CURS 1

METODE DE PRELEVARE
SI
PREGATIRE A PROBELOR

Programul de studiu: MASTERAT

Sectia: CHIMIE CLINICA II
CMR6312 / Colocviu

Lector Dr. Cobzac Simona

STRUCTURA

Curs 2 ore/saptamana

Cap 1. Prelevarea probelor

Cap 2. Pregatire probelor organice
Extractia compusilor semivolatili din probe lichide
Extractia compusilor semivolatili din probe solide
Extractia compusilor volatili
Cap 3. Pregatirea probelor anorganice
Cap 4. Pregatirea probelor pentru analiza acizilor nucleici
Cap 5. Pregatirea probelor pentru analiza microscopica si spectroscopica
Bibliografie
1. Simion Gocan, Cobzac Simona, Metode moderne de prelucrare a probelor organice ,
Ed. Risoprint, Cluj-Napoca, 2006 biblioteca facultatii
2. Somenath Mitra (Editor), Sample preparation in Analytical Chemistry, John Wiley
& Sons Inc., 2003, New Jersy
3. R.A.Mayers, Encyclopedia for Analytical Science, Applications, Theory and
Instrumentation, Forensic Science, John Wiley & Sons Ltd, Chichester, 2005
4. F.Taroni, S. Bozza, A. Biedeermann, P. Garbolino, C. Aitken, Data Analysis in
Forensic Science: A Bayesian Decision Perspective, John Willey and Sons Ltd,
Chichester, 2010
2

STRUCTURA

Laborator/seminar 1 ora/saptamana

L 1. Extractia compusilor organici din matrici lichide (4 ore).

L 2. Extractia compusilor organici din matrici solide (4 ore).
R Pregatire si sustinere referat privind diferite metode de prelevare a probelor
studiul litaraturii de specialitate/articole (4+2 ore).
Bibliografie
1. Referate de laborator
2. Articole literatura de specialitate

Nota finala
Examen 80%
Referat 10%
Lucrari practice de laborator 10%

CAP I.
PRELEVAREA
PROBELOR

1.

Introducere

2.

Aspecte fundamentale de prelevare

3.

Planul de sampling

4.

Aspecte practice

5.

Aspecte specifice

Introducere
Aplicatii
Industria
metalurgica
Industria
alimentara

Industria produse
cosmetice

Industria
farmaceutica

Medicina
chimie clinica

Controlul calitatii
mediului (aer, apa, sol)

Sport control doping

5

Criminalistica

Introducere

Analiza

Controlul
produse
(alimente,
medicamente,
cosmetice, etc.)

Materii prime

Control interfazic

Analiza
Cercetare
Determinari de
rutina

Investigareexpertiza

Proceduri analitice standardizate

Validare

O
R
I
C
E
T
O
T
U
L

Proceduri nestandardizate
6

Introducere
Prelevarea probei
colectarea probei,
transport, conservare

Pregatirea probei pentru analiza

aducerea probei in solutie,
indepartarea interferentilor

Analiza propriu-zisa

Rezultate
(interpretare, raportare)

Introducere

RELATIA SAMPLING ALTE ETAPE ANALITICE

Introducere

Samplingul nu operaie izolat, ci n strns corelaie cu celelalte etape;

Relaia dintre diferitele etape necesit un studiu atent al problemei
ridicate necesitand o planificare atent a prelevarii.

Care este scopul analizei?

Care sunt parametrii relevanti pentru obiectivele analizei?
Care este nivelul de calitate care trebuie asigurat rezultatelor?
1. Scopul analizei
- Analize de cercetare stiintifica: identificarea unor marcheri specifici - asociati
unor boli, dezvoltarea criteriilor de stabilire a limitelor normale, respectiv a
valorilor cu semnificatie patologica, etc.
- Analize de rutina: analiza unor parametrii fizico-chimici si biochimici ai
sangelui in vederea stabilirii unui diagnostic
- Analize cu relevanta juridica determinarea alcoolemiei in caz de accident
9
rutier

Prelevarea probelor

2. Parametrii selectati

Introducere

- Parametrii selectai sunt relevani pentru obiectivele analizei?

- Parametrii selectai sunt exact definii? Aceasta este foarte important
deoarece probele de mediu pot conine multe substane n diferite forme fizice
i chimice, prelevarea i metoda de analiz alese sunt dictate de modul n care
se face msurtoarea n vederea atingerii obiectivelor. Astfel dac se
urmrete evaluarea toxicitii metalelor, mobilitatea lor prin mediu sau
tendina lor de a se acumula n organismele vii, formele care trebuie
determinate trebuie clar identificate, deoarece concentraia general a
metalului nu d informaii despre potenialul risc.
3. Calitate datelor
-Care este exactitatea si precizia necesara?
-Poate fi obinut corect informaia necesar cu tehnica disponibil? Dac nu,
persoana care solicit analiza trebuie sa fie de acord cu un compromis intre
calitatea informaiei cerut i cea care poate fi obinut.
10

Prelevarea probelor

Aspecte fundamentale

DEFINITIE
Prelevare/sampling = operatie de extragere a unei parti dintr-un intreg
Unitatea / unitatile sunt prea mari pentru a fi analizate
Din motive economice, analiza intregii populatii
ar costa prea mult;
ar fi prea multa munca (eficienta muncii)
ar lua prea mult timp
De
Utilizarea
ca se face intregii
prelevarea
cantitati
probelor?
in teste distructive nu ar mai permita
efectuarea altor teste/ nu ar mai ramane nimic de consumat
Prelevare/sampling =totalitatea operatiilor efectuate pana in momentul
in care proba este supusa pregatiriii pentru analiza

CERINTA
(CONDITIE)

proba prelevata sa fie reprezentativa

11

Aspecte fundamentale
Natura populatiei
-Omogena/Neomogena (heterogena)

Prelevarea probelor

Cerinta de baza:

sa reprezinte
caracteristicile
populatiei din
care a fost
extrasa
a)
b)

rezultatul obtinut
reprezinta concentratia
medie a intregii populatii
sa prezinte neomogenitatea
populatiei/repartitia
neomogena a unui analit

P
u
n
c
t
e
c
h
e
i
e

Natura si concentratia analitului

-Proprietatile fizico-chimice (stare de
agregare, volatilitate, reactivitate chimica)
Caracteristica determinata
-Atribut/variabila

Factorii de mediu
-Proba prelevata este extrasa din contextul
natural (apa subterana)
Contaminarea
-Probei in timpul prelevarii sau in timpul
transportului
-Contaminarea mediului din care s-a
prelevat proba

Conservarea/Stocarea
-Proba prelevata se poate deprecia in timp
12
si nu va mai fi reprezentativa pentru
populatia supusa analizei

Prelevarea probelor

Aspecte fundamentale

Linii generale privind tehnica de prelevare a probelor

Se discuta in acest curs liniile generale ale prelevarii probelor, si anume:
1. cantitatea de proba prelevata,
2. conservarea si pastrarea probelor,
3. selectarea conatainerelor
4. echipamentelor de prelevare,
5. secventele de prelevare ale matricilor si a analitilor,
Exista si alte subiecte importante cum ar fi
1. impachetarea,
2. etichetarea,
3. expeditia/transportul probelor
4. custodia probelor
5. trasabilitatea
Executarea oricarei etape in mod defectuos va duce la invalidarea datelor
obtinute.
13

Planul de sampling

Prelevarea probelor
Planul de sampling
DOCUMENT SCRIS

Elaborarea planului de
sampling

CUM

CE

CU CE

DE UNDE

IN CE CANTITATE

CAND / CU CE
FRECVENTA

Scopul analizei
Natura proprietatii analizate
atribut / variabila
caracteristicile analitului
Natura populatiei
omogena / eterogena
stare de agregare
Natura analitului
Tehnica de analiza
Calitatea rezultatelor

CATE PROBE
Planul de sampling trebuie s specifice ori ce alte msurtori ce se realizeaz n
cmp (pH, temperatur), variabile fizice, meteorologice, hidrologice care trebuie
14
nregistrate sau msurate n momentul prelevrii.

Prelevarea probelor

Planul de sampling

Natura populatiei

In stabilirea tipului planului de sampling este foarte

important sa definim natura populatiei din care se realizeaza prelevarea.
Populatie finita/infinita: o populatie este considerata finita daca este clar
delimitata/are dimensiunile clar definite (camion de mere, sac de faina,
cisterna de lapte). O populatie este considerata infinita cand dimensiunea nu
este definita. Pentru a putea stabili un plan de sampling in cazul populatiilor
infinite se recomanda delimitarea acestora in populatii finite.

Populatie compartimentata/continua: populatiile compartimentate sunt

acelea pentru care se pot defini sub-unitati. Numarul si marimea sub-partilor
va influenta planul de sampling. Populatiile continue sunt acelea pentru care
nu se pot defini suprafete fizice de separare intre diferitele parti.
Populatii omogene/neomogene: prin populatie onogena se intelege acea
populatie pentru care proprietatile sunt constante/identice in intreaga masa.
Intr-o populatie heterogena propretatile nu raman constante, variind in spatiu,
in unele cazuri putand fi observate suprafete de separare intre faze. Populatiile
omogene nu ridica probleme deosebite de prelevare, probele selectate
prezentand aceleasi proprietati ca si intreaga populatie. In practica majoritatea
15
probelor sunt heterogene, planul de sampling depinzand de gradul de
neomogenitate.

Prelevarea probelor

Planul de sampling

Natura proprietatii analizate

atribut = proprietate care exista sau nu (are sau nu virusul HIV, este sau nu
drogulconstituit ca dopaj al sportivului?)
variabila = proprietate care poate fi masurata (cat alcool in sange?)
Pentru determinarea proprietatilor tip variabil sunt necesare un numar mai
mic de probe decat pentru determinarea atributelor.
Tipul proprietatii masurate este puternic corelata cu importanta rezultatului
implicatiile pe care le are rezultatul obtinut in luarea deciziilor ulterioare. De
exemplu, daca proprietatea masurata este prezenta substantelor daunatoare
(bacterii, chimicale toxice, etc), implicatiile rezultatului, daca se face o gresala
in etapa de prelevare, sunt mult mai serioase decat daca parametrul masurat
este un parametru de calitate (culoare, textura).

16