Ctedra de Bioqumica

Facultad de Medicina
UNNE

Dra. Mara Victoria Aguirre

Prof. Titular Ctedra de Bioqumica
Dr. Juan Pablo Rodrguez
Prof. Libre Ctedra de Bioqumica
Dra. Mnica Pantanali
JTP Ctedra de Bioqumica
Dr- Jos Alerich
JTP Ctedra de Bioqumica

Las respuestas inmunitarias adaptativas

comienzan por el reconocimiento especifico de

antgenos por los linfocitos. En este apunte se
exponen las bases celulares y moleculares del
reconocimiento de los antgenos y las especificidades
de los linfocitos B y T.

Se hace especial hincapi en estos aspectos

dado que estos principios constituyen actualmente las
bases farmacolgicas de los tratamientos con clulas
inmunocompetentes, hacia donde tienen la

investigacin actual en biomedicina experimental.

Auxiliares Alumnos Docentes:
Srita. Julieta Pizzorno
Srita. Mayra Rossberg

Sr. Santiago Toledo

ndice de Contenidos
A. Introduccin ........................................................................................................... 2
Vnculos entre la inmunidad Innata y Adaptativa ................................................................ 2

B. Reconocimiento, procesamiento y presentacin del antgeno ................................ 3

1. Reconocimiento: ............................................................................................................. 3
1.1. Reconocimiento de antgenos por los linfocitos B: ........................................................ 5
1.2. Reconocimiento de antgenos por los linfocitos T: ........................................................ 5
2. VAS DE PROCESAMIENTO DEL ANTGENO ...................................................................... 6
2.1. COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD (MHC), sistema HLA: .......................... 7
2.2. Las vas de procesamiento del antgeno incluye diferentes vas: ................................. 10
Va de clase I ..................................................................................................................... 10
Va de clase II .................................................................................................................... 10
Va cruzada: ...................................................................................................................... 12
2.3. Estructura y propiedades de las molculas del MHC ................................................... 13

C. LINFOCITOS T ........................................................................................................ 16
1. Linfocitos T CD4+: ......................................................................................................... 16
2. Linfocitos T CD8+ .......................................................................................................... 18
3. Complejo Receptor del linfocito T (TCR): ....................................................................... 19
3.1. Molculas accesorias en Linfocitos .............................................................................. 21
3.2. Acontecimientos intracelulares en la activacin de la clula T .................................... 23

D. LINFOCITOS B ....................................................................................................... 24
1. Ontogenia ................................................................................................................. 24
2. Estructura de las inmunoglobulinas: Sntesis y diversidad ............................................. 26
2.1. Genes de las inmunoglobulinas. Organizacin y reordenamiento somtico ............... 28
2.2. Funcin de las inmunoglobulinas: actividad anticuerpo y funciones efectoras. .......... 30

A. Introduccin

En el apunte anterior se dio una visin general del Sistema inmune innato y el
adaptativo. En esta segundo apunte se describir brevemente, como se vinculan ambos
sistemas y como se modulan mutuamente.

Vnculos entre la inmunidad Innata y Adaptativa

Las respuestas inmunitarias adaptativas comienzan por el reconocimiento
especifico de antgenos por los linfocitos. En esta seccin se exponen las bases
celulares y moleculares del reconocimiento de los antgenos y las especificidades de los
linfocitos B y T.

Se describe brevemente la gentica y la bioqumica del complejo principal de

histocompatibilidad (MHC), cuyos productos son componentes integrales de los
ligandos que reconocen de forma especifica los linfocitos T. Posteriormente, se explica
como luego del reconocimiento los antgenos peptdicos extraos se procesan y se
unen a las molculas del MHC, para ser presentados a los linfocitos T.
Finalmente, se da un visin muy resumida de los anticuerpos, que son los
receptores de los antgenos y las molculas efectoras de los linfocitos B, debido a que
el conocimiento acerca de las bases estructurales del reconocimiento del antgeno se
ha desarrollado a partir de estudios sobre estas molculas.

B. Reconocimiento, procesamiento y presentacin del antgeno

Cuando una noxa ingresa, debe ser reconocida por clulas presentadoras de
antgenos (CPA; Clulas dendrticas, macrfagos y linfocitos B) procesada y presentada
a los Linfocitos. As, la respuesta inmune adaptativa mediada por stos ltimos se
desarrolla en tres fases (Figura 1):

Fase de reconocimiento: unin de antgenos extraos (o sus pptidos
procesados) a receptores especficos de linfocitos.
Fase de activacin: Requiere de la participacin de dos seales, el antgeno y
clulas colaboradoras, con participacin de molculas coestimuladoras. Esta fase
incluye:
o Proliferacin,
o Expansin clonal y,
o Diferenciacin hacia clulas efectoras.
Fase efectora: se desarrollan las funciones que llevan a la eliminacin del
antgeno.
Fase regulatoria: Al mismo tiempo, la respuesta inmunitaria debe mantenerse
controlada de modo que no dae por s misma al organismo.

1. Reconocimiento:

Qu es un antgeno? Es cualquier sustancia que puede unirse especficamente a

una molcula de anticuerpo o a un receptor del linfocito T. Aunque todos los antgenos
son reconocidos por linfocitos especficos o por anticuerpos, slo algunos antgenos
son capaces de activar a los linfocitos. Las molculas que estimulan respuestas
inmunolgicas se denominan inmungenos.

Figura 1. Estimulacin de la inmunidad adaptativa por las respuestas inmunitarias innatas. El

reconocimiento del antgeno por los linfocitos aporta la seal 1 para su activacin, y las
molculas inducidas en las clulas del husped durante las respuestas de la inmunidad innata
contra los microbios aportan la seal 2. En esta imagen, los linfocitos son linfocitos B, pero los
mismos principios se aplican a los linfocitos T. La naturaleza de las segundas seales vara entre
ambos tipos celulares.

Como se nombr anteriormente, los macrfagos, las clulas dendrticas y los

linfocitos B son denominados clulas presentadoras de antgenos, a pesar de que
cada uno de ellos cumple funciones diferentes. As, los macrfagos se hallan en la
periferia y al reconocer los antgenos emiten seales a travs de mediadores
(citoquinas) generando una extravasacin de clulas y molculas hacia el sitio del
reconocimiento del antgeno, formando as un microclima inflamatorio. Las clulas
dendrticas tambin se hallan en la periferia patrullando; cuando reconocen un
antgeno, se activan y a diferencia de las anteriores, migran hacia los ganglios para
presentar ste antgeno y as activar a las dems clulas de sistema inmune. Por
ejemplo, una clula dendrtica presenta en el ganglio linftico su antgeno al linfocito B,
el cual es residente del ganglio linftico y al activarse genera su mecanismo efector de
produccin de inmunoglobulinas que las libera al torrente sanguneo. Por ltimo,
recordemos que el linfocito B tambin es una CPA, la cual en esta funcin reconoce al
antgeno en el ganglio linftico, lo fagocita y presenta a un linfocito T CD4+.
Los linfocitos B y T reconocen el antgeno (Ag) mediante receptores de membrana:
anticuerpos (Ac) o inmunoglobulinas (Igs) de membrana (mIg) en los linfocitos B, y
receptor antignico especifico de clulas T (TCR) en los linfocitos T. Las mIg se designan
tambin como receptor antignico de las clulas B o BCR. Tanto el TCR como el BCR

comparten la caracterstica esencial de las cadenas polipeptdicas que los integran,

poseen regiones constantes (C) y variables (V), y stas ltimas forman el sitio de unin
al antgeno, y determinan su especificidad, lo que se debe a un mecanismo gentico
especial y primitivo de los linfocitos T y B.
TCR y BCR difieren de modo radical en dos aspectos:
El BCR acta como receptor de membrana y como molcula libre secretada (Ac
o Ig), mientras que el TCR acta solo como receptor de membrana.
El BCR se une directamente al Antgeno nativo, mientas el TCR slo reconoce
fragmentos peptdicos del Ag unidos a molculas del complejo mayor de
histocompatibilidad (MCH).
El reconocimiento por parte de los receptores tiene como finalidad la activacin
del los linfocitos, pero para que esto se produzca tiene que establecerse una fuerte
estimulacin, para poder entender cmo se estimula a un linfocito para su activacin es
necesario conocer la estructura de estos receptores o anticuerpos (Figura 2).
1.1. Reconocimiento de antgenos por los linfocitos B:
A diferencia de los linfocitos T, los linfocitos B pueden ser activados directamente
por los Ag. Sin embargo no todos los Ag son capaces de activar la respuesta inmune.
Los antgenos que activan a los linfocitos se clasifican en base a la necesidad o no
de que estos linfocitos requieran la ayuda de linfocitos TCD4+.
Los Ag que requieran de esa ayuda se denominan Linfocitos T-dependientes, esta
clase est constituida por las protenas y conjugados de protenas, y la mayora de la
vacunas que se utilizan pertenecen a esta categora. La respuesta a estos Ag suelen
inducir la memoria inmune a largo plazo, activan la produccin de Ac, principalmente
IgM en las respuestas primarias y de IgG en las respuestas secundarias.
Los Ag que activan a los linfocitos B sin participacin de los linfocitos CD4+ se
denominan Linfocitos T-independientes, las respuestas que generan son de Ac
especialmente IgM y en menos medida IgG y no suelen inducir memoria inmunolgica .
1.2. Reconocimiento de antgenos por los linfocitos T:
Como ya sabemos un Ag es cualquier sustancia capaz de ser reconocida por los
linfocitos T y B a travs de sus receptores clonales. Los linfocitos T, salvo excepciones,
no reconocen Ag en su forma nativa, sino que estos deben ser procesados y asociados
a molculas presentadoras expresadas en la superficie de las CPA (clulas
presentadoras de antgenos). Aunque puedan reconocer molculas de diferentes clases
biolgicas (protenas, lpidos, polisacridos), los linfocitos T reconocen
mayoritariamente protenas. Estas son degradadas en las CPA, y en su interior son
convertidas en pequeos pptidos, que luego son presentados en la superficie celular
asociado a las molculas presentadores de antgenos que son producto de la

codificacin del complejos mayor de histocompatibilidad (MHC), HLA en humanos. El

reconocimiento de Ag por las clulas T es, por lo tanto, una interaccin trimolecular
(TCR-pptido-MHC) entre dos clulas (linfocito T y CPA).
La especificidad de un linfocito T no depende solo del pptido antignico que
reconoce, sino tambin de la capacidad de presentar dicho pptido por parte del MHC .
Adems, los linfocitos T CD4+ reconocen a pptidos antignicos unidos a molculas
MHC de clase II (Ag+MHC II), mientras que los linfocitos CD8+ reconocen los Ag unidos
a los MCH I. Las propias molculas CD4+ y CD8+ actan como correceptores del TCR
por que se unen a las partes no polimrficas de las molculas de MHC-II Y MHC-I,
respectivamente. La presentacin va MHC-II o va MHC-I depende de la forma en que
el antgeno proteico accede al interior de la APC: en general los Ag capturados desde el
espacio extracelular (por pinocitosis, endocitosis o fagocitosis) se presentan va MHC-II,
mientas que los Ag que se originan intracelularmente en el citoplasma de la APC
(proteasoma) los hacen por va MHC-I, esto ltimo ocurre principalmente en las
infecciones causadas por bacterias de crecimiento intracelular, virus, o clulas
anormales que exponen antgenos tumorales.
La respuesta de los linfocitos T es ms diversa que la de los B, ya que los mismos se
diferencias en varias subpoblaciones celulares (ver mas adelante).

2. VAS DE PROCESAMIENTO DEL ANTGENO

Para que se genere una respuesta inmunitaria se tiene que producir la activacin
de linfocitos T CD4+, que a su vez facilitarn la respuesta mediada por otros linfocitos.
Para ello se requiere la intervencin de CPA profesionales, que se caracterizan por
las siguientes capacidades:
Captacin de material del medio extracelular
Degradacin eficiente de protenas y generacin de pptidos adecuados para
unirse al MHC (complejo mayor de histocompatibilidad)
Expresin de molculas de MHC de clase II, de molculas coestimuladoras y de
molculas de adhesin


Figura 2. Caractersticas de la unin al antgeno por las molculas reconocedoras de antgenos
del sistema inmunitario

Produccin de citoquinas que sirvan de seales de diferenciacin para los

linfocitos activados.
Es un proceso biolgico que ocurre en las CPA y que implica mecanismos de
degradacin proteica intracelular y de asociacin de los pptidos generados a
molculas MHC para su expresin en la superficie celular. Este proceso es
imprescindible para la activacin de linfocitos T, pero no de linfocitos B.
La presentacin del Ag va estar dada segn la localizacin del mismo, ya sea
extracelular o intracelular. Los Ag. extracelulares son captados desde el exterior, los
cuales son fagocitados por las clulas y se procesan va lisosoma. Los Ag. intracelulares
son degradados va proteasoma.

La presentacin del Ag se lleva a cabo a travs del complejo mayor de
histocompatibilidad: MHC I que se hallan en todas las clulas nucleadas y
MHC II, en las CPA.
2.1. COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD (MHC), sistema HLA:
El sistema HLA (human Leukocyte Antigens) constituye el complejo principal de
histocompatibilidad humano (MHC) y codifica para un grupo de glicoprotenas

presentes en la membrana celular de prcticamente todas las clulas del organismo,

que se caracterizan por su extraordinario grado de variabilidad de unos individuos a
otros. Entonces decimos que el Complejo Mayor de Histocompatibilidad es resultados
de un conjunto de genes que codifican protenas, cuyos productos de expresan en la
superficie de varias clulas.
Estas glicoprotenas se denominan antgenos de histocompatibilidad por ser
inductores de la respuesta inmune de rechazo que se produce cuando se realiza un
trasplante entre individuos genticamente diferentes. Su variabilidad depende de dos
factores : cada individuo posee antgenos de histocompatibilidad codificados por genes
distintos (poligenia) y cada uno de estos genes puede presentar muchas formas
alternativas o alelos (polimorfismo).
Poligenia y Polimorfismo combinados hacen del sistema HLA el sistema gentico
ms complejo del hombre. A dems podemos decir que son codominantes en relacin
en que todos sus genes son expresados.
Organizacin de los genes del MHC
En los seres humanos los genes del MHC se ubican en el brazo corto del
cromosoma 6 y ocupan un segmento del ADN bastante extenso, alternando entre otros
genes y segmentos de ADN no codificante (Figura 3).
Los genes de clase I del MHC, estn ubicados en la posicin ms telemrica del
HLA. Mientras que los genes de clase II son ms centromricos. Entre los grupos de
genes de clase I y II se encuentran otro grupo que codifican ciertas protenas del
complemento y tres citoquinas estructuralmente relacionadas (TNF, LT y LT), a este
grupo se los denomino genes de clase III del MHC. Los genes clase I del MHC, HLA-A,
HLA-B y HLA-C sintetizan las molculas de clase I del MCH, (ver mas adelante la
estructura completa de la molcula de clase I del MHC) encargadas de presentar a los
antgenos peptdicos a los Linfocitos T CD8+. Dentro de la regin I tambin
encontramos otros genes de polimorfismo muy bajo o nulo conocidos como class I-like
genes (HLA-F, HLA-G, HLA-H, HLA-E, HLA-J y HLA-X). La funcin de estos class I-like
genes no es conocido pero se cree que sirven como repertorio de secuencias de
codificacin, que pueden ser utilizadas para generar nuevas secuencias polimrficas en
las molculas de clase I y II por un proceso conocido como conversin gnica. En este
proceso una porcin del ADN de un gen es reemplazado por una secuencia de otro de
una manera no reciproca. De hecho el gran polimorfismo de los genes del MHC es
debido a conversiones gnicas y no a mutaciones . En cuanto al locus del MHC II, se
encuentran los genes HLA-DP, HLA-DQ y HLA-DR, que sintetizan las molculas de clase
II del MHC cuya funcin consiste en presentar a los antgenos peptdicos a los linfocitos
T CD4+. Dentro del locus de la clase II se encuentran tambin genes que codifican
varias protenas encargadas del procesamiento del antgeno. Una de ellas es el

heterodmero TAP (transportador asociado con el procesamiento del antgeno),

encargado de transportar los pptidos desde el citosol al interior del retculo
endoplsmico (estas funciones se vern mas adelante). Adems incluye a otros genes
que codifican subunidades del proteasoma. Tambin se ubican aqu en el locus del
MHC II a un par de genes que codifican la protena HLA-DM que esta involucrada en la
unin del pptido a la molcula de clase II .

Figura 3. Mapa del MHC humano. Este mapa est simplificado para excluir muchos genes que
tienen funciones desconocidas. HLA-E, HLA-F, HLA-G, HLA-J y HLA-X son molculas similares a
las de la clase I, muchos de cuyos productos son reconocidos por los linfocitos NK; C4, C2 y los
genes del factor B codifican protenas del complemento; DM, DO, TAP y los proteasomas
codifican protenas implicadas en el procesamiento del antgeno; LTA, B y TNF codifican
citocinas. Muchos seudogenes y genes cuya funcin en las respuestas inmunitarias no est
establecida estn localizados en el complejo HLA, pero no se muestran.

Los dos tipos principales de molculas codificadas por el MHC (MHC-I y MHC-II)
estn especializadas en la presentacin de Ag que se degradan en uno u otro de los dos
compartimentos (intra o extracelular). Las molculas MHC-II presentarn Ag de
microorganismos exgenos que se degradan en la va endolisosmica; las molculas
MHC-I presentarn Ag endgenos (intracelulares), procedentes de protenas que se
degradan en el citosol, entre ellas protenas sintetizadas por la propia clula (como una
protena vrica en la clula infectada o un Ag tumoral en una clula cancerosa).

La presentacin por MHC-II requiere procesamiento en las vesculas que

conforman la va endoctica para generar pptidos capaces de ser presentados a
linfocitos T CD4+; la presentacin por MHC-I requiere procesamiento citoslico
mediado por el proteasoma, que genera pptidos capaces de ser presentados a clulas
T CD8+ citotxicas.
2.2. Las vas de procesamiento del antgeno incluye diferentes vas:
Va de clase I
La cadena pesada (a) y ligera (b2-microglobulina, b2m) del MHC-I se translocan
durante su sntesis al RE, donde se ensamblan y forman un heterodmero fsicamente
inestable, protegido de su degradacin por diversas chaperonas. As, la cadena a se
asocia a calnexina, chaperona asociada a la membrana del RE, que la mantiene
temporalmente plegada hasta que se une a b2 microglobulina, para formar un
heterodmero inestable que luego se disocia de calnexina y se asocia con las
chaperonas calreticulina, y tapasina, para interaccionar con TAP (Transporter
Associated with Antigen Presentation) de la membrana del RE, cuya funcin es el
transporte de pptidos del citosol al interior del RE. Este complejo multiproteico se
denomina complejo de carga y se mantiene estable hasta que un pptido que entre
al RE se asocie al dmero cadena pesada-b2micloglobulina. La tapasina ejerce adems
la funcin de selector de pptidos en funcin de la estabilidad que confieren a la
molcula MHC-I. Finalmente la unin con el pptido forma un complejo peptidocadena pesada-b2microglobulina, que se libera del resto de molculas para ser
transportado a la membrana plasmtica por la va de exocitosis constitutiva. Los
pptidos que se unen a MHC-I en el RE tienen 8-10 AA y proceden de protenas
degradadas en el citosol. Sern pptidos derivados de protenas endgenas propias:
citoslicas, nucleares o vesiculares. Estos pptidos pasan a la luz del RE mediante un
transporte activo (dependiente de ATP) llevado a cabo por TAP, heterodmero formado
por TAP-1 y TAP-2. En ausencia de TAP se expresan bajos valores de MHC-I, lo que
demuestra que la unin a pptidos es esencial para la expresin en superficie de MHC-I
(Figura 4).

Va de clase II
Las cadenas pesadas y ligeras de MHC-II se ensamblan en el RE con la ayuda de
diversas chaperonas, entre ellas calnexina y BiP (binding protein), para formar un
dmero cadenas pesadas-livianas inestable. Un tercer polipptido, la cadena invariante
(Ii), se une no covalentemente a dicho dmero para estabilizarlo (funcin chaperona) e
impedir que MHC-II se una a pptidos que hayan entrado en el RE. Esta funcin la
realiza mediante insercin de parte de su secuencia, el pptido CLIP (CLass II-associated

10

Invariant chain Peptide), en la hendidura peptdica del dmero cadena pesada-cadena

liviana. La cadena Ii trimeriza, con lo que se forma un complejo estable de alto peso
molecular (abIi)3. Este complejo nonamrico es transportado a la membrana
plasmtica por la va secretoria constitutiva, y se internaliza rpidamente hacia los
compartimentos MIIC de la va endoctica, entre los que destacan los llamados cuerpos
multivesiculares (mvb) y multilaminares (mlb). Durante la internalizacin de (abIi)3 se
produce la protelisis secuencial de Ii, hasta que los dmeros quedan unidos
nicamente al fragmento CLIP, que mantiene la estabilidad del dmero. En los MIIC, la
asociacin al complejo ab-CLIP de una chaperona especfica llamada DM induce un
cambio conformacional que permite liberar CLIP y dejar la hendidura peptdica
accesible a otros pptidos presentes en MIIC, hasta que encuentre uno que le confiera
alta estabilidad, momento en el que se separar el complejo cadenas pesadas-cadenas
livianas-pptido de DM para su transporte a la superficie de la CPA. De hecho, las
clulas deficientes en DM expresan en su superficie molculas de MHC-II unidas
mayoritariamente a CLIP. Los pptidos que se unen a MHC-II son largos (12-20 AA) y
proceden en su mayor parte de protenas extracelulares o de membrana, que entran
en la clula por endocitosis. En clulas en reposo, los ligandos naturales de MHC-II
proceden de protenas endgenas que entran en la va endolisosomal o de protenas
del medio (p. ej., protenas sricas).

Figura 4. Va de presentacin MHC-I. Etapas de procesamiento y presentacin a un LT CD8+.

11


Figura 5. Va de presentacin MHC-II. Etapas de procesamiento y presentacin a un LT CD4+.

Va cruzada:
Una respuesta inmunitaria eficiente requiere la activacin paralela de clulas T CD4
y CD8 especficas para un mismo Ag. Existen vas alternativas que facilitan que Ag
exgenos se presenten asociados a MHC-I y otras que permiten que Ag sintetizados en
el citosol se asocien a MHC-II. El conjunto de estas vas, particularmente eficientes en
las clulas dendrticas (DC), recibe el nombre de vas de presentacin cruzada y
permiten que la respuesta inmunolgica a Ag endgenos y exgenos involucre a
linfocitos T CD4 y CD8.
Los Ag exgenos pueden acceder a la va de MHC-I por varios mecanismos:
Va vacuolar por la que molculas MHC-I de la membrana son internalizadas y
coinciden con Ag endocitados de degradacin rpida, con lo que se produce
un intercambio de pptidos en vesculas tempranas endocticas.
Escape y posterior degradacin en el citosol de material fagocitado
Endocitosis directa al RE,
Protelisis extracelular de protenas de superficie que genera pptidos
capaces de unirse a molculas MHC-I vacas en la membrana de las DC.
Aunque la presentacin cruzada no es la va cannica y no se produce en la
mayora de clulas, su papel es esencial en la induccin por DC de respuestas de clulas
CD8+ a Ag tumorales, a virus que no infectan las DC pero frente a los que las DC son las
nicas que pueden inducir respuesta citotxicas o en autoinmunidad mediada por
clulas CD8+, como es el caso de la diabetes autoinmunitaria. La presentacin por

12

MHC-II de protenas endgenas depende de que su degradacin pase por la va

endoctica por mecanismos diversos:
Importacin mediada por chaperonas del Ag desde el citosol a la va endoctica.
Autofagia de componentes propios del citosol.
Fagocitosis de material citoslico liberado al medio extracelular tras la muerte
de clulas vecinas.
La induccin de respuestas CD4 frente a virus que infecten DC, la presentacin de
pptidos citoslicos o nucleares propios en autoinmunidad o la generacin de
tolerancia en el timo de molculas propias que se degraden en el citosol son procesos
en los que este fenmeno adquiere relevancia.

2.3. Estructura y propiedades de las molculas del MHC
Si bien las molculas de clase I y II son funcionalmente diferentes, existen
caractersticas estructurales similares que consideramos de gran importancia para
comprender su unin al pptido y el reconocimiento por parte de los linfocitos T.
Poseen 4 propiedades distinguibles:
Todas las molculas del MHC tienen 4 segmentos: Un segmento de unin al
pptido o hendidura, un dominio tipo Inmunoglobulina (Ig), un segmento
transmembrana y una porcin citoplasmtica carboxi-terminal.
El sector polimorfico de las molculas del MHC se halla en la hendidura de unin
a pptido. Esta se encuentra formada por dos segmentos en hlice separados
por un piso creado por una secuencia en lamina plegada . Los aminocidos
que varan de un alelo a otro generando el polimorfismo que caracteriza al MHC
se ubican alrededor de esta hendidura. Debido a esta gran variabilidad en la
regin de unin al pptido, el MHC puede cubrir la amplia gama de antgenos a
los que nos encontramos expuestos.
Los dominios tipo Igs no son polimrficos y participan en el reconocimiento del
MHC por parte de los linfocitos T. Los dominios tipo Igs del MHC I son distintos a
los del MHC II, ya que, son estos segmentos los cuales la molcula CD8 y CD4
reconocen respectivamente

Molculas de clase I del MHC
La molcula de clase I est constituida por dos cadenas polipeptdicas unida de
forma no covalente. La cadena cadena pesada, codificada por los genes de clase I
del MHC y una cadena no codificada por el MHC, la 2-microglobolina o cadena liviana,
cuyo gen se encuentra en el cromosoma 15 . La cadena posee tres segmentos que se
numeran desde el extremo N-terminal, 1, 2, y 3. Los segmentos 1 y 2 interactan

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separados por un segmento de en lamina plegada para formar el sitio de unin al

pptido. Este espacio creado es lo suficientemente grande para que quepan pptidos
entre 8 a 11 aminocidos. El segmento 3 se pliega para formar un dominio tipo Ig,
este segmento contiene un bucle que sirve de unin a la molcula CD8.

Figura 6. MHC-I. El diagrama esquemtico (izquierda) ilustra las diferentes regiones de la

molcula del MHC-I. Las molculas de la clase I estn compuestas de una cadena polimorfa
unida de forma no covalente a la 2-microglobulina (2m) no polimorfa. La cadena est
glucosilada; los residuos de hidratos de carbono no aparecen representados. El diagrama de
cintas (derecha) muestra la estructura de la porcin extracelular de la molcula de HLA-B27 con
un pptido unido, resuelto mediante cristalografa por rayos X.

La cadena liviana 2-microglobulina interacta de modo no covalente con el
segmento 3, y al igual que este se pliega en un dominio tipo Ig. La molcula de clase I
completamente ensamblada es un heterotrmero, formado por la cadena , la 2 microglobulina y el pptido. En esta conformacin la molcula se encuentra estable en
la membrana celular. Todo individuo normal heterocigoto expresa seis molculas de
clase I diferentes en cada clula, ya que contienen cadenas derivadas de los seis
alelos de los genes HLA-A, HLA-B y HLA-C. Tres alelos heredados de la madre y tres del
padre.

Molcula de clase II del MHC
Las molculas de clase II del MHC estn compuestas por dos cadenas asociadas de
modo no covalente, la cadena y la cadena , a diferencia de las molculas de clase I,
son sintetizadas por genes del MHC. La cadena y la cadena poseen segmentos que

14

se nombran desde su extremo N-terminal en 1, 2 y 1, 2. En esta molcula los sitios

de unin al pptido se encuentran entre los segmentos 1 y 1, el espacio que surge de
esta relacin de dos cadenas polipeptdicas distintas es mayor que el que forman los
segmentos 1 y 2 del MHC I, esto trae como consecuencia que, los pptidos
antignicos que se unan al MHC II posean entre 10 a 30 residuos o incluso mas . Las
secuencias polimrficas de las molculas de clase II se ubican alrededor de los
segmentos 1 y 1 e inclusive entre ambos, pero se ha demostrado que existe mayor
polimorfismo en los sectores 1. En tanto que los segmentos 2 y 2 se pliegan
formando dominios tipo Ig. Los bucles formados por las secuencias 2 son el sitio de
unin a la molcula CD4 de los Linfocitos T colaboradores. En similitud con las
molculas de clase I, el MHC II completamente ensamblado y estable es un
heterotrmero, constituido por la cadena , la cadena y el pptido. Existen en un
individuo normal heterocigoto, seis alelos para la cadena y seis para la cadena , lo
que nos dara como resultado un total de doce posibles variantes en la molcula del
MHC II, sin embargo existen cadenas provenientes del alelo HLA-DQ que no
necesariamente se aparean con las cadenas del alelo HLA-DQ, si no que pueden
asociarse a cadenas de otros alelos (HLA-DP HLA-DR, etc.). Este mecanismo
permite la existencia de alrededor de 10 a 20 molculas de clase II.


Figura 7. MHC-II. El diagrama
esquemtico
(izquierda)
ilustra las diferentes regiones
de la molcula del MHC-II. Las
molculas estn compuestas
de una cadena polimorfa
unida de forma no covalente a
una cadena polimorfa.
Ambas
cadenas
estn
glucosiladas; El diagrama de
cintas (derecha) muestra la
estructura de la porcin
extracelular de la molcula de
HLA-DR1 con un pptido
unido, resuelto mediante
cristalografa por rayos X.

15

C. LINFOCITOS T

Los linfocitos T, son los principales efectores de la inmunidad adaptativa,
recordando que el linfocito B tambin es una CPA. Estos se encargan bsicamente de
erradicar a los microorganismos intracelulares.
Los linfocitos T se fabrican en la mdula sea a partir de una clula precursora
pluripotencial hematopoytica (Stem Cell) de la cual se originan las UFC (unidades
formadoras de colonias), que va dar origen a las lneas eritroideas y mieloideas, y a un
precursor linfoideo, del cual se originaran las clulas destinadas a ser LB o LT. Las
clulas B continan su desarrollo en la medula sea, y las clulas destinadas a ser LT,
migran al timo, donde sern procesados y sufrirn diferenciacin. Los LT que dejan el
timo y alcanzan el torrente sanguneo, van a diseminarse por todo el organismo para
alojarse en el tejido linfoideo corporal, ms extensamente en los ganglios linfticos,
vigilantes de la entrada de algn agente agresor. El linfocito T en general es definido
por su TCR, cuya estructura pertenece a la familia de las inmunoglobulinas.
En la periferia los linfocitos llevan a cabo las fases de la respuesta inmune.

1. Linfocitos T CD4+:

Una vez que un linfocito se ha activado por el Ag, pasa de una estadio llamado Th 0
o clula efectora inmadura a diferenciarse hacia los diferentes subtipos maduros.
Existen dos subpoblaciones de linfocitos T, los T colaboradores o helper (CD4+) y los T
citolticos o citotxicos (CD8+). A su vez los LTh (linfocitos T helper), se subdividen en
Th1, Th2 , Th 3 y los Treg, caracterizados por la produccin de un espectro distinto de
citoquinas.
Th 1: secretan IL-2 e INFg, muy eficaces para desarrollar las respuestas de
hipersensibilidad retardada (activacin de macrfagos y respuestas protectoras
frente a agentes de crecimiento intracelular); tambin son eficaces para la
cooperacin con los linfocitos B para la respuesta opsonizante, de los isotipos
IgG1 y IgG3.
Th2: secretan IL-4 , IL-5, IL-13 e IL-10 y son muy eficaces para activar a los
linfocitos B vrgenes e inducir la secrecin de todas las clases de
inmunoglobulinas y muy particularmente IgE, esencial en la defensa
antiparasitaria; por el contrario no activan a los macrfagos y, por tanto, no
tienen efecto protector contra patgenos intracelulares.
Th17: Secretan IL-17 e IL-22 pero no INFg o IL-4, y su principal funcin es la
induccin de reacciones inflamatorias, especialmente aquellas ricas en
neutrfilos.

16

 T reguladores (Treg.): Secretan IL-10, TGFb y controlan la induccin de

fenmenos autoinmunitarios.

Hay una contraposicin activa entre la generacin de los diferentes subtipos de
linfocitos CD4+: INF g inhibe la generacin de Th2 y favorece la de Th1; IL-10 e IL-4
inhiben la generacin de Th 17 y favorece la de Th 1 y Th2, respectivamente. Los
factores que regulan la desviacin no se conocen bien, pero se sabe que es decisivo el
microambiente de citoquinas generado al inicio de la estimulacin primaria de un
linfocito T virgen; as, la presencia de IL-4 y de IL-6 favorece la generacin de Th2; la de
IL-12 sobre todo, tambin la de INF-g e INF-a, favorece la generacin de Th1; la de IL-23
e IL-6 favorece la generacin de Th 17, y la de TGFb estimula la generacin de Treg. La
fuente inicial de tale citoquinas puede ser las propias APC como clulas dendrticas o
macrfagos (IL-12 IL-&) o las propias Th0 (p. ej. IL-4 en respuesta a la influencia de IL-6
producida por la APC).

Figura 8. Funciones de las diferentes clulas presentadoras de antgenos. Los tres tipos
principales de clulas presentadoras de antgenos para los linfocitos T CD4+ actan
presentando antgenos en diferentes etapas y en diferentes tipos de respuestas inmunitarias.
Los linfocitos T efectores activan a los macrfagos y los linfocitos B mediante la sntesis de
citoquinas y la expresin de molculas de superficie.

17

El mecanismo de funcin cooperadora de los linfocitos Th1 y Th2 con los linfocitos
B tiene lugar a travs de los mecanismos antes indicados. Respecto a la activacin de
los macrfagos por los linfocitos Th1 efectores/memoria, refleja la capacidad de este
subtipo linfocitario para atraer y activar a los macrfagos. La activacin de los
macrfagos de debe esencialmente a los efectos, sobre esas clulas, del INF-g
secretado por los linfocitos Th1.

2. Linfocitos T CD8+
Los linfocitos T CD8+ citotxicos efectores (LTC) son capaces de lisar clulas que
presenten un antgeno unido al MHC-I, especfico para el TCR del linfocito, aun cuando
dicha clula no exhiba seales coestimuladoras. Inicialmente, la interaccin fsica con la
clulas diana se realiza mediante la unin de la integrina LFA-1 (CD18/CD11a) a sus
ligandos ICAM expresados por la clula diana. Si esta no presenta el Ag+ - MHC-I
apropiado, el CD8+ se despega rpidamente de la diana; si lo presenta, se produce la
activacin del T CD8+ el cual dispara rpidamente el ataque citotxico. ste consiste en
la liberacin hacia la clula diana por la zona de contacto de citotoxinas de los grnulos
lisosmicos del CD8+ que incluyen perforinas y enzimas degradativas (serinproteasas)
llamadas granzimas. Perforina es una molcula homologa al C9 (del complemento) que,
en presencia de calcio, se polimeriza y forma poros en la membrana de la clula diana
permitiendo la entrada de granzimas, las cuales activan a otras enzimas intracelulares
(caspasas) inductoras de la apoptosis.






Figura 9. TCR y Molculas accesorias. Se
muestran las principales protenas de
membrana de los linfocitos T que
intervienen en el reconocimiento del
antgeno y en las respuestas frente a
ellos. Las funciones de estas protenas
pertenecen
a
tres
grupos:
reconocimiento
del
antgeno,
transduccin de seales y adhesin.

Tras el ataque citotxico , el CD8+ se despega de la diana y repite el mismo proceso
con sucesivas clulas dianas. Las clulas diana apoptticas son fagocitadas por

18

macrfagos y clulas dendrticas. Otro mecanismo de induccin de la apoptosis, es la

mediada por la interaccin de la molcula FAS (CD95) expresada en la membrana de la
clula diana y su ligando, FasL (CD95) de los linfocitos.
Los CD8+ efectores se caracterizan por secretar INF-g, pero tambin secretan TNFa y TNF b (linfotaxina).

3. Complejo Receptor del linfocito T (TCR):

El complejo TCR-CD3 consta de dos partes estructurales y funcionalmente bien
diferenciadas (Figuras 9 y 10):
TCR: Se trata de un heterodmero de cadenas polipeptdicas a y b, unidas
covalentemente por enlaces disulfuro. Es la porcin especifica del receptor, y en ella se
da la variacin clonotpica que permite el reconocimiento de mas de 1010 antgenos
(peptdicos) diferentes. Esto quiere decir que cada linfocito T tiene un TCR especifico e
irrepetible, que en caso del reconocimiento de un antgeno puede dar lugar a un clon
de linfocitos efectores (por proliferacin) capaces de identificar ese antgeno en
partculas y adems recordarlo.
CD3: Es la porcin invariable del complejo y consta, en su estequiometria mnima,
de dos heterodmeros CD3g e y CD3 d e y un homodmero CD3 z z, estas cadenas
invariables son imprescindibles tanto para la estabilizacin del complejo TCR-CD3 en la
membrana como para la transmisin de la seal de reconocimiento antignico al
interior celular.
Cadenas variables (TCR): La organizacin del las cadenas a y b del TCR es muy
similar a las del fragmento Fab de las Ig. Ambas cadenas polipeptdicas constan de una
regin variable (V) y una regin constante (C). La regin V de las cadenas a y b,
contiene un dominio globular de tipo Inmunoglobulnico (V) y es en ella donde reside la
variabilidad clonotpica del TCR. La regin C de ambas cadenas posee tres dominios
diferenciados:
Un dominio extracelular del tipo Inmuniglobulnico (C) que contiene tres
cistenas (dos de ellas forman un puente intercatenario que une las cadenas
a y b
Un pequeo dominio a-hlice transmembrana, con aminocidos con carga
positiva implicados en las interacciones con las cadenas CD3 (cuyos aminocidos
estn cargados negativamente)
Un dominio citoplasmtico de solo cinco aminocidos.

19


Figura 10. Estructura del TCR. El
diagrama esquemtico muestra los
dominios de un TCR tpico especfico
frente a un complejo pptido-MHC.
La porcin de unin al antgeno del
TCR est formada por los dominios
Va y Vb. El diagrama de cintas
(derecha) muestra la estructura de la
porcin extracelular de un TCR segn
revela la cristalografa con rayos X.
Los
bucles
del
segmento
hipervariable que forman el punto
de unin pptido-MHC estn en la
parte superior.

Al igual que ocurre con los genes de Igs, las regiones V y C de las cadenas del TCR
estn codificados por elementos gnicos separados normalmente en el genoma de la
lnea germinal: segmentos V, D y J para la regin V, y C para la regin C. El
reordenamiento gnico es el proceso mediante el cual se yuxtapone al azar un
segmento de cada tipo en cada clula, para generar la gran diversidad de receptores
antignicos, tanto en la sntesis de las Ig como en la del TCR. El reordenamiento es
dependiente de secuencias DNA especificas adyacentes a segmentos gnicos que se
reordenan.
Cadenas invariables (CD3) z y h: Las cadenas a d y e son entre s muy homlogas,
presentan regiones extracelulares N-terminales que contienen un dominio variable
nico, semejante al de las inmunoglobulinas. Los segmentos transmembrana de todas
las cadenas CD3 contienen un residuo de cido asprtico, que tiene carga negativa,
caracterstica importante para su asociacin fsica con las cadenas a y b del TCR. Los
dominios citoplasmticos tienen una longitud que vara de 44 a 81 residuos
aminoacdicos, tamao suficiente para traducir seales al interior de la clula. Cada una
de las colas citoplasmticas posee una copia de una secuencia motivo, denominada
motivo de activacin del inmunorreceptor va tirosina (ITAM) o motivo de activacin
para el reconocimiento del antgeno (ARAM), importante para las funciones de
sealizacin. Este est compuesto por 26 residuos aminoacdicos, en los que la
secuencia tir-x-x-leucina aparece dos veces con una separacin de seis a ocho residuos
(x= aminocidos sin especificar).

20

Los residuos de tirosina son fosforilados en respuesta al reconocimiento del

antgeno por el TCR; esto permite la unin de las protenas que contienen dominios
SH2 a los ITAM y la iniciacin de una cascada de seales intracelulares. Los dominios
extracelulares de las cadenas z y h son cortos, de 9 residuos; los residuos
transmembrana contienen cido asprtico y los dominios citoplasmticos son largos, de
113 a 115 residuos. Las cadenas z y h difieren entre s por sus colas citoplasmticas.
Adems, la cadena z posee tres ITAM.
Cuando un antgeno se une al TCR, las cadenas asociadas, CD3 y z, traducen
seales al citoplasma de la clula que conducen a su activacin funcional. Adems de
estas protenas asociadas al complejo TCR, se requieren de otras molculas,
coestimuladores adicionales, que interactan con molculas de superficie de la clula T
distintas del complejo TCR. Otra funcin de estas protenas es facilitar la expresin en
superficie del complejo TCR en su totalidad.

3.1. Molculas accesorias en Linfocitos
En el reconocimiento del antgeno, las molculas CD4+ y CD8+ actan como
correceptores, facilitando la adhesin a la clula respectiva y participando en la
transduccin de seales tempranas al interior celular. Este reconocimiento es el
estmulo para el inicio de la activacin del linfocito T; constituye la primera seal, pero
son necesarias dos seales extracelulares distintas para inducir la proliferacin y
diferenciacin hacia clulas efectoras.
Esta segunda seal va a estar dada por las molculas coestimuladoras, que son
molculas de superficie presentes en clulas presentadoras de antgeno (APC) y/o
diana, y que interactan con receptores especficos presentes en el linfocito T.
CD4+: Es una glicoprotena transmembrana, miembro de la sper familia de
inmunoglobulinas, que se unen al CMH-II con funciones de adhesin y sealizacin, y se
expresa en el 65 % de los LT circulantes. Es un monmero que adems puede
expresarse en monocitos y macrfagos; tiene cuatro dominios globulares
extracelulares, incluyendo un dominio N-terminal, tipo V y tres que no son ni de tipo V
ni C. Hay adems una regin transmembrana hidrofbica y una cola citoplasmtica de
38 residuos, aminocidos bsicos principalmente.
CD8+: Es una glicoprotena transmembrana que se une a molculas CMH-I, y es
expresada en un 35 % de los LT circulantes; sus funciones son similares a las de CD4+ .
Estructuralmente es un heterodmero unidos por puentes disulfuro compuestos por
CD8a y CD8b, cada una posee un dominio globular extracelular, una regin hidrofbica
transmembrana y una cola citoplasmtica o intracelular de 25 residuos, aminocidos
bsicos principalmente. En cuanto a las funciones, tanto CD4+ como CD8+ facilitan la

21

adhesin entre clulas T y las APC o clulas diana. El CD4+ se une al dominio b2 del
CMH-II, CD8+ se une al dominio a3 del CMH-I; adems cumplen funciones de
traduccin de seales a travs de una protena llamada ICK, con actividad de tirquinasa, que se asocia en forma no covalente a las colas citoplasmticas de CD4+ y
CD8+ . ICK fosforila residuos de tirosina en los ITAM de CD3 y z. Si bien los LT
reaccionan con antgenos unidos al CMH, para una completa estimulacin requieren
molculas coestimuladoras, junto a las seales inducidas por el antgeno. Una falta de
coestimulacin puede inducir a un estado de falta de respuesta denominado anergia.
La expresin de estos coestimuladores se halla regulada por protenas proinflamatorias
y eso garantiza que los linfocitos sean activados en el momento y lugar adecuados. En
condiciones fisiolgicas tambin contribuyen a los fenmenos de tolerancia
inmunolgica.
CD28: es una de las molculas de superficie ms importantes en la coestimulacin
para la activacin del linfocito T. Se une a CD80 o B7-1 y CD86 o B7-2, expresadas en la
APC; es un homodmero de la sper familia de las inmunoglobulinas que se expresa en
el 80 % de las clulas T CD4+ y en el 50 % de las CD8+ . Las B7-1 y B7-2 son
glicoprotenas homlogas de cadena lateral sencilla, cada una con dos dominios
extracelulares tipo inmunoglobulina, una regin transmembrana y una cola
citoplasmtica; adems tambin pertenecen a la sper familia de inmunoglobulinas con
iguales caractersticas y funciones que CD28. No se conoce por completo cmo CD28
estimula la activacin de los LT, tampoco cmo estimula la produccin de IL-2 y
preserva a la clula de la apoptosis.
CD45 o T200: est formado por varias molculas de diferente tipo (8 en total),
codificadas por un solo gen. Son protenas intrnsecas con un dominio citoplasmtico
de 705 residuos aminocidos, con actividad de tiro-fosfatasa y que participa en la
regulacin de la respuesta.

Tambin hay integrinas implicadas en la interaccin de adhesin de clulas T y
otras clulas, como la LFA-1, que se asocia a la molcula de adhesin intercelular 1 o
ICAM-1, que es una glicoprotena transmembrana con cinco dominios extracelulares
tipo inmunoglobulina. Otra molcula que media funcin de adhesin y estimulacin es
el CD2 o LFA-2, glicoprotena perteneciente a la sper familia que se asocia con LFA-3 o
CD52, presente en las clulas T.
Como consecuencia de estas interacciones se desencadenan una serie de seales
intracelulares.

22

3.2. Acontecimientos intracelulares en la activacin de la clula T

El reconocimiento del antgeno y las seales coestimuladoras activan a las clulas
T vrgenes, que sufren expansin clonal y diferenciacin hacia clulas T efectoras y de
memoria. La estimulacin antignica de clulas T efectoras conduce a una expansin
clonal posterior y al desarrollo de funciones efectoras, como secrecin de citoquinas y
actividades citolticas. Cuando el TCR se une al complejo pptido-CMH, se activan
protenas tir-quinasa (PTK) asociadas al TCR; una de ellas, la ICK, sera la responsable de
la fosforilacin temprana de los ITAM en las clulas T. Esta es una protena de la familia
de ser-treonina quinasa que se asocia estrechamente a las colas citoplasmticas de las
molculas CD4+ y CD8+ del linfocito T. Una vez que los ITAM del CD3 y las cadenas z
son fosforiladas en sus residuos de tirosina por la ICK, se convierten en sitios
especficos de acoplamiento, que se unen a protenas citoplasmticas con dominios
SH2. Una de ellas, de gran importancia, es la denominada ZAP-70, la cual para activarse
debe ser fosforilada en un residuo de tirosina interno, lo cual ocurre rpidamente tras
su unin a la cadena z. Una vez activada la ZAP-70, puede autofosforilarse en otros
residuos de tirosina y entonces funcionar como una molcula armazn para el
reclutamiento de otras molculas de sealizacin con dominios SH2. Los dominios SH2
son el recurso por medio de los cuales la PTK fosforila sus sustratos. La enzima fosfatidil
inositol fosfolipasa Cg 1 (PI PLCg 1) de la membrana plasmtica es uno de sus sustratos,
de gran importancia en la generacin de seales intermedias de la activacin de las
clulas T. Esta enzima puede ser activada de dos maneras:
1. Las PTK fosforilan a protenas que se unen especficamente a la enzima por sus
dominios SH2.
2. Las PTK fosforilan directamente a la PI PLCg 1. Entonces, esta ltima activada
cataliza la hidrlisis de un fosfolpido de membrana, llamado fosfatidil inositol 4-5
bifosfato, formando de este modo, los segundos mensajeros diacilglicerol (DAG) e
inositol 1-4-5 trifosfato (IP3). El IP3 estimula la liberacin de calcio de los depsitos
intracelulares, provocando una rpida elevacin del in libre, que se une
rpidamente a una protena reguladora dependiente de calcio, denominada
calmodulina. Los complejos Ca2+-calmodulina pueden activar varias enzimas,
entre ellas algunas fosfatasas importantes para la activacin de factores de
transcripcin (FT). La funcin del DAG es activar ciertas isoformas de protenas
quinasas, que junto con el Ca2+ estimulan la produccin de enzimas para la
activacin de FT.

La PTK no solamente induce la escisin de fosfolpidos, sino que tambin activa
vas de sealizacin a travs de la cascada RAS, las cuales sirven para unir receptores de
la membrana con quinasas que actan a favor de corriente, incluyendo las cascadas de

23

quinasas de protenas activadas por mitgenos (MAP). Al final, estas vas activadas,
catalizan la fosforilacin y activacin directa de FT o de sus componentes. Por ltimo,
estos FT activados conducen a la transcripcin de varios genes que codifican citoquinas,
receptores para citoquinas, y otras protenas necesarias para la funcin efectora de las
clulas T.

D. LINFOCITOS B

Es el protagonista de las inmunidad humoral, adems de ser una clula

presentadora de antgeno.

1. Ontogenia
La ontogenia no es ms qu el transcurso del nacimiento, formacin y maduracin
de los linfocitos, los que constan de distintos subconjuntos que difieren en sus
funciones pero son muy parecidos desde el punto de vista morfolgico. Los linfocitos B,
las clulas productoras de anticuerpos, recibieron este nombre porque en los pjaros
se observ su maduracin en un rgano llamado la bolsa de Fabricio. En los mamferos,
no existe ningn otro equivalente anatmico a la bolsa, y las primeras fases
madurativas de los linfocitos B transcurren en la mdula sea. Por tanto, los linfocitos
B designan a los linfocitos derivados de la bolsa o de la mdula sea (en ingls, bone
marrow).

La maduracin de los linfocitos B a partir de sus precursores de la mdula
sea se acompaa de cambios especficos en la expresin del gen de Ig, lo
que da lugar a la produccin de molculas de Ig en diferentes formas.

La primera clula en el linaje del linfocito B que produce polipptidos de Ig,
denominada linfocito pre-B, sintetiza la forma de membrana de la cadena pesada. Estas
cadenas m se asocian a protenas denominadas sustitutos de cadenas ligeras para
formar el receptor de los linfocitos pre-B, y una pequea proporcin del receptor
sintetizado del linfocito pre-B se expresa en la superficie celular. Los linfocitos B
inmaduros y maduros producen cadenas ligeras k o l, que se asocian a protenas
para formar molculas de IgM. Los linfocitos B inmaduros, pueden reconocer un Ag
especfico, pero no pueden proliferar ni diferenciarse frente a ste. Los linfocitos B
maduros expresan formas de membrana de IgM e IgD (cadenas pesadas y d asociadas
a cadenas ligeras k o l). Estos receptores de Ig de membrana actan como receptores
de superficie celular que reconocen antgenos e inician el proceso de activacin de los
linfocitos B. Los receptores del antgeno de los linfocitos B se asocian de forma no
covalente a otras dos protenas de membrana, Iga e Igb, que realizan funciones de
emisin de seales y son fundamentales para la expresin de superficie de las IgM e
IgD.

24


La importancia de la maduracin correcta del un linfocito es para hacerlo
funcionalmente activo, especifico y eficaz.
Las fases de la maduracin son:

Reordenamiento y expresin de genes de inmunoglobulina (Ig)
Proliferacin celular .
Seleccin del repertorio .

Los Linfocitos B son un tipo celular que cumple mltiples funciones en el
mantenimiento de la inmunidad y ante la re-exposicin de noxas. Los linfocitos B se
originan y maduran en medula sea pero una vez que hayan completado estos cambios
se ubican en los ganglios linfticos, donde se activan en presencia de un agente
extrao, con la ayuda de otro tipo celular, los Linfocitos T CD4 + o Linfocitos T helper;
aunque bajo ciertas circunstancias pueden hacerlo en ausencia de estos. Las clulas B
durante su maduracin expresan diferentes molculas de superficie que determinan su
funcin.
Se distinguen cuatro estadios madurativos consecutivos: Clula Pro B (o pre pre B),
clula Pre B, linfocito B inmaduro , Linfocito B maduro virgen o naive.
Para comprender este proceso madurativo hay que conocer la estructura, funcin
y gentica de las Ig .
A medida que avanza en su maduracin, se inicia el reordenamiento de los genes
de las Ig, comenzando por las cadenas pesadas (H, por Heavy), con la recombinacin de
los segmentos Dh y Jh (clula Pro-B inicial), y luego la recombinacin del segmento Vh
con el complejo Dh-Jh recombinado (clula Pro-B tarda). Tan pronto como el
reordenamiento es productivo, se sintetizan las cadenas , y se llega al estadio
siguiente de la clula Pre-B, caracterizado por la expresin de las cadena unidada a
seudocadenas ligeras (SL), para formar lo que se denomina IgM inmadura o subrogada
o Pre-BCR, que enva seales que hacen detener el reordenamiento de las cadenas H.
Esto ultimo sucede en la clula pre-B inicial, luego en las clulas Pre-B tardas, en las
que se reordenan los genes de las cadenas V-J de las cadenas ligeras (L), primeros las
de tipo K, y luego, si no son productivas, las de tipo l. Cuando este reordenamiento es
productivo se sintetizan las cadenas L y la clula pasa a expresar IgM en la membrana
(mIgM), siendo esta la primera en la ontogenia del linfocito B, con cadenas L
autenticas, lo que lleva al cese de la maquinaria combinatoria.
El Linfocito B Maduro, expresa IgD en la membrana aparte de mIgM , alcanzando
as el ultimo estadio. En un mismo linfocito B, ambas Ig, mIgM y mIgD, tienen las
mismas regiones Vh y Vl y el mismo tipo de cadena L, por lo que reconocen el mismo
tipo de Ag.
Antes de pasar a la circulacin general estos linfocitos pasan por un proceso
denominado Tolerancia o seleccin del repertorio.
El concepto de tolerancia no es fcil de asimilar. Para comprender hay que
concebir al sistema inmune como un sistema inteligente que puede programarse, el
cual debe No responder frente a los antgenos propios o inocuos y si responder frente a

25

los patgenos. La tolerancia no es un mecanismo que se hereda sino que se instaura (se
programa).

Figura 11. Ontogenia de Linfocitos B. Expresin de inmunoglobulinas durante la maduracin de

los linfocitos B. Se muestran las fases de maduracin de los linfocitos B con los cambios
asociados en la produccin de cadenas ligeras y pesadas de Ig. La cadena pesada de IgM se
muestra en rojo; la de IgD, en azul; y la cadena ligera, en verde.

La tolerancia de los linfocitos autoreactivos, depende de la afinidad de su
receptor. La afinidad del Ag por el BCR o TCR, es el elemento ms importante de la
determinacin de la programacin del linfocito durante su diferenciacin.
En los linfocitos inmaduros las interacciones de alta afinidad generan seales
intracelulares que desencadenan apoptosis denominndose Seleccin negativa, que se
da cuando un linfocito reconoce con alta avidez un Ag propio durante su maduracin.
Por el contrario, en linfocitos maduros perifricos estas interacciones constituyen una
potente seal para la activacin y proliferacin, mientras que las de baja afinidad
generan anergia clonal. Esta divergencia entre linfocitos inmaduros y maduros explica
en parte las diferentes formas de induccin de tolerancia en los rganos primarios y
secundarios.
Una vez listos, luego de haber pasado el control estos linfocitos pasan a la
circulacin perifrica donde se llevaran a cabo las fases de la respuesta inmunolgica,
descriptas al comienzo.

2. Estructura de las inmunoglobulinas: Sntesis y diversidad

Los Ac o Ig son glicoprotenas solubles secretadas por los linfocitos B que tienen la
propiedad de reconocer de forma especfica molculas, denominadas antgenos (Ag).
La estructura bsica: constituida por cuatro cadenas polipeptdicas: dos pesadas (H,
heavy) idnticas y dos ligeras (L, light), tambin idnticas. Las cuatro cadenas estn
unidas mediante enlaces disulfuro: las dos cadenas H entre s, y cada cadena H a una de
las L. En cada cadena (H o L) hay una regin variable (V) y una regin constante (C). La
regin V abarca los primeros 110 aminocidos del extremo aminoterminal y su
secuencia aminoacdica vara notablemente de una a otra molcula de Ig, mientras que

26

la regin C comprende el resto de la cadena y su secuencia es la misma en todas las Ig

de la misma clase (isotipo) y subclase.

Figura 12. Estructura de un anticuerpo. A. Diagrama esquemtico de una molcula de IgG

secretada. Los sitios de unin al antgeno estn formados por la yuxtaposicin de los dominios
de la cadena ligera variable (VL) y la cadena pesada variable (VH). Las regiones C de la cadena
pesada terminan en colas. Las localizaciones de los lugares de fijacin al complemento y los
receptores del Fc en las regiones constantes de la cadena pesada son aproximaciones. B.
Diagrama esquemtico de una molcula de IgM unida a la membrana en la superficie de un
linfocito B. La molcula de IgM presenta un dominio ms de la regin C de la cadena pesada
(CH) que la IgG y la forma de membrana del anticuerpo presenta porciones citoplsmicas y
transmembranarias C terminales que anclan la molcula a la membrana plasmtica

El sitio de unin al Ag lo forman conjuntamente las regiones V de la cadena H (VH)
y L (VL). Dentro de cada regin VH y VL se hallan tres regiones hipervariables, tambin
denominadas regiones determinantes de la complementariedad (CDR), que forman el
sitio de unin al Ag, donde este encaja de forma complementaria (especfica). Las
regiones que flanquean las CDR se denominan regiones de entramado o FW (del ingls,
framework).
Tanto en el laboratorio como en terapia se utilizan frecuentemente fragmentos de
Ac denominados Fab y F(ab)2, que se obtienen mediante la digestin proteoltica con
papana o con pepsina, respectivamente.
La regin C de las cadenas H (CH) presenta variaciones isotpicas que determinan
las clases y subclases de las Ig. As, se distinguen cinco clases de Ig: IgG, IgA, IgM, IgD e

27

IgE (de mayor a menor concentracin srica), con cuatro subclases de IgG (IgG1-4) y
dos subclases de IgA (IgA1-2) . Hay slo dos tipos de cadena L, designados como kappa
(k) y lambda (l).

Figura 13. Flexibilidad de las molculas de anticuerpo. Los dos puntos de unin al
antgeno de un monmero de Ig pueden fijar- se simultneamente a dos determinantes
separados por distancias variables. A. Se representa una molcula de anticuerpo
unindose a dos determinantes muy separados sobre una superficie celular. B. El
mismo anticuerpo est unido a dos determinantes que se encuentran bastante
prximos. Esta flexibilidad se debe fundamentalmente a las regiones bisagra localizadas
entre los dominios CH1 y CH2, lo que permite un movimiento independiente de los
lugares de fijacin al antgeno en relacin con el resto de la molcula.

2.1. Genes de las inmunoglobulinas. Organizacin y reordenamiento somtico

Las Ig estn codificadas en tres sitos o loci del genoma: cromosoma 14 (cadenas H), 2
(cadenas k) y 22 (cadenas l) A diferencia de otros genes, los loci de las Ig estn
constituidos por diferentes segmentos gnicos que codifican para la regin V y otros
que codifican la regin C, que en la lnea germinal (DNA embrionario o DNA de clulas
no linfoides) estn separados entre s. La regin VL est codificada por mltiples
segmentos gnicos de tipo V (Variable) y J (Joining), todos ellos diferentes entre s. La
regin VH est codificada, adems de por segmentos V y J, por un tercer tipo de
segmentos denominado D (Diversity). Para las cadenas H hay tantos segmentos C
distintos como clases y subclases de cadenas H. Para que pueda sintetizarse una
cadena H o L, los segmentos gnicos V(D)J de la lnea germinal deben reordenarse y
formar un nico gen, que luego se transcribir a RNA y se traducir a protena. Estos
reordenamientos gnicos ocurren durante el desarrollo de los linfocitos B en los sitios

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hematopoyticos y siguen un orden jerrquico muy estricto que comienza por las
cadenas H en el estadio pro-B: primero se reordenan un segmento DH con otro JH, y
luego uno de los mltiples segmentos VH con el DHJH reordenado( D+J=DJ V+DJ=
VDJ). Si el reordenamiento VHDHJH no es productivo (incapaz de transcribirse
correctamente) prosiguen los intentos hasta que uno lo sea o hasta que se agote el
material en ambos cromosomas 14 y la clula aborte. En cuanto uno es productivo, se
sintetizan cadenas m y cesan los reordenamientos en las cadenas H, para iniciarse los
de las cadenas k con el mismo proceso de intentos sucesivos hasta que uno sea
productivo, momento en que la clula expresa mIgMk y cesa la maquinaria
recombinatoria. Si fracasan todos los reordenamientos l, se inicia el mismo proceso en
el locus de las cadenas k hasta que uno sea productivo; si ninguno resulta productivo,
la clula aborta. Este sistema retrorregulador hace que, en cada linfocito B, cada
cadena H y L expresada corresponda slo a uno de los dos alelos (el materno o el
paterno), fenmeno conocido como exclusin allica; es una excepcin en las clulas
de vertebrados con organizacin cromosmica diploide, en las que se expresan los dos
alelos de un gen activo. As garantiza que una clula B (y su clon) exprese Ig, una nica
regin VH y una nica regin VL y, por tanto, una misma especificidad Ac. Durante
mucho tiempo se haba credo que, una vez que un linfocito B haba adquirido y
expresado un determinado reordenamiento, ya no poda cambiarse. Ahora se sabe que
en los linfocitos B inmaduros en la mdula sea pueden ocurrir reordenamientos
secundarios, principalmente de las cadenas L, que sustituyen al original o primario y,
por tanto, cambian la especificidad de la mIgM (edicin del receptor).

Figura 14. Organizacin de
los locus de las Ig
humanas en la lnea
germinal. Se muestran los
locus de la cadena pesada,
la cadena ligera y la
cadena ligera humanas.
Slo se muestran los genes
funcionales;
se
han
omitido los seudogenes
por
simplicidad.
Los
exones y los intrones no se
dibujan a escala. Cada gen
CH se muestra en un nico
recuadro, aun- que est formado por varios exones, como se ilustra para C. Los seg- mentos
gnicos se indican como sigue: C, constante; D, diversidad; L, gua (con frecuencia denominado
secuencia seal); J, unin; pot, potenciador; V, variable.

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2.2. Funcin de las inmunoglobulinas: actividad anticuerpo y funciones efectoras.

Las Ig desempean dos grandes tipos de funciones:

1. Unirse de forma especfica (complementaria) al Ag, esta funcin radica en el
sitio de unin al Ag constituido por la conjuncin de las regiones VH-VL que
forman una hendidura en la que encaja de forma complementaria el
determinante antignico o eptopo.
2. Desencadenar diferentes procesos efectores destinados a eliminar o neutralizar
el Ag, y que incluyen (Figura 16):
a. Activar el complemento
b. Unirse a la membrana de otras clulas a travs de los receptores Fc
presentes en las clulas fagocticas y otros tipos celulares
c. Atravesar la placenta, y
d. Unirse a ciertas protenas microbianas, como la protena A estafiloccica y
la protena G estreptoccica.

Figura 15. Isotipos de anticuerpos humanos y sus funciones.

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La simple unin de un Ac al Ag puede ser efectiva en muchos casos para neutralizar

la patogenicidad de un agente microbiano o de sus toxinas, pero en general resultara
biolgicamente poco eficaz para destruir los agentes patgenos si no activara el
complemento y la fagocitosis (opsonisacin).

Figura 16. Funciones efectoras de los anticuerpos. Los anticuerpos frente a los
microorganismos (y sus toxinas, que no se muestran) los neutralizan, los opsonizan para la
fagocitosis y la citotoxicidad celular de- pendiente de anticuerpos y activan el sistema del
complemento. Las distintas funciones efectoras pueden estar mediadas por distintos isotipos
de anticuerpos.

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