Elemente de fotobiologie

1. Introducere
2. Interaciunea radiaiilor neionizante cu substana
3. Legile fotochimiei
4. Efectele radiaiilor vizibile
5. Efectele radiaiilor ultraviolete

Introducere

Fotobiologia studiaz interaciunea radiaiilor electromagnetice neionizante

cu sistemele biologice.

Spectrul radiaiilor electromagnetice

Undele electromagnetice sunt unde transversale care au component

magnetic i o component electric, vectorii electric i magnetic fiind
perpendiculari unul pe cellalt i pe direcia de propagare (figura). Mrimile
ondulatorii caracteristice acestor unde sunt lungimea de und , frecvena i
perioada T. Din punct de vedere al caracteristicilor ondulatorii spectrul radiaiilor
electromagnetice se ntinde de la undele radio lungi caracterizate prin frecvene

mici i lungimi de und mari (km) pn la razele de mare energie, de frecvene

mari i lungimi de und mici () (figura).

Energia radiaiilor electromagnetice i interacia lor cu substana

Conform relaiei lui Planck, energia unei unde electromagnetice este:

E = h = hc/
unde h = 6,62 10-34 Js, constanta lui Planck
c = 3108 m/s, viteza luminii n vid.

Din punct de vedere al energiei transportate, radiaiile electromagnetice se

clasific n:
I. Radiaii neionizante
II. Radiaii ionizante
La interacia cu substana, radiaiile electromagnetice cedeaz energie
atomilor i moleculelor. Efectele interaciei pot fi:
- creterea energiei de agitaie termic a atomilor i moleculelor
- excitarea atomilor i moleculelor (electronii ce intr n alctuirea acestora
pot trece pe nivele de energie superioare, tranziiile fiind cuantificate)
- ionizarea atomilor i moleculelor (extragerea electronilor din nveliurile
electronice ale acestora).

Energia

de

ionizare

principalilor

atomi

care

intr

structura

biomoleculelor este: 13,54 eV pentru hidrogen, 13,17 pentru oxigen, 11,24

pentru carbon i 14,51 pentru azot (1 eV = 1,6 10-19 J). Se observ c energia cea
mai mic de ionizare este cea pentru carbon. Se poate calcula lungimea de und
a radiaiei care are energia suficient pentru a produce ionizarea carbonului:
E = hc/ = hc/E = 6,62 10-34 3 108/11,241,6 10-19= 110 nm
n spectrul radiaiilor electromagnetice, numai radiaiile X i ndeplinesc
condiia ca lungimea de und s fie mai mic de 100 nm, deci numai acestea pot
produce ionizri ale principalilor atomi din componena materiei vii. De aceea,
radiaiile X i se numesc radiaii ionizante. Radiaiile cu lungimea de und
mai mic de 100 nm , ncepnd cu UV (radiaii ultraviolete) extrem(100-190 nm)
i mergnd spre undele radio lungi sunt radiaii neionizante.

Radiaiile neionizante din domeniul radiaiilor vizibile i ale celor cu lungimi

de und apropiate de acestea i interacia lor cu substana constituie obiectul de
studiu al fotobiologiei. Ele sunt radiaii cu care aproape toate sistemele vii
convieuiesc i sunt absorbite selectiv de ctre moleculele componente ale
sistemelor vii.

Interaciunea radiaiilor neionizante cu substana

Se realizeaz prin:
1.

Transferul energiei undelor electromagnetice ctre molecule. Energia

total a acesora va crete:

E = Ee + E v + E r
Ee energia electronilor
Ev energia de vibraie

Er energia de rotaie
Prin creterea energiilor de rotaie i vibraie are loc nclzirea substanei
(creterea agitaiei termice):
E = Ev + Er
Radiaiile infraroii (IR) pot mri numai energiile de vibraie i rotaie ale
moleculelor, pe cnd radiaiile ultraviolete pot mri toate tipurile de energie.

2. Transferul energiei undelor electromagnetice ctre electronii periferici ai

atomilor i moleculelor, Ee. Prin acest transfer se produce excitarea atomilor i
moleculelor, respectiv trecerea lor pe nivele de energie superioare. Conform
principiului de incertitudine al lui Heisenberg, electronii nu pot rmne mult timp
n stare excitat (10-8 10-6 s n starea de singlet cu spinii orientai antiparaleli 10-3 100 s n starea de triplet cu spinii orientai paralel). Dup aceste interval
de timp, electronii se dezexcit, iar dezexcitarea poate fi de dou feluri:
a dezexcitare radiativ
b dezexcitare neradiativ.
Dezexcitarea radiativ este numit i fotoluminescen. Absorbia
fotonului este urmat de emisia unui foton cu o lungime de und mai mare sau
egal cu cea a fotonului absorbit. Exist dou tipuri de fotoluminescen:
fluorescena (reemisia din starea singlet) i fosforescena (reemisia din starea
triplet). Atunci cnd lungimea de und n reemisie este egal cu cea a fotonului
absorbit, fluorescena se numete de rezonan. Durata fluorescenei este foarte
mic, practic emisia se face n acelai timp cu excitarea. n fosforescen emisia
continu i dup ncetarea excitrii.

3.

Transferul energiei undelor electromagnetice ctre molecule, avnd

drept rezultat creterea reactivitii chimice a acestora ori producerea unor

reacii fotochimice. Dintre aceste reacii fotochimice se pot meniona: izomerizri

i rearanjri interne ale moleculei, polimerizri sau combinri ntre molecule,

fotosensibilizri.

Exemple
Reacia cu o alt molecul, reacie care altfel nu s-ar fi produs (M* molecula fotoexcitat):
M* + A D
Reacia de dimerizare:
M* + M MM
Fotosensibilizarea - energia absorbit de M este transferat speciei N care
devine reactiv:
M* + N M + N*
Radiaiile respective sunt absorbite de ctre grupri speciale ale unor
molecule, grupri care se numesc cromofori.
Exemple de grupri cromofore: - N = N - , = C = O, - N = O
Aceste reacii fotochimice se desfoar conform unor legi.

Legile fotochimiei

1. Legea Grotthus-Draper: radiaia trebuie s fie absorbit de o

molecul nainte ca reacia fotochimic s aib loc; dac substana iradiat nu
absoarbe radiaii, nu se produce reacia fotochimic.

2. Legea Stark-Einstein: radiaia absorbit nu duce n mod obligatoriu la

o reacie fotochimic, dac totui se produce reacia, pentru fiecare molecul
transformat este necesar un singur foton. n legtur cu aceasta se definete
randamentul cuantic :
= Nm/Nf
Nm numrul de molecule (respectiv moli) care au reacionat
Nf numrul de fotoni (respectiv Einsteini) care au fost absorbii
1 Einstein = NA h

n sistemele biologice efectele la nivel molecular determin efectele la

nivel celular sau la cel al organismului.

Efectele radiaiilor vizibile

Fotosinteza

Const n conversia energiei radiante n energie chimic folosit n sinteza

unor molecule complexe. Celulele plantelor verzi conin organite celulare numite
cloroplaste, n care se afl pigmeni clorofilieni i carotenoizi. Clorofilele sunt
molecule complexe care conin grupri cromofore n sisteme de duble legturi
conjugate. Prin absorbia luminii de ctre gruprile cromofore se produce
excitarea electronilor pe nivele superioare de energie. Revenirea lor pe nivelul
fundamental se face n trepte, de-a lungul lanului transportor de electroni. n
fiecare treapt are loc o reacie de fosforilare a ADP cu formare de ATP. Astfel,
energia luminoas este transformat n energie chimic nmagazinat n ATP.
Fotosinteza se realizeaz prin dou tipuri de reacii:

- reacii la lumin, direct dependente de energia luminoas

- reacii la ntuneric, n absena luminii

ntr-o variant foarte simplificat, reaciile la lumin sunt cele de fotoliz

a apei, de formare a NADPH (nicotinamid-adenin dinucleotid-difosfat) i a ATP,
n timp ce n reaciile la ntuneric are loc reducerea CO2 cu formarea de
polimeri hexozici.

2 H2O + h

O2 + 4H+ + 4 e-

2 NADP + 2 H+ + 2e-

CO2 + 2 NADPH + 2 H+ + 2e-

2 NADPH

(CH2O) + H2O + 2 NADP

h
n(H2O) + nCO2

(CH2O)n + nO2

Ionii de H se fixeaz pe NADP i reduc la NADPH, ionii oxidril se

combin ntre ei genernd ap, oxigen i electroni care trec de-a lungul
lanului de transportori cednd treptat energia pentru sinteza ATP.
Bilanul n sinteza moleculei de glucoz este:
h
6H2O + 6CO2

C6H12O6 + 6O2

Aceste reacii se produc n nite structuri lamelare (discuri

lipoproteice) ale cloroplastelor numite membrane tilacoide sau tilacoizi
(figura).

Fotorecepia cu ajutorul pigmenilor rodopsinici

Rodopsinele vizuale, rodopsina i iodopsinele, fac parte din clasa

proteinelor retinale, al cror cromofor este aldehida vitaminei A numit retinal.
Sub aciunea radiaiilor luminoase vizibile se produce izomerizarea retinalului din
configuraia 11-cis n cea all-trans i desprinderea acestuia de opsin. n acest
mod se produce activarea rodopsinei i se declaneaz ciclul de reacii
biochimice la ntuneric. Energia radiaiei luminoase este utilizat pentru
declanarea excitaiei vizuale. Pentru ntreaga cascad de reacii biochimice ce
urmeaz, i care se ncheie cu nchiderea canalelor de Na i Ca i hiperpolarizarea
membranei, este utilizat energia metabolic.

Bacteriorodopsina, de asemenea membru al familiei proteinelor retinale,

reprezint

pomp

protonic

activat

de

lumin.

Cromoforul

bacteriorodopsinei este tot retinalul care la ntuneric se afl n configuraia alltrans i care prin fotoizomerizare trece n configuraia 13-cis. Urmeaz o serie de
reacii nsoite de modificri conformaionale ale bacteriorodopsinei, reacii care
au ca efect translocarea unui proton din citoplasm n exteriorul celulei.
Gradientul protonic astfel creat poate folosi la sinteza ATP prin intermediul ATP sintazei. Transportul de protoni este cuplat cu fosforilarea ADP (ADP + P ATP) i
cu evacuarea ionilor de Na din celula bacterian.

Efectele radiaiilor ultraviolete (UV)

Radiaiile UV se situeaz n spectru dincolo de radiaiile vizibile de lungime

de und mic (violet) i din punct de vedere al efectelor biologice sunt clasificate
astfel:
UV-A, cu lungimea de und cuprins ntre 315-400 nm
UV-B, cu lungimea de und cuprins ntre 280 - 315 nm
UV-C, cu lungimea de und mai mic de 280 nm.

Cea mai mic energie o au radiaiile UV-A i cea mai mare UV-C. Energia
radiaiilor UV se afl n domeniul 3-7 eV, deci este mai mic dect energia de
ionizare a principalilor atomi constitueni ai biomoleculelor. Radiaiile UV pot
produce ruperi de legturi chimice i reacii fotochimice. Dintre efectele radiaiilor
UV se pot meniona urmtoarele:
- Dimerizarea unor perechi de baze azotate (ex. dimerizarea timinei) cu
sudura lanurilor de ADN n locul respectiv. Aceast sudur mpiedic copierea
informaiei de pe ADN pe ARN. Una din consecinele dimerizrii este aciunea
bactericid al UV, prin mpiedicarea transcripiei este oprit diviziunea celular.
Demonstrarea acestui lucru se poate face prin fotoreactivare: bacteriile iradiate
cu UV sunt imediat iradiate cu radiaii vizibile (380-450 nm). Se activeaz prin
aceasta o enzim care desface dimerii timinei. Reactivarea nu se face ns 100%,
eficacitatea procesului fiind determinat prin intermediul unei curbe doz-efect.
- Efecte asupra ADN: formare de dimeri, hidratarea bazelor pirimidinice,
ruperea legturilor de H, ruperea lanului de ADN, formarea unor legturi cu
proteinele (ADN-protein cross-links).
- Producere de eritem (arsuri tegumentare) UV-B (290-320 nm).
-

Pigmentarea

pielii

(UV-A,

320-420

nm).

melanocite

are

loc

transformarea tirozinei n melanin cu ajutorul enzimei tirozinaz. Pigmentul

absoarbe apoi 90-100% radiaiile UV realiznd o protecie contra insolaiei.
- Transformarea ergosterolului n vitamina D 2 (antirahitic). Spectrul de
aciune are un maximum la 280 nm.

- Inflamaia corneei ( de aceea se recomand ochelari din sticl special

pentru protecie).
Protecia cea mai important fa de aciunea nociv a UV de energii mari
este realizat prin stratul de ozon (O 3) din partea superioar a atmosferei.
Oxigenul absoarbe radiaiile UV-C i se produc reaciile:
O2 + h O + O

O + O2 O3
O - radicali liberi foarte nocivi i activi
Ozonul rezultat absoarbe radiaiile UV-B cu lungimi de und mai
mici de 300 nm care sunt foarte duntoare pentru organismele vii.

h + O3 O2 + O

Fotoproduii rezultai reintr n reaciile anterioare. n acest fel radiaiile UV

duc la formarea de ozon n straturile superioare ale atmosferei.