Ctedra de Bioqumica

Facultad de Medicina
UNNE

Dra. Mara Victoria Aguirre

Prof. Titular Ctedra de Bioqumica
Dr. Juan Pablo Rodrguez
Prof. Libre Ctedra de Bioqumica
Dra. Mnica Pantanali
JTP Ctedra de Bioqumica
Dr- Jos Alerich
JTP Ctedra de Bioqumica

Las respuestas inmunitarias adaptativas

comienzan por el reconocimiento especifico de

antgenos por los linfocitos. En este apunte se
exponen las bases celulares y moleculares del
reconocimiento de los antgenos y las especificidades
de los linfocitos B y T.

Se hace especial hincapi en estos aspectos

dado que estos principios constituyen actualmente las
bases farmacolgicas de los tratamientos con clulas
inmunocompetentes, hacia donde tienen la
investigacin actual en biomedicina experimental.

Auxiliares Alumnos Docentes:

Srita. Julieta Pizzorno
Srita. Mayra Rossberg
Sr. Santiago Toledo

Sistema del complemento

El sistema de complemento es uno de los principales mecanismos efectores de la
inmunidad humoral y tambin un importante mecanismo efector de la inmunidad innata.
El sistema de complemento consta de protenas sricas y de superficie celular que
interactan entre ellas y con otras molculas del sistema inmunitario de una forma
sumamente regulada.
Las protenas del complemento son protenas plasmticas que normalmente estn
inactivas; slo de activan en determinadas circunstancias para generar productos que
intervienen en varias funciones efectoras del complemento.
La activacin del complemento, sus molculas se unen de forma covalente a la
superficie de las clulas microbianas o a los anticuerpos fijados a los microorganismos y
otros antgenos.
La inhibicin del complemento se produce mediante protenas reguladoras que estn
presentes en las clulas normales del husped y ausentes en las clulas de los
microorganismos .
Importancia: muchas reacciones de Ag-Ac dejaran de cumplir su funcin de defensa si
no contaran con la participacin del complemento. Su accin se ejerce: 1) a travs de
los Acs que han reaccionado con el Ag. 2) por medio de los receptores que para algunos
de sus factores activados poseen varias de las clulas del sistema inmune. 3) por
mecanismos fsicoquimicos, no muy claros, que permiten por la via alterna cumplir una
funcin de defensa no especifica, sin la participacin de Acs.
PRODUCCION DE LOS FACTORES DEL COMPLEMENTO:
Los factores C3, C6 Y C9, el inhibidor de C1, as como el properdin y el factor B de la via
alterna, se producen en el hgado. El bazo produce el C6 y el C8. Los macrfagos el C4 y
el C2. El C1 es producido por las clulas epiteliales del intestino. Los genes presentes en
el cromosoma 6 controlan la produccin de varios factores.

FUNCIONES Y CARACTERISTICAS:
Las funciones efectoras principales del sistema del complemento en la
inmunidad innata y humoral especfica consisten en estimular la fagocitosis
de los microorganismos sobre los que se activa el complemento, estimular la
inflamacin e inducir la lisis de estos microorganismos. Adems, los productos
de la activacin del complemento actan como seales secundarias para la activacin de
los linfocitos B y la sntesis de anticuerpos. La fagocitosis, la inflamacin y la
estimulacin de la inmunidad humoral estn mediadas por la unin de fragmentos de la
lisis de protenas del complemento a varios receptores de la superficie celular, mientras
que la lisis celular est mediada por el Complejo de Ataque a la Membrana (CAM). A
continuacin describiremos cada una de las funciones del sistema del complemento y su
importancia en la defensa del husped.

Opsonizacion y fagocitocitosis:
Los microorganismos sobre los cuales se activa el complemento por las vas
alternativa o clsica se hallan recubiertos de C3b, iC3b o C4b y son
fagocitados por la unin de estas protenas a receptores especficos para el
complemento que se encuentran en los macrfagos y los neutrfilos. Sabemos
que la activacin tanto de la va alternativa como de la clsica conduce a la generacin
de C3b e iC3b que se unen mediante enlaces covalentes a las superficies de las clulas.
C3b e iC3b actan como opsoninas debido a que se unen especficamente a receptores
del complemento (CR) en la membranade los neutrfilos y los macrfagos. C3b y C4b
(este ltimo generado slo por la va clsica) se unen a CR1, mientras que iC3b se fija a
CR3 y CR4.
Por s solo, CR1 no induce la fagocitosis de los microorganismos recubiertos de C3b,
pero su capacidad aumenta cuando los microbios estn recubiertos de anticuerpo IgG
que se unen simultneamente a receptores Fc (Receptores para la fraccin constate de
las IgGs). La activacin de los macrfagos por la citosina IFN- tambin potencia la
fagocitosis mediada por CR1.
La fagocitosis de los microorganismos depediente de C3b e iC3b es un mecanismo de
defensa importante frente a las infecciones en la inmunidad innata y adaptativa. Los
seres humanos y los ratones con deficiencia de C3 son extremadamente susceptibles a
las infecciones bacterianas mortales.

Anafilotoxicas: Las fracciones C5a, C4a y C3a inducen la inflamacin aguda mediante
la activacin de mastocitos y neutrfilo. Se denominan tambin anafilotoxinas, debido a
que se unen a los mastocitos e inducen la degranulacin de mediadores vasoactivos
como la histamina y producen contractura de los msculos lisos. C5a es el mediador ms
potente de la desgranulacin de los mastocitos, sin embargo tambin puede actuar
directamente sobre las clulas endoteliales vasculares y provocar un aumento de la
permeabilidad vascular.

Adherencia inmunolgica: La presencia de receptores para C3b, a nivel de

eritrocitos, leucocitos, macrfagos y linfocitos B, promueve lo que se denomina
adherencia inmunolgica que cumple las siguientes funciones:
1. Aumenta la fagocitosis si las molculas de C3b se unen a los receptores
presentes en los neutrfilos y macrfagos.
2. Induce la degranulacin externa de los granulocitos, si el antgeno cubierto con
las molculas de C3b no puede ser fagocitados. La liberacin de las enzimas de
los neutrfilos se hace con el fin de destruir el antgeno, pero
concomitantemente incrementa la respuesta inflamatoria y produce dao
tisular.
3. Se cree que juega un papel importante en la trasformacin de los monocitos en
macrfagos.

Quimiotaxis: La fraccin C5a tiene una potente actividad quimiotctica sobre

neutrfilos, eosinfilos y monocitos, y el complejo C567 ejerce una fuerte accin
quimiotctica para los neutrfilos.

Citolisis:La lisis mediada por complemento de los organismos extraos est mediada
por el CAM. La mayora de los patgenos ha evolucionado hasta presentar paredes
celulares o cpsulas gruesas que impiden el acceso del CAM hasta sus membranas
celulares. La lisis mediada por complemento parece ser crtica para la defensa contra
slo algunos patgenos incapaces de resistir la insercin del CAM. Por lo tanto los
defectos gnicos de los componentes del CAM dan lugar a un aumento de la sensibilidad
slo a infecciones por bacterias del gnero Neisseriatodas las cuales tienen paredes
celulares muy delgadas

FUNCIONES DE LAS MOLECULAS C4a,C2b, C3a, C5a

Estas se desprenden del factor correspondiente durante el proceso de activacin y
cumplen funciones especficas.
El C4a. tiene accin quimiotctica, pero de muy baja potencia en relacin a C3a y C5a.
El C2b. Da origen al C2 quinina, molcula que incrementa la permeabilidad capilar de
intensidad similar a la histamina pero sin sus otras funciones.
El C3a y el C5a: son quimiotacticos, atraen leucocitos y anafilotoxicos por excelencia,
especialmente el C5a. Inducen la contraccin de la musculatura lisa.
El C5a es de 10 a 20 veces ms activa que el C3a. El C5a es el ms potente
quimiotctico, activa los neutrfilos activando su metabolismo, induce produccin de
leucotrieno B4, induce la degranulacin de los mastocitos adems de producir
contractura de los msculos lisos.
VIAS DE ACTIVACION DEL COMPLEMENTO
Existen tres vas principales de activacin del complemento:

La va clsica: se inicia por ciertos isotipos de anticuerpos unidos a los

antgenos.
La va alternativa: se activa sobre las superficies de las clulas microbianas
sin los anticuerpos.
La va de la lectina: se activa por una lectina plasmtica que se une a
manosas sobre los microorganismos.

Aunque las vas de activacin difieren en cmo se inician, todas desencadenan la

generacin de los complejos enzimticos que son capaces de escindir a la protena ms
abundante del complemento, C3.
La va alternativa como as tambin la va de la lectina son mecanismos efectores de la
inmunidad innata, a diferencia de la vida clsica que es un mecanismo de la inmunidad
humoral.
El acontecimiento central en la activacin del complemento es la protelisis de la
protena del complemento C3 para generar productos biolgicamente activos y la
posterior unin covalente de un producto de C3, denominado C3b, a las superficies de
las clulas microbianas o a los anticuerpos unidos a antgenos. La activacin del
complemento depende de la generacin de dos complejos proteolticos, la C3convertasa, que escinde C3 en dos fragmentos proteolticos, que son C3a y C3b, y la
C5-convertasa que escinde a C5 en C5a y C5b.
Los pasos iniciales de la activacin del complemento generan dos productos
proteolticos de C3, denominados C3a Y C3b. Este ltimo se une covalentemente a la
superficie de la clula microbiana o a las molculas de anticuerpos. Las funciones
biolgicas del complemento dependen de esta escisin, por ejemplo, la activacin del
complemento estimula la fagocitosis porque los leucocitos expresan receptores para
C3b.
VIA ALTERNATIVA

Esta va da lugar a la
protelisis de C3 y la unin
estable de su producto de
degradacin, CBb, a las
superficies microbianas, sin
participacin
de
los
anticuerpos.
C3 contiene un enlace
tioster reactivo oculto en el
dominio tioster. Cuando C3
es escindido, la protena
C3b
cambia
de
conformacin
exponiendo
de esta manera el enlace
tioster previamente oculto.
Normalmente C3 se escinde
en el plasma en forma
constante, para generar
C3b en un proceso que se
llama activacin basal de

C3. Una pequea proporcin de C3b se une de forma covalente a la superficie de las
clulas.
Un enlace tioster interno de C3 se vuelve inestable cuando se escinde la molcula y
reacciona con los grupos amino o hidroxilo de las protenas o polisacridos de la clula
para formar enlaces amida o ster. Si no se forman estos enlaces, C3b permanece en
fase liquida, hidrolizndose su enlace tioster, lo cual la inactiva.
Al experimentar C3b el cambio conformacional, queda expuesto un sitio de unin para
el FACTOR B (protena plasmtica), que ahora se encuentra anclada a superficie de la
membrana de la clula microbiana o del husped. El FACTOR B, posteriormente, es
escindido por una proteasa de serinaplasmtica denominada FACTOR D, liberando un
fragmento pequeo llamado Ba y un fragmento de mayor tamao Bb que
permanece unido a C3b.

El complejo C3bBb es la convertasa de la va alternativa y su funcin es escindir

ms molculas de C3, consiguiendo as una amplificacin secuencial.
La activacin estable de la va alternativa ocurre sobre las superficies de las
clulas microbianas y NO sobre las clulas de los mamferos.
Si el complejo C3bBb se forma sobre las clulas de mamferos, se degrada
rpidamente gracias a la accin de protenas reguladoras. La falta de estas
protenas en las clulas microbianas permite la unin y activacin del complejo.
La protena PROPERDINA (nico regulador positivo del complemento), puede
unirse a C3bBb y estabilizarlo. Esta unin esta favorecida sobre todo en las
clulas microbianas.
Algunas molculas C3b generadas por esta va, se unen a la propia convertasa, dando
lugar a la formacin del complejo C3bBb3b que acta como C5-convertasa de
la va alternativa.

VIA CLASICA:
Se activa por ciertos isotipos de anticuerpos unidos a los antgenos.
Se inicia mediante la unin de la protena del complemento C1 al dominio CH2 de la
IgG o CH3 de las IgM,que anteriormente se han unido a un antgeno.
De los diferentes tipos y subtipos de Ig: las IgG, IgG3 eIgG1 (en seres humanos) son
los activadores ms eficientes del complemento.
C1 es un complejo multimrico protenico grande que est compuesto de las
subunidades C1q, C1r,C1s; C1q de une a los anticuerpos, C1r y C1s son
proteasas. C1 le da especificidad a la va clsica.

La subunidad C1q est constituida por seis protenas dispuestas en forma radial como
un paraguas. Este hexmero realiza la funcin de reconocimiento de la porcin fc de
las cadenas pesada mu (IgM) y algunas a la gamma (IgG). Cada regin Fc tiene un
nico sitio de unin a C1q y cada molcula de C1q debe unirse a dos cadenas pesadas
de inmunoglobulina para activarse.
Cada molcula de IgG solo tiene una regin Fc, por lo que deben acercarse mltiples
IgG, para que se pueda unir Cq1, y mltiples IgG quedan agrupados nicamente
cuando se acercan a un antgeno multivalente.
En cambio las IgM libre (circulante) es pentamerica, no se puede unir a C1q porque
sus regiones Fc son inaccesibles para C1q. La interaccin de IgM a un antgeno
produce un cambio conformacional que expone los sitios de unin a C1q de las
regiones Fc. Por se pentamrica una sola molcula de IgM (tambin denominada
fijacin del complemento) puede unirse a dos de C1q, es por esto que la IgM se la
considera ms eficiente que una IgG.
C1r y C1s: son serin-estearasas que forman
un tetrmero. La unin de de dos o mas C1q a
las regiones Fc de una IgG o IgM provoca una
activacin enzimtica del C1r asociado, que a
su vez escinde y activa a C1s. C1s activado
escinde la siguiente protena de la cascada, C4,
generando C4b un compuesto inestable (se
libera C4a que ms pequeo con funciones
anafilotoxicas). C4b tiene un enlace tioster
interno, que forma uniones covalente amida o
ster con los complejos antgenos-anticuerpo o
con la superficie de una clula que se ha unido
a un anticuerpo. Esta unin de C4b asegura
que la activacin de la va clsica tenga lugar
sobre una superficie clulas o a un
inmunocomplejo.

La
siguiente
protena
del
complemento
es,
C2,
forma
entonces un complejo con C4b que
anteriormente se haba unido a la
superficie celular, C2 unida a C4b es
un sustrato para C1s la cual la
escinde en el fragmento de C2a
soluble y un fragmento C2b ms
grande que permanece asociado
fsicamente a C4b sobre la
superficie celular. Formando as el
complejo
C3-convertasa
(C4bC2b) de la va clsica, este
complejo se une a C3 y lo escinde
por protelisis, generando C3a que
se libera y C3b que se une a la
superficie celular formando el
Complejo
C5
convertasa
(C4bC2bC3b) de la va clsica.

VIA DE LA LECTINA
Esta va se desencadena sin anticuerpos por la unin de polisacridos microbianos a
lectinas circulantes, como la lectina fijadora de manosa (MBL) plasmtica, o a las
lectinas que reconocen la N-acetilglucosamina conocida como ficolinas.
Estructuralmente son similares a C1q.
MBL se une a residuos de manosa de los polisacridos y tambin se une a proteasas de
serina asociadas a MBL (MASP) como MASP-1, MASP-2 y MASP-3. Estas dos ltimas
forman un complejo tetramrico que escinde C4 y C2. Los fenmenos siguientes son
idnticos a los que se producen en la va clsica.

PASOS FINALES DE LA ACTIVACIN DEL COMPLEMENTO

Las convertasas generadas por las vas inician la activacin de los componentes finales,
que culminan en la formacin del complejo de ataque a la membrana (CAM).
Las C5-connvertasas escinden a C5 en C5a que es liberado y C5b de dos cadenas que
permanece unido a las protenas del complemento sobre la superficie celular. C6, C7,
C8 y C9 son protenas relacionadas estructuralmente pero sin actividad enzimtica.
C5b se une a C6 Y C7, este ltimo es higrfobo y se inserta en la bicapa lipdica de la
membrana, donde se convierte en un receptor de alta afinidad para la molcula C8,
formndose de esta manera el complejo C5bC6C7C8, el cual tiene capacidad limitada
para lisar clulas.
La formacin del CAM activo se alcanza tras la unin de C9, que es una
protena srica que se polimeriza en la zona C5b-C8 para formar poros en las
membranas plasmticas. Estos poros constituyen canales que permiten el movimiento
del agua e iones, lo que dar lugar a una hinchazn osmtica y rotura de las clulas en
cuya superficie se ha depositado el CAM.

FUNCIONES DEL COMPLEMENTO

En resmen sas funciones biolgicas del sistema del complemento consisten en la
opsonizacin de los microorganismos e inmunocomplejos mediante fragmentos proteolticos de C3, seguido de la unin a receptores fagocticos de fragmentos del
complemento y la fagocitosis, la activacin de las clulas inflamatorias mediante
fragmentos proteolticos de las protenas del complemento denominados anafilotoxinas
(C3a, C4a, C5a), la citlisis mediada por la formacin de CAM en las superficies de las
clulas, la solubilizacin y eliminacin de los inmunocomplejos y la potenciacin de las
respuestas inmunitarias humorales.