1.

Replicarea celulara -Replicarea ADN

Ciclul celular consta din interfaza (cand celula nu se replica) si replicarea celulara
sau mitoza .

Mitoza -este procesul de diviziune celular, specific celulelor eucariote, prin care
dintr-o celul- mam rezult doua celule-fiice, identice din punct de vedere genetic.
- diviziunea celulara a celulelor somatice (din intregul corp) pe baza ei se
realizeaza cresterea organismului (celulele fiice vor avea 2n cromozomi = diploide.
Fazele mitozei: -Profaza
-Metafaza
-Anafaza
- Telofaza

INTERFAZA: -
1. Etapa in care celula se pregateste de mitoza
2. Alcatuita din fazele :G1 (sinteza de ARN, proteine si acumulare de ATP),
S (replicarea ADN),
G2(sinteza unor proteine necesare formrii fusului
de diviziune tubulina, actina, miozina)
3.Celula are cea mai ridicata activitate metabolica
4.Materialul genetic se dubleaza
PROFAZA
1.Cromozomii devin vizibili la microscopul optic si se dubleaza
- cromozomii dublati prezinta doua cromatide (surori) legate prin
centromer
2. Centriolii migreaza in doua capete opuse ale nucleului
3. Nucleolii dispar
4. Membrana nucleara se dezintegreaza
METAFAZA
1. Cromozomii se dispun la ecuatorul celulei (in mijloc)
2. Se ataseaza cu ajutorul centromerilor de fibrele fusului mitotic si formeaza
placa metafazica (ecuatoriala)
3. La sfarsitul metafazei are loc diviziunea centromerilor, cromozomii devenind
monocromatidici
ANAFAZA
1. Cromozomii se dispun la ecuatorul celulei (in mijloc)
2. Se ataseaza cu ajutorul centromerilor de fibrele fusului mitotic si formeaza
placa metafazica (ecuatoriala)
3. La sfarsitul metafazei are loc diviziunea centromerilor, cromozomii devenind
monocromatidici
TELOFAZA
1. Cromozomii se despiralizeaza
2. Fibrele fusului de diviziune se dezintegreaza
3. Se formeaza cite un nucleu cu membrana nucleara la fiecare pol unde au
migrat cromozomii
4. Celula se divide (citokineza) citoplasma si organitele se divizeaza si apar cele
doua celule fiice, identice, cu garnitura diploida de cromozomi (2n)
Meioza
are loc la organismele cu reproducere sexuata
diviziunea celulara a celulelor sexuale care sunt haploide avind un singur set de
cromozomi (n) - gametii
Intr-o runda de meioza se obtin 4 fiice (gameti)
Fiecare din cele celulele rezultate contine jumatate din garnitura de cromozomi
din celulelor parentale (sunt haploide = n cromozomi)
Au loc doua seturi de diviziune:
in prima faza dintr-o celula 2n se obtin doua celule n
in a doua faza (mitotica) din doua celule n se obtin 4 celule, tot cu garnitura
haploida n = gametii, care nu se mai divid
Replicarea-Dublul helix al ADN se desface i se construiesc pe fiecare
dintre cele dou catene parentale (numite catene matri sau template)
cte o caten complementar replica celor parentale
Replicarea ADN este semi-conservativ (Fiecare molecul fiic de ADN conine
o caten parental intact asociat cu o caten nou sintetizat.)
Replicarea ADN este complet(Replicarea ADN antreneaz ntregul cromozom,
rezultand doi cromozomi identici.)
Replicarea ADN este bi-direcional (dei are loc ntotdeauna n direcia 5-3
!!!)-Replicarea ncepe ntr-un punct bine determinat numit origine de replicare
(ori) i pornind din acest punct se deruleaz simultan n ambele direcii.
Pasii: 1. Dublul helix se desface.
2. La jonciunea dintre cele dou catene parentale desfcute
ianatere bifurcaia de replicare
3. O nou caten se formeaz prinmperecherea nucleotidelor
libere cu bazele complementare de pe catena veche.
4. Rezult dou molecule-fiice de ADN care conin cte o caten
Parental i o caten nou.

2.Structura membranei plasmatice

Membrana celulara -Este flexibila
-permite deplasarea organismelor unicelulare
Functiile membranei plasmatice
1. Bariera de protectie
2. permeabilitate selectiva (regleaza transportul moleculelor si a ionilor in interiorul
si in afara celulei)
3. permite recunoasterea unor molecule specifice si comunicarea intercelulara
4. Asigura situsuri de ancorare a filamentelor din citoschelet
Functiile membranelor interne
Membranele interne delimiteaza organitele celulare
Asigura functiile metabolice ale celulei
Permit impartirea celulei in compartimente cu functii biochimice diferite
Componentele membranelor
Fosfolipide (Toate mermbranele au un strat dublu de fosfolipide si cu proteine
intercalate)
Colesterol
Proteine
Carbohidrati (glucoza)
 Modelul Mozaicului Fluid al MC
Membranele sunt mozaicuri de lipide si proteine
- Elementul structural fundamental al membranelor celulare este dublul strat
lipidic
- Proteinele si alte molecule sunt asociate dublului strat lipidic
Membrana este fluida
numeroasele componente structurale se pot deplasa liber de ex. majoritatea
proteinelor si moleculele de fosfolipide se pot deplasa lateral.

Lipidele membranare
Membrana celular const din 3 tipuri de lipide: fosfolipide, glicolipide si
steroli (colesterolul)
Fosfolipidele sunt majoritare si sunt alcatuite dintr-o componenta hidrofila si
o coada hidrofoba

Rolul proteinelor membranare

1. Proteine implicate in recunoasterea intercelulara
2. Proteine structurale: integrine, proteine de jonctiune intercelulara
3. Proteine cu rol de enzime
4. Proteine cu rol de transmitere a semnalelor
5. Proteine care asigura transportul moleculelor

Tipuri de transport membranar

Difuzia simpla
-NU necesita energie
-Moleculele se deplaseaza de la concentratie MARE catre concentratia MICA
- DIFUZIA este un proces pasiv dirijat doar de energia cinetica a moleculelor
OSMOZA -difuzia apei prin membrana

ACVAPORINELE
1. Sunt proteine cu rol de canale de apa
2. Porii (acvaporinele) utilizati de moleculele de apa in timpul OSMOZEI

Transportul pasiv
DIZFUZIA SIMPLA
NU necesita consum de energie
Sensul difuziei: de la concentratie mare catre concentratie mica
Exemple: oxigenul sau apa difuzeaza in celula iar CO2 iese din celula

Difuzia facilitata
Nu necesita consum de energie
Utilizeaza proteine de transport pentru deplasarea moleculelor mici de la
concentratie mare catre concentratie mica

Transportul activ
o Necesita ENERGIE -ATP
Deplaseaza moleculele de la concentratie MICA la concentratie MARE= contra
gradientului de concentratie
Exocitoza -Moleculele sunt transportate in afara celulei in vezicule care
fuzioneaza cu membrana plasmatica secretia hormonilor sau transportul impulsului
nervos intre neuroni
 Pinocitoza-Celula formeaza o invaginare si preia molecule dizolvate in apa

3. SISTEMUL MEMBRANAR INTRACELULAR

Reticulul endoplasmatic(RE)
- reprezinta o retea de canale si cisterne distribuite in toata celula
- -RE este alcatuit din membrane similare membranei plasmatice si consta
din RE neted si RE rugos (smooth ER and a rough ER)
- La nivelul RE se sintetizeaza proteine si lipide
- -Organite organizate ca o retea de transport, responsabile de transferul
proteinelor si a glucidelor catre aparatul Golgi, lizozomi etc.
Reticulul endoplasmatic rugos (RER)
-prezinta la suprafata membranei numerosi ribozomi iar lumenul este o continuare a
spatiului perinuclear
-RER este responsabil de sinteza unor proteine prin intermediul ribozomilor
atasati, de procesarea si plierea acestora si de distribuirea lor prin reteaua de
canale
-Organizat dintr-o retea de canale, vezicule si cisterne sustinute de
citoschelet
Reticulul endoplasmatic neted (REN)
- Este organizat ca o retea de canale
- REN sintetizeaza lipide si hormoni steroizi si, in unele cazuri, metabolizeaza
lipidele si compusii asociati
- Contine enzime care permit sinteza membranelor si functia de detoxifiere
- Concentratie mare in celulele hepatice
Aparatul Golgi
- este format din cisterne turtite si vezicule
- Este format din 3 regiuni distincte:
- compartimentul cis in legatura cu RE din care componentele membranare si
proteinele intra in aparatul Golgi
- compartimentul median in care se face glicozilarea lipidelor si proteinelor
- compartimentul trans prin care ies moleculele produse si procesate din AG
FUNCTII:
1. Receptioneaza proteinele sintetizate in RE si le modifica
2. Concentreaza, impacheteaza si sorteaza proteinele inainte ca acestea sa
fie trimise catre destinatie
3. Considerat sediul sintezei glucidelor
LIZOZOMII
- sunt vezicule care contin enzime digestive provenite din aparatul Golgi
- reprezinta organitele de digestie in care are loc liza nutrientilor si a altor
componente fagocitate
- In lizomi are loc autofagia = digestia componentelor celulare uzate
- Enzimele functioneaza la un pH acid
Procesul de digestie are loc dupa fuzionarea membranei lizozomului cu o vacuola
digestiva si ejectarea enzimelor lizozomale in interiorul acesteia
Membrana lizozomului contine proteine puternic glicozilate care o protejeaza de
actiunea hidrolitica a enzimelor din interior
Citoscheletul
- Determina si mentine forma celulelor
- Asigura motilitatea celulara: contractia musculara, locomotia ameboidala, cu
ajutorul cililor si flagelilor, miscarile din cadrul mitozei si meiozei
 - Actioneaza ca trasee pentru proteinele motrice care transporta componentele
celulare
- Trei tipuri componente: microfilamente (actina), filamente intermediare
(participa la jonctiunea celulelor, keratina in celulele epiteliale) si microtubuli
(structuri provizorii ca fibrele fusului de diviziune sau permanente centriolii,
cilii, flagelii)
Microtubulii reprezinta tuburi formate din subunitati proteice de tubulina
- Microtubulii asigura un schelet rigid intracelular si pot functiona ca trasee pe
care se deplaseaza proteinele motrice
- Daca forma celulei se modifica sistemul de microtubuli se poate dezasambla
si reconstitui ulterior

Cilii si flagelii sunt alcatuiti din microtubuli si sunt apendicele locomotorii

ale celulelor
Flagelii sunt mai lungi decit cilii si pot fi unici sau dubli per celula
Cilii sunt mai scurti si sunt prezenti in numar mare pe o singura celula

Centriolii
-Sunt localizati langa nucleu, in pozitie perpendiculara unul pe celalalt si formati din
microtubuli
-Au functia de organiza diviziunea celulara

4.RIBOZOMII
Structura:
- Ribozomul bacteriei Escherichia coli are 25 nm si consta din doua subunitati
inegale alcatuite din proteine si ARN ribozomal = rRNA
- Subunitatea 30S (constituita din 21 din proteine si un rRNA 16S)
- Subunitatea 50S (constituita din 31 proteine si doua rRNAs: 23S rRNA si 5S
rRNA)
- Exista 20.000 ribozomi intr-o celula, 20% din masa celulara

Localizare si functii
Implicati in sinteza proteinelor
Localizati:
fie liberi, in citosol sintetizeaza proteinele care ramin in citosol
fie legati de RER sintetizeaza proteinele care compun membranele celulare
sau pe cele care vor fi exportate in afara celulei
Ribozomii liberi si cei legati sunt intersanjabili
Cele doua subunitati se leaga de ARN mesager (mRNA) in timpul sintezei proteinelor

Sinteza proteinelor
Procesul incepe cu TRANSCRIEREA codului genetic din ADN in ARN mesager
Urmeaza TRANSLATIA (Traducerea) - de mRNA se ataseaza subunitatile
ribozomilor si se sintetizeaza proteinele conform codului incriptat in mRNA
Ribozomii realizeaza de fapt traducerea tripletelor de nucleotide din mRNA

tRNA-Codul genetic este citit in timpul translatiei de catre moleculele de ARN de

transfer = tRNAs, care contin baze numite anticodoni, complementare cu
codonii din mRNA.
 Sinteza proteinelor - implica 3 etape: initiere, elongare, finalizare
Initierea implica legarea de subunitatea mica a ribozomului a mRNA si a
initiatorului aminoacil-tRNA urmata de legarea subunitatii mari
PASI:
- Translatia incepe cu atasarea mRNA de 30S
-tRNA soseste si se leaga de mRNA (codon-anticodon)
-Se ataseaza si 50S la 30S. Pe 50S se fixeaza toate tRNAs Urmeaza elongarea

Elongarea: sinteza legaturilor peptidice prin intermediul tRNAs legat de situsul

acceptor (A).
Exista doua situsuri de legare pe subunitatea mare 50S: A site si P site
Se fixeaza primul tRNA (care transporta aac metionina) la A site. Apoi se muta
catre situsul P. Urmatorul aac este adus de un alt tRNA care se leaga situsul A
Se formeaza legaturi peptidice intre aminoacizii nou sositi Primul tRNA se va
desprinde de aac si paraseste ribozomul
Al doilea tRNA are atasati primul aac (Met) si al doilea (ex prolina)
tRNA se deplaseaza catre P site.
Fiecare tRNA care soseste adauga cite un aac in lantul peptidic in formare

Finalizarea (Termination) are loc cind se ajunge la codonul stop de pe mRNA

Ribozomul se deplaseaza pe mRNA pe masure ce fiecare codon este citit
Cind ribozomul intilneste un codon stop lantul peptidic este finalizat
Ribozomul se separa de mRNA
Subunitatile ribozomului se separa si ele pina cind un alt mRNA sosese si
procesul de sinteza se declanseaza din nou

In ADN si ARN cite 3 nucleotide formeaza un codon

3 nucleotide = 1 aminoacid dintr-o proteina

5.PREPARAREA OMOGENATELOR CELULARE SI

FRACTIONAREA CELULARA PRIN CENTRIFUGARE
Fractionarea celulara reprezinta separarea organitelor din celula
Omogenatul celular (sau tisular) este reprezentat de componentele celulare
obtinute prin ruperea membranelor celulare si suspendate intr-un mediu corespunzator
- Pastrarea structurii organitelor si a activitatii functionale

METODE DE DISTRUGERE A MEMBRANELOR CELULARE

1. Omogenizare mecanica cu piston POTTER (500-3000 t/min)
2. cicluri repetate de inghet-dezghet
3. cu detergenti (SDS, Triton X-100, Tween 20)
4. prin ultrasonicare (3 sec 2 min la 20000 Hz)
FRACTIONAREA OMOGENATELOR CELULARE PRIN CENTRIFUGARE
Particulele difera prin marime si densitate
Forta centrifuga - F exprimata in unitati de forta gravitationala notate cu g
Coeficientul de sedimentare a particulelor -exprimat in unitati Svedberg (s) indica
viteza de sedimentare a unei particule supusa unei forte centrifuge si depinde
de:
- marimea particulelor
- vascozitatea mediului de suspendare
Acceleratia centrifugala depinde de:
 - viteza de rotire (viteza unghiulara)
- raza rotorului

DENSITATE densitatea unui corp este egal cu raportul dintre masa i volumul su.
Unitatea de msur - g/ml.
CENTRIFUGAREA DIFERENTIALA
- Separa particulele pe baza marimii lor in mediu cu densitate uniforma
- particulele sedimenteaza in functie de marime si pot fi colectate dintr-un
omogenat celular printr-o serie de centrifugari repetate, cu viteza crescanda
CENTRIFUGAREA IN GRADIENT DE DENSITATE
Separarea componentelor celulare are loc in mediu in care densitatea solutiei creste de
la suprafata tubului de centrifuga catre baza acestuia
Necesita un aparat de formare a gradientului
GRADIENT DISCONTINUU
Este compus din straturi cu diferente mari de densitate

6.MITOCONDRIA
- Organit care furnizeaza energie celulei
- Se gaseste numai in celulele animale
- Mitocondria produce ATP din energia stocata in nutrienti

Membrana mitocondriala externa este compusa din fosfolipide (50%) si contine

nenumarate enzime implicate in activitati ca:
- metabolismul acizilor grasi
- oxidarea adrenalinei
- sau degradarea unor aminoacizi (triptofanul)
Morfologia mitocondriilor
Mitocondria este un organit dinamic :
- pot exista ca organite individuale
- sau ca retele de mitocondrii
- Se deplaseaza in celula pe filamentele citoscheletului
Retelele mitocondriale se pot forma sau dizolva prin intermediul unor
proteine
de fuziune sau de fisiune.

Compartimentele mitocondriilor
Membrana interna
-Sediul lantului enzimatic respirator si a enzimei ATP sintetaza
- impermeabila la unele molecule
-Prezinta pliuri numite criste
-Membrana externa
Permeabila pentru molecule mari
-Matricea mitocondriala
Sediul enzimelor din ciclul acidului citric (Krebs), ADN mitocondrial
Spatiul intermembranar

Membrana interna contine proteine cu 3 tipuri de functii :

- cele care realizeaza reactiile de oxidare in cadrul lantului respirator
- ATP sintetaza care produce ATP in matrice
- proteine de transport specifice care regleaza tranzitul metabolitilor in interiorul si in
afara matricei mitocondriale
FUNCTII
 Functia principala: convertirea nutrientilor organici in energie celulara sub forma
ATP
Apoptoza sau moartea celulara programata
Proliferarea celulara
Regleaza statusul redox celular
Sinteza hemului (din eritrocite)
Sinteza hormonilor steroizi

Rol in producerea de caldura (mentinerea organismului la o temperatura

constanta)
Mitocondriile cu anumite functii sunt prezente in tesuturi specializate cum este
ficatul mitocondriile contin enzime care detoxifica celula de amoniac (produs in
metabolismul proteinelor)
Mutatiile in genele care regleaza aceste functii conduc la boli metabolice
mitocondriale

Unicitatea mitocondriilor
Mitocondriile sunt organite cu caracteristici unice
Detin ADN circular propriu (asa cum au bacteriile)
Au ribozomi proprii - pentru sinteza proteinelor mitocondriale
ADN nuclear nu are gene codificatoare pentru producerea mitocondriilor
Toate mitocondriile din organism provin de la mama
Pe linie paterna mostenim genele tatalui
Pe linie materna mostenim genele mamei plus citoplasma din ovul
Deoarece mitocondriile se afla in citoplasma celulelor si au capacitatea de
autoreproducere noi le mostenim numai de la mama
Pe baza studiului mitocondriilor geneticieni pot studia evolutia populatiilor
umane