PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATLICA DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES

ESCUELA DE CIENCIAS BIOLGICAS
LABORATORIO DE BIOLOGA DEL DESARROLLO
INTEGRANTES: Gonzalo Domnguez
Henry Macas
Carolina Medina
Paola Padilla
Jessica Revelo
Alejandra Silva

FECHA DE ENTREGA: 31 de enero del 2017

INFLUENCIA DE CO2 EN EL DESARROLLO DE EMBRIONES DE POLLO (Gallus gallus)

INTRODUCCIN

El gallo y gallina (Gallus gallus) pertenece al orden Galliformes, a la familia Phasianidae.

Son aves domsticas que presentan dimorfismo sexual: los machos pueden medir ms de 70 cm,
presentan una coloracin en su negruzca, verde y amarilla en su plumaje, adems exhiben dos
crestas colgantes en la parte ventral del pico y una gran cresta en el dorso de la cabeza (ambas de
coloracin roja); las hembras por su parte son ligeramente ms pequeas que los machos con un
plumaje crptico negruzco y blanco, tienen una cresta dorsal no tan evidente y no poseen crestas
colgantes. Se consideran las aves ms abundantes a nivel mundial y con gran xito reproductivo ya
que existen ms de 16 mil millones de ejemplares, su origen viene del Sudeste de Asia. Los huevos
de esta especie pueden ser sometidos a incubacin artificial en un tiempo aproximado de 21 das,
siendo la temperatura ptima d C (Gautier, Z. 2002).

La fertilizacin del vulo de pollo se realiza en una regin llamada oviducto. Dentro de esta
cavidad el oocito sufre un movimiento de rotacin donde se da la formacin posterior de
coberturas por secrecin de capas del cascarn y albmina, eventualmente el huevo es
ovopositado. Las aves tienen huevos de tipo telolecitos y un clivaje meroblstico discoidal y el
nico lugar de segmentacin es el blastodisco al igual que en los peces (Gilbert, 2003). El
desarrollo embrionario es un proceso que est determinado tanto por el genotipo de un individuo
as como tambin por el medio ambiente en el cual se desarrolla. Se ha planteado que el
desarrollo de un organismo en un ambiente alterado puede afectar las trayectorias del desarrollo
de algunos sistemas fisiolgicos regulatorios. A este cambio fenotpico de un organismo que fue
inducido por condiciones ambientales diferentes a las normales se le conoce como plasticidad; es
decir la capacidad del genotipo de producir varios fenotipos diferentes de acuerdo en el medio en
el que se desarrolle, sin embargo para referirse a los eventos de plasticidad en el inicio del
desarrollo se usa el trmino heterocairia (Rundle & Spicer, 2016). En este experimento utilizamos
como condicin de estrs ambiental un aumento en los niveles de CO 2 y la hipoxia (reduccin de
O2). La hipoxia es una condicin donde la concentracin de oxgeno en la sangre y tejidos es
insuficiente. Se conoce que cuando las clulas son sometidas a condiciones de hipoxia estas
pueden responder activando vas de seales que regulan la proliferacin, angiognesis y muerte
(Harris, 2002).

OBJETIVO GENERAL

Conocer la influencia que tiene el CO2 en el desarrollo de embriones de pollo (Gallus

gallus)

OBJETIVOS ESPECFICOS

Exponer a los embriones de pollo a condiciones de estrs (concentraciones de CO 2

mayores que en su condicin normal de incubacin).
Identificar los efectos o beneficios producidos en los estadios embrionarios tempranos de
Gallus gallus durante el tiempo de incubacin.
Comparar los pesos entre los embriones expuestos a CO2 y los controles.
Realizar mediciones de todos los embriones y compararlos.

MATERIALES

7 huevos de gallo y gallina Bistur

2 bandejas Pinzas
Algodn Cajas petri
Un vaso de precipitacin Estereoscopios
Alka-Seltzer (CO2) Formaldehido al 4%
Balanza Tubos Falcon
2 Incubadoras a 37C Papel milimetrado

METODOLOGA

1. Se enumeraron los huevos del 1 al 7. Los primeros 5 se colocaron en una bandeja con
algodn y los huevos 6 y 7 en otra. Los huevos del 1 al 5 fueron experimentales y los
huevos 6 y 7 fueron de control. Se procedi a pesar los huevos antes de iniciar el
experimento.
2. Ambas bandejas fueron colocadas en dos incubadoras cada una. En la incubadora donde
estaban los huevos experimentales se coloc tambin un vaso de precipitacin en donde
se colocaron las pastillas de Alka-Seltzer con agua.
3. Se empez a las 10 de la maana del mircoles 18. Se revisaban los huevos cada 2 horas
para voltearlos. Cada da se lo realiz desde las 8 am hasta las 4 pm. Al revisar a las 4 pm
tambin se proceda a pesar los huevos. Durante este lapso de tiempo se colocaban 2
pastillas a las 8 am, a las 12 pm, y a las 4 pm se ponan de 3 a 4 pastillas. Eso se lo realizaba
para representar un ambiente microaerfilo.
4. Esto se lo realiz durante una semana. Finaliz el mircoles 25 a la misma hora (10 am) y
se procedi a abrir los huevos con un bistur. Antes de abrirlos se los pes. Luego de
 abrirlos se utiliz una caja petri para observar los embriones en el estereoscopio, se midi
los embriones con papel milimetrado, tomando fotografas de cada uno para el
reconocimiento de varias estructuras y luego se los guard en dos tubos Falcon. En el uno
se pusieron los embriones experimentales y en el otro los de control.
5. Para la medicin de los embriones, se utiliz las fotografas de los embriones y junto con el
programa ImageJ. Este programa crea escalas a partir de una imagen. En este caso la
escala fue con las medidas del papel milimetrado y con esto el programa tom en cuenta
la cantidad de pixeles que tenia cada cuadrado en el papel para tener la medida de cada
embrin.

RESULTADOS

Tabla 1. Peso en gramos del embrin durante 7 das

EMBRIN
DA 1 2 3 4 5 6 (CONTROL) 7 (CONTROL)
0 71,85 70,97 71,20 63,65 68,13 71,35 67,95
1 71,85 70,84 70,15 63,46 67,96 71,59 68,16
2 71,41 70,34 69,52 62,83 67,22 72,96 69,20
3 71,16 70,11 69,23 62,39 66,79 71,09 67,01
4 69,90 68,69 67,70 60,62 64,73 69,22 64,82
5 69,42 68,31 67,35 59,81 63,98 68,33 63,58
6 69,33 68,22 67,27 59,63 63,69 67,86 63,13

Promedio del peso en gramos de los embriones

72
70
68
66
Gramos

64
62
PESO
60
58
56

Grfica 1. Promedio del peso en gramos de los embriones

 Mn
Mn
Mn
O
O O
D D D
T Co T Co T AA
yAA AA AP
AP
AP C
yAP C
C
7 1 2

Mn Mn
Mn

D O O
O

T Co D T
Co T
AA AA AA AA
Co
AA
AP AP AP
AP C
3 C 4 C 5
O: ojo; C: cola; T: telencfalo; D: diencfalo; Mn: mesencfalo; Co: corazn; yAA: yema apndice anterior; yAP: yema apndice
posterior; AP: apndice posterior; AA: apndice anterior

Grfico 2. Estructuras del desarrollo embrionario (control y experimentales). En donde el embrin control
(7) present estructuras avanzadas como el ojo (cristalino y cpula ptica), cola, corazn, telencfalo,
mesencfalo y el diencfalo, mientras que otras estructuras como los apndices anteriores y posteriores solo
se observ su primordio (yema). En tanto los embriones experimentales tuvieron un desarrollo avanzado en
la mayora de sus estructuras, principalmente en los apndices, donde se pudo observar de manera
meticulosa los dgitos ya formados (embrin 2, 3, 4 y 5); cabe recalcar que los apndices en los
experimentales eran ms extendidos con relacin al embrin control #7.
 2.4 cm
2.6 cm
1 2.7 cm
7 2

2.7 cm 2.4 cm 2.5

cm
3 4 5

Grfico 3. Medidas de cada embrin desde el mesencfalo hasta la cola. Los embriones 4 y 7(control)
tienen una medida de 2.4, el embrin 5 de 2.5, el embrin 2 de 2.6 y los embriones 1 y 3 de 2.7cm. La
mayora de los embriones tienen un promedio cercano a 2.56 cm.

Amnios
1.04 cm

Grfico 4. Medidas y estructura del embrin 6 (control) resultado negativo. Se observa que este embrin
control luego de los 7 das en la incubadora no se desarroll como se esperaba, pero an as al momento de
ser abierto solo se divis una de sus capas germinales (amnios) y ninguna otra estructura de manera defina.
DISCUSIN

Comparando los pesos (tabla 1) de los embriones (junto con capas extra embrionarias)
entre ellos se ve que todos fueron reduciendo su peso con el paso de los das. Pero de media los
embriones del 1 al 5 tuvieron de media una reduccin del peso de 3.53g en total y los huevos
control 4.24 pero el huevo 6 muri antes de completarse su desarrollo por lo tanto comparando
solo con el huevo 7 que sobrevivi habra una diferencia entre los huevos 1 al 5 y 7 de 1.29g, de
esta forma vemos que los huevos 1 al 5 tuvieron una menor prdida de peso que el 7; esto
reafirma el estudio "Embryonic developmental plasticity of the chick: Increased CO2 during early
stages of incubation changes the developmental trajectories during prenatal and postnatal
growth" (De Smit et al., 2006), en el cual dice que una cantidad mayor de CO2 en la incubadora
hace que el embrin sea ms grande de lo normal, nosotros al no llegar hasta el nacimiento no
podemos saber si los embriones puestos con capsulas de CO2 (Alka seltzer) habran nacido antes
pero si podemos confirmar que si son de mayor peso y tienen un desarrollo ms rpido.

Haciendo comparaciones con respecto al tamao de los embriones (Grfico 3), se observa
que la mayora de los embriones que estuvieron con CO2 en la incubadora son de mayor tamao
que el control, exceptuando al embrin nmero 4 pero comparando esto con los pesos el embrin
4 era el de menor peso por lo tanto puede que esta diferencia de tamao se deba a esto. Aun as
la mayora es ms grande desde 0.1 cm hasta 0.3 cm esto nos vuelve a confirmar que el CO2
influye positivamente en el crecimiento de los embriones de Gallus gallus (De Smit et al., 2006)

Los embriones tanto experimentales como el control (Grfico 3) tuvieron un desarrollo

lento, en comparacin con los embriones descritos por Hamburger & Hamilton, 1951. Esto se debe
a que el almacenamiento de los huevos despus de la ovoposicin provoca un retraso en el inicio
del desarrollo y en la tasa de crecimiento (Meijerhof, 1992). El embrin control (7) (Grfico 2) es el
que se encuentra en una etapa de desarrollo ms temprano, se encuentra aproximadamente en el
estadio 24 que corresponde a 4 das de desarrollo; que se caracteriza por que el primordio del ojo
alcanza la etapa de copa ptica y las yemas de las extremidades son ms largas que anchas y los
dedos de las patas an no se han delimitado. Los embriones experimentales 1, 2, 3 y 5 (Grfico 2)
se encuentran en un estado aproximado al 26, que se caracteriza por que ya se encuentran
formadas las articulaciones del codo, rodilla y por la diferenciacin de los dgitos 1 y 3 de las patas.
Esto corresponde al da 5 de desarrollo. Mientras que el embrin 4 (Grfico 2) se encuentra en
estado 28, porque se observa el pico y los dgitos de los pies 3 y 4. Este estado corresponde a los
5 das y medio de desarrollo (Hamburger & Hamilton, 1951) (Hill, 2017).

Los estados de los embriones experimentales son mucho ms avanzados que los del
control, lo cual nos indica que la exposicin al CO2 no solo afecta al peso sino tambin a que los
embriones de pollo se desarrollen ms rpido (De Smit et al., 2006)

En recopilacin este estudio demostr que el CO2 en los primeros das de incubacin si
tiene un efecto positivo en el peso, tamao y desarrollo de los embriones de Gallus gallus. Esto
reafirma el estudio de De Smit et al., (2006). sta teora tambin fue confirmada en el estudio "
Higher levels of CO2 during late incubation alter the hatch time of chicken embryos" (Tong et al.,
2015), aunque en esta investigacin el CO2 era puesto al final de la incubacin, tambin se observ
que al nacimiento los embriones eran ms grandes cuando fueron puestos en una condicin ms
anaerobia. Esto contradice al estudio de Owen (1991).

CONCLUSIONES

Se concluye que el efecto del CO2 sobre los embriones de (Gallus gallus) es positivo para el
peso y el tamao.
Se expusieron a los embriones de pollo a concentraciones de CO2 mayores a las normales
para la incubacin y se lograron identificar los cambios que se produjeron en los
embriones.
Se identific un desarrollo ms rpido, esto es benfico para las empresas avicultoras.
BIBLIOGRAFA

De Smit, L., Bruggeman, V., Tona, J. K., Debonne, M., Onagbesan, O., Arckens, L.,
Decuypere, E. (2006). Embryonic developmental plasticity of the chick: Increased CO2
during early stages of incubation changes the developmental trajectories during prenatal
and postnatal growth. Comparative Biochemistry and Physiology - A Molecular and
Integrative Physiology, 145(2), 166175. https://doi.org/10.1016/j.cbpa.2006.06.046
Gautier, Z. (2002). "Gallus gallus" (On-line), Animal Diversity Web. Accessed January 28,
2017 at http://animaldiversity.org/accounts/Gallus_gallus/
Gilbert, S. (2003). Biologa del Desarrollo. Sptima Edicin. Montevideo, Uruguay: Editorial
Mdica Panamericana.
Hamburger, V. & Hamilton. H. L. (1951). A series of normal stages in the development of
the chick embryo. Developmental Dynamics, 88(1), 4992. doi:10.1002/aja.1001950404
Harris, A. L. (2002). Hypoxiaa key regulatory factor in tumour growth. Nature Reviews
Cancer, 2(1), 38-47.
Hill, M.A. (2017). Embryology Chicken stages. Consultado: Enero 29, 2017, de
https://embryology.med.unsw.edu.au/embryology/index.php/Chicken_stages.
Meijerhof, R. (1992). Pre-incubation holding of hatching eggs. Worlds Poultry Science
Journal, 48(1), 5768. doi:10.1079/WPS19920006
Owen, J., (1991). Principles and problems of incubator design. In: Tullet, S.G. (Ed.), Avian
Incubation. Butterworth-Heinemann, London, pp. 205224.
Rundle, S. D., & Spicer, J. I. (2016). Heterokairy: a significant form of developmental
plasticity? Biology Letters, 12(9), 20160509.
Tong, Q., McGonnell, I. M., Roulston, N., Bergoug, H., Romanini, C. E. B., Garain, P.,
Demmers, T. G. M. (2015). Higher levels of CO2 during late incubation alter the hatch time
of chicken embryos. British Poultry Science, 56(4), 5039.
https://doi.org/10.1080/00071668.2015.1041097