Sunteți pe pagina 1din 41

Definiia i caracteristicile rspunsului imun

Rspunsul imun (RI) include totalitatea evenimentelor care au loc dup


introducerea unui Ag, i anume:
activarea limfocitelor,
eliberarea a diverse molecule,
multiplicarea celulelor specifice,
producerea de limfocite T citotoxice sau de anticorpi capabili s se fixeze pe Ag i
s participe la
eliminarea acestuia (direct sau indirect).
Dup acest prim contact (ca i n cursul imunizrii consecutive), sistemul imun
produce limfocitele T i B de memorie, capabile s reacioneze mai rapid, mai
amplu, cu ocazia unei reintroduceri ulterioare a aceluiai antigen.
Aa cum a fost menionat anterior, principala caracteristic a imunitii este
specificitatea. Pentru a sugera ct de specific este rspunsul imun, o modalitate
este de a discuta despre potrivirea dintre cheie i broasc, ntre structurile Ag i
Ac. Acest exemplu are un grad de sugestivitate, dar este incomplet n comparaie cu
realitatea. O alt modalitate de a sugera specificitatea rspunsului imun ar fi
potrivirea dintre mna aezat n faa oglinzii i imaginea din oglind.
O alt caracteristic foarte important a RI, n condiii fiziologice, este capacitatea
de a discerne ntre self i non-self i de a reaciona numai fa de
moleculele care ndeplinesc definiia de antigen (vezi i MHC/CMH).
Rspunsul imun poate fi
-de tip umoral, mediat prin anticorpi sau
-de tipcelular, mediat de ctre celule.
n cazul antigenelor timodependente (cea mai mare parte a antigenelor), se
dezvolt un rspuns imun celular specific prin LT citotoxice i unul umoral
specific prin anticorpi. Diferite citokine pot activa sau inhiba, n mod preferenial,
unul sau ambele tipuri de rspuns. n cazul antigenelor timoindependente,
rspunsul imun este umoral. n continuare vor fi prezentate n mod schematic
aceste dou tipuri de rspuns imun umoral i celular.
Rspunsul imun de tip umoral
Rspunsul imun umoral (RIU) const n producerea de Ac specifici i este
transferabil pentru o perioad de timp (3-6 sptmni), prin ser, la un alt
animal. Imunitatea umoral intervine n distrugerea bacteriilor extracelulare,
neutralizarea virusurilor, inhibarea toxinelor.
Natura antigenelor fa de care se dezvolt un rspuns imun umoral include
poliozide, proteine, substane sintetice, rareori lipide i acizi nucleici sau anticorpi
(n cazul proceselor autoimune). Unele antigene (alergenii) determin un RI cu
anticorpi de tip IgE.
Introducerea antigenului pe cale subcutan, intramuscular sau intravenos
determin un RIU cu producerea de IgM i/sau IgG iar administrarea pe cale
oral determin un rspuns preferenial cu IgA.
n cazul antigenelor particulate (celule, bacterii, virusuri) sau al antigenelor sub
form de agregate, eliminarea este mult mai rapid, prin procesul de fagocitoz
(care antreneaz o imunizare mai precoce).
Contactul cu antigenul antreneaz importante modificri histologice ale
organelor limfoide: centri germinativi se dezvolt n foliculi i persist mai multe
sptmni; n paralel apar att imunoblatii i plasmocitele, ct i limfocitele de
memorie; dup 3-4 zile se pot detecta limfocite cu anticorpi membranari, apoi
celule care sintetizeaz anticorpi serici.
Rspunsul imun primar (RIP)
naintea primului contact cu un anumit antigen, nu exist anticorpi potrivii fa
de acesta. Stimulul antigenic primar selecteaz LB care au receptori pentru
respectivul Ag. Dup primul contact cu Ag se dezvolt RIP, cu urmtoarele
caracteristici:
Latena: reprezint perioada de la contactul cu Ag pn la prezentarea
structurilor Ag ctre LB (n conjuncie cu moleculele MHC); variaz n funcie de
natura antigenului, calea de administrare i doza administrat; dureaz ntre 2 i 3
zile; 223
Creterea logaritmic: (sintez activ de Ac, de ctre plasmocite) dureaz circa
3 zile; n timpul acestei perioade, Ac devin decelabili prin reacii Ag-Ac; urmeaz o
faz de stagnare (cteva zile), timp n care titrul anticorpilor serici se menine
relativ constant;
Ulterior are loc scderea progresiv a titrului anticorpilor serici.
De regul, tehnicile imunologice uzuale permit identificarea Ac dup 5-14 zile de la
stimulul antigenic primar.
Natura anticorpilor:
examinarea claselor de anticorpi produi arat c primii anticorpi care apar sunt de
tip IgM (cei din clasa IgG apar cteva zile mai trziu iar nivelul lor crete pe
msur ce nivelul IgM scade);
n urmtoarele 2-3 sptmni, n ser predomin anticorpii de tip IgG;
n urmtoarele luni, eventualii anticorpi care persist sunt de tip IgG.
Rspunsul imun secundar (RIS)
Rspunsul imun secundar apare dup al doilea contact cu acelai antigen (sau dup
contacte ulterioare). RIS are urmtoarele caracteristici:
poate aprea chiar i dup administrarea unor doze destul de mici de antigen;
latena este redus la circa 24 ore; se ajunge repede, abrupt la faza de cretere
logaritmic;
anticorpii sunt de tip IgG;
titrul Ac produi este mult mai nalt;
persistena acestora este mai lung (Ac produi se menin timp mai ndelungat,
luni de zile).
Diferena dintre RIP i RIS este datorat n primul rnd existenei limfocitelor
cu memorie. Dup eliminarea Ag, n organism continu s circule celule cu
memorie, reacia imun la al doilea contact cu acelai Ag avnd caracteristicile de
mai sus. Memoria imun se stabilete din timpul RIP i este specific.

Teoria seleciei clonale


Teoria seleciei clonale a fost propus n jurul anului 1950 de ctre McFarlane
Burnet. Aceast teorie afirm c la nivelul sistemului imun exist un numr imens
de capi de clone de limfocite, fiecare dintre aceti capi de serie corespunznd
unei structuri antigenice (unui anume epitop); n cadrul aceleai teorii, Burnet a
fcut estimarea c n lume ar exista circa 100 de milioane de tipuri de epitopi
diferii. Clona, aa cum se cunoate, este o populaie de celule identice din punct de
vedere genetic, descendente ale unei singure celule mam.
Toate celulele unei anumite clone au la suprafa, molecule identice cu structur
imunoglobulinic; aceste imunoglobuline au rol de receptori pentru structurile
antigenice (pentru fiecare antigen diferit exist un receptor diferit).
Structurile antigenice selecteaz din acest numr imens de limfocite cap de
serie pe acelea care au receptori complementari (configuraie spaial etc) i astfel
determin proliferarea i diferenierea lor n celule productoare de anticorpi.
Celulele unei clone au aceeai specificitate pentru structura antigenic datorit
creia au proliferat.
Clonele de limfocite care ar putea s produc anticorpi fa de structurile proprii
(self) sunt reprimate n timpul vieii intra-uterine i numai celelalte clone pot
ajunge la maturitate. n lipsa acestei represii apar boli autoimune grave, potenial
fatale. 225
Rspunsul imun de tip celular
Imunitatea celular presupune n special dezvoltarea unui rspuns imun fa de
celulele infectate cu virusuri, celulele infectate cu microorganisme cu multiplicare
intracelular (mycobacterii, Listeria spp., Brucella spp. etc), parazii intracelulari,
allogrefe, celule tumorale.
Un microorganism cu dezvoltare intracelular penetreaz n diverse celule i n
particular n macrofage (aflate n stare de repaus i neactivate) i se poate divide
fr ca acest proces s induc o reacie imun celular natural i specific.
Macrofagul care a fost infectat cu un microorganism secret o serie de citokine (IL-
1, IL-6, IL-10, IL-12, TNF-a i TNF-) care la rndul lor vor aciona dup cum urmeaz
(Figura nr. 2):
TNF-a va activa macrofagul infectat;
TNF-a, TNF- vor activa macrofagele neinfectate nc;
TNF-a, IL-10, IL-12 vor activa celulele NK.
Aceast prim faz va pune n micare celulele imunitii celulare specifice i astfel
limfocitele Th0 vor fi activate i se vor diferenia n Th1, datorit IL-12, secretat de
macrofage i a IFN-g, secretat de celulele NK activate.
Etapele rspunsului imun celular
Imunitatea celular intervine n mai multe etape succesive.
Rspunsul celular presupune ca antigenul prezentat limfocitelor s fie degradat n
peptide i asociat cu molecule MHC II. Dintre APC menionm celulele dendritice
(cele mai bune prezentatoare de antigen), celulele Langherhans, macrofagele i
limfocitele B (eficiente numai dup stimulare).
Recunoaterea peptidelor antigenice de ctre LT helper i activarea lor necesit
contactul direct ntre APC i limfocitele Th, interaciunea fiind trimolecular: TCR,
peptide antigenice i MHC clasa II. moleculele CD4 i moleculele de adeziune
consolideaz aceast interaciune. Toate aceste contacte duc la activarea i
multiplicarea limfocitelor T CD4+. Drept rezultat, LT CD4+ activate sintetizeaz IL-2
i lanul a cu rol de receptor pentru IL-2 (IL-2R), ceea ce permite o aciune autocrin
i exocrin; multiplicarea limfocitelor T antigen-specifice duce la formarea de clone
celulare specifice antigenului.
Generarea limfocitelor T citotoxice
LT CD8+ sunt selecionate dup specificitatea lor fa de antigen i activate de
diferitele citokine (IL-2, IFN-g) secretate de limfocitele Th1 activate n prealabil.
Recrutarea altor celule pentru cooperare
Prin citokinele secretate, imunitatea celular permite recrutarea i activarea unor
celule care nu sunt specifice antigenului:
IL-2 - produs numai de LT (n principal CD4+ i numai ntr-o mic msur de ctre
CD8+), are o aciune autocrin asupra LT dar i asupra monocitelor, macrofagelor,
LT CD8+ i a celulelor NK; 226

IFN-g - produs n principal de LT (CD8+ i mai puin din CD4+) dar i de celulele
NK, activeaz macrofagul, crete sinteza de molecule MHC II, recruteaz celule NK i
le activeaz funcia citotoxic sub efectul TNF-a i mpiedic infectarea celulelor cu
virusuri (aciune antiviral)
Tipuri de imunitate
Imunitatea poate fi motenit (trstur de specie, se transmite ereditar) i
dobndit.
Imunitatea poate fi dobndit activ, dup contactul cu un anumit antigen (ex.
bacterian). Evenimentul imunologic poate aprea dup o infecie (natural) sau dup
administrarea unor vaccinuri (artificial). Avantajul imunitii dobndite activ este
faptul c, de regul, protecia este de durat. Dezavantajul principal este
reprezentat de faptul c instalarea rspunsului imun are loc lent, mai ales n cazul
RIP.
Imunitatea poate fi dobndit i pasiv, prelund anticorpi produi de ctre o alt
gazd. Spre exemplu, administrarea de anticorpi anti toxin difteric / tetanic /
botulinic (artificial) pune la dispoziia gazdei infectate, imediat, o cantitate
important de antitoxin, n vederea neutralizrii ct mai rapid a toxinei implicate
patogenic. n mod natural, ftul i nou nscutul beneficiaz de protecie prin
intermediul anticorpilor (IgG transplacentar, IgA prin colostru, lapte) provenii de la
mam. Avantajul imunitii dobndite pasiv este rapiditatea, n timp ce dezavantajul
este reprezentat, pe de o parte, de timpul scurt pentru care este oferit protecia iar
pe de alt parte, de riscurile unei hipersensibilizri, atunci cnd sunt utilizai
anticorpi provenind de la o alt specie (ex. n cazul administrrii de ser recoltat de
la cal hiperimunizat).
Exist i posibilitatea dobndirii unei imuniti activ - pasiv, atunci cnd se
administreaz concomitent (dar n locuri diferite) ser imun i un vaccin (ex. n
suspiciunea infeciei cu Clostridium tetani).
Mult timp s-a considerat c cele 2 tipuri de imunitate acioneaz independent,
imunitatea nnscut oferind prima linie de aprare mpotriva microbilor invadatori,
iar imunitatea dobndit intervenind mai trziu, pentru a elimina infecia. ns,
interaciunea dintre cele 2 tipuri de imunitate este evident: imunitatea adaptativ
profit de abilitatea imunitii nnscute de a distinge ntre agenii patogeni,
microbii benefici i factorii de mediu.
Cele 2 tipuri de imunitate sunt complementare, n strns colaborare (un
adevrat exemplu pentru studeni, medici sau orice membru al sistemului sanitar).
Existena celulelor NK ntrete aceste considerente. Conform unor descoperiri
recente, celulele NK au o proprietate esenial, atribuit numai celulelor imunitii
memoria; n plus, au fost identificate celule NK n locuri atribuite n mod clasic
imunitii adaptative: timus i ganglionii limfatici.

Organele cu rol n imunitate


Dup secvena de intrare n funcie i rolul deinut, se descriu trei tipuri de
organe imune: stem, primare i secundare.
Organele su (stem)
Sistemul hematopoietic i celulele stem
Sistemul hematopoietic cuprinde organele stem cu funcie dubl, hematologic i
imunologic. Celula multipotent, primordial (su, stem, matc) se
formeaz iniial la nivelul peretelui sacului vitelin, ulterior n esutul hematopoietic
din ficatul embrionului. Celula stem se afl la originea tuturor liniilor
hematopoietice (vezi i 11.1.). Din celulele stem multipotente rezult celulele liniei
limfocitare (din care iau natere limfocitele B i T) i celulele liniei mieloide
(precursoare pentru liniile eritrocitar, megakariocitar, monocito-macrofagic i
granulocitar).
. Mezodermul embrionar i ficatul fetal
Organele care conin celulele stem hematopoietice sunt active de-a lungul vieii
embrionare i fetale, ntr-o anumit succesiune. n primele sptmni de via, ele
sunt situate n mezodermul intra-embrionar i extra-embrionar (sacul vitelin). La ft,
celulele stem migreaz i se localizeaz la nivel hepatic. n cea de-a zecea
sptmn de via intrauterin, apar primele celule stem n os. dup cea de-a 20-a
sptmn, la ftul uman, hematopoieza devine exclusiv medular.
Mduva osoas
Teritoriul hematopoietic (MOH) se reduce odat cu vrsta: la copil, toate oasele au
funcie hematopoietic; la adult, teritoriul hematopoietic se restrnge la oasele
trunchiului i bazinului, atingnd un volum de circa 5 litri la un subiect de 60 kg; la
persoanele vrstnice, funcia hematopoietic se menine la nivelul sternului,
vertebrelor i al oaselor coxale.
Organele limfoide primare
organele limfoide primare, numite i centrale, sunt situate n afara cilor de acces i
circulaie antigenic. n aceste organe diferenierea apare precoce, n viaa
embrionar, naintea celor secundare. Proliferarea limfocitar este intens i
independent de stimularea antigenic.
Organele limfoide primare au urmtoarele roluri:
permit multiplicarea limfocitelor T (timodependente) i B (dependente de mduva
roie hematogen / bone marrow - la mamifere).
gzduiesc primele stadii de difereniere, pn la limfocitele T sau B mature, apte
s recunoasc structurile antigenice i s fie stimulate de antigene.
efectorii imuni nva la acest nivel s recunoasc i s tolereze constituenii
propriului organism (auto-recunoatere i toleran fa de self). 143
Un limfocit T sau B matur care a prsit timusul, respectiv mduva osoas
hematogen, nu mai revine niciodat la acest nivel, cele dou organe fiind n afara
cilor de recirculare a limfocitelor antigen-specifice din organele limfoide secundare.
Timusul
Timusul se formeaz n perioada de dezvoltare a celui de-al treilea arc branchial.
nc din stadiul de dezvoltare fetal, timusul este prezent n cavitatea toracic, fiind
dispus retrosternal, ca un organ bine difereniat, deja funcional. Agenezia acestei
regiuni duce la apariia unui deficit congenital rar, sindromul Di George (aplazia
congenital timic sau boala pipernicirii), caracterizat prin tulburri ale imunitii
celulare i implicit prin susceptibilitate crescut la infecii (respiratorii, digestive i
cutanate, produse n special de fungi i virusuri i mai rar de ctre bacterii), tetanie
neonatal (datorat absenei paratiroidelor) i malformaii congenitale diverse (arc
aortic dublu, tetralogie Fallot, micrognatism, atrezie de esofag etc).
Timusul este un organ situat n mediastinul anterior i superior, retrosternal, format
din doi lobi unii printr-un istm median. Fiecare lob este format din lobuli
compartimentai de septuri derivate din capsula organului. Lobulul timic este
alctuit din 2 zone: cortical (la exterior) i medular (la interior). Iniial se dezvolt
zona cortical.
Greutatea sa variaz cu vrsta (este bine dezvoltat la ft, greutatea crete pn la
pubertate - dezvoltarea maxim se realizeaz la vrsta de 10-12 ani, apoi sufer o
involuie lent, fr s dispar total).
n zona cortical, trama de-a lungul creia se plaseaz protimocitele (sosite n timus
de la MOH) cuprinde celule epiteliale, celule dendritice intratimice i macrofage.
Limfocitele mici, denumite i timocite corticale, sunt numeroase, grupate n
grmezi, n jurul celulelor epiteliale. Ele se divid activ, dar nu se structureaz n
noduli limfatici.
n zona medular, celulele epiteliale sunt izolate sau grupate formnd corpusculii lui
Hassal (formaiuni de celule epiteliale care degenereaz, fiind mereu nlocuite cu
alte celule similare), caracteristici timusului. Se consider c au rol fagocitar. Cresc
att numeric ct i ca dimensiuni, probabil datorit contactului cu microorganismele
din flora normal, dar i contaminrii cu alte microorganisme. Medulara mai conine
i celule dendritice, macrofage i timocite. Timocitele medulare sunt mult mai
dispersate dect cele din zona cortical. La acest nivel are loc selecia negativ a
timocitelor.
Timusul are capacitatea de a elimina prin selecie pozitiv celulele care, odat
eliberate n circulaie, nu ar fi putut produce efectul scontat, deoarece nu ar fi
recunoscut structurile non-self i prin selecie negativ celulele care ar fi dat reacii
autoimune.
Populaia limfocitar aflat n proces de multiplicare n timus, este foarte sensibil la
aciunea corticosteroizilor, 95% din limfocite fiind distruse. Restul de 5% din
limfocitele cortico-rezistente sunt cele care, la finalul maturaiei, trec n circulaie.
Se pare c iniial are loc distrugerea a 80% dintre limfocite, 20% ajung la nivel
medular i dintre acestea supravieuiesc cele 1-5% limfocite cortico-rezistente.
Timocitele ajunse n zona medular sunt mai rezistente la aciunea cortizolului
dect cele din zona cortical. (Figura nr. 1)
Rolul timusului se manifest local i la distan:
rolul local, const n transformarea limfocitelor nedifereniate n limfocite T
mature, cu achiziia de receptori pentru antigene (TCR). Procesul de multiplicare i
difereniere are loc, n principal, n regiunea cortical. Celulele achiziioneaz
progresiv markeri ai limfocitului T adult: 144
molecule CD2, CD3, CD4, CD8 i TCR. Urmeaz o dubl selecie, pozitiv i
negativ. n selecia pozitiv, timocitele care recunosc antigenele strine fixate pe
moleculele MHC pot prolifera (timocitele CD4+ recunosc moleculele MHC clasa II,
timocitele CD8+ recunosc moleculele MHC clasa I), n timp ce acele limfocite care
nu i-au dezvoltat receptori pentru antigene sunt distruse. n selecia negativ,
timocitele care recunosc structurile self sunt distruse, eliminndu-se astfel
timocitele puternic autoreactive, care ar conduce la apariia unor fenomene
autoimune imediat dup natere. n timus are loc multiplicarea, diferenierea i
selecia limfocitelor T. Tot la nivel timic are loc producerea celulelor de control, cu rol
n prevenirea bolilor autoimune (experienele realizate prin nlocuirea limfocitelor
proprii cu limfocite de la persoane sntoase a dus, pentru un timp, la dispariia
semnelor de boal, dovedind astfel existena acestor celule timice). (Figura nr. 2)
rolul la distan se realizeaz prin factorii timici peptidici umorali (timostimulina,
timopoietinele, timozinele, factorul umoral timic etc). Aceti factori au funcii
diverse, unii dintre ei influennd diferenierea limfocitelor T n ariile
timodependente din organele limfoide periferice. Acioneaz att la nivelul timusului
ct i la distan. Cteva informaii despre factorii timici:
Timozina are efecte asupra limfocitelor T, stimulndu-le activitatea citotoxic i
crescnd sinteza de IL-6. In vivo, stimuleaz LH i GnRH, iar in vitro Prolactina i GH.
Timostimulina necesit Zn pentru a aciona. Are efect asupra dezvoltrii
protimocitelor n MOH.
Factorul umoral timic induce producerea de IL-2 (are potenial antiviral).
Timopoietina intervine n procesul de difereniere a limfocitelor T.
Mduva osoas hematogen la mamifere
La mamifere, se menine divizarea funcional n limfocite T i B, dar nu exist
bursa lui Fabritzius. Transformarea celulei stem n limfocit B matur are loc n
mduva osoas hematogen (bone marrow, LB). La copii, rolul de organ limfoid
primar este asigurat att de mduva din oasele late ct i din oasele lungi; ulterior,
mduva de la nivelul oaselor lungi este nlocuit cu esut adipos, care mai trziu se
fibrozeaz, iar mduva activ rmne la nivelul oaselor late (stern, coxal, coaste,
vertebre). Cazurile cu deficit imunitar selectiv pentru limfocite B (ex. maladia
Bruton), confirm existena unei autonomii a acestei populaii. Transplantul de
mduv osoas hematogenrestaureaz imunitatea umoral, ducnd la dispariia
perturbrilor.
Dintre funciile mduvei osoase hematogen n imunitate amintim:
1. meninerea unui procent de celule stem cu difereniere spre linia limfocitar i
primele stadii ale seriei T i B;
2. maturarea i diferenierea complet a limfocitelor B n celule B mature, apte s
colonizeze organele limfoide secundare.
La nivelul mduvei exist mai multe tipuri de celule: celule cap de serie i celule
tinere care deriv din acestea, celule din seria granulocitar, celule din seria
megakariocitar, celule din seria eritrocitar, celule din seria monocito-macrofagic,
celulele din seria limfoid (dar nu exist LT, ci doar protimocite, limfocite T
nedifereniate).
Organele limfoide secundare
Dezvoltarea organelor limfoide secundare, numite i periferice sau efectoare,
este tardiv fa de cea a organelor limfoide primare, atingnd dezvoltarea deplin
numai dup stimularea antigenic. Amintim ca exemple de organe limfoide
secundare: ganglionii limfatici, splina i organele limfoide ataate sistemului
digestiv (apendice, amigdale, plci Peyer) etc. La nivelul acestor organe se
cantoneaz limfocitele T provenite din timus i limfocitele B provenite din mduva
osoas hematogen, migrate pe calea torentului circulator. n organele limfoide
secundare, aceste celule se vor activa n urma contactului cu antigenele.
n anumite zone ale organelor limfoide secundare, precum cele din ganglionii
limfatici sau din splin, se gsesc grupuri de celule, constituite n special din
limfocite B, denumite foliculi sau noduli limfatici. naintea stimulrii antigenice,
aceti foliculi primari sunt n repaus, cu limfocite mici apropiate unele de altele,
determinnd un aspect dens, caracteristic. Aceste limfocite mature sunt denumite
naive, deoarece nu au avut contact cu antigenul. Dup circa 3-6 zile de la
stimularea antigenic, foliculii primari se transform n foliculi secundari, cu un
centru germinativ clar, nconjurat de o zon mai ntunecat. n jurul foliculului exist
o zon marginal puin vizibil, constituit din limfocite B cu memorie. Foliculul
secundar persist cteva sptmni dup care redevine folicul primar.
Organele limfoide secundare cuprind urmtoarele grupe:
Ganglionii limfatici
Ganglionii limfatici (nodulii limfatici) reprezint structuri imune, organizate, situate
la interseciile traseelor limfatice. Au urmtoarele roluri:
colecteaz structurile antigenice care traverseaz teritoriul vaselor limfatice
aferente (libere sau captate de macrofage i/sau de celulele dendritice);
induc un rspuns imun fa de antigenele de tip celular, n regiunea paracortical
(dnd natere la limfocite T specifice) sau fa de antigene de tip umoral, n foliculii
limfatici cu limfocite B active, maturate n mduva osoas hematogen i
stocheaz informaiile imune datorit limfocitelor cu memorie dar au rol i n
diseminarea rspunsului imun prin circulaia limfocitelor pe calea traseelor limfatice
eferente, ctre torentul circulator i ulterior spre alte teritorii ganglionare, splenice,
digestive sau respiratorii.
n seciune anatomo-patologic transversal remarcm la exterior o zon cortical
(cuprinde n special limfocite B, instruite la nivel medular, aglomerate sub form
de noduli limfatici. n mijlocul nodulilor se afl centrii germinativi. Foliculii cresc mult
n dimensiuni dup infecie, iar ganglionii limfatici devin palpabili i dureroi.
Sub zona cortical se afl zona paracortical (cuprinde n special limfocite T). n
mijloc se afl zona medular, n care se gsesc att limfocite B ct i limfocite T. n
ganglionii limfatici se mai gsesc macrofage, celule dendritice etc. (Figura nr. 2)
Splina
Splina este cel mai mare organ limfoid secundar, avnd ns i alte funcii:
joac rolul unui filtru care n mod nespecific ndeprteaz/elimin complexele
antigen-anticorp circulante, diferite microorganisme, eritrocite parazitate (ex. cu
Plasmodium spp., Babesia microti);
are o eficien remarcabil n ndeprtarea/eliminarea microorganismelor slab
opsonizate precum i celor capsulate (ex. Streptococcus pneumoniae, Haemophilus
influenzae, Neisseria meningitidis, Capnocytophaga spp.); 146
eliminarea hematiilor degradate, mbtrnite;
reglarea volumului sngelui etc.
Pe seciune, splina are o culoare roie, cu formaiuni albe diseminate, numite
corpusculii Malpighi (foliculi splenici).
Splina este compus din dou tipuri de esuturi: pulpa roie implicat n distrugerea
hematiilor i pulpa alb, corespunztoare esutului limfoid. Aceasta din urm este
organizat sub forma unor grupri de limfocite T dispuse n imediata vecintate a
arteriolelor (manoane de limfocite T - teaca limfatic periarterial), iar spre
periferia acestora se gsesc cordoane de limfocite B (zona marginal). Se consider
c zona bogat n limfocite T este zona timo-dependent, n timp ce zona cu
limfocite B este zona medulo-dependent.
La periferia foliculilor splenici se gsesc plasmocite. La acest nivel are loc sintez de
anticorpi (n special dup stimuli antigenici solubili, venii pe calea torentului
circulator). Dup sintez, moleculele de anticorpi sunt antrenate sanguin i pot
ajunge n tot organismul. Splina reprezint un organ n care are loc sinteza
anticorpilor de tip IgM i diferenierea spre LB cu memorie n cadrul RI primar.
Splina are i rol n sinteza unei enzime care desprinde tuftsina (tetrapeptid rezultat
din clivarea enzimatic a poriunii Fc din molecula de IgG) de pe molecula de IgG
(tuftsina la rndul ei are rol n creterea funciei fagocitare a PMN i n
chemotactism).
Hipofuncia splenic i n special splenectomia favorizeaz apariia unor infecii
grave, inclusiv sepsis, cu microorganisme capsulate i microorganisme care
paraziteaz eritrocitele. Este necesar aplicarea unei strategii de prevenire a
infeciilor, incluznd vaccinarea i uneori profilaxia cu antibiotice i chimioterapice.
Sistemul limfoid asociat mucoaselor (MALT - mucous associated lymphoid
tissue)
Cile respiratorii, tractul digestiv i cel uro-genital sunt nconjurate pe toat
lungimea lor de esut limfoid difuz (sau nodular), bogat n limfocite B i plasmocite
care secret sIgA. Datorit particularitilor funcionale, MALT se subdivide n:
Sistemul imunitar nazo-faringian (NALT - nasopharynx associated lymphoid tissue)
reprezentat de inelul lui Waldeyer cu diferitele amigdale (palatine, faringian,
linguale) i structuri adenoide. Amigdalele sunt constituite din foliculi limfoizi
agregai i esut limfoid difuz n strns asociere cu epiteliul faringian. Amigdalele
sunt lipsite de vase limfatice, la fel ca i splina. Amigdalele au un rol protector
important n regiunea esofagian, faringian i a arborelui traheobronic,
constituind un prim obstacol mpotriva infeciilor. Cu toate c dup amigdalectomie
nu rezult infecii severe, decizia privind aceast operaie trebuie luat numai dup
o analiz critic, punnd n balan att beneficiile ct i posibilele urmri negative.
147
Structurile adenoide se inflameaz frecvent n timpul copilriei (dup diferitele i
frecventele infecii respiratorii) i deseori, crescnd n dimensiuni, trebuie extirpate;
Sistemul imunitar asociat tubului digestiv (GALT - gut associated lymphoid tissue)
cuprinde plcile Peyer i formaiunile limfoide ale apendicelui (secret IgA),
limfocitele intra-epiteliale i limfocitele sub-epiteliale. Plcile Peyer reprezint
aglomerri de celule limfoide (la nivelul jejunului, duodenului i ileonului). Dup
infecii bacteriene se mresc i se pot uni n adevrate cordoane limfoide. Nu au
vase limfatice proprii;
Sistemul imunitar asociat arborelui bronic (BALT - bronchus associated lymphoid
tissue);
Sistemul imunitar asociat cilor uro-genitale, prezent n special la nivelul vaginului;
Sistemul imunitar asociat glandelor mamare (mammary associated lymphoid
tissue).
Laptele matern conine IgA secretorie (sIgA) cu rol protector pentru noul nscut fa
de infeciile digestive. IgA nu poate trece prin bariera hemato-placentar, dar sIgA
poate fi primit n timpul alptrii, asigurnd protecia nou-nscutului i sugarului
fa de o serie de patogeni, n primele luni de via.
n organele limfoide secundare, distribuia limfocitelor i a celorlalte celule imune
este controlat de citokine i chemokine. Membrii familiei TNF (tumour necrosis
factors) (citokine implicate n reacii inflamatorii) au un rol deosebit de important n
dezvoltarea normal a organelor limfoide. Celulele imune au receptori pentru aceti
mediatori, acest lucru fiind demonstrat pe cobai la care s-au distrus o serie de
receptori pentru a se pune n eviden care este rolul lor.
Molecula MIP-3 face parte din categoria chemokinelor pentru care limfocitele T
prezint receptori. Datorit acestei substane, limfocitele T se localizeaz cu
strictee n zonele timodependente. Receptorul pentru MIP-3 se numete CCR7, iar
la cobaii la care receptorii CCR7 au fost distrui s-a observat absena marcat a
zonelor timodependente i un rspuns imun primar extrem de slab. Celulele
dendritice interdigitate produc chemokina MIP-3 i pentru c sunt prezente n
zonele timodependente, atrag acolo limfocite T mature. Receptorul CCR7 este
prezent n proporie mic i la nivelul limfocitelor B, lucru care explic migrarea
acestora prin zonele timodependente ctre foliculii limfatici.

Celulele implicate n rspunsul imun


Toate celulele sistemului hematopoietic intervin, n diferite msuri, n imunitate. Aa
cum am menionat anterior, aceste celule acioneaz ca nite adevrai soldai
(de ex. LT citotoxice, celulele NK), care pot avea att o activitatea efectoare ct i
de control i retro-control (depindu-i condiia de simpli ostai).
Limfocitele T i B suntelementele centrale alerspunsului imun specific.
Celulele NK sunt celule fundamentale (alturi de fagocite) n imunitatea
nnscut.
Monocitele / macrofagele, neutrofilele, eozinofilele, bazofilele i
mastocitele acioneaz n diferite momente ale rspunsului imun.
Plachetele sanguine intervin n lupta anti-parazitar iar globulele roii particip
la eliminarea complexelor imune.
Celule pot reaciona n mod nespecific, indiferent de natura agentului agresor (ex.
granulocitele PMN, eozinofilele, bazofilele, mastocitele, monocitele,
macrofagele, celulele dendritice etc) sau pot participa la o reacie specific,
condiionat de structura moleculelor antigenice, prin intermediul receptorilor (ex.
limfocitele).
Termenul generic de limfocite, include o multitudine de celule distincte,
imposibil de difereniat morfologic (n microscopia obinuit sau chiar i n
microscopia electronic).
Pe baza caracterelor morfologice, este totui posibil identificarea a dou tipuri de
limfocite:
- limfocitele mici (small lymphocytes), cele mai numeroase (circa 85% din
numrul total al limfocitelor); aici se ncadreaz majoritatea limfocitelor T,
limfocitelor B, celulelor dendritice i rarelor celule stem hematopoietice aflate n
circulaie.
- limfocitele mari cu granulaii (large granular lymphocytes), reprezentnd circa
5-15% din totalul limfocitelor. Dintre acestea amintim celulele NK (ucigae n mod
natural / natural killer) i limfocitele T citotoxice.
Clasificarea limfocitelor
Clasificarea limfocitelor se realizeaz pe baza:
funciilor i
identificrii markerilor celulari.
Funciile limfocitelor.
S-a demonstrat c pe lng limfocitele B, exist o mare varietate funcional de
limfocite T [ajuttoare (helper, LTh), supresoare, citotoxice sau responsabile de
imunitatea celular]. Funcionalitatea limfocitelor este dificil de studiat n practica
curent, mai ales c o singur celul poate avea mai multe funcii.
Pentru activarea limfocitelor este nevoie de dou semnale:
unul care provine de la antigen
altul provenit de la moleculele accesorii de pe suprafaa APC (B7/CD80) pentru LT
sau de pe LTh (CD40L) pentru LB.
Limfocitele care sunt stimulate doar de primul semnal devin neresponsive la alte
semnale antigenice i nici nu se activeaz pentru a reaciona fa de primul semnal
antigenic.
Etapele activrii limfocitelor:
sinteza de citokine dar i de receptori pentru acestea de ctre limfocitele naive dar
mature
proliferarea limfocitar (expansiunea clonal) - n unele infecii numrul LT poate
crete de 50.000 ori, iar al LB de 5.000 ori
transformarea limfocitelor naive n limfocite efectoare cu rol n eliminarea
antigenului 153
diferenierea limfocitelor efectoare n limfocite cu memorie.
Aadar, avem de-a face cu trei tipuri de limfocite:
naive mature dar care nu au avut contact cu antigenul; acestea urmeaz s fie
distruse n cazul n care ntr-o perioad de 1-3 luni nu au contact antigenic
efectoare
cu memorie - care vor reaciona mai rapid la a doua stimulare cu acelai antigen.
Limfocitele T (LT) (Figura nr. 2 Maturarea limfocitelor)
Limfocitele T sunt majoritare n circulaia sanguin, reprezentnd circa 70% din
totalul limfocitelor [2/3 sunt LT4 (CD4+) i 1/3 sunt LT8 (CD8+)]. Limfocitele T sunt
localizate la nivelul organelor limfoide secundare n zone speciale: zona
paracortical a ganglionilor, manonul limfoid n jurul arterelor centrale splenice.
Limfocitele T sunt implicate n principal n imunitatea mediat celular. Pe de o
parte particip la eliminarea structurilor strine dar i a structurilor proprii
modificate (prin mbtrnire, n urma unei infecii, cu multiplicare neoplazic) iar pe
de alt parte coopereaz cu limfocitele B n rspunsul imun umoral. De fapt,
funciile exercitate de LT sunt mult mai complexe.
Cea mai important funcie a limfocitelor T este inducerea unui rspuns sau a
unei reacii imune specifice la antigene, prin recunoaterea unor peptide antigenice
fixate pe moleculele MHC (complex major de histocompatibilitate). n acest scop pe
limfocitul T exist un receptor pentru antigen (TCR), asociat ntotdeauna cu un
complex molecular transductor CD 3.
Linia limfocitar T se matureaz n dou organe: (a) mduv osoas i (b) timus.
Din celula stem hematopoietic multipotent (CD34+, CD38-), prima
difereniere conduce la apariia CFU-L (colony forming unit-lymphocyte) comun
limfocitelor T i B (CD34+, CD45RA+, CD10+) din care rezult protimocitul.
Protimocitul prsete mduva roie hematogen i se cantoneaz n corticala
timic.
Maturizarea timocitelor nu a putut fi studiat la om, astfel nct datele se obin prin
extrapolarea informaiilor obinute experimental, la animale de laborator.
Protimocitele i apoi timocitele imature se gsesc n corticala timic (subcapsular),
n contact cu celulele epiteliale i cu macrofagele (rare) de la acest nivel. Aceste
celule tinere au o capacitate foarte mare de multiplicare. Se deplaseaz prin cortex
spre jonciunea cortico-medular i vin n contact cu celulele dendritice i cu
macrofagele. La acest nivel are loc o nou multiplicare relativ intens. Este de
remarcat faptul c n cursul acestui proces, doar 1-5% din celulele tinere ajung
limfocite T mature. Restul, de cel puin 95% din celule, mor prin apoptoz.
Activarea unui limfocit T specific se face printr-un mecanism dublu: 1. contactul
(direct) celul - celul, cu o celul prezentatoare de antigen (APC); 2. stimularea
(indirect) de ctre citokine: IL-1, IL-6, IFN-g i IL-2. Limfocitul produce la rndul su
att IL-2 ct i lanul a al receptorului Il-2, contribuind la activarea altor LT specifice.
LT sunt activate doar de ctre antigenele timodependente ;procesul se desfoar la
distan de locul de ptrundere al antigenului, i anume n organele limfoide
secundare unde o APC i prezint structurile antigenice. Consecina activrii LT este
transformarea acestuia n limfoblast T. 154
Tipuri de limfocite T
^Limfocitele T ajuttoare (T helper, CD4+) (LTh/Th)
Limfocitul Th este un veritabil coordonator, orientnd rspunsul imun (RI) ctre RI
celular sau ctre RI umoral. Exist cinci subtipuri de LTh (Th0, Th1, Th2, Th3 i
Th17):
- limfocitele Th0 sunt limfocite tinere (sub influena unor stimuli moleculari, ex. IL-
4, IL-12, se vor transforma n limfocite Th1 sau n limfocite Th2);
- limfocitele Th1 sintetizeaz limfotoxin, IL-2, IFN-, TNF- i TNF-
o au rol foarte important n aprarea anti-viral, i anti-neoplazic (dar i n
aprarea anti-fungic i anti-bacterian),
o sunt implicate mai ales n RIC,
o stimuleaz switch-ul izotipic spre IgG2 i IgG3,
o amplific rolul citotoxic al macrofagelor i stimuleaz proliferarea LTc;
- limfocitele Th2 sintetizeaz IL2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13;
o au rol mai ales n RIU,
o sunt implicate n reaciile de hipersensibilitate,
o stimuleaz proliferarea LB i secreia de anticorpi;
o sunt stimulate de semnale venite de la bazofile i eozinofile (papaina duce la
sinteza de IL-4 de ctre bazofile care duce la stimularea rspunsului Th2) (1).
- limfocitele Th3 (limfocitele T reglatorii) deprim funcia altor limfocite (CD4+,
CD8+, LB, NK); secret Il-10 (inhib Th1 i Th2, deci RIU i RIC) i TGF- (inhib
rspunsul imun); sunt CD4+ i CD25+;
- relativ recent au fost identificate limfocitele Th17; acestea se gsesc la interfaa
dintre mediul extern i mediul intern (ex. la nivelul tegumentului, de-a lungul
tractului gastro-intestinal); sintetizeaz IL-6, IL-17 i TNF-;
o au rol de protecie la nivelul acestor suprafee,
o studii recente au aratat c sunt implicate n inducerea i exacerbarea
autoimunitii i inflamaiei (datorit IL-17),
o activeaz RIC (importante n RI prin recrutarea neutrofilelor i macrofagelor la
locul infeciei),
o sunt n relaie cu LT reglatorii care previn fenomenele inflamatorii i mediaz
tolerana imun (2),
o secreia lor este stimulat de IL-23,
o LTh-17 cu memorie reacioneaza fa de antigenele Candida albicans (3).
^Limfocitele T citotoxice (Tc, CD8+)
Se refer n principal la LT CD8+, cu toate c aceast proprietate a fost observat i
la unele LT CD4+, cu urmtoarele diferene:
LTc CD8+ pot liza oricare dintre celulele organismului care exprim molecule HLA I
(HLA - human leukocyte antigen system)
LTc CD4+ i limiteaz funcia la celulele care exprim molecule HLA II.
Au mai multe roluri, de ex. realizeaz supravegherea imunologic prevenind
multiplicarea anarhic a celulelor. Dac de ex. apar antigene tumorale, LTc au
capacitatea de a le recunoate, de a se multiplica/activa i de a le distruge. n
aceast supraveghere, LTc sunt ajutate de celulele NK.
Distrugerea antigenelor este indus prin dou mecanisme:
inducerea apoptozei prin intermediul unui receptor al morii celulare, ceea ce
duce la fragmentarea ADN-ului celulei int; 155
atacul asupra celulei int prin perforine (proteine ce rup membrana plasmatic
sau lizozomal) i granzine (serin proteaze care lizeaz substraturi sau activeaz
diverse proteaze) sintetizate i eliberate de ctre LTc.
LTc au un rol important n aprarea mpotriva celulelor infectate viral.
Activitatea lor este intensificat de IFN-g.
^Limfocitele T supresoare (Ts, CD8+)
Limfocitul T supresor este o celul CD8+, ca i LT citotoxic.
Limfocitele Ts au rol n reglarea rspunsului imun, meninndu-l n limite normale.
n lipsa Ts, orice stimul antigenic ar putea fi urmat de o proliferare anarhic a unei
clone de limfocite (acele limfocite dotate cu receptorul specific pentru respectiva
structur antigenic).
n mod normal, ntre populaiile de limfocite Th i Ts exist un echilibru, care se
cuantific prin raportul Th/Ts, raport care trebuie s fie supraunitar. Exemplul cel
mai cunoscut n care valoarea raportului devine subunitar este infecia HIV / SIDA.
O parte dintre limfocitele T nu au funcie efectoare i se transform n LT
cu memorie.
Limfocitele T ( T cells)
Limfocitele T sunt sechestrate la nivelul barierelor epiteliale sau la nivelul
focarului inflamator i manifest citotoxicitate fa de diverse inte.
Sunt activate direct de antigen (non-peptide de dimensiuni mici) fr a fi necesar
prezentarea n conjuncie cu MHC.
Limfocitele T NK (NKT cells)
Limfocitele T NKintervin n RIP i produc cantiti crescute de IL-4. mprumut
proprieti att de la LT ct i de la NK. 156
Limfocitele B (LB)
Limfocitele B reprezint 5% pn la 15% din limfocitele din snge (300 pn la 600
elemente/mm3) i constituie majoritatea celulelor din foliculii limfatici, ganglioni i
splin. Rolul lor esenial este sinteza anticorpilor, n cursul RIU specific. Au fost
denumite astfel deoarece s-a descoperit c la psri LB se dezvolv n bursa lui
Fabricius. La om LB se dezvolt n mduva osoas hematogen (bone marrow).
Limfocitele B provin (la om i la mamifere) din celulele stem hematopoietice
(CD34+, CD38-). Toat linia limfocitar B (celule imature sau mature) are markeri
specifici de suprafa CD19 i CD20, utilizai pentru identificarea celulelor B (ex. n
citometria n flux); identificarea prin aceeai metod a markerului CD10 permite
ncadrarea n stadiul de limfocit matur.
Limfocitul B prsete mduva osoas i trece n zonele B din organele limfoide
secundare (ganglioni limfatici, splin etc). LB naiv (virgin) este pregtit pentru a
rspunde stimulului antigenic, dei se gsete n stare de repaus, n ateptarea
primei stimulri antigenice. n acest stadiu, LB are urmtoarele caracteristici:
exprim la nivelul membranei imunoglobuline din clasele IgM i IgD;
exprim receptori pentru interleukinele IL-1 i IL-4;
exprim receptori pentru complement CR1 (CD35) i CR2 (CD21). Ultimul
recunoate fragmentul C3d, component degradat al fragmentului C3 al
complementului. Acesta contribuie la activarea limfocitului B.
exprim receptori pentru anumite lectine (ex. PWM) utilizate in vitro pentru
transformarea limfoblastic a limfocitelor B, dar i receptori pentru endotoxine
bacteriene (LPZ).
Transformarea unui LB naiv ntr-un LB activ i apoi n plasmocit necesit intervenia
succesiv a citokinelor (ca ntr-o cascad).
Activarea are loc datorit recunoaterii antigenice dar i datorit secreiei de IL-1 de
ctre celula prezentatoare de antigen (APC) i respectiv secreiei de IL-4 de ctre
Th2. Limfocitul B activ exprim receptori pentru alte interleukine, n special IL-5 i
IL-6 i lanul a al IL-2. LB se va divide i va da natere la numeroase celule identice
n foliculul limfoid secundar.
Limfocitul B se difereniaz progresiv ntr-un limfoblast sau imunoblast care secret
IgM. Sub aciunea diferitelor citokine are loc comutarea izotipic (isotypic switch) de
la IgM la IgG, IgA sau IgE; n urma acestei comutri plasmocitul va secreta IgG, IgA
sau IgE. De exemplu, sub aciunea IL-4 are loc comutarea izotipic a IgM n IgG sau
IgE iar sub aciunea IL-5 n IgA.
Exist i limfocite B active care nu se transform n plasmocite ci persist sub form
de limfocite B cu memorie, cu o durat de via lung (asigurnd spre exemplu
protecia fa de o nou mbolnvire, de ex. dup scarlatin/infecie cu streptococul
piogen de grup A, lizogenizat).
Limfocitul B are urmtoarele funcii: 1. Prezentarea antigenelor ctre LT; 2. Sinteza
imunoglobulinelor (anticorpilor). n cazul antigenelor timo-dependente, are loc
trecerea de la rspunsul primar cu secreie predominent de IgM, la un rspuns
secundar cu predominena IgG sau mai rar a IgA sau IgE. n cazul antigenelor timo-
independente, se menine sinteza anticorpilor din clasa IgM.
Limfoblastul (lymphoid progenitor) d natere la trei linii celulare (LT, LB i NK).
Exist o gen (Pax5) care este esenial pentru maturarea LB (5). 157
Celulele NK (Natural killer cells)
Numele de celule NK a fost dat acestei populaii celulare datorit puterii lor
citotoxice spontane, fr a avea nevoie de un stimul imun sau de prezena MHC
(complexul major de histocompatibilitate). Numite iniial celule de clasa a III-a
(nefiind LB sau LT), ulterior celule nule (pentru c pe suprafaa lor nu fuseser, nc,
pui n eviden receptori), n final au fost numite celule NK (ucigae n mod nativ,
natural killer).Fac parte dintre limfocitele mari cu granulaii (large granular
lymphocytes).
Se gsesc n mduva osoas hematogen, splin i n sngele periferic.
Celulele NK reprezint o linie primordial de aprare a organismului (imunitatea
nnscut), pe care l ajut s elimine celulele modificate datorit unor infecii, sau
celulele modificate neoplazic, n special n neoplazii hematologice (ex. leucemie).
Spre deosebire de limfocitele Tc
celulele NK nu au TCR (au ns, de ex., receptori pentru molecule de IgG),
n cazul celulelor NK nu exist rspuns imun secundar (de memorie).
Celulele prezentatoare de antigen (antigen presenting cells)
Capacitatea de a prezenta antigene limfocitelor Th, iar prin aceasta de a induce un
RI specific, este asigurat de dou categorii de celule prezentatoare de antigen
(APC):
- celulele profesionale / specializate
celulele dendritice,
monocitele / macrofagele i
limfocitele B;
- celulele ocazionale (ndeplinesc funcia doar n anumite condiii de activare
celular)
neutrofilele,
celulele endoteliale i
celulele epiteliale.
Celulele prezentatoare de antigen (APC) au urmtoarele funcii (Figura nr. 3):
recunosc antigenele T dependente prin receptorii membranari, le endociteaz i
prelucreaz,
transport antigenele native de la esuturi la organele limfoide secundare,
prezint antigenele native LT urmnd selecia clonei de limfocite specifice acelui
antigen,
activeaz fie LTc fie LTh.
Celulele dendritice se gsesc n aproape toate esuturile organismului, incluznd
sngele i organele limfoide. La nivelul esuturilor periferice formeaz o reea care
se extinde i n spaiile dintre celulele parenchimatoase astfel nct pot detecta
orice microorganism aflat n acea zon. Celulele dendritice posed dou sisteme de
supraveghere imunologic:
macropinocitoz (n fiecare or inger echivalentul volumului lor; nu ateapt
pasiv apariia antigenului care s le stimuleze),
au pe membran mai multe tipuri de receptori pentru mai multe tipuri de
particule.
Aadar, celulele dendritice sunt eliberate n circulaie din mduva osoas
hematogen i se transform n CDS(sangvine). De aici pot urma dou ci:
n esutul cutanat se transform n CDL (capteaz antigenele opsonizate), apoi iau
calea vaselor limfatice transformndu-se n CDV, ajung la nivelul organelor limfoide
secundare unde se transform n CDID care prezint pe membrana epitopi n
conjuncie cu MHC II.
n interstiiu se transform n CDI, apoi fie iau calea vaselor limfatice (i urmeaz
drumul de mai sus), fie trec n circulaie, se transform din nou n CDS i ajung n
splin unde fie
o ajung periarteriolar (zona cu LT) i se transform n CDF care reprezint filtre
pentru antigenele solubile,
o ajung n jurul zonei periarteriolare (zona cu LB) i se transform n CDID.
Monocitele / macrofagele pot fagocita exo-antigenele ntr-o vacuol numit
endozom primar. Fuziunea endozomilor secundari cu lizozomii permite degradarea
antigenelor n peptide imunogenice. Moleculele MHC II, produse la nivelul reticulului
endoplasmic, pot ncrca aceste peptide. Fago-lizozomii fuzioneaz cu membrana
plasmatic i astfel, peptidul de pe MHC II se exprim la suprafaa extern a
macrofagelor.
Macrofagele reprezint APC majoritare n organism, ns nu toate pot ndeplini
funcia de APC, respectiv:
cele care nu au capacitatea s funcioneze ca APC vor rmne implicate n
rspunsul inflamator, 159
celelalte vor funciona ca APC n cinci etape
1. captarea Ag (proces imunologic nespecific, mediat de receptori);
2. endocitarea Ag captate (realizat doar de ctre macrofagele activate metabolic);
3. prelucrarea Ag native captate (are loc la nivel lizozomal iar la finalul ei, rmne
un epitop, format dintr-o hapten cu specificitate maxim i o protein carrier);
4. conservarea epitopilor n anumite sectoare subcelulare (n acest fel este
asigurat autontreinerea RI n timp);
5. prezentarea epitopilor pe membrana APC, cuplai n permanen cu molecule
MHC. Sistemul MM exprim molecule MHC II, mai ales dup activarea prin
interferonul gamma (IFN-g). Dup contactul cu limfocitul T, macrofagele secret IL-1
i IL-6 i TNF-a; TNF-a activeaz RI i procesul inflamator local.
Limfocitele B pot funciona ca APC profesionale numai n condiii de activare
metabolic. Au capacitatea de a recunoate epitopii conformaionali ai antigenelor
i de a-i prezenta limfocitelor T (de peste 30 de ani a fost dovedit faptul c RI la
antigenele timo-dependente necesit cooperarea LB-LT). Prezint pe suprafaa lor
receptori de tip CR i FcR i pot sintetiza molecule MHC II.
LB recunosc i prezint numai Ag solubile. Exist studii care afirm faptul c LB au o
mai mare eficien n procesul de prezentare al antigenelor n comparaie cu
macrofagele.
LB naive dar mature (nc nu au avut contact cu antigenul, dar au fost maturate n
mduva osoas hematogen) sunt stimulate de antigen. Ag este captat prin
intermediul BCR (receptor pentru antigen de pe LB). LB capteaz antigenul, l
proceseaz, prezint apoi epitopii n complex cu molecule MHC II spre LTh CD4+.
Acesta din urm trimite semnale ctre alte LB prin citokine i molecule de suprafa
iar LB ncep s prolifereze, se transform n limfoblaste B, apoi n plasmocite care
vor secreta anticorpi.
Sistemul mononuclear fagocitar (sistemul MM)
Monocitele / macrofagele reprezint o linie celular cu funcie important n
imunologie, prin intervenia lor n imunitatea natural, n prezentarea antigenic i
n reacia imun specific. Principalele funcii ale sistemului MM sunt reprezentate
de:
recunoaterea structurilor strine (non-self) sau modificate,
fagocitarea, prelucrarea i prezentarea acestora (n context MHC),
citotoxicitate, citostatism,
secreie a diferitelor molecule (ex. IL-1, TNF-) i
reglarea reaciilor n cadrul rspunsului imun.
Macrofagele, alturi de celulele dendritice i celulele epiteliale, formeaz sistemul
reticulo-histiocitar (SRH).
Macrofagele pot fi observate n toate esuturile. Se formeaz n mduva osoas
hematogen, dintr-un precursor comun monoblast-mieloblast i cnd devin mature
poart numele de monocite. n acest stadiu, moleculele MHC II fie nu exist fie sunt
slab exprimate, ca semn al unui status funcional redus (devin foarte bine
reprezentate dup stimulare).
Monocitele circul n snge 6-8 ore, dup care migreaz n esuturi unde iau nume
diferite i ndeplinesc funcii diferite: histiocite n esutul conjunctiv; celule gliale
(microglii) n esutul nervos; osteoclaste; macrofage alveolare pulmonare; celule
Kuppfer n ficat; macrofage 160
splenice; macrofage peritubulare n rinichi; macrofage ganglionare, n mduva
osoas i timus (macrofagele din aceste organe nu trebuie confundate cu celulele
dendritice, care pot avea, la rndul lor, o capacitate fagocitar fa de limfocitele n
apoptoz).
Monocitele / macrofagele prezintreceptori pentru carbohidrai, receptori pentru M-
CSF, receptori pentru imunoglobuline i complement.
n cadrul procesului de recunoatere, fagocitare i prelucrare a structurilor strine
sau a structurilor proprii modificate, spre deosebire de PMN care distrug complet
structurile fagocitate, sistemul MM produce un anumit grad de distrugere, cu
conservarea gruprilor specifice, necesare stimulrii rspunsului imun.
Etapele fagocitozei
1. Migrarea macrofagelor la locul infeciei,
2. Aderarea macrofagelor la celula int,
3. Ingestia celulei int,
4. Formarea fagolizozomului,
5. Inactivarea intracelular a celulei int,
6. Digestia intracelulara a celulei int.
Iat cteva studii interesante legate de funciile macrofagelor i modul n care
acestea interacioneaz cu diferitele microorganisme.
Lipoarabinomananul (LAM) este considerat unul din factorii de virulen ai
Mycobacterium tuberculosis. S-a demonstrat c LAM este incorporat n plutele
lipidice din interiorul membranei macrofagelor prin intermediul glicozil-fosfatidil-
inozitolui ducnd la reducerea maturrii fagozomilor i protejnd astfel celula
fagocitat (6).
Toxina pertusis (TP) produs de Bordetella pertussis este implicat n tusea
convulsiv. S-a studiat interrelaia dintre TP i macrofagele alveolare n cursul
procesului infecios. La un lot de oricei s-au eliminat macrofagele alveolare ceea
ce a condus la intensificarea manifestrilor procesului infecios, cu toate c imediat
s-a produs un influx de neutrofile la locul infeciei. Mai mult dect att, lipsa
macrofagelor a dus la declanarea procesului infecios chiar i cu tulpini care erau
deficitare n sinteza TP (7).
Endocardita poate fi cauzat de streptococii orali. Mecanismul nu este complet
elucidat, dar se pare c monocitele au un rol important. Dei celulele monucleare
din sngele periferic sintetizeaz titruri crescute de IL-12, monocitele tind s
dispar. Acest lucru scoate n eviden 161
faptul c monocitele infectate streptococic se transform n celule dendritice
secretoare de IL-12 i nu n macrofage. Celule sanguine mononucleare periferice de
la subieci sntoi au fost infectate cu ase tulpini de streptococi orali. S-a
observat c monocitele stimulate de aceste antigene exprim fenotipul i funcia
celulelor dendritice (8).
Alte celule implicate n rspunsul imun
Neutrofilele
Sunt cele mai abundente granulocite din circulaia periferic.
Neutrofilele intervin n:
imunitatea natural prin fagocitoz i
imunitatea specific, datorit receptorilor proprii pentru imunoglobuline i
complement, n colaborare cu limfocitele i alte APC.
Principalii factori care atrag PMN la nivelul focarului infecios sunt:
complexele Ag-Ac,
subcomponenta C5a a sistemului complement,
derivaii acidului arahidonic (ex. leucotriena B4).
Dup fagocitare, PMN utilizeaz pentru degradarea structurilor strine diferite
enzime precum: lizozim, proteinaze neutre (ex. elastaze), hidrolaze acide (ex.
glicerofosfataze). Sunt generai i radicali activi de oxigen.
S-a studiat relaia ntre neutrofile i macrofage n cadrul infeciei cu Mycobacterium
tuberculosis. Dup infectarea experimental a cobailor, neutrofilele au fagocitat
microbul i au secretat IL-8 i TNF- (cu rol activator asupra macrofagelor).
Neutrofilele i macrofagele au fost prelevate i cultivate mpreun i separat, apoi
infectate. IL-8 a fost detectat la nivele mult crescute n culturile care conineau
att macrofage ct i neutrofile n comparaie cu situaia n care culturile conineau
separat macrofage, respectiv neutrofile. S-au folosit mai multe tehnici de cultivare
i s-a ajuns la concluzia c i TNF- este la un nivel mai nalt n culturile ce
conineau ambele tipuri de celule. Ulterior, cultura a fost tratat cu anticorpi
policlonali anti TNF- iar rspunsul macrofagelor la stimularea neutrofilelor infectate
a fost complet anulat. Acest studiu demonstreaz c TNF- produs de neutrofilele
infectate ar putea fi responsabil de activarea macrofagelor alveolare (10).
Eozinofilele
Eozinofilele reprezint n mod normal ntre 1% i 3-5% din leucocitele sanguine.
Procentul eozinofilelor crete n alergii sau n infeciile parazitare.
Funcia lor fagocitar, prin receptorii de IgG i IgE i mecanismul ADCC, este relativ
limitat. Totui, eozinofilele pot fagocita fungi, complexe Ag-Ac, bacterii. Granulele
lor conin produi toxici pentru diferii parazii. 162
Pe de alt parte, eozinofilele produc histaminaz i arilsulfataz care inactiveaz
histamina i respectiv leucotrienele produse de mastocite. Prin aceti factori se
reduce rspunsul inflamator i migrarea leucocitelor n focarul infecios.
Mai multe studii au demonstrat rolul eozinofilelor n cadrul imunitii nnscute i
adaptative ndreptate mpotriva infeciilor cu parazii. Nu a fost dovedit c
eozinofilele ar iniia rspunsul imun fa de parazii. Plecnd de la ipoteza c
eozinofilele ar putea fi celule prezentatoare de antigen n infeciile parazitare,
eozinofilele au fost expuse la un anumit parazit i s-a examinat expresia diferiilor
markeri de suprafa implicai n activarea celular. S-a remarcat o cretere de 6 ori
a CD69 i MHC II, de 4 ori a CD86 (molecula costimulatoare pentru LT). Abilitatea
eozinofilelor de a prezenta antigenul a fost explorat i prin cultivarea lor mpreun
cu LTCD4+. Eozinofilele au avut capacitatea de a transforma LT naive n LTh2
productoare de IL-5 (11).
Bazofilele i mastocitele
Conin granule metacromatice i receptori pentru IgE. Au rol n reacia de
hipersensibilitate mediat umoral (tip I). Principalul mediator n declanarea HS de
tip I este histamina.
Ambele sunt implicate n aprarea anti-parazitar.
Mastocitele nu se gsesc n cantitate mare n snge, dar sunt ntlnite la nivelul
esuturilor conjunctive n apropierea vaselor sanguine i limfatice, aproape de sau n
interiorul nervilor i sub epiteliile organelor care vin n contact cu mediul extern
(plmn, intestin, piele).
Bazofilele se difereniaz i matureaz n mduva osoas hematogen, apoi circul
prin snge. Att bazofilele ct i mastocitele secret citokine dar spre deosebire de
mastocite, bazofilele secret i IL-4. A fost studiat un eventual rol n diferenierea
limfocitelor helper spre linia Th2 (proces care necesit IL-4).
Plachetele
Plachetele au un rol accesoriu n reacia imun. Ele conin serotonin i exprim
receptori pentru IgG i IgE. Plachetele ader la endoteliul vascular, se agreg i
elibereaz substane care cresc permeabilitatea capilar i activeaz sistemul
complement. Datorit Ig fixate pe membrana lor, plachetele pot adera la parazii i
pot elibera radicali liberi ai oxigenului cu efect toxic pentru acetia.
Globulele roii
Alturi de rolul principal de a transporta oxigenul la esuturi i bioxidul de carbon la
plmni, globulele roii dein receptori pentru sistemul complement, faciliteaz
transportul complexelor imune din snge la celulele Kuppfer din ficat, prin fixarea
lor pe receptorii pentru complement.
Complementul, un complex multienzimatic format din circa 30 de componente,
reprezint unul dintre principalii constitueni ai aprrii naturale, ai imunitii
umorale i respectiv un element important al reaciei imune survenite ca urmare a
formrii complexelor antigen-anticorp (are rol esenial n rspunsul inflamator).
Sistemul complement (C') reprezint o component normal a serului.
Sistemul complement are o serie de funcii importante: aprarea nespecific
mpotriva infeciei (liza virusurilor, liza bacteriilor, liza celulelor strine, favorizarea
prin opsonizare a fagocitozei, chemotactism pentru PMN i sistemul MM etc);
eliminarea complexelor imune i a celulelor apoptotice; reglarea fiziologic a RI, dar
particip i la creterea permeabilitii capilarelor, stimularea contractilitii
musculaturii netede etc. n cele mai multe mprejurri, sistemul complement are
efecte benefice; totui sunt de menionat i unele efecte negative (ex. particip la
reaciile anafilactice, este implicat n hipersensibilitatea citolitic-citotoxic etc).
Sistemul complement cuprinde circa 30 de componente celulare sau
plasmatice. Componentele sale suntsintetizate de hepatocite, macrofage,
celule epiteliale intestinale etc. Substanele activatoare reprezint 5% din suma
proteinelor serice (circa 3 g/l); componenta C3 este componenta care se gsete n
cantitatea cea mai mare (circa 1,3 g/l). (Tabelul nr. 1)
Sistemul C' se poate activa pe trei ci, respectiv calea clasic, calea
lectinic i calea altern.
Activarea pe calea clasic este declanat n primul rnd de formarea complexelor
imune (Ag-Ac), dar i de apariia celulelor apoptotice, anumite virusuri sau de
proteina C reactiv cuplat cu anumii liganzi (Figura nr. 1).
Calea lectinic poate fi activat de lectina care leag manoza de pe suprafaa
bacteriilor (MBL, Mannan-Binding Lectin), dar i de alte proteine asemntoare.
Lectinele sunt proteine sau glicoproteine ce nu au origine imun i prezint cel
puin dou situsuri identice de legare specific a unor structuri glucidice;
MBL este o protein din clasa colectinelor, avnd domenii lectinice prin care se
ataaz glucidelor i un domeniu colagen-like. MBL se gsete n cantitate mic n
serul indivizilor sntoi, ns n cazul infeciilor acute, concentraia acesteia crete
semnificativ. S-a constatat c persoanele care au deficit de
Calea altern poate fi activat de bacterii, fungi, virusuri, parazii, venin de viper,
produi de coagulare, celule tumorale etc. 197
Calea clasic i calea altern (alternativ) converg ctre C3, apoi urmeaz o cale
efectoare comun, implicnd ultimele componente ale sistemului complement
(Figura nr. 3). n fiecare dintre etape, intervin proteine activatoare, inhibitoare sau
reglatoare precum i receptorii pentru complement. Aceste elemente se gsesc fie
n plasm fie la nivelul peretelui celulelor autologe sau omologe.
n mod curent, sistemul complement este desemnat prin litera C. Pentru fiecare
component studiat i bine delimitat n cadrul cascadei de activare se adaug o
cifr, de la C1 la C9, care este eventual urmat de o liter (care reprezint o
anumit subdiviziune; spre exemplu, pentru C1 exist C1q, C1r i respectiv C1s).
Ca urmare a activrii sistemului C', unele componente (C4, C2, C3, C5), sunt
fragmentate, aceste fragmente fiind desemnate printr-o liter ataat componentei
iniiale (exemplu C3a i C3b). n general componenta b este de dimensiuni mai mari
(excepie C2a, fragment nglobat ntr-un complex proteolitic i care are dimensiuni
mai mari dect C2b) i se fixeaz la nivelul structurii int, n timp ce componenta a
este mai mic, este solubil i posed o activitate anafilactoid sau chimiotactic.
Anafilatoxinele sunt polipeptide mici, eliberate n cursul cascadei de activare a
complementului, care prezint receptori pe mastocite, monocite, macrofage,
neutrofile, trombocite i au efect proinflamator. Cea mai puternic dintre
anafilatoxine este C5a. Aciunile anafilatoxinelor sunt de tipul:
contracie a musculaturii netede,
cretere a permeabilitii vasculare,
degranulare bazofilic i mastocitar,
chemotactismul i activarea granulocitelor care vor conduce la eliberarea
enzimelor litice i a radicalilor liberi.
15. 1. Calea clasic
Activarea sistemului complement
Componentele C' se gsesc n ser, n stare inactiv. Pentru a declana activarea lor
este necesar un stimul. Pentru calea clasic, punctul de pornire este reprezentat de
ctre complexele antigen-anticorp (Figura nr. 1), unde anticorpii sunt de tip IgM
(domeniul CH4) sau de tip IgG (domeniul CH2) corespunznd subclaselor IgGl, IgG2
sau IgG3. Complementul poate fi activat de o singur molecul de IgM sau de ctre
dou molecule de IgG apropiate una de alta. Activarea este posibil i n cazul unor
molecule de IgG agregate.
n mod asemntor, calea clasic poate fi activat i de ctre unele microorganisme
sau diferite substane chimice: bacterii Gram-negative (Salmonella spp., E. coli,
Neisseria spp.), retrovirusuri, glicoproteina anvelopei HIV, complexe heparin-
protamin etc.
n cursul activrii intervin urmtoarele proteine: 198
C1. n sngele circulant exist un complex plurimolecular ce conine o molecul de
C1q (molecul ce aparine familiei colectinelor, precum MBL), dou molecule de C1r
i dou molecule de C1s, situate n jurul ionilor de calciu i asociate inhibitorului C1,
denumit C1inh. La persoanele cu deficit congenital de C1 inh, complementul se
activeaz cronic n mod spontan, provocnd episoade severe i recurente de edem
edem angioneurotic.
Compusul C1q, cu o greutate molecular de 400.000 Da, a fost comparat cu un
buchet de 6 lalele. Fiecare floare este la rndul su compus din 3 lanuri de
proteine alipite i terminate n mod globular. Fixarea C1q prin mai puin de dou
pri globulare periferice pe fragmentele Fc ale imunoglobulinelor permite activarea
sa cu eliberarea C1inh din complexul plurimolecular. Acest fenomen antreneaz pe
de alt parte autoactivarea moleculelor C1r i C1s. Componenta C1s are o activitate
serinesterazic, prin care poate s cliveze urmtoarele 2 componente: C4 i C2.
C4 este fragmentat n C4a, molecul mic, cu activitate anafilactoid i respectiv
C4b, de dimensiuni mai mari, care se leag printr-o legtur covalent fie de
fragmentul Fab al anticorpului fie la nivelul peretelui bacterian sau la nivelul unor
celule (strine, proprii modificate, infectate etc). Ansamblul formeaz complexul C1-
C4b, notat pe scurt C14b.
C2. Aceeai esteraz (C1s) mpreun cu fragmentul C4b, cliveaz o molecul de C2
n C2b (o molecul mic, cu activitate de tip kinin) i n C2a (molecula de
dimensiune mai mare, care se leag de structura int). Ansamblul necesit
prezena Mg2+ i formeaz C3 convertaza cii clasice sau C4b2a. n acest moment,
anticorpii i respectiv componenta C1 pot s se detaeze de structura int, iar
procesul poate continua.
C3 este clivat n C3a i C3b de ctre C4b2a. C3a este o molecul mai mic i are,
n mod primordial, o activitate anafilactoid i chimiotactic, n timp ce
subcomponenta C3b se fixeaz pe structura int datorit unei puni realizate ntre
un radical tioester i o grupare (-OH) sau (-NH2) de pe suprafaa celular
acceptoare. Pe de alt parte, C3b poate fi inactivat de factorul I (rezultnd C3bi), iar
apoi clivat ntr-o molecul mare C3c (liber) i o molecul C3dg restant pe
structura int, care poate apoi s se transforme n C3d. C3b format permite
constituirea C5 convertazei (C4b2a-C3b) pe calea clasic. (Figura nr. 1)
Calea clasic de activare a complementului poate fi amplificat foarte mult. Fiecare
complex antigen-anticorp leag o molecul de C1, iar C1s n stare activ cliveaz
pn la 100 molecule de C4. Din acestea, doar 20 de fragmente C4b se ataaz
complexelor antigen-anticorp. C3 convertaza cii clasice cliveaz mii de molecule
de C3. Aceste lucru dovedete imensa capacitate de amplificare a acestui lan de
reacii biochimice.
15. 2. Calea altern i calea de amplificare
Calea altern constituie una dintre primele linii de aprare a organismului fa de un
agent patogen, naintea constituirii rspunsului imun. 199
Aceast cale poate fi activat de ctre diferite microorganisme, de componente ale
acestora, de numeroase substane neimune, spre exemplu:
bacterii Gram-pozitive (ex. Streptococcus pneumoniae) sau Gram-negative,
virusuri (dar i celule infectate sau transformate de ctre virusuri), fungi (ex.
Candida albicans), parazii (ex. Schistosoma mansoni, Trypanosoma cruzi),
endotoxine bacteriene,
alte substane (insulin, hemoglobin, zymosan, fibre de azbest, gluten, prafuri,
unele substane de contrast utilizate n radiologie, venin de viper sau veninul altor
erpi etc.).
Calea altern poate fi activat de complexele imune care cuprind IgG sau IgA.
Printre componentele cii alterne se numr:
C3. n plasm, prin proteoliza spontan a C3, sunt formate n permanen mici
cantiti de C3b. Moleculele de C3b se fixeaz de suprafeele acceptoare, n
particular de peretele microorganismelor sau de celulele infectate i alterate.
Cteva bacterii, a cror structur este bogat n acid sialic, pot evita aciunea
sistemului complement. La rndul su, C3b acioneaz asupra factorului B.
Factorul B. Element al cii de amplificare, factorul B este clivat n Ba i Bb.
Complexul C3bBb, format n prezena ionilor de Mg2+, constituie C3-convertaza
alternativ, care cliveaz noile molecule de C3 n C3b. Acest clivaj accelerat de C3,
d natere C5-convertazei (C3bBb)n.
Factorul D, factor prezent sub form activ n ser nainte de activarea C, cliveaz
factorul B, ceea ce faciliteaz formarea complexului C3bBb.
Ansamblul factorilor activatori ai cii clasice i alternative realizeaz o bucl de
amplificare, care permite transformarea numeroaselor molecule de C3 n C3b astfel
nct C3b s acopere (opsonizeze) peretele bacterian. (Figura nr. 2)
15. 3. Calea final comun
Calea final comun mai este numit i calea efectoare sau calea litic. Activarea
ncepe de la C5-convertaza cii clasice (C4b2a-C3b)n i respectiv de la (C3bBb)n n
cadrul cii alternative.
Activarea cuprinde de fapt complexul de atac al membranei (Membrane Attack
Complex), MAC):
C5. Convertazele-C5 pentru calea clasic i respectiv pentru calea altern cliveaz
C5 n C5a, molecula mic, liber i C5b, molecula mare care se fixeaz pe structura
int. Att C5a, ct i molecula care rezult n urma transformrii sale n C5-
dezarginin, acioneaz la nivelul receptorului C5a-R al mastocitelor i bazofilelor.
C6, C7, C8. C5b antreneaz legtura dintre C6 i C7, formnd un complex C5b67
notat prescurtat C5b7. Complexele C5b7 se leag de o molecul de C8 care se
implanteaz n membran apoi mai multe molecule de C9 vor forma un complex
membranar C5b9m. 200
C9. Aceast protein are dou proprieti: 1. de a se insera la nivel membranar,
graie unei fee hidrofobe; 2. de a polimeriza, formnd astfel peretele unei soluii de
continuitate de circa 10 nm n diametru la nivelul membranelor celulelor int
(limfocitul T utilizeaz o substan numit perforin, cu efect asemntor cu cel
produs de C9). Formarea sau fixarea complexului C5b9 n cantiti sublitice la
suprafaa celulelor antreneaz sinteza i eliberarea mediatorilor inflamaiei
(leucotriene, IL-1 etc). (Figura nr. 3)
Exist o serie de mecanisme de reglare a activitii sistemului complement, acestea
fiind mediate de proteine reglatoare care intervin la un moment dat n cursul
cascadei de activare, avnd capacitatea de a o limita sau chiar opri. (Tabelul nr. 2)
n general, aceste proteine inhib formarea C3 convertazei sau promoveaz
disocierea ei (cnd aceasta deja s-a format). Decay Accelerating Factor (DAF)
Factorul de accelerare a disocierii C3 convertazei este o protein care poate
dezactiva C3 convertaza cii clasice, dar are i rolul de a inhiba formarea ei,
nepermind elementelor C2a i C4b s interacioneze. mpreun cu CR1
(complement receptor 1), DAF competiioneaz cu factorul B la legarea de
C3b, prevenind astfel constituirea C3 convertazei cii alterne. Acest complex DAF-
CR1 poate s disloce Bb din compusul C3bBb, disociind C3 convertaza cii alterne.
Factorul H are aciune similar.
15. 4. Receptorii pentru complement (CR)
Cei mai importani receptori recunosc C3b sau derivaii si C3bi i C3d.
CR1 (CD35) sau receptorul pentru C3b
CR1 sau receptorul pentru C3b i C4b este prezent pe hematii, trombocite,
neutrofile, eozinofile, monocite i macrofage, limfocite B i T4 precum i la nivelul
podocitelor glomerulare. Acest receptor permite transportul complexelor imune prin
intermediul globulelor roii spre macrofagele hepatice sau celulele Kuppfer.
15. 5. Rolul biologic al sistemului complement
Sistemul complement prezint numeroase activiti biologice:
15. 5. 1. n inflamaie sunt implicai diferii compui solubili de talie mic. C3a i
C4a au o mas molecular apropiat de 10.000 Da i sunt numite anafilatoxine. Ele
pot s se fixeze pe bazofile i pe mastocite atrgnd eliberarea de histamin
precum i vasodilataie, unul dintre primele elemente ale rspunsului inflamator.
C2b (kinina-C2) este capabil s creasc permeabilitatea vascular. C5a posed o
activitate chimiotactic pozitiv fa de neutrofile i conduce la agregarea
polinuclearelor, n urma activrii complementului. Complexul C5b7 fixat pe
membrane sau pe complexele imune are de asemenea aciune chimiotactic pentru
polinucleare.
15. 5. 2. n aprarea anti-infecioas. Agenii infecioi extracelulari pot fi
acoperii de componente ale sistemului complement fie n urma activrii directe
(calea alternativ activnd direct C3), fie prin intermediul anticorpilor care fixeaz
complementul. n final, complexele de 202
atac ale membranei (componentele C5-C9) lizeaz diferite microorganisme: bacterii,
virusuri sau parazii. Aceasta reprezint o activitate citolitic direct a
complementului cu sau fr prezena anticorpilor.
Prin mecanisme asemntoare, agenii infecioi pot fi acoperii de C3b sau C3bi
care sunt recunoscui de diferii receptori, prezeni la nivelul diferitelor celule
fagocitare eseniale: neutrofile i macrofage. Dup aderare, acestea vor fagocita
microorganismele. Diferite microorganisme au dezvoltat mecanisme de rezisten la
aciunea complementului: ex. prezena unei capsule care mpiedic activarea cii
alternative (S. pneumoniae, Haemophilus influenzae), sintetizarea unor substane
care fixeaz C3b sau antreneaz o rezisten la inseria complexului de atac al
membranei.
15. 5. 3. n metabolismul complexelor imune. Curarea (clearance-ul)
complexelor imune este facilitat n mare msur de ctre sistemul complement.
Simpla fixare a complementului inhib formarea complexelor imune de talie mare
(calea clasic) i le solubilizeaz. Totui complexele circulante acoperite de C3b pot
adera la hematii, iar apoi pot fi transportate pn la nivelul celulelor Kuppfer
hepatice, pentru a fi fagocitate. C1q are proprietatea de a precipita complexele
imune in vitro. Aceast proprietate st la baza diverselor metode de detectare a
complexelor imune circulante.
15. 5. 4. n reglarea rspunsului imun.Pe limfocitele B se gsesc receptori pentru
C3d sau C3dg (CR2).
15. 5. 5. n inducerea secreiei de citokine de ctre monocite i macrofage prin
intermediul receptorilor C3. (5)
Citokinele (Interleukinele) sunt substane proteice, solubile, cu greutate
molecular mic, 8-70 kDa. cel mai frecvent sunt sintetizate de ctre celule dup
activare prealabil, acionnd ca mediatori asupra altor celule sau asupra lor nsi,
n cantiti foarte mici, de ordinul pico sau nanogramelor. n momentul de fa au
fost identificate peste 100 de molecule diferite de citokine. O parte dintre citokine
au n special efecte chemotactice i din acest motiv au fost numite chemokine.
Termenii de limfokine (substane sintetizate de limfocite) sau de monokine
(provenind din monocite) nu se mai folosesc deoarece citokinele sunt sintetizate de
o gam mult mai larg de celule. Termenul de interleukine, care indic o aciune
ntre dou leucocite, a persistat i continu s persiste n denumirea prescurtat, de
la IL-1 la IL-35.
Termenul de citokine pare s fie cel mai adecvat. n unele cazuri, denumirea provine
de la una din activitile care au permis descoperirea citokinei: TNF (tumor necrosis
factor), IFN (interferon), GM-CSF (granulocyte/monocyte-colony stimulating factor),
G-CSF (granulocyte-CSF), M-CSF (monocyte-CSF), TGF (transforming growth factor).
n afara sistemului imun i hematopoietic au fost descoperii i ali factori de
cretere: NGF (nerve growth factor), FGF (fibroblast growth factor), EGF (epithelial
growth factor) etc.
Citokinele acioneaz datorit prezenei receptorilor specifici, desemnai prin
denumirea lor englez: IL-1R, IL-2R, TNF-R etc. Ei sunt prezeni uneori pe aceeai
celul care a sintetizat citokina (efect autocrin) sau pe alte celule (efect exocrin). O
clasificare atotcuprinztoare a citokinelor este foarte dificil, din punct de vedere
funcional, pentru motivele prezentate (i care reprezint un punct din cutia
Pandorei la care se face uneori referire, atunci cnd sunt luate n discuie aceste
structuri). Din punct de vedere didactic (i funcional), vom ncerca s prezentm n
continuare o grupare a celor mai cunoscute dintre citokine.
13. 2. 1. Citokine pro-inflamatorii
n cadrul procesului infecios, diferitele microorganisme care au sau dobndesc prin
variabilitate un efect de agresiune fa de organismul gazd, antreneaz un rspuns
la nivelul endoteliului vascular; una dintre primele reacii este reprezentat de
mobilizarea leucocitelor polimorfonucleare neutrofile (PMN). n aceast etap
intervin i o serie de citokine.
TNF- i TNF-
TNF- este produs de monocite / macrofage dar i de diverse alte celule (limfocite T,
limfocite B, celule NK, fibroblaste, mastocite, bazofile, celule gliale etc), ca reacie la
contactul cu diferite bacterii sau lipopolizaharidele din peretele germenilor Gram-
negativi. Sursa cea mai important pentru TNF- rmne ns sistemul monocito-
macrofagic. TNF- favorizeaz expresia moleculelor de adeziune la nivelul
endoteliului vascular i al monocitelor; atrage ctre sediul procesului infecios alte
monocite i leucocitele PMN. Are o activitate anti-viral, anti-parazitar i anti-
tumoral. Stimuleaz lipoliza, glicoliza muscular i reabsorbia osoas prin care
poate antrena apariia caexiei (TNF a fost numit iniial caexin). Induce formarea
altor mediatori ai inflamaiei (leucotriene, PAF). Formarea sa este la rndul su
indus de IFN, IL-1, factori de cretere sintetizai de monocit, endotoxinele
bacteriilor Gram-negative, diferite virusuri, bacterii, unele componente ale
sistemului complement, leucotriene i prostaglandine. Eliberarea TNF- este
inhibat de glucocorticoizi, 2-macroglobuline, 2-antitripsin etc. TNF- 177
este sintetizat de LT activate i celule NK i are aciuni identice cu TNF-, acionnd
pe acelai tip de receptori. n momentul de fa este clasificat ntre limfotoxine (LT-
).
IL-1 i IL-6
Sunt dou citokine cu rol asemntor. Sunt produse de numeroase celule: monocite,
macrofage, LT, LB, celule endoteliale vasculare, keratinocite (din piele), astrocite i
celule gliale (din creier) etc.
IL-1 se gsete sub dou forme: IL-1a fixat la membran i IL-1 secretat.
Experimental a fost demonstrat c stimularea cu orice structur microbian a
celulelor care n mod potenial sintetizeaz IL-1 va duce la sinteza acestor molecule
(IL-1a i IL-1). Ele sunt codificate de gene diferite dar recunosc aceeai receptori:
primul receptor IL-1R1 induce transducia informaiei la nivel celular, n timp ce IL-
1R2 nu induce un semnal celular. IL-1 are funcie imunologic, activnd la nivel
superior LTh, care se vor divide mitotic i se vor diferenia n diverse clase. IL-1,
eliberat n spaiul extracelular i n snge, exercit o puternic aciune
proinflamatorie.
Celulele care sintetizeaz IL-1 produc cteva ore mai trziu un antagonist al
receptorului de IL-1, numit IL-1Ra, care face ca aciunea IL-1 s fie tranzitorie. IL-1
induce creterea expresiei moleculelor de adeziune; activeaz limfocitele T i B;
crete sinteza proteinelor de faz acut la nivel hepatic; crete catabolismul
celulelor musculare i al osteoclastelor (rezorbie osoas); activeaz sistemul nervos
central cu febr, anorexie i insomnie. Fiind i prima interleukin numit ca atare,
IL-1 a fost considerat iniial drept o molecul piretogen. Inocularea de IL-1 la
subieci umani conduce la apariia febrei i frisonului. Concentraia de IL-1 din
plasm poate s creasc i n condiii fiziologice (ex. n stres nepatologic, exces de
vitamin A, n timpul menstruaiei).
IL-6 are o aciune att asupra sistemului imun ct i asupra unor celule care nu
aparin acestuia, asemntoare cu aceea a Il-1, cu o singur diferen: ea
acioneaz mai ales pe maturaia terminal a LB n plasmocite i pe diferenierea LT
citotoxice. Ca i IL-1, produce proteoliz endogen, induce sinteza proteinelor
inflamatorii la nivel hepatic (fibrinogen, haptoglobin, 1-antitripsin, protein C
reactiv etc) i activeaz sistemul nervos central conducnd la apariia febrei,
anorexiei, somnolenei etc. IL-6 induce sinteza de imunoglobuline; are i rol n
maturarea celulelor pe linia megakariocitar. Sinteza IL-6 este stimulat de IL-1.
Limfotoxinele
Limfotoxina (LTx) a fost identificat n urma efectului citotoxic exercitat de
limfocitele activate, ulterior a fost sintetizat i caracterizat, dar s-a dovedit c nu
exist un singur factor de acest tip, ci o serie de substane care ar putea fi grupate
ntr-o superfamilie. Iniial LT-, o limfotoxin solubil, a fost definit drept factor
de necroz tumoral (TNF-). Dintre numeroii membri ai superfamiliei
limfotoxinelor menionm LT- i LT-, sintetizate n special de LT i LB activate, dar
i de ctre celulele NK sau celule LAK (lymphokine activated killer cells). Au rol n
etapele de iniiere a inflamaiei i se pare c au un rol n realizarea unei protecii
fa de agresiunea microbian.
IFN-g
Dintre efectele pro-inflamatorii ale IFN- amintim activarea macrofagelor (acest
interferon este probabil cea mai important substan care produce trecerea
macrofagelor de la o stare n ateptare la starea activ, bactericid) i astfel
intervine n fazele iniiale ale inflamaiei dar i n 178
diferenierea clonelor de limfocite care reacioneaz fa de structurile bacteriene
agresoare (Figura nr. 7). Alte efecte vor fi prezentate n urmtoarele subpuncte.
IL-10
Acioneaz att asupra celulelor hematopoietice ct i asupra altor celule. Dac
iniial s-a considerat c are efecte pro-inflamatorii, n momentul de fa se cunoate
faptul c, prin efectele inhibitorii asupra monocitelor, neutrofilelor, celulelor
dendritice, este de fapt o interleukin cu efect anti-inflamator. A fost numit i
factor de inhibare al macrofagelor.
IL-11
Sinteza IL-11 poate avea loc la nivelul fibroblastelor, condrocitelor, sinoviocitelor,
keratinocitelor, celulelor endoteliale, celulelor epiteliale etc. Administrarea de IL-11
stimuleaz sinteza unor reactani de faz acut, la fel ca i IL-6. Totui, efectul
esenial al IL-11 se adreseaz creterii trombocitare. Are i efecte anti-inflamatorii la
nivelul adipocitelor i osteoclastelor. Relativ recent, a fost avizat utilizarea IL-11 n
tratamentul asociat chimioterapiei din cancer, pentru a preveni apariia unei
trombocitopenii severe la pacienii care primesc medicaie citotoxic, anti-tumoral.
IL-12
Cunoscut drept o substan care induce sinteza de IFN-, IL-12 are i alte efecte de
stimulare a rspunsului inflamator al gazdei, n urma unui proces infecios. Sursa
cea mai important de IL-12 este reprezentat de celulele dendritice.
HMGB1 (high mobility group box chromosomal protein 1)
Iniial a fost caracterizat ca o protein non-histonic cu rol n arhitectura
cromozomilor. S-a demonstrat c aceast citokin cu totul particular are rol pro-
inflamator, fiind eliberat din celulele necrotice (i doar n mic msur de cele
apoptotice), jucnd rol de DAMP (Damage Associated Molecular Pattern) dar i
secretat activ de macrofage stimulate. Receptorul membranar specific, numit
RAGE (Receptor for Advanced Glycation End-products) mediaz efectele sale.
Aceast protein are un rol patogenic important n sepsis i medierea efectelor de
faz trzie ale LPZ-ului. Astfel, s-a demonstrat experimental, la animale, c
mortalitatea n sepsis a fost redus prin administrarea pasiv de anticorpi anti-
HMGB1.
13. 2. 2. Citokine cu aciune anti-viral i anti-proliferativ
n aceast categorie sunt cuprinse mai multe interleukine.
Spre exemplu interferonul a i . IFN-a este produs de monocite i celulele
hematopoietice iar IFN- este produs de alte celule de tipul fibroblatilor i al
celulelor endoteliale. Cele dou citokine prezint aciune anti-viral i anti-
proliferativ; stimuleaz celulele NK; cresc expresia moleculelor MHC I; activeaz
producia de IL-2 de ctre monocite/macrofage i celule dendritice; induc sinteza de
IFN-g, cu aciune anti-viral i anti-proliferativ.
IL-2, cu efect autocrin i paracrin, a fost prima interleukin utilizat n terapia
cancerului (administrarea pe cale intravenoas a fost asociat, din nefericire, cu
efecte toxice severe; datorit acestor efecte, dar i descoperirii unor efecte similare
prin administrarea altor molecule n alte situaii clinice, n momentul de fa a intrat
ntre noiunile medicale clasice i definirea sindromului de toxicitate al
citokinelor). Mai recent, se ncearc administrarea IL-2 la pacienii cu infecie HIV /
SIDA, n sperana c efectele proliferative asupra LT CD4+ vor mbunti istoria
natural a bolii. O analiz recent a datelor din dou mari studii clinice a artat un
efect neutru al terapiei. (1)
Prin potenarea activitii citotoxice a LT i a celulelor LAK, IL-12 ar putea avea
utilitate clinic n inhibarea procesului infecios determinat de virusuri dar i n
diferite forme de neoplazii.
IL-18 are sau induce efecte mpotriva virusului Epstein-Barr, virusului gripal,
virusului herpes simplex etc dar are i efecte anti-tumorale. 180
13. 2. 3. Citokine activatoare ale rspunsului imun celular
Citokinele cu rol n rspunsul imun celular au ca surs de provenien limfocitele
Th1. n aceast categorie sunt incluse urmtoarele citokine.
IL-2 este produs n special de LT CD4+ de tip Th0 i Th1 (cu rol n RIP de tip
celular) activate i ntr-o mai mic msur de celulele NK i de celulele dendritice. i
LT Th2 (cu rol n RIP de tip umoral) pot sintetiza IL-2. IL-2 acioneaz asupra
diferitelor celule cu rol n imunitate [asupra limfocitelor T acioneaz printr-un
mecanism autocrin, antrennd proliferarea i activarea spre subsetul Th1 dar i
Th2; transform celulele Nk n celule LAK (lymphokine activated killer cells);
antreneaz proliferarea limfocitelor B]. Acioneaz sinergic cu IL-12 i IFN-
stimulnd activitatea citotoxic a celulelor NK. IL-2 a fost prima dintre interleukine
care a fost caracterizat pn la nivel structural. Este o interleukin cu 133
aminoacizi, o greutate molecular de 15,5 kDa; gena care codific sinteza de IL-2 se
gsete pe cromozomul 4.
IFN-g este produs de limfocitele Th1; sursa esenial pentru aceast interleukin
este reprezentat de celulele NK. Rolul principal al IFN-g este activarea
macrofagelor, cu producerea speciilor reactive ale oxigenului i NO, cu efect
bactericid asupra microorganismelor intracelulare. Prin aciunea sa anti-Th2, reduce
rspunsul imun umoral. IFN- controleaz funcii imune implicate n aprarea
antibacterian, antiviral i antiparazitar.
13. 2. 4. Citokine activatoare ale rspunsului imun umoral
Aceste citokine sintetizate de ex. de ctre limfocitele Th2 i unele mastocite,
orienteaz rspunsul imun umoral spre diferitele clase i subclase de
imunoglobuline.
IL-4 acioneaz n etapa iniial a rspunsului imun umoral, permind trecerea LB
din stadiul G0 la stadiul G1. Stimuleaz producerea i maturarea intramedular a
LB. Aciunea sa este ntrit de IL-1. De asemenea, stimuleaz producerea de IgG,
specific RIU secundar i blocheaz producerea de IgM, specific RIU primar.
Mecanismul are loc la nivel de genom i se numete izotipic switch (comutare
izotipic) (Figura nr. 8). Citokina este totodat un factor de cretere pentru bazofile
i mastocite. Are de asemenea rol n hematopoiez. Acioneaz sinergic cu IL-3 n
cursul diferenierii mastocitelor i limfocitelor. Dac exist o sintez crescut peste
normal a IL-4 de ctre LT Th2, se nregistreaz o cretere semnificativ a sintezei de
IgE iar din punct de vedere clinic apariia manifestrilor hipersensibiliti de tip
umoral (tip I).
IL-5 stimuleaz RIU la nivelul mucoaselor. Intr n aciune mai trziu, alturi de IL-
2, permind multiplicarea LB. IL-5 are rol de factor de cretere pentru leucocitele
polimorfonucleare eozinofile dar are efecte stimulatoare i asupra bazofilelor. La fel
ca i IL-4 i IL-5, are rol hematopoietic. Stimuleaz sinteza de Ig A de ctre
limfocitele B. Datorit efectelor menionate, un tratament novator al afeciunilor
datorate hipersensibilitii de tip I ar putea s se adreseze tocmai IL-5
(medicamente anti- alergice care s aib drept int molecula IL-5).
Printre numeroasele sale activiti, IL-6 este o citokin proinflamatorie, cu aciune
tardiv n procesul de maturaie a imunoblastelor n plasmocite. 181
IL-10 induce diferenierea iniial a liniei de celule B. IL-10 inhib citokinele
proinflamatorii i sinteza de IFN-g, comportndu-se ca o citokin reglatorie negativ
pe subsetul Th1. Are de asemenea i rol stimulator, n cazul maturrii mastocitelor,
n cazul aprrii antivirale i antitumorale, precum i rol chemoatractant pentru
limfocitele T (CD8+).

Definiia vaccinurilor
Pornind de la observaiile i experimentele lui Edward Jenner, Louis Pasteur a
fundamentat tiinific vaccinurile alctuite din corpi microbieni. Gaston Ramon a pus
la punct metodele de neutralizare a toxinelor i a identificat utilizarea lor ca
anatoxine.
Vaccinul este 1. o suspensie de microorganisme (bacterii, virusuri) vii atenuate sau
inactivate sau 2. cuprinde fraciuni din microorganisme (subuniti), n vederea
stimulrii mecanismelor de rspuns imun, de regul pentru prevenirea apariiei unor
infecii. 229
Vaccinarea este definit drept o metod profilactic, care urmrete creterea
rezistenei specifice a unei gazde, printr-o imunizare activ, cu stimularea
rspunsului umoral sau celular, dup caz. De fapt, vaccinrile incluse n programele
naionale de vaccinare (conform recomandrilor Organizaiei Mondiale a Sntii,
OMS) reprezint metodele profilactice cu cel mai bun raport ntre cost i eficien, n
comparaie cu orice alt metod cunoscut.
Strategiile de vaccinare au n vedere mai multe aspecte, inclusiv statusul imun al
gazdei respective (imunocompetent sau imunodeprimat).
Unele vaccinuri se pot administra i n timpul unei izbucniri epidemice (outbreak)
sau a unei epidemii, pentru prevenirea apariiei de cazuri noi i scurtarea duratei
epidemiei.
Exist i posibilitatea administrrii unor vaccinuri n scop curativ, gazda fiind deja
infectat n momentul inoculrii (ex. vaccin HBV la persoanele cu hepatit cronic,
cu HBV).
17. 7. Clasificarea vaccinurilor
n funcie de infecia care se dorete a fi prevenit, vaccinurile pot fi bacteriene sau
virale.
n funcie de modul de preparare exist:
Vaccinuri corpusculare (bacteriene, virale), incluznd, dup caz, corpi vii
atenuai sau distrui (inactivai) prin aciunea unor factori fizici (ex. cldur) sau
chimici (ex. mertiolat de sodiu). Vaccinul BCG conine bacterii vii atenuate,
stimuleaz RIC i se administreaz pentru a preveni tuberculoza. Vaccinurile
poliomielitic (Salk) sau hepatitic A includ virusuri omorte. Vaccinurile poliomielitic
(Sabin), rujeolos, rubeolos conin virusuri vii, atenuate i stimuleaz RIU i rspunsul
imun la poarta de intrare.
Vaccinurile subunitare, preparate prin inginerie genetic, au un grad superior
de siguran (vaccin hepatitic B, vaccin pertussis acelular).
Vaccinurile care conin anatoxine bacteriene, purificate i adsorbite pe suport
mineral (DTP conine anatoxin tetanic i difteric plus corpi de Bordetella
pertussis omori, DT, dT, ADPA, ATPA/VTA).
n funcie de numrul componentelor antigenice exist:
Vaccinuri monovalente (rujeolos/VVR, rubeolos, hepatitic A, hepatitic B,
pertussis acelular, BCG etc),
Vaccinuri asociate, care conin amestecuri de antigene (DTP, DT, dT, rujeolos-
rubeolos etc).
Date privind schema de vaccinare aflat n uz n ara noastr la acest moment,
precum i cteva informaii privind substanele imuno-modulatoare (ex. Cantastim)
sunt prezentate n anexa nr. 4.

Imunoglobulinele sunt glicoproteine cu rol de anticorpi. Imunoglobulinele exist n


plasm, lichid interstiial i secreii i au capacitatea de a recunoate i de a se
combina specific cu antigenul inductor al rspunsului imun. Lor li se adaug
proteinele patologice cu aceeai structur dar fr activitate de anticorpi.
Toi anticorpii sunt imunoglobuline. Imunoglobulinele pot fi anticorpi, dar au i alte
roluri.
Denumirea de anticorp se pare c a fost dat pentru substanele mpotriva
corpilor bacterieni, ceea ce nu este corect, deoarece exist anticorpi i fa de alte
structuri (inclusiv mpotriva structurilor proprii, n bolile autoimune) sau chiar i n
cazul bacteriilor, pot exista anticorpi diferii fa de structuri diferite ale aceleai
bacterii (ex. anticorpi fa de cele peste 90 de tipuri capsulare ale Streptococcus
pneumoniae).
Imunoglobulinele sunt diferite de alte structuri proteice:
- recunosc i reacioneaz specific cu structura antigenic din cauza creia au
aprut;
- au funcie de anticorp, dar dac sunt inoculate la un individ dintr-o specie diferit
vor avea rolul de antigene pentru respectivul individ;
- sunt singurele structuri proteice care sunt sintetizate dup un stimul antigenic;
- pot activa sistemul complement etc.
S-a reuit sinteza de anticorpi monoclonali himerizai, alctuii dintr-o parte de
molecul uman i alta animal; fiind de izotip uman nu vor mai aprea ca i
structuri antigenice i nu vor mai fi respini.
14. 1. Structura general
Structura de baz a unei Ig monomer (ex. IgG1) cuprinde dou lanuri grele identice
i dou lanuri uoare identice, legate ntre ele prin puni disulfurice: dou puni
ntre cele dou lanuri grele (n cazul IgG1) i o singur punte ntre fiecare lan greu
i uor.
Aceast schem structural a fost identificat n urma mai multor experimente
(reducere i alchilare, aciunea papainei, aciunea pepsinei). Pepsina poate de ex. s
degradeze enzimatic o molecul de imunoglobulin, acionnd la nivelul
aminoacidului Leucin din structura lanurilor grele. Duce astfel la apariia unui
fragment cu greutate molecular destul de mare format la rndul su din 2
fragmente Fab unite [acest fragment poart numele de F(ab)2].
Fragmentele unei Ig sunt urmtoarele:
- Fab: prima jumtate a lanului greu i ntregul lan uor, legate ntre ele printr-o
punte disulfuric, obinute sub aciunea papainei, prin scindarea naintea regiunii
balama, cu un singur situs de legare;
- F(ab) 2: cele dou fragmente Fab i regiunea balama, care rezult dup aciunea
pepsinei, constituie un fragment superior celor dou fragmente Fab i conine dou
situsuri de legare;
- Fc: jumtile terminale ale celor dou lanuri grele unite prin puni disulfurice la
nivelul regiunii balama; 187
- pFc: cuprinde fragmentele peptidice rezultate dup aciunea pepsinei, cu ntregul
domeniu CH3 situat dup aminoacidul 333 al lanului greu;
- Fd: corespunde primei pri a lanului greu dup aciunea papainei, cu formarea
fragmentului Fab, i dup reacia de reducere-alchilare, pentru a extrage lanul uor;
- Fv: corespunde prilor variabile ale lanului greu i lanului uor (VH+VL).
Pentru Ig, noiunea de domeniu se regsete la lanurile grele n 4 exemplare (IgG,
IgA, IgD) sau 5 exemplare (IgM, IgE) i la lanurile uoare n 2 exemplare.
Terminologia utilizat este urmtoarea:
Lanurile grele:
- VH - pentru fragmentul greu variabil (variable heavy), comun tuturor claselor i
subclaselor cu aceeai specificitate.
- CH 1, CH 2, CH 3 i CH 4, - pentru fragmentul greu constant (constant heavy), care
conine diferenele pentru fiecare clas i subclas; de exemplu pentru IgG1 exist
fragmentele Cg11 , Cg12 i Cg13 i pentru IgM, fragmentele Cm1, Cm2, Cm3,Cm4.
Lanurile uoare:
- VL pentru fragmentul uor variabil (variable light), diferit pentru lanurile kappa i
lambda: Vk i Vl.
- CL pentru fragmentul uor constant (constant light), cu un singur lan Ck i patru
Cl funcionale.
Domeniile variabile VL i VH formeaz locul unde anticorpul se cupleaz cu
determinantul antigenic (epitop). Faa interioar a situsului anticorpului (situs
combinativ) vine n contact direct cu epitopul i se numete paratop. Faa exterioar
a situsului combinativ se numete idiotip