corelaie evident ntre lungimea cromozomilor i numrul de gene
pe care le conin.
Linkage-ul constituie o tez de baz a teoriei cromozomice a ereditii, conform creia
genele localizate pe acelai cromozom se transmit la descendeni n bloc, formnd o singur
grup de linkage.

4.4. SCHIMBUL RECIPROC DE GENE NTRE CROMOZOMII

OMOLOGI (CROSSING-OVER)
Bateson i Punnett au elaborat teoria cuplrii i repulsiei, prin care cutau s
demonstreze c n procesul de hibridare pot avea loc fenomene de cuplare i recombinare a
genelor. T. H. Morgan a nlocuit termenul de cuplare cu cel de linkage iar cel de repulsie cu
termenul de crossing-over.

Fenomenul prin care se realizeaz schimbul de gene alele sau segmente cromatidice
nesurori ntre cromozomii omologi n timpul meiozei se numete crossing-over. Existena acestui
fenomen dovedete c linkage-ul nu este ntotdeauna complet , ca atare ,crossing-over-ul este un
linkage incomplet. Pentru a demonstra schimbul de gene ntre cromozomii omologi, Morgan a
folosit urmtoarea experien: a ncruciat un mascul de culoare neagr i cu aripi vestigiale cu o
femel cu corpul de culoare gri i aripi normale(figura 4.2).

Fig.4.2.-Fenomenul de crossing-over la Drosophila melanogaster

n generaia F1 a obinut o descenden uniform fenotipic , cu corpul de culoare gri i
aripi normale i genotipic heterozigot. Dac se retroncrucieaz o femel din generaia F1 cu un
mascul cu ambele caractere mutante , rezult n generaia F2 patru grupe fenotipice: dou grupe
fenotipice parentale i dou grupe fenotipice noi , n urmtoarele proporii: corp gri-aripi
normale, 41,5% , corp negru-aripi vestigiale, 41,5% , corp gri-aripi vestigiale , 8,5% , i corp
negru-aripi normale ,8,5%.
Se observ c raportul de segregare nu este cel ateptat n urma unei retroncruciri
1:1:1:1. Formele noi rezultate ,n proporie mult mai mic dect cele parentale , sunt determinate
de schimbul de gene ntre cromatidele nesurori ale cromozomilor omologi , fiind denumite i
forme recombinate.

Raportul de segregare , deosebit de cel mendelian , se datorete faptului c femela

heterozigot formeaz patru tipuri de gamei , dou de tip parental (b+vg+i bvg)i dou de tip nou
(b+vg i bvg+) , care se fecundeaz cu unicul tip de gamei ai masculului (bvg).
Valoarea crossing-over-ului se exprim n % i ne arat cu ct fora de nlnuire a
genelor este mai mic , frecvena crossing-over-ului este mai mare. Valoarea procentual cu care
se manifest crossing-over-ul se mai numete i valoare de schimb sau fora nlnuirii.

4.5. HRILE CROMOZOMICE

Tezele teoriei cromozomice a ereditii au constituit baza teoretic i practic pentru
elaborarea hrilor cromozomice sau genetice.
Hrile cromozomice constituie reprezentarea grafic a cromozomilor i a genelor care
alctuiesc diferite grupe de linkage, genele fiind plasate pe cromozomi la distane relative
exprimate n procente de crossing-over.
Alctuirea hrilor cromozomice presupune trei etape de lucru:
- obinerea mutantelor de la caracter normal sau slbatic;
- stabilirea grupelor de linkage;
- determinarea ordinii i distanelor dintre gene n cadrul fiecrei grupe de linkage.
Dup ce s-au realizat un numr ct mai mare de forme mutante, genele respective se
repartizeaz n grupe de nlnuire. Pentru a stabili aceste grupe se efectueaz un numr mare de
ncruciri i retroncruciri ntre indivizi normali i mutani sau ntre indivizi mutani. Dac
segregarea se face dup raporturile mendeliene, se trage concluzia c genele respective se gsesc
n grupe diferite de nlnuire, iar dac n urma retroncrucirilor se obin n proporie mai mare
fenotipurile parentale, ntre genele respective se manifest linkage, complet sau incomplet, deci
ele sunt plasate n acelai cromozom.
Pentru determinarea ordinii i distanei dintre gene s-a plecat de la constatarea c
frecvena crossing-over-ului este o funcie direct proporional cu distana dintre gene. Distanele
dintre gene se exprim n uniti de recombinare, denumite uniti Morgan sau morganide.
Fiecare unitate de recombinare corespunde cu 1% crossing-over, iar 1% crossing-over este egal
cu 1 unitate de pe harta cromozomic.
Prima hart cromozomic s-a ntocmit la Drosophila melanogaster iar apoi la Zea mays,
Antirrhinum majus, Lathyrus odoratus, Hordeum vulgare etc.

Frecvena crossing-over-ului nu poate depi valoarea maxim de 50%. Dac se observ

cele dou hri cromozomice, se constat c pe hart apar i distane mai mari de 50 uniti. Acest
lucru se explic astfel: ntre genele ndeprtate apar crossing-overe duble i n acest caz distanele
mari se calculeaz prin nsumarea distanelor mai mici dintre genele intermediare.
n concluzie, distane dintre gene figurat pe harta cromozomic nu corespunde cu
procentul de crossing-over dect n cazul genelor apropiate ntre care nu pot avea loc crossingovere duble.

4.6. HRILE CITOLOGICE

Localizarea genelor pe cromozomi s-a putut stabili prin determinarea procentului de
crossing-over, alctuindu-se hrile cromozomice. Se pune ntrebarea dac nu se pot localiza
genele pe cromozom, folosind elementele de structur ale acestuia, mai precis, diferenele de
structur ce apar de-a lungul lui i care s corespund genelor. Acest lucru a devenit posibil, prin
descoperirea i studierea cromozomilor gigantici din celulele glandelor salivare ale larvelor de
Drosophila melanogaster, deoarece au dimensiuni mari i pot fi studiai uor n interfaz. La
aceti cromozomi, s-au evideniat microscopic o serie de benzi transversale, unele
heterocromatice (dense) i altele eucromatice (clare). La nivel molecular, cromozomii gigantici
pot fi privii ca o multiplicare de cteva sute sau mii de ori a macromoleculei de ADN, locii
suprapunndu-se n paralel i deci, un locus de pe aceti cromozomi reprezint o amplificare a
unicului locus de pe fibra de ADN din cromozomii somatici. Acest lucru a permis studierea
amnunit a cromozomilor gigantici, la care s-au identificat peste 5000 de benzi transversale, iar
fiecare fiind alctuit din 16 puncte. Localizarea acestor benzi este constant pe cei patru
cromozomi, fapt ce a permis identificarea i numerotarea lor.
Lungimea total a cromozomilor gigantici (1180 ) a fost mprit n 100 de diviziuni,
repartizate astfel: cromozomul I, 0 20 diviziuni; cromozomul II, 20 60 diviziuni; cromozomul
III, 60 100 diviziuni. Cromozomul IV fiind foarte mic nu a intrat n aceast mprire. Fiecare
diviziune a fost mprit n ase subdiviziuni notate cu literele: A, B, C, D, E, F. Fiecare
subdiviziune cuprinde un anumit numr de benzi transversale.
C. B. Bridges (1944) a stabilit o coresponden ntre genele localizate pe cromozomii
obinuii i benzile transversale de pe cromozomii gigantici.

Distana dintre genele de pe harta cromozomic i cea citologic nu coincide

ntotdeauna, mai ales n regiunile centromerice.
Hrile genetice au o importan deosebit din punct de vedere teoretic i practic.
Elaborarea hrilor genetice a permis s se cunoasc o serie de aspecte cum ar fi: neomogenitatea
funcional liniar a cromozomilor, explicarea unor aberaii cromozomice, importana genetic a
fiecrui cromozom, n funcie de felul genelor i numrul lor.
Cunoaterea precis a locilor genelor pe cromozomi deschide perspective mari n
cunoaterea modului de transmitere a unor caractere i n modificarea constelaiei genetice a
organismelor pin metode de manipulare a materialului genetic.

CAPITOLUL 5
DETERMINISMUL GENETIC AL SEXULUI

5.1. GENERALITI
Sexualitatea a aprut pe o anumit treapt a evoluiei plantelor i animalelor,
reprezentnd un avantaj, deoarece asigur reproducerea organismelor, recombinarea genetic,
vigoarea hibrid a descendenei i trecerea de la starea haploid la cea diploid. Aspectele pe care
le ridic acest domeniu al biologiei sunt pe ct de variate, pe att de complexe. Este vorba de
biologia, de transmiterea i diferenierea sexului, precum i de posibilitatea de dirijare a lui.
Determinarea i dirijarea sexelor prezint un deosebit interes pentru practic. Dei s-a
lucrat mult n direcia gsirii unor posibiliti pentru a putea dirija raportul dintre sexe, s-au fcut
puine progrese. Ct de important ar fi pentru noi s putem dirija raportul dintre sexe la plante sau
animale, dup necesiti de ordin economic? S putem, de exemplu, reduce la animale numrul
de masculi, mrind numrul de femele n scopul nmulirii mai rapide a acestui sex (pentru
producia de lapte, ou .a.). Pentru plantele de cultur ar prezenta importan, de exemplu,
transformarea unor plante dioice n plante monoice sau invers; s putem obine, cum ar fi la
cnep, prin tratarea seminei, numai cnep mascul (de var), care s fac posibil recoltatul ei
mecanic. Faptul c, n culturile obinuite de cnep, ambele sexe sunt intercalate, recoltatul
plantelor mascule se face manual. n direcia acestor probleme s-ar putea gsi multe exemple.
Diferenierea sexelor, att n regnul vegetal ct i animal, este legat de modul de
nmulire sexuat. Din acest punct de vedere organismele se pot clasifica n: organisme unisexuate,
cu diferene exclusiv masculin i feminin; organisme bisexuate (hermafrodite) cu difereniere
ambigen, care produc att gamei masculi ct i femeli; organisme pseudohermafrodite cu
difereniere ambigen care, dei posed organe pentru producerea gameilor de ambele sexe,
produc gamei numai de un sex.
Sub aspectul diferenierii sexuale, lumea vie este att de variat, nct o ncercare de
clasificare a lor nu este chiar att de uoar.
Deosebirea dintre sexe se numete gonochorism i este difereniat prin dou categorii
de caractere: caractere sexuale primare i caractere sexuale secundare. Primele sunt datorate

prezenei glandelor sexuale, care produc un anumit tip de celule sexuale, diferite la mascul fa de
femel i anexele acestor glande sexuale. Caracterele sexuale secundare se evideniaz sub aspect
morfologic i fiziologic diferit de cele dou sexe; sunt determinate de hormonii secretai de
glandele genitale i nu asigur direct procesul gametogenezei, dar joac un rol n nmulirea
sexual.
Caracterele sexuale secundare, spre deosebire de cele primare, apar ntr-o anumit
perioad, n cursul dezvoltrii individuale. Totalitatea caracterelor sexuale secundare, care fac ca
cele dou sexe s se deosebeasc ntre ele, poart numele de dimorfism sexual.
Dimorfismul sexual este mai accentuat la organismele inferioare i mai puin accentuat
la cele superioare. El poate merge att de departe la unele specii, nct masculii, fa de femele,
pot s aib dimensiuni foarte mici. Aa de exemplu, la viermele marin Bonellia viridis, femela
are form de sac, cu o prelungire n form de tromp i o lungime pn la 0,3 m. Masculul este de
forma unui filament de 1-2 mm (aproape de 300 ori mai mic dect femela) i triete ca parazit n
esofagul sau oviductul femelei.
n general, la speciile inferioare i la unele insecte, femela este mai bine dezvoltat dect
masculul. La peti, reptile, dimorfismul sexual este aproape imperceptibil. El se accentueaz n
favoarea masculului la vertebratele superioare. La psri, deosebirile sunt de culoare, form,
mrime etc.; la mamifere aceste deosebiri se refer la mrime, pr, coarne etc.

5.2. DETERMINISMUL CROMOZOMIC AL SEXELOR

Observaiile cu privire la proporia dintre sexe, att la plante ct i la animale, au dus la
acumularea de date, din care s-a dedus c, n natur, indivizii masculi i femeli sunt n numr
aproximativ egal.
La sfritul secolului trecut, cercetndu-se meioza la unele insecte, s-a constatat c
exist o distribuire neuniform a cromozomilor; (spermatozoizii aveau un numr inegal de
cromozomi). Aceast repartiie inegal a substanei cromatice n unele celule germinale, a fost
sesizat de Henking (1891), Mac Clung (1901), Castle (1903) i Wilson (1905 1940). Ei i-au
exprimat totodat prerea c, cromozomul impar, deosebit ca form i mrime poate fi pus n
legtur cu determinarea sexelor.
Repartiia inegal a substanei cromatice duce la stabilirea raportului de 1:1 ntre sexe,
iar mecanismul de distribuire inegal a cromozomilor este o problem ereditar. Din cauza

distribuirii inegale a cromozomilor, n meioz nu toi au pereche sinaptic. Cromozomul unic

migreaz singur la unul din polii celulei, fr ca la cellalt pol s mearg omologul su. Din
aceast cauz se nasc celulele sexuale cu un numr par sau impar de cromozomi.
Cromozomii sexului pot alctui n celulele somatice perechi n care unul s fie diferit
sau la fel cu cellalt: La Drosophila melanogaster unul este drept, iar cellalt puin curbat.
Cromozomii normali au fost notai cu litera X, iar cei curbai cu Y (fig. 5.1.). Sexul care are cei
doi cromozomi sexuali identici s-a notat cu XX, iar cellalt, la care ei sunt inegali, cu XY sau
XO, cnd Y lipsete.
n procesul de gametogenez sexul XX formeaz un
tip de gamei (cu cromozomul X) i este denumit sex
homogametic, iar sexul XY sau XO formeaz dou
tipuri de gamei
Fig. 5.1. Cariotipul la Drosophila melanogaster

(cu cromozomul X sau Y sau

cu cromozomul X i fr cromozomul sexual Y) i

este denumit heterogametic.
Se cunosc dou tipuri principale de determinare cromozomic a sexelor: tipul
Drosophila i tipul Abraxas.
Tipul Drosophila. Aa dup cum arat i numele, acest tip cromozomal de determinare a
sexului a fost studiat mai nti la Drosophila. El se ntlnete ns i la alte insecte, viermi,
molute, echinoderme, peti, batracieni, mamifere i la unele plante.
La organismele ce se ncadreaz n acest tip de determinare a sexului, cnd are loc
reducerea cromatic n timpul maturaiei celulelor sexuale, toate ovulele primesc un cromozom
X, pe cnd spermatozoizii, 50% primesc cromozomul X, iar 50% cromozomul Y. Oul ce va
rezulta din fecundarea cu un spermatozoid ce posed cromozomul X va fi femel (XX), pe cnd
din ovulul fecundat de un spermatozoid cu cromozomul Y va rezulta un mascul XY. Schematic
aceasta se poate prezenta n felul urmtor:
P1 (2n).. XX x XY
Gamei (n).X
X i Y
F1 (2n).. XX i XY
Tipul Drosophila cuprinde trei subtipuri:
- Subtipul Lygaeus, la care femela posed doi cromozomi XX, iar masculul, unul X i
altul Y. Este de fapt tipul clasic, cunoscut sub numele de tipul Drosophila;

- Subtipul Protenor, la care femela posed cei doi cromozomi XX, iar masculul un
singur cromozom X. Se ntlnete la ortoptere, miriapode, la viermii nematozi .a.
- Subtipul Ascaris, la care femelele posed doi cromozomi XX, iar masculii un singur X,
care nu este independent, ci ataat autozomilor.
Tipul Abraxas. Numele vine de la genul de fluturi la care s-a descoperit i studiat acest
tip de determinare a sexului. n acest caz, sexul femel este heterogametic XY, iar cel mascul
homogametic XX. Femelele (XY) formeaz ovule cu X i ovule cu Y, n timp ce masculii un
singur fel de spermatozoizi, care primesc cte un cromozom X. Dup cum spermatozoidul, care
posed un cromozom X, va ntlni un ovul cu X sau Y va lua natere un mascul (XX) sau o
femel (XY).
Determinarea schematic a sexului se poate nota astfel:
P1 (2n).. XY x XX
Gamei (n)X i Y
X
F1 (2n) XY i XX
Tipul Abraxas cuprinde i el dou subtipuri:
Subtipul clasic descris mai sus, la care femelele sunt heterogametice XY i masculii
homogametici XX;
Subtipul deficiens, la care, la sexul femel lipsete cromozomul Y i rmne un singur X;
masculii posed cromozomii XX.
Acest tip de determinare a sexului l ntlnim la psri, la fluturi, la fragi .a. i este mult
mai rar dect primul. Se mai numete i tipul pasre.
Aceste dou tipuri de determinare cromozomic a sexului au fost studiate mai bine. n
afar de ele au mai fost descrise i alte tipuri ntlnite mai rar. Astfel, la unele insecte au fost
descrise pn n prezent existena unui numr mare de subtipuri.

5.3. SEXUL N CAZUL NMULIRII PARTENOGENETICE

Prin partenogenez se nelege dezvoltarea ovulului ntr-un individ complet, fr o
fecundare prealabil. La albin din ovulele nefecundate rezult masculi, iar din cele fecundate
mtci i albine lucrtoare.
Determinarea sexului n cazul de fa se face prin ntreaga serie de cromozomi autozomi:
n = , 2n = . n procesul de formare a celulelor sexuale, reducerea numrului de cromozomi se

face numai la femele, de la 32 la 16. Pentru partenogenez, determinarea sexului pentru femele sa numit diplogenotipic, iar pentru masculi haplogenotipic.

5.4. DETERMINISMUL GENETIC AL SEXULUI

LA PLANTE
Majoritatea plantelor superioare sunt hermafrodite, iar formarea elementelor sexuale este
dictat de genele care se gsesc pe cromozomii autozomi.
La Zea mays, plant tipic unisexuat monoic, s-au identificat mai multe gene care
determin sexul W. R. Singlleton i D. F. Jones (1930) au identificat gena ms1, situat pe
cromozomul 6, ce determin androsterilitatea. Studiile ulterioare de genetic a porumbului au
avut ca rezultat descoperirea altor gene implicate n determinarea sexului: - gena normal Ts
determin formarea paniculului normal n timp ce gena recesiv mutant ts n stare homozigot
(tsts), inhib formarea florilor mascule, paniculul transformndu-se ntr-o inflorescen cu flori
femele; - gena Sk, controleaz formarea pistilului, alela sk n stare homozigot (sksk) inhib
formarea acestuia; - gena Ba rspunde de formarea tiuletelui, iar alela sa ba n stare homozigot
(baba) supreseaz formarea tiuletelui.
Prin combinarea acestor gene pot rezulta o serie de genotipuri i fenotipuri, unele avnd
importan deosebit n procesul de ameliorare a porumbului.
De exemplu, genotipul Ts2ts2sksk produce plant mascul cu panicul normal, tiulete
steril, fr pistile; genotipul Ts2Ts2baba, plante mascule cu paniculul normal, dar fr tiulete;
ts2ts2sksk, plant femel cu pistile n panicul i tiulete fr pistile; ts2ts2baba plant femel cu
pistile n panicul i fr tiulete.
Dioicizarea plantelor monoice poate avea o importan teoretic i practic deosebit.
La plantele dioice ns, mecanismul care asigur determinarea sexelor, separate pe
indivizi deosebii, este asemntor animalelor. La baza acestuia st prezena cromozomilor
sexului, descoperii pentru prima dat de C.E. Allen (1917) la plantele de muchi dioici
Sphaerocarpus donelli. Indivizii femeli posed n celulele somatice 14 cromozomi autozomi i
cromozomii sexului XX, n timp ce acei masculi, 14 cromozomi autozomi i cromozomii sexului
XY.
Mai trziu, cromozomii sexului au fost pui n eviden i la plantele superioare, cum
sunt: Melandrium album, Humulus lupulus, Elodea gigantea, Rumex acetosella .a.

n ceea ce privete repartizarea cromozomilor sexului la cele dou sexe, plantele se pot
clasifica n mai multe categorii. Dup Westergaard (1958) mecanismele determinrii sexelor se
pot ncadra n urmtoarele tipuri:
- Plante cu sexul mascul heterogametic (XY) i sexul femel homogametic (XX), situaie
ntlnit la tipul Drosophila. Din acest tip fac parte specii ca: Melandrium album, Cannabis
sativa, Humulus lupulus .a.
- Plante cu sexul mascul heterogametic (XO) i sexul femel homogametic (XX) ntlnit
la speciile Discorea sinuata, Vallisneria spiralis .a.
- Plante cu sexul mascul heterogametic, cu un cromozom n plus fa de cel femel,
ntlnit la speciile Phoradendron villosum. Phoradendron flavescens .a.
- Plante cu sexul femel heterogametic (XY) i sexul mascul homogametic (XX)
aparinnd speciilor Fragaria elatior .a.
- Plante cu sexul mascul heterogametic i sexul femel homogametic cu un cromozom
sexual compus din mai muli cromozomi legai sub form de lan cu formula, de exemplu, XY1Y2
i XX ntlnit la speciile Humulus japonicus, Rumex hastatulus .a.

Fa de cele artate mai sus trebuie menionat c unisexualitatea plantelor superioare nu

este absolut. O analiz n acest sens a fost fcut de C. Correns (1907) folosind dou specii de
Bryonia: Bryonia dioica cu sexele separate, cu formula pentru sexul femel XX i sexul mascul
XY i Bryonia alba, hermafrodit, cu formula XX.
Din ncruciarea intraspecific a plantelor femele de Bryonia dioica cu plantele mascule
tot cu Bryonia dioica a obinut 50% plante femele i 50% plante mascule, adic un raport ntre
sexe de 1:1. Aceasta a dus la concluzia c la Bryonia dioica un sex este homogametic i altul
heterogametic.
ncrucind Bryonia alba (hermafrodit) ca form matern cu Bryonia dioica ca form
patern a obinut n descenden plante dioice n raport de 50% plante femele i 50% plante
mascule. Din ncruciarea invers, folosind Bryonia dioica ca form matern i Bryonia alba ca
form patern, a rezultat aproape exclusiv numai plante femele.
Rezultatele acestor ncruciri demonstreaz c la Bryonia dioica sexul femel este
homogametic, iar cel mascul heterogametic.
Spre deosebire de animale i n special la animalele superioare, unde exist o strict
determinare a sexelor, la plantele superioare exist specii dioice la care raportul de segregare ntre

sexe variaz n limite relativ mari. Aa de exemplu, la Humuls japonicus sau Humulus lupulus
predomin indivizii femeli. La cnep, n anumite condiii, apare fenomenul de dubl sexualitate.
Raportul dintre sexe poate fi favorabil unuia sau altuia dintre ele. Analizndu-se inflorescenele la
cnep s-a constatat c plantele mascule pot forma i flori femele sau diferite forme tranzitorii
ntre cele dou sexe.

5.5. EREDITATEA CARACTERELOR LEGATE DE SEX

La hibridri, n general, nu are importan dac un caracter homozigot urmrit se gsete
n autozomii mamei sau tatlui. Ei nu afecteaz ntr-un anumit mod segregarea caracterelor n
descenden.
n cazul n care aceste caractere (gene) se gsesc n cromozomii sexului, caracterul
ereditii i al segregrii este condiionat de mediul de comportare a cromozomilor sexului n
meioz i mai apoi n procesul fecundrii.
Deoarece cromozomul Y este inert nu conine gene, genele care se gsesc n
cromozomul X nu au pereche alelic. Ca urmare, distribuirea lor este legat de distribuirea
acestor cromozomi.
Motenirea caracterelor, care sunt localizate n cromozomii sexului se mai numete i
ereditate legat de sex i ea se comport diferit dup cum organismele se ncadreaz n diferite
tipuri de determinare a sexelor: Drosophila sau Abraxas.

Ereditatea legat de sex n cazul heterogamiei sexului

mascul (Drosophila)
Pentru a ilustra n ce const la organismele care au sexul mascul heterogametic i sexul
femel homogametic, mecanismul de transmitere a caracterelor legate de sex, ne vom folosi de o
experien efectuat de T. Morgan la Drosophila.
El ncrucieaz mascul cu ochi albi (o form mutant) cu femele cu ochi roii (de tip
slbatic) i obine n prima generaie n proporii egale, masculi i femele cu ochi roii caracter
dominant, culoarea alb fiind un caracter recesiv. ncruciai ntre ei, indivizii din F1 produc n F2
o segregare: dup sex 50% femele i 50% masculi, iar dup caracterul studiat, la trei indivizi cu
ochi roii se obine un individ mascul cu ochi albi (raportul 3:1). Notnd cu w+ culoarea roie a

ochilor, cu w culoarea alb a ochilor, iar cu linii verticale cromozomii sexului putem obine
urmtoarea schem (fig. 5.2.).

Fig. 5.2. Ereditatea caracterelor cuplate cu sexul (culoarea ochilor)

n cazul heterogamiei sexului mascul.
Faptul c n aceast experien apar masculi att cu ochi roii ct i cu ochi albi de
dovedete c ei sunt heterogametici i formeaz dou tipuri de gamei.
S vedem ce se ntmpl cnd se ncrucieaz femelele cu ochi albi, cu masculi cu ochi
roii. Segregarea are loc deja n F1, unde se produc toate combinaiile posibile. Raportul ntre
sexe pentru fiecare culoare a ochilor a fost 1:1. Prin ncruciarea ntre ei a indivizilor din F1, apar
n F2 femele i masculi 50% cu ochi roii i 50% cu ochi albi (fig. 5.3.). n experienele descrise
se poate sesiza c genele care determin culoarea ochilor sunt situate n cromozomii X.

Fig. 5.3. Ereditatea caracterelor cuplate cu sexul la Drosophila melanogaster (ncruciarea

reciproc).
Din schemele prezentate reiese c dac femela este homozigot pentru gena dominant a
ochilor roii aflat n cromozomul X, atunci culoarea roie a ochilor se transmite n F1 i
masculilor. Femelele din F1 primesc cromozomul X cu gena recesiv a culorii albe a ochilor de la
tat, iar de la mam al doilea cromozom ce conine gena dominant a culorii roii.
Sub influena genei ce produce culoarea roie a ochilor toate femelele au ochii roii. n
F2 prin combinarea diferit a gameilor apar combinaii artate la prima experien.
n cazul celei de a doua experiene cu ncruciarea reciproc, femelele primesc de la tat
un cromozom cu gena dominant a culorii roii a ochilor i de la mam un cromozom cu gena
recesiv a culorii albe a ochilor.
Din aceast cauz femelele din F1 au ochi roii. Masculii din F1 au ochi albi, deoarece
primesc de la tat cromozomul Y care este inert, iar de la mam un cromozom ce conine gena
recesiv a culorii albe a ochilor. Gena, dei este recesiv se exteriorizeaz nefiind dominat de
alte gene. Ea se gsete ntr-o singur doz, stare numit hemizigot.
Motenirea caracterelor legate de sex, de la mam la fiu i de la tat la fiic, poart
denumirea de criss-cross.
Schemele date pentru ereditatea culorii ochilor legat de sex la Drosophila sunt valabile
i pentru alte caractere i alte specii a cror gene sunt situate pe cromozomul X la organismele la
care sexul heterogametic se prezint la mascul. Au fost studiate asemenea cazuri la insecte, peti,
psri, mamifere.
La om se cunosc unele ncruciri cuplate cu sexul: daltonismul, hemofilia .a. Deoarece
sexul mascul la om este heterogametic, aceste boli se manifest frecvent la acest sex.

CAPITOLUL 6
EREDITATEA EXTRANUCLEAR

nc din secolul XX, cercetrile au artat c, alturi de nucleu, i citoplasma prezint un

rol important n transmiterea caracterelor ereditare.
Prin fenomenul de ereditate extranuclear se nelege motenirea caracterelor i
nsuirilor organismului prin elementele citoplasmatice.
Pentru a pune n eviden rolul citoplasmei n ereditate, trebuie s artm care elemente
anume posed aceste nsuiri, dac au sau nu proprietatea de a se reproduce, de a se modifica i a
transmite aceste modificri la generaia urmtoare i care sunt metodele de cercetare.
S-a artat ntr-un capitol anterior c n citoplasma celulei se gsesc diferite structuri care
au rol genetic, fr a analiza ns n ce const acest rol i cum poate fi pus el n eviden. Vom
cuta s lmurim aceste probleme n capitolul de fa.

6.1. METODE DE EVIDENIERE A EREDITII

EXTRANUCLEARE
Ereditatea extranuclear se poate pune n eviden prin mai multe ci:
- fecundarea unui ovul anucleat cu un spermatozoid din alt specie (merogonie);
- hibridarea reciproc;
- prin intermediul incluziunilor i organitelor citoplasmatice;
- testul heterocarion;
- segregarea nemendelian.

6.1.1. Fenomenul merogoniei

Prin merogonie se nelege formarea unui embrion prin fecundarea unui ovul anucleat cu
un spermatozoid normal. Din fecundarea unui ovul anucleat cu un nucleu strin rezult un zigot
haploid, deoarece posed nucleul patern, haploid i citoplasma matern. Este foarte greu de a se
obine, n astfel de cazuri, organisme mature deoarece zigoii, din cauza perturbrii raportului
dintre nucleu i citoplasm, mor ntr-un stadiu timpuriu.

Primele indicaii asupra existenei acestui fenomen au fost experienele embriologului T.

Boveri (1899). El s-a folosit de ovule de arici de mare, pe care le-a centrifugat puternic, astfel
nct membrana lor s-a rupt, fcnd loc nucleului s ias afar. Aceste ovule anucleate au fost
fecundate cu spermatozoizi de la o specie nrudit - crinul de mare. Larvele obinute erau
haploide i conineau, pe lng caracterele tatlui i caracterele materne, transmise prin
intermediul citoplasmei ovulului.
n afar de metoda centrifugrii, nucleii din ovul pot fi ndeprtai i cu ajutorul
micromanipulatorului, prin operaii de microdisecie, sau cu ajutorul unei micropipete, prin
aspirare.
O alt metod folosit este distrugerea nucleilor din celule cu ajutorul ocurilor de
temperatur, a radiaiilor ionizante, raze ultraviolete sau unor substane chimice.
Folosind unele din aceste metode I. Danielli i colab. (1957) au nlocuit nucleii de la
Amoeba discoides cu nucleii de la Amoeba proteus. Nucleii transplantai au suferit influena
citoplasmei strine, modificndu-i forma n sensul nucleilor de la Amoeba discoides.
Cercetri interesante de acest gen s-au efectuat i cu specii din genul Triton (Triton
palmatus i Triton cristatus) de ctre Paula Hertwig (1936, 1942), V. Curry (1931) .a., n care
nucleii din ovule au fost distrui prin iradiere. Ereditatea citoplasmatic a fost pus n eviden la
embrionii provenii prin fecundarea acestor ovule cu nucleii de la alt specie. Embrionii ns se
dezvoltau numai pn n faza de blastul, apoi mureau.
Elveianul E. Hadorn (1955) a reuit s nlture acest neajuns procednd n felul
urmtor: fecundeaz ovule anucleate de Triton palmatus cu spermatozoizi de la specia T.
cristatus. Din embrionii rezultai a desprins o poriune de epiderm i a transplantat-o pe
embrionii unei specii de T. alpestris. Indivizii rezultai aveau poriunea de epiderm transplantat,
asemntoare ca aspect i culoare cu aceea a lui T. palmatus. Citoplasma ovulului de T. palmatus
i-a imprimat deci caracterele, epidermei transplantate la embrionul nou format.

6.1.2. Ereditatea extranuclear n hibridarea reciproc

n ncrucirile formelor ndeprtate (interspecifice i intergenerice), apare foarte
frecvent fenomenul de matroclinie, prin care se nelege transmiterea cu precdere a caracterelor
materne. De aceea, la astfel de hibridri nu este indiferent care dintre cele dou specii constituie
forma matern sau patern.
Practica a demonstrat c la hibridarea dintre Equus caballus i Equus asinus se obin
hibrizi a cror mrime i constituie este mai mult asemntoare formei materne. Din hibridarea

dintre Equus caballus i Equus asinus rezult catrul (Equus mullus), de mrimea i
conformaia lui Equus caballus, iar din hibridarea dintre Equus asinus i Equus caballus
rezult bardoul (Equus hinnus), de mrimea i conformaia lui Equus asinus. Cei doi hibrizi se
deosebesc foarte mult prin mrime, culoare, for .a., dei n celulele somatice au acelai numr
de cromozomi (2n=63).

6.1.3. Testul heterocarion

Prin heterocarion se nelege o celul n care, pe lng nucleul propriu, mai exist inclus
un nucleu strin. n urma includerii nucleului strin se formeaz un dicarion, o celul cu doi
nuclei. Fenomenul a fost pus n eviden la ciupercile inferioare, care se nmulesc asexuat.
Realizri n aceast direcie au fost obinute de ctre R. E. Wright i J. Lederberg (1957)
la drojdia de bere, Saccharomyces cerevisiae. Dac notm la o prim celul nucleul cu A i
citoplasma cu , iar la a doua celul nucleul cu B i citoplasma cu , dicarionul format prin
transferul nucleului B n celula va deveni AB. n descendena acestuia vor rezulta celule cu A
i B . Cu aceast ocazie se constat c celulele B manifest caracteristici ale celulei A. Rezult
c aceste caracteristici sunt transmise prin citoplasma i nu de nucleu (figura 6.1.).

Fig. 6.1. Schema formrii celulelor heterocarion

6.2. MANIFESTAREA EREDITII EXTRANUCLEARE

Tipurile de manifestare ale ereditii extranucleare mbrac diferite forme i ele depind
de structurile din citoplasm, care poart i transmit caractere.

6.2.1. Ereditatea prin plastide

Primii cercettori care au pus n eviden ereditatea prin plastide au fost C. Correns
(1909) i E. Baur (1910).
E. Baur a studiat ereditatea culorilor mozaicate la Pelargonium zonale. Aceast plant
posed frunze pestrie (alb-glbui cu verde). Observnd la microscop seciuni din aceste frunze se

constat existena unor grupe de celule cu plastide necolorate n epiderma i subepiderma frunzei,
n timp ce n partea central a ei se gsesc plastide verzi (cloroplaste). La aceast plant pot s
apar, uneori, att ramuri cu frunze pestrie, ct i ramuri cu frunze cu frunze verzi sau albe.
Executnd polenizri ncruciate ntre flori de pe ramuri cu frunze diferite, el obine semine care
produc plante ce au caracterele frunzelor de la forma matern.
Aceste ncruciri ne arat c transmiterea cloroplastelor la urmai se realizeaz prin
citoplasma celulei-ou i ntr-o mic msur de ctre spermatie, care are o cantitate mic de
citoplasm.
C. Correns descrie un caz de ereditate citoplasmatic la Mirabilis jalapa. Aceast plant
are ramuri cu frunze verzi, albe i mozaicate. El a efectuat polenizarea florilor de pe ramurile
verzi, albe i pestrie, cu polenul de la florile acestor trei tipuri. Plantele pe care le obine din
semine au purtat numai caracterul mamei n ceea ce privete culoarea frunzelor. Fenomene
asemntoare au fost observate la gura leului, patlagin, hamei .a.
O dovad gritoare c ntr-adevr cloroplastele se transmit numai pe cale citoplasmatic
este faptul c ele posed un mecanism de autodedublare i o continuitate celular. Plantele la care
au fost distruse plastidele dau urmai fr plastide, nefiind capabile de a le sintetiza "de novo".

6.2.2. Ereditatea mitocondrial

Primele dovezi asupra localizrii unor structuri ereditare (mutante) la nivelul
mitocondriilor de la Neurospora crassa aparin lui Mitchell (1952), iar la Saccharomyces
cerevisiae lui Ephrussi (1953) i Slonimski (1953). Ulterior, s-au descoperit i alte tipuri de
mutante, cum ar fi acelea ce confer rezistena la antibiotice de la Saccharomyces cerevisiae.
Au fost studiate mai bine dou mutante i anume: "petite" la Saccharomyces cerevisiae
i "poky" la Neurospora. Aceste mutante se caracterizeaz printr-o cretere insuficient a
coloniilor, din cauza unor alterri ale enzimelor din mitocondrii implicate n procesele de
respiraie.
Analiza genetic a mutantelor de tip "petite" a dus la concluzia c, n cazul de fa,
acioneaz un factor citoplasmatic R (normal) sau r (deficien respiratorie) i un factor nuclear P
(normal) sau p (deficien respiratorie). Aceti factori acioneaz mpreun. n stare normal o
celul haploid va conine RP. Dup constituia lor genetic, coloniile "petite" pot fi de dou

feluri: primele se numesc "petite vegetative" (rP). n stare diploid, ele nu formeaz ascospori,
dar hibrizii rezultai din ncruciarea haploizilor normali i haploizi de tip "petite vegetative", se
comport normal i dau ascospori, fr a da prin segregare tipul "petite". S-a explicat acest
rezultat presupunndu-se c n citoplasma celulelor normale se gsesc factori ce lipsesc din
citoplasma cu deficien respiratorie. Hibridul haploid primete aceti factori de la tipul normal;
al doilea tip de colonii se numete "petite segregante". n acest caz, coloniile au fenotip identic cu
acelea "vegetative", dar ele s-au format prin mutaiile genei nucleare P i au genotipul Rp sau rp.
Prin ncruciarea unui haploid normal cu un haploid mutant "petite", prin formarea sporilor se
produce o segregare de dou celule normale la dou celule "petite". Fenomenul poate fi explicat
presupunnd c factorul Rp din citoplasma celulei respective, n prezena genei nucleare p este
nefuncional, iar n prezena genei dominante P devine funcional. O gen nuclear influeneaz
deci, genele extranucleare.

6.2.3. Androsterilitatea citoplasmatic i nucleo-plasmatic

Androsterilitatea (sterilitatea mascul) este o nsuire a plantelor de a nu produce polen
sau de a produce polen steril. Fenomenul acesta este studiat foarte mult la porumb i are
importan pentru producerea hibrizilor simpli i dubli, obinui din ncruciarea liniilor
consangvinizate.
Se cunosc trei tipuri de androsterilitate: nuclear (cromozomic), citoplasmatic i
nucleo-plasmatic. Prima se cunoate de mult vreme i a fost sesizat la multe plante. La
porumb, Emerson, Beadle i Frase (1935) comunicau existena a mai mult de 25 gene ce produc
androsterilitatea.
Aceast sterilitate nu a putut fi folosit n lucrrile de ameliorare, deoarece, din cauza
segregrii, n descenden, apar i plante fertile.
Androsterilitatea ce se motenete pe calea citoplasmei se transmite n descenden de
ctre partenerul femel i ea se folosete n lucrrile de ameliorare. A fost descoperit la o plant
steril de porumb de Peru de ctre Rhoades (1931, 1933). ncrucind repetat descendenele cu
aceeai form patern, nu s-a modificat n descenden caracterul de androsterilitate. S-a ajuns la
concluzia c, n acest caz, androsterilitatea este determinat exclusiv de citoplasm.

Totui, Rhoades d unele date, care ne arat c n unele cazuri, n urma polenizrii libere
la porumb, pot aprea n descendene i plante fertile sau parial fertile. Deci, acest caracter
depinde i de genele nucleare, care intr n aciune cu genele din citoplasm (androsterilitate
nucleo-plasmatic).
Numeroase linii care posed polen fertil, prin ncruciare, produc forme cu polen steril.
n aceste cazuri, genotipul nu influeneaz asupra caracterului de androsterilitate, motenirea ei
realizndu-se pe calea citoplasmatic. Au fost totui gsite linii cu factori genotipici capabili de a
restabili fertilitatea polenului, n urma ncrucirii cu forme, care dein nsuirea citoplasmatic
de sterilitate.
Restaurarea fertilitii. Se ntlnesc cazuri rare cnd androsterilitatea la porumb se
motenete numai prin citoplasm, n mod independent fa de genotip. Exist cazuri cnd
genotipul inhib aciunea citoplasmei ce produce sterilitatea polenului, precum i cazuri cnd, din
contra, citoplasma poate influena genotipul, provocnd androsterilitatea nuclear. Caracterul de
androsterilitate este condiionat deci de interaciunea dintre genotip i citoplasm.
Cercettorii Jones (1950), Rogers (1954) .a. au emis ipoteza c restabilirea fertilitii
polenului se datorete prezenei a dou gene dominante prezente la linia care i restabilete
fertilitatea.
Dup comportarea lor fa de liniile sterile, liniile consangvinizate pot fi clasificate:
1. Linii fixatoare de sterilitate;
2. Linii restauratoare de fertilitate;
3. Linii semirestauratoare de fertilitate (semifixatoare de sterilitate).
Trebuie menionat c liniile consangvinizate de porumb se comport n mod deosebit
fa de diferite tipuri de sterilitate. Uneori, aceeai linie poate fi restauratoare pentru un tip de
androsterilitate i fixatoare pentru alt tip.
Pentru a urmri comportarea plantelor fa de androsterilitate n funcie de aciunea
genelor din citoplasm i nucleu, vom nota cu S gena ce produce sterilitatea, cu F gena ce asigur
fertilitatea i cu R gena restauratoare de fertilitate (figura 6.2.)

Fig. 6.2. Cele trei tipuri de androsterilitate: nuclear (I), citoplasmatic (II) i nucleo-plasmatic (III)

Folosirea androsterilitii n producerea de hibrizi reduce lucrrile de castrare a plantelor

i cheltuielile de producie. Pentru producie se lucreaz la obinerea de linii consangvine, acestea
se ncrucieaz i formeaz hibrizi simpli, iar acetia din urm ncruciai produc hibrizi, dubli
cultivai n producie.
n figura 6.3. este redat schema pentru obinerea de hibrizi dubli pe baz de
androsterilitate.

Fig. 6.3. Schema pentru obinerea de hibrizi dubli pe baz de androsterilitate

CAPITOLUL 7
MUTAII GENETICE

Noiunea de mutaie a fost introdus de Hugo de Vries, nelegnd prin aceasta, o

schimbare brusc a nsuirilor ereditare. E. Baur o definete drept o modificare ereditar, care a
aprut n afara hibridrii, iar E. Guyenot, o variaie brusc i ereditar, ce poate apare spontan sau
sub influena unor factori experimentali.
Mutaia este o nsuire a materialului genetic i este tot att de important ca i
stabilitatea lui. Ea apare la toate organismele i alturi de recombinarea genetic este principala
surs de variabilitate a lor.

7.1. CLASIFICAREA MUTAIILOR

Mutaiile se pot clasifica n mai multe tipuri, fiecare avnd la baz un anumit criteriu:
Dup modul de apariie, ele se mpart n mutaii naturale i mutaii artificiale: mutaiile
naturale, numite i spontane, apar n condiiile din natur, fr nici o influen din partea omului.
Datorit faptului c mediul totalizeaz o mare complexitate de factori ce influeneaz organismul
este foarte greu de a descoperi cauzele ce determin apariia acestor mutaii; mutaiile artificiale,
numite i induse, sunt provocate de om cu ajutorul diferiilor ageni mutageni.
Dup capacitatea de expresie fenotipic (mrimea lor), ele pot fi mari sau mici: mutaiile
mari (macromutaiile) se deosebesc prin caracterul lor net vizibil, ceea ce face ca ele s fie foarte
uor sesizate; mutaiile mici (micromutaiile), spre deosebire de primele, sunt greu perceptibile,
dar mai frecvente i cu un rol important n evoluie.
Dup aciunea genei mutante, mutaiile pot fi morfologice, fiziologice sau biochimice:
mutaiile morfologice afecteaz trsturile morfologice ale organismelor, de form, mrime,
culoare etc. i sunt uor detectabile vizual; mutaiile fiziologice produc schimbri n procesele
fiziologice, cum ar fi ritmul de cretere, perioada de vegetaie, rezistena la boli .a.; mutaiile
biochimice determin modificarea cantitativ sau calitativ a componenilor chimici din
organism, organisme ce acumuleaz anumite substane de rezerv sau toxice, organisme ce nu pot
sintetiza anumii compui .a.

Dup natura substratului material al ereditii, mutaiile sunt: genice, cromozomice, de

genom, citoplasmatice: mutaiile genice (punctiforme) provoac modificarea genei fr a produce
o schimbare n morfologia cromozomului. Ele se refer la schimbri de structur chimic. O alel
se transform n alta, fr a schimba locus-ul n cromozom; mutaiile cromozomice se refer la
restructurrile ce pot avea loc n cromozom (deficien, deleie, inversie, translocaie, translaie);
mutaiile de genom privesc variaia numrului de cromozomi; plasmomutaiile sunt mutaiile
plasmonului, a structurilor ereditare din citoplasm.
Dup originea lor, mutaiile pot fi germinale i somatice: mutaiile germinale apar n
celulele sexuale i ele se manifest n zigoii la a cror formare particip; mutaiile somatice apar
n celulele somatice. Cu ct ele apar mai devreme, cu att vor afecta o poriune mai mare de
organism. Pentru organismele la care esutul reproductor se difereniaz foarte devreme, aceste
modificri nu pot deveni ereditare i dispar odat cu individul. La organismele cu nmulire
vegetativ ele se pot menine pe cale vegetativ i pe cale sexuat cnd din esuturile somatice
afectate se dezvolt celule sexuale, purttoare a acestor mutaii.
Dup direcia lor, mutaiile pot fi progresive (mutaii nainte) i mutaii de reversie
(mutaii napoi): mutaiile progresive conin o modificare nou fa de materialul iniial; n
mutaiile de reversie, mutantul revine la caracterul normal.

7.2. MUTAIILE SPONTANE

Apariia brusc a unor indivizi deosebii, n cadrul unei populaii cu posibiliti de a
transmite modificarea lor la urmai, a fost sesizat nc de foarte mult timp. Unele mutaii, mai
deosebite, au rmas nscrise n diferite lucrri. Aa este cazul unei mutaii descoperit n sec. XVI
de ctre farmacistul german Sprenger din Heidelberg, la planta Chelidonium majus. Un individ
avea frunzele i petalele laciniate (spintecate), caracter care a aprut brusc i s-a transmis ca atare.
Noua form a fost denumit Chelidonium laciniatum i a fost meninut prin autofecundare. La
fragi exist o mutaie descoperit de Duchesne (1763), care are frunza compus dintr-o singur
foliol, numit i fragul monofil.
Darwin, n lucrarea sa "Variaia animalelor i plantelor sub influena domesticirii"
(1868), descrie diferite mutaii pe care le denumete sporturi. Se folosete de apariia unui
piersic, care avea frunzele netede, de apariia unui prun cu fructe de culoare galben .a. La
animale citeaz numeroase mutaii: rasa de vite Nistos, cu maxilarul superior mai scurt dect cel

inferior, asemntor cinilor buldogi, rasa de oi Ancona cu picioare foarte scurte, puni cu umeri
ce au pene de culoare neagr .a.
n afar de aceste mutaii, exist foarte multe exemple acumulate n literatura de
specialitate: cinii bassei, cunoscui cu 3000 de ani . C., merinosul de Machamp cu lna puin
ondulat, dispariia coarnelor la oi, taurine i capre, porcii solipezi, care au o singur copit i nu
se mbolnvesc de febra aftoas, rasa de oi chinez Yang-ti, fr urechi, porumbeii rotai,
gulerai, moai, fluturi de culoare neagr .a.

7.3. MUTAIILE ARTIFICIALE

Odat cu descoperirea unor factori ce pot fi folosii de om n obinerea de mutaii,
interesul oamenilor de tiin pentru studiul acestora i a efectelor pe care le produc asupra
organismelor a crescut foarte mult. Paralel cu acest studiu s-au elaborat i s-au perfecionat i
metodele pentru producerea de mutaii, denumite i induse.
Dintre factorii mutageni folosii de ctre om pentru prima dat au fost razele X. n anul
1925, G.A. Nadson supunnd ciuperci inferioare la aciunea razelor X a obinut mutaii.
O dovad mai convingtoare a aciunii mutagene a razelor X i gamma a fost obinut de
G. Muller n 1927 i 1928 la Drosophila. Rezultatele le public n lucrarea "Transmutaia
artificial a genei". Tot n aceast perioad, L. J. Staddler, n 1927-1929 obine tot cu ajutorul
radiaiilor, mutaii la orz, porumb i tutun.
Descoperirea efectului mutagen al radiaiilor a deschis calea unor bogate cercetri
tiinifice, cu nsemntate att din punct de vedere teoretic, ct i practic.
T. H. Morgan i coala sa au obinut la Drosophila peste 500 de forme mutante (figura
7.1.)
Dintre agenii mutageni folosii de om i mai bine studiai fac parte: radiaiile,
temperatura i unele substane chimice. Ultimele au fost folosite mai mult i cu succes n
obinerea de mutaii.

Fig. 7.1. Indivizi normali de Drosophila melanogaster (a) i diferite mutante (b, c, d)

7.3.1. Radiaiile mutagene

Radiaiile electromagnetice au o gam de lungimi de und foarte ntins care variaz de
la 10-3 m ct au razele gamma, pn la peste 1 m, cum este cazul undelor heriene. ntre aceste
limite se gsesc razele X, razele ultraviolete (UV), razele infraroii.
Radiaiile mutagene sunt radiaiile care produc mutaii i din ele fac parte: radiaii
ionizante electromagnetice (razele X i gamma); radiaii ionizante corpusculare (raze , ,
protoni, neutroni, diferite particule grele); radiaii neionizante (razele ultraviolete).
Razele X i gamma, prin energia lor absorbit, provoac ionizri n esuturile plantei i
modific metabolismul celular. Razele X sunt foarte mult folosite, deoarece aparatele Rentgen
sunt mai uor utilizabile. Pentru iradierea cu raze gamma se folosete cobaltul radioactiv. Razele
gamma sunt mai penetrante dect razele X.
Razele beta () sunt formate din electroni eliberai de radioizotopi de P32 i S35. Cu
acetia se realizeaz soluii radioactive, n care se introduc semine uscate sau germinate.
Neutronii sunt particule neutre din punct de vedere electric, rezultai din dezintegrarea
atomilor. Ei acioneaz prin curentul dens i ionizant de protoni de hidrogen. Efectul iradierii cu
neutroni este mai puternic, cu ct elementele celulei au o structur mai dens (plastide, nuclei i
cromozomi).
Razele ultraviolete (UV) fac parte din spectrul solar invizibil, sunt constituite din fotoni
cu o lungime de und ntre 136 i 4000 . Absorbite de organism, transform energia lor n
reacii chimice, provocnd diferite efecte genetice. Ele au o mic putere de ptrundere i sunt
absorbite la suprafaa esuturilor.
n lucrrile de genetic se folosete mai frecvent aciunea mutagen a razelor X, gamma
i a neutronilor termici. Studiul i folosirea radiaiilor n genetic a dus la fundamentarea unei noi
ramuri a biologiei - radiogenetica - care, n ultimul timp, a cptat o amploare foarte mare.

7.3.2. Temperatura

Temperatura este un agent mutagen slab. Aciunea ei a fost sesizat n special la

Drosophila. Odat cu ridicarea temperaturii la care sunt crescute musculiele, frecvena mutaiilor
crete. Dar cu creterea sau scderea treptat a temperaturii, frecvena mutaiilor crete
nensemnat. Mult mai eficace sunt ocurile de temperatur, aplicate pentru o perioad scurt de
timp.
Prin tratarea larvelor de Drosophila cu temperaturi de 36-380C timp de 12-24 ore,
frecvena mutaiilor letale crete de dou ori fa de acele crescute la temperaturi normale. Dac
ocul corespunde temperaturilor sczute de -60C timp de 25-40 minute, frecvena mutaiilor
crete de trei ori fa de acele crescute la temperaturi normale.

7.3.3. Substanele chimice mutagene

Aciunea mutagen a unor substane a fost pus n eviden mai ales n ultimele decenii.
Oehlkers, n 1943 descoper aciunea de dezintegrare a cromozomilor de Oenothera prin tratarea
acesteia cu uretan. Primele rezultate s-au obinut prin tratarea Drosophilei cu iperit (gaz mutar),
prin nregistrarea letalelor legate de sex. S-a obinut pn la 24% spor de letalitate. Ulterior, s-au
obinut rezultate i la plantele superioare, la ciuperci i microorganisme.
Principalii ageni mutageni chimici sunt: agenii alkilani, acidul nitros, hidroxilamina,
acridinele etc.
Agenii alkilani, dintre care face parte i iperita, se numesc astfel, deoarece conin un
radical numit alkil (metil, etil, propil), care poate fi transferat nucleotidelor. Majoritatea lor
opresc diviziunea mitotic, de aceea sunt folosii i n tratamentul cancerului. Ei intr n reacie
cu molecula de ADN, unde pot produce urmtoarele modificri: ruperea coloanei glucidofosforice, alkilarea bazelor azotate, depurinizrile moleculei de ADN, blocarea mitozei prin
formarea unei legturi transversale intercatenare. Efectul mutagen al agenilor alkilani a fost pus
n eviden la bacterii, Drosophila melanogaster, Neurospora crassa, Vicia faba .a. Substanele
alkilante acioneaz n perioada S a ciclului mitotic.
Acidul nitros (HNO2) este un agent mutagen care acioneaz asupra bazelor purinice i
pirimidinice, dezaminndu-le. S-a artat c prin tratarea ARN din virusul mozaicului tutunului cu
acid nitros, se produce dezaminarea bazelor azotate i adenina a trecut n hipoxantin, guanina n
xantin i citozina n uracil.
Aceste treceri au repercusiuni asupra blocrii biosintezei unei enzime i n consecin
asupra unei proteine.

Hidroxilamina (NH2OH) acioneaz n special asupra citozinei, care face parte din
bazele pirimidinice. Ea provoac o dezaminare a citozinei i transformarea ei n uracil. A fost
experimentat asupra virusului mozaicului de la tutun, asupra fagului T4.
Acridinele sunt colorani bazici care produc mutaii, acionnd asupra moleculelor de
ADN, dar ale cror mecanisme nu sunt nc bine elucidate.
n afar de substanele artate mai sus se mai cunosc i altele cu aciune mutagen:
hidrazina, formaldehida, clorura de mangan, peroxizii organici, apa oxigenat, clorura feroas .a.

7.3.4. Factorii mutageni biologici

Cercetrile care s-au efectuat n ultimii ani la microorganisme au scos n eviden c
virusurile i micoplasmele produc mutaii la plante i animale. Se cunosc ribovirusurile care
produc sarcomul la gini i leucemia la psri i mamifere. Dintre dezoxiribovirusuri pot fi
menionate: virusul poliomei sau virusul oncogen.
Teoria virotic a cancerului uman ctig tot mai mult teren. Este vorba de ribovirusuri
defective, care se integreaz n cromozomii umani. Dar ptrunderea virusurilor n celul
determin restructurri cromozomice, pulverizri cromozomice. Sunt citate chiar i apariii de
mutaii genice.
Micoplasmele, cele mai mici organisme, de dimensiuni cuprinse ntre cele mai mari
virusuri i cele mai mici bacterii, capabile i de via independent, introduse n culturi de celule
produc restructurri i pulverizri cromozomice. La nivel molecular sinteza ADN micoplasmic
oprete sinteza ADN din celula gazd.

7.4. MECANISMUL MOLECULAR AL MUTAIILOR

Deoarece, un anumit tip de secven este purttorul unei anumite informaii ereditare,
orice influen care ar schimba aceast secven, schimb i coninutul informaiei. n procesul de
diviziune al celulei aceast schimbare se va transmite i celulelor fiice.
Se cunosc astzi unele substane chimice, care, venind n contact cu organismele sau
numai cu acizii nucleici extrai din ele, modific structura acestora i fac s apar mutaii.
Schimbrile se produc n anumite regiuni ale moleculei i nu au nimic comun cu restructurrile
cromozomice ce se produc la cromozomi.

Schimbarea secvenei nucleotidelor se refer de fapt la schimbarea bazelor azotate,

acestea constituind elementul mobil. Exist mai multe modaliti de schimbare a lor: substituia,
deleia, adiia i inversia.
Prin substituie, se nelege nlocuirea unei baze purinice sau pirimidinice printr-o alt
baz purinic sau pirimidinic. Dac aceast nlocuire are loc numai ntr-o caten, odat cu
replicarea moleculei, nlocuirea se va transmite i n catena complementar. nlocuirea este i ea
de dou tipuri: a) cnd o baz purinic este nlocuit tot cu o baz purinic, iar una pirimidinic
tot cu una pirimidinic, ea mai poart numele de tranziie (de exemplu se nlocuiete adenina cu
guanina sau timina cu citozina); b) cnd o baz purinic este nlocuit cu o baz pirimidinic sau
invers, poart numele de transversie.
Deleia este pierderea unuia sau mai multor nucleotide, modificnd mesajul genetic.
Adiia este adugarea unuia sau mai multor nucleotide n cadrul secvenei iniiale, iar inversia
este schimbarea ordinei unui numr de baze ntr-un segment al catenei din molecula de ADN.
Pentru a da o explicaie diferitelor tipuri de modificri structurale a ADN, Watson i
Crick au emis teoria copierii greite n procesul de replicare a ADN. Schimbarea de secven a
unei baze va comanda n procesul de sintez, baza corespunztoare, cu care se va lega catena
nou, complementar. Aceast nou ordine va fi copiat i la o nou replicare a moleculei de
ADN.
Mutaii ale acizilor nucleici s-au obinut prin aciunea cu diferii ageni mutageni, fie
asupra organismului, fie direct asupra acizilor nucleici. n cazul radiaiilor ionizante, mecanismul
de obinere a mutaiilor la nivel molecular nu este nc complet elucidat. Exist numai ipoteze,
care susin c acestea produc ruperi ale moleculei de ADN, urmate de realipirea fragmentelor n
diferite poziii. Razele ultraviolete cu lungimea de und de 2600 acioneaz asupra bazelor
purinice i pirimidinice. S-a demonstrat acest lucru, acionndu-se direct asupra acestor baze. S-a
constatat c acestea sunt sensibile la tratamentul cu raze ultraviolete i se descompun n mod
difereniat. Temperaturi anormale pot produce alterri n molecula de ADN: disocierea i
depurinizarea catenelor de ADN.

PARTEA II
AMELIORAREA PLANTELOR
CAPITOLUL 8
NOIUNI INTRODUCTIVE

8.1. OBIECTUL, CONINUTUL I IMPORTANA

AMELIORRII PLANTELOR
Din momentul n care agricultura a devenit o activitate contient, omul a sesizat
neuniformitatea plantelor n cadrul unor populaii luate n cultur, fiind tentat s selecteze pentru
viitorul ciclu de cultur indivizii cu o productivitate sporit, rezisteni la boli i duntori, secet
sau temperaturi coborte etc. Pentru satisfacerea nevoilor sale, omul a fost preocupat n
permanen de mbuntirea formelor pe care le cultiva.
Dup apariia geneticii ca tiin de sine stttoare, omul i-a dat seama c unele
caractere ereditare pot fi recombinate, reunite la nivelul unui individ, obinnd o form care
ntrunete mai multe caractere utile, deci o form ameliorat, conturndu-se o nou tiin
denumit ameliorarea plantelor.
Termenul "amelioare" provine din latin (ad-"la" i melior-"mai bine"), fiind folosit cu
sensul de mbuntire.
Obiectul ameliorrii plantelor este crearea de forme noi, superioare celor existente la un
moment dat, exploatnd variabilitatea i ereditatea caracterelor, dar i multiplicarea acestora
pentru meninerea unei valori biologice ridicate i satisfacerea cerinelor cultivatorilor.
Formele noi la care facem referire sunt soiurile i hibrizii existente n cultur, la
majoritatea speciilor cultivate. n sens strict, ameliorarea plantelor este tiina crerii de soiuri
(hibrizi) i nmulirea (multiplicarea) lor.
Soiul este o grupare de indivizi asemntori morfologic, fiziologic, biochimic i reacie
la factorii de mediu, cu o stabilitate genetic ct mai mare n timp.
Hibridul este o sum de indivizi cu caracteristici comune, obinut prin ncruciarea a
dou forme parentale, caractere care, n generaia F1, manifest heterozis.

Fiind o disciplin agrobiologic aplicativ, coninutul ameliorrii plantelor este un

ansamblu de principii, metode i tehnici folosite n crearea de soiuri i hibrizi, producerea de
semine i particularitile ameliorrii principalelor specii cultivate.
Importana ameliorrii plantelor este unanim recunoscut i argumentat astfel:
- noile soiuri i hibrizi contribuie la sporirea produciei agricole, fr investiii
suplimentare, micorndu-se preul de cost;
- soiurile i hibrizii nou creai valorific superior elementele chimice din sol, apa i
factorii ce in de mecanizare;
- nsuirile fiziologice superioare, plasticitatea ecologic superioar, permit extinderea n
cultur a soiurilor i hibrizilor, n noi regiuni;
- asigur o nutriie mai abundent i raional a omenirii;
- se economisesc importante surse energetice i se combate poluarea mediului
nconjurtor.

8.2. Legtura ameliorrii plantelor cu alte discipline

Ca tiin agrobiologic, ameliorarea plantelor este indisolubil legat de majoritatea
tiinelor biologice, dar vine n contact i cu altele, cum ar fi matematica.
Legile ereditii i variabilitii organismelor, modul de reproducere al acestora, au stat
la baza elaborrii metodelor proprii de cercetare a ameliorrii plantelor, nct se poate afirma c
aceasta este o genetic aplicat.
Identificarea formelor cu rezisten genetic la boli i duntori presupune cunoaterea
ciclului biologic al acestora, modul de atac, pagubele posibile, ceea ce presupune o interaciune
ntre ameliorare, fitopatologie i entomologie.
Cunotinele generale referitoare la creterea i dezvoltarea plantelor, determinismul
elementelor de productivitate, metabolismul, rezistena la factorii de stres, sunt furnizate
amelioratorului de fiziologie i biochimie.
Botanica i ecologia sunt tiine indispensabile pentru ameliorare, deoarece furnizeaz
informaii privind taxonomia i originea materialului biologic, biologia nfloritului, modul de
reproducere al plantelor.
Tehnologia de cultur, difereniat pentru un anumit soi (hibrid), precum i cea pentru
producerea seminei, domeniul fitotehniei, nu este neglijat de ameliorator.

n procesul de ameliorare, valorile individuale ale msurtorilor biometrice sunt

interpretate tiinific cu ajutorul metodelor elaborate de matematic (biometrie).

8.3. Scurt istoric al ameliorrii plantelor

Plantele de cultur i au originea n specii slbatice, care s-au format n aa numitele
centre de origine, noiune introdus de N. I. Vavilov (1935). Frecvent se folosete i noiunea de
centru genic, prin care nelegem acele zone ale Terrei cu o mare diversitate de forme cu o
frecven maxim pentru o anumit specie cultivat.
S-au conturat dou etape n ameliorarea plantelor: etapa ameliorrii empirice i cea a
ameliorrii tiinifice.
Etapa ameliorrii empirice, a nceput acum 7000-8000 de ani, cnd omul a fcut
primele alegeri ale plantelor, dup criterii morfologice, pstrnd pentru cultur "planta mai bun".
Rezultatul acestor selecii artificiale s-a concretizat prin crearea soiurilor locale sau autohtone, la
speciile cultivate ntr-o anumit zon.
Etapa ameliorrii tiinifice, a nceput n secolul al XIX-lea, prin crearea n mod
deliberat, prin metode tiinifice a unor forme noi, cu o mai bun capacitate de producie, cu o
bun rezisten la factorii de stres.
n timp, omul a constatat c variabilitatea natural a caracterelor este limitat i a nceput
s provoace variabilitatea artificial prin diverse metode, hibridarea fiind prima folosit.
Descoperirea legilor transmiterii ereditare a caracterelor de Gregor Mendel (1822-1884),
a constituit piatra de temelie a geneticii, contribuind i la perfecionarea lucrrilor de ameliorare.
Un alt moment hotrtor n dezvoltarea ameliorrii, l-a constituit teoria cromozomic a
ereditii elaborat de T. H. Morgan (1866-1945). Au nceput s fie iniiate alte metode moderne
de ameliorare: consangvinizarea i utilizarea heterozisului, crearea artificial a formelor mutante
(mutaii genice, cromozomice i de genom), transferul interspecific al genelor pentru realizarea
de organisme modificate genetic sau organisme transgenice.
n zilele noastre s-au elaborat metode moderne de studiu a fondului de germoplasm,
mergndu-se pn la secvenializarea nucleotidelor din ADN, deci identificarea genelor
responsabile de determinarea caracterelor ereditare.
Problema conservrii genetice a speciilor vegetale, identificarea i colectarea unui imens
material iniial de ameliorare a fost o alt realizare a oamenilor de tiin prin crearea a unor

uniti speciale denumite bnci de gene. n Romnia, prima banc de gene s-a nfiinat la
Suceava, n anul 1985.

CAPITOLUL 9
OBIECTIVELE AMELIORRII PLANTELOR
Soiuri (hibrizi) care s ntruneasc un numr nelimitat de nsuiri favorabile i cu o
durat de conservare foarte ndelungat nu exist. De aceea, crearea unui soi (hibrid) nou cere, n
primul rnd, depirea sortimentului existent, cu o serie de caracteristici, care s-l fac
competitiv. Aceste caracteristici, care-i confer competivitate, reprezint obiective de ameliorare,
care alctuiesc programe de ameliorare.

Principalele obiective de ameliorare a plantelor agricole sunt: capacitatea de producie,

calitatea, rezistena la boli i duntori, durata perioadei de vegetaie, rezistena la cdere i
scuturare, rezistena la temperaturi coborte, rezistena la secet, reacia la irigare, la lucrrile
mecanice.

9.1. AMELIORAREA CAPACITII DE PRODUCIE

Sporirea capacitii de producie este cel mai important obiectiv al ameliorrii, deoarece
potenialul biologic al cultivarului* condiioneaz nivelul ntregii producii agricole.
Capacitatea de producie este o nsuire complex, determinat de factori intrinseci i de
factori de influen.
Factorii intrinseci sunt reprezentai de elementele capacitii de producie, caracteristice
fiecrei specii, condiionate de procese fiziologice i biochimice (capacitatea de asimilare,
depunerea asimilatelor, sintetizarea substanelor utile, coninutul acestora etc.)
Factorii de influen, reprezentai de rezistena la boli i duntori, la factorii
nefavorabili de mediu, condiioneaz n mare msur valoarea cantitativ i calitativ a
elementelor de productivitate.
________________________________________________________________
* Cultivar - soiuri i hibrizi.

Mrirea intensitii de exprimare a elementelor de productivitate determin, n final,

sporirea capacitii de producie.
Elementele de productivitate, n majoritate caractere cantitative, sunt determinate
poligenic, fiind influenate ntr-o msur mai mare sau mai mic de factorii de mediu, prin
urmare, ameliorarea capacitii de producie este anevoioas i de durat.
Idealul ar putea fi atins n sporirea capacitii de producie i stabilitatea acesteia, dac
odat cu realizarea unor genotipuri noi, cu valori ridicate ale elementelor de productivitate,
acestea s aib i o bun rezisten la factorii de influen.
Ameliorarea capacitii de producie, obiectiv mereu n actualitate, presupune o
activitate complex pentru studiul germoplasmei mondiale, pentru identificarea de noi gene
responsabile de valoarea elementelor de productivitate, crearea unor gene noi, prin mutaie sau
sintez artificial, acumularea genelor valoroase prin hibridare, transferul de gene, mrirea

plasticitii ecologice, ruperea unor corelaii negative dintre unele caractere cantitative i cele
calitative.

9.2. AMELIORAREA CALITII

Calitatea produselor agricole este la fel de important, dac nu chiar mai important,
dect capacitatea de producie.
nsuire complex, calitatea este dat de coninutul n substane utile, natura compuilor
biochimici, nsuirile tehnologice, nsuirile culinare.
Principalele grupe de substane utile, urmrite n procesul de ameliorare sunt: proteinele,
lipidele i hidraii de carbon. Sursa principal de protein, cu condiia realizrii i a unei
capaciti de producie ridicate, o constituie crearea de cultivare, care s acumuleze n producia
finit o cantitate ct mai mare la unitatea de suprafa.
Coninutul proteic este determinat genetic, dar influenat n mare msur de condiiile
ecologice i tehnologice. Este posibil creterea coninutului de protein brut prin inducerea
unor mutaii, care rup corelaia negativ dintre coninutul de proteine i capacitatea de producie.
Coninutul de lipide este dependent, n mare msur, de factorii de mediu, ns exist o
mare variabilitate genetic n cadrul speciilor vegetale, care poate fi folosit n direcia creterii
acestuia.
Ridicarea coninutului n hidrai de carbon prezint importan la cerealele destinate
fabricrii amidonului, dextrinei, alcoolului etilic, berei etc.
n ameliorarea coninutului n substane utile amelioratorul se lovete de existena unor
corelaii genetice negative ntre producia de semine i coninutul chimic (procentul de protein
mare din gru-producie mic, nivel proteic ridicat la porumb-producie mic, coninutul de
proteine-coninutul de ulei la porumb, floarea soarelui, soia etc.).
Calitatea depinde i de natura compuilor chimici, cum ar fi tipurile de aminoacizi
eseniali din proteina brut (lizin, metionin, triptofan etc.), dar i de nsuirile tehnologice i
culinare. O mare importan pentru gru, prezint nsuirile de morrit i panificaie, la orzul
pentru bere, coninutul n amidon, la floarea soarelui, sporirea coninutului n acid linolenic, la
leguminoasele pentru boabe, procentul de tegumente, capacitatea i uniformitatea de fierbere etc.

9.3. AMELIORAREA REZISTENEI LA BOLI I DUNTORI

Rezistena la boli este condiionat genetic, oligogenic sau poligenic, la fel i reacia
patogenului.
Rezistena la boli este de dou tipuri: rezistena vertical i rezistena orizontal.
Rezistena vertical se manifest atunci cnd un nou cultivar manifest o rezisten
activ la o anumit ras fiziologic a patogenului, fa de o alt ras a aceluiai patogen. De
obicei controlul genetic este oligogen, mai rar poligen. Rezistena vertical are o durabilitate
redus, n sensul c se menine pn cnd agentul patogen nu dezvolt o nou ras fiziologic.
Rezistena orizontal, denumit i permanent sau rezisten stabil, se realizeaz pe
parcursul filogenezei plant-parazit, cnd planta, n contact permanent cu parazitul, i-a creat o
rezisten la materialul iniial, neameliorat, din flora spontan, fiind slab la formele nou create.
Determinismul genetic este poligenic, uneori fiind implicate sute sau mii de gene.
Proliferarea rapid a agenilor patogeni are numeroase cauze (N. Ceapoiu, 1977):
- introducerea n cultur a cultivarelor intensive, la care se exprim la nivel nalt
capacitatea de producie i mai puin rezistena la boli;
- cultivarea pe suprafee mari a unui numr mic de soiuri, care poate favoriza
rspndirea rapid a unei noi rase a patogenului;
- migrarea din zonele cu inocul primar a noilor rase fiziologice;
- apariia de noi rase fiziologice prin recombinri genetice, mutaii etc;
- nerespectarea asolamentelor, aplicarea de doze mari de ngrminte cu azot;
- utilizarea pe scar larg a rezistenei verticale, n detrimentul celei orizontale.
Pentru evitarea pagubelor produse de boli sunt dou soluii:
- perfecionarea mijloacelor de combatere chimic;
- crearea de noi cultivare cu rezisten sporit.
Desigur, optm pentru cea de-a doua soluie, fiind economic i nepoluant.
Duntorii cei mai redutabili ai plantelor agricole sunt insectele, care cuprind aproape
700000 specii, au o mare capacitate de adaptare, prolificitate extraordinar, adaptabilitate la
mediu.
Insectele duntoare s-au rspndit foarte mult datorit unor cauze cunoscute:
- distrugerea unor ecosisteme naturale;
- cultivarea unui numr mic de specii pe arii ntinse;
- folosirea iraional a unor cantiti mari de insecticide care duc la proliferarea unor
forme mai bine adaptate i mai virulente;
- "importul" unor insecte, fr a se aduce i inamicii lor naturali.

Ameliorarea rezistenei la duntori este dificil, dar justificat economic. Mari

companii productoare de insecto-fungicide sunt preocupate de crearea unor soiuri transgenice,
rezistente sau imune la boli i duntori.

9.4. AMELIORAREA PRECOCITII

Scurtarea perioadei de vegetaie prezint importan pentru unele zone ale rii i pentru
majoritatea speciilor cultivate:
- soiurile de gru mai precoce nu itvesc i nu sunt atacate de rugina neagr;
- hibrizii de porumb mai precoci pot fi extini n zonele mai rcoroase i constituie o mai
bun premergtoare pentru gru;
- soiurile de fasole pentru boabe formeaz bobul n condiii de temperaturi moderate
atunci cnd perioada de vegetaie este mai mic;
- cartoful timpuriu contribuie la completarea alimentaiei pentru perioada de var.
Durata de vegetaie este o nsuire complex, care cuprinde mai multe componente
elementare, n ontogeneza fiecrei specii.
Perioada de vegetaie a plantelor se comport de cele mai multe ori ca o nsuire
transgresiv. Cea mai bun cale de cercetare genetic a precocitii o constituie hibridrile dintre
formele precoce i cele tardive, formele care apar putnd fi intermediare, dar pot depi limitele
celor doi prini.

9.5. AMELIORAREA REZISTENEI LA CDERE I SCUTURARE

Mecanizarea lucrrilor de recoltare presupune sporirea rezistenei la cdere, respectiv la
frngere i la scuturare, mai ales c chimizarea i irigaiile pot favoriza aceste aspecte nedorite.
La cerealele pioase, cderea favorizeaz grefarea unor patogeni, ntrzie i
neuniformizeaz maturizarea, depreciaz producia.
La porumb, frngerea tulpinilor mpiedic recoltarea mecanizat i producia scade.
Pierderi mari prin scuturare i cdere se nregistreaz i la leguminoasele pentru boabe (fasole,
mazre, linte etc.)

Rezistena la cdere i scuturare sunt nsuiri de soi, depinznd de talia plantei i de

structura anatomo-morfologic a tulpinii.

9.6. AMELIORAREA REZISTENEI LA IERNARE I LA NGHEURILE

TRZII DE PRIMVAR
La cerealele de toamn, n anii cu ierni aspre i fr zpad, rezistena la ger este un
obiectiv de importan major.
ngheurile trzii din primvar pot produce pagube mari la porumb, floarea-soarelui,
fasole, ceea ce necesit crearea de forme biologice capabile s germineze i s reziste, n faza de
plantul, la temperaturi coborte.
Rezistena la ger este o nsuire genetic i fiziologic complex.
Ereditatea rezistenei la ger este de tip poligenic, fiind o ereditate cantitativ. Majoritatea
cercetrilor susin c rezistena la ger este o nsuire recesiv, dar sunt i cercetri care reliefeaz
posibilitatea apariiei de transgresiuni.

9.7. AMELIORAREA REZISTENEI LA SECET I ITVIRE

Este un obiectiv de mare interes pentru zonele din sudul i estul rii.
La cerealele pioase, seceta din perioada formrii primordiilor florale, determin
sterilitatea, iar seceta din perioada umplerii bobului duce la itvire, reducndu-se puternic masa
a 1000 de boabe. La leguminoasele pentru boabe, seceta din timpul nfloritului duce la avortarea
florilor.
Rezistena la secet are la baz factori genetici i se apreciaz pe baza coeficientului de
ofilire i a produciei obinute n anii secetoi. Este o nsuire genetic complex, controlat de
gene multiple, hibridarea putnd duce la apariia formelor segregante transgresive.

9.8. AMELIORAREA REACIEI FAVORABILE LA IRIGARE I

MECANIZARE
Genotipurile cultivate n condiii de irigare trebuie s ndeplineasc cteva condiii:
capacitate mare de producie, s valorifice ct mai bine apa i elementele nutritive din sol,
rezisten foarte bun la cdere i boli. Pentru mecanizarea integral a tehnologiilor de cultivare,

noile genotipuri trebuie s ndeplineasc o serie de condiii: s aib portul erect i compact,
sistem radicular profund i puternic, maturizare uniform, rezisten la scuturare i cdere etc.

CAPITOLUL 10
MATERIALUL INIIAL DE AMELIORARE
Ameliorarea plantelor agricole se desfoar n Staiunile de Cercetri Agricole, avnd
drept scop crearea de noi soiuri i hibrizi. Amelioratorul are obligaia s produc i smna
noilor genotipuri, pentru ca aceasta s ajung la unitile agricole.
n etapa crerii de noi soiuri sau hibrizi se obine un material iniial cu o diversitate
genetic pronunat, din care se rein prin selecie, genotipurile care corespund obiectivelor
urmrite. Acestea se compar cu soiurile i hibrizii zonai i dac se dovedete superior este
omologat i zonat pe teritoriul rii.
Producerea de smn presupune reproducerea genotipului nou creat, urmrind mrirea
progresiv a cantitii de smn cu condiia meninerii tuturor caracteristicilor pozitive avute n
momentul omologrii.

10.1. IMPORTANA MATERIALULUI INIIAL

Materialul iniial de ameliorare, denumit mai nou germoplasm, reprezint un material
biologic diversificat genetic, care posed genele responsabile de transmiterea unor caractere, ce
constituie, n final, obiective de ameliorare.
Valoarea, diversitatea i ansamblul genelor valoroase a materialului iniial sunt
hotrtoare n desfurarea cu succes a programelor de ameliorare. Rolul hotrtor al materialului
iniial n procesul de ameliorare presupune colectarea, studiul, conservarea i alegerea judicioas
pentru oricare plant de cultur.

10.2. FORMELE MATERIALULUI INIIAL

Materialul iniial trebuie s aib o variabilitate pronunat. Aceasta poate fi natural sau
artificial, indus de ameliorator.

Materialul iniial folosit n ameliorarea plantelor poate fi clasificat astfel (A. Creu,
2000):
1. Material iniial de baz:
a. Material iniial din flora spontan;
b. Populaiile locale;
c. Soiurile locale;
d. Soiurile ameliorate.
2. Material iniial creat de ameliorator:
2.1. Folosind metode convenionale:
a. Populaiile hibride;
b. Liniile consangvinizate;
c. Formele mutante;
d. Formele poliploide.
2.2. Folosind metode neconvenionale:
a. Materialul folosit n tehnologia ADN-recombinat;
b. Materialul rezultat prin culturi de celule i esuturi "in vitro";
c. Materialul folosit n obinerea haploizilor;
d. Materialul folosit n hibridrile somatice.
Materialul iniial din flora spontan
Este reprezentat de speciile slbatice nrudite cu specia ce urmeaz a fi ameliorat.
Speciile slbatice au o serie de avantaje, majoritatea caracteristicilor fiind rezultatul
seleciei naturale: rezistena la ger, secet i boli i o mare plasticitate ecologic. Unele caractere,
utile pentru forma slbatic sunt ns defecte pentru formele ameliorate: producie redus, calitate
inferioar, slab rezisten la scuturare, maturare ealonat a fructelor i seminelor.
Avnd o variabilitate pronunat a caracterelor, supus seleciei, acest material poate
constitui baza unor soiuri noi. La fel de util este hibridarea formelor spontane cu cele cultivate,
acestora din urm transmindu-li-se caractere de rusticitate.
Populaiile i soiurile locale, au fost create n cea mai mare parte prin selecie natural
i selecie empiric aplicat de om. Aceste forme de material iniial s-au format n timp i, prin
urmare, au o plasticitate ecologic foarte mare, rezisten foarte mare la factorii nefavorabili de
mediu, variabilitate mare (alctuite din numeroase biotipuri). Prin selecie artificial la plantele
autogame se pot izola linii (soiuri noi), iar la cele alogame se pot obine linii consangvine,
folosite apoi ca genitori n procesul de hibridare.
Soiurile ameliorate, obinute prin metode tiinifice de ameliorare, cu o structur
genetic cunoscut, constituie materialul iniial cel mai valoros. Avnd o bun capacitate de

producie, calitate superioar, rezistente la factorii nefavorabili de mediu, soiurile ameliorate se

pot folosi n procesul de hibridare la plantele autogame sau pentru obinerea liniilor consangvine
la cele alogame.
Populaiile hibride, n curs de segregare constituie o surs important de variabilitate
genotipic la plantele autogame, deoarece pe lng indivizi ce pstreaz caracterele genitorilor,
apar i aa numitele forme transgresive, valoroase pentru ameliorare. Genitorii trebuie s fie ct
mai difereniai genetic. Pot fi folosite hibridrile apropiate (intraspecifice), dar i cele ndeprtate
(interspecifice i intergenerice).
Liniile consangvinizate reprezint un valoros material iniial de ameliorare al plantelor
alogame. Ajungnd la prag foarte ridicat de homozigoie, n urma hibridrii, hibrizii din generaia
F1 exteriorizeaz la maximum vigoarea hibrid (heterozis).
Formele mutante i formele poliploide pot constitui noi soiuri, cnd au nsuiri
valoroase sau pot fi folosite n diferite programe de ameliorare.
n ultimul timp se extind metodele neconvenionale de creare a materialului iniial, prin
tehnologii specifice ingineriei genetice, bazate pe tehnologia ADN recombinat.
Izolarea genei sau a unui grup de gene nlnuite, transferul acestora prin intermediul
unui vector a dus la obinerea de soiuri transgenice, care ctig din ce n ce mai mult teren.
Culturile "in vitro" de celule i esuturi vegetale au creat posibiliti imense de multiplicare a
materialului biologic, a unui material liber de viroze.
Obinerea formelor haploide, prin androgenez i ginogenez experimental, constituie o
alt realizare a ingineriei genetice, deoarece liniile izogene se obin ntr-un timp scurt i sunt
complet homozigote.
Realizarea protoplatilor (celule vegetale fr membrana pecto-celulozic) a deschis
calea hibridrilor somatice, nlturndu-se barierele de specie i a obinerii nor genotipuri noi,
superioare celor existente.

CAPITOLUL 11
METODELE DE AMELIORARE A PLANTELOR AGRICOLE

11.1. ALEGEREA METODEI DE AMELIORARE

Alegerea uneia sau a mai multor metode de ameliorare depinde de o serie de aspecte
legate de modul de reproducere al speciei. Plantele de cultur dup modul de reproducere pot fi:
autogame, alogame i cu nmulire vegetativ.
Plantele autogame se fecundeaz cu polen propriu, realiznd un grad ridicat de
homozigoie, n urma seleciei rezultnd liniile pure, care pot constitui noi soiuri. Principalele
specii cultivate autogame sunt: grul, orzul, orzoaica, ovzul, mazrea, fasolea, soia, lintea,
lupinul, inul, sorgul, meiul, iarba de Sudan etc.
Plantele alogame se fecundeaz cu polen strin, fiind n mare msur heterozigote. n
acest mod se reproduc: porumbul, floarea soarelui, sfecla pentru zahr i cea furajer, secara,
cnepa, o serie de leguminoase furajere (lucerna, trifoi, sparcet), graminee perene furajere
(obsig, golom, raigras). Pentru plantele alogame, hibridarea dirijat pentru realizarea hibrizilor
valoroi, presupune obinerea liniilor consangvinizate, dup 7-8 generaii de autopolenizare
forat, cnd rezult linii pure, homozigote. Aceste linii, dac ndeplinesc caractere dorite de
ameliorator sunt hibridate, rezultnd hibrizi F1, la care se manifest fenomenul heterozis.
Cteva specii de cultur (cartoful, trestia de zahr) se nmulesc vegetativ, ceea ce
asigur o constan a caracterelor ereditare, n timp, variaiile ce apar fiind cauzate de mutaii
genice.
Metoda de ameliorare folosit trebuie s fie simpl, exact, tiinific, s permit, n
final, realizarea obiectivului de ameliorare propus.

11.2. CLASIFICAREA I CARACTERIZAREA METODELOR DE

AMELIORARE
Metodele de ameliorare a plantelor agricole s-au conturat odat cu descoperirile realizate
n genetic, astfel c putem s distingem o prim categorie de metode clasice i o alta de metode
moderne.
Metodele clasice de ameliorare sunt: selecia, hibridarea, consangvinizarea, mutageneza
(genic, cromozomic i de genom).

Metodele moderne, de o mai mare complexitate, necesit i o dotare tehnic deosebit:

tehnologia ADN recombinat, culturi de celule i esuturi "in vitro", haploidia prin androgenez
sau ginogenez, hibridarea somatic.

11.3. Selecia n procesul de ameliorare

Importana seleciei
Selecia este metoda cea mai veche de ameliorare i n acelai timp cea mai rspndit,
mai uor de aplicat, indispensabil i n celelalte metode de ameliorare, clasice sau moderne.
Selecia este un proces natural sau artificial, care favorizeaz supravieuirea sau
nmulirea preferenial a unor indivizi.
n ameliorarea plantelor se practic numai selecia artificial - separarea i nmulirea
plantelor care corespund obiectivelor de ameliorare.
Orice lucrare de selecie ncepe cu alegerea genotipurilor valoroase din materialul iniial,
denumite plante elit i continu cu observarea i trierea lor.
Baza teoretic a seleciei
Prin selecie nu se realizeaz forme noi, ci se rein doar plantele valoroase din materialul
iniial. Din cauza aceasta, eficiena seleciei este determinat de: variabilitatea genotipic i
eritabilitatea caracterelor i nsuirilor.
Variabilitatea materialului iniial
n sens larg, variabilitatea este neasemnarea dintre indivizii aceleiai uniti sistematice.
Concret, variabilitatea materialului iniial de ameliorare const n variabilitatea caracterelor i
nsuirilor acestuia.
Caracterele ereditare sunt particulariti morfologice, individuale, ce exprim forma,
mrimea, greutatea, structura etc. Distingem dou tipuri de caractere, caractere calitative i
caractere cantitative.
Caracterele calitative sunt determinate, n cele mai multe cazuri, monogenic, se transmit
mendelian i permit gruparea indivizilor n clase distincte cum ar fi: prezena sau absena unui
caracter, culoarea florilor, seminelor (fructelor) etc.
Caracterele cantitative (metrice) sunt determinate poligenic, putnd fi exprimate n
uniti de msur (lungime, greutate, capacitate, numr). Participarea unui numr mare de gene,

cu aciune minor, separat, face ca aceste caractere s aib toat gama de valori intermediare ntre
valorile extreme ale genitorilor sau chiar s-i depeasc (variabilitate transgresiv).
nsuirile ereditare cuprind particulariti fiziologice, biochimice i comportamentale (de
adaptare) fa de condiiile de mediu.
Noiunea de fenotip cuprinde totalitatea caracterelor i nsuirilor, determinate de
genotip n interaciune cu factorii de mediu.
Genotipul reprezint totalitatea genelor unui individ, transmise de prini (genitori).
Interaciunile complexe ale zestrei ereditare cu factorii de mediu, duc la apariia
variaiilor individuale i deci a variabilitii.
Variabilitatea fenotipic este determinat de variaiile genotipice i cele datorate
influenei condiiilor de mediu.
Variaiile genotipice determinate de constituia ereditar a indivizilor provin din mutaii
i recombinri genetice.
Variaiile provocate de condiiile de mediu pot fi caracterizate ca fiind fenotipuri diferite
ale aceluiai genotip. Aceste variaii denumite i modificaii, nu afecteaz genotipul i nu sunt
ereditare.
n lucrrile de ameliorare sunt urmrite variaiile genetice utile, punctul de plecare
pentru obinerea unui nou soi.
Studiul variabilitii. Eritabilitatea
Pentru studiul variabilitii caracterelor calitative i selecia acestora este necesar
stabilirea proporiei de indivizi homozigoi dintr-o populaie segregant.

Se poate aplica formula:

m

2 n 1 1
X n = n 1 , n care:
2

Xn - proporia homozigoilor n generaia n de autopolenizare

m - numrul locilor la care se urmrete homozigotarea
Pentru studiul caracterelor cantitative, variabilitatea fenotipic se exprim statistic prin:
varian (s2), abaterea standard (s) i coeficientul de variabilitate (s%).
Variana (s2) este un indice statistic al dispersiei valorilor individuale, exprimnd
variabilitatea ntr-un grup de indivizi. Se calculeaz folosind mai multe formule de calcul, n

funcie de mrimea probei medii. Cele mai uzuale formule de calcul, folosesc datele individuale,
negrupate n iruri de variaie:

(x x )
sau s 2 =
n 1
2

s2 =

x 2

(x )2

n 1

, n care:

x - valorile individuale;
x - media aritmetic;
n - numrul de indivizi din proba medie.
Variana calculat astfel reprezint variana fenotipic total (s2F), care cuprinde att
variana genotipic (s2G), ct i variana mediului (s2M).
Prin urmare, s2F = s2G + s2M.
Cnd materialul genetic este uniform, variana fenotipic este dat de variana mediului
n cea mai mare msur, deci s2F = s2M. Variana genotipic, se poate descompune n mai multe
componente.
Avnd n vedere sarcina amelioratorului de a crea soiuri stabile n timp, trebuie izolate
variaiile fenotipice stabile, determinate n mare msur de genotip.
Pentru a distinge cota de participare a genotipului i a mediului se calculeaz
coeficientul de eritabilitate, notat cu h2, dup formula:

h2 =

s2G
s2G
=
s2F s2G + s2M

Acest coeficient are valori cuprinse ntre 0 i 1. Cu ct valoarea sa este mai mare, mai
apropiat de 1, variana genetic contribuie mai mult la variana total, iar selecia este mai
eficient.

11.3.1. Efectul seleciei n funcie de modul de reproducere al

plantelor
Modul de reproducere al plantelor este hotrtor n privina manifestrii, transmiterii
variaiilor genotipice i a celor determinate de mediu. Distingem dou categorii de plante, funcie
de modul de reproducere: plante cu reproducere vegetativ i plante cu reproducere sexuat,
acestea fiind de dou tipuri: autogame i alogame.

n cadrul reproducerii vegetative, indivizii se dezvolt din organele vegetative sau

poriuni ale acestora. n absena mutaiilor, caracterele ereditare se transmit constant, nemodificat,
un numr mare de generaii. Se utilizeaz frecvent termenul de clon - o grupare de indivizi
rezultai din multiplicarea vegetativ a unui individ, identici din punct de vedere genetic.
Variaiile ereditare sunt rare, datorate mutaiilor spontane.
Selecia aplicat n cazul acestor plante este nul, deoarece variabilitatea genotipic este
inexistent, indivizii sunt identici genetic, coeficientul de eritabilitate (h2) este egal cu zero.
Reproducerea sexuat presupune participarea, la formarea oului (zigotului) a doi gamei
identici sau diferii genetic, rezultnd organisme homozigote sau heterozigote.
n cazul plantelor autogame, n urma autofecundrii organismelor homozigote rezult
indivizi identici genetic, care alctuiesc o linie pur. Variabilitatea fenotipic ce se observ n
cadrul liniilor pure se datorete modificaiilor. Variana genotipic i coeficientul de eritabilitate
sunt egale cu zero i deci, selecia n cadrul liniilor pure este ineficient.
Variaiile genotipice ce pot apare n cadrul liniilor pure se datoresc mutaiilor i
hibridrilor, caz n care, dac sunt utile, amelioratorul le separ (selecteaz). Chiar i la plantele
autogame soiurile nu sunt constituite dintr-o singur linie pur, ci din mai multe, aa numitele
biotipuri, descendene homozigote, deci alctuiesc populaii, cu o plasticitate ecologic mai mare.
Plantele alogame se reproduc n urma polenizrilor strine, recombinarea genetic fiind
continu, rezultnd un amestec de indivizi heterozigoi.
Ca urmare a acestui fapt, variana genotipic deine o mare pondere, coeficientul de
eritabilitate are valori mari, selecia este eficient.

11.3.2. Metodele de selecie

Procesul de selecie const n alegerea plantelor elit din materialul iniial (de baz sau
nou creat).
Planta elit este o plant sau poriune din ea ce ntrunete unul sau mai multe caractere i
nsuiri, care corespund obiectivelor de ameliorare. Plantele elit se aleg din cmpul de alegere i
se analizeaz n laborator.
n cmp, elitele se aleg n momentul n care elementele de productivitate i nsuirile
fiziologice sunt evideniate i corespund obiectivelor de ameliorare.
n laborator, elitele sunt analizate cantitativ i calitativ, sunt nregistrate, iar n momentul
trierii, n vederea nsmnrii, se rein cele ce corespund criteriilor propuse de ameliorator.

Indivizii rezultai din seminele unei singure plante alctuiesc o descenden.

Descendenele unei plante elit la care seminele au fost obinute prin autopolenizare se
numesc linii genealogice sau linii. Linia pur este descendena identic genetic a unei elite
homozigote, obinut la plantele autogame.
Autopolenizarea forat, repetat, la plantele alogame duce la obinerea liniei
consangvinizate.
Arborele genealogic sau pedigriul este o succesiune de generaii prin care trece o linie

genealogic pentru a fi nmulit.

La plantele alogame, descendena unei elite obinute prin polenizare liber se numete
familie genealogic sau familie.
Clona sau linia vegetativ este descendena unui individ, uniform genetic, nmulit

vegetativ.
n procesul de selecie se disting cteva etape obligatorii: cmpul de alegere (C.A.),
cmpul de selecie (C.S.), cmpul de control (C.C.), cmpul de culturi comparative de orientare
(C.C.O.), cmpul de culturi comparative de concurs (C.C.C.), cmpul de nmulire (C..), cmpul
de testare n reeaua Inspeciei de Stat pentru Testarea i Introducerea Soiurilor (cmpul ISTIS).
Cmpul de alegere (C.A.) - parcela din care se aleg primele elite dintr-o populaie, soi,

hibrid.
Cmpul de selecie (C.S.), cuprinde descendenele elitelor extrase la ntmplare din

cmpul de alegere. n acest cmp se urmresc cu atenie descendenele i se elimin cele

necorespunztoare.
Cmpul de control (C.C.), alctuit din descendenele reinute din anul anterior, care

sunt comparate cu materialul iniial.

Cmpul de nmulire (C.I.), se realizeaz pentru formele valoroase din ultimul cmp,

pentru a avea smna necesar nfiinrii viitorului cmp cu materialul ce urmeaz a fi promovat.
Cmpul de culturi comparative de orientare (C.C.O.) se nfiineaz pentru noile

forme, stabile, dup regulile tehnicii experimentale, n mai multe repetiii (cel puin trei), alturi
de soiul/hibridul zonat. Experimentrile dureaz minimum trei ani, dup care materialul valoros
este verificat n reeaua ISTIS, cel puin trei ani, n trei Centre de ncercare a Soiurilor (CIS).
Cnd materialul experimentat depete cu minimum 10% soiul zonat poate fi omologat,
ca soi/hibrid nou, amelioratorul dndu-i i un nume.

11.3.3. Clasificarea metodelor de selecie

Dup modul de nsmnare i urmrire a elitelor i a descendenelor, selecia este de

dou tipuri: selecia n mas i selecia individual.
A. Selecia n mas

Se aleg elitele dup criteriile cunoscute, smna tuturor se amestec i se nsmneaz

pentru nmulire. De aici i denumirea de selecie n mas - urmrirea n amestec, n mas a
descendenei elitelor.
Selecia n mas are dou variante: selecia n mas negativ i selecia n mas pozitiv.
Selecia n mas negativ, const n eliminarea plantelor cu caractere nedorite a celor

atipice cultivarului rmnnd plantele valoroase, tipice. Acest tip de selecie se aplic n
producerea seminelor, cnd se fac de obicei purificri biologice.
Selecia n mas pozitiv const n alegerea din cmpul de alegere a celor mai valoroase

plante elit n proporie de 5-10% i nmulirea lor n amestec.

Selecia n mas pozitiv la rndul ei are dou variante: selecia n mas simpl i
selecia n mas repetat anual.
Selecia n mas simpl const ntr-o singur alegere de plante elit din cmpul de
alegere (CA) i nmulirea acestora n amestec. n paralel, descendena obinut se compar ca
valoare cu materialul iniial.
Selecia n mas repetat anual presupune alegerea plantelor elit mai muli ani
consecutiv i nmulirea n amestec a elitelor din anul n curs. Lucrrile desfurndu-se n fiecare
an, ca n cazul seleciei n mas simple, valoarea biologic a cmpului de alegere se va mbunti
ca urmare a unei valori biologice mai ridicate a descendenelor.
Selecia n mas are o serie de avantaje, dar i dezavantaje motive pentru care
amelioratorii o practic pe scar restrns, mai ales n procesul de producere de smn
(ameliorare conservativ).
Avantajele sunt evidente atunci cnd: acioneaz n acelai sens cu obiectivele seleciei
naturale, cnd se aplic n populaii locale, neprelucrate, bogate n biotipuri, cnd caracterele
urmrite sunt homozigote recesive.
Dezavantajele sunt: acioneaz cu precdere asupra fenotipului prezent n momentul
alegerii, netiindu-se ct este condiionat genetic; amestecul elitelor mpiedic urmrirea separat
a descendenelor, ca urmare unele forme valoroase se pierd, altele inferioare scad valoarea
ntregului material biologic.

B. Selecia individual

Selecia individual este o metod modern de ameliorare, aplicat n orice fel de

material iniial, att pentru crearea de forme noi ct i pentru producerea de smn.
Fa de selecia n mas, selecia individual are avantajul c pe lng aprecierea
fenotipic a fiecrei elite se stabilete i valoarea genotipic a descendenei.
Selecia individual are multe variante, n funcie de modul de alegere a elitelor (simpl
i repetat anual), cu o serie de particulariti, legate de modul de reproducerea plantelor
(autogam, alogam, vegetativ).

1. Selecia individual simpl la plantele autogame

Baza teoretic a seleciei

Soiurile locale sunt alctuite dintr-un numr mare de biotipuri, fiecare cu o anumit
frecven, ce determin o mare variabilitate genotipic. Dac frecvena acestor biotipuri nu se
modific, structura genetic a soiurilor rmne constant. Cnd asupra lor intervine selecia
natural sau artificial (mutaiile sau migraia genelor), se modific structura genetic a acestora.
Soiurile ameliorate autogame au un numr mai mic de biotipuri cu diferene mici ntre
ele i cu un echilibru mai pronunat ntre biotipuri i factorii modificatori (selecie, mutaie,
migraie etc).
Soiurile locale i ameliorate ale plantelor alogame prin autopolenizare sunt alctuite n
cea mai mare parte din biotipuri homozigote. Datorit acestui fapt selecia individual simpl
asigur identificarea i nmulirea biotipului valoros, iar selecia individual repetat nu are efect
(nu se justific biologic i economic).
Acest fapt a fost demonstrat de W. Johannsen n cazul fasolei n anul 1903, formulnd
teoria liniei pure, conform creia selecia la plantele autogame este eficient numai pn la
obinerea liniei pure.
Tehnica seleciei

n cadrul soiurilor locale i ameliorate n care exist o variabilitate genotipic, selecia

individual simpl este cea mai folosit, denumit i selecie genotipic deoarece selecia liniilor
( descendenelor) se face pe baza elitelor homozigote. Soiurile obinute dintr-o singur linie
homozigot se numesc soiuri monolineale iar cele care provin din amestecul mai multor linii
homozigote foarte asemntoare, soiuri multiliniale.
n figura 11.1. este redat tehnica seleciei individuale simple (I. Gologan, 1981).

Fig. 11.1: Selecia individual simpl

n anul I se aleg elitele din cmpul de alegere sau din alt verig a procesului de
ameliorare pe baza obiectivelor de ameliorare propuse, urmnd analiza, nregistrarea i
selectarea, n final, a celor care ntrunesc complexul de caractere i nsuiri urmrite.
n anul II descendenele reinute se nscriu n registrul de prime descendene, primind un
numr cu ajutorul cruia se identific pn la sfritul procesului de ameliorare. Elitele se
nsmneaz separate, pe cte un rnd, n cmpul de selecie, n ordinea numerotrii D1 Dn, la
fiecare a IX-a descenden intercalnd soiul zonat folosit ca martor. n perioada de vegetaie se
fac observaii referitoare la uniformitatea rsritului, ritmul i uniformitatea creterii, rezistena la
diveri factori de mediu, toate notndu-se ntr-un registru de observaie. Toate descendenele
necorespunztoare se elimin. Cele reinute se recolteaz separat fr s mai fie extrase alte elite.
n anul III n cmpul de control (C.C.) se seamn descendenele secunde (D2), n trei
repetiii alturi de soiul martor. Se vor reine descendenele valoroase sub aspectul capacitii de
producie, nsuirile de calitate i alte nsuiri fiziologice.

n anii IV i V cele mai bune descendene (linii) se nsmneaz n culturi comparative

de orientare (C.C.O.) n staiuni experimentale (universiti agronomice), rezultatele de producie,
rezistena la boli i duntori, elementele calitii interpretndu-se statistic prin analiza varianei.
Cele mai bune linii ncepnd din anii V i VI n paralel cu verigile normale ale
procesului de ameliorare sunt supuse unui proces de nmulire preliminar a seminei. Linia
superioar soiului zonat (cu un spor de minimum 10%) este verificat n reeaua ISTIS, iar dac
superioritatea ei este verificat se propune pentru omologare, autorul atribuindu-i un nume. Din
momentul omologrii autorul are obligaia de a produce smna elit pentru soiul respectiv.
Prin aceast metod de selecie n ara noastr s-au creat numeroase soiuri de gru, ovz,
fasole etc.
n unele cazuri selecia individual simpl se practic i n cadrul soiurilor ameliorate,
cnd, n snul lor apar variaii genotipice, prin mutaii spontane sau hibridri naturale.
Selecia individual simpl este metoda de baz pentru producerea de smn la soiurile
de plante autogame, pstrndu-le caracteristicile pentru o perioad de mai muli ani. Pentru
aceasta, se aleg ct mai multe elite, se nsmneaz n cmpul de selecie (C.S.) apoi n cmpul
de control (C.C.), obinndu-se smna pre-baz. Prin purificri biologice (selecie n mas
negativ) n anii urmtori se obine smna baz i n final smna certificat, livrat
cultivatorilor.

2. Selecia la plantele alogame

Baza teoretic a seleciei la plantele alogame. La plantele alogame soiurile locale i

ameliorate sunt alctuite din indivizi heterozigoi deoarece la originea lor este fecundarea a doi
gamei diferii genetic n urma creia se realizeaz un numr enorm de recombinri genetice. ntro populaie alogam alegerea plantei elit se face numai pe baza genitorului matern ceea ce face
ca genotipul descendenilor s poat fi ntr-o mic msur cunoscui.
n fiecare generaie au loc numeroase recombinri genetice, iar fixarea genelor valoroase
ntr-un singur genotip este anevoioas. Selecia n cadrul soiurilor alogame difer mult de cea
practicat la autogame. Fiecare soi alogam constituie o populaie cu un fond de gene comun.
Totalitatea genelor unei populaii poart numele de genofond.
Fondul de gene se modific frecvent prin recombinri genice, ceea ce duce la apariia
diferitelor genotipuri. n condiiile n care nu intervin factori modificatori (genetici i de mediu),
frecvena genelor i genotipurilor au o tendin de stabilitate, exprimat prin echilibrul genetic.

Fondul genetic i echilibrul genetic rmn nemodificate atta vreme ct frecvena genelor i
genotipurilor rmn constante (legea Hardy-Weinberg).
La plantele alogame echilibrul genetic se modific datorit urmtorilor factori: abaterile
de la panmixie, mutaia, migraia, driftul genetic i selecia.
Abaterile de la panmixie - micorarea anselor ca un individ dintr-o populaie s

primeasc polen de la oricare individ din acea populaie.

Mutaia, determin modificarea uneia sau mai multor gene n alelele lor avnd ca efect

modificarea frecvenei genelor, genotipurilor i echilibrului genetic.

Migraia genelor se realizeaz datorit schimbului de gamei (polenul) ntre dou

populaii nvecinate. Migraia poate fi prevenit prin izolarea spaial i evitarea amestecului
mecanic.
Driftul genetic (deriva genetic) are loc n populaiile foarte mici, cnd o anumit

combinaie a gameilor se realizeaz ntmpltor cu o frecven mai mare dect altele, modificnd
echilibrul genetic.
Selecia este factorul care modific cel mai rapid echilibrul genetic al populaiei

eliminnd din populaie indivizii cu fertilitate redus sau cu slab rezisten la factorii de mediu.
Avnd n vedere natura heterozigot a populaiilor alogame cu un anumit fond de gene, cu un
anumit echilibru genetic ameliorarea acestora are loc n dou direcii:
- eliminarea prin selecie a genelor nefavorabile mrind frecvena genotipurilor
valoroase;
- obinerea liniilor consangvinizate prin autopolenizare forat, repetat, homozigote,
care printr-o hibridare dirijat s dea natere la hibrizi cu o vigoare ct mai mare (heterozis).
Efectul seleciei este n concordan cu determinismul genetic al caracterului asupra
cruia acioneaz. n cazul n care un caracter este determinat de o alel dominant, pentru a-l
ndeprta va fi nevoie de o singur generaie, prin ndeprtarea genotipurilor homozigote
dominante (AA) i a celor heterozigote (Aa). De exemplu la floarea soarelui, gena ce determin
ramificarea tulpinii este o gen dominant notat Br ( branch-ramur), care diminueaz producia.
Prin eliminarea din lan nainte de nflorit a genotipurilor homozigote (BrBr) i a celor
heterozigote (Brbr) gena Br se elimin total, ntr-o singur generaie.
Eliminarea unei gene recesive prin selecie este un proces mai lung, deoarece gena se
manifest numai n stare homozigot (aa). Calculele matematice demonstreaz c eliminarea
definitiv a unei gene recesive este imposibil; n practic nu se justific acest efort (conform
legii Hardy-Weingberg).

Tehnica seleciei n populaiile alogame. Se practic diferite forme de selecie: selecia

n mas, simpl sau repetat i selecia individual, cu o singur alegere sau repetat anual.
Selecia n mas are o utilizare din ce n ce mai redus aplicndu-se doar n procesul de
producere de smn.
Metoda presupune alegerea elitelor care posed anumite caractere cantitative i calitative
i ndeprtarea plantelor necorespunztoare, nainte de nflorit pentru a nu poleniza elitele.
Smna plantelor elit se amestec pentru a fi nsmnat n anul urmtor. Selecia n
mas poate fi cu o singur alegere sau repetat anual. Aceast metod de selecie d rezultate bune
n populaii cu variabilitate mare, pentru caracterele cantitative.
Selecia individual cu o singur alegere const n alegerea elitelor, verificarea primei
descendene i amestecul familiilor rezultate.
La multe plante alogame se practic o variant denumit "jumtate de smn pe rnd".
Smna plantelor elit se mparte n dou. Jumtate din smn se nsmneaz iar cealalt se
pstreaz n magazie. Pe baza rezultatelor obinute n cmpul de selecie, n anul urmtor se va
amesteca numai smna de rezerv a celor mai bune elite.
Selecia individual repetat anual, prezint unele particulariti ce in de biologia
nfloritului speciei cu care se lucreaz.
La plantele alogame alegerea elitelor se face exclusiv dup genitorul matern, cel patern
nefiind cunoscut, dac polenizarea este nedirijat. Polenizarea controlat de ameliorator, n cadrul
familiilor sau grupelor de familii aere o importan deosebit. Pentru meninerea puritii
biologice n cadrul familiilor se impun o serie de msuri tehnice: izolarea n spaiu a familiilor,
pentru a nu primi polen strin; izolarea n timp, ceea ce nseamn nsmnarea familiilor n epoci
diferite, pentru a evita coincidena nfloritului i izolarea indivizilor din familii cu izolatori
speciali.
Meninerea sau ridicarea valorii genetice a familiilor de ctre ameliorator pot fi realizate
prin ndeprtarea familiilor necorespunztoare sau a indivizilor necorespunztori din familie
nainte de nflorit, reinndu-se numai materialul valoros. Sub aspect tehnic, selecia individual
repetat anual const n urmtoarele operaiuni:
- n anul I, se aleg elitele din cmpul de alegere;
- n anul II elitele se nsmneaz n cmpul de selecie, eliminndu-se descendenele
(familiile) i plantele necorespunztoare de la polenizare; se continu extragerea de elite ce se vor
nsmna n anii urmtori n cmpuri de selecie cu familii;

- n anul III familiile provenite din aceeai plant elit se fac grupe de familii a cror
valoare va fi verificat n culturi comparative;
- aceste operaiuni continu, n paralel, timp de 6-7 ani pn la obinerea noului soi.
Metoda seleciei individuale repetate anual necesit un volum mare de munc, urmrirea
unui material biologic voluminos, motive pentru care au fcut ca n timp, s fie mai puin folosit,
ctignd teren metoda consangvinizrii.

3. Selecia individual n cadrul speciilor cu nmulire

vegetativ
nmulirea vegetativ se caracterizeaz prin faptul c informaia genetic transmite
nemodificat de la o generaie la alta. Dintr-o singur plant prin fragmentarea diferitelor organe
vegetative, rezult un numr de indivizi identici genotipic i fenotipic, ce constituie o
descenden denumit clon.
n cadrul descendenei pot apare, cu o frecvena redus, variaii genetice prin mutaii
spontane sau induse.
Selecia n cazul plantelor cu nmulire vegetativ este eficient numai pn la obinerea
clonelor, deci n urma unei selecii individuale simple, ca n cazul plantelor autogame. Clonele
care depesc soiul zonat sunt propuse pentru omologare.

11.4. HIBRIDAREA CA METOD DE AMELIORARE

11.4.1. Importana i baza teoretic a hibridrii

Hibridarea este cea mai veche metod de creare a materialului iniial nou, primele
hibridri artificiale realizndu-se la mijlocul secolului XVIII.
Bazele tiinifice ale hibridrii au fost puse de Gr. Mendel, n urma descoperirii modului
de transmitere al caracterelor de la prini la urmai, prin legile care-i poart numele: legea
segregrii caracterelor i legea segregrii independente a perechilor de caractere.
Hibridarea constituie principala metod de creare a variabilitii genotipice, n cadrul
materialului iniial, deoarece hibridul ntrunete potenialul ereditar a doi sau mai muli prini,
diferii genetic.
Hibridarea este aplicat, n prezent, la majoritatea plantelor de cultur, nelipsind din
programele moderne de ameliorare.

Apariia genotipurilor noi, n urma hibridrii se explic astfel:

- n procesul de meioz, cnd se formeaz gameii, cromozomii omologi segreg, deci
segreg i genele alele;
- n procesul de fecundare, cnd se reface numrul diploid (2n) de cromozomi, au loc
recombinri ale genelor (recombinri intercromozomice);
- apariia formelor transgresive - n cazul ereditii polimere - cnd ncepnd din
generaia F2, un individ este superior celui mai bun printe, n privina unuia sau mai multor
caractere.
Valoarea materialului iniial creat prin hibridare const n superioritatea unor genotipuri
reprezentnd combinri, recombinri i transgresiuni genice, ce apar n generaiile hibride
segregante.
Valoarea hibridrii ca metod de ameliorare a crescut i mai mult dup descoperirea
efectului heterozis (hibridul din generaia F1 este superior celor doi prini).
11.4.2. Clasificarea metodelor de hibridare

Exist mai multe criterii de clasificare a hibridrii: dup modul de realizare al

polenizrii, dup numrul genitorilor (prinilor), dup gradul de nrudire al prinilor etc.
1. Dup modul de realizare al polenizrii, hibridarea este de dou tipuri: natural i

artificial (dirijat).
Hibridarea natural, ntlnit ca un fenomen natural la plantele alogame, care se

polenizeaz liber, a dus la apariia de noi combinaii hibride, omul le-a identificat i luat n
cultur dac au fost valoroase.
Hibridarea artificial, dirijat de om, presupune cunoaterea celor doi prini i obligat

genitorul matern s primeasc polen numai de la un anumit genitor patern.

2. Dup numrul de genitori (prini) ai hibridului, distingem dou tipuri de hibridare:

simpl i complex.
3. n funcie de gradul de nrudire dintre genitori, hibridarea este: intraspecific

(apropiat), cnd prinii aparin aceleiai specii i interspecific (intergeneric sau ndeprtat),
cnd genitorii sunt dou specii sau chiar genuri diferite.
Hibridarea simpl, const n faptul c hibridul este rezultatul fecundrii numai a doi

prini. Hibridarea simpl are mai multe variante: hibridarea direct, hibridarea reciproc, de tip
back-cross, hibridarea ciclic i dialel.

Notnd cu A i B cei doi prini, ntr-o hibridare AxB sau BxA, genitorul matern ocup
ntotdeauna prima poziie, iar cel patern a doua. Hibridarea AxB este hibridare direct, iar cea de
tip BxA este reciproc.
Valoarea celor doi hibrizi (direct i reciproc) este de cele mai multe ori apropiat,
deoarece prinii particip cu informaii genetice identice. n unele cazuri, cnd caracterele sunt
determinate de gene cloroplastice sau mitocondriale, hibridul are unele caractere preponderent
materne, transmise prin citoplasma gametului femel.
La plantele autogame, hibridarea simpl st la baza crerii materialului iniial, deoarece
din generaiile segregante (F2, F3, ) se pot selecta genotipuri valoroase.
n cazul plantelor alogame, hibridarea simpl se aplic n ncruciarea liniilor
consangvinizate, hibrizii F1 manifestnd heterozis.
Cnd se folosete hibridarea simpl ca metod de ameliorare, ambii prini trebuie s fie
valoroi (capacitate bun de producie, rezisten bun la factorii de mediu etc.). n practic, se
ntlnesc situaii n care un printe are valoare agronomic mai mic, dar este folosit pentru
introducerea n hibrid a uneia sau a ctorva gene valoroase, caz n care nu se mai folosete
hibridarea simpl, ci hibridarea de tip backcross.
Hibridarea de tip backcross se mai numete i hibridare regresiv, hibridare recurent,

hibridare repetat, retroncruciare, ncruciare analizatoare.

Forma parental cu valoare agronomic redus, dar care prezint 1-2 nsuiri valoroase
se numete donator, iar cealalt, care este valoroas, dar este deficitar n privina nsuirilor
valoroase ale donatorului se numete recurent.
Metoda backcross const n ncruciarea repetat (5-6 ori) a hibridului din generaia F1
cu printele recurent. Amelioratorul va avea grij ca la fiecare ncruciare s foloseasc indivizii
asemntori fenotipic formei recurente, dar care au motenit de la donator, nsuirea ce urmeaz a
fi transferat. Schema de lucru care se aplic n cazul hibridrii de tip backcross este: (AxB)xB;
[(AxB)xB]xB etc, n care A este donatorul, iar B este recurentul.
Metoda backcross d rezultate bune la plantele autogame, mai ales cnd se urmrete
transmiterea rezistenei la boli, de la un donator ce posed gena pentru rezisten, la un recurent
valoros sub aspect agronomic, dar deficitar n privina rezistenei.
Folosind acelai printe recurent ncruciat cu mai multe forme donator pentru rezistena
la boli se pot obine mai multe linii izogenice asemntoare morfologic, dar diferite sub aspectul
genelor de rezisten la boli i duntori. Aceste linii se amestec, rezultnd un soi multilinial, cu
o rezisten orizontal sporit, cu o mai mare plasticitate ecologic.

Metoda backcross este eficient n cazul caracterelor determinate de un numr mic de

gene, cu aciune dominant, deci cu eritabilitate ridicat. Pentru transferul genelor recesive se
impune ca genele recesive s devin homozigote. Indivizii homozigoi recesivi pot fi apoi
identificai fenotipic.
La plantele alogame, de obicei heterozigote, la fiecare backcross trebuie folosit un
amestec de polen de la mai multe plante ale printelui recurent.
n cazul liniilor consangvinizate, care sunt homozigote, metoda backcross se aplic ca i
la plantele autogame, cu scopul de a le mbunti pentru transferul androsterilitii
citoplasmatice i a factorilor de restaurare ai fertilitii.
Metoda backcross, n cercetrile de genetic se aplic pentru analiza structurii genetice a
unui individ prin ncruciri cu printele recesiv (test-cross).
Hibridarea ciclic este o ncruciare succesiv a formelor ce urmeaz a fi folosite ca

genitori (A, B, C, D, ) cu o form a crei valoare genetic este cunoscut, denumit tester (T).
Hibrizii obinui, AxT, BxT, CxT etc se urmresc n culturi comparative pentru stabilirea valorii
agronomice a fiecruia. Formele ce reacioneaz ct mai bine n ncruciarea cu testerul au o
capacitate combinativ general bun i se rein ca forme parentale pentru urmtoarele hibridri.

Selecia liniilor consangvinizate dup capacitatea combinativ general se bazeaz pe existena

unei corelaii pozitive accentuate, ntre aceasta i capacitatea medie de combinare a unor linii n
viitorii hibrizi simpli.
Hibridarea dialel const n hibridarea fiecrei forme parentale dintr-un grup cu toate

formele incluse n grupul respectiv. Hibridarea dialel poate fi direct i reciproc. Dac ntr-un
grup sunt patru forme parentale A, B, C, D, hibridrile dialele directe vor fi: AxB, AxC, AxD,
BxC, BxD i CxD, iar cele reciproce, BxA, CxA, DxA, CxB, DxB i DxC.
Hibridarea dialel se folosete pentru selecia formelor parentale dup capacitatea
combinativ specific, care se reflect n valoarea maxim a produciei hibridului n generaia F1.

Dac, de exemplu, forma A a dat cea mai mare producie n hibridul AxD, spunem c forma A
manifest cea mai mare capacitate combinativ cu forma D.
Pentru realizarea hibrizilor simpli la plantele agricole, criteriul de baz n alegerea
formelor parentale l constituie capacitatea combinativ specific.
Hibridarea complex, const n ncrucirile la care particip mai multe forme

parentale, care permite obinerea unei populaii hibride ce ntrunete genele favorabile ale
prinilor.

La plantele autogame, hibridrile complexe se realizeaz n mai multe etape, ntre dou
sau mai multe soiuri cu origine hibrid, rezultnd soiuri cu origine hibrid complex.
La plantele alogame, hibridrile complexe se pot realiza prin urmtoarele metode:
hibridarea n mas (testul polycross), hibridarea dubl, hibridarea triliniar i hibridrile pentru
obinerea soiurilor sintetice.
Hibridarea n mas se folosete la gramineele perene, alogame, care se pot clona

(dintr-o tuf-plant se obin mai multe plante identice). ncruciarea mai multor genotipuri, n
culturi comparative, permit stabilirea genotipurilor cu cea mai mare capacitate combinativ
general, care vor compune viitorul soi.
Hibridrile duble, constau n ncruciarea a patru linii consangvinizate, componente a
doi hibrizi simpli: [(AxB)x(CxD)].
Hibridarea triliniar, presupune participarea a trei linii, respectiv un hibrid simplu i o
linie consangvinizat: (AxB)xC.
Un soi sintetic rezult n urma hibridrilor dintre mai multe linii parentale.

11.5. CONSANGVINIZAREA LA PLANTE

Consangvinizarea (lat. consanguineus - nrudit prin snge) const n autopolenizarea
forat, repetat, a plantelor alogame.
La plantele autogame autofecundarea este modul natural de reproducere, fiind lipsit de
efecte nocive asupra organismului, n timp ce plantele alogame autofecundate, prezint o serie de
anomalii (vitalitate sczut, caractere negative prin manifestarea unor gene recesive etc.).
n anii 1908-1909, geneticienii americani Shull i East au constatat efectele negative ale
consangvinizrii plantelor alogame. n urma ncrucirii a dou linii consangvinizate, ei au
descoperit fenomenul heterozis la hibrizii din generaia F1, ce se traduce printr-o vigoare sporit a
acestora fa de prini, fenomen exploatat azi la majoritatea plantelor alogame (porumb, floareasoarelui, secar, sfecl pentru zahr etc).
11.5.1. Efectele consangvinizrii

Consangvinizarea se manifest prin trei efecte principale: micorarea vitalitii plantelor,

reducerea variabilitii caracterelor i segregarea biotipurilor componente ale populaiei.

Micorarea vitalitii se manifest prin reducerea creterii i dezvoltrii plantelor

consangvinizate, prin reducerea taliei, a elementelor capacitii de producie, a unor nsuiri

fiziologice influenate mai puternic de factorii de mediu.
Reducerea vitalitii plantelor se manifest mai puternic n primele generaii de
consangvinizare, iar dup 5-6 generaii se menine constant, plantele ajungnd la un minimum de
consangvinizare.

Sub aspect genetic, depresia liniilor consangvinizate se datorete homozigotrii unui

numr mare de gene i n special a genelor recesive, care de obicei sunt responsabile de caractere
nefavorabile speciei. La plantele alogame, polenizarea strin asigur o stare permanent de
heterozigoie, selecia natural favoriznd combinaiile genice favorabile speciei.
Scderea variabilitii se manifest printr-o mare uniformitate fenotipic a indivizilor

unei linii consangvine, dup mai multe generaii de autofecundare.

Aceast uniformitate fenotipic este determinat de creterea gradului de homozigoie a
perechilor de gene alele. Calculele matematice demonstreaz c, dup 7-8 generaii de
autopolenizare, liniile sunt homozigote pentru majoritatea locilor i pot fi folosite n programele
de hibridare pentru obinerea heterozisului.
Segregarea

biotipurilor

componente

ale

populaiei

este

consecin

consangvinizrii de mare importan pentru lucrrile de ameliorare, deoarece permite izolarea

unor biotipuri homozigote valoroase.
Genotipurile separate pot fi homozigot recesive sau homozigot dominante. Marea
majoritate a genotipurilor homozigot recesive, determin caractere duntoare sau inferioare,
nct ele se elimin prin selecie. ntr-o mic proporie, unele gene recesive homozigote, pot avea
efecte favorabile (tulpin scurt, rezisten la cdere, rezisten la boli etc.), genotipurile
respective fiind reinute de ameliorator.
Genotipurile homozigot dominante sunt cele mai valoroase, deoarece caracterele lor se
transmit dominant la hibrizi.
Odat obinute, liniile consangvinizate se testeaz pentru a le determina capacitatea
combinativ general i specific, cu ajutorul seleciei recurente, dup care vor fi folosite n
producerea hibrizilor simpli, dubli, triliniari etc. capabili de o producie i calitate superioare.

11.6. MUTAIILE N AMELIORAREA PLANTELOR

11.6.1. Definiie i clasificare

Prin mutaie se nelege o schimbare detectabil i ereditar, care afecteaz constituia

chimic sau fizic a materialului genetic, o alterare a mesajului genetic al ADN, care poate avea
loc prin adiia, deleia, substituia sau inversia nucleotidelor sau prin transferul lor n alte poziii i
care nu se datorete recombinrii genetice intra i extracromozomice (Herskovitz, 1965).
n capitolul 7 s-a prezentat clasificarea mutaiilor, factorii mutageni i mecanismul
molecular al mutaiilor, nct n acest capitol vom prezenta aspecte legate de selecia mutantelor
i folosirea lor n ameliorarea plantelor.
11.6.2. Selecia mutantelor

La plantele cu reproducere sexuat, apariia mutaiilor la nivelul esuturilor de

reproducere sau chiar la nivelul gameilor, constituie o mare ans ca ele s se transmit ereditar
i s fie detectate.
n urma tratamentelor cu ageni mutageni (fizici, chimici sau biologici) se realizeaz o
anumit variabilitate genotipic, care poate fi exploatat.
n anul 1954, N. Nyborn (dup Gologan, I., 1981) elaboreaz metoda de selecie a
mutantelor, introducnd o serie de simboluri care au devenit universale n literatura de
specialitate.
n cazul n care se acioneaz cu mutageni asupra seminei, aceasta se simbolizeaz cu
M0 sau X0 (notaia vine de la radiaiile X). Plantele rezultate din smna iradiat, vor fi generaia
M1 (X1), descendenele acesteia se vor nota cu M2 (X2), M3 (X3) etc. Cnd se iradiaz plantele,
acestea se noteaz cu X1, iar descendenele succesive cu X2, X3, Xn.
Smna tratat cu ageni mutageni, notat cu M0 (X0) se seamn n cmpul de
experien, la distane mai mari, pentru a putea urmri individual, plantele.
In anul I, plantele din generaia M1 (X1) sunt heterozigote n cazul mutaiilor induse.
Modificrile morfo-fiziologice din aceast generaie, denumite radiomorfoze, de obicei nu se
transmit ereditar.
Seminele fiecrei plante M1 (X1) se recolteaz separat, iar n anul II se nsmneaz
separat, rezultnd generaia M2 (X2). n acest an o parte din mutaiile recesive se pot homozigota,
iar dac sunt valoroase se vor reine. n anii urmtori, frecvena mutantelor homozigote se
mrete, astfel c, se continu selecia pentru a reine mutantele valoroase.

n procesul de mutagenez, trebuie avut n vedere urmtorul aspect: mutaiile folositoare

apar cu o frecven redus, motiv pentru care, selecia trebuie s se fac ntr-un material ct mai
numeros.
11.6.3. Utilizarea mutaiilor n ameliorare

Mutaiile pot fi utilizate n ameliorare n trei moduri: ca soiuri noi, ca material iniial de
ameliorare i n diferite tehnici de ameliorare.
Cel mai eficient mod de utilizare a mutaiilor este pentru obinerea de noi soiuri, atunci
cnd sunt valoroase sub aspectul capacitii de producie, al calitii i rezistenei la factorii de
mediu.
Ca material iniial, mutaiile pot fi folosite n hibridri: hibridarea a dou mutante,
hibridarea ntre un soi normal i o mutant.
Mutaiile pot fi folosite i n unele tehnici de ameliorare, pentru realizarea unor obiective
speciale: corectarea unor nsuiri negative a unor soiuri, mrirea variabilitii n cadrul unor
populaii hibride, ruperea unor corelaii negative nedorite, mrirea coninutului n proteine,
mrirea rezistenei la boli i duntori sau la ali factori de mediu.

11.7.POLIPLOIDIA (MUTAIILE DE GENOM)

11.7.1. Definiie i clasificare

Numrul de cromozomi din celulele somatice (2n) i din celulele sexuale (n) este
constant pentru fiecare specie n parte.
n cadrul unui gen, pot exista specii care n celulele somatice prezint un multiplu al
unui anumit numr de baz de cromozomi. Numrul de cromozomi din gameii strmoului
diploid comun al speciilor poliploide se numete numr de cromozomi de baz i se noteaz cu
"x". Numrul de cromozomi din gamei, notat cu "n" se numete genom, i poate fi egal cu "x",
sau poate fi un multiplu al acestuia.
Poliploidia este o multiplicare a numrului de cromozomi de baz sau a numrului de
genomuri, fiind considerat o mutaie de genom.
Poliploidia, ca variaie numeric a cromozomilor poate fi clasificat, dup mai multe
criterii:

1. Dup gradul de multiplicare a numrului de genomuri (x), organismele pot fi:

triploide (3x), tetraploide (4x), pentaploide (5x), hexaploide (6x) etc. Poliploizii cu un numr

par de genomuri (2x, 4x, 6x etc.) sunt numii artioploizi, iar cei cu un numr impar (3x, 5x, 7x
etc.), perisoploizi.
2. n funcie de originea garniturilor cromozomice, organismele pot fi: autopoliploide,
cnd multiplicarea se realizeaz pe baza unui genom propriu i alopoliploide, cnd multiplicarea
se realizeaz n urma hibridrilor intra sau interspecifice. Organismele care nglobeaz
genomurile a dou sau mai multe specii, urmat de dublarea numrului de cromozomi se numesc
amfiploizi.

Poliploidia este nsoit de multiplicarea cantitii de ADN/nucleu, n timp ce

pseudopoliploidia este o multiplicare a numrului de genomuri, dar cantitatea de ADN rmne

neschimbat.
Unele organisme eucariote pot avea n nucleul celulelor somatice un set haploid de
cromozomi, fenomen denumit monoploidie sau haploidie. Aceste forme sunt de obicei sterile. n
cazul n care provin de la forme tetraploide (2n=4x), se numesc dihaploizi, sau dac gradul de
poliploidie este mai ridicat se numesc polihaploizi.
3. Exist organisme la care, la numrul cromozomilor din celulele somatice, exist unul
sau mai muli cromozomi n plus sau lipsesc unul sau mai muli cromozomi, forme denumite
aneuploide.

Aneuploizii de tipul 2n+1 (trisomie), 2n+2 (tetrasomie) sunt forme hiperploide, iar cei
de tipul 2n-1 (monosomie), 2n-2 (nulisomie) sunt forme hipoploide.
4. n funcie de modul de apariie, poliploizii pot fi naturali sau artificiali. Apariia
poliploizilor naturali este determinat de o serie de cauze (Serra, A. I., 1968):
- Endomitoza - pe parcursul acesteia nu se formeaz fusul de diviziune, membrana
nuclear nu se fragmenteaz, nucleul diploid devine 4n, 8n etc.
- Mitoze anormale, n care, dei membrana nuclear se dezintegreaz, nu se formeaz
fusul nuclear, iar dup clivarea longitudinal a cromozomilor n anafaz cromozomii nu se separ
n cei doi nuclei fii, i deci se reface un singur nucleu, nucleul de restituie, cu un numr dublu
(multiplu) de cromozomi.
- Meioze anormale, cnd nu are loc reducerea la jumtate a numrului de cromozomi n
celulele sexuale (gamei).
11.7.2. Obinerea poliploizilor

Poliploizii naturali exist n cadrul unor genuri cu o frecven destul de mare, mai ales n
zonele geografice cu condiii extreme de via: deerturi, altitudini mari, regiuni nordice. Dup
identificarea, descrierea i cultivarea poliploizilor naturali s-a constatat c acetia au o valoare
economic ridicat: cantitate mai mare de biomas, coninut mai mare de proteine, lipide,
zaharuri, o mai mare plasticitate ecologic.
Pentru inducerea artificial a poliploidiei s-au experimentat un numr mare de metode:
fizice (radiaiile, centrifugarea, ocurile termice), chimice (tratarea cu substane chimice ce inhib
formarea fusului nuclear) i biologice (regenerare, hibridrile sexuate interspecifice, hibridrile
somatice).
n prezent, se apreciaz drept cea mai eficient metod chimic folosirea substanelor de
tipul colchicinei, -bromonaftalenului, gamexanului, chinoleinei, care blocheaz fusul de
diviziune i duce la multiplicarea numrului de genomuri.
Colchicina, alcaloid extras din Colchicum autumnale (brndua de toamn) a fost
experimentat pe un numr mare de specii vegetale, n diferite concentraii (0,01-0,5%). Aplicat
asupra esuturilor meristematice sau celor de reproducere a stat la baza obinerii a numeroase
forme autopoliploide (secar, sfecl pentru zahr) sau la dublarea numrului de cromozomi la
hibrizii interspecifici pentru realizarea amfiploizilor.
Metoda regenerrii, destul de uor de aplicat, const n secionarea zonei de calusare a
altoiului cu portaltoiul din unele celule lezate putnd apare esuturi i organe poliploide.
O atenie deosebit se acord obinerii de forme haploide, care, n urma dublrii
numrului de cromozomi, constituie modalitatea obinerii unor linii complet homozigote (linii
izogenice), care pot fi folosite n diverse programe de hibridare.
11.7.3. Folosirea mutaiilor de genom n ameliorare

n funcie de tipul de poliploidie, formele respective pot fi folosite difereniat.

Utilizarea direct n producie a tetraploizilor, sub form de soiuri noi este mai restrns,
fiind ntlnit numai la secar i trifoi. La secar, soiurile tetraploide prezint o mas a 1000 de
boabe mult superioar formelor diploide, dar un numr redus de boabe n spice.
Poliploizii sunt implicai ntr-un proces de hibridare, fie pentru realizarea triploizilor, fie
a amfidiploizilor.
Cea mai frecvent utilizare dat n prezent poliploizilor este n crearea formelor
triploide. Triploizii sunt sterili i ca atare sunt folosii n practic numai la plantele la care
produsul principal urmrit nu este smna (ex. la sfecla pentru zahr, pepeni verzi etc).

Tot printr-un procedeu de hibridare se realizeaz mbinarea genomurilor de la specii

diferite n amfidiploizi utili pentru practica agricol. Aa este cazul formei triticale, hibrid
ndeprtat ntre gru i secar, a crui fertilitate se realizeaz prin dublarea numrului de
cromozomi.
Formele haploide au o larg utilizare n studiile de genetic i ameliorarea plantelor. Ele
sunt folosite pentru studiul mutaiilor de gene i a omologiei dintre cromozomi. Liniile strict
homozigote se obin prin haploidie n 2-3 ani, pe cnd realizarea homozigoiei prin
consangvinizare dureaz 6-8 ani. Liniile dublu haploide, care manifest o capacitate combinativ
ridicat sunt utilizate pentru obinerea diferitelor tipuri de hibrizi pentru producie.
Formele aneuploide prezint pentru genetic i ameliorare un interes deosebit, deoarece
permit precizarea rolului genetic al cromozomilor i localizarea genelor pe cromozomi. Absena
sau schimbarea anumitor caractere la formele nulisomice demonstreaz, n mod evident, c
genele care condiioneaz caracterele respective sunt situate pe cromozomii care lipsesc.
n aceast direcie au fost fcute lucrri interesante la gru de ctre Sears (1953), care a
obinut seria complet de 21 de nulisomici i de 21 de monosomici la soiul Chinese Spring. Pe
baza analizei nulisomilor, Sears a precizat rolul genetic al fiecrui cromozom n transmiterea
caracterelor i nsuirilor.

11.8. Metode moderne utilizate n ameliorarea plantelor

n afara metodelor considerate clasice pentru provocarea unei variabiliti genotipice
pronunate - hibridare, consangvinizare, mutaii de gene i de genom - atenia specialitilor a fost
concentrat n ultimul timp spre alte posibiliti de creare a unor forme biologice noi. Ingineria
genetic, utilizat n acest scop, cuprinde totalitatea metodelor de manipulare genetic, fr
participarea proceselor sexuale, prin care se realizeaz organisme cu combinaii noi de caractere
ereditare.
Sfera de activitate a ingineriei genetice cuprinde domeniul celular, care include cultura
organismelor haploide i hibridarea direct a celulelor somatice i domeniul molecular, care se
ocup cu manipularea ADN.
Practicat la nivel celular, ingineria genetic cuprinde, ca prim etap, culturile de celule
i de esuturi "in vitro" i ca a doua etap - fuziunea protoplatilor i hibridarea somatic
(parasexuat).

Prin cultura de celule i esuturi se contureaz unele posibiliti practice de mare

perspectiv pentru ameliorarea plantelor, cum ar fi nmulirea i producerea materialului liber de
viroze, utilizarea haploizilor din culturile de antere i de polen, selecia de mutante rezistente la
boli sau la diferite condiii de stres (clone celulare rezistente la temperaturi ridicate, la erbicide, la
substane poluante, la concentraii ridicate de sruri etc.), izolarea i selecia mutantelor cu
coninut ridicat de aminoacizi, perfecionarea metodologiei de ameliorare a plantelor (cultura
embrionilor hibrizi neviabili, polenizarea i fecundarea "in vitro", testarea rezistenei la boli la
nivel celular etc.).
Fuziunea protoplatilor deschide perspectiva realizrii hibrizilor somatici interspecifici
i intergenerici, care vor contribui considerabil la diversificarea genetic.
Protoplatii reprezint celule la care pereii celulari au fost ndeprtai prin metode
mecanice sau enzimatice. n cazul cultivrii pe medii speciale, protoplatii au capacitatea de a
regenera plante ntregi sau de a fuziona, pentru a forma hibrizi somatici, interspecifici. De
asemenea, protoplatii au posibilitatea de a absorbi organite i material genetic, care s determine
schimbri importante n genotipul plantelor cultivate.
Se estimeaz c ameliorarea plantelor va beneficia, de pe urma culturii i fuziunii
protoplatilor, de unele realizri deosebit de importante, cum ar fi:
- creterea variabilitii genetice necesare programelor de ameliorare;
- inducerea rezistenei la boli prin ncorporarea unui genom de la o plant rezistent ntrun protoplast sensibil;
- transplantarea cloroplastelor strine n plantele cu sistem fotosintetic deficitar;
- regenerarea de "cibrizi" (hibrizi citoplasmatici) prin fuziunea protoplatilor de la plante
nenrudite sau incompatibile sexual;
- introducerea de plasmide, alge albastre-verzi, bacterii fixatoare de azot etc. n speciile
neleguminoase, ndeosebi la cereale, pentru intensificarea sintezei proteinelor.
Utilizarea protoplatilor izolai n studiile de fiziologie, biochimie i genetic va permite
dezvoltarea, la nivel superior, a cercetrilor fundamentale i aplicate din domeniul ameliorrii
plantelor.

BIBLIOGRAFIE SELECTIV
1. ANTOHI, ST., GAVRIL, L., 1981 - Progrese n genetica molecular, Edit. tiinif. i
encicloped., Bucureti.
2. BUTNARU, GALLIA, 1985 - Genetic, vol. I i II, Lito, Inst. Agr. Timioara.
3. COLES, N., 1974 - Genetica, Lito, Universitatea Craiova.
4. CRCIUN, T., 1970 - Genetica, Ed. Did. i Ped., Bucureti.
5. CRCIUN, T., PTRACU, MINODORA, 1978 - Mecanismele ereditii.
6. CRCIUN, T., 1981 - Genetica plantelor horticole, Edit. Ceres, Bucureti.
7. CRCIUN, T:, TOMOZEI, I., COLES, N., BUTNARU, GALLIA, 1991 - Genetica, Ed. Did.
i Ped., Bucureti.
8. CRLAN, M., 1996 - Elemente de genetic animal normal, Edit. Polirom, Iai.
9. DIACONU, P., 1971 - Ereditatea i factorii mutageni, Edit. Ceres, Bucureti.
10. DRACEA, I., 1972 - Genetica, Edit. Did. i Pedag., Bucureti.
11. DRACEA, I., 1973 - Genetica, Edit. Did. i Pedag., Bucureti.
12. GAVRIL, L., DABALA, I., 1975 - Genetica diviziunii celulare, Edit. Dacia, Cluj-Napoca.
13. GAVRIL, L., DABALA, I., 1981 - Descifrnd tainele ereditii, Edit. Dacia, Cluj-Napoca.
14. LINTS, F., 1991 - Genetique 3, Office International de Librairie, Bruxelles, Technique et
Documentation, Paris.
15. MAXIMILIAN, C., IOAN, DOINA MARIA, 1984 - Dicionar enciclopedic de genetic. Edit.
tiinif. i encicloped., Bucureti.
16. MENDEL, GR., 1945 - Experiene asupra hibrizilor de plante. Buletinul cultivrii i
fermentrii tutunului nr. 3-4.
17. PANFIL, C., 1974 - Genetica, Edit. Did. i Pedag., Bucureti.
18. RAICU, P., 1980 - Genetica, Edit. Did. i Pedag., Bucureti.
19. TOMA, C., NI, MIHAELA, 1995 - Celula vegetal, Edit. Universitii "Al. I. Cuza", Iai.
20. RDEA, GH., 1996 - Genetica, Lito, USAMV, Iai.
21. WATSON, J.D., CRICK, F.H.C., 1953, - The structure of DNA, Cold Spring Harbor Symp.,
Quant. Biol., 18.
22. WATSON, J.D., 1974 - Biologia molecular a genei, Edit. tiinif., Bucureti.
23. WILKINS, M.H.F., 1961 - The molecular structure of DNA, J. Chim. Phys. 58.
24. WILKINS, M.H.F., 1963 - Molecular configuration of nucleic acids. Science, 140.
25. ZOLYNEAC, C.C., 1982 - Genetica i ameliorarea plantelor i animalelor. Partea I. Xerox,
Univ. "Al. I. Cuza", Iai.