La espectroscopia ultravioleta-visible o espectrofotometra ultravioleta-
visible (UV/VIS) es una espectroscopia de emisin de fotones y una espectrofotometra. Utiliza radiacin electromagntica (luz) de las regiones visible, ultravioleta cercana (UV) e infrarroja cercana (NIR) del espectro electromagntico, es decir, una longitud de onda entre 380nm y 780nm. La radiacin absorbida por las molculas desde esta regin del espectro provoca transiciones electrnicas que pueden ser cuantificadas. La espectroscopia UV-visible se utiliza para identificar algunos grupos funcionales de molculas, y adems, para determinar el contenido y fuerza de una sustancia. Se utiliza de manera general en la determinacin cuantitativa de los componentes de soluciones de iones de metales de transicin y compuestos orgnicos altamente conjugados. Se utiliza extensivamente en laboratorios de qumica y bioqumica para determinar pequeas cantidades de cierta sustancia, como las trazas de metales en aleaciones o la concentracin de cierto medicamento que puede llegar a ciertas partes del cuerpo.
PRINCIPIO DE LA ESPECTROSCOPIA
El principio de la espectroscopia ultravioleta-visible involucra la
absorcin de radiacin ultravioleta visible por una molcula, causando la promocin de un electrn de un estado basal a un estado excitado, liberndose el exceso de energa en forma de calor. La longitud de onda () comprende entre 190 y 800 nm.
La luz visible o UV es absorbida por los electrones de valencia, stos son
promovidos a estados excitados (de energa mayor). Al absorber radiacin electromagntica de una frecuencia correcta, ocurre una transicin desde uno de estos orbitales a un orbital vaco. Las diferencias entre energas varan entre los diversos orbitales. Algunos enlaces, como los dobles, provocan coloracin en las molculas ya que absorben energa en el visible as como en el UV, como es el caso del - caroteno.
Cuando un haz de radiacin UV-Vis atraviesa una disolucin conteniendo
un analito absorbente, la intensidad incidente del haz (Io) es atenuada hasta I. Esta fraccin de radiacin que ha logrado traspasar la muestra es denominada transmitancia (T) (T = I/Io). Por aspectos prcticos, se utilizar la absorbancia (A) en lugar de la transmitancia (A = -logT), por estar relacionada linealmente con la concentracin de la especie absorbente segn la Ley de Beer-Lambert: A = lc (: coeficiente de absortividad molar, l: camino ptico, c: concentracin de la especie absorbente).
ESPECTROFOTOMETRO
El espectrofotmetro es un instrumento que permite comparar la
radiacin absorbida o transmitida por una solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia. Todas las sustancias pueden absorber energa radiante. El vidrio, que parece ser completamente transparente, absorbe longitudes de onda que pertenecen al espectro visible; el agua absorbe fuertemente en la regin del IR. La absorcin de las radiaciones UV, visibles e IR depende de la estructura de las molculas, y es caracterstica para cada sustancia qumica. El color de las sustancias se debe a que absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y slo dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda no absorbida. Esta espectrofotometra utiliza radiaciones del campo UV de 80 a 400 nm, principalmente de 200 a 400 nm (UV cercano) y de luz visible de 400 a 800 nm, por lo que es de gran utilidad para caracterizar las soluciones en la regin ultravioleta-visible del espectro. Se rige por una ley muy importante: la ecuacin de Beer-Lambert. CARACTERISTICAS DEL SISTEMA
Las muestras en solucin se ponen en una pequea celda de Si.
Se utilizan dos lmparas: una de H o deuterio para la regin UV, y
una de W / halgeno para la regin visible
Se utiliza tambin una celda de referencia que contiene slo
solvente.
La luz pasa simultneamente por la celda de muestra y la celda de
referencia.
El espectrmetro compara la luz que pasa por la muestra con la
que pasa por la celda de referencia.
La radiacin transmitida es detectada y el espectrmetro obtiene
el espectro de absorcin al barrer la longitud de onda de la luz.
CONSIDERACIONES GENERALES
La espectroscopia ultravioleta-visible es la ms limitada para la
informacin de compuestos. Los compuestos que tengan un cromforo o instauraciones son visibles en esta regin. Un cromforo es cualquier grupo de tomos que absorben luz independientemente de que presente color o no, aunque tambin puede presentar un grupo auxcromo que es el que amplia la conjugacin de un cromforo mediante la comparticin de electrones de no enlace.
La mxima absorcin se debe a la presencia de cromforos en
una molcula. Este tipo de espectroscopia sirve principalmente para el anlisis de compuestos aromticos y cidos carboxlicos ( y ) insaturados. Para el anlisis de catalizadores suele utilizarse una variante de esta espectroscopia llamada espectroscopia de reflectancia difusa(fsica)#Reflexi.C3.B3n difusa.