La apomixis:

Por qu toma tanto tiempo?

Toda la situacin relacionada con la apomixis me recuerda la pelcula de 1902

de George Mlis, Viaje a la luna. En la pelcula, simplemente dispararon una
gran bala desde un can gigante hacia la luna y, despus de un breve lapso, la
bala choc en la gigantesca rbita de queso. Sesenta y siete aos ms tarde,
realmente aterrizamos en la luna, pero no antes de que hubiramos desarrollado
y comprendido cabalmente una enorme gama de tecnologas nuevas, as como
los conceptos cientficos bsicos involucrados. Ahora, en nuestro trabajo sobre
la apomixis, hemos llegado a la etapa en que comprendemos que nuestro
enfoque inicial era demasiado sencillo y necesitamos saber ms.

-Enrico Perotti, integrante del equipo de investigacin sobre la apomixis

Hace ms de 13 aos, el Instituto de Investigacin para el Desarrollo (IRD) se

uni al CIMMYT para comenzar a trabajar en la generacin de maz apomctico.
Haba muchas esperanzas de que, cruzando el maz con su pariente apomctico
silvestre Tripsacum, los investigadores podran generar una planta de maz que
produjera clones de s misma en todas las generaciones (vase Qu hace que
la apomixis sea una caracterstica valiosa?

No es necesario estar familiarizado con la terminologa o el proceso para

reconocer el potencial revolucionario de la apomixis. Se podra acelerar
considerablemente la produccin de hbridos, sera econmicamente viable el
mejoramiento para pequeos ambientes con condiciones particulares y los
agricultores pobres podran reciclar semillas que conservaran las
caractersticas de los hbridos.

Los conocimientos acerca de la apomixis se han incrementado mucho, al igual

que la impaciencia por desarrollar maz apomctico. Entonces, por qu ha
tomado tanto tiempo?

El primer mtodo
Al comienzo, explica el jefe del equipo de investigacin Olivier Leblanc, trabajbamos segn
la premisa de que la apomixis es una caracterstica sencilla y que no sera muy difcil transferir
una caracterstica controlada por un solo gen al maz con la tecnologa existente. Buscbamos
un mejoramiento aplicado ms que un mtodo cientfico bsico. No estbamos interesados en
los mecanismos y la base molecular del fenmeno. Slo necesitbamos encontrar ese
espcimen apomctico nico que estaba oculto all, entre medio milln de plantas
experimentales. Nunca lo encontramos.

se es el origen de gran parte de la impaciencia. En el fitomejoramiento, cuando

se identifica una fuente de variabilidad para una caracterstica determinada, con
el tiempo, mediante cruzas progresivas entre las plantas, por lo general se
puede incorporar la caracterstica deseada en variedades o lneas de maz. Pero
resulta que la apomixis es compleja. Ciertamente, no cedi ante un
procedimiento progresivo.

Significa esto que esos aos de trabajo fueron infructuosos? No. En la ciencia, a medida que
se desechan pistas falsas, se reorientan los esfuerzos sobre la base de los conocimientos
obtenidos, opina David Hoisington, director del Centro de Biotecnologa Aplicada del CIMMYT,
donde se lleva a cabo la investigacin sobre la apomixis.

Como tenemos un equipo, colaboradores y avances tan slidos en la ciencia, explica

Hoisington, podemos continuar avanzando hacia la meta definitiva, aun cuando cambiemos de
ruta de vez en cuando.

El camino menos transitado

Si bien la creacin de maz apomctico sigue siendo la meta del equipo, el camino para
alcanzarla ha cambiado de un mtodo relativamente mecnico transferir el gen o genes de la
apomixis directamente desde Tripsacum al maz a explorar otras opciones que requieren un
mejor conocimiento del proceso apomctico en general.

La mayora de los equipos que trabajan en la apomixis, estn, segn Leblanc, investigando y
manipulando las vas sexuales de las plantas para obtener un producto apomctico. El equipo
del CIMMYT y el IRD sigue utilizando una planta apomctica y una planta de cultivo afn. Al
hacerlo, puede aprovechar su larga experiencia con Tripsacum, una planta modelo
verdaderamente til para la apomixis, opina el integrante del equipo Daniel Grimanelli, que es
un mtodo original en comparacin con los que utilizan otros grupos. Estn investigando la
biologa celular y la gentica molecular de los procesos que sustentan la apomixis, as como las
barreras en el genoma de maz para la transferencia de la caracterstica.

Tambin obtienen apoyo de un consorcio formado en 1999 para acelerar los avances. El IRD y
el CIMMYT se unieron mediante un acuerdo de cinco aos con Pioneer Hi-Breed, Groupe
Limagrain y Novartis Seeds (ahora Syngenta). El propsito del acuerdo es compartir esfuerzos
en la tarea de resolver el problema de la apomixis. Para el equipo del CIMMYT y el IRD, esto
significa acceso a material biolgico, bases de datos, informacin y expertos, as como
recursos financieros adicionales.

El equipo est entusiasmado con su nueva orientacin. Estamos trabajando en mtodos

novedosos y tenemos cosas muy interesantes en marcha, comenta Leblanc. Pero es
demasiado pronto para hablar de logros importantes. Ya no entraremos en el juego de las
predicciones.

Qu hace que la apomixis sea una caracterstica valiosa?

La apomixis la reproduccin asexual por medio de la semilla genera

plantas que son clones exactos de la planta progenitora. La caracterstica
se presenta en forma natural y se ha identificado en ms de 400 especies
de plantas, entre ellas algunas variedades de Tripsacum, un pariente
silvestre del maz. En una forma apomctica de reproduccin, se
transfieren copias exactas de los cromosomas de la planta progenitora a
la progenie, con lo cual cada descendiente es un clon de su antepasado.
Esta transferencia directa de cromosomas (y por lo tanto de
caractersticas) contina generacin tras generacin.

Las implicaciones de transferir la caracterstica apomctica a un cereal

importante como el maz son enormes. Los mejoradores podran reducir
considerablemente el tiempo y los costos para producir variedades
nuevas, por ejemplo, arreglando al momento la composicin gentica
deseada, lo cual por lo general toma varios ciclos. La apomixis es de
particular inters para el CIMMYT porque hara ms viable desde el punto de
vista econmico el mejoramiento y el desarrollo de variedades adaptadas para
zonas agroecolgicas nicas y para usos especficos.

Los productores de semilla podran reducir el costo de la produccin de

hbridos, lo cual se traducira en precios ms bajos de la semilla para los
agricultores. Los agricultores de los pases en desarrollo que obtuvieran
semilla mejorada portadora de la caracterstica de la apomixis podran
reciclar su semilla de manera indefinida, conservando al mismo tiempo
las diversas propiedades que incrementan el rendimiento generalmente
asociadas con los hbridos, que no pueden ser reciclados en forma
productiva.

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Si desea mayor informacin, dirjase a:

Olivier Leblanc (o.leblanc@cgiar.org)
Dra. Silvina Pessino1; Dr. Juan Pablo Ortiz2; Dra. Viviana Echenique 3
Dra. Ana Gonzlez4; Dr. Guillermo Seijo4; Ing. Camilo Quarin4
1
Ctedra Qumica Orgnica
2
Ctedra Qumica Biolgica, Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad
Nacional de Rosario
3
CERZOS-CONICET. UNS
4
IBONE-CONICET. UNNE

pessino@arnet.com.ar

Apomixis: una herramienta poderosa para el mejoramiento

La apomixis es una forma de reproduccin clonal a partir de la formacin

de semillas que portan un embrin genticamente idntico a la planta
materna. Este modo de reproduccin aparece naturalmente en muchas
especies de plantas como las frutillas, la manzana, los ctricos, el mango, la
mandioca y numerosas gramneas forrajeras como el pasto horqueta
(Paspalum notatum) y el pasto llorn (Eragrostis curvula).

Las plantas apomcticas no realizan las etapas normales de la

reproduccin sexual: no reducen a la mitad el contenido de cromosomas
durante la formacin de las clulas reproductivas (gametas), ni tampoco
llevan a cabo la fecundacin, salvo para generar en algunos casos el
endosperma de las semillas. Los embriones se originan a partir de clulas
maternas, pero lo hacen siempre dentro de los confines del vulo. Se
forma as una semilla verdadera y perfecta, que contiene adentro un
individuo idntico a la planta materna.

Durante la reproduccin sexual una clula del vulo (clula madre de la

megspora) inicia un proceso de reduccin meitica que concluye con la
formacin de cuatro megasporas haploides. En la mayora de las angiospermas
slo una de las megsporas es funcional (las dems degeneran) y se divide por
mitosis para formar un saco embrionario octanucleado integrado por una clula
huevo, dos sinrgidas, dos ncleos polares y tres antpodas.
Figura 1: Saco embrionario reducido de un genotipo sexual de Paspalum
notatum. En el extremo micropilar se observa la clula huevo rodeada por las
sinrgidas. Hacia el centro del saco se observan los dos ncleos polares. En el
extremo de la chalaza se observan 4 antpodas. La foto fue gentilmente cedida
por el Dr. Francisco Espinoza (IBONE, CONICET).

Durante la reproduccin apomctica de tipo gametoftica se forma siempre

un saco embrionario no reducido, cuyas clulas contienen el nmero de
cromosomas tpico de las clulas somticas. Por ejemplo en la
reproduccin apomctica aposprica algunas clulas de la nucela se
dividen por mitosis para formar uno o varios sacos embrionarios no
reducidos, que contienen una clula huevo, las sinrgidas y ncleos
polares y pueden o no poseer antpodas, segn el caso.
Figura 2: Sacos embrionarios no reducidos de un genotipo apomctico de
Paspalum notatum. Se trata de un corte seriado del mismo vulo. Se distinguen
varios sacos en el mismo vulo, que se originaron en distintas clulas
nucelares. Es notable la ausencia de antpodas. La foto fue gentilmente cedida
por el Dr. Francisco Espinoza (IBONE, CONICET).
Mientras la clula huevo reducida de una planta sexual espera la fecundacin
para formar el cigoto y luego el embrin, la clula huevo no reducida de las
plantas apomcticas inicia la formacin del embrin por partenognesis, sin
esperar la fecundacin. A veces la fecundacin es necesaria para formar el
endosperma (pseudogamia), pero otras veces ste se desarrolla en forma
autnoma.

La introduccin de la apomixis en los cultivos mayores (maz, arroz,

sorgo y otros) permitira propagar en forma clonal a los hbridos,
perpetuando su vigor en forma indefinida. Pero tambin permitira obtener
nuevos hbridos interespecficos e intergenricos con mucha facilidad, ya
que la apomixis elimina las restricciones en la reproduccin que impone
el proceso de reduccin de cromosomas durante la formacin de las
clulas reproductivas. Por otra parte, sera sencillo mantener lneas puras sin
necesidad de aislamiento fsico. Se facilitara la tecnologa de transgnicos, ya
que una vez introducido un transgen en un fondo gentico apomctico no sera
necesario realizar retrocruzas para que sea heredado de manera uniforme por
la progenie. Adems, el uso programado del carcter permitira reproducir por
semillas muchas especies que actualmente se propagan por mtodos
vegetativos.

La apomixis representa un beneficio potencial enorme para la agricultura de los

pases en desarrollo y sus muchos posibles usos varan de acuerdo a la regin
considerada. Asia necesita urgentemente nuevas variedades de sus principales
cereales (principalmente arroz) que posean un mayor potencial de rendimiento
que las usadas actualmente, ya que deber duplicar su produccin en los
prximos 50 aos utilizando el mismo rea de cultivo. Uno de los principales
obstculos que enfrenta la produccin de arroz hbrido de mayor calidad es la
imposibilidad de realizar cruzamientos viables de las variedades mejoradas con
otras salvajes portadoras de genes de inters agronmico. La introduccin de
la apomixis en el arroz facilitara enormemente la produccin de arroz hbrido,
ya que sta eliminara las etapas propias de la reproduccin sexual (que no
pueden llevarse a cabo correctamente en los hbridos) y permitira propagar
clonalmente a los mismos por innumerables generaciones. El beneficio
potencial calculado para la generacin de arroz hbrido usando la
tecnologa de apomixis fue calculado entre 2,5 y 4 billones de dlares
anuales. En el IRRI (International Rice Research Institute, Filipinas) se
llevan a cabo desde hace varios aos intentos por transferir la apomixis al
arroz.

Asimismo en frica y Latinoamrica se requiere un gran nmero de variedades

mejoradas de diferentes cultivos (entre ellos algunos tan importantes como el
maz), cada uno de ellos bien adaptados a los diferentes nichos ecolgicos
propios de esos continentes. Los agricultores africanos y latinoamericanos
podran beneficiarse enormemente por el uso de las semillas hbridas de
cultivos que se autorepliquen por apomixis conservando todo su potencial en
forma indefinida generacin tras generacin, y por la reproduccin por semillas
de especies como la papa. En el CIMMyT (Centro Internacional de
Mejoramiento de Maz y Trigo, Mxico), la Universidad del Estado de Utah,
USA y la Universidad de Georgia, Tifton, Georgia, USA se hacen intentos por
introducir el carcter en el maz, el trigo y el mijo.

Sexualidad versus Apomixis

Las estrategias de manipulacin de la apomixis deben desarrollarse
cuidadosamente para impedir que el carcter se disperse en forma
indiscriminada a variedades sexuales salvajes, disminuyendo la
variabilidad gentica y el potencial evolutivo de las especies en cuestin.
Las plantas utilizan la sexualidad para mantener la variabilidad gentica
dentro de sus poblaciones, ya que este modo de reproduccin implica la
recombinacin o rearreglo de genes durante el proceso de formacin de
las clulas reproductivas (gametas) seguida de la reunin en un mismo
individuo de genes recombinados provenientes de los progenitores
femenino y masculino. As, cada individuo generado de la reproduccin sexual
es nico. Esta variabilidad es sumamente importante para la evolucin y
supervivencia de las especies.

tctica ms refinada Las plantas apomcticas naturales no prescinden en

absoluto de las ventajas de la sexualidad. Utilizan variadas estrategias
para mantener tanto su capacidad de variar cuando es necesario como de
reproducirse velozmente en forma clonal si esto resulta conveniente.
Muchas plantas apomcticas forman una parte de su progenie por
sexualidad y otra por apomixis. Otras usan una an: presentan individuos de
dos tipos diferentes, los que tienen un nmero bajo de cromosomas (diploides)
se reproducen por sexualidad y los que tienen un nmero alto de cromosomas
(poliploides) se reproducen clonalmente por apomixis. Los individuos sexuales
pueden eventualmente duplicar su nmero de cromosomas y convertirse en
individuos apomcticos poliploides. Esta estrategia compleja de reproduccin
(conocida como estrategia Henry Ford, en memoria del creador de los
conocidos automviles) le permite a la planta generar variabilidad a niveles
diploides hasta producir un individuo de caractersticas superiores, cuya
nmero de cromosomas es luego duplicado para reproducirlo muy
eficientemente en forma clonal. Tal como hizo alguna vez el famoso americano
ensayando miles de modelos infructuosos hasta producir el exitossimo Ford T,
que vendi por millones en todos los rincones del mundo. No debe extraarnos
entonces que las plantas apomcticas hayan invadido y ocupado velozmente
todas las reas del planeta que quedaron disponibles luego de la ltima
glaciacin, y que muchas de ellas sean consideradas malezas por su muy
eficiente velocidad de propagacin.

En el caso de utilizarse una tecnologa para generar hbridos clonales por

la manipulacin de la apomixis es esencial confinar el carcter
exclusivamente a los individuos a cultivar, evitando su dispersin
descontrolada a las especies salvajes. Entre las varias estrategias a
utilizar para lograr este objetivo est la de introducir el carcter en
individuos macho-estriles que no produzcan polen. La planta podra
entonces reproducirse eficientemente en forma clonal, sin generar polen
que pueda dispersar los genes fuera del sistema cerrado del cultivo. De
hecho existen numerosas especies apomcticas autnomas, donde tanto
el embrin como el endosperma son generados sin necesidad de
fecundacin.

Investigacin de las bases moleculares de la apomixis

Como sucede con cualquier otro carcter de inters agronmico, la

manipulacin de la apomixis aplicada al mejoramiento requiere de un
conocimiento detallado de sus bases moleculares. O sea, cules son los
genes involucrados en el desarrollo del carcter y cules las vas
metablicas afectadas.
Nuestro grupo se dedica a estudiar cules son los genes y las vas moleculares
involucradas en la reproduccin apomctica. Este trabajo se realiza en el marco
de una colaboracin entre la Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad
Nacional de Rosario (FCA UNR) el CERZOS (Centro de Recursos Naturales de
la Zona Semirida, CONICET, Baha Blanca) y el IBONE (Instituto de Botnica
del Nordeste, CONICET, Corrientes). Inicialmente se identific el locus
genmico que controla la apomixis aposprica en el pasto africano Brachiaria
brizantha. Luego se llev a cabo una caracterizacin gentica de ms de 40
accesiones del pasto apomctico Paspalum notatum, originarias de diferentes
pases de Amrica. Esta caracterizacin detallada nos permiti seleccionar
genotipos apropiados para obtener cruzamientos con el fin de realizar un mapa
gentico completo de la especie Paspalum notatum.

Figura 3: Poblacin utilizada para el mapeo gentico y localizacin del locus

que gobierna a la apomixis en Paspalum notatum. Esta familia fue generada a
partir del cruzamiento entre una planta madre sexual (parental pistilado) y un
dador de polen apomctico. La poblacin es segregante para el carcter
apomixis. A partir de ella se gener un mapa gentico completo de Paspalum
notatum a nivel tetraploide y se caracteriz la regin genmica que dispara la
reproduccin asexual en esta especie.
Un mapa gentico es un esquema de la posicin que ocupan los genes
dentro de los cromosomas. Utilizando marcadores moleculares se
desarrollaron mapas genticos completos a nivel diploide y tetraploide.

Figura 4: Construccin del mapa gentico de Paspalum notatum. En la foto se

observa un patrn de bandeo correspondiente a marcadores moleculares de
AFLP (Amplification Fragment Length Polymorphisms) obtenido a partir de la
poblacin de mapeo. Cada calle del gel corresponde a una planta de la familia
segregante utilizada.
Se determin que en P. notatum el/los gen/es que controlan la apomixis se
encuentran localizados en un sector de un cromosoma que ha sufrido una
alteracin (posiblemente una inversin). Los genes ubicados cerca y dentro de
esta regin estn inactivados, dando origen a la apomixis. Se caracteriz a
nivel molecular el desarrollo en los rganos reproductivos de plantas
apomcticas de Paspalum notatum y de Eragrostis curvula (pasto llorn),
comparndolo con el de las plantas sexuales. De esa manera logramos
identificar numerosos genes que presentaban actividad o estaban inhibidos
(silenciados) nicamente en la planta apomctica. Algunos de estos genes se
hallan localizados dentro de la regin genmica que gobierna el carcter. Los
genes descubiertos son una caja de herramientas con la que se puede
intentar manipular el carcter apomixis para utilizarlo en beneficio de la
agricultura. Se han iniciado experimentos para modificar la expresin de los
genes identificados en plantas de pasto horqueta.
Adems de los Dres. Pessino, Ortiz, Echenique, Gonzlez, Seijo y el Ing.
Quarin, integran este grupo de investigacin las Dras Silvina Felitti y Juliana
Stein, las becarias de CONICET Bioq. Natalia Laspina, Lic. Ana Ochogava, Lic.
Maricel Podio, Lic. Lorena Siena y Lic. Mara Pa Rodrguez (FCA UNR), el Dr.
Gerardo Cervigni y el Lic. Juan Pablo Selva (CERZOS) el Dr. Francisco
Espinoza, el Dr. Eric Martnez, la Lic. Romina Rebozio, la Ing. Marita Sartor y la
Ing. Florencia Galdeano (IBONE).

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 Apomixis, un fenmeno en proceso de adopcin natural en
maz?
Is maize in a trend of natural adoption of apomixis?

Jos Espinoza Velzquez1, Humberto de Len castillo1

Resumen
Se informa aqu de posibles mecanismos especiales para la formacin de semilla en
dos poblaciones de maz, BAP (enana) y NAP (normal), seleccionadas originalmente
para alta frecuencia poliembrinica (PE, 50 a 60%), encontrando adems poliploida
en BAP (2n = 3X = 30). La experimentacin se llev a cabo en lotes aislados, ambas
poblaciones, con el objeto de incrementar la frecuencia PE y aplicar tres modalidades
de aislamiento-proteccin de jilotes que impidieran la fecundacin por polen en el
ambiente; una modalidad incluy la adicin de polen deshidratado slo para simular
efecto de polinizacin; tratamientos con tres repeticiones, 15 plantas por repeticin.
Los resultados demuestran una incidencia general entre 15 y 51% de granos formados
sin que para ello mediara la polinizacin; el tratamiento con polen deshidratado
obstruy pero no impidi (P .10) la formacin de grano, afectando aparentemente la
penetrancia del fenmeno. El nmero de granos presentes en mazorcas positivas fue
variable, prevaleciendo los casos de menos de 10 semillas; la proporcin de mazorcas
con ms de 10 semillas fue de 44% en BAP, y 25% en NAP. Los granos en el olote se
dispusieron de manera aleatoria, pero localizados mayormente en el segundo tercio
del mismo. Los datos indican que la proporcin de mazorcas con grano fue superior al
que pudiera esperarse por contaminacin de polen en el manejo artificial de la
reproduccin en maz, generando una base creble para plantear que BAP y NAP
contienen mecanismos de reproduccin no-sexuales que podran referirse a una
fuente apomctica maz-maz para estudios bsicos y aplicados en el tema.

Palabras clave: Zea mays L., poliembriona, reproduccin asexual, poliploida.

1
Instituto Mexicano del Maz Dr. Mario E. Castro Gil Universidad Autnoma Agraria Antonio Narro. Buenavista,
Saltillo, Coahuila. Mxico. C.P. 25315; jespvel@uaaan.mx
Abstract

There is a possibility that non-sexual mechanisms are taking place in two maize
populations, named here as BAP, dwarf and NAP, normal, originally selected favoring
polyembryony (PE) to actual frequencies of 50 to 60%; it has been also detected
polyploidy (2n=3X=30) in BAP. Experimentation on these populations was made using
isolated pollination fields to increase PE frequency and to apply three procedures
(three traits, three replicates, 15 plants per replication) on silks covering thought as
physical barriers to avoid pollination; one of the traits included the addition of
dehydrated pollen simulating pollination. Results showed among 15% and 51%
incidence of ears with grains, formed without natural or forced pollination. The
dehydrated pollen trait obstructed but not impeded grain formation (P.10) acting more
likely as an obstacle on penetrance of the trait. Variation in grain number was also
found, prevailed the cases of ears with less than 10 seeds; proportions of higher seed
numbers were 44% in BAP and 25% in NAP. The ear grain distribution was at random
but located mostly on the second third of the cob length. As seen, the proportion of
grained ears found in the purposely covered silks-ears was higher than the expected
by mishandling artificial maize pollination; indeed, results are a good evidence for some
non-sexual mechanism which is occurring in BAP and NAP populations along with
sexual reproduction, and they might be taken as a maize sources of certain class of
apomixis for basic and applied research.

Key words: Zea mays L., polyembryony, asexual reproduction, polypoidy.

Introduccin

La apomixis se ha colocado como un fenmeno relevante en la agricultura ante la

posibilidad de transformar cultivos de importancia mundial, normalmente de
reproduccin sexual, en clones de procedencia materna, apomcticos, condicin que
confiere ventajas de aplicacin agrcola, como de alguna forma lo sealan Koltunow y
Grossniklaus (2003).

Lo que algunos han llamado el sueo en la mejora de plantas (Becker 1998; GRAIN,
2001; Perotti et al, 2004) ha merecido atencin los ltimos 40 a 50 aos, generndose
conocimiento relevante en desarrollo del vulo, embrin y endospermo, fenmenos
clave en la formacin de semilla, tanto en plantas sexuales como apomcticas
(Koltunow y Grossniklaus, 2003); sin embargo, como lo declaran Perotti et al. (2004),
los mtodos convencionales de mejoramiento han fallado en lograr la anunciada
transferencia de la apomixis observada en especies silvestres a cultivos agrcolas; es
todava una expectativa que la ingeniera de la apomixis puede redituar en un mayor
conocimiento de la reproduccin sexual y su eventual manipulacin.

El conocimiento actual de especies naturalmente apomicticas indica que stas son

tambin poliploides y de manifestacin apomictica facultativa, es decir que las plantas
hembra producen proporciones variables de semillas de origen tanto sexual como
asexual en sus estructuras florales, y que la dotacin cromosmica en ellas es de tres
o ms juegos completos (Grimanelli et al, 2001; GRAIN, 2001; Perotti et al, 2004); otra
caracterstica concurrente es la de semilla poliembrionica (Koltunow 1993), condicin
de dos o ms embriones por semilla, los cuales pueden ser de origen sexual o
asexual.

El maz, especie de reproduccin sexual, considerada diploide de 20 cromosomas, sin

ejemplares silvestres conocidos, completamente domesticado, es uno de los cultivos
candidato a ser apomixizado; trabajos en este sentido se ha venido desarrollando
desde los aos sesenta; los ms publicitados son los del ARS-USDA (Becker 1998;
Bretting 1999), organismo gubernamental que logr patentes para sus Apomictic
maize y supuestos genes que lo influyen; y el CIMMYT en convenio con ORSTOM-
IRD de Francia (Savidan 1998) quienes tambin obtienen patentes relativas a sus
hallazgos en la introgresin Maiz-Tripsacum. El ARS-USDA otorga a Bryan Kindiger
(norteamericano) y a Victor Sokolov (ruso) el crdito como co-inventores de sus
maces apomcticos; publicaciones relativamente recientes de estos investigadores
relatan la incapacidad de esos maces apomicticos de tener un comportamiento de
maz comn (Kindiger, 2001; Sokolov, 2001). De las publicaciones de investigadores
en CIMMYT sobre el tema destaca la de Perotti et al (2004) sealando que la fallida
recuperacin de cultivos apomcticos transformados pudiera ser una consecuencia
directa de la complejidad gentica de la apomixis y su relacin con todo el fondo
gentico en el que se inserta.

De acuerdo con Savidan (2000) la apomixis se origina por la expresin a destiempo y

fuera de lugar (ectpica) de genes que regulan el desarrollo del embrin, los cuales se
activan antes de lo que ocurre en el proceso sexual; sta activacin puede darse
incluso en clulas que normalmente no participan en el proceso reproductivo; an
ms, la expresin ectpica slo resulta en apomixis si sta acta en un fondo gentico
favorable.

Investigacin molecular-genmica se est aplicando en el tema, como lo sealan

Koltunow y Grossinklaus (2003) y Perotti et al (2004). Los trabajos sobre apomixis en
maz utilizan generalmente fuentes externas donadoras del fenmeno, principalmente
de Tripsacum dactyloides, graminea silvestre, apomctico facultativo, poliploide 2n=4x=
72 cromosomas, que como donador puede ser excelente, pero que ha impedido la
recuperacin exitosa de tipos maz aprovechables; quiz esta sea la causa para
sealar la necesidad de un fondo genomial favorable, condicin que no se ha dado
en mucho tiempo con la estrategia de hibridacin Maz-Tripsacum.

La apomixis, complejidad reproductiva derivada de la sexualidad en plantas, va

regularmente acompaada de poliploida y de poliembriona. En algunas poblaciones
de maz que muestran estas dos ltimas caractersticas, la cuestin es si existen
fuentes genticas directas dentro de ellas para la expresin de apomixis; de ser as, no
se requerira obtenerla de parientes u otras fuentes. Tambin se superaran las
barreras que presenta un fondo genomial desfavorable como el heredado de cruzas
Maz-Tripsacum.
En este trabajo partimos de los maces UAAAN-IMM-BAP y UAAAN-IMM-NAP,
poblaciones aqu obtenidas, y las cuales concentran el fenmeno poliembriona en
frecuencias de 50 a 60%; producen granos de alta calidad nutrimental (Espinoza et al,
2004; Valdez et al, 2004); y en el caso de BAP se ha podido documentar la ocurrencia
de poliploida (Espinoza et al, 2000). Con base en estas cualidades se plantea que los
grupos genticos referidos tienen el potencial generador de apomixis y por lo tanto,
pueden llegar a constituirse en una fuente de los mecanismos genticos funcionales
de la apomixis en maz. En preparacin para estudios de mayor precisin, los trabajos
actuales se basan en observaciones directas bajo condiciones de campo, en lotes-
vivero para el incremento de las poblaciones. Este artculo presenta informacin de la
incidencia y distribucin de granos en mazorcas donde sus jilotes de origen fueron
fsicamente impedidos para recibir polen, o recibieron polen deshidratado slo como
una simulacin de la polinizacin.

Metodologa experimental

Las poblaciones base del proyecto se incrementaron en segundo ciclo de

recombinacin, practicada con 4 mil a 5 mil plantas, en lotes aislados durante el ciclo
P-V/2004 en Buenavista, Saltillo; de aqu se seleccionaron de 300 a 350 familias de
medio hermanos (FMH) representando los mejores tipos de cada grupo, es decir las
poblaciones de alta poliembriona (PE), denominadas BAP y NAP, as como las de
baja PE, denominadas BBP y NBP; luego, a partir de estas FMH, aplicando una
presin de seleccin de 10%, se retuvieron a las mejores 30 familias, calificadas por
su condicin sobresaliente en sanidad, frecuencias de PE y germinacin, tipo de grano
y mazorca. El grupo selecto de FMH de BAP y NAP se sembraron en Tepalcingo,
Morelos durante el ciclo O-I/2004-2005 con la finalidad de incrementar la disponibilidad
de semilla y dar cumplimiento a los trminos del convenio UAAAN- COECYT-COAH.-
CONACYT, sobre la entrega de dos muestras poblacionales de prototipos de maces
poliembrinicos.

En cada uno de los lotes BAP y NAP desarrollados en 2004, se realiz la practica de
cubrir de una manera segura a 135 jilotes, electos al azar, con la finalidad de utilizarlos
en la aplicacin de tres tratamientos de manejo reproductivo, donde se evitara la
polinizacin regular, propia del maz. Una vez cubiertos los jilotes, las plantas madres
se delimitaron en grupos de 15, formando as nueve unidades experimentales para
recibir la asignacin de manera aleatoria a tres tratamientos, tres repeticiones cada
uno; los jilotes participantes fueron de pelo abundante y fresco, protegidos por la bolsa
encerada (glacin) que los aisl del polen circundante; al recibir los tratamientos, se
recubrieron con bolsa de papel, la usual en el manejo reproductivo de maz; los
tratamientos fueron como sigue: 1) proteccin del jilote desde su aparicin con bolsa
encerada, firmemente sujeta, re-cubierta con bolsa de polinizar en posicin invertida y
sujeta al tallo, cerrando completamente, evitando aberturas; 2) igual que en (1) pero
agregando al jilote una porcin de polen deshidratado al ambiente, colectado de
plantas frtiles cinco das antes del tratamiento; y 3) como en polinizaciones normales,
jilotes cubiertos con glacin, y re-cubiertos con bolsa de papel, sujetndola al tallo por
una grapa, sin cierre hermtico.
En todos los casos, el manejo de los jilotes se practic el mismo da, despus de las
18:00 horas. Los datos colectados se refieren a la frecuencia de casos con granos, as
como al nmero y posicin de ellos en el olote, en cada tratamiento. El diseo
experimental fue uno completamente al azar, tres tratamientos y tres repeticiones
(promedio de 15 plantas por repeticin); anlisis de varianza de acuerdo al diseo.

Resultados y discusin

Las poblaciones de inters poliembrinico mantuvieron su nivel de frecuencia

PE, alto en los casos de BAP y NAP, y bajo en los casos de BBP y NBP (Cuadro 1);
comportamiento semejante y deseable mantuvieron las dos poblaciones BAP y NAP
incrementadas va cruzas meso-fraternales en Tepalcingo, Mor. (Cuadro 2). Los dos
ciclos de recombinacin en lotes aislados de los primeros cuatro grupos de seleccin
(alta PE: BAP y NAP; baja PE: BBP y NBP) se practicaron buscando que los fondos
genticos correspondientes lograran la estabilizacin con respecto a los loci que
concurren o se involucran en la poliembriona, y de otros que pudieran estar asociados
a ella, principalmente los que influyen la reproduccin y calidad de semilla.

Cuadro 1. Frecuencias promedio de germinacin y poliembriona, datos de campo e

invernadero, poblaciones de inters poliembrinico. UAAAN, P-V / 2004.

Nm. de Nm. semillas

Poblacin FMH Por FMH PG PPE PDEF

P3Ms

BAP 2241 49 1 96 7 70 9 97 15
9
 33 348 8 71 14 59 11 64 14 3

NAP 203 48 1 97 6 72 6 84 19 6

29 258 9 69 12 61 10 12 5 16 7

BBP 210 49 1 99 2 2.5 3 0 33

31 257 18 80 9 4.5 1 0 61

NBP 220 50 1 99 1 1.4 3 0 12

32 209 2 92 5 3.5 1 0 54

1
Dato superior , invernadero; inferior, resultados en campo. BAP = poblacin braqutica de alta poliembriona; BBP, de
baja PE; NAP = poblacin talla normal, alta poliembriona; NBP, de baja PE. PG = % germinacin; PPE = % de
poliembriona; PDEF = % plntulas anormales; P3ms = % de semilla de 3 ms plantas.

Cuadro 2. Caractersticas en campo de compuestos balanceados de las poblaciones de

maz, alta poliembriona, Tepalcingo, Morelos, O-I, 2004 / 2005.

Nm. de Nm. semillas

Poblacin FMHS1 Por FMHS PG PPE PDEF P3Ms

BAP 33 130 74 6 58 6 13 5 15 6

NAP 29 150 78 7 57 4 10 3 23 9

1 FMHS = Familias de medio hermanos selectas para generar el siguiente ciclo.

Los resultados numrico-estadsticos relativos a los tratamientos de

jilotes de las poblaciones BAP y NAP, manejados para observar su capacidad
de formar granos sin la polinizacin natural o premeditada, se presentan en
Cuadro 3. Como lo sealaron Espinoza et al (2000) ante el caso de maces
BAP triplodes (2n=3X=30) en frecuencia de 7.1%, existe la posibilidad que esta
poliploida se debiera a clulas germinales no reducidas (apomeiosis) y
fertilizadas por el ncleo generador del polen, por lo que parece ms que una
simple coincidencia que en esta misma BAP, la frecuencia de casos con semilla
(al menos una) en mazorcas maduras, originalmente jilotes protegidos, est en
la banda de 15 y 35%, cifras mayores a lo esperado por contaminacin
espordica en manejo de polinizaciones. Por otra parte, la poblacin NAP
present datos todava ms contundentes, exhibiendo la formacin de uno o
ms granos en jilotes no polinizados en frecuencias de 24 a 51% de los casos.
En las dos poblaciones, los tratamientos sin polen deshidratado son iguales
entre s, pero presentan valores ms altos de mazorcas con semilla que los
exhibidos por el tratamiento con polen muerto (P .10); las evidencias indican
que la adicin de este tipo de polen obstruy significativamente, ms no
impidi, la manifestacin de casos de semillas en jilotes protegidos; el caso
presenta analoga con afectacin de la penetrancia de los genes involucrados
en el control de esta condicin gentica.

Los casos de mazorcas con menos de 10 granos fue el mayoritario en todos los
tratamientos; de hecho, la proporcin general de mazorcas con 10 ms semillas en
NAP slo alcanz 24% del total de mazorcas efectivas, mientras que en BAP el dato
fue ligeramente mayor (35%). La ocurrencia de estos casos permitirn el estudio de
parecido gentico y fenotpico de estas familias.

Por otra parte, el nmero total de granos obtenidos de mazorcas efectivas en

NAP fue de 377 en NAP y de 558 en BAP; recordando que el nmero de jilotes
utilizados en el experimento en cada poblacin fue de 135, el promedio general de
granos en NAP fue de 2.8 por mazorca (incluyendo efectivas y vacas), y de 4.1 en
BAP. Utilizando esta informacin y tomando en cuenta que una mazorca promedio,
generada de manera normal, contienen de 350 a 400 semillas, se puede calcular que
la frecuencia de granos originados por la supuesta va no-sexual es del orden de 0.7%
(NAP) y 1% (BAP), las cuales son proporciones muy altas para considerarlas como
mutacin fortuita en la reproduccin de estos maces. Tambin de inters el hecho de
que la distribucin de los granos en el olote fue aleatoria, y de preferencia en el
segundo tercio de la mazorca; la conjugacin de toda esta informacin pudiera indicar
que en BAP y NAP, el conjunto floral de las mazorcas productivas tienen la capacidad
de desarrollar granos tanto por la va sexual como no-sexual, siguiendo un patrn
especial que les es comn.

Cuadro 3. Anlisis de varianza 1 y proporcin de semillas presentes en mazorcas sin la

ocurrencia de polinizacin en poblaciones poliembrinicas. UAAAN, 2004 .

Indicador Poblacin BAP Poblacin NAP

CGJP NGMP CGJP

NGMP
Cuadrados medios tratamientos 2.23 * 2065.3 NS 3.04 * 356.7
NS

Cuadrados medios error experimental .543 602.23 .76 449.9

CV (%) 18.7 39.6 18.0

50.6

Media general (%) 28.1 62.0 40.7

41.9

Media tratamiento 1 (%) 35.6 80.7 51.1

47.3

Media tratamiento 2 (%) 15.6 32.0 24.4 29.3

Media tratamiento 3 (%) 33.2 73.3 46.7

49.0
1
Datos transformacin seno-1 x . CGJP = Variable: proporcin de granos en jilotes protegidos. NGMP = Nmero de
granos en jilotes-mazorcas protegidas. *, significacin estadstica al 10 %.

Conclusiones

Con base en el historial poliembrinico y poliploide de estas poblaciones, y los

resultados de este trabajo preliminar sobre conducta reproductiva atpica en maz, se
puede plantear que las poblaciones de maz PE, BAP y NAP poseen capacidades de
reproduccin asexual por semilla, en el lindero de alguna modalidad de apomixis: De
corroborarse estas cualidades en las poblaciones de referencia, se contara con una
fuente maz-maz para estudios y aplicaciones reproductivas especiales en la especie.

Literatura citada

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