SEMINARIO

Baeyer-Villiger Mono-Oxigenasas
BVMOs
Enzimas de interés en química orgánica.

María Laura Mascotti

23 de marzo de 2010
 OXIDORREDUCTASAS
OXIDASAS PEROXIDASAS OXIGENASAS/ DESHIDROGENASAS/
HIDROXILASAS REDUCTASAS

MONOOXIGENASAS/ DIOXIGENASAS/
HIDROXILASAS HIDROXILASAS

HEMO- Cu- DEPENDIENTES Fe (NO HEMO)-

DEPENDIENTES FLAVIN- DEPENDIENTES DE DEPENDIENTES
PTERIDINA- DEPENDIENTES OTROS INDEPENDIENTES
DEPENDIENTES COFACTORES DE COFACTORES
 Oxidación de Baeyer- Villiger
• Oxidación de una cetona a éster o lactona.
• 1899: Adolf von Baeyer y Victor Villiger.
Mecanismo de reacción (Criegee 1948)

Oxidantes: ác. m-cloroperbenzoico y trifluorperacético.

• Características:
• Tolera la presencia de varios grupos funcionales
• La regioquímica esta dada por las aptitudes migratorias de los
sustituyentes (voluminosos>pequeños)
• Se mantiene la configuración del carbono quiral que migra

RM tiene que estar:

- Antiperiplanar al enlance O-O del grupo saliente
- Antiperiplanar al par de e- no compartido del –OH.
BVMOs
Monooxigenasas, flavin dependientes (FAD: cofactor) que
utilizan nicotinamida (NAD(P)H) como coenzima
• Catalizan diversas reacciones de oxidación:
• Oxigenaciones nucleofílicas de carbonilos y átomos de B.
• Oxigenaciones electrofílicas de heteroátomos: S, N, Se y P.
• Epoxidaciones por ambas vías.
Enzimas aisladas: CHMO,
CPMO, PAMO, HAPMO, STMO…
Todas de origen bacteriano.

2 CLASES:
Tipo I: Intermedio “Criegee S”, FAD,
NADPH, subunidades idénticas.
Tipo II: Intermedio “Criegee R”,
FMN, NADH, subunidades a2b.
Algunos ejemplos
• Ciclohexanona monoxigenasa (CHMO)
• Ciclohexanonas 2 o 3 sustituidas.
• Ciclopentanonas 2 sustituidas
• Cetonas bicíclicas
Regiodivergencia

Enantiodivergencia
PAMO: Fenilacetona monoxigenasa
- Aislada de Thermobifida fusca por búsqueda de secuencias conservadas.
- Termoestable, FAD cofactor, NADPH coenzima
- Primer BVMO con estructura de Rayos X
- Oxida cetonas aromáticas y alifáticas y sulfuros orgánicos.
pKa 7,82
pKa 9,2
Relacionado al equilibrio
Relacionado a
FAD:C4a-
Arg337
hydroperoxido/FAD:C4a-
peróxido (pKa: 8.4+/- 0.2)
Sustratos:
alquil sulfuros y alquil aril sulfuros
Screening de biocatalizadores
• Biocatalizadores:
• Hongos filamentosos: Aspergillus
• Células vegetales:
• Hairy roots: Brassica napus
• Bacterias: Streptomyces
• Metodologías:
Optimización • Resting cell
• Growing cell
• pH
• Temperatura
• Aireación (O2 disponible)
• Utilización de inhibidores enzimáticos
 Identificación de enzima(s)
• Comparación de:
• Secuencias genómicas o de aminoácidos.
• Rutas metabólicas compartidas.
• Torres Pazmiño, DE y col. Journal of Biotechnology 2010,146: 9-24.
• Torres Pazmiño, DE y col. Current Opinion in Chemical Biology 2009,
14:1–7.
• Kayser, M. Tetrahedron 2009, 65: 947–974.
• Torres Pazmiño, DE y col. ChemBioChem. 2009, 10: 2595- 2598.
• van Berkel, W y col. Journal of Biotechnology. 2006, 124: 670- 689.
• Fraaije, M y col. Appl Microbiol Biotechnol . 2005, 66: 393–400.
• Kamerbeek, N y col. Adv. Synth. Catal. 2003, 345: 667- 678.
GRACIAS!