Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
2
3 UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO
4 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
5 CARRERA PROFESIONAL DE ODONTOLOGIA
6
7
8
9
10
11
12EFECTO INHIBITORIO INVITRO DEL ACEITE
13ESENCIAL DE MINTHOSTACHYS MOLLIS GRISEB (MUA) SOBRE
14MICROORGANISMOS PREVALENTES EN PATOLOGAS PERIAPICALES
15CRNICAS DE ORIGEN ENDODNTICO UNA PUNO 2016
20 PUNO - PER
21 2016
22
23
24 UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO
25 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
26
27 CARRERA PROFESIONAL DE ODONTOLOGIA
28 EFECTO INHIBITORIO INVITRO DEL ACEITE ESENCIAL DE MINTHOSTACHYS
29 MOLLIS GRISEB (MUA) SOBRE MICROORGANISMOS PREVALENTES EN
30 PATOLOGAS PERIAPICALES CRNICAS DE ORIGEN ENDODNTICO UNA
31 PUNO 2016
1 1
2
3
34 DNIKA QUISPE HUMPIRI
35 JHONNY MAMANI ASCENCIO
37PRESIDENTE: .
38 CD. Betsy Quispe Quispe
39
40PRIMER MIEMBRO: .
41 CD. Nelly Beatriz Quispe Maquera
42
43SEGUNDO MIEMBRO: .
44 CD. Milagros Molina Chicata
45
46DIRECTOR/ASESOR:
47 .
48 CD. Cesar Augusto Molina Chicata
49
50 DEDICATORIA
51
56investigacin.
57
4 2
5
6
58
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71 AGRADECIMIENTOS
72
73 A la Universidad Nacional del Altiplano Puno por permitirnos cumplir un gran anhelo
80 de investigacin.
7 3
8
9
81 A nuestra docente CD. Betsy Quispe Quispe por brindarnos sus conocimientos y por su
84 proyecto de investigacin.
85 A nuestros familiares por su apoyo incondicional.
86
87
88
89
90
91 NDICE GENERAL
92 PAGINA
93 RESUMEN 11
94 1. INTRODUCCIN 13
95 2. REVISIN DE LA LITERATURA 15
96 II.1. JUSTIFICACION
97 15
98 II.2. ANTECEDENTES
99 16
100 II.3. MARCO TEORICO
101 20
102 II.3.1. Caractersticas Generales De Las Lesiones Periapicales
103 II.3.2. Clasificacin de las Lesiones Periapicales
104 II.3.3. Microbiologa Endodntica De Las Lesiones Periapicales
105 2.3.4. Microorganismos Prevalentes en Patologas Periapicales Crnicas
106 2.3.5. Plantas medicinales
107 2.3.6. Minthostachys Mollis Griseb (Mua)
108 2.3.7. Aceites esenciales
10 4
11
12
109 2.4. OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIN 51
110 2.5. HIPTESIS. 51
1113. MATERIAL Y MTODOS 52
112 3.1. DISEO Y TIPO
113 DE ESTUDIO. 52
114 3.2. POBLACIN Y
115 MUESTRA 52
116 3.3. OPERACIONALIZ
117 ACIN DE VARIABLES 53
118 3.4. MTOD
119 OS 54
120 3.4.1. Mtodo para la obtencin el aceite esencial de Minthostachys Mollis Griseb (mua)
121 mediante extraccin por arrastre a vapor
122 3.4.2. Mtodo de recoleccin y cultivo de muestra de conducto radicular
123 3.4.3. Metodologa para la identificacin de Staphylococcus Aureus
124 3.4.4. Mtodo para la identificacin de Enterococcus Faecalis
125 3.4.5. Mtodo para la identificacin de Cndida Albicans
126 3.4.6. Mtodos previos de laboratorio
127 3.4.7. Mtodo para determinar la concentracin mnima inhibitoria (CMI)
128 3.4.8. Preparacin de los discos de sensibilidad
129 3.4.9. Prueba de susceptibilidad microbiana
130 3.4.10. Determinacin de la concentracin mnima inhibitoria (CMI)
131 3.4.11. Recoleccin de datos
132RESULTADOS Y DISCUSIONES 62
133CONCLUSIONES 78
134RECOMENDACIONES 79
135BIBLIOGRAFA 80
136ANEXOS 83
137
138
139
140
141
13 5
14
15
142
143
144
16 6
17
145 NDICE DE FIGURAS
146 Pg.
147Figura 1. Vas locales infecciosas de lesiones apicales ..........................................................
148Figura 2. Vas de acceso al sector apical.................................................................................
149Figura 3. Tincin de Gram: Cocos Gram positivo...................................................................
150Figura 4. Microfotografa, tomada con un microscopio electrnico de barrido......................
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178 INDICE DE TABLAS
179 Pg.
180Tabla 1. Anlisis estadsticos descriptivos de la accin del aceite esencial de
181 Minthostachys Mollis Griseb (mua) en sus diferentes concentraciones y
182 del Paramonoclorofenol Alcanforado sobre el Staphilococcus
183 Aureus...................................................................................
184Tabla 2. Anlisis de la varianza (ANOVA) unifactorial de la accin del aceite de
185 Minthostachys Mollis Griseb (mua) en sus diferentes concentraciones y
186 del Paramonoclorofenol Alcanforado sobre Staphilococcus Aureus........................
187Tabla 3. Prueba POST HOC a travs de HSD TUKEY, diferencias significativas entre los grupos
188de aceites esenciales de Minthostachys Mollis Griseb (mua) y sus efectos sobre el
189Staphilococcus Aureus.........64
235
238PMN = polimorfonucleares
243LPS = lipopolisacridos
249PMNF = paramonoclorofenol
250
251
252
253
254
255
256
257
258
259
260 RESUMEN
261El objetivo de la presente investigacin fue determinar el efecto inhibitorio in vitro del
262aceite esencial de Minthostachys Mollis Griseb (mua) frente a cepas de Staphylococcus
263Aureus, Enterococcus faecalis y Cndida Albicans, microorganismos de alta prevalencia en
264patologas periapicales crnicas de origen endodntico. Se evalu la susceptibilidad
265utilizando el mtodo de difusin de discos o Kirby-Bauer. Se utilizaron 120 placas Petri
266con agar Muller-Hinton; 40 por cada especie, donde se sembraron las cepas de
267Staphylococcus Aureus, Enterococcus Faecalis y Cndida Albicans y se colocaron los
268discos con el aceite esencial de mua al 100% y en dilucin etanlica al 75%, 50 % y 25%.
269Las placas se incubaron a 37C en estufa, se evalu las placas midiendo el halo de
270inhibicin de cada disco a las 12 horas utilizando una regla de Vernier. Se recolectaron los
271datos en la ficha matriz de recoleccin. Concluyndose que el aceite de Minthostachys
272Mollis Griseb (mua), present una gran actividad inhibitoria sobre las muestras de
273microorganismos en estudio: Enterococcus Faecalis, Staphylococcus Aureus y Cndida
274Albicans, esta actividad inhibitoria fue mayor a la del Paramonoclorofenol Alcanforado.
276
277
278
279*
280
281
282
283
284
285
286
287
288
289
290
291 ABSTRACT
292
293The objective of the present investigation was to determine the in vitro inhibitory effect of
294the essential oil of Minthostachis mollis griseb (mua) against strains of Staphylococcus
296in chronic periapical pathologies of endodontic origin. The susceptibility was evaluated
297using the disc diffusion method or Kirby-Bauer. 120 Petri dishes with Muller-Hinton 40
298agar per species were used where the strains of Staphylococcus Aureus, Enterococcus
299faecalis and Candida Albicans were planted and the discs were placed with the 100%
300essential oil and at 75% ethanolic dilution, , 50% and 25%. Plates were incubated at 37 C
301in an oven, plates were evaluated by measuring the inhibition halo of each disk at 12 hours
302using a Vernier rule. Data were collected on the collection matrix. It was concluded that
303minthostachys mollis griseb (mua) oil had a high inhibitory activity on the samples of
304microorganisms under study: Enterococcus Faecalis, Staphylococcus Aureus and Candida
306Alcanforado.
308
309
310
311
312
313
314
315
316
328El proceso evolutivo de las infecciones de los conductos radiculares posee numerosos
329estudios a lo largo del tiempo. Y es as que a mediados del siglo XX, los diferentes
330estudios realizados ya describan a algunos microorganismos aerobios y anaerobios
331facultativos como los de mayor prevalencia en las infecciones de conductos radiculares.
332Recientemente se desarrollaron nuevas tcnicas de cultivo e identificacin de
333microorganismos, los cuales han realizado considerables progresos con respecto a la
334etiopatognesis de las infecciones endodnticas, demostrando la naturaleza polimicrobiana
335de sta, as como la prevalencia de microorganismos. Actualmente las investigaciones
336concernientes al sistema de conductos radiculares refieren la prevalencia, junto a los
337microorganismos anaerobios estrictos, de microorganismos facultativos, los cuales son
338Enteroccocua. Faecalis, Staphylococcus Aureus y Cndida Albicans responsables de la
339sintomatologa persistente. A si mismo se viene investigando numerosas opciones
340alternativas a los antibiticos tradicionales, tal es el caso del uso de plantas con
341propiedades medicinales aplicadas a diversas reas de la medicina, como una opcin
342alternativa, claro est que su uso no se remonta estrictamente a esta poca sino que viene
343desde hace siglos atrs, puesto que nuestros antepasados hacan uso de estas plantas para
344aliviar diversas dolencias que los aquejaban, esto es un motivo ms para revalorar estos
345recursos en beneficio de nuestra poblacin.
346
347La "Mua" es una planta oriunda de la sierra del Per que tiene mltiples usos: Para tratar
348malestares gastrointestinales, como condimento, para repeler insectos de los cultivos,
349proteger las cosechas de la putrefaccin, en tratamiento de tumores, inflamaciones, asma,
350halitosis, entre otros.
351En el presente estudio se investiga la efectividad antibacteriana del aceite esencial de
352Minthostachys mollis mua en distintas diluciones frente a bacterias relacionadas con la
353etiologa y desarrollo de patologas periapicales crnicas de origen endodntico; siendo
354ste un estudio pionero en la regin, para lo cual las ciencias bsicas se integran para
355obtener los conocimientos deseados a partir de esta investigacin.
356
357
358
359
360
361
362
363
364
365
366
367
368
369
370
371
372
373
399A pesar de todos los alcances que ofrece la endodoncia todava hay casos en que ocurren
400infecciones persistentes post tratamiento endodntico, estudios demostraron que ciertas
401bacterias penetran profundamente en los tbulos dentinarios del conducto radicular que
402hace muy difcil su eliminacin a la hora de la instrumentacin biomecnica, desinfeccin
403con los irrigantes antispticos o colocacin de medicamento intracanal.6
404En diversos trabajos de investigacin que se realizan en la actualidad en diversas partes del
405mundo, se destaca que cada vez se est dando mayor importancia al estudio de las plantas
406medicinales como una alternativa al tratamiento de diversas patologas, y las afecciones
407bucodentales no son la excepcin. El Per, considerado el tercer pas con mayor diversidad
408del planeta, ha efectuado importantes aportes de especies y variedades para el mundo
409gracias a los diversos pisos ecolgicos y microclimas que presenta, contando con 84 zonas
410de vida de las 103 conocidas donde habra 50 mil especies vegetales (20% de las existentes
411en la Tierra) de las que 2,000 han sido utilizadas con fines curativos.9
418
II.6.
532 MARCO TERICO
533
II.6.1.
534Caractersticas Generales De Las Lesiones Periapicales
535
536 Espacio Periapical
537 La regin periapical tiene una casi ilimitada fuente de clulas indiferenciadas, que
538pueden participar en el proceso inflamatorio, as como tambin en el proceso reparativo.13
539 Los tejidos periapicales son tambin ricos en suplemento sanguneo colateral y
540drenaje linftico, esto lo diferencia de los tejidos pulpares. Tambin estas caractersticas le
541permiten, a los tejidos periapicales, contrarrestar los elementos destructivos relacionados
542con los irritantes de los conductos y de la inflamacin resultante.13
544 Patognesis de las lesiones periapicales
545 Las lesiones periapicales pueden ser consideradas lesiones infecciosas endgenas
546multifactoriales, con el husped que juega un rol significativo en el proceso inflamatorio.
547El egreso de microorganismos, sus derivados, y los tejidos alterados de los canales
548radiculares hacia los tejidos perirradiculares pueden iniciar la formacin y/o perpetuacin
549de estas lesiones.13
550
551 Dependiendo de la fase de desarrollo, una evaluacin de estas lesiones revela
552numerosas clulas inflamatorias como neutrfilos polimorfonucleares (PMN), macrfagos,
553linfocitos, clulas plasmticas, clulas mastoides, basfilos, y eosinfilos. Una interaccin
554entre los irritantes exgenos y estas clulas defensivas del hospedador, pueden producir
555una expulsin de varios mediadores qumicos endgenos como neuropptidos, pptidos
556fibrinolticos, pptidos, quininas, fragmentos del complemento, aminas vasoactivas,
557enzimas lisosomales, citoquinas y mediadores de reacciones inmunolgicas. Una de las
558caractersticas ms relevantes del desarrollo de las lesiones periapicales es la resorcin
559sea, aunque el proceso patognico an no ha sido muy bien establecido.13
567 Las lesiones agudas son aquellas que presentan dolor y los signos ms serios, y las
568lesiones crnicas son aquellas que no tienen sintomatologa relevante. Es evidente que en
569el tratamiento de estas lesiones, el factor ms importante es la medicacin antibacteriana.13
570
571 Periodontitis Apical Aguda (Sintomtica).- Es una inflamacin circunscrita del
572 ligamento periodontal en la regin apical. Las principales causas son irritantes que se
573 difunden desde una pulpa inflamada o necrtica, la salida de irritantes como
574 bacterias, toxinas bacterianas, medicamentos desinfectantes, residuos empujados
575 hacia los tejidos periapicales o irritacin fsica de los tejidos periodontales puede
576 ocasionar periodontitis apical sintomtica.15 La sensibilidad a la percusin es la
577 principal caracterstica clnica, el dolor vara desde la hipersensibilidad leve hasta el
578 dolor intenso. La liberacin de los mediadores de la inflamacin ocasiona
579 degradacin del ligamento periodontal y resorcin del hueso alveolar.15
581 Periodontitis Apical Crnica (Asintomtica).- Puede ir precedida de Periodontitis
582 apical sintomtica o Absceso apical. Sin embargo, la lesin a menudo se desarrolla y
583 crece sin signos y sntomas subjetivos. El tratamiento inadecuado de conductos
584 radiculares tambin origina el desarrollo de estas lesiones. En general, una pulpa
585 necrtica gradualmente libera agentes nocivos de escasa patogenicidad o en
586 concentraciones bajas que dan origen al desarrollo de una Periodontitis apical
587 asintmatica (PAC). Por lo general se acompaa de una resorcin sea perirradicular
588 que es visible en las radiografas.15
589 El paciente por lo general no refiere dolor importante y las pruebas revelan dolor
590 mnimo o nulo a la percusin. No obstante, si la Periodontitis apical asintomtica
591 perfora la lmina cortical del hueso, la palpacin de los tejidos superpuestos
592 ocasionar malestar. El diente asociado tiene una pulpa necrtica y por tanto no
593 responder estmulos elctricos o trmicos.16
594
595 A la periodontitis apical crnica se le asocia a:
596 Granuloma perirradicular: Desde el punto de vista histolgica consta
597 predominantemente de tejido inflamatorio de granulacin con capilares
598 pequeos, fibroblastos, mltiples fibras de tejido conectivo. Este tejido
599 reemplaza al ligamento periodontal.15
600
601 Quiste perirradicular: Histolgicamente es una cavidad central, revestida de
602 epitelio escamoso estratificado. La luz del quiste contiene un lquido plido
603 eosinfilo y en ocasiones algunos residuos celulares.15
604
605 Absceso Apical.- Es una concentracin circunscrita de pus en una cavidad
606 formada por la desintegracin de los tejidos. Segn el grado de formacin y
607 excresin de exudado, la intensidad del dolor y la presencia o ausencia de signos y
608 sntomas generales, los abscesos pueden dividirse en:15,16
609
610 Absceso apical sintomtico: Es un proceso inflamatorio en los tejidos
611 perirradiculares de los dientes, que se acompaa de la formacin de exudado
612 dentro de la lesin. Una causa frecuente es una afluencia rpida de
613 microorganismos o sus productos, desde el sistema de conductos radiculares.
614 El paciente puede o no mostrar tumefaccin que puede ser localizada o difusa.
615 Al exmen clnico el diente revela diversos grados de sensibilidad a la
616 percusin y a la palpacin. No existe reaccin al fro, el calor o los estmulos
617 elctricos, ya que la pulpa del diente afectado esta necrosada.15,16
618 La diseminacin de la respuesta inflamatoria hacia el hueso esponjoso ocasiona
619 resorcin sea apical. Debido a la presin causada por la acumulacin de
620 exudado dentro de los tejidos limitantes, el dolor es intenso. Con mayor
621 frecuencia la tumefaccin permanece localizada, aunque puede tornarse difusa
622 y diseminarse de forma amplia (celulitis).17
623 El lugar del rea de la tumefaccin es determinado por la relacin del pice del
624 diente afectado con las inserciones musculares. El proceso de supuracin busca
625 lneas de menor resistencia, y con el tiempo perfora la placa cortical. Cuando
626 llega a los tejidos blandos, la presin sobre el periostio se libera, y por lo
627 general se reducen los sntomas.15,16
629 Absceso apical asintomtico: Est relacionado con la salida gradual de
630 irritantes del sistema de conductos radiculares hacia los tejidos perirradiculares
631 y la formacin de un exudado. Se asocia con un trayecto fistuloso que drena en
632 forma continua o intermitente. Esto se manifiesta como un estoma sobre la
633 mucosa bucal o, en ocasiones, sobre la piel de la cara. El exudado tambin
634 puede drenar a travs del surco gingival del diente afectado, imitando una
635 lesin periodontal conbolsa.15
636 Si se obstruye el trayecto de la fstula, se producir diversos grados de dolor.
637 Al examen clnico se presentar sensibilidad a la percusin y a la palpacin,
638 dependiendo si la fstula est abierta y drenando o cerrada. Las pruebas de
639 vitalidad son negativas, debido a que las pulpas estn necrosadas. Al exmen
640 radiogrfico revelar prdida sea a nivel del pice del diente afectado. Estos
641 trayectos fistulosos, tengan o no revestimiento, se resuelven tras el tratamiento
642 del conducto radicular, con el que se elimina la causa.15
643
644
645
646
647
648
649
650
651
652
653
654
Causado por la Consecuencia de Resulta cuando General ente
primera extensin necrosis pulpar y egresa un nmero asociado una PAC.
de la inflamacin generalmente se grande de Este absceso ha
ETIOLOGIA
en los tejidos presenta como una bacterias a travs perforado a travs
periapicales. continuacin de la del pice y de la mucosa o
Pulpitis PAA. provoca una incluso la piel
irreversible o respuesta como una fstula.
necrosis pulpar. inflamatoria
severa.
Dolor de leve a Generalmente Dolor moderado Generalmente
severo a diversos asintomtico o con severo. asintomtica,
estmulos como: una molestia Existen debido a la
fro, caliente, mnima. manifestaciones liberacin de la
SIGNOS Y masticacin. Respuesta negativa a sistmicas: presin
SINTOMAS Existe una respuesta estmulos temperatura, establecida por
positiva a pruebas provocados. tumefaccin, la fstula.
de la palpacin. Un ligero dolor a la Siempre responde El resto de las
Radiogrficamente prueba de a la percusin y caractersticas
existe un ligero percusin. palpacin. clnicas y
ensanchamiento del Radiogrficamente es Radiogrficamente radiogrficas son
espacio periodontal. imposible hay un similares a los de
Generalmente normal. diagnosticar un ensanchamiento PAC.
quiste. del espacio
periodontal.
657
669 Caractersticas para que los microorganismos puedan sobrevivir en los conductos
670 radiculares:
671 o El ambiente de los conductos radiculares, tiene que permitir la supervivencia
672 crecimiento y desarrollo del microorganismo.
673 o El microorganismo debe estar localizado a nivel de las redes dentarias; de tal
674 manera que, sus factores de patogenicidad puedan llegar a tejidos que rodean al
675 diente.
676 o Debe poseer factores de virulencia.
677 o Tiene que presentar en un nmero propicio para originar y mantener la lesin
678 perirradicular.18
688
690 En nuestros das, ha sido ampliamente demostrado que las bacterias y sus productos
691patognicos, juegan un rol importantsimo en el desarrollo y el mantenimiento de las
692lesiones pulpares y periapicales. Tambin se sabe que las infecciones de los canales
693radiculares y los tejidos periapicales son polimicrobian0s y que tienen una predominancia
694de microorganismos anaerobios.20
696 Cuando agentes irritantes o microorganismos que se originan del contenido de los
697conductos radiculares llegan a la zona periapical, ya sea a travs del foramen apical
698principal, o a travs de conductos laterales, producen sucesos inflamatorios que afectan los
699tejidos del peripice.21
700 Los agentes irritantes pueden tener distintas vas de acceso al sector apical como
701 son:21
-
702 Por va de la Pulpa Radicular: Debido a un sin nmero de agentes irritantes
703 principalmente la caries, la pulpa puede verse afectada. Los productos de la
704 degeneracin de la pulpa ante un estmulo irritante se diseminan por los
705 conductos radiculares y llegan al tejido periapical, en el cual desata una serie de
706 reacciones inflamatorias en el tejido del peripice que tuvieron origen
707 endodntico. El foramen apical, es el principal medio de comunicacin por el
708 cual microorganismos y sus productos de desecho pueden llegar a diseminarse
709 por los tejidos del peripice, ocasionando una inflamacin local que conduce a
710 la reabsorcin del hueso y de la raz. En resumen mediante la va de la pulpa
711 radicular distintos agentes irritantes en especial microorganismos pueden llegar
712 al sector apical.21
714 - Por va Periodontal: Existen vas de comunicacin entre el periodonto y la
715 pulpa a travs del foramen apical y de los canales laterales, lo que permite el
716 paso de agentes nocivos de una zona a la otra cuando alguno de los dos, o
717 ambos, se encuentran alterados. Tambin pueden ocurrir procesos degenerativos
718 en los dientes, o incluso tratamientos periodontales como raspados radiculares
719 pueden ocasionar la migracin de bacterias a la zona apical o incluso puede
720 ocasionar la exposicin de los tbulos dentinarios. La estrecha relacin que
721 existe entre el periodonto y la pulpa dificulta en muchas ocasiones el
722 diagnstico diferencial de las lesiones que tienen lugar en ambos.21
723 Como se observa en la (figura 1) las vas principales de infeccin a la zona apical son
724la necrosis pulpar o por va pulpar y la va periodontal:
725
726
727
728
729
730
731 Figura 1. Vas locales infecciosas de lesiones apicales (1) Necrosis pulpar (2)
732Enfermedad periodontal. 21
733 - Por va Endgena: Distintos factores endgenos son vas para que agentes
734 nocivos lleguen al sector apical como son los traumatismos, ya que en caso de
735 un accidente pueden migrar bacterias u otros factores y ocasionar inflamaciones
736 de los tejidos periapicales, adems tambin se conoce que la compresin que
737 originan los quistes en el tejido periapical al igual que los tumores pueden
738 producir gran dao a los tejidos periapicales.21
739
740 - Por va Sangunea: En esta va los microorganismos se diseminan a travs del
741 torrente sanguneo hacia la pulpa de un diente que no est infectado pero que
742 presenta una inflamacin pulpar.21
743
744
745
746
747
748
749
750
751
752
753 Figura 2. Vas de acceso al sector apical. (I) Por va pulpar (II) Por va periodontal
754(III) Por va endgena (IV) Por va sangunea.21
757 La sola presencia de bacterias en los canales radiculares o en los tejidos periapicales,
758no implica que se vaya a producir una infeccin y sus consecuencias sintomatolgicas.
759Esto depender de la interaccin de los siguientes factores: nmero de clulas bacterianas,
760virulencia de las bacterias, duracin de la agresin y la resistencia del hospedador.13
761 Los componentes estructurales que son considerados como factores de virulencia
762son: lipopolisacridos (LPS), cpsula, peptidoglicano, fimbrias, lipoprotenas y cidos
763lipoproteicos. Las bacterias Gramnegativas contienen LPS en su estructura y son causantes
764de actividades biolgicas tales como: induccin febril, reaccin de Shwartzman, actividad
765adyuvante y citotoxicidad.13
766 Las enzimas que son consideradas como factores de virulencia y que provienen de
767bacterias aisladas de conducto radiculares y tejidos periapicales infectados son: colagenasa,
768hialuronidasa, condroitinsulfatasa, cido fosfatasa, fibrinolisina, hemolisina, coagulasa y
769otras proteasas. Existen muchos productos del metabolismo de las especies bacterianas que
770estn involucradas en su patogenicidad. cidos grasos de cadena corta, amoniaco,
771compuestos sulfurados, indol, poliaminas, etc. Las bacterias tienen que atravesar muchas
772fases para producir una infeccin. Estos son: adherencia, colonizacin, invasin,
773sobrevivencia y dao tisular.13
774 Diseminacin de bacterias a travs de los canales radiculares hacia los tejidos
775 periapicales y otros tejidos
776 Una infeccin endodntica de larga duracin puede permitir que las bacterias se
777propaguen por todo el sistema de los canales radiculares, incluyendo canales accesorios,
778deltas apicales e itsmos. Esto provoca que el tratamiento de estas infecciones sea difcil. La
779acumulacin de las bacterias en los tbulos dentinales, a veces no permite el ingreso de
780clulas de defensa al sitio de la infeccin.13
788 La propagacin ms comn de las infecciones de los canales radiculares son los
789tejidos osteomielitis, sepsis, angina de Ludwig, meningitis y abscesos intracraneales.13
887
Factores de patogenicidad
894
898 Enzimas:
948Taxonoma
949Los microorganismos involucrados como agentes etiolgicos de la Candidiasis, se
950encuentran actualmente clasificados taxonmicamente de la siguiente forma: 28
Reino: Hongo
Divisin: Deuteromycota
Clase: Blastomycetes
Familia: Cryptococcaceae
Gnero: Cndida
Especies Albicans
952El Gnero Cndida comprende ms de 150 especies, cuya principal caracterstica es la
953ausencia de forma sexual, con excepcin de algunas especies micticas. Son clasificadas
954como levaduras, las cuales corresponden a hongos con un modo de desarrollo
955predominantemente unicelular.28
956Solamente una docena de las especies pertenecientes al gnero Cndida poseen la facultad
957de adaptarse a una temperatura de 37C, y pueden ser ocasionalmente patgenas para el
958hombre, estas son entre otras: C. albicans, C. tropicalis, C. kefyr (pseudotropicalis), C.
959krusei, C. guillermondi, C. parakrusei, C. zeylanvides, C. stellatoidea y C. brumptii.28
Caractersticas Generales
961
962 Las especies cndida crecen como clulas de levaduras tpicas de 4-6 micras
963redondas u ovaladas con gemacin en la mayora de las condiciones y en casi toda las
964temperaturas, crecen en condiciones de anaerobiosis en medios de cultivo a pH con rango
965entre 2,5 y 7,5 y la temperatura oscila entre 20 y 38, el crecimiento de colonias se puede
966detectar entre 48 y 72 horas despus de la siembra.29
967 Los microorganismos del genero cndida son oportunistas se encuentran como
968comensal en la cavidad oral, intestino, vagina, secrecin bronquial y piel del hombre. Las
969colonias de esta especie se observan macroscpicamente: color crema cerosa, hmedas,
970redondas. Y microscpicamente son blastosporas redondas ovales.28,29
Factores de Patogenicidad
971
972 La Cndida Albicans tiene varios factores de virulencia para colonizar al hospedero y
973ocasionar daos de forma directa al activar, resistir o desviar los mecanismos de defensa
974del mismo. Esto atributos que contribuyen a la patognesis de Candida albicans incluye la
975morfognesis, ansicin entre las clulas lavaduras unicelulares y las formas de crecimiento
976filamentosas), las enzimas secretadas aspartil proteasas (SAP) y fosfolipasas y las
977biomolculas de reconocimiento del hospedero (adhesinas), que le permiten iniciar el
978proceso de formacin de biopelculas. As mismo, el cambio de fenotipo se acompaa por
979alteraciones en la expresin de antgenos, morfologa colonial afinidades de Cndida
980Albicans a los tejidos.29
981
982Especies de Cndida pueden tambin bloquear la actividad de neutrfilos polimorfo
983nucleares llegando a producir radicales libres y des granulacin, adems puede causar la
984muerte de moncitos. Este hongo tambin es capaz de evadir clulas de defensa del
985husped a travs de la produccin de proteinasas que degradan factores del complemento
986causando cambios en la permeabilidad vascular y en las imunoglobulinas IgG, IgA,
987tambin ocurre estimulacin de la sntesis de citocinas pro-inflamatorias, estimulando
988macrfagos, clulas endoteliales y fibroblastos.22
10202.3.8.1. Taxonomia
1033 La mua es una planta arbustiva leosa oriunda del Per su nombre cientfico es
1034Minthostachys mollis. Es una especie cuyo cultivo es muy difundido en las regiones
1035andinas, especialmente en Apurmac, Ayacucho, Cuzco, Huancavelica y Puno siendo muy
1036empleada por las comunidades nativas y campesinados de Sudamrica. Adems es
1037conocida como peperina en Argentina y organo en Colombia, encontrndose tambin en
1038Venezuela, Brasil, Ecuador y Bolivia, habita en los diferentes pisos ecolgicos de nuestra
1039serrana, se denomina en la lengua Quechua mua, y en la Aymara tiene 2 nombres:
1040Coa y Huaycha. Debido a sus caractersticas semejantes al pleo y organo, los
1041espaoles la denominaban poleo silvestre. Otros nombres vulgares con los que se le conoce
1042a esta planta son: "Mua negra", "Polco silvestre", "coz", "mua-mua", "arash mua",
1043"kon", "Orcco-mua".31
1044 Alcanza una altura de 1.50 m., desarrollndose en forma difusa y muy ramificada,
1045crece en lugares cercanos a acequias, manantiales sin tener grandes requerimientos de
1046agua. Se desarrolla en suelos arenosos, ricos en materia orgnica, bien drenados, con buena
1047retencin de humedad, con un pH entre 5 - 8 y un clima con elevada luminosidad, florece
1048en poca de lluvia, se multiplica por semilla y por codo. As como es una planta
1049hemicriptfila que durante la poca ms fra del invierno y seco desaparecen sus rganos
1050areos para brotar nuevamente con las primeras lluvias de la primavera.31
1051
10522.3.8.3. Caractersticas Botnicas de Minthostachys mollis (mua)
1053 Es una planta arbustiva, leosa, frondosa en la parte superior, de aspecto general
1054 glauco, erecta y pubescente, su tallo es ramificado desde la base. La hoja es el
1055 elemento vegetativo simple ligeramente aserrado, carece de estpulas, cortamente
1056 pedunculares de filotaxia opuesta. Su peciolo mide entre 4 y 6 mm de largo,
1057 pubescente acanalada en la parte superior y convexo en la parte inferior, es aqu
1058 donde se deposita la mayor cantidad de aceite, que al estrujarlos dejan sentir su
1059 aroma caracterstico.31
1060
2.3.8.4.
1061 Principales molculas con accin bactericida presentes en el aceite esencial
1062de Minthostachys mollis (mua)31
Pulegona
1063
1064 Uno de los componentes ms importantes del aceite esencial de Minthostachys
1065mollis y tambin de muchos aceites, pero es mejor conocido por pulegium poleo (Mentha).
1066Es altamente txico en grandes cantidades, daa el hgado y puede provocar el aborto. Su
1067toxicidad probablemente explica algunos de los efectos del aceite de Minthostachys mollis
1068contra las plagas y parsitos. La sustancia tambin se usa en perfumera y saborizantes.31
Carvacrol
1069
1070 Se han encontrado para ser componentes dominantes en una menor proporcin de los
1071estudios de los aceites de Minthostachys mollis. Carvacrol tambin se encuentra en varias
1072hierbas conocidos como el organo (Origanum vulgare), la ajedrea de verano (Satureja
1073hortensis) o tomillo (Thymus serpyllum), y es sobre todo un valor para sazonar.31
Linalol
1074
1075 Empleado como condimento y como insecticida, linalol es ms conocido de cilantro
1076(Coriandrum sativum) de la familia Apiaceae. A menudo es uno de los componentes
1077menores del aceite de Minthostachys mollis.31
Timol
1078
1079 Como su nombre lo sugiere, esta sustancia es bien conocida de los aceites de
1080distintas especies de tomillo. Acta como antisptico y contra el dolor de garganta y tos. A
1081veces se encuentra como un componente menor en el aceite de Minthostachys mollis.31
2.3.8.5.
1083 Propiedades y usos de Minthostachys mollis (mua)
1084 La medicina popular no poda dejar de beneficiarse con tantas virtudes curativas y
1085alimenticias. Se sabe que es una especie de mltiples aplicaciones, muchas de las cuales
1086permanecen an en el misterio. Los mdicos de una sociedad grafa como la Inca, los
1087galenos amautas, se las llevaron por lo visto consigo; su empleo como infusin o mate
1088(hojas y flores) es imprescindible para aliviar malestares estomacales, flatulencias,
1089afecciones diarreicas, vmitos y afecciones reumticas, adems posee propiedades sedantes
1090y hemostticas.En casos de soroche o mal de altura ayuda a liberar los bronquios y disipar
1091el mareo, estimula la prevencin de la mayora de problemas respiratorios y ayuda a
1092descongestionar las vas respiratorias, es excelente contra la halitosis y para combatir
1093jaquecas .31 Asimismo ayuda a eliminar los parsitos intestinales. Tambin se emplea como
1094saborizante y aromatizante en la elaboracin de licores y bebidas amargas.31
1095 Los indgenas del Per la emplearon como resolutiva de tumores y sus hojas
1096mezcladas con chilca eran recomendadas en fracturas de huesos. Es as como las hojas de
1097mua contribuyen en la curacin de fracturas, luxaciones y tumores ocasionados por golpe.
1098Actualmente tambin los hueseros logran recuperaciones asombrosas aplicando su aceite
1099esencial en luxaciones y frotaciones antirreumticas.31
1100 Sus poderosas propiedades bactericidas han sido tiles, durante milenios, para
1101conservar la papa contra las plagas en la germinacin de sus semillas y tambin, durante su
1102almacenamiento porque tiene un fuerte efecto repelente sobre los "gusanos de tierra" que
1103devoran los tubrculos, tallos, hojas y es antimoho; de igual manera protege al maz, col y
1104cebolla.31 En algunos lugares de Colombia la emplean en el campo pecuario para controlar
1105los ectoparsitos y endoparsitos de los animales domsticos y ganado, adems para curar
1106sarna en equinos y camlidos. Es recomendable como repelente contra las pulgas y podra
1107igualmente utilizarse para el control del gorgojo del frijol, tambin para la fumigacin de
1108insectos molestos como zancudos y moscas .31
11102.3.11. Aceites esenciales
1111 Los aceites esenciales son productos voltiles de naturaleza compleja, elaborados por
1112ciertos vegetales a los que confieren un aroma agradable. Oficialmente, se denominan
1113aceites esenciales a los productos que se pueden obtener por arrastre con corriente de vapor
1114de agua o por expresin del pericarpio de ciertos frutos. 31
1115
1116 Los aceites esenciales son generalmente lquidos a temperatura ambiente aunque
1117algunos solidifican a baja temperatura como, por ejemplo, la esencia de ans. La mayora
1118son prcticamente transparentes, incoloros o ligeramente coloreados (amarillentos) con
1119excepciones como la esencia de manzanilla, que contiene camazuleno de un intenso color
1120azul. Algunos aceites esenciales son inflamables. Generalmente, son menos densos que el
1121agua aunque tambin hay excepciones como las esencias de clavo y de canela, que son ms
1122densas. Los aceites esenciales suelen ser insolubles en agua. Los aceites esenciales son
1123lipfilos y solubles en disolventes orgnicos apolares (hexano, eter etlico, etc.). La
1124solubilidad en alcohol es variable y suelen ser solubles en alcoholes de alta graduacin. Se
1125oxidan con facilidad y polimerizan dando productos resinosos.31
1126
11272.3.11.1. Localizacin del aceite esencial en las plantas
1128
1129 Se producen y se almacenan en clulas glandulares, que tapizan el interior de las
1130hojas y tallos, en pelos glandulares de las plantas o en otras clulas especializadas. Pueden
1131estar ubicados en diferentes partes de la planta; por ejemplo, en las conferas esta en todo
1132el tejido; en la rosa solo en el ptalo; en el comino en las semillas; en el clavo de olor en el
1133brote o yema; en la lima en los frutos, en la lima en los pelos glandulares de las ramas y
1134hojas.31
11362.3.11.2. Composicin qumica de los aceites esenciales
1137
1138 Los aceites esenciales son generalmente mezclas complejas de varias sustancias (a
1139veces ms de 200) que a su vez pueden tener estructuras muy diversas. Respecto a la
1140formacin y evolucin de los aceites esenciales en las plantas es necesario tener en cuenta
1141algunos aspectos externos, que pueden afectar la composicin qumica de las esencias de
1142manera cualitativa y cuantitativa, entre ellos, se pueden destacar los siguientes:
1143
1144 - Condiciones geobotnicas: clima, altitud, tipo de suelo, pluviosidad.
1145 - Labores culturales: uso de fertilizantes, abonos y pesticidas.
1146 - Parte y estado de desarrollo fenolgico de la planta.
1147 - poca de recoleccin.
1148 - Modo de almacenamiento y manejo del material vegetal: fresco, seco,
1149 fermentado, tratamiento post cosecha.
1150 - Modo de obtencin del aceite: destilacin o expresin.
1151Los compuestos presentes en los aceites esenciales se pueden clasificar en: terpenoides y
1152no terpenoides.
1153
Terpenoides: Los compuestos terpnicos proceden de la condensacin del isopreno (C5) y
1154
1155pueden tener o no oxigeno. Los que carecen de oxigeno son hidrocarburos: monoterpenos
1156(C10) y sesquiterpenos (C15), que pueden ser aromticos o alifticos. Los que poseen
1157oxigeno son terpenos funcionalizados con funcin alcohol, fenol. aldehdo, cetona, ter,
1158ster o perxido.31
1159
1160
No terpenoides:
1161
1162
1163 - Sustancias voltiles alifticas.
1164 - Sustancias voltiles aromticas.
1165 - Sustancias con estructura C6 C1.
1166 - Sustancias con estructura C6 C3.
1167 - Derivados cumarnicos.
1168
1169 Las sustancias C6-C1 y C6-C3 son sustancias voltiles de bajo peso molecular,
1170generalmente oxigenadas con funciones alcohol, fenol, cido o ter. 31
1171 Sustancias nitrogenadas: son poco frecuentes. Hay aminas alifticas voltiles
1172(metilamina, etilamina, etc.) que tienen olor a pescado y derivados del indol que tiene olor
1173fecal (heces). 31
1174 Sustancias con azufre: son todava menos frecuentes que las sustancias nitrogenadas.
1175Ciertas especies contienen isotiocianatos (R-N=C=S) y otras contienen sulfuros (R-S-R) o
1176disulfuros (R-S-S-R).31
2.3.11.3.
1177 Propiedades biolgicas de los aceites esenciales
1178
1179 Desde la antigedad, las especies aromticas y sus aceites esenciales se han
1180empleado en preparaciones culinarias no slo como agentes saborizantes y aromatizantes,
1181sino tambin como conservantes naturales inhibiendo el deterioro oxidativo y los daos
1182causados por bacterias, hongos u otros microorganismos; de esta manera, actualmente, las
1183industrias de alimentos y cosmticos han disminuido el uso de conservantes sintticos,
1184reemplazndolos por sustancias de origen natural, por tal motivo, el conocimiento de las
1185actividades antimicrobianas, antioxidantes y citotxicas son importantes para la aplicacin
1186de los aceites esenciales en las diferentes industrias.
1187
1188 Las acciones farmacolgicas son muy variadas tanto en su utilizacin por va tpica
1189como por va interna. Las acciones ms frecuentes son:
1190
Antispticos: Frente a microorganismos gram positivos y gram negativos e incluso frente a
1191
1192hongos productores de micosis y ciertas levaduras. El poder antisptico es variable segn
1193las caractersticas estructurales de los componentes del aceite esencial, en cual puede
1194tener:31
1195 - Elevado poder antisptico: aceites que poseen componentes con un grupo
1196 fenol.
1197 - Poder antisptico medio: aceites que poseen componentes con funcin alcohol.
1198 - Bajo poder antisptico: aceites que poseen componentes con funcin cetona.
1199
Antiespasmdicos: Disminuyen los espasmos gastrointestinales y aumentan las secreciones
1200
1201gstricas, por lo que se usan sobre el aparato digestivo como eupcticos (facilitan la
1202eliminacin de gases), digestivos, estomacales, colagogos (facilitan la salida de bilis de la
1203vescula biliar al duodeno) y colerticos (facilitan la secrecin de bilis por parte de las
1204clulas hepticas). Suelen aumentar las ganas de comer (aperitivos) porque aumentan las
1205secreciones salivares y gstricas.31
1206
Sedantes: Algunos componentes de los aceites esenciales tienen acciones sedantes en
1207
1208estados de nerviosismo o ansiedad.31
1209
Accin irritante: Algunas esencias aplicadas por va tpica tienen un efecto rubefaciente,
1210
1211es decir, aumentan la circulacin capilar y epidrmica y producen un enrojecimiento. Otros
1212aceites son cicatrizantes y vulnerarios. Aplicados por va interna actan sobre el rbol
1213bronquial, fluidificando las secreciones respiratorias y facilitando su eliminacin, y son por
1214tanto expectorantes; tambin pueden actuar sobre el aparato renal ejerciendo una accin
1215diurtica que generalmente no suele aprovecharse porque, como efecto indeseable, suelen
1216producir hematuria (emisin de orina con sangre) .31
1217
Analgsicos: Ciertas esencias aplicadas por va tpica presentan una accin analgsica
1218
1219frente a dolores musculares, dolores en las articulaciones, etc. Tambin surten un efecto
1220antiinflamatorio.31
2.3.11.4.
1221 Actividad Antimicrobiana De Los Aceites Esenciales
1222 Los aceites esenciales, compuestos extrados de varios tipos de plantas y usados para
1223preservar alimentos y bebidas, tienen un efecto inhibitorio sobre el desarrollo de
1224microorganismos. En su estudio Walton y col. demostr que el extracto destilado del ajo
1225tiene efectos bactericidas y bacteriostticos. Se conoce de la actividad antimicrobiana de
1226varias especies vegetales en forma de extractos o hierbas aromticas en los alimentos,
1227inhiben la formacin vegetativa de esporas, detienen el crecimiento de elementos
1228patgenos y levaduras.13
2.3.11.5.
1230 Mecanismo De Accin Del Aceite Esencial Sobre Los Microorganismos
1231 Este mecanismo de accin hacia los microorganismos es complejo y an no ha sido
1232del todo entendido y explicado. El modo de accin de los aceites esenciales tambin
1233depender del tipo de microorganismos y est principalmente relacionado con la estructura
1234de la pared celular y la membrana externa de los mismos. Kakrani y col. establecieron, in
1235vitro, la actividad antimicrobiana, antiparasitaria y antimictica de los aceites esenciales
1236de Agliaodoratissima. Las investigaciones plantean que los aceites esenciales interferiran
1237la fase del metabolismo intermedio de los microorganismos inactivando enzimas de
1238reaccin.13
1268
12692.4. OBJETIVOS DE LA INVESTIGACION
1270
1271 3.4.12. Objetivo General
1272 Determinar el efecto inhibitorio in vitro del aceite esencial de Minthostachys Mollis
1273 Griseb (mua) frente a microorganismos prevalentes en patologas periapicales
1274 crnicas de origen endodntico.
1275
1276 3.4.13. Objetivos especficos
1277
1278 Determinar el efecto inhibitorio in vitro del aceite esencial de Minthostachys Mollis
1279 Griseb (mua) puro y en diluciones del 75%, 50% y 25% frente al crecimiento
1280 bacteriano de la cepa Staphylococcus aureus.
1281 Determinar el efecto inhibitorio in vitro del aceite esencial de Minthostachys Mollis
1282 Griseb (mua) puro y en diluciones del 75%, 50% y 25% frente al crecimiento
1283 bacteriano de la cepa Enterococcus Faecalis.
1284 Determinar el efecto inhibitorio in vitro del aceite esencial de Minthostachys
1285 Mollis Griseb (mua) puro y en diluciones del 75%, 50% y 25% frente al
1286 crecimiento de Cndida albicans.
1287
1288 3.5. HIPTESIS.
1289
1290 Hi: El aceite esencial de Minthostachys Mollis Griseb (mua) tiene efectividad
1291 inhibitoria in vitro frente a cepas de Staphylococcus Aureus, Enterococcus Faecalis
1292 y Cndida Albicans.
1293 Ho: El aceite esencial de Minthostachys Mollis Griseb (mua) no tiene efectividad
1294 inhibitoria in vitro frente a cepas de Staphylococcus Aureus, Enterococcus Faecalis
1295 y Cndida Albicans.
1296
1297
1298
1299
1300 III. CAPITULO III: MATERIALES Y MTODOS
1301
1302 III.1. DISEO Y TIPO DE ESTUDIO
1303
1304 Experimental debido a que se cont con un grupo control positivo representado por
1305 los discos de papel filtro embebidos con Paramonoclorofenol alcanforado, un grupo
1306 control negativo representado por discos de papel filtro embebidos en alcohol
1307 etlico al 70%; y un grupo experimental representado por discos de papel filtro
1308 embebidos con el aceite esencial de Minthostachys Mollis Griseb (mua) en
1309 concentraciones al 100%, 75%, 50% y 25%.
1310 In vitro porque el estudio se realiz en unos medios de cultivo que sirven para el
1311 desarrollo de los microorganismos, y se manej todo en un laboratorio.
1312 Prospectivo debido a que la recoleccin de los datos se realiz conforme la
1313 ocurrencia de los hechos.
1314 Transversal debido a que las variables fueron observadas en un solo momento de
1315 acuerdo a los objetivos de la investigacin.
1322
1323
1324
1325
1326
1327
1328
1331
1332
1333
1334
13353.4. MTODOS
1340Procedimiento:
1360Se prepararon los medios de transporte y de cultivo (caldo tioglicolato y agar schaedler).
1361b. Procedimiento:
1363Los pacientes que recibieron terapia endodntica presentaron piezas dentarias con
1364diagnstico de Periodontitis apical crnica. Se seleccion piezas dentarias sin tratamiento
1365endodntico previo: determinado clnicamente por presencia de una lesin cariosa, cambio
1366de coloracin y respuesta positiva a las pruebas de vitalidad pulpar al fro y al calor, existi
1367presencia de lesin periapical, que fue determinado por presencia de una imagen
1368radiolcida perirradicular en la radiografa periapical.
1374Despus se procedi a realizar la apertura cameral con el uso de fresa redonda mediana de
1375grano grueso, y a desinfectar la porcin coronal de la cmara pulpar con etanol 70%,
1376previo aislamiento de sta por medio de una bolilla de algodn.
1378- Se emple 2 ml. de suero fisiolgico al 9% como solucin irrigadora en la cmara pulpar
1379y en el canal radicular por considerarla inocua para los microorganimos presentes.
1380- Se realiz un leve debridamiento por 30 segundos con una lima Kerr #10 y as se pudo
1381conseguir una mxima suspensin de bacterias en el medio.
1382- Luego se insert puntas de papel seco y estril dentro del conducto radicular por un
1383espacio de 3 segundos.
1389La presente tcnica para la deteccin de Staphylococcus Aureus, se realiz de acuerdo a los
1390siguientes procedimientos:
1392Se suspendi 40 g del polvo en un litro de agua destilada. Se dej reposar 5 minutos y se
1393mezcl perfectamente hasta obtener una suspensin homognea. Luego se calent con
1394agitacin frecuente y se puso a hervir 1 minuto. Se esterilizo 20 minutos a 121C. se dej
1395enfriar a 45-50C y se agreg sangre desfibrinada al 5%. Por ltimo se homogenizo y se
1396distribuy en las placas.
1400 Siembra
1401Se realiz por inoculacin directa del material en estudio, sobre la superficie del medio de
1402cultivo por medio de un hisopo estril.
1403 Incubacin
1429
1431Se trat de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracin salina. Los
1432estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio; las colonias
1433aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante. Los estafilococos coagulasa negativos,
1434presentan colonias rodeadas de una zona roja o prpura. Las colonias sospechosas, se
1435repicarn en un medio sin exceso de cloruro de sodio para efectuarles, posteriormente, la
1436prueba de la coagulasa.
1441Las bacterias que crecen en un medio con alta concentracin de sal y fermentan el manitol,
1442producen cidos, con lo que se modifica el pH del medio y vira el indicador de pH del
1443color rojo al amarillo.
1447Los estafilococos que no fermentan el manitol, se visualizan como colonias rojas, rodeadas
1448de una zona del mismo color o prpura.
1449 b. Incubacin
1451 c. Identificacin
1452Se realiz la prueba de diferenciacin con el medio manitol salado, cuya caracterstica es
1453que el medio de color rosa virar a color amarillo por la presencia de la acidificacin y
1454confirmar la presencia del Staphylococcus aureus.18
1455
1456
1457
1461
1467a. Procedimiento
1473La prueba es positiva al visualizar una estructura elongada que se origina a partir de la
1474levadura.
1476Es un medio de cultivo muy utilizado para aislar hongos de animales. Sirve para el
1477aislamiento y mantenimiento de hongos en tubo inclinado. Debido a su composicin, los
1478hongos crecen exuberantemente y esporulan bien. Es el medio estndar para observar la
1479morfologa tpica de los hongos, pero no es el medio ideal de crecimiento o para estudiar la
1480esporulacin.
1481 Siembra
1482 Sembrar la cepa aislada en placa Petri que contenga agar papa dextrosa e incubar a
1483 42 C por 48 horas.
1484 Incubacin
1485
1488 Procedimiento:
1489Se esterilizo con este mtodo el siguiente material: pipetas, tubos de vidrio, matraces,
1490probetas, placas petri de vidrio, tubos de ensayo.
1492 Procedimiento:
1493 Se esterilizo el siguiente material: medios de cultivo, medios de diferenciacin.
1494
14953.4.7. Preparacin de los discos de sensibilidad
1496
1497 Se obtuvo discos a partir de papel filtro Watman N 4 con 6 mm de dimetro con un
1498 perforador y se colocaron en frascos estriles.
1499 Las concentraciones del aceite esencial de mua se diluyeron en alcohol al 70%.
1500 Los discos se empaparon con 20 l del aceite esencial de mua preparados a
1501 diferentes concentraciones (100 mg/ml, 0,75 mg/ml, 0,50 mg/ml, 0,25 mg/ml),
1502 luego se dejaron secar. Posteriormente se colocaron en frascos estriles y se
1503 diferenciaron las concentraciones de los discos de sensibilidad para evitar
1504 confusiones.
1505 Se colocaron a Temperatura ambiente y en un lugar seco hasta su uso.
1506
15073.4.8. Prueba de susceptibilidad microbiana
1508
1509 a. Mtodo de difusin en agar segn Kirby Bauer
1510
1511 Procedimiento:
1539Se procedi a la medicin de los halos inhibitorios del aceite de mua en sus diferentes
1540concentraciones con la escala Vernier o pie de rey.
1542Se realiz una ficha de datos en la cual se anotaron los resultados de la prueba de difusin
1543en agar con discos, clasificndolos dependiendo del resultado. La recoleccin de los datos
1544se realiz de forma manual y visualmente. Para la medicin de los halos se utiliz una
1545regla correctamente calibrada. Se verific cada una de las fichas para evitar errores u
1546omisiones en los datos que pudieran perjudicar la investigacin.
1547
1548
1549
1550
1551
1552
1553
1554
1555
1556
1565
1566Interpretacin:
1567Se presenta el valor medio del halo de inhibicin de las diferentes concentraciones del aceite
1568esencial de Minthostachys Mollis Griseb (mua) y del paramonoclorofenol alcanforado.
1569Encontrndose una media mayor del halo de inhibicin en el aceite esencial de mua al
1570100%(23,350) y una media menor del halo de inhibicin del aceite esencial de mua al
157125%(12,895).
1572
1573
1574
1575
1576
1582
1583
1584
1585
1587Interpretacin:
1588El ANOVA unifactorial indica que el p-valor o significancia asinttica es menor a 0,05, por
1589lo cual rechazamos la hiptesis nula y aceptamos la hiptesis alterna, la cual indica que
1590existe diferencias entre los 5 grupos de antibiticos, con respecto a los halos de inhibicin.
1591
1592
1593
1594
1595
1596
1597
1598
1599
1600
1601
1602
1603
1604
1605 Tabla n3: Prueba POST HOC a travs de HSD TUKEY (comparaciones mltiples)
1606 diferencias significativas entre los grupos de aceites y sus efectos sobre el Staphylococcus
1607 Aureus
1608
1609
1611
1612Interpretacin:
1613Existe una diferencia significativa del tamao del halo de inhibicin producido por los
1614aceites utilizados debido al nivel de significancia encontrado ya que para todos los casos es
1615< 0.05, por lo cual existe diferencia del efecto causado por los aceites sobre en
1616Staphylococcus aureus.
1617 Tabla n4: Subconjuntos de homogeneidad HSD TUKEY basados en las medias de los
1618 aceites esenciales de Minthostachys Mollis Griseb (mua) utilizados en la inhibicin
1619 del Staphylococcus Aureus
1620
1621Fuente: elaboracin personal
1623Interpretacin:
1624 Las medias de los halos de inhibicin de los aceites esenciales de Minthostachys Mollis
1625 Griseb (mua) utilizados presentan diferencias significativas entre s, por lo cual se ubican
1626 en subconjuntos de homogeneidad diferentes, as mismo los efectos causados por los
1627 aceites esenciales de Minthostachys Mollis Griseb (mua) sobre el Staphylococcus Aureus
1628 fueron diferentes.
1629
1630
1631
1632
1633
1634
1635
1636
1637
1638
1639 Grfico n1: distribucin de las medias de los halos de inhibicin del aceite esenciale de
1640 Minthostachys Mollis Griseb (mua) en sus diferentes concentraciones y del
1641 paramonoclorofenol alcanforado sobre Staphylococcus Aureus
1642
1643Fuente: elaboracin personal
1644Interpretacin:
1645Se observa la distribucin grfica de las medias de los diferentes aceites esenciales de
1646Minthostachys Mollis Griseb (mua) utilizados contra el Staphylococcus Aureus, es as que
1647la media ms elevada fue la alcanzada por el aceite de mua al 100%, seguida en segundo
1648el aceite de mua en concentracin del 75%. En tercer lugar se encuentra la concentracin
1649al 50%, en cuarto lugar se encuentra el Paramonoclorofenol Alcanforado y por ltimo el
1650aceite de mua en concentracin del 25%.
1651 Tabla n5: anlisis estadsticos descriptivos de la accin del aceite esencial de
1652 Mintostachys Mollis Griseb (mua) en sus diferentes concentraciones y del
1653 paramonoclorofenol alcanforado sobre el Enterococcus Faecalis
1655Fuente: elaboracin personal
1656Interpretacin:
1657Se presenta el valor medio del halo de inhibicin de las diferentes concentraciones del aceite
1658esencial de Minthostachys Mollis Griseb (mua) y del paramonoclorofenol alcanforado.
1659Encontrndose una media mayor del halo de inhibicin en el aceite de mua al
1660100%(15,828) y una media menor del halo de inhibicin del aceite de mua al 25%(9,884).
1661
1662
1663
1664
1665
1666
1667
1668
1670
1671
1672
1673
1674
1676Interpretacin:
1677El ANOVA unifactorial indica que el p-valor o significancia asinttica es menor a 0,05, por
1678lo cual rechazamos la hiptesis nula y aceptamos la hiptesis alterna, la cual indica que
1679existe diferencias entre los 5 grupos de aceites esenciales, con respecto a los halos de
1680inhibicin.
1681
1682
1683
1684
1685
1686
1687
1688
1689
1690
1691
1692
1698Interpretacin:
1699Existe una diferencia significativa de efecto del aceite esencial de mua al 100%, a
1700diferencia del aceite esencial de mua al 50% y 25%. Existe tambin una diferencia
1701significativa de efecto del aceite de mua al 75% a diferencia del aceite de mua al 25%.
1702Adems existe tambin una diferencia significativa de efecto del aceite de mua al 50% a
1703diferencia del aceite esencial de mua al 25%. Por ultimo existe tambin una diferencia
1704significativa de efecto del aceite esencial de mua al 25% a diferencia del
1705paramonoclorofenol alcanforado.
1706
1707 Tabla n8: Subconjuntos de homogeneidad HSD TUKEY basados en las medias de los
1708 aceites esenciales utilizados en la inhibicin del Enterococcus Faecalis
1709
1710
1711
1712
1713
1714
1715
1716 Fuente:
1717elaboracin personal
1718Interpretacin:
1719Las medias de los halos de inhibicin del aceite esencial de mua al 100%, 75% y del
1720paramonoclorofenol alcanforado, no presentan diferencias significativas por lo cual se
1721encuentran en un subconjunto, al igual que el aceite esencial de mua al 75%, 50% y el
1722paramonoclorofenol alcanforado que tambin se ubican en otro subconjunto, a diferencia
1723del aceite esencial de mua al 25% que difieren significativamente de los dems.
1724
1725
1726 Grafico n2: Distribucin de las medias de los halos de inhibicin del aceite esencial de
1727 mua en sus diferentes concentraciones y del paramonoclorofenol alcanforado sobre
1728 Enterococcus Faecalis
1730
1731Interpretacin:
1732Se observa la distribucin grafica de las medias de los diferentes aceites utilizados contra
1733el Enterococcus faecalis, es as que la media ms elevada fue la alcanzada por el aceite
1734esencial de mua al 100%,seguida en segundo lugar por el paramonoclorofenol
1735alcanforado, en tercer lugar se encuentra la concentracin al 75%, en cuarto lugar se
1736encuentra el aceite de mua en concentracin del 50%.y por ltimo el aceite de mua en
1737concentracin del 25%.
Tabla n9 : Anlisis estadsticos descriptivos de la accin del aceite esencial de mua en
sus diferentes concentraciones y del paramonoclorofenol alcanforado sobre Candida
albicans
1740Interpretacin:
1741Se presenta el valor medio del halo de inhibicin de las diferentes concentraciones del aceite
1742esencial de mua y del paramonoclorofenol alcanforado. Encontrndose una media mayor
1743del halo de inhibicin en el aceite esencial de mua al 75%(15,363) y una media menor del
1744halo de inhibicin del aceite esencial de mua al 25%(11,570).
1745
1746
1747
1748
1749
1750
1751
1752
1753
1754
1755
Tabla n 10: Anlisis de la varianza (ANOVA) unifactorial de la accin del aceite esencial
de mua en sus diferentes concentraciones y del paramonoclorofenol alcanforado sobre
Cndida Albicans
1757Interpretacin
1758El ANOVA unifactorial indica que el p-valor o significancia asinttica es menor a 0,05, por
1759lo cual rechazamos la hiptesis nula y aceptamos la hiptesis alterna, la cual indica que
1760existe diferencias entre los 5 grupos de aceites esenciales, con respecto a los halos de
1761inhibicin.
1762
1763
1764
1765
1766
1767
1768
Tabla n11: Prueba POST HOC a travs de HSD TUKEY (comparaciones mltiples)
diferencias significativas entre los grupos de aceites y sus efectos sobre la Cndida Albicans
1770Interpretacin:
1771Existe una diferencia significativa de efecto del aceite de mua al 100%, 75% y 50% a
1772diferencia del aceite de mua al 25% y el paramonoclorofenol alcanforado. Existe tambin
1773una diferencia significativa de efecto del aceite de mua al 25% a diferencia del aceite de
1774mua al 100%, 75%, 50% y el paramonoclorofenol alcanforado.
1775
1779
1781
1782Interpretacin:
1783Las medias de los halos de inhibicin del aceite de mua al 100%, 75%, 50% no presentan
1784diferencias significativas por lo cual se encuentran en un subconjunto, a diferencia del
1785aceite de mua al 25% y el paramonoclorofenol alcanforado que difieren
1786significativamente de los dems.
1787
1788
1789
1790
1791
1792
1793 Grafico n3: Distribucin de las medias de los halos de inhibicin del aceite esencial de
1794 mua en sus diferentes concentraciones y del paramonoclorofenol alcanforado sobre la
1795 Cndida Albicans
1796
1797
1799Interpretacin:
1800Se observa la distribucin grafica de las medias de los diferentes aceites esenciales
1801utilizados contra la Cndida Albicans, es as que la media ms elevada fue la alcanzada por
1802el aceite de mua al 75%,seguida en segundo lugar por su concentracin al 50%, en tercer
1803lugar se encuentra la concentracin al 100%, en cuarto lugar se encuentra el
1804paramonoclorofenol alcanforado y por ltimo el aceite de mua en concentracin del 25%.
1805 IV.2. DISCUSIN
1806
1807El objetivo del presente estudio fue determinar el efecto inhibitorio invitro del aceite
1808esencial de Minthostachys Mollis Griseb (mua) sobre microorganismos prevalentes en
1809patologas periapicales crnicas de origen endodntico Una Puno 2016
1822Alaba W. en el 2014 en su estudio. Efecto inhibitorio in vitro del aceite esencial de las
1823hojas de Minthostachys Mollis Griseb (mua) sobre colonias de Enterococcus faecalis
1824ATCC 29212, se evalu la susceptibilidad in vitro llegando a la conclusin que el aceite
1825esencial de Minthostachys Mollis Griseb (mua) al 100% posee mayor actividad
1826inhibitoria in vitro sobre el crecimiento del E. faecalis que el IKI al 2% y la dilucin
1827etanlica de aceite esencial al 50%. 12. Estos resultados son semejantes a los obtenidos en el
1828presente estudio, evidenciando asi la eficacia que posee el aceite de mua al 100% sobre
1829las cepas de Enterococcus faecalis.
1830
1831
1832
1833
1834
1835 V. CONCLUSIONES
1836
1838El aceite de Minthostachys Mollis Griseb (mua), presento una gran actividad inhibitoria
1839sobre las muestras de microorganismos en estudio: Enterococcus Faecalis, Staphylococcus
1840Aureus y Candida Albicans, esta actividad inhibitoria fue mayor a la del
1841Paramonoclorofenol Alcanforado.
1843La actividad del aceite de Minthostachys Mollis Griseb (mua) sobre las cepas de
1844staphylococcus aureus, evidencio una mayor efectividad del aceite de mua al 100% por
1845encima de la actividad del paramonoclorofenol alcanforado el cual solo supera a la
1846efectividad del aceite de mua al 25%
1848La actividad del aceite de Minthostachys Mollis Griseb (mua) sobre las cepas de
1849Enterococcus Faecalis, evidencio una mayor efectividad del aceite de mua al 100% por
1850encima de la actividad del paramonoclorofenol alcanforado el cual supera a la efectividad
1851del aceite de mua al 75%, 50% y 25%
1853La actividad del aceite de Minthostachys Mollis Griseb (mua) sobre las cepas de Cndida
1854Albicans, evidencio una mayor efectividad del aceite de mua al 75% seguida de la
1855concentracin del aceite al 50% y 100%, superando as la actividad del
1856Paramonoclorofenol Alcanforado, el cual solo supera la actividad inhibitoria de la
1857concentracin al 25% del aceite de Mua.
1858
1859
1860
1861
1881
1882
1883
1884
1885
1886
1887
1888
1889
19077. Gonzalez J. Estudio in vitro del sellado de conductos obturados con gutapercha y
1908sellador ah26 mediante la tcnica de la condensacin lateral de la gutapercha en fro. (tesis
1909doctoral)Universidad de Valencia. Espaa. 2006.
19129. ROADMAPPING PER. El futuro de los productos andinos en la regin alta y los
1913valles centrales de los andes plantas medicinales. ANDEAN PRODUCT. Junio 2006.
1974
1975
1976
1977
1978
1979
1980
ANEX
OS
1981
1982
1983
1984
1985
1986
1987
1988
1989
1990
1991
1993
1994
1995
1996
1997
1998
1999
2000
2001
2002
2003
2004
2005
2006
2007
2008
2009
FOTOGRAFIAS
2010
2011
2014
2015
2016
2017
2018
2022
2023
2034
2035
2036
2037
2038
2039 5. OBTENCION DEL ACEITE ESENCIAL DE MINTHOSTACHYS MOLLIS
2040 MUA
2042
2043
2044
2045
2046
2047
2048
2049
2050
2051
2052
2053
2054
2058
2059
2062
2063 8.
2064 8.
2065 8.
2066 8.
2067 8.
2068 8.
2069 8.
2070 8.
2071 8.
2072 8.
2073 8.
2074 8.
2075 8.
2076 8.
2077 8.
2078 8.
2079 SANGRE Y MEDIO BASE PREVIOS A SU MEZCLA
2064
2065
2066
2067 9. PLAQUEADO
2068
2069
2070 10. SIEMBRA
2071
2072
2073
2074
2075
2078
2081
2082
2083
2084
2085
2088
2089
2092
2093
2094
2095
2096 15.
2097 15.
2098 15.
2099 15.
2100 15.
2101 15.
2102 15.
2103 15.
2104 15.
2105 15.
2106 15.
2107 15.
2108 15.
2109 15.
2110 15.
2111 15.
2112 15.
2113 CEPAS AISLADAS DE CANDIDA ALBICANS
2097
2098
2099 16. CEPAS
2100 AISLADAS
2101 DE
2104
2105
2114
2115
2116 21. PREPARACION DE LAS CONCENTRACIONES DEL ACEITE DE MUA
2117
2118
2122
2123
2124
2130
2131 25. INCUBADORA 37 C
2132
2133 26.
2134 26.
2135 26.
2136 26.
2137 26.
2138 26.
2139 26.
2140 26.
2141 26.
2142 26.
2143 26.
2144 26.
2145 26.
2146 26.
2147 26.
2148 26.
2149 26.
2150 26.
2151 26. MEDIDA DEL
2152 HALO DE
2153 INHIBICION DEL
2154 ENTEROCOCCUS
2155 FAECALIS
2138
2139
2140
2141
2142
2143
2144
2145
2146
2147
2148
2149
2150
2151
2155
2156
2157
2158
2159
2160
2161
2162
2163
2164
2165
2166
2167
2170
2171
2172
2173
2174
2175
2176
2177
2178
2179
2180
2181
2182
2183
2184
2185
2186
2187