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INSTITUTO DE QUMICA
&
2 semestre/2016
SUMRIO
1
1.2. PARTE EXPERIMENTAL
concentrao
(g/L) rea do pico
400 26098
800 51857
1200 79004
1600 104511
2000 130298
2
Curva analtica obtida para o experimento de LLE
140000
120000
100000
rea do pico
80000
60000 y = 63,281x - 3402,4
40000
R = 0,9829
20000
0
0 500 1000 1500 2000 2500
concentrao (g/L)
100000
80000 y = 65,264x + 37,4
60000
40000 R = 0,9999
20000
0
0 500 1000 1500 2000 2500
concentrao (g/L)
SPE LLE
rea do rea do
soluo pico pico
branco 1 542 688
branco 2 454 960
branco 3 429 822
Desvio padro
branco 59 136
LOD 2,7 6,3
LOQ 9,1 20,8
3
onde LOD (limite de deteco) e LOQ (limite de quantificao) foram calculados pela seguinte
frmula:
3
=
10
=
Para uma melhor anlise da curva de calibrao, foi feito um grfico de resduos. Os
resduos foram calculados da seguinte maneira:
= 1
onde a rea do pico terica foi calculada a partir da equao da reta da curva analtica.
0,2000
0,1000
resduo
0,0000
0 500 1000 1500 2000 2500
-0,1000
-0,2000
concentrao (g/L)
grfico de resduos
0,01
0,008
0,006
0,004
0,002
resduo
0
-0,002 0 500 1000 1500 2000 2500
-0,004
-0,006
-0,008
-0,01
concentrao (g/L)
5
=
300
LLE SPE
= ( ) 100 5
6
=
LLE SPE
eficincia de extrao 73,3 60,3
fator de pr concentrao 44,0 36,2
Pelos valores da tabela acima se pode observar que tanto a eficincia de extrao
quanto o fator de pr-concentrao do mtodo por Extrao Lquido-Lquido foram melhores,
apesar de uma das vantagens do SPE em relao ao LLE ser uma extrao mais completa do
analito e a menos consumo de solventes orgnicos, alm da maior eficincia na separao do
5
analito dos interferentes, procedimento manual mais conveniente, remoo de partculas e
mais fcil de ser automatizado 7. No entanto, a aparelhagem do LLE muito mais simples e
barata, alm dos cartuchos de SPE serem descartveis.
Uma das causas provveis para isto seria a saturao do cartucho, pois as amostras
estavam com bastante material particulado.
1.4. CONCLUSO
1.5. BIBLIOGRAFIA
6
2. EXPERIMENTO 3 + 4: Caracterizao de bebidas alcolicas destiladas por
Cromatografia Gasosa: Determinao do teor em etanol por GC-FID e Identificao dos
Constituintes Minoritrios por GC-MS + HS-SPME
7
A Cromatografia Gasosa uma tcnica que permite separao, identificao e
determinao de componentes parecidos em misturas complexas. A amostra
dissolvida na fase mvel, que em Cromatografia Gasosa um gs. Esta fase mvel
passa em uma fase estacionria. Os analitos so separados por afinidade com a mesma 4.
O Detector de Ionizao por Chama um dos detectores mais utilizados em GC.
Nele, o eluente que veio da coluna direcionado a uma chama de ar-hidrognio.
Quando pirolisado, muitos compostos orgnicos produzem ons e eltrons, no qual
produzem corrente eltrica. A deteco envolve monitorar a corrente produzida por
essas espcies 4.
Em Espectrometria de Massas, o instrumento faz a degradao das molculas
dos compostos, ionizando-os. Depois, realiza o scan da massa durante toda a corrida
cromatogrfica, os dados so processados, gerando um espectro massa/carga (m/z),
sendo possvel assim analisar e identificar vrios compostos 4.
Este experimento visa a identificao dos constituintes minoritrios por HS-
SPME + GC-MS e a quantificao de etanol em bebidas alcolicas por GC-FID, alm
de estudar os fundamentos da tcnica a partir dos experimentos 4.
O detector de ionizao em chama (FID) como o prprio nome diz, mensura os ons
formados durante a combusto de compostos orgnicos. Para isso, necessrio preparar
solues padro da substncia de interesse, a fim de montar uma curva de calibrao e deste
modo, quantizar o analito presente na amostra.
Na Tabela abaixo, esto os dados obtidos a partir da anlise de etanol na amostra Natu
Noblis Blended Whisky.
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Tabela 1: Resultados obtidos pela anlise de etanol em amostra pelo FID.
% de etanol na rea do pico de rea do pico de n- Razo entre a rea
amostra etanol butano de etano e a rea de
n-butano
2 165,28 727,09 0,22
2 136,34 614,80 0,22
2 152,01 633,60 0,24
4 259,47 417,52 0,62
4 325,83 523,96 0,62
6 538,84 575,67 0,94
6 481,14 520,94 0,92
8 699,63 594,85 1,18
8 642,54 536,14 1,20
10 1093,06 724,78 1,51
10 509,97 332,38 1,53
10 767,39 504,00 1,52
A equao da reta para a curva de calibrao sem o padro interno de y = (82 12)x
(11 86) e apresenta coeficiente de correlao r = 0,88645 enquanto que a da curva analtica
com o padro interno de y = (0,157 0,03)x (0,05 0,02) e coeficiente de correlao r =
0,99778. Portanto, enquanto a curva analtica sem o padro interno apresenta linearidade
regular, a curva com o padro interno apresentou uma grande melhora na linearidade da reta.
Desta maneira, a curva a ser utilizada para melhor anlise quantitativa de etanol na amostra a
do grfico da Figura 2.
Lembrando que para realizar este tipo de anlise, necessrio que a concentrao do
analito de interesse esteja dentro dos pontos utilizados na curva de calibrao, sendo necessrio
as vezes, pr concentrar ou pr diluir a amostra.
Abaixo est a tabela com os dados de rea do pico para o etanol e n-butano da amostra:
10
Utilizando a equao obtida no Grfico 2, foram obtidos as seguintes porcentagens na
amostra diluda:
Replicata 1=5,23%
Replicata 2=5,27%
Considerando que 1,3mL da amostra foi diluda em um balo de 10mL, haviam ento,
0,525mL de etanol neste contedo de 1,3mL.
Deste modo, o resultado da % de etanol na amostra de:
% de etanol na amostra=(40,40,2) %
Estrutura 2 Estrutura 5
Estrutura 1
Pico Estrutura 3 Estrutura 4
morto
[Digite
uma
cita
Figura 3: Cromatograma da amostra de whisky
o do
docu
Os espectros de massas encontram-se em anexo, sendo que as estruturas
mento
correspondentes aos picos encontrados esto listadas abaixo:
ou o
resum
o de 11
um
ponto
intere
ssante
Figura 4: Estrutura do octanoato de etila (estrutura 1)
Sendo estes, os compostos que foram eludos nesta ordem pelo GC. Deste modo, nota-
se que os steres que eluram primeiro possuem massa molar menos elevada do que os steres
que eluram por ltimo, e os compostos que saram depois dos steres maiores, possuem
ramificao, o que aumenta a interao com a fase estacionria do GC.
Os steres eram esperados de sarem no espectro de massas, pois eles fazem parte da
fermentao da bebida. Os outros compostos encontrados podem ter sido colocados para dar
aroma bebida.
Era esperada a apario de algum terpeno no espectro, os quais do algum aroma
caracterstico e propriedades antioxidantes s bebidas, o que prolonga a validade, porm o
mtodo ainda no estava otimizado quando a anlise foi feita, e alguns componentes
importantes podem no terem sido detectados.
Alm disso, notou-se a presena de compostos com grupos siloxanos, indicando que ou
a fibra do SPME ou a coluna cromatogrfica estava sofrendo a sangria, ou seja, estava
ocorrendo perdas da fibra/coluna.
Em seguida, foi calculado o ndice de reteno de cada composto identificado e seu erro
percentual a parir das frmulas:
= 100 ( )
12
onde IR o ndice de reteno de Kovts, tRA o tempo de reteno ajustado do analito em
questo, tRn o tempo de reteno ajustado do analito do pico posterior ao analito A, t RN o
tempo de reteno ajustado do analito do pico anterior ao analito A e n o nmero de carbonos
do analito do pico anterior.
Logo, foi possvel verificar que o ndice de reteno obtido a partir do experimento
apresentou uma baixa exatido. Uma possvel causa para isto seria que a coluna estava perdendo
grupos siloxanos, e o tempo de reteno foi prejudicado, acarretando erros no clculo do ndice
de reteno.
tempo
ndice de ndice de
de erro
Composto reteno reteno
reteno percentual
calculado terico
ajustado
octanoato de etila 1,417 9,492784364 12136 99
decanoato de etila 4,117 981,4927698 14246 31
Tridecanoato de etila 6,575 1144,800194 16977 33
7-metxi-3,7- No foi
-
trimethil-octanal 12,983 1427,417219 encontrado
Dodecanoato de 2,3- No foi
-
bis(acetiloxi)propila 13,392 1113,879951 encontrado
2.4. CONCLUSO
O mtodo GC-FID foi muito eficaz para a quantificao do teor alcolico na amostra
whisky. No entanto, para o experimento de identificao de compostos minoritrios para uma
melhor anlise talvez fosse melhor utilizar outro tipo de coluna.
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4. HOLLER, F. James; SKOOG, Douglas A.; CROUCH, Stanley R. Princpios de
anlise instrumental. Bookman, 2009.
5. VIEGAS, M. C.; BASSOLI, D. G.; Quim. Nova, Vol. 30, No. 8, 2031-2034, 2007
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