Manual de Hematologa

HIAEP Sor Mara Ludovica

Calle 14 N La Plata.
TEL: 0221-4535901
interno 1728

Resistencia Osmtica Eritrocitaria

Fecha de emisin: 11/11/2016

H 01
Versin:1

Resistencia osmtica eritrocitaria (ROE)

ALCANCE:
Servicio de hematologa.
PRINCIPIO
Se evala la habilidad de los glbulos rojos para incorporar agua antes de la lisis,
determinado por la relacin superficie / volumen.
Los esferocitos tienen mas volumen por lo tanto son ms susceptibles a la hemolisis,
independientemente de la causa de la esferocitosis: relacin superficie/volumen mas
baja.
En la esferocitosis hereditaria la curva puede 2 poblaciones, una de los hemates
normales y la otra de los ms frgiles. Despus de la esplenectoma la curva da mas
homognea, indica un espectro continuo de clulas, de mas frgiles a normales.
Disminucin de la ROE (concentracin ms alta)
Esferocitosis hereditaria
Estomatocitosis congnita
Anemia hemoltica autoinmune con esferocitosis
Anemia hemoltica microangiopatica
Aumento de la ROE (concentracin ms baja)
Talasemias
Anemia ferropenica
Hemoglobinopata S
Hemoglobinopata C
En las anteriores patologas estn presentes los leptocitos con relacin
volumen/superficie ms baja
Xerocitosis congnita
MUESTRA
Sangre heparinizada. No puede usarse oxalato o citrato por su efecto sobre la
concentracin salina del medio hipotnico.
MATERIALES Y REACTIVOS
-Solucin madre de ClNa (90g/L) tamponada a pH 7.4
ClNa 90 g/L
Nombre
Elaborado por
Revisado por
Aprobado por

Horrach Heredia, Brenda B

Firma

Fecha
26/06/2013

Manual de Hematologa
HIAEP Sor Mara Ludovica
Calle 14 N La Plata.
TEL: 0221-4535901
interno 1728

Resistencia Osmtica Eritrocitaria

Fecha de emisin: 11/11/2016

H 01
Versin:1

PO4Na2 12.H2O 27.21 g o PO4HNa2 anhidro 13.66 g

PO4Na2 2.H2O 2.43 g
H2O csp 1000 mL
Bien tapada y a 4 C puede conservarse durante meses.
-Soluciones Hipotnicas de Trabajo
Se prepara a partir de la solucin madre mediante diluciones en H2O destila.
Una vez preparadas estas soluciones pueden mantenerse durante varias semanas a
4 C.
Hemolisis %
0% Blanco
0
0-5
0-40
40-85
65-100
85-100
95-100
100%

Solucin Madre
(mL)
1
0.94
0.88
0.83
0.77
0.72
0.66
0.61
0.55
0.50
0.44
0.38
0.33
0.27
0.22
0.16
0.11

H2O destilada
(mL)
9
9.05
9.12
9.17
9.23
9.28
9.34
9.39
9.45
9.5
9.55
9.61
9.66
9.72
9.77
9.83
9.88

Concentracin ClNa
g/L
9.0
8.5
8.0
7.5
7.0
6.5
6.0
5.5
5.0
4.5
4.0
3.5
3.0
2.5
2.0
1.5
1.0

Procedimiento
A partir de la sangre recin extrada, incubarla durante 24 Hs a 37C.
1. Colocar 5 mL de cada solucin hipotnica en tubos de centrifuga y aadir a
cada una 50 ul de sangre total (es crtico que la cantidad aadida a cada tubo
sea la misma)
Agitar suavemente por inversin.
Dejar a temperatura ambiente durante 60 minutos. Agitar suavemente
2. Centrifugar 5 minutos a 1200-1500 g.
3. Separar el sobrenadante.
Nombre
Elaborado por
Revisado por
Aprobado por

Horrach Heredia, Brenda B

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Fecha
26/06/2013

Manual de Hematologa
HIAEP Sor Mara Ludovica
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TEL: 0221-4535901
interno 1728

Resistencia Osmtica Eritrocitaria

Fecha de emisin: 11/11/2016

H 01
Versin:1

4. Leer a 540 nm en espectrofotmetro.

Considerando 100% Hemolisis el tubo con 1 g/L y 0% el de 9 g/L
La ROE se expresa como la concentracin de ClNa necesaria para producir el 50%
de hemolisis
Cargar los resultados en la planilla de clculo ubicada en Mis documentosRGO,
donde obtenemos, por ejemplo, la siguiente curva:

Realizar a lectura en el 50% de hemolisis.

Resultados
Valores de Referencia: 4.5-5.2 g/L
Bibliografa
-

Hematologa Prctica Dacie y Lewis 10 edicin 2008

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Horrach Heredia, Brenda B

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Fecha
26/06/2013