Revista ALEIQ

Revista de la Asociación Latinoamericana de Estudiantes

de Ingeniería Química y Ramas Afines

Volumen 1, Número 1

2010
 PRODUCCIÓN DE HIDROLIZADO DE FIBRA DE MAÍZ PARA
LA OBTENCIÓN DE ETANOL

Emílio Vieira Lopes Rosa, Boutros Fouad Sarrouh e Sílvio Silvério da Silva

Escuela de Ingeniería de Lorena – Universidad de São Paulo

(EEL-USP) – Dpto. de Biotecnología

Para una eficiente degradación de la fracción hemicelulósica de la fibra de maíz y

consecuentemente obtención de un hidrolizado rico en xilosa, objetivando una menor
concentración de compuestos tóxicos que perjudican el crecimiento microbiano durante
el desarrollo de procesos fermentativos, se ha evaluado la influencia de las variables
temperatura (110 – 120 ºC), concentración del ácido sulfúrico (0,5 – 1,0 % v/v) y la
relación sólido-líquido (10 – 20 g/100ml). Por un plan factorial completo 23 con 3 puntos
centrales, se ha obtenido la influencia de cada variable y una superficie de respuesta.
Frente a los resultados obtenidos, se ha dicho que la obtención de un mejor perfil
hidrolítico depende de la menor relación sólido-líquido y mayor concentración de ácido
sulfúrico, mientras eso no se ha observado influencia significativa de la variable
temperatura.

Palabras Claves: Fibra de maíz; Hidrolice Ácida; Xilosa, Etanol

1. INTRODUCCIÓN diversos productos, ya que es ampliamente

En la actualidad se ha observado un gran aumento
de los estudios con objetivo del aprovechamiento
de los residuos agro-industriales, como bagazo de
caña, fibra de maíz y otros. Hoy puede ver que la
escasez y la elevación de los precios del petróleo
son concretos, lo que lleva a una amplia inversión
en las investigaciones para obtención de
combustibles renovables a partir de diferentes
fuentes. Destacándose la fibra de maíz, pues es un
residuo agro-industrial de larga escala, que se ha
dejado sobre el suelo.
1.1 Etanol
El etanol, por ser altamente eficiente y con bajo
cuesto de producción, es una de las mejores formas
de disminuir la emisión de gases del efecto
invernadero, que también colabora
significativamente para el desarrollo sustentable,
más allá de inducir nuevas tecnologías.
Uno de los factores que se converge la producción
de etanol por fermentación como la forma más
económica de su obtención, es el gran número de
materias primas naturales que hay en todo el país.
Su distribución geográfica, que cubre diversos
climas y tipos de suelos, que se permite su cultivo
en casi todo el territorio y durante todo el año6.
disponible en países productores de maíz. Se
Encuentra en la fibra de maíz a la proporción de
35% hemicelulosa, 45% celulosa y un 18%
celulosa3.
1.3 Fracciones hemicelulósicas
1.3.1 Celulosa
La celulosa es el material orgánico más abundante
en la naturaleza, no ocurriendo en la forma pura en
ninguna fuente natural, siendo encontrada asociada
con otros polisacáridos tales como almidón,
pectina, hemicelulosa y lignina. La celulosa es un
homopolisacarideo linear formado por unidades de
D-glucosa unidas a través de ligamentos
glucosídicos β (1→4).
La celulosa es uno de los principales componentes
de la biomasa vegetal que puede ser utilizada como
fuente de carbono y energía por los
microorganismos y para la obtención de productos
químicos. Entretanto, la hidrólisis es uno de los
principales factores envueltos en el establecimiento
de un proceso eficiente de conversión de ese
material en productos de interés comercial. La
hidrólisis de la celulosa es dificultada por su
estructura y configuración, que ofrecen resistencia
a muchos tratamientos enzimáticos8.

1.2 Fibra de Maíz 1.3.2 Hemicelulosa

La Fibra de maíz es un material lignocelulósico La Hemicelulosa se distingue de la celulosa por una

compuesto por polisacáridos y lignina y es una composición de varias unidades de azúcar, por
materia-prima potencial para producción de cadenas mucho más cortas, y por una ramificación
de la cadena molecular. Las unidades de azúcar que
la componen pueden ser subdivididas en grupos,
tales como pentoses, hexoses, ácidos hexurónicos y
deoxi-hexoses2.
La hemicelulosa es el segundo carbohidrato más
abundante encontrado en la naturaleza, pudiendo
representar hasta aproximadamente un 40% del
material de la pared celular de los vegetales4
actuando como sustancia de reserva y sustentación.
La utilización de la hemicelulosa en procesos
fermentativos es favorecida principalmente en
función de su estructura abierta, que es fácilmente
hidrolizada a azúcares fermentecibles por procesos
físicos, químicos o enzimáticos4. Su configuración
molecular facilita la difusión de ácidos no
polímeros lo que aumenta la velocidad de hidrolice.
1.3.3 Lignina
La lignina es polímero tridimensional existente en
los vegetales, cuya función es “cementar” las
fibras, ofreciendo una barrera a la degradación
enzimática de la pared celular de los vegetales. La
lignina es uno de los polímeros naturales más duros
encontrado, en lo que dice a respecto a su
estructura y heterogeneidad2. La macromolécula
lignina no puede ser descrita por una simple
combinación de una de las pocas unidades
monoméricas o por un o algunos tipos de
ligamientos como en el caso de la celulosa y
hemicelulosa2. Ese polímero posee una estructura
polifenólica compleja y no es convertida en
azúcares fermentecibles.
1.4 Hidrólisis ácida
La hidrólisis é un proceso que además de provocar
la conversión simultanea de todos los polímeros de
la biomasa, aprovecha individualmente los
potenciales de cada fracción del material
lignocelulósico, transformando la hemicelulosa en
monosacáridos (principalmente xilosa y manose) y
la celulosa en glucosas. Varios métodos de
hidrolice de los materiales lignocelulósicos para la
producción de etanol u otros bioproductos han sido
reportados pela literatura.
El hidrolice del hemicelulósico obtenido tras el pre-
tratamiento del material lignocelulósico por ácidos
y calor contiene varios inhibidores del crecimiento
microbiano. Según GONG (1983), el tipo y la
cantidad de esas substancias no hidrolizadas
dependen de las condiciones de hidrolice y de la
biomasa utilizada. Muchos de esos compuestos
incluyen productos de la degradación de azúcares,
como furfural y hidroximetilfurfural (HMF), ácido
levulínico, ácido fórmico, ácido acético y
compuestos fenólicos derivados de la lignina, tales
como seringaldeído y vanilina, además de
extractivos como resinas ácidas, taninos y
terpenos3.
Tales compuestos deben ser removidos o tener sus
concentraciones reducidas para que el hidrolizado
pueda ser utilizado en procesos de bioconversión,
una vez que la interferencia en la actividad
microbiológica lleva a una reducción de la
eficiencia de conversión de sus azúcares
componentes.
El objetivo de una optimización de la hidrolice de
la fibra de maíz, es la busca de mejores condiciones
de hidrolice para que se obtenga mayor cantidad de
azúcares fermentecibles y una menor concentración
de inhibidores.
2. MATERIALES Y MÉTODOS
2.1 Métodos analíticos
2.1.1 Determinación del tenor de productos de
descomposición de la lignina (fenoles totales)
Para la determinación del tenor de productos de
descomposición de la lignina fue utilizado el
método propuesto por Rocha (2000), que consiste
en la cuantificación de la lignina Klason soluble en
medio básico.
Una alícuota del hidrolizado fue alcalinizada hasta
pH 12 por la adición de NaOH 6M y diluida con
H2O destilada de forma a obtenerse una lectura
inferior a una unidad de absorbancia.
La absorbancia de la solución fue determinada en
un espectrofotómetro BECKMAN DU 640B, con
un largo de onda ultravioleta de 280 nm, utilizando
H2O destilada como referencia.
La concentración de la lignina fue calculada a
través de la ecuación (1), considerando la
normalización de las concentraciones en función
del factor dilución utilizado.
Clig = 4,187x10-7 (Alig – Apd280) – 3,279x10-4 (1)
Clig : Lignina soluble en medio básico (g/L)
Alig : Absorbancia de la solución en 280 nm
Apd280 : C1E1 + C2E2
C1 : Concentración furfural (HPLC)
E1 : Coeficiente = 146,85 L/gcm
C2 : Concentración HMF (HPLC)
E2 : Coeficiente = 114,00 L/gcm
Las concentraciones de furfural y
hidroximetilfurfural (HMF) fueron medidas en
cromatografía líquida de alta performance (HPLC)
Waters 2487/USA, usando detector UV, columna Tablilla 3: Matriz de planificación factorial 23 para
ResolveTM C18 Waters (3,9x300mm), fase móvil evaluación de la influencia de las variables:
H2SO4, a 25ºC, flujo de 0,9 ml.min-1 y 20µL de temperatura, concentración del ácido y relación
muestra. sólido-líquido.

2.1.2 Determinación de las concentraciones de los TEMP. AC.%

azúcares y ácido acético MUESTRAS S/L
(ºC) (V/V)
1 120 1,0 1:5
Las concentraciones de los azúcares (xilosa, glicosa
2 120 1,0 1:10
y arabinosa) y ácido acético, obtenidos en el
hidrolizado, fueron medidas por Cromatografía 3 120 0,5 1:5
Líquida de Alta Performance (HPLC) en un 4 120 0,5 1:10
modelo Water 410/USA, usando detector IR,
5 110 0,5 1:10
columna HPX – 87H (300 x 7,8 mm), fase móvil
H2SO4 (0,01N), flujo de 0,6 ml.min-1, 20µL de 6 110 1,0 1:5
muestra y temperatura de 45ºC. 7 110 1,0 1:10
8 110 1,0 1:5
2.1.3 Planificación factorial
0 115 0,75 1:7.5
En este trabajo fue analizada la influencia de tres
variables en la hidrolice ácida de la fibra de maíz. 2.1.4 Análisis de los resultados
La temperatura variando en 110 y 120°C,
concentración del ácido 0.5 e 1.0% v/v, y relación Los resultados fueron analizados con el programa
sólido-líquido 1:10 e 1:5 (g de masa seca : ml de Statgraphics V. 15.1.
solución ácida), resultando en un planificación
factorial 23. Con el punto central hecho en 2.2 Materia-prima
triplicada a temperatura de 115ºC, concentración
del ácido en 0.75 % v/v y relación sólido-líquido en En este trabajo fue utilizada fibra de maíz,
1:7.5 (g de masa seca : ml de solución ácida), fornecida por la empresa Midland Co. ubicada en el
resultando en 11 experimentos, de acuerdo como estado de Illinois, Estados Unidos.
mostrado en las tablillas 1, 2 y 3.
2.3 Preparo del hidrolizado
Tablilla 1: Codificación de los niveles para las
variables evaluadas. 2.3.1 Preparo de la materia-prima

MUESTRA TEMPERATURA ÁCIDO S/L La fibra de maíz fue molida y seleccionada en

1 + + + partículas uniformes utilizando un colador de
2 + + - tamaño 20 tyler mesh.
3 + - +
4 + - - La humedad de la fibra de maíz fue medida en un
- - - medidor de humedad Marte®, modelo ID50, en el
5
cual se obtuvo una humedad de 3,8% m/m.
6 - - +
7 - + -
2.3.2 Preparo de las muestras
8 - + +
9 0 0 0 Para la hidrolice, fue fijada la masa de fibra en 5,0
10 0 0 0 gramas, a 3,8% de humedad. Fueron preparadas
11 0 0 0 soluciones ácidas de 0.5, 0.75 e 1.0% v/v,
utilizando ácido sulfúrico concentrado (H2SO4) con
Tablilla 2: Valores reales de las variables 98% de pureza.

MUESTRA MÍNIMO CENTRAL MÁXIMO La cantidad de agua presente en la fibra de maíz

Temperatura 110 115 120 fue despreciada en los cálculos da concentración
Ácido 0.5 0.75 1.0 del ácido tras la adición de la solución sobre la
S/L 1:10 1:7.5 1:5 fibra, por ser relativamente pequeña si comparada
con el volumen de solución utilizado.

Con la masa de fibra de maíz fija en 5,0 gramas, o

sea, 4,8 gramas de masa seca, fue añadido el
volumen de solución ácida 24.1ml, 48.1ml y
36.1ml, para obtener las relaciones sólido-líquido
de 1:5 , 1:10 e 1:7.5, respectivamente.
Temperatura = 110°C
2.3.3 Hidrolice 20 Conc. Xilosa (g/L)
6,20
18 9,70
La hidrolice ácida de la fibra de maíz fue hecha en 10,88
11,67
una autoclave de la marca STERMAX, con tempo 16
12,78
de reacción de 10 minutos. 13,40
14 13,61
13,80
12 19,48
3. RESULTADOS Y DISCUSIONES 25,19
10 26,06
0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1
Los resultados de los ensayos realizados a partir de % del ácido (v/v)
la planificación factorial 23 están presentados en la
tablilla 4.
Figura 3: Superfície de respuesta

Tablilla 4: Caracterización del hidrolizado hemicelulósico de la fibra de maíz tras la hidrolice ácida

1 2 3 4 5 6 7 8 0
GLICOSIS (g/L) 2,32 1,58 1,06 0,75 0,24 0,35 0,78 0,97 1,0
XILOSE (g/L) 13,40 25,19 13,80 19,45 10,88 6,20 26,06 9,70 12,69
ARABINOSE (g/L) 7,63 14,32 9,38 13,82 12,40 7,80 13,63 7,08 15,2
ÁC. ACÉTICO (g/L) 0,41 0,26 0,35 0,18 0,18 0,24 0,22 0,31 0,26
FENOLES
9,70 7,60 13,20 6,50 6,80 13,40 6,60 10,0 7,40
TOTALES (g/L)

Se observa que en el ensayo 2, trabajando con una

mayor temperatura, 120ºC, y manteniendo las
mismas condiciones de hidrolice utilizadas en el
C:S\L + ensayo 7 (S/L - 1:10 y concentración del ácido -
- 1,0% v/v), se obtuvo una menor conversión a xilosa
A:Concentración
ácido (25 g/L) y una mayor formación de inhibidores
AC
(0,26 g/L de ácido acético; 7,60 g/L fenoles
AB totales), conforme tablilla 4. Tal hecho es atribuido
B:Temperatura al uso de altas temperaturas en la hidrolice ácida, lo
BC
que resultó en una mayor degradación de la xilosa,
una mayor liberación del grupo acetíl (ácido
0 2 4 6 8
acético) y una mayor solubilización parcial de la
Efectos normalizados lignina, lo que justificó la presencia de mayores
concentraciones de compuestos fenólicos y ácido
Figura 1. Influencia de las variables en la
acético en el hidrolizado de la fibra de maíz.
hidrolice ácida de la fibra de maíz.
De acuerdo con la figura 1, se nota que una mayor
Concentración de Xilosa relación sólido-líquido ocurre una influencia
negativa en la obtención de xilosa en la hidrolice
ácida de la fibra de maíz, mientras eso la
concentración del ácido influencia positivamente,
donde se puede observar también que la
temperatura no influencia significativamente en el
proceso de hidrolice.

Por la figura 3, superficie de respuesta, se puede

ver claramente la región de mejor conversión de la
0,5 1,0 110 120 1:10 1:5 fracción hemicelulósica de la fibra de maíz en
xilose, condiciones que también se obtuvo menor
Temperatura S\L
Concentración formación de inhibidores.
ácido
Figura 2. Efectos de las variables en la
Concentración de Xilosa
 4. CONCLUSÍON 7. Rocha, G.J.M. (2000), Deslignificação do
bagaço da cana de açúcar assistida por
En este trabajo, la hidrolice ácida de la fibra de oxigênio. Tese de Doutorado, Instituto de São
maíz se mostró eficiente en la degradación de la Carlos – USP, São Carlos, Brasil.
fracción hemicelulósica (cadena de xilana) de la
paja de maíz y en la producción de un hidrolizado 8. Tsao. G. T.; Alani, D. I.; Moo-Young, M.
rico en xilosa objetivando la producción de etanol. (1986), Conversion of cellulosics. Structures of
cellulosic material and their hydrolysis by
Tabilla 5: Condiciones usadas y condicione óptima. enzymes. Acid hydrolysis and chemicals from
cellulosics. Perspectives in Biotechnology and
Factor Bajo Alto Óptimo Applied Microbiology. Elsevier.
% do ácido (v/v) 0,5 1,0 1,0
Temperatura (°C) 110,0 120,0 110,0
S/L (g masa seca:ml de 1:10 1:5 1:10
sol.)

5. GRACIAS

Escuela de Ingeniería de Lorena - Universidad de

São Paulo (EEL-USP)

Santander

CNPq

REFERENCIAS

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Biodegradation of cellulosic material:
substrates, microorganisms, enzyme and
products. Enzyme and Microbial Technology,
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