CITOESQUELETO E MOTILIDADE CELULAR

Citoesqueleto: conjunto de filamentos

Coordena toda movimentao da celula, os movimentos que ocorre dentro da celula e todos
os que ela executa depende do citoesqueleto.
Existe uma organizao estrutural muito grande dentro da celula, as estruturas no estao
soltas elas estao ancoradas, elas se movimentam de uma regiao subcelular para outra
atravs de trilhos.
FUNES
-forma celular apropriada
-estrutura fsica forte
-organizaao estrutural interna
Rearranjos contnuos permitem o controle das atividades celulares em resposta aos
estmulos.
-3 principais compoenentes do citoesqueleto:
-actina: contrao muscular. Subunidade proteica que forma as fibras de actina
-microtbulos: formados por tubulinas (subunidade proteica)
O citoesqueleto composto por 3 familias de protenas que atuam conjuntamente.
a) Filamentos de actina: forma da superfcie celular e locomoo
b) Filamentos Intermedirios: fora mecnica. As protenas que compe esse tipo de
filamento so mais variadas, cada celula tem protena diferente. Graas a esses tipos
de filamentos a celula se mantem integra. So encontradas em organismos
metazorios (tem organizao estrutural de tecidos).
c) Microtbulos: posio das organelas e transporte intracelular.

Celula em cultura Microtbulos (verde) e filamentos de actina (vermelho)

marcadas.

As clulas normalmente tem uma concentrao de actina logo abaixo da membrana

plasmtica, os microtubulos partem do centro e cortam a actina (movimenta a celula como
um todo) perpendicular, esses trilhos passam por toda a celula.

Clulas epiteliais em cultura Filamentos intermedirios marcados.

Tem a ligaao de um filamento de um celula com a outra. Ele vai unir celula com celula para
dar estabilidade ao tecido.

Os trilhos proteicos so muitro dinmicos, a unio entre as subunidades so fracas, ento a

associao entre uma protena e outra pode ser desfeitas e refeita rapidamente na celula
Caminhos de Formiga.

Exemplo: dinmina do citoesuqeleto no ciclo celular.

Microtubulos faz a segregao cromossmica
Actina faz a contrao da membrana (citocinese)
O citoesqueleto dinmico versus estabilidade.

O citoesqueleto pode formar uma variedade ds estruturas Filamentos de Actina

(desenho)
-G-actina: solvel globular
-protofilamentos: fita de actina. F-actina quando forma uma fita.
Unio de 2 protofilamentos torcidos forma o microfilamento de actina. As microvilosidades s
possvel graas a ao de filamentos de actina. Cada microtbulo s formado por
filamentos de actina.
A celula muscular tem varias miofibrilas que so compostas por feixes de actina que tem
feixes de miosinas por cima.
O citoesqueleto pode formar uma variedade de estruturas Microtbulos
Cada tubulina se liga um do lado do outro formando um cilindro. Microtbulo um cilindro
proteico formado por 13 protofilamentos de tubulina.
Cada protofilamento se une lateralmente para formar o microtbulo. O microtbulo mais
rgido e espesso que o filamento de actina. Exemplo: fibras do fuso.
Filamento de actina tem mais mobilidade est mais associado ao momento da celula.
Microtubulo como mais espesso ele mais rgido, ento se ele fosse estar envolvido em
movimento da celula ele quebra, ento funciona como suporte.

O citoesqueleto pode formar uma variedade de estruturas Filamentos Intermedirios

A protena subunidade no tubular como tubulina e actina, ela uma -hlice longa.
Tem unio de uma -helice com a outra anti-paraleloneutraliza as pontas (as pontas so
iguais)filamentos simtricos.
No caso de actina/tubulina as pontas no so iguais porque coloca sempre em uma direo
ento os filamentos so assimtricos (tem polo).
Formam tetrmeros isso que vai ficar solvel na celula.
(desenho)

A rea de contato lateral maior entre os filamentos, devido a forma da subunidade.

rea superficial + resistente e flexvel, porque o contato maior (esto mais arrumados).
Ento mais difcil quebrar a ligaao.
Exemplo: neurnios protenas neurofilamento.
Ncleo abaixo do envelope nuclear tem a lmina nuclear, que formada por
protena chamada lmina que so filamentos intermedirios.
Toda hora que falar de membrana celula tem uma estrutura proteica que sustenta ela.
O citoesquele dinmico versus estabilidade

Elas estao distribudas em toda a celula so que tem regies que elas se concentram mais que
onde elas vo exercer mais suas funes.
Microtbulos: projetam da regiao mais basal para a apical.
Actina: est na base e no pice da celula se projetando nos microvilos.
Intermedirio: circula toda a celula e se liga a desmossomos fazendo a conecao com
as clulas vizinhas.
FILAMENTOS INTERMEDIRIOS E ESTABILIDADE
Graas aos filamentos tem essa fora e no rompe facil. Se tivesse s o desmossomo sem o
filamento intermedirio a celula se romperia.

A)
B)
C)
D)

1 proteina (monmero)
Dmero
Tetrmero (subunidade solvel no citoplasma)
Protofilamento (2 tetrmeros)

Nos filamentos intermedirios os contatos laterais predominam

O fato de contato lateral ser maior que o outro d a capacidade de flexo CORDA.
Estrutura em forma de CORDA= fora, resistencia e flexibilidade.

A uniao entre 8 protofilamentos forma uma corda (filamento), porque eles se ligam e
giram formando uma corda.

Todos os eucariotos tem actina e microtubulos. Os intermediarios so s nos metazorios.

Proteina Plectina une os filamentos intermedirios a microtubulos e filamentos de actina.

Tem protenas que associam um tipo de filamento ao outro e isso que da organizao
das redes de filamentos.
Tipos de filamentos intermedirios em diferentes clulas

Filamentos intermedirios nucleares protenas laminas estabilidade e organizao do

nucleo
Mutaoes na queratina das clulas da lmina basal causam epidermlise Bulbosa.

Hemidesmossomo: desmossomo que une na lmina basal (matriz proteico que fica
entre estroma e epitlio). Se tem mutao a celula se rompe logo acima do
hemidesmossomo.
A pele descola porque a clula no esta aderida na clula basal ruptura do tecido.
Citoesqueleto de MICROTBULOS Motilidade celular

Microvisodidade formada por citoesqueleto de actina.

Clios: citoesqueleto de microtbulos. Ex: movimento de muco
Citoesqueleto de actina Forma e Mobilidade

a)
b)
c)
d)

Microvilosidade
Clula se esticar e aderir no substrato
Clula emitir no substrato
Formao do anel contrtil

Microtubulos e filamentos de actina Subunidades pequenas e globulares

-Reorganizaao e Flexibilidade
Ambos precisam de uma sinalizao, se tem um sinal ele se desmonta e refaz do outra
lado ontem o sinal), para isso tem gasto de energia.
Polimerizaao dos filamentos tem uma fase de nucleao

No inicio esto todos solveis, tem que ter uma energia para que elas se associem e
formem um filamento pequeno [ ] chance de formar filamentos.
Concentrao crtica: tem tanto monmeros livres que tem equilbrio entre estado de
filamento e monmero a entrada de monmero no filamento = saida de monmero no
filamento.
A fase de nucleao pode ser facilitada

Se j tiver filamentos pr-montados com uma concentrao menor de monmeros j

entra em equilbrio.
A clula faz com que seja nucleada a formao de pequenos filamentos no ponto de interesse.
Tem protenas que vo formar a base para ancoragem dos monmeros e ento ocorrera a
polimerizao naquele ponto.
Na clula esta toda hora entrando e saindo proteina no filamento. Ele esta sendo reciclado
toda horaDINMICO (s que em menor grau quando comparado com clulas de defesa).
A partir da nucleao e associaao de um monmero no outro sempre tem uma porque que
cresce mais e outra que cresce menos.
A velocidade de polimerizao assimtrica nos diferentes terminais (para actina e
tubulina)

Nas duas pontas ocorre entrada e saida, s que uma ponta sai mais e outra entra mais,
isso indica para que lado esta sendo formado. Todo processo de crescimento e encurtamento
do microtubulo direciona o crescimento da clula.
Os microtbulos so formados de e tubulina

Tanto como a tem uma molcula de GTP associado:

-= fica preso no dmero

-= o GTP fica exposto

Sempre vai ter em cima de . O GTP quando entra no protofilamento vai ser hidrolisado s
que isso ocorre lentamente. S o GTP da hidrolisado.
O GTP hidrolisado aps a entrada da tubulina no filamento

Na ponta tem tubulina associada com GCP porque a velocidade de hidrlise maior
que a da polimerizao. Na ponta + tem preferencialmente tubulina associada a GTP porque
adiciona mais rpido do que a velocidade de hidrlise (entra um novo antes do anterior ser
hidrolisado).
Hidrolise do GTP altera a conformaao da tubulina

A tubulina associada com GTP tem uma conformao reta.

Quando tem a hidrlise a ponta fica curva.

A ponta curva promove a despolimerizao rpida do microtubulo (CATSTROFE)

Exposiao de tubulina-GDP na ponta mais provoca a CATSTROFE do microtubulo.
Se na ponta tem GTP tendncia de crescer
Se na ponta tem GDP tendncia de encurtar
A presena de GTP/GDP controla o prolongamento/encurtamento do microtubulo.

Crescimento VS Encurtamento do microtbulo

Se na ponta tem GDP ela se quebra, se despolimeriza rapidamente formando as

estruturas encurvadas.
Instabilidae Dinmica do microtbulo a capacidade de crescer e encurtar
Proteinas -tubulina formam um anel, nde se inicia a polimerizao dos microtubulos.

mais favorvel a clula aumentar/produzir o microtubulo se ela j tiver um pedainho

pronto.
A -tubulina associada a outras protenas acessrias ela forma um anel para facilitar a
polimerizao de microtbulo (nucleao do microtubulo).
Os microtubulos brotam de uma regio organizadora denominada CENTROSSOMO.

No centrossomo (regio onde esta o centrmero) tem anis de -tubulina que de

onde vo crescer os microtubulos. A partir dos anis irradia para toda a clula.
Estabilizaao assimtrica dos microtubulos contribuir para polimerizao celular

Nos microtubulos que esto chegando na membrana esto em ambos os movimentos

(cresce e encurta). Quando ele se liga a proteinas na membrana ele fica estvel.
A clula ancora a ponta no local de destino e protege da despolimerizao. Assim forma os
trilhos.
Proteinas capping (que reconhecem a ponta do microtubulo) podem estabilizar ou
desestabilizar os microtubulos.
Exemplo= MAP estabiliza o microtubulo. Quando ela protege a ponta do microtubulo ele no
degradado (microtubulo crescente).
Cinesina 13 fator indutor de catstrofe

Proteinas auxiliares estabilizam os feixes

Protenas controlam a associaao dos microtubulos (une lateralmente).

Ex= MAP2: ela mais longa fica mais longe. A MAP2 mantem a estrutura de um axnio, por
exemplo.
Tau: forma uma ala (as 2 pontas esto no microtubulo e a ala vai se ligar no outro)
ficam mais prximos.

A distancia entre os microtubulos varia dependendo da proteina que esta associada

Protenas Motoras= associam a microtubulos ou filamentos de actina.
Microtubulos atuam como trilhos para o transporte de molculas e organelas.

Motores moleculares executam este processo

-DINENA: levam para terminal

-CINESINA: levam para terminal +
A cabea globular ancora no microtubulo e a cauda na vescula que ela vai transportar
Diferentes cargasso levadas para a direo apropriada.

Tem vrios tipos de cinesina para os vrios tipos de cargas que a celula tem que
transportar, o que unida a cauda apolar. Cauda com formas diferentes associadas com
molculas diferentes. Elas caminham pelo trilho como se tivessem andando.
Moleculas de cinesina caminhamsobre os microtubulos com consumo de ATP

Mo microtubulo tem uma sucesso de stios de ligao para as cabeas globulares.

Quando uma associa a outra solta, gira e liga mais para frente e assim vai.

Tudo regulado por hidrolise de ATP quando ancora troca ADP por ATP, ai fica preso mais
finalmente e a outra gira e liga e ento troca ADPATP.
Assim diferentes organelas so levadas para o destino correto.
A clula pode alterar o sentido do movimento ela vai expor/esconder stios de interao
na carga que ela tem que ser carregada.
Drogas que afetam a polimerizao de microtubulos

Substancias que so extradas de plantas, por exemplo. Ex: taxol se lifa e estabiliza o
microtubulo; calchicina, vimblastinase liga e no deixa polimerizar.
O taxol paraliza os microtubulos j formados

Ele perde a propriedade de polimerizar ou despolimerizar e entao formou uma

bagun;Ca.
Essas drogas so usadas para cncer, porque elas dividem rapidamente, entao
depende do citoesqueleto para se dividir. Administrando essas drogas prejudica essas clulas
que esto proliferando muito (atua em todas as clulas)
Citoesqueleto de Actina Forma e Mobilidade

a)
b)
c)
d)

Clula epitelial com microvilos preenchidos por filamentos de actina

Filamentos contrcteis de actina
Clulas em movimento emitiu filopdeos
Clulas em diviso mostrando anel contrctil de actina

A funo bsica de filamentos intermedirios dar resistncia. Eles so formados por

protenas alongadas, polimeriza lateralmente (contato).

Os filamentos de actina/microtubulos so formados por protenas globulares polimeriza

unindo cabeas das protenas (contato). Eles conseguem montar/desmontar mais
rapidamente.
Os filamentos de actina esto mais associados a movimento celular.
Os microtubulos so os trilhos da clula, para movimentao de organelas e vesculas
regula o transporte intracelular. Forma tambm as fibras do fuso, puxam cromatinas.
Filamentos de actina esto associadas mais a forma da clula, quando ele polimeriza
possibilita a movimentao da clula movimento da clula como um todo no substrato.
O filamento de actina se polimeriza no plo positivo que para onde ela tem que ir e se
contrai no plo negativo para que ela se mova. A troca do sentido muito rpida.
A clula tem uma protena de membrana que reconhece o quimiottico e desencadeia uma
srie de reaes intracelulares que vai ativar protenas que regulam o citoesqueleto de actina.
Os filamentos de actina so finos, flexveis e polarizados.

Os filamentos so altamente dinmicos

A ATP/ADP fica em um bolso bem no interior da molcula de actina. Enquanto ela esta no
filamento ela esta ligada ao ADP. A extremidade positiva fica protegida enquanto ela esta
ligada a um ATP.
A ponta positiva tem tendncia de adicionar outra subunidade e essa reao ocorre
mais rapidamente que a hidrolise do ATP fica ligada a ATP.
A ponta negativa ela demora mais para polimerizar ento a hidrolise ocorre mais
rpido, despolariza mais rpido fica ligada a ADP.
Proteinas ARPs (Actin Related Proteins) e forminas fazem a nucleao dos filamentos

COMPLEXO ARP inativo (ARP2 e ARP3 estao afastadas quando as acessoras esto inativas)
fator de ativao ativa o complexo (as proteinas acessrias se ativam e aproximam as
ARPs) forma a estrutura (base) que permite um monmero da actina se ligue (no
conseguem se unir sozinhas para formar um filamento) a tendncia do complexo ativado
se apoiar a filamentos j existentes para dar inicio a formao de um novo filamento (quando
ancorado ele fica mais estvel e ativa mais rapidamente a nucleao) produz uma rede de
filamentos de actina (a rede tem uma produo definida).
Forminas: protenas que ajudam a formao do novo filamento. Ela fica na forma dimrica,
ela abraa uma subunidade e deixa um espao vazio para a entrada de outra subunidade.
A ARP ajuda na base (extremidade negativa) e as forminas ajudam na extremidade
positiva.

-Proteinas sequestrantes= impede a polimerizao da actina (seqestra os monmeros)

-Proteina careadora= impede a despolimerizao
-Protenas Cross-linking= estabilizam a formao da rede, ela liga um filamento ao
outro
-Proteinas de ligao lateral= anela em torno do filamento (estabilidade)
-Proteinas motoras= exemplo a miosina
-Proteinas que intercalam entre os filamentos de actina formando uma estrutura.
A ao coordenada destas protenas permite uma sucesso de eventos que leva ao
movimento.
Sucesso de eventos da atividade migratria

1) A clula tem que comear a polimerizar a actina no sentido que ela quer se
movimentar. A emisso de filopodium de actina chamado de PROTUSO
2) A clula depois de emitir o filopodium ela tem que se aderir ao substrato novo.
3) Ao mesmo tempo que ela se fixar ela tem que sofrer uma contrao no lado aposto par
que ela consiga empurrar a clula.
Projetar o citoplasma
(polimerizao de
actina)

PROTUSO DA CELULA

Puxar o resto do corpo celular

e se ancorar ao novo substrato

CONTRAO DA REGIO
POSTERIOR

A clula se fixa no novo

substrato

ANCORAMENTO

Protenas -actinina e fimbrina organizam os feixes

A -actinina liga os filamentos de actina e forma um feixe que tem espao que permite
a mesma se ligar FEIXE CONTRTIL.
A Fimbrina forma um feixe com um espao menor entre os filamentos de actina. Ento
no permite a mesma se ligar FEIXE ESTRUTURAL.
A protena FILAMINA estabiliza as interaes dos filamentos no crtex celular.

Filamina tem dificuldade de movimentao.

A estabilidade da pela filamina que mantem a rede de actina no lugar certo, abaixo da
membrana.
A filamina segura um filamento no outro, ento quando vai movimentar eles escorregam em
si baguna a rede formando a bolha.
O crescimento do lamelipdio mediado pelas ARPs e Protenas auxiliares

Para onde a clula quer se movimentar tem que ter maior polimerizao para isso tem
que ter muita protena capeadora para evitar que ocorra a despolimerizao pelas protenas
depolimerizadoras.
Para a finalizao do movimento so necessrios o ancoramento e a contrao
ANCORAMENTO= contatos focais de integrina e finalmente....
CONTRAO= interao com os motores miosina

As propriedades motoras deste sistema so utilizadas por bactrias patognicas. A bactria

faz com que os filamentos de actina comecem se polimerizar empurrando ela para frente.
Os filamentos de actina vo se polimerizando atrs dela, empurrando-a para frente.
A miosina-I pode movimentar vesculas ou a membrana plasmtica em relao aos
filamentos de actina.

A molcula de miosina a cabea gruda na actina e a cauda na vescula e ai a cabea

empurra a vescula.
Experimento onde a miosina foi fixada no substrato e filamentos de actina soltos esto
marcados. A cabea globular se liga ao filamento de actina, assim que adiciona ATP a
cabe~ca consegue empurrar a vescula.
Cada tipo de filamento tem uma protena adequada que atua sobre ele.
Estrutura bsica do motor molecular miosina

Os dmeros de miosina tambm podem se associar formando filamentos

Forma um feixe bipolar de miosina II onde a cabea polar fica para fora. O filamento
com vrias molculas de miosina associadas que vai possibilitar a contrao.
MIOSINA I= atua como monmero movimenta em funo dos feixes de actina.
MIOSINA II= responsvel pela contrao muscular (especializada para realizar movimentos
para contrair todo msculo junto). Elas se associam formando um feixe de miosina (filamento
grosso) que tem as cabeas globulares para fora, essas cabeas vo interagir com os
filamentos de actina.
A miosina II permite movimentos de contrao atravs de deslizamento sobre os filamentos
de actina.

Ciclos repetidos de ligao e liberao promovidos pela hidrlise do ATP geram o

movimento. A hidrlise do ATP para ADP que vai controlar o movimento.
Quando ela se liga a actina ela libera o ADP e vai receber ATP ento se solta, gira, movimenta
e se liga a outro ponto de actina puxando o filamento. Aqui a miosina no se movimenta, o
movimento ocorre devido a ligaopuxadesliga da actina.
Quando se trata de movimento de estruturas dentro da clula so motores moleculares
associados a trilhos de microtbulos. No caso de contrao muscular diferente, tem
filamentos de actina que se deslizam devido a miosina II (tambm forma feixes de miosina).

Esse arranjo permite a contrao muscular

Nas clulas musculares tem o sarcmero onde os filamentos de actina + miosina esto
sobrepostos (mais escuro). E na lateral tem o DISCO Z que onde os filamentos de actina
estao ancorados. A contrao muscular ocorre pelo encurtamento do sarcmero.
As clulas musculares se contraem por um mecanismo de deslizamento dos filamentos.

A contrao muscular induzida por um sbito aumento na concentrao de clcio.

Os tbulos T (transversais) e o retculo sarcoplasmtico possibilitam o espalhamento
rpido do sinal e assim a contrao simultnea de todas as miofibrilas da clula.

Estmulo eltrico entra pela marginao (??) passa pelo retculo sarcoplasmatico que libera
Calcio por todo o sarcmero.
O aumento da concentrao de clcio provoca alterao nas protenas troponina e
tropomiosina.

O filamento de actina protegido pela troponina e tropomiosina. A tropomiosina

bloqueia o sitio de ligao para a miosina. Quando tem exposio de clcio a tropomiosina
altera a sua posio e libera o stio para ligao da miosina.
Sucesso de eventos da contrao muscular.
Estimulo nervosoTubulos Testimula o reticulo sarcoplasmticolibera clcioo clcio se
liga ao complexo troponinadesloca a tropomiosina.
A contrao acontece rpido porque o clcio rapidamente reabsorvido pelo retculo e s
seria liberado de novo com um novo estmulo.
Tropomiosina se liga ao sitio de ligao para miosina. S que quem sensitiva ao clcio a
troponina.
Drogas que afetam a polimerizao de filamentos de actina.
Faloidina= liga e estabiliza o filamento (no
despolariza)
Citocolasina= capeia o terminal positivo
(protege de despolizao)
Latruculina= se liga a subunidades isoladas e
impede a polimerizao.
De qualquer forma a movimentao est prejudicada.
Faloidina usada como um marcador de presena de filamentos de actina, ela usada
quando est associada a um fluorforo.