BIORREACTORES

1. BIORREACTORES
Un biorreactor es sin duda, uno de los equipos fundamentales de la
microbiologa industrial. Es un recipiente donde se realiza el cultivo, su
diseo debe asegurar un ambiente uniforme y adecuado para la
reproduccin y el hbitat de los microorganismos.
En algunos casos, un biorreactor es un recipiente en el que se lleva a
cabo un proceso qumico que involucra organismos o sustancias
bioqumicamente activas derivadas de dichos organismos. Este proceso
puede ser aerbico o anaerbico.
Dispositivo fsico donde se efecta un proceso biolgico (bioreaccin)
bajo condiciones ambientales controladas. En un proceso biolgico se
tiene dos sistemas interactuando:
Sistema biolgico
Medio ambiente
Recipiente donde se lleva a cabo reacciones bioqumicas y/o
bioprocesos, sea con enzimas, microorganismos o con clulas vegetales
y animales, viables y no viables. Todas estas especies se conocen como
biocatalizadores.
Fermentador: se utilizan clulas.
Reactor enzimtico: se utilizan enzimas.
Un biorreactor puede ser tambin un dispositivo o sistema empleado
para hacer crecer clulas o tejidos en operaciones de cultivo celular.
Estos dispositivos se encuentran en desarrollo para su uso en ingeniera
de tejidos.
En trminos generales, un biorreactor busca mantener ciertas
condiciones ambientales propicias (pH, temperatura, concentracin de
oxgeno) al organismo o sustancia qumica que se cultiva.

PARA QUE SIRVE EL BIORREACTOR?

Las tareas que debe desempear el biorreactor, se resumen en:
1- Mantener las clulas uniformemente distribuidas en todo el
volumen del
cultivo a fin de prevenir la sedimentacin o la
flotacin.
2- Mantener constante la temperatura.
3- Minimizar los gradientes de concentracin de nutrientes.
4- Para mantener el cultivo puro; una vez que todo el sistema ha
sido
esterilizado
y
posteriormente
sembrado
con
el
microorganismo deseado.

1.1. BASES MICROBIOLGICAS PARA LA COMPOSICIN

DE UN BIORREACTOR
Los sistemas biolgicos que determinan el metabolismo celular de
cultivo y el modo procesal-biolgico del sistema son:

Ejemplo de algunas bases microbiolgicas

CLULAS Y MICROORGANISMOS ANAERBICOS
Bacterias en su gran mayora, son microorganismos de metabolismos
degradativo
(catablico),
generalmente
unicelulares,
estos
microorganismos son autnomos y nutricionalmente independientes
(auttrofos); sus clulas (cuerpos) no respiran (no utilizan la gluclisis
para la respiracin celular), en cambio, utilizan vas alternas, donde una
molcula orgnica, producida durante el proceso metablico
(catabolismo), es utilizada como aceptor de electrones, en un proceso
bioqumico conocido como respiracin oxidativa; esta molcula es
reducida a producto orgnico en un proceso comnmente denominado
fermentacin.
CLULAS Y MICROORGANISMOS FACULTATIVOS
Son ambivalentes, tienen la capacidad de vivir y sobrevivir entre
ambientes: aerbicos (presencia de oxigeno) y anaerbico (ausencia de
oxigeno); son microorganismos de metabolismo mixto por lo que,
pueden degradar, a partir de diferentes sustratos (materia prima), tanto
orgnicos como inorgnicos. Pese a su versatilidad, sus mayores
representantes son microorganismos que presentan relaciones parsitas
o simbiontes tales como: hongos y levaduras, por lo que no son muy
extensos.

Hongos

Levadura

CLULAS Y MICROORGANISMOS AERBICOS:

Pertenecen en su mayora al Reino Eucariota- pero tambin los hay

procariotas- son microorganismos y clulas que respiran (utilizan la
gluclisis como forma de respiracin celular); por lo que su metabolismo
es constructivo (anablico) y deben de obtener sus nutrientes de
diferentes fuentes. Sus principales grupos estn representados por:
bacterias y microorganismos aerbicos, plantas y animales: cuyas
clulas pueden cultivar en suspensiones celulares o bien, en diferentes
arreglos artificiales o modificadas.
A continuacin alguna de los posibles sistemas de cultivo que se
pueden realizar en el biorreactor:
CULTIVO MICROBIANOS
BACTERIAL (CO2)

ANAERBICOS-

FERMENTADOR

Los microorganismos de metabolismo anaerbicos son los ms

simples que todos, tan solo necesitan de un medio de cultivo
adecuado, agitacin vigorosa y cierta cantidad de CO 2 disueltos
(COD) para crecer y multiplicarse.

Saccharomyces
CULTIVOS MICROBIANOS
BACTERIAL

cerevisiae.
FACULTATIVOS-

FERMENTADOR

Los microorganismos facultativos toleran la presencia de oxigeno

de bajas concentraciones y adems de un sustrato adecuado, solo
requieren agitacin moderada y un medio de cultivo para crecer y
desarrollarse.

Ejemplo de microorganismos usados en un biorreactor

CULTIVOS
MICROBIANOS
BACTERIAL (O2)

AERBICOS-

FERMENTADOR

Los microorganismos aerbicos necesariamente requieren la

presencia de oxigeno (aire) disuelto (OD) para sobrevivir; adems
agitacin moderada y un medio de cultivo rico en nutrientes para
poder crecer y desarrollarse.
El crecimiento bacteriano necesita de una serie de sustancias y de
ambientes que faciliten su desarrollo. Estas caractersticas pueden
ser: Fsicas teniendo en cuenta la temperatura, podemos clasificar
a los microorganismos en:
-MESFILOS: son capaces de desarrollarse a temperaturas que
pueden oscilar entre los 20-45C.
-TERMFILOS: son capaces de desarrollarse a temperaturas
superiores a los 45C.
-PSICRFILOS: son capaces de desarrollarse a temperaturas que
oscilan entre 0-20C.

COMPONENTES BSICOS DE UN BIORREACTOR:

 El

recipiente:
debe ser esterilizable.
resistente a la corrosin.
construido con materiales que
no sean txicos.
vidrio de espesor apropiado.
acero inoxidable.

Entrada/salida de aire o gases.

Entrada del medio de cultivo y
salida del producto obtenido.
Alimentacin del inculo.
Lneas de muestreo.
Sistemas de agitacin mecnica.

CRECIMIENTO BACTERIANO
El crecimiento bacteriano necesita de una serie de sustancias y de
ambientes que faciliten su desarrollo. Estas caractersticas pueden ser:
FSICAS
Temperatura
Teniendo en cuenta
microorganismos en:

la

temperatura,

podemos

clasificar

los

Mesfilos: son capaces de desarrollarse a temperaturas que

pueden oscilar entre los 20-45C. Temperatura ptima = 35-37C.

Termfilos: son capaces

superiores a los 45C.

Sicrfilos: son capaces de desarrollarse a temperaturas que oscilan

entre 0-20C.

PH

de

desarrollarse

temperaturas

El pH ptimo en el que se desarrollan la mayora de los microorganismos

es neutro, que oscila entre 6,5-7,5. Los m.o que se desarrollan a pH = 4
se denominan acidfilos. En ocasiones, como consecuencia del
metabolismo bacteriano, se producen residuos que acidifican el medio.
Para mantener el medio neutro se utilizan tampones. El ms utilizado es
el de sales fosfato, que adems sirven de alimento a los
microorganismos, Presin Osmtica: es la presin que se origina por
difusin o intercambio de soluciones de diferente concentracin a travs
de una membrana. La mayora de los microorganismos habitan en
medios hipotnicos. Su membrana debe ser selectivamente
semipermeable para que se pueda dar ese fenmeno.
QUMICAS
Oxgeno O2
A pesar de ser un elemento fundamental para la mayora de los
organismos, es bastante txico y con efectos corrosivos.
Carbono
Es un elemento que forma parte de la estructura bsica de la materia
viva. Las fuentes a partir de las cuales los m.o obtienen este elemento
son:Las protenas (en forma de peptonas. Sirve para diferenciar m.o, por
ejemplo, cuando tenemos un medio de cultivo con lactosa y peptonas).
Los hidratos de carbono (fundamentalmente la glucosa y la lactosa. Se
usa cuando no nos importa el tipo de m.o que crezca en ese cultivo).

1.2 TIPOS DE BIORREACTORES

Biorreactor de tanque con agitacin mecnica.

Es el ms utilizado en la industria por tener bajos costos de

operacin.

Son de acero inoxidable >20 l.

Poseen rodetes (agitadores).

Se utilizan solo al 70-80% de su capacidad para dar espacio a

espuma.

La relacin altura y dimetro es variable aunque la ms barata es

de 1.

El enfriamiento se da por medio de serpentines internos.

Se utilizan en reacciones con enzimas libres e inmovilizadas as

como para cultivo de clulas en suspensin e inmovilizadas.

Biorreactor de columna de burbujas.

La agitacin, aireacin y mezcla se logran por medio de inyeccin

de gas con un difusor.

Son cilndricos con alturas dobles al dimetro.

No presentan estructuras internas.

Son baratos, no tienen partes mviles y tiene un adecuado

rendimiento en la transferencia de materia y transmisin de calor.

Se utilizan para la produccin de levadura, cerveza, vinagre y

tratamiento de aguas residuales.

Biorreactor de elevacin con aire.

Su rasgo caracterstico es que las corrientes de flujo (ascendente y

descendente) lquido estn separadas.

El gas se inyecta por el riser y baja a travs del down comer por
diferencia de densidad.

Hay reactores de bucle interno y bucle externo (es el ms

efectivo).

Se utilizan en produccin de protena unicelular a partir de

metanol y gasoil, cultivo de clulas, tratamiento de aguas.

Relacin altura-dimetro 10:1

 TIPOS DE CULTIVO

Clulas vegetales en suspensin

Las clulas vegetales pueden ser cultivadas en suspensiones celulares:
pequeos agregados celulares que se suspenden en el medio de cultivo
mediante agitacin. Dado que las clulas vegetales respiran, el diseo
del biorreactor debe incorporar una lnea de aireacin (aire) para
suministrar oxgeno disuelto (OD) al medio de cultivo.
El diseo debe contar con agitacin vigorosa, pues los agregados
celulares vegetales tienden a agruparse (clusters) y de alcanzar gran
tamao y peso, precipitaran. Por eso, la operacin de este tipo de
biorreactores debe ser en rgimen turbulento (Re3000).
Los biorreactores para clulas vegetales en suspensin generalmente
son diseados con un mecanismo de levantamiento por aire air lift que
combina una agitacin vigorosa (turbulenta) con una adecuada aireacin
(oxgeno disuelto) del medio de cultivo.

Protoplastos vegetales
Los protoplastos son clulas vegetales desprovistas de su pared celular,
esto se logra utilizando enzimas proteolticas (proteasas y lipasas) que
degradan la pared celular. Actualmente, el cultivo de protoplastos no es
muy comn, pero de realizarse, requiere de una cama de aire (burbujas
muy finas) que opere en rgimen laminar (Re2300), para evitar que los
esfuerzos cortantes (esquileo) e hidrodinmicos (agitacin) generados
en el medio de cultivo daen (lisis celular) las clulas en suspensin
(tamao de Kolmogorov de los Eddies). Tambin es indispensable que el
medio de cultivo contenga las proteasas y lipasas necesarias para evitar
la regeneracin de la pared celular.

Biorreactor de lecho empaquetado.

Los biorreactores de lechos empaquetados se utilizan con

biocatalizadores inmovilizados en forma de partculas. El reactor
consiste en un tubo, generalmente vertical, relleno y empaquetado con
partculas de catalizador. El medio de cultivo puede alimentarse por la
parte superior o inferior de la columna y forma una fase lquida continua
entre las partculas.
En los lechos empaquetados, el dao debido al desgaste de partculas es
mnimos en comparacin con los reactores agitados mecnicamente.
Los reactores de lecho empaquetado han sido utilizados a nivel
comercial con clulas y enzimas inmovilizadas de penicilina a cido 6aminopenicilnico y en la resolucin de ismeros de aminocidos.
La transferencia de materia entre el medio lquido y el catalizador slido
se facilita trabajando a caudales elevados de lquido a travs del lecho,
para lo cual normalmente se recircula el lquido.
Para evitar que el catalizador se arrastre fuera de la columna se colocan
pantallas a la salida del lquido. Las partculas deber ser relativamente
incomprensibles y capaces de soportar su propio peso en la columna sin
deformarse y obstruir el fijo del lquido. El medio recirculado debe estar
limpio y libre de desechos para evitar el taponamiento del lecho. La
aireacin se realiza generalmente en un recipiente separado ya que si se
inyecta el aire directamente en el lecho, la coalescencia de las burbujas
produce una distribucin deficiente del flujo.
Los lechos empaquetados no pueden utilizase en aquellos procesos que
producen grandes cantidades de dixido de carbono u otros gases que
pueden quedar atrapados en el relleno.

 Clulas empaquetadas
El empaquetamiento celular es una forma menos drstica de
inmovilizacin; pues sta es parcial. Tambin tiene el objetivo de
aumentar la concentracin y la densidad celular; pero al no estar
enclaustradas las clulas, la transferencia de masa es mayor, aunque
siempre limitada.
Un lecho empacado es una matriz de soporte slido que retiene las
clulas, bien por geometra (dentro de los intersticios o espacios huecos
de la matriz), bien por afinidad (paso o adherencia selectiva).
Un biorreactor con este propsito debe contener un lecho de soporte
slido, sumergido en el medio de cultivo. La oxigenacin generalmente
se realiza en el exterior del lecho, a travs del medio de cultivo.

Biorreactores de lechos fluidizados.

Cuando se hace fluir hacia arriba un lquido sobre un lecho empaquetado
de partculas de catalizador de tamao y densidad apropiados, ste se
expande debido al movimiento ascendente de las partculas.
Aprovechando que las partculas presentes en los lechos fluidizados
estn en continuo movimiento y no se producen canalizaciones ni
atascos en el mismo, el aire puede introducirse directamente en la
columna. Los reactores de lecho fluidizado se utilizan en el tratamiento
de residuos con arena o un material similar que soporta las mezclas de
poblaciones microbianas. Tambin pueden utilizarse con organismos
floculantes e los procesos de fabricacin de cerveza o produccin de
vinagre.
CARACTERSTICAS

Los catalizadores empaquetados se mantienen en suspensin por

el movimiento ascendente del lquido impulsado por gas.

El medio es recirculado.

Se utiliza en el tratamiento de residuos con arena o material

similar que soporta las mezclas de poblaciones microbianas.
Tambin pueden utilizarse con organismos floculantes en la
fabricacin de cerveza y vinagre.

Es una modificacin del biorreactor del lecho empaquetado.

Clulas animales
Los cultivos de clulas animales requieren de proximidad mutua y de un
soporte slido (anclaje) para interactuar (comunicacin clula-clula) y
poder metabolizar (producir); esto por cuanto, las clulas animales, por
lo general, no son independientes y deben estar unidas a un sistema
(p.ejm; heptico) para funcionar adecuadamente.
Para suministrar esa proximidad y el soporte necesario, los diseos de
biorreactores para clulas animales deben aumentar la densidad celular
(concentrar) de las clulas en cultivo. Una forma de hacerlo es
incorporar un lecho fluidizado formado por cantidad de microesferas

acarreadoras hechas de material cermico poroso inerte que, por su

tamao (micromtrico) forman una interfase con el medio de cultivo
(fluido) que permite la transferencia de masa (nutrientes y OD), energa
(calor) y momentun (agitacin) entre el medio de cultivo y las clulas en
cultivo; lo que es llamado lecho fluidizado.
Los cultivos celulares animales, por la delicada naturaleza de las
membranas plasmticas requieren adems de oxgeno disuelto (OD) en
el medio de cultivo (tamao de Kolmogorov de los Eddies) y de un
rgimen de agitacin laminar (Re2300).

Biorreactores con lecho de goteo.

El lquido se roca como spray sobre la parte superior del

empaquetamiento y las gotas descienden a travs del lecho en
forma de pequeas corrientes.

El aire o gas se introduce por la base y sube con facilidad ya que la

fase lquida no es contina a travs de la columna.

Se utilizan para tratamiento aerobio de aguas residuales.

Es una modificacin del biorreactor de lecho empaquetado.

1.3 AGITACIN DE BIORREACTORES

La sntesis de la mayora de nuevos productos requiere el crecimiento de
microorganismos en recipientes aereados con agitacin. El xito de
muchas operaciones industriales depende de la eficaz agitacin y
mezcla de fluidos. Aunque cuando hablamos de agitacin y mezcla, no
se habla de lo mismo.
AGITACIN: se refiere a forzar un fluido por medios mecnicos
para que adquiera un movimiento generalmente circulatorio en el
interior de un recipiente.
MEZCLADO: distribucin al azar de 2 fases inicialmente separadas.
Eso implica partir de dos fases individuales, tales como un fluido y
un slido pulverizado o dos fluidos de distinta densidad, y lograr
que ambas fases se distribuyan al azar entre s.
La condicin de agitacin no es tan difcil de alcanzar siempre y cuando
la fase lquida no sea demasiada viscosa.
El propsito de lograr una buena agitacin es lograr que en el interior
del tanque se produzca una buena mezcla de los materiales, con el fin
de asegurar que todo el volumen del recipiente se utilice para llevar
cabo la reaccin, y que no existan o queden espacios muertos.
I.

OBJETIVOS DE LA AGITACIN
Mezclado de dos lquidos miscibles.
Disolucin de slidos en lquidos.
Dispersin de un gas en un lquido en forma de burbujas
pequeas.
Suspensin de partculas slidas finas en un lquido.
Agitacin de un fluido para aumentar la transferencia de calor.

II. SISTEMA DE AGITACIN

La mezcla y la dispersin de las burbujas, se alcanza mediante

agitacin mecnica, lo cual requiere una relativa gran cantidad de
energa por unidad de volumen. Los deflectores se utilizan para
reducir la formacin de vrtices.
Existe una amplia variedad de
formas y tamaos diferentes de
rodetes que producen diferentes
tipos de flujo dentro del
recipiente. En los fermentadores
altos se instalan varios rodetes
para mejorar la mezcla.
Generalmente, slo el 70-80 %
del volumen de los reactores
agitados se llena con lquido, lo
que permite que exista un
espacio en la parte superior
para retirar las gotas que
arrastra el gas de salida y para
dar cabida a cualquier espuma
que se forme. Si la formacin de espuma es un problema, se puede
instalar otro rodete denominado separador de espuma. Otra
posibilidad consiste en aadir agentes antiespumantes al caldo de
cultivo, aunque stos pueden reducir la transferencia de oxgeno, por
lo que se suele preferir la opcin de dispersin mecnica de la
espuma.
El factor de forma de los reactores agitados, es decir, la relacin entre
la altura y el dimetro, puede variar considerablemente. La forma ms
barata de construccin tiene una relacin aproximada de 1, ya que
esta forma presenta la menor superficie y, por tanto, necesita la
mnima cantidad de material para un determinado volumen. Sin
embargo, cuando se necesita aireacin la relacin de forma aumenta,
lo cual proporciona tiempos de contacto mayores entre las burbujas
que ascienden y el lquido as como una mayor presin hidrosttica en
el fondo del reactor.
El control de la temperatura y de la transmisin de calor en los
reactores agitados puede resolverse mediante la colocacin de
serpentines de refrigeracin internos.

III. DISEO DE UN REACTOR AGITADO

Para lograr los objetivos, un biorreactor de tipo tanque agitado debe
contar con los siguientes componentes:

Cuerpo del biorreactor: recipiente o contenedor que alberga al

cultivo o microorganismo. El contenedor es la frontera fsica entre
el ambiente externo contaminado y el ambiente interno
controlado. Un tanque contenedor o cuerpo del biorreactor se debe
construir en acero inoxidable austentico, por sus caractersticas
qumicas y fsicas superiores.

Sistema de agitacin: tiene la funcin de generar la potencia

necesaria para producir la mezcla perfecta para el sistema de
cultivo y producir un rgimen de agitacin adecuado que,
maximice la produccin de esfuerzos cortantes y la presin
hidrodinmica local y global, para optimizar los fenmenos de
transferencia, calor y masa.

Un sistema
mecnicas:

de

agitacin

consta

de

las

siguientes

partes

Motor impulsor: dado que un biorreactor debe operar de

forma continua durante todo el proceso de cultivo; se
requiere un motor capaz de resistir largos periodos de
operacin continua y trabajo duro; por eso, el motor debe
ser de induccin de corriente alterna y debe ser acorazado,
preferiblemente de acero inoxidable.
Eje transmisor de potencia: es una barra cilndrica de
acero inoxidable 316 L y por lo general se disea en
dimetros estndar para mayor facilidad de ajuste los
estndares de motores a.c. Su longitud depende de la
profundidad del contenedor.
Transmite la potencia del motor al impulsor a travs de las
hojas de agitacin. Existen ejes en los cuales ya vienen

incorporados hojas o aspas de agitacin, se disean para

operar en uno de dos sistemas de flujo, segn sea, la
orientacin espacial de las hojas o aletas.
Sello mecnico: su funcin es triple: evitar la
contaminacin, mantener hermtico el sistema, servir de
amortiguador de friccin. El sello mecnico tambin permite
la esterilizacin in situ del biorreactor, mediante una lnea de
vapor sobrecalentado.
Turbinas: es un impulsor de flujo axial el cual opera como
una centrfuga que distribuye el flujo de lquido a travs de
hojas planas, a todo el volumen de fluido.
IV.

V.

TIPOS DE MOVIMIENTO CIRCULATORIO GENERADO POR LOS

AGITADORES

AGITACIN DE FLUJO AXIAL

Son los que generan corrientes paralelas al eje del impulsor.

AGITACIN DE FLUJO RADIAL

Son los que generan corrientes en direccin radial tangencial al
eje del impulsor.

TIPOS DE AGITADORES

AGITADORES DE PALETAS

 Las paletas giran a velocidades bajas o moderadas en el

centro del tanque.
Impulsan al lquido radial y
tangencialmente
(hacia
afuera
hasta la pared del tanque y
entonces fluyen hacia arriba o hacia
abajo)
No hay un movimiento vertical
respecto del agitador, a menos que
las paletas estn inclinadas.
En tanques de proceso como
agitador industrial giran a velocidades entre 20 y 150 RPM.
Produce una agitacin suave, y no requiere placas
deflectores o corta corrientes, los cuales son necesarias para
velocidades elevadas.

AGITADORES DE TURBINA
Estos agitadores son eficaces para un amplio intervalo
viscosidades.
En lquidos poco viscosos producen
corrientes
intensas,
que
se
extienden por todo el tanque y
destruyen las masas de lquido
estancado.
Aplicable para dispersar un gas en
un lquido, el gas puede ingresar
por debajo del eje del rodete de
manera de dispersar el gas en muchas burbujas finas.
La turbina de hojas inclinadas, con aspas de 45
combinan flujos radiales y axiales.
Este tipo de turbina es til para slidos en suspensin,
que las corrientes fluyen hacia abajo y luego levantan
slidos depositados.

de

se
ya
los

AGITADORES DE HELICE
Es un agitador que genera flujo axial, operando con
velocidad elevada y se emplea para lquidos poco viscoso s.

 Cortan o friccionan vigorosamente

el
lquido.
Debido a la persistencia de las
corrientes de flujo, estos agitadores
son eficaces para tanques de gran
tamao.
En tanques de gran altura, pueden
disponerse de dos o ms hlices
sobre el mismo eje, moviendo el
lquido generalmente en la misma direccin.
Para tanques extraordinariamente grandes, del orden 1500
m3 se han utilizado agitadores mltiples.
VI. BIORREACTOR CON AGITACIN MECNICA
Consiste en un eje provisto de una serie de paletas ubicado el fondo del
estanque las que producen turbulencia al girar a unas 90 a 120
revoluciones por minuto. La nica dificultad es que su eje a la entrada al
estanque y en el punto de apoyo presenta prdidas de lquido.

Sin

circulacin interna

Velocidad de rotacin
agitador entre 50-60

del
RPM.
Velocidad perifrica en el extremo de la paleta 5 m/s.
Efecto de cizalladura reducido.
Asegura transferencia de oxgeno necesaria.

Con circulacin interna

Mvil de agitacin diseado como el rotor de una bomba
centrifuga.

 El lquido de fermentacin y el gas de aireacin se aspiran y

mezclan hacia la parte superior donde se expulsan de forma
radial.
Buena capacidad de transferencia de oxgeno.
VII.

BIORREACTOR CON AGITACIN NEUMTICA

Consiste en aplicar en el fondo del estanque un tubo con perforaciones

por las cuales se libera una presin de aire obtenida de un compresor
adicional que debe tener el equipo. Es muy poco usado.

Sin circulacin interna

Brindan una baja transferencia de oxgeno y sensible accin
de cizalladura.
Utiliza columnas de burbujas.
Su diseo permite aumentar el tiempo de permanencia de
las burbujas de gas estableciendo una altura muy superior a
su dimetro.

Con circulacin interna

Diseados para fermentacin continua.
Un diseo pequeo brinda una suspensin celular en la zona
central donde tiene lugar la alimentacin del medio de
cultivo.
Un diseo grande brinda un sentido de circulacin inverso, la
expansin y la alimentacin se hace en la zona perifrica.

Con circulacin externa

Circulacin organizada en dos zonas interconectadas, por un
bafle o tubo de draft.
La columna montante, ascendente o riser brinda la fase de
oxigenacin.
El compartimiento descendente o downcomer realiza una
reinyeccin de aire.
Provoca un aumento en la velocidad de circulacin contra la
base.

 Permite obtener un buen coeficiente de intercambio trmico

y una buena recirculacin basada en la diferencia de
densidad.
7.1) REACTOR DE COLUMNA DE BURBUJAS
En los reactores de columna de burbujas, la aireacin y la mezcla se
alcanza mediante la inyeccin de gas, proceso que requiere menos
energa que la agitacin mecnica. Las
columnas
de
burbujas
se
utilizan
industrialmente para la produccin de
levadura de panadera, cerveza y vinagre,
y en el tratamiento de aguas residuales.
Las columnas de burbujas son de
estructura
muy
sencilla.
Consisten
principalmente en un recipiente cilndrico
con alturas superiores al doble del
dimetro. Aparte del difusor para la
inyeccin del aire comprimido, los
reactores de columna de burbujas no
presentan estructuras internas. En la produccin de levadura de
panadera es normal utilizar una relacin altura: dimetro de 3:1,
mientras que en otras aplicaciones pueden utilizarse torres con
relaciones de 6:1. Algunas veces, en los reactores de columna muy
altos se instalan placas horizontales perforadas para evitar la
coalescencia de las burbujas y lograr una mejor redistribucin del
aire.
Las ventajas de los reactores de columna de burbujas incluyen los
bajos costos de capital, la usencia de partes mviles y un adecuado
rendimiento de la transferencia de materia y de la transmisin de
calor.
La hidrodinmica de la columna de burbujas y las caractersticas de
la transmisin de calor depende por completo del comportamiento
de las burbujas formadas en el difusor. Existen diferentes regmenes
de flujo dependiendo del caudal de gas, del diseo del difusor, del
dimetro de la columna y de las propiedades del medio como puede
ser la viscosidad. Un flujo homogneo se produce nicamente

caudales bajos de gas y cuando las burbujas que abandonan el

difusor se distribuyen a lo largo de toda la seccin de la columna.
En el flujo homogneo, todas las burbujas ascienden con la misma
velocidad y no existe retromezcla de la fase gas. La mezcla del
lquido con este tipo de rgimen de flujo es bastante limitada y se
reduce nicamente a su arrastre en las escalas de las burbujas.
Normalmente se opera a mayores velocidades de gas, donde se
desarrolla un gran flujo heterogneo. En este rgimen, las burbujas
y el lquido tienden a ascender por el centro de la columna mientras
que en la proximidad de las paredes existe un flujo descendente de
lquido. La circulacin de lquido arrastra a las burbujas y produce
cierta retromezcla del gas.
7.2) REACTOR DE TIRO O CORRIENTE DE AIRE AIR-LIFT
Al igual que las columnas de burbujas, en los reactores de tiro la
mezcla se produce sin agitacin mecnica. Los reactores de tiro de
aire se utilizan a menudo para cultivos de clulas animales y
vegetales, y catalizadores inmovilizados.
Existen varios tipos diferentes de reactores de tiro de aire. El rasgo
caracterstico que los diferencia de los de columna de burbujas es
que las corrientes de flujo de lquido estn ms definidas debido a
la separacin fsica de las corrientes ascendentes y descendentes.
El gas es inyectado nicamente en una parte de la seccin del
reactor denominado riser. El gas existente en el reactor y la
disminucin de densidad producen un movimiento ascendente del
lquido en el riser. El gas se retira del lquido en la parte superior
del reactor dejando el lquido ms pesado libre de las burbujas y se
recircula a travs del downcorner. El lquido circula en los
reactores de tiro de aire como resultado de la diferencia de
densidad entre el riser y el downcorner.

En los reactores de bucle interno el riser y el downcorner estn

separados por un deflector interno o tubo de aire. El aire puede
inyectarse bien en el tubo de tiro o en el anillo.
En los reactores de tiro de aire de bucle externo se conectan a dos
tubos verticales separados mediante pequeas secciones
horizontales en la parte superior e inferior. En este dispositivo la
separacin del gas es ms efectiva que en los reactores de buble
interno ya que el riser y el downcorner se encuentran
separados. Asimismo, en el downcorner se arrastran muy pocas
burbujas, lo que provoca que la diferencia de densidad entre los
fluidos del riser y del downcorner aumente y la circulacin del
lquido en el reactor sea ms rpida.
Por consiguiente, la mezcla es generalmente mejor en los reactores
de bucle externo que en los de bucle interno.
Los reactores de tiro de aire proporcionan generalmente mejores
mezclas que los de columna de burbujas excepto cuando se opera a
velocidades bajas de lquido. La configuracin de tiro de aire le
confiere un grado de estabilidad al flujo del lquido en comparacin
con el de columna de burbujas, pudiendo utilizarse mayores
caudales de gas sin producir problemas de operacin como pueden
ser el flujo pistn o nebulizaciones.
Los reactores de tiro de aire se han utilizado en la produccin de
protenas de origen unicelular a partir de metanol y gasoil, as como
el cultivo de clulas animales y vegetales y en el tratamiento de
aguas municipales y para la industria.
VIII. COMPARACIN ENTRE UN BIORREACTOR DE AGITACIN
MECNICA Y UN BIORREACTOR CON AGITACIN NEUMTICA
Tanto los reactores mecnicos como neumticos pueden conseguir
una mezcla y transferencia de materia adecuadas con fluidos de
baja viscosidad.

Cuando se necesita un fermentador de gran tamao (50-500 m 3)

para un cultivo de viscosidad baja, el reactor de columna de
burbujas representa una eleccin muy atractiva debido a que es
simple y barato, tanto desde en el punto de vista de instalacin
como de operacin. Los reactores agitados mecnicamente no son
prcticos para volmenes superiores a 500 m 3 ya que la potencia
necesaria para conseguir una mezcla adecuada llega a ser
extremadamente alta.
Si el cultivo tiene una alta viscosidad, los reactores agitados por aire
no proporcionan una mezcla suficiente y, por tanto, la transferencia
de materia es deficiente. En este caso, los reactores agitados
mecnicamente son ms apropiados ya que mediante este sistema
se pueden suministrar mayores potencias. A pesar de todo, las
velocidades de transferencia de materia disminuyen rpidamente
en los reactores agitados mecnicamente cuando la viscosidad
supera los 50-100 cP.
Un punto importante a la hora de elegir entre reactores mecnicos y
neumticos es el referido a la transmisin de calor. La agitacin
mecnica genera mucho ms calor que la inyeccin de gas
comprimido. Cuando el calor de reaccin es elevado, como es el
caso de la produccin de protenas de origen unicelular a partir de
metanol, la eliminacin de calor producido por el rozamiento
mecnico puede ser un problema por lo que es preferible utiliza
reactores agitados por aire.

2. TRANSFERENCIA DE OXIGENO
2.1. FUNCIONES DEL O2 EN LA FERMENTACIN

CINTICA DE LA FERMENTACIN
Actualmente se conoce la fermentacin como la utilizacin de
microorganismos para la conversin de un sustrato en productos de
valor agregado. El campo de la biotecnologa que trata sobre las
fermentaciones a nivel industrial se llama microbiologa industrial. Los
productos comerciales fermentados son clasificados por
Scragg en tres casos:
1) En el primer caso, el microorganismo elabora el producto, el cual
permanece intacto y puede ser un cido orgnico, un alcohol, una
enzima u otra protena, un aminocido, una vitamina o un
antibitico.
2) En el segundo caso, el producto es el mismo microorganismo. Por
ejemplo la levadura de panadera y algunas vacunas.
3) En el caso final, el microorganismo convierte durante un proceso
de bio transformacin una sustancia en otra de mayor rentabilidad
econmica, tal es el caso de los esteroides.

Teniendo en cuenta las condiciones en que acta el microorganismo, se

puede clasificar la fermentacin en aerobia y anaerobia:
A) FERMENTACIN AEROBIA
Es aquella en la cual el microorganismo necesita oxgeno durante
todo el proceso de fermentacin. Como fuente de ste se utiliza
aire a una presin muy cercana a la atmosfrica. No se utiliza
oxgeno directamente ya que ste a concentraciones altas es
txico para los microorganismos, adems el costo y los cuidados
que se requieren debido a su alto poder comburente lo hacen en la
mayora de los casos inaplicable industrialmente.
En la actualidad, se han desarrollado procesos aerobios para la
produccin de antibiticos como la penicilina, la produccin de
cidos orgnicos como ctrico, glucnico, itacnico, actico, etc.,
solventes como acetona y la produccin de levadura como
alimento.
B) FERMENTACIN ANAEROBIA

Por definicin es aquella que sucede en ausencia total de oxgeno,

sin embargo son muy pocas las que exigen una exclusin total de
aire, debido a que al trabajar con sistemas vivos stos requieren
normalmente su presencia en alguna etapa del proceso. La
fermentacin anaerobia ms conocida es la alcohlica.

USOS
El beneficio industrial primario de la fermentacin es la conversin del
mosto en vino, cebada en cerveza y carbohidratos en dixido de carbono
para hacer pan. De acuerdo con Steinkraus (1995), la fermentacin de
los alimentos sirve 5 propsitos generales:
Enriquecimiento de la dieta a travs del desarrollo de una
diversidad de sabores, aromas y texturas en los substratos de los
alimentos.
Preservacin de cantidades substanciales de alimentos a travs de
cido lctico, etanol, cido actico y fermentaciones alcalinas.
Enriquecimiento de substratos alimenticios con
aminocidos, cidos grasos esenciales y vitaminas.

protenas,

Detoxificacin durante el proceso de fermentacin alimenticia.

Disminucin de los tiempos de cocido y de los requerimientos de
combustible.
TIPOS DE FERMENTACION

A) FERMENTACION ACETICA
Es la fermentacin bacteriana por ACETOBACTER, un gnero de
bacterias aerbicas, que transforma el alcohol en cido actico. La
fermentacin actica del vino proporciona el vinagre debido a un
exceso de oxgeno y es considerado uno de los fallos del vino. La
fermentacin actica es un rea de estudio dentro de la citologa.

Caractersticas

La formacin del cido actico (CHCOOH) resulta de la oxidacin

de un alcohol por la bacteria del vinagre en presencia del oxgeno
del aire. Estas bacterias, a diferencia de las levaduras productoras
de alcohol, requieren un suministro generoso de oxgeno para su
crecimiento y actividad. El cambio que ocurre es descrito
generalmente por la ecuacin:
CHOH + O + Acetobacter aceti -> CHCOOH + HO

B) FERMENTACION ALCOHOLICA
Es un proceso biolgico de fermentacin en plena ausencia de aire
(Oxigeno - O), originado por la actividad de algunos
microorganismos que procesan los hidratoas de carbono (por regla
general azucares: como pueden ser por ejemplo la glucosa, la
fructuosa, la sacarosa, el almidn, etc.para obtener productos
finales: un alcohol en forma de etanol (cuya frmula qumica es:
CH-CH-OH), dixido de carbono (CO) en forma de gas y algunas
molculas de ATP que consumen los propios microorganismos en
su metabolismo celular energtico anaerbico. El etanol resultante
se emplea en la elaboracin de algunas bebidas alcohlicas, tales
como el vino, la cerveza, la sidra, el cava, etc. Aunque en la
actualidad empieza a sintetizar tambin etanol mediante la
fermentacin a nivel industrial a gran escala para ser empleado
como biocombustible.
Tiene como fianlidad biolgica proporcionar energia anaerbica a
los microorganismos unicelulares (levaduras) en ausencia de
oxigeno para ello disocian las molculas de glucosa y obtiene la
energia necesaria para sobrevivir, produciendo el alcohol y CO
como desechos consecuencia de la fermentacin. Las levaduras y
bacterias causantes de este fenmeno son microorganismos muy
habituales en las frutas y cereales.
Es un proceso anaerbico que ademas de generar etanol
desprende grandes cantidades de dixido de carbono (CO)
adems de energa para el metabolismo de las bacterias
anaerbicas y levaduras.

cido pirvico acetaldehdo + CO2 acetaldehdo + NADH + H + etanol

+ NAD

C) LA FERMENTACION LACTICA
Algunas bacterias como diversas especies de Lactobacillus son
responsables de fermentar la lactosa (azcar de la leche) hasta
cido lctico, aunque tambin algunos hongos, protozoos y tejidos
musculares pueden realizarla. Como la lactosa es un disacrido,
primero tiene que ser rota en sus componentes (monosacridos)
que son la glucosa y galactosa para despus entrar a la
fermentacin. La reaccin general es la siguiente:

cido pirvico + NADH + H+ --> cido lctico + NAD

A travs de la fermentacin lctica pueden obtenerse diversos

alimentos como el yogurt y el kfir.
En casos de trabajo excesivo, el msculo esqueltico es capaz de
formar cido lctico cuando la oxigenacin no es la adecuada,
generando la fatiga muscular. Nuestro cuerpo es capaz de
regenerar este cido hasta glucosa por un proceso inverso a la
gliclisis anaerobia, llamado gluconeognesis.

D) FERMENTACION BUTIRICA
La fermentacin butrica es la degradacin de glcidos hasta cido
butrico. Tal accin es realizada por bacterias de las especies
Clostridium butyricum y Bacillus amilobcter en ausencia de
oxgeno con frecuencia acta sobre productos lcteos,
responsables del arrancamiento de la mantequilla, por ejemplo.
Este tipo de fermentacin, que se caracteriza por la aparicin de
olores ptridos y desagradables, como el olor corporal y el olor
a pie en quesos, tambin es un producto indeseable en el proceso

de ensilado (almacenamiento de semillas y forraje en el silo que es

el lugar, generalmente subterrneo, en donde se guarda el grano)
si la cantidad de azcares en el forraje almacenado no es lo
suficientemente grande como para producir una cantidad de cido
lctico que garantice un pH inferior a 5. Esto permite entonces la
proliferacin de bacterias de fermentacin butrica

2.2. MODALIDADES EN LA TRANFERENCIA Y MEDICIN

DEL K.A.
Durante el crecimiento y metabolismo microbianos tiene lugar en forma
continua la transferencia de nutrientes y metabolitos entre el medio
ambiente externo y la clula. En fermentaciones aerbicas, se considera
la transferencia de oxgeno de la fase gaseosa a la fase lquida como el
problema ms importante en comparacin con el suministro de cualquier
otro nutriente, ya que el oxgeno es menos soluble en agua que las
fuentes de carbono (generalmente en exceso) y otros nutrientes. Por
ejemplo el azcar se disuelve entre 500 600 g/L mientras que la
mxima solubilidad del oxgeno a 1 atm y 4 C en agua pura es de
solamente 8 mg/L. As, no es posible proveer inicialmente un cultivo
microbiano con todo el oxgeno necesario para la respiracin completa,
por lo que ste debe ser suministrado durante el crecimiento a una
velocidad suficiente para satisfacer la demanda de los organismos. En
esta seccin se consideran los parmetros fisicoqumicos que gobiernan
el fenmeno de la transferencia de oxgeno desde la fase gaseosa hasta
la fase acuosa en un medio de cultivo.
1. INTERFASE GAS LQUIDO.
Cuando una sustancia se mueve desde el seno de una fase a la
interfase o viceversa, el fenmeno es conocido como transferencia
de masa. Como regla general un flujo de masa Ni es proporcional a la
diferencia de concentracin, en este caso la diferencia entre la
concentracin C y la concentracin de la interfase Ci. La constante
de proporcionalidad resultante de la relacin entre el flujo de materia
y la diferencia de concentracin es conocida como el coeficiente de
transferencia de masa:
Ni = k (Ci C)

Para efectos prcticos generalmente se supone despreciable la

resistencia al transporte en la interfase, lo que equivale a suponer
que las fases se encuentran en equilibrio en el plano de contacto
como se indica en la Figura 1. La diferencia entre CGi y CLi en la
interfase justifica la posibilidad de que en equilibrio, el oxgeno
pueda ser ms soluble en una fase que en la otra. La difusin del
oxgeno es bsica para que se produzca la transferencia de materia
debido a que las velocidades locales del fluido se aproximan a cero
en la interfase.
Figura 1. Perfiles de concentracin del modelo de dos
pelculas, transferencia de masa global por absorcin.

Donde k tiene un ndice L G dependiendo de si la concentracin

corresponde al lado gaseoso o al lado lquido.
En estado estable, la velocidad de transferencia de oxgeno a la
interfase gas lquido debe ser igual a la velocidad de transferencia
de oxgeno a travs de la pelcula de lquido, ya que no existe
acumulacin de oxgeno en la interfase ni en ningn otro lugar del
sistema. De esta forma pueden escribirse dos ecuaciones iguales
para la velocidad de transferencia de oxgeno:
Flujo de oxigeno = KG (CG CGi)
Flujo de oxigeno = K (Ci C

Lado gas
Lado lquido

Dnde: Flujo de oxgeno en [mol O2 / (m2.s)]

2. RESISTENCIA A LA TRANSFERENCIA
El oxgeno para ser metabolizado por el microorganismo debe pasar
a travs de una serie de resistencias al transporte, dependiendo de
la hidrodinmica de la burbuja, temperatura, actividad celular y
densidad, composicin de la solucin, fenmeno interfacial y otros
factores. En la Figura 2 se muestra de forma esquemtica las
resistencias involucradas en el transporte de oxgeno desde el
interior de la burbuja de gas hasta el lugar de reaccin en el interior
de la clula.
Estas son:
1. Difusin desde el seno o ncleo del gas a la interfase gas
lquido.
2. Movimiento a travs de la interfase gas lquido.
3. Difusin del soluto a travs de la regin estancada adyacente
a la burbuja.
4. Transporte del soluto a travs del seno del fluido lquido.
5. Movimiento a travs de la segunda regin estancada asociada
con la clula.
6. Transporte difusivo hacia el interior de la clula.
7. Si las clulas estn en un flculo, agregado o partcula slida,
difusin a travs del slido hasta cada clula individual.
8. Transporte a travs del citoplasma hasta el lugar de reaccin.
Figura 2. Esquema del transporte de oxgeno desde una
burbuja de gas al interior de la clula.

3. COEFICIENTES DE TRANSFERENCIA DE MASA

Desarrollo. El coeficiente de transferencia de masa del biorreactor
fue obtenido de manera independiente a las ecuaciones diferenciales
bsicas del modelo, ya que para cada volumen de control ste se
considera invariable. No obstante, el coeficiente volumtrico de
transferencia de masa para toda la columna puede calcularse como:

Donde la altura de la regin (H) es:

El coeficiente volumtrico global de transferencia de masa kLa para

cada regin fue obtenido a partir del algoritmo presentado en la
Figura 19, el cual involucra las propiedades hidrodinmicas
caractersticas de una columna de burbujeo.
Figura 3. Algoritmo de clculo para el coeficiente volumtrico
global de transferencia de masa.

Como se aprecia en el diagrama anterior, el clculo del coeficiente

volumtrico global de transferencia de masa requiere la estimacin
previa del rgimen de formacin de la burbuja (Regimen_B), que
determina el comportamiento y las caractersticas de la burbuja

generada en el orificio y en su ascensin a travs del lquido. El

algoritmo que se muestra en la Figura 20 considera los posibles
regmenes que se presentan en la formacin de la burbuja de gas.
Determinado el rgimen de formacin de la burbuja en el orificio, fue
posible obtener los trminos requeridos por la ecuacin (1.3.38) para
el clculo directo del coeficiente KL.A.
Este valor fue comparado con el resultado del producto K L.A para
diferentes especificaciones de las variables de diseo.

BIBLIOGRAFA
Doran, P. (1998) Bioprocess Engineering Principles. Academic
Press Limited. London.

 Scragg,

A. (ed). (1996). Biotecnologa para ingenieros.

Sistemas biolgicos en procesos tecnolgicos. Editorial Limusa
S.A. De C.V. Mxico.