9

AULA
Propriedades qumicas
dos aminocidos I
Meta da aula
Apresentar as propriedades qumicas dos
aminocidos que os fazem capazes de
receber ou doar prtons.
objetivos

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:

caracterizar o comportamento de um aminocido

1
em soluo aquosa;

2
definir a carga lquida de um aminocido de
acordo com seu estado de protonao;

relacionar o grupamento do aminocido com seu

3
pK de dissociao;

identificar o estado de protonao de um

4 aminocido de acordo com o pH em que este se
encontra.

Pr-requisitos
Para acompanhar com tranqilidade esta aula,
importante que voc tenha em mente como funciona uma
substncia tampo, o que voc aprendeu na Aula 7.
Alm disso, no deixe de rever tambm, nessa mesma
aula, o que pK de uma substncia!
Bioqumica I | Propriedades qumicas dos aminocidos - I

INTRODUO Na aula passada, voc aprendeu que a estrutura genrica de um aminocido

formada por um carbono D ligado a uma amina (NH3+), uma carboxila
(COOH), um hidrognio (H) e um radical R varivel. Os diferentes radicais R
que fazem com que tenhamos muitas estruturas de aminocidos possveis,
dentre as quais apenas vinte aparecem como formadoras de protenas.
As protenas so molculas fundamentais vida e tm diversas funes
no nosso organismo. Uma das funes que as protenas podem assumir
funcionarem como catalisadoras (aceleradoras) de reaes qumicas. Protenas
que tm essa funo so denominadas enzimas.
Uma enzima precisa, muitas vezes, receber ou doar prtons para uma outra
molcula, transformando-a. Um exemplo?
Quando fazemos exerccio fsico intenso, comum que nosso msculo comece
a trabalhar com pouco oxignio, fazendo unicamente a quebra de glicose
para gerar energia. O produto final deste processo uma molcula chamada
piruvato. O piruvato, em uma situao anaerbica (de pouco oxignio), no
tem nenhum destino e tenderia a se acumular dentro da clula. S que isso
no acontece, pois ns temos uma enzima capaz de converter o piruvato em
uma outra molcula, o lactato. Nesta reao, h duas vantagens: (1) acontece
a regenerao de um composto necessrio para que a quebra da glicose
continue acontecendo e (2) o lactato gerado pode ser secretado na corrente
sangnea, no se acumulando no msculo. Por que estamos falando tudo
isso? Veja as estruturas do piruvato e do lactato:

NADH NAD+

Lactato
desidrogenase
Piruvato Lactato

Figura 9.1: O produto final da quebra da glicose chamado de piruvato. O piruvato

convertido em lactato pela adio de hidrognios na sua molcula (sinalizado com
a seta larga). Quem faz essa reao uma enzima chamada lactato desidrogenase,
que pega o H do NADH. Para pegar esse H, a enzima precisa ser capaz de lig-lo
a ela e depois transferi-lo para outro composto. O NAD+ gerado importante para
a quebra da glicose continuar acontecendo.

176 C E D E R J
 MDULO 1
O lactato muito parecido com o piruvato, diferindo apenas pelo H que

9
foi adicionado ao oxignio apontado com a seta larga. Os hidrognios

AULA
adicionados vieram de um composto chamado NADH. O NADH doou
o seu H para a lactato desidrogenase, que foi capaz de se ligar a esse
hidrognio. Isso s aconteceu porque, no stio ativo desta enzima, h
aminocidos capazes de receber um hidrognio e, em seguida, transferi-lo
para o piruvato, convertendo-o em lactato.
Concluindo, as enzimas so capazes de receber e doar prtons por causa
dos aminocidos que as compem. A importncia de um fenmeno como
este muito grande, pois uma enormidade das reaes no nosso organismo
acontece por adio ou retirada de hidrognios catalisadas por enzimas. Voc
ter melhor dimenso disso em Bioqumica II.
Agora que voc j tem uma idia de como importante um aminocido doar
ou receber prtons, que tal entender como isso funciona, de fato?

O COMPORTAMENTO DOS AMINOCIDOS EM SOLUO

Quando um L-aminocido dissolvido em gua, ele pode

apresentar uma regio carregada positivamente (a parte da amina NH3+)
e uma regio carregada negativamente (a parte da carboxila COO).
Isso sempre acontece em pH 7,0. Veja a Figura 9.2:

Figura 9.2: Em pH 7,0, um aminocido apresenta uma regio carregada positivamente

(amina) e outra carregada negativamente (carboxila). ZWITERION
Vem do alemo on
hbrido e significa
Quando uma molcula apresenta duas cargas distintas em duas que uma molcula
tem uma parte com
regies da sua estrutura, dizemos que essa molcula um on dipolar, carga negativa e outra
com carga positiva,
tambm chamado de ZWITERION ou anflito. Essa dualidade de cargas
podendo funcionar
faz com que o aminocido possa atuar tanto como cido quanto como tanto como cido
quanto como base de
base (Figura 9.3). Bronsted-Lowry.

C E D E R J 177
Bioqumica I | Propriedades qumicas dos aminocidos - I

!
Cuidado para no confundir!
Voc acabou de ver que um aminocido pode ter uma regio com carga
positiva e outra com carga negativa, sendo um on dipolar. Cuidado para
no confundir com o que aprendeu sobre a gua, que tambm chamada
de dipolar, mas NO apresenta cargas reais como os aminocidos, apenas
cargas parciais, geradas pelo deslocamento da nuvem eletrnica para perto
do tomo de oxignio.

Comportamento de base

Comportamento de cido

Figura 9.3: Um aminocido pode se comportar como uma base, recebendo um prton
e ficando com carga positiva, ou como um cido, doando um prton e ficando com
um excesso de eltrons (carga negativa).

Qual dos dois comportamentos a molcula vai assumir depender

de uma mudana de pH no meio, para cido ou para bsico.
Ento, vamos a alguns exemplos. O que aconteceria se dissolvssemos
um aminocido em pH 2 (soluo cida)?

Mudana de pH e concentraes de H+
Vale a pena lembrarmos que a escala de pH varia de forma logartmica.
Isso quer dizer que se mudarmos o pH de 7 para 6, por exemplo, estamos
aumentando a concentrao de prtons na soluo em 10 vezes e no
em uma vez, como poderia parecer. Se mudarmos o pH de 7 para 5,
aumentamos a concentrao de hidrognios livres em 100 vezes e assim
por diante. Por outro lado, se subirmos o pH de 7 para 9, diminumos a
concentrao de prtons em 100 vezes. Podemos diminuir o pH de uma
soluo adicionando cidos como, por exemplo, cido clordrico e cido
sulfrico. Podemos tambm aumentar o pH de uma soluo adicionando
uma base, como hidrxido de sdio ou hidrxido de potssio. Para
refrescar sua memria, reveja a Aula 6.

178 C E D E R J
 MDULO 1
Se dissolvermos o aminocido em pH 2 (soluo cida), ocorrer

9
a entrada de prtons na molcula do aminocido, j que neste pH a

AULA
quantidade de prtons livres 100.000 vezes maior do que em pH 7. Com
esta concentrao de prtons muito mais elevada, aliada presena de
grupos protonveis neste valor de pH, a tendncia ser esses prtons se
ligarem molcula de aminocido. Assim, um aminocido em pH cido
tender a receber prtons, ou seja, a se comportar como uma base.

ATIVIDADE

1
1. Caracterizando o comportamento de um aminocido
Na seqncia do que voc acabou de aprender nesta aula sobre aminocidos
que se comportam diferentemente dependendo do pH da soluo em que
se encontram, se dissolvermos o aminocido em uma soluo com pH 9
(soluo bsica):
a. Quantas vezes a concentrao de H+ desta soluo maior ou menor
do que em uma soluo com pH 7?
________________________________________________________________
________________________________________________________________
b. Os prtons tendero a se agregar ou a se dissociar dos grupamentos
protonveis da molcula? Assim, o aminocido est exibindo comportamento
de cido ou de base?
________________________________________________________________
________________________________________________________________

RESPOSTAS COMENTADAS
Em uma soluo de pH 7, a [H+] = 107, enquanto em uma soluo
de pH 9 a concentrao de H+ 109, ou seja, 100 vezes menor
do que em uma soluo de pH 7. Portanto, se dissolvermos o
aminocido em uma soluo com pH 9 (soluo bsica), na qual
a concentrao de prtons livres 100 vezes menor do que em pH
7, ocorrer a sada de prtons da molcula do aminocido.

C E D E R J 179
Bioqumica I | Propriedades qumicas dos aminocidos - I

Estes dois casos extremos que voc acabou de ver (pH muito cido e muito
alcalino) podem parecer drsticos e pouco realsticos, mas na verdade no
so, pois nosso organismo no se mantm sempre em pH neutro:
no estmago, onde se d a digesto das protenas, o pH pode chegar
a 1,5 ou 2, provvel que os aminocidos a encontrem em situao
bastante parecida com a primeira;
nos lisossomas das nossas clulas, onde muitas de nossas protenas so
degradadas e recicladas, o pH pode atingir valores em torno de 5;
muitas bactrias podem viver em ambientes de pHs tanto muito cidos
como muito bsicos.

O fato de um aminocido ser capaz de receber ou de doar prtons

de acordo com a concentrao de H+ a que submetida lembra algo que
voc aprendeu nas ltimas aulas?
Pense um pouco: se voc adicionar prtons a uma soluo e estes
prtons imediatamente se associarem a uma molcula (portanto, no
ficarem livres), o pH da soluo vai ser alterado imediatamente?
Ora, em situaes como a descrita anteriormente, ou seja,
adio de H+ sem alterao do pH, a molcula presente na soluo est
funcionando como um tampo! Veja na seo a seguir, com mais detalhes,
como os aminocidos podem exercer este papel!

CURVAS DE TITULAO DOS AMINOCIDOS

Vamos tomar como exemplo a glicina (Figura 9.4), j que o

aminocido mais simples de todos, e observar o que ocorre com sua
molcula quando ela exposta variao de pH.

Glicina

Figura 9.4: A estrutura da glicina em pH neutro (7,0). O grupamento lateral est

destacado em cinza-claro e os grupamentos ionizveis, em cinza-escuro. Em pH 7,
a molcula se apresenta com uma carga positiva sobre sua poro amino (NH3+) e
com uma carga negativa sobre a poro carboxlica (COO).

180 C E D E R J
 MDULO 1
Em pH cido, por exemplo, pH 1, conforme voc j sabe, a

9
concentrao de H+ livre alta. Em uma situao como essa, a tendncia

AULA
desses prtons de se agregarem s molculas que sejam capazes de
receber um prton, como o caso dos aminocidos. Neste pH, como
existe muito H+ livre, a glicina est completamente protonada, isto , sua
carboxila recebeu um prton (est na forma COOH) e o seu grupamento
amino na forma NH3+. Enquanto a carboxila vai seqestrando prtons
do meio, o pH da soluo se mantm constante. Observe a Figura 9.5,
ainda utilizando a glicina como exemplo, e entenda molecularmente o
que est acontecendo:

Em pH 7... Aumentando a acidez... Em pH 1...

Glicina
Glicina

Glicina

Figura 9.5: Em pH neutro, a glicina apresenta sua carboxila ionizada (COO-). Em pH cido, por exemplo, 1, a
concentrao de H+ alta (representada pelos H+ em torno da glicina) de tal maneira que o grupamento carboxila
protonado (recebe um prton do meio).

Em pH neutro, a glicina encontrava-se com a carboxila dissociada

(COO ). Em pH cido, a glicina fica completamente protonada, ou seja,
com sua carboxila na forma COOH e o seu grupamento amino na forma
NH3+. Por ter recebido um prton que neutralizou sua carga negativa
(COO o COOH), sua carga lquida passou a valer +1.
E se adicionarmos a esta soluo de pH 1 gotas de uma base forte,
como KOH (hidrxido de potssio), por exemplo? Uma base forte se
dissocia imediatamente em soluo aquosa; o pH tender a subir j que
a hidroxila (OH) do KOH roubar os prtons livres da soluo,
formando gua (H+ + OH o H2O). A associao entre H+ e OH far

C E D E R J 181
Bioqumica I | Propriedades qumicas dos aminocidos - I

com que a concentrao de H+ no meio diminua; com menos prtons

livres, o pH sobe para valores mais altos.
Ao alcanar o pH 7, voc j sabe como estar a frmula da glicina
(volte Figura 9.4). Vamos, ento, continuar adicionando mais hidrxido
de potssio. O pH continuar a subir at um ponto em que, mesmo
colocando mais hidrxido de potssio, ele passa a no se alterar muito.
O que est ocorrendo neste momento? Veja a Figura 9.6:

Em pH cido Em pH neutro Em pH bsico

Glicina Glicina parcialmente Glicina

protonada protonada desprotonada

Figura 9.6: Dependendo do pH em que o aminocido se encontra, seus grupamentos

se encontraro protonados ou desprotonados. Em pH cido, a alta concentrao
de H+ faz com que todos os grupamentos estejam completamente protonados; em
pH neutro, s metade dos grupamentos est protonado; por fim, quando o pH
bsico, a baixa concentrao de H+ no meio promove a dissociao destes ons do
aminocido, fazendo com que ele se encontre 100% desprotonado.

Nesse valor de pH, o grupamento COOH da glicina comea a

perder seu prton (passando forma COO). Os prtons da soluo,
roubados pela hidroxila adicionada, so compensados pelos prtons
liberados pela carboxila da glicina, o que faz com que o pH no se
altere. Podemos dizer que ela atuou como um tampo, pois, ao perder
o hidrognio da carboxila, evitou que o pH da soluo subisse muito.
A carga lquida do aminocido nesta situao -1 (Figura 9.7).

182 C E D E R J
 MDULO 1
Observe o Grfico 9.1. Se continuarmos a adicionar mais hidrxido

9
de potssio, todas as molculas de glicina perdero seu hidrognio da

AULA
carboxila e, ento, o pH da soluo voltar a subir muito rapidamente.
Sua carga lquida nesse ponto nula (Figura 9.7).

Grfico 9.1: Comportamento do pH de uma soluo de glicina a partir da adio

de uma base forte

13
12
11
10
9
8
pH 7
6
5
4
3
2
1
0
0 0,5 1 1,5 2

Quantidade de OH adicionada (em equivalentes)

Adicionando mais e mais hidrxido de potssio, percebemos que

h um segundo momento no qual o pH da soluo no se altera mais.
E agora, o que ser que est acontecendo?
A resposta simples. Uma vez que adicionamos muito hidrxido
de potssio, o pH da soluo ficou em torno de 8 ou 9, ou seja, a
concentrao de prtons livres ficou muito baixa e a concentrao de
hidroxilas livres tornou-se relevante. O grupamento amino da glicina
passa a perder seu prton (NH3+ o NH2) que se junta s hidroxilas
provenientes da base, formando gua. Com isso, o pH da soluo fica
inalterado. Sua carga neste ponto 1 (Figura 9.7) e o pH da soluo
j est bsico (acima de 7).

C E D E R J 183
Bioqumica I | Propriedades qumicas dos aminocidos - I

Em pH cido Em pH neutro Em pH bsico

Carga lquida = +1 Carga lquida = 0 Carga lquida = 1

Figura 9.7: Resumo do que ocorre com a glicina quando o pH da soluo sobe. Em
pH cido, todos os grupamentos esto protonados, a carga da carboxila nula e a
do grupamento amino, +1; em pH neutro, a carboxila est desprotonada (carga 1)
e a amina, protonada (+1), fazendo com que a carga lquida da glicina seja nula.
Em pH bsico, todos os grupamentos esto desprotonados: a carboxila vale 1 e a
amina no tem carga.

!
Quantidade de H+ no aminocido x Quantidade de H+ no meio
Analisando a relao entre a quantidade de prtons em um aminocido em
relao ao meio em que este se encontra, podemos dizer que:
em um meio cido, a concentrao alta de prtons faz com que estes
se associem aos aminocidos. Assim, em pH cido, os aminocidos esto
completamente protonados;
em um meio alcalino, a concentrao de prtons baixa de tal maneira que
faz com que os prtons da molcula de aminocido se dissociem e fiquem
livres no meio. Assim, em pH bsico, os aminocidos esto completamente
desprotonados;
em pH neutro (7,0), a carboxila est dissociada (est na forma COO) e a
amina est protonada (NH3+).

184 C E D E R J
 MDULO 1
ATIVIDADE

9
AULA
2
2. Qual a carga?
Veja a estrutura dos aminocidos a seguir:

Leucina Isoleucina

A leucina e a isoleucina, assim como a glicina, so dois aminocidos

apolares. Eles apresentam grupamentos laterais quase iguais, no fosse
pela organizao diferenciada dos tomos de carbono. Sobre esses dois
aminocidos, responda:

a. Qual o estado de protonao destas molculas?

Leucina: ( ) completamente protonado
( ) parcialmente protonado
( ) completamente desprotonado

Isoleucina: ( ) completamente protonado

( ) parcialmente protonado
( ) completamente desprotonado

b. As estruturas apresentadas tm que carga lquida?

Leucina: ( ) +1 ( ) zero ( ) 1
Isoleucina: ( ) +1 ( ) zero ( ) 1

c. Em pH cido, portanto, as cargas lquidas dessas molculas seriam:

Leucina: ( ) +1 ( ) zero ( ) 1
Isoleucina: ( ) +1 ( ) zero ( ) 1

d. Em pH alcalino, portanto, as cargas lquidas dessas molculas seriam:

Leucina: ( ) +1 ( ) zero ( ) 1
Isoleucina: ( ) +1 ( ) zero ( ) 1

C E D E R J 185
Bioqumica I | Propriedades qumicas dos aminocidos - I

RESPOSTAS COMENTADAS

Leucina Isoleucina

Repare que as estruturas da leucina e da isoleucina esto com uma

carga positiva sobre a amina e uma carga negativa sobre a carboxila.
Isso significa que as molculas j sofreram desprotonao de um
de seus grupamentos ionizveis (esto parcialmente protonadas).
No estado em que esto representadas, tanto uma quanto outra
molcula tm carga lquida zero.
Este estado de protonao de ambas condizente com uma regio
de pH em torno de 7, ou seja, neutra. Se colocssemos estas duas
substncias em pH cido, a alta concentrao de prtons faria com
que a carboxila ficasse na forma COOH, e as molculas estariam
completamente protonadas. A carga lquida, em pH cido, portanto,
seria +1 (COOH = neutro e NH3+ = +1). J em pH alcalino, a situao
se inverteria. As molculas liberariam seus prtons para o meio, os
quais iriam reagir com hidroxilas livres formando gua. Totalmente
desprotonadas, as molculas estariam com carga negativa no
grupamento COO e nenhuma carga sobre o grupamento amino,
o que, na soma, perfaz uma carga lquida de 1.

186 C E D E R J
 MDULO 1
Resumindo, h pelo menos dois momentos em que um

9
aminocido pode impedir alteraes no pH de uma soluo, ou seja,

AULA
pode agir como tampo.
Momento 1:
Quando o aminocido est em meio bastante cido, est comple-
tamente protonado (grupamentos nas formas COOH e NH3+). Neste
momento, se adicionarmos uma base soluo, o pH comear a subir at
uma determinada regio (que depende do aminocido em questo, mas que
ainda na faixa de pH cido), e as carboxilas comearo a sofrer dissociao
(COOH o COO), liberando prtons no meio e mantendo a concentrao
de H+ constante. Em pH 7,0, os aminocidos encontram-se com a carboxila
D desprotonada (carga negativa) e a amina protonada (carga positiva).
Momento 2:
Quando um aminocido est em um meio de pH neutro e
continuamos a adicionar uma base a este meio, o pH da soluo subir
at um determinado ponto, na faixa do bsico. Neste momento, os
grupamentos amino comearo a se dissociar (NH3+ oNH2), liberando
prtons para o meio. Estes prtons reagiro com as hidroxilas livres
formando gua e, por alguns instantes, por mais que adicionemos mais
base, o pH se manter constante.
Assim como todo tampo, o comportamento da glicina em uma
soluo em que ocorre mudana de pH pode tambm ser expresso por
uma curva de titulao. Reveja o Grfico 9.1.
Repare que h neste grfico duas regies destacadas: uma em
pH cido e outra em pH alcalino. Nestas duas regies, a inclinao
da curva se altera, ficando menos acentuada. Isso significa que, nesses
trechos, hidroxilas esto sendo adicionadas sem que haja uma alterao
expressiva do pH da soluo.
Isso acontece porque este aminocido se comporta como um cido
fraco, liberando prtons de acordo com a mudana de pH do meio.
Como a glicina tem dois grupamentos capazes de liberar um prton
cada um, existem duas faixas de pH em que este aminocido funciona
como um tampo.

C E D E R J 187
Bioqumica I | Propriedades qumicas dos aminocidos - I

De posse dessas informaes, pense um pouco: ser que existe

uma ordem na remoo dos prtons que esto presos molcula do
aminocido? Ou ser que os prtons saem sempre juntos, independente
do grupo ao qual esto presos? Se h uma ordem, qual grupamento
perde prton primeiro durante a curva de titulao, a carboxila ou o
grupamento amino?
A resposta para estas questes no difcil. A carboxila um
grupamento cido, cuja tendncia de perder prtons quando colocada
em soluo aquosa. A afinidade da carboxila pelo prton no muito
elevada. J o grupamento amino (NH3+) se comporta como uma base
de Bronsted-Lowry, ou seja, uma molcula que costuma receber um
prton. O grupamento amino, portanto, um grupamento que tem
grande afinidade por prtons.
Desta forma, de fato existe uma ordem na sada dos prtons da
molcula do aminocido. Os grupamentos que tm mais facilidade de perder
seus prtons o fazem nas primeiras adies de hidroxila. Os grupamentos
que tm mais afinidade pelos seus prtons, perdem-nos apenas quando
a quantidade de hidroxila adicionada muito alta, ou seja, em pH mais
bsico. exatamente a menor ou a maior afinidade de um grupamento
por seu prton que vai determinar a forma da curva de titulao.

Entendendo afinidade
Podemos comparar o compor-
tamento dos aminocidos em
solues cujo pH est variando (de
cido a bsico), grosseiramente, ao
que ocorre, por exemplo, quando
o vento sopra em uma rvore com
folhas amarelas (que esto fracamente
presas ao galho) ou com folhas verdes,
jovens e bem fixadas ao galho.
Obviamente, as folhas amarelas so
as primeiras a cair ao cho, e s com
um vento mais forte que as folhas
verdes, ento, caem.
No nosso caso, o vento a hidroxila
que estamos adicionando soluo de aminocidos e as folhas amarelas
e verdes so os prtons que devem cair ou sair da molcula.
Obviamente, os prtons que so como as folhas amarelas (que esto
menos presos) so primeiramente removidos da molcula, e os prtons
que so como as folhas verdes so removidos posteriormente.
Logo, fazendo a analogia entre um aminocido e a nossa rvore de
folhas amarelas e verdes, o prton da carboxila tipo folha amarela
e o prton do grupo amino tipo folha verde!

188 C E D E R J
 MDULO 1
Outra coisa importante para voc reparar que h um ponto

9
assinalado na curva em torno do pH 2,3, bem no meio da regio

AULA
destacada. Esse ponto representa o pK dos grupamentos carboxila do
aminocido, ou seja, o valor de pH no qual metade das carboxilas est
protonada e a outra metade est desprotonada (Figura 9.8).

13
12
11
10
50% COOH e 50% COO
9
8 4 pK1 = 2,34
pH 7
6 3
pH
5
2
4
3 1
2
1 0
0 0 0,5 1
0 0,5 1 1,5 2 Quantidade de OH
Quantidade de OH

Figura 9.8: Detalhe do Grfico 9.1, destacando a regio onde o tamponamento

acontece por desprotonao da carboxila. O ponto assinalado na curva (pH em
torno de 2,3) representa o pK deste grupamento carboxila, ou seja, o valor de pH
em que metade dessas COOH est protonada e metade no. Para a glicina, este pK
vale precisamente 2,34.

Observe agora a regio destacada do grfico em torno do pH 9,5,

onde tambm h um ponto assinalado. O que este ponto representa?
____________________________________________________________
____________________________________________________________
Na faixa de pH bsico, o grupamento amino se dissocia, liberando
um prton (NH3+ o NH2). O ponto assinalado revela o pK deste
grupamento, ou seja, o valor de pH no qual metade das aminas est
protonada e a outra metade est desprotonada (Figura 9.9).

C E D E R J 189
Bioqumica I | Propriedades qumicas dos aminocidos - I

13
12
11 50% NH3+ e 50% NH2
10 13
9 12
8
11 pK2 = 9,60
pH 7
6 pH 10
5
4 9
3 8
2 0
1 0 0,5 1 1,5 2
0 Quantidade de OH
0 0,5 1 1,5 2

Quantidade de OH

Figura 9.9: Detalhe do Grfico 9.1, destacando a regio onde o tamponamento

acontece por desprotonao da amina. O ponto assinalado na curva (pH em torno
de 9,5) representa o pK deste grupamento amino, ou seja, o valor de pH em que
metade dessas NH3+ est protonada e metade no. Para a glicina, este pK vale
precisamente 9,60.

Por que esta explicao toda sobre pKs? Para voc ver como, de
fato, os aminocidos so tampes: eles possuem grupamentos ionizveis,
os quais se dissociam em um determinado valor de pH. Assim como para
os tampes que voc aprendeu na Aula 7, o valor de pH em que voc
encontra metade de um grupamento ionizvel do aminocido protonado
corresponde ao pK deste grupamento.

CONCLUSO

Um aminocido possui pelo menos dois grupamentos capazes de

liberar prtons quando est em soluo: a carboxila D e a amina D, isto ,
os grupamentos carboxila e amina ligados ao carbono D da molcula de
aminocido. Estes dois grupamentos fazem com que a curva de titulao
de um aminocido revele, pelo menos, dois pKs.
Aminocidos cujos grupamentos laterais apresentam radicais
ionizveis (capazes de se dissociar) apresentaro mais de dois pKs. isso
que voc aprender na aula que vem!

190 C E D E R J
 MDULO 1
ATIVIDADE FINAL 3 4

9
AULA
pH, pK e estrutura dos aminocidos

As propriedades que tornam as protenas fundamentais vida esto diretamente

relacionadas com as caractersticas qumicas dos aminocidos que as compem.
A seguir, voc encontra dois aminocidos apolares, a alanina e a valina, cada um
com seus pKs representados. Suas tarefas so:

a. Relacionar os pKs aos grupamentos a que eles se referem (se so pKs para
dissociao da COOH ou da NH3+);

Alanina:

- pK1 = 2,4 ( ) carboxila ( ) amina

- pK2 = 9,7 ( ) carboxila ( ) amina

Valina:

- pK1 = 2,3 ( ) carboxila ( ) amina

- pK2 = 9,6 ( ) carboxila ( ) amina

b. Identificar (circulando) qual a estrutura destes dois aminocidos em pH 5

(analise novamente os pKs apresentados na letra a).

Alanina:

Valina:

C E D E R J 191
Bioqumica I | Propriedades qumicas dos aminocidos - I

c. Agora, considere que esses aminocidos esto em uma soluo de pH 11. Circule
a estrutura correspondente a cada aminocido nesta condio:

Alanina:

Valina:

RESPOSTAS COMENTADAS
De acordo com o que voc aprendeu nesta aula, os aminocidos se
comportam em soluo aquosa como cidos fracos. Isso o mesmo
que dizer que eles so capazes de doar prtons, de acordo com o meio
em que se encontrem. Grupamentos que possuem menos afinidade
pelos prtons tendero a liber-los em gua aps pequenos aumentos
na concentrao de OH. Com pequenos aumentos no pH de uma
soluo pela adio de OH (de uma base forte), a carboxila sofre
dissociao. Assim, os pKs de valores mais baixos (2,4 para a alanina
e 2,3 para a valina) se referem dissociao do grupamento COOH,
que passa a COO . O valor de pK mais alto (9,7 para a alanina e 9,6
para a valina) se refere dissociao da amina (NH3+ o NH2). A
amina se dissocia somente quando as concentraes de prtons caem
muito, pois ela uma base de Bronsted-Lowry, ou seja, tem tendncia
a receber e no a doar prtons.

192 C E D E R J
 MDULO 1
Tanto para a alanina quanto para a valina, o pH 5 maior do que o

9
pK de dissociao da carboxila e menor do que o pK de dissociao

AULA
da amina. Isso significa que a carboxila est dissociada, mas a amina
ainda no. Nesta situao, as estruturas encontradas so:

Alanina Valina

J em pH 11, o grupamento amino tambm encontra-se dissociado.

As estruturas encontradas, portanto, so:

Valina
Alanina

C E D E R J 193
Bioqumica I | Propriedades qumicas dos aminocidos - I

RESUMO

Os aminocidos, por apresentarem grupamentos titulveis como o grupamento

COOH e NH3+, comportam-se, em soluo, como um tampo. Se voc observar a
curva de titulao dos aminocidos quando adicionada uma base forte soluo,
possvel perceber algumas regies desta curva onde o pH da soluo no se altera.
Nessas regies, ocorre a sada de prtons dos grupamentos titulveis presentes
no aminocido, que neutralizam as hidroxilas adicionadas.
Assim, em uma soluo cida, a adio de uma base forte provocar a liberao de
prtons do grupamento carboxila (COOH o COO) do aminocido, neutralizando
a base adicionada. Pela adio de mais base, todas as carboxilas j se encontram
na forma COO, e no h mais prtons liberados por esse grupamento para conter
mudanas no pH. Se a concentrao de OH continuar aumentando, chegar um
ponto em que comear a dissociao do grupamento amino (NH3+ o NH2), tambm
liberando prtons no meio, mantendo o pH da soluo constante.
As variaes no estado de protonao de um aminocido tambm acarretam
mudanas na carga final da molcula. Para um aminocido com dois grupamentos
dissociveis, h trs cargas possveis: o estado completamente protonado confere
carga +1; quando est parcialmente protonado, a carga nula; por fim, quando
est completamente desprotonado, a carga do aminocido 1.

INFORMAO SOBRE A PRXIMA AULA

Continuaremos com este assunto na prxima aula, quando voc ver a titulao
do cido glutmico (um aminocido cido) e da lisina (um aminocido bsico).
Se voc ainda tem dvida quanto titulao da glicina, vale a pena uma releitura
desta aula antes de seguir adiante.

194 C E D E R J
 Mais propriedades

10
AULA
qumicas dos
aminocidos
Meta da aula
Apresentar as propriedades qumicas de
aminocidos cidos e bsicos
em soluo aquosa.
objetivos

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:

interpretar o que so os plats de uma curva

1
de titulao;

identificar os grupamentos ionizveis de um

2 aminocido de acordo com o pH da soluo
em que ele se encontra;

calcular a carga lquida de uma molcula

3 de aminocido de acordo com seu grau
de ionizao;

4
interpretar o que significam os pKs de
um aminocido;

5 definir ponto isoltrico.

Pr-requisitos
Para acompanhar bem esta aula, preciso que voc tenha em mente
o que j aprendeu sobre o comportamento de um aminocido de cadeia
lateral no carregada em soluo aquosa, tema tratado na aula passada.
Revise a dissociao dos grupamentos carboxila e amino, bem como
a curva de titulao da glicina.
Bioqumica I | Mais propriedades qumicas dos aminocidos

INTRODUO Na aula passada, voc viu o que ocorre com a glicina em soluo aquosa.
A glicina um aminocido apolar, ou seja, um aminocido cuja cadeia lateral
CARBOXILA D E (um hidrognio) no se dissocia. Na glicina, a CARBOXILA D e a AMINA D que
AMINAD so responsveis por sua capacidade de atuar como um tampo. Estes dois
Carboxila (COOH) e
grupamentos, em soluo aquosa, so capazes de liberar ou de se associar
ao carbono D de
amina (NH2) ligadas
a prtons dependendo da concentrao de H+ no meio. Dessa maneira, eles
um aminocido.
funcionam como cidos (quando doam H+) ou bases (quando aceitam H+)
de Bronsted-Lowry.
Na Aula 8, voc aprendeu que existem vinte aminocidos de interesse para a
bioqumica, pois so constituintes das protenas, um grupo de biomolculas muito
importante. Naquela ocasio, voc estudou as estruturas desses aminocidos, e viu
que alguns deles apresentam cadeia lateral com grupamentos polares, carregados
ou no. Exemplos destes aminocidos so o cido glutmico e a lisina.
O cido glutmico aminocido de carter cido, com uma cadeia lateral
constituda por uma carboxila. Esta cadeia lateral carregada negativamente
em pH neutro (Figura 10.1.a) e, quando o aminocido est com esta carga
negativa, chamado de glutamato. A lisina (Figura 10.1.b), por sua vez,
um aminocido bsico, que apresenta uma amina no seu grupamento lateral.
Esta amina, em pH neutro, encontra-se protonada (ou seja, na forma NH3+),
conferindo molcula de aminocido uma carga positiva.

Carga = 1 Carga = 1
Carga = +1 Carga = +1

(a) (b)

Carga = 1
Carga = +1

Glutamato em pH 7
Carga lquida = 1 +1 1 = 1

Lisina em pH 7
Carga lquida = 1 +1 +1 = +1

Figura 10.1: Os aminocidos cido glutmico (a) e lisina (b) em pH neutro, quando
esto com seus grupamentos laterais ionizveis. O glutmico, neste pH, apresenta
duas cargas negativas e uma positiva, somando uma carga lquida igual a 1. Nesta
situao, este aminocido chamado de glutamato. A lisina apresenta, em pH 7,0,
duas cargas positivas e uma negativa, somando carga lquida igual a +1.

196 C E D E R J
 MDULO 1
Agora que voc j se lembrou de como so estes aminocidos, que tal

10
aprender um pouco sobre o comportamento deles em soluo aquosa?

AULA
TITULANDO O CIDO GLUTMICO

!
No precisa ficar confuso! cido glutmico e glutamato so a mesma molcula,
s que em estados de protonao diferentes.

Observe a Figura 10.2, correspondente titulao do cido

glutmico por uma base forte, o hidrxido de potssio (KOH):

10 pK2 = 9,67

8
Glutamato
6

4 pKR = 4,25

2 pK1 = 2,19

0 1,5 2,0 3,0

OH (equivalentes)

Figura 10.2: Titulao do cido glutmico pela adio de uma base forte, a qual
aumenta (ao se dissociar) a quantidade de OH, reduzindo a concentrao de H+
livres. O que so os pKs voc ver depois da explicao sobre a dissociao dos
grupamentos ionizveis.

Veja que, embora no estejam bem definidos, existem trs plats

(trs patamares) nesta curva. Voc sabe por que eles existem? Sabe a que
se referem? (dica: analise novamente a estrutura do cido glutmico, na
Figura 10.1.a)
Se voc respondeu que a existncia dos trs plats se deve
existncia de trs grupamentos ionizveis na molcula do cido
glutmico, marcou um belo gol!
Como voc sabe, os prtons se dissociam das molculas de acordo com
a afinidade que possuem os grupamentos aos quais estes H+ esto ligados.

C E D E R J 197
Bioqumica I | Mais propriedades qumicas dos aminocidos

Assim, grupamentos cidos tm tendncia maior a liberar prtons.

O primeiro plat se deve sada do hidrognio da carboxila D; o segundo se
deve sada do hidrognio ligado carboxila do grupamento R. medida
que o pH vai aumentando, ou seja, a concentrao de H+ vai diminuindo,
grupamentos que naturalmente no so bons doadores de prtons (como
o caso das aminas) acabam se dissociando tambm. O terceiro plat,
portanto, refere-se sada do hidrognio do grupamento amino.
Vamos explorar, passo a passo, a curva de titulao mostrada
na Figura 10.2, comeando com o cido glutmico em pH bem cido,
como por exemplo pH 1.
Em pH 1, o cido glutmico apresenta-se completamente
protonado: suas duas carboxilas esto na forma COOH e seu grupamento
amino na forma NH3+. Desta maneira, ele apresenta carga +1, conforme
mostra a Figura 10.3:

Carga = 0
Carga = +1

Carga = 0

Glutmico em pH 1
Carga lquida = 0 + 0 +1 = +1

Figura 10.3: Estrutura do cido glutmico em pH 1 (bastante cido). Todos os

grupamentos da molcula encontram-se protonados, somando carga lquida para
o aminocido = +1.

medida que adicionamos hidrxido de potssio soluo, o pH

da soluo vai se elevando at um ponto em que no sobe mais (incio do
primeiro plat). Neste ponto, no primeiro plat do grfico (referente
primeira dissociao), o prton da carboxila ligada ao carbono D que est
se dissociando; enquanto isso acontece, o pH da soluo pouco se altera.

198 C E D E R J
 MDULO 1
Continuando a adio de hidrxido de potssio, vemos que o pH

10
da soluo sobe gradualmente. Nesse momento, a estrutura da molcula

AULA
a representada na Figura 10.4. O pH sobe at atingir um valor (por
volta de 3) no qual se forma um segundo plat. Nesse ponto, prximo
ao pKR (segundo plat do grfico, referente dissociao do grupamento
lateral R), o prton da carboxila do grupamento R que est deixando a
molcula do cido glutmico.

!
Em curvas de titulao de aminocidos com trs grupamentos ionizveis (os dois
da estrutura de todo aminocido mais o do grupamento lateral), chamaremos
o valor de pH em que o grupamento lateral se dissocia de pKR.

Carga = 1
Carga = +1

Carga = 0

Glutmico em pH 3
Carga lquida = 1 + 1 + 0 = 0

ao carbono D j se dissociou, apresentando carga 1. Os outros dois grupamentos

Figura 10.4: cido glutmico em pH em torno de 3. Neste pH, a carboxila ligada

ionizveis da molcula continuam protonados: a carboxila do grupamento lateral

R apresenta carga = 0, e a amina, uma carga positiva. A carga lquida da molcula,
por volta do pH 3, nula.

Quando o prton da carboxila ligada ao grupamento R se dissocia

da molcula, o que acontece durante o segundo plat e acaba por volta do
pH 5,5, a carga lquida da molcula se altera, assim como sua estrutura.
Nesse ponto, o cido glutmico est como representado na Figura 10.5:

C E D E R J 199
Bioqumica I | Mais propriedades qumicas dos aminocidos

Carga = 1
Carga = +1

Carga = 1

Glutmico em pH 5,5
Carga lquida = 1 1 +1 = 1

Figura 10.5: O aminocido glutmico em pH 5,5. Neste pH, a quantidade de prtons

no meio tal que o segundo grupamento carboxila da molcula se dissocia. A carga
lquida da molcula, neste pH, 1, pois h um grupamento com carga +1 (a amina)
e dois com carga 1 cada.

!
Obviamente, o primeiro e o segundo plats no ficam muito evidentes e
acabam por se misturar, j que, por serem muito prximos, o fim de um
passa a ser o comeo do outro. importante que voc tenha em mente que,

um grupamento que se dissociou. O primeiro foi a carboxila D, o segundo, a

mesmo no sendo aparentemente to definidos, eles se referem, cada um, a

outra carboxila da molcula.

A adio de mais hidrxido de potssio na soluo de aminocido

que j estava em pH 5,5 acarreta uma rpida subida do pH, at que tem
incio o terceiro plat, em torno de pH 9, na regio do pK2, o prton do
grupamento amino passa a deixar a molcula do glutamato (Figura 10.6).

200 C E D E R J
 MDULO 1
10
Carga = 1
Carga = 0

AULA
Carga = 1

Glutmico em pH 9
Carga lquida = 0 1 1 = 2

Figura 10.6: Estrutura do aminocido glutmico em pH 11. Neste valor de pH, a

concentrao de hidrognio baixa, fazendo com que a amina (NH3+) doe seus
prtons para a soluo. Este grupamento, quando est desprotonado (NH2), tem
carga = 0. A carga lquida da molcula, nesse pH, vale 2.

O glutamato, portanto, funciona como um tampo para trs

faixas de pH, diferente do que voc viu na aula passada para os demais
aminocidos. Assim como ele, todos os aminocidos que apresentam
trs grupamentos dissociveis se comportaro da mesma maneira em
uma soluo cujo pH esteja sofrendo variaes.

TITULANDO A LISINA

At agora, voc aprendeu como o cido glutmico se dissocia

conforme o pH da soluo em que ele se encontra vai aumentando. Alm
do fato de ambos serem aminocidos, a lisina e o glutmico tm mais uma
caracterstica em comum, que o fato de ambos apresentarem mais de dois
grupamentos ionizveis. A diferena que o glutmico possui uma carboxila
na sua cadeia lateral, o que o faz ser um aminocido cido, enquanto a
lisina possui uma amina no seu grupamento R, sendo classificada como
um aminocido bsico (se voc no se lembra da estrutura da lisina em
pH neutro, volte Figura 10.1, no incio desta aula).
Que tal aprender a titular um aminocido bsico fazendo uma
atividade?

C E D E R J 201
Bioqumica I | Mais propriedades qumicas dos aminocidos

ATIVIDADE

1. Titulando a lisina 1 2 3
Suponha que haja uma soluo aquosa na qual
esteja presente o aminocido lisina. Nesta soluo, pouco a pouco, sero
adicionadas gotas de hidrxido de potssio, uma base bastante forte.
A base, gota a gota, aumentar o pH da soluo, concorda? Veja o grfico
a seguir:

Comportamento da lisina em soluo aquosa

frente adio de KOH
12
11
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1

1,0 2,0 3,0

OH (equivalentes)

a. A que se referem os plats indicados com as setas?

________________________________________________________________
________________________________________________________________

b. No trecho anterior, voc viu que, no cido glutmico, primeiro se dissocia

a carboxila D, em seguida a carboxila do grupamento lateral e, por ltimo,
a amina. Isso acontece porque as carboxilas tm menos afinidade pelo
prton do que as aminas e, por isso, os liberam em pHs mais baixos do
que as aminas fazem. Entre dois grupamentos idnticos (como as duas
carboxilas do glutmico), o que est associado ao grupamento lateral
que apresenta maior afinidade pelo prton, ou seja, que vai se dissociar
por ltimo.
Considerando essas informaes:
complete a estrutura da lisina nos diferentes pHs;
indique quais so os grupamentos ionizados em cada valor de pH;
preencha a lacuna para a carga de cada grupamento e calcule a carga
lquida da molcula.

202 C E D E R J
 MDULO 1
10
a b

AULA
Carga = __ Carga = __ Carga = __ Carga = __

Carga = __ Carga = __

Lisina em pH 1 Lisina em pH 4
Carga lquida = Carga lquida =

c d
Carga = __ Carga = __ Carga = __ Carga = __

Carga = __ Carga = __

Lisina em pH 9 Lisina em pH 11
Carga lquida = Carga lquida =

c. Relacione a curva de titulao com as estruturas que voc completou. Em

outras palavras, aponte, no grfico, o trecho da curva em que as estruturas
a, b, c e d podem ser encontradas.

RESPOSTA COMENTADA
A lisina um aminocido bsico, que apresenta em sua cadeia lateral
uma amina (NH3+). Como voc viu na Aula 8, todos os aminocidos
funcionam como tampes. Isso acontece pois, frente a variaes
na concentrao de prtons do meio em que se encontram, seus
grupamentos carboxila e amino sofrem dissociao, liberando
prtons para a soluo. Dessa maneira, os aminocidos controlam
variaes drsticas do pH do meio.

C E D E R J 203
Bioqumica I | Mais propriedades qumicas dos aminocidos

Os plats vistos no grfico de titulao do aminocido lisina se

referem s dissociaes que esse aminocido sofreu por estar em
uma soluo em que foi adicionada uma base forte, o hidrxido de
potssio. A adio da base forte faz com que a concentrao de
hidroxilas (OH) aumente e, conseqentemente, que a concentrao
de H+ diminua. A diminuio na concentrao de prtons far com
que, pouco a pouco, os grupamentos carboxila D, amina D e amina
R (da cadeira lateral) se dissociem tambm.
O primeiro grupamento a se dissociar a carboxila, por ter menor
afinidade pelo prton; em seguida, se dissocia a amina D e, por
ltimo, a amina da cadeia lateral.
As estruturas, as cargas de cada grupamento e a carga lquida ficam
dessa maneira:

a b
Carga
g =0 g = 1
Carga
Carga = +1 Carga = +1

Carga = +1 Carga = +1

Lisina em pH 1 Lisina em pH 3
Carga lquida = 0 +1 +1 = +2 Carga lquida = 1 +1 +1 = +1

c d
Carga
g = 1 Carga
g = 1
Carga = 0 Carga = 0

Carga = +1 Carga = 0

Lisina em pH 9 Lisina em pH 11
Carga lquida = 1 +0 +1 = 0 Carga lquida = 1 +0 +0 = 1

204 C E D E R J
 MDULO 1
10
De acordo com os valores de pH em cada quadro (a, b, c e d),

AULA
voc pode facilmente encaixar as estruturas no grfico da titulao.
Veja como fica:

Comportamento da lisina em soluo aquosa

frente adio de KOH
12
D
11
C
10
9
8
7
6
5 B

4
3
A
2
1

1,0 2,0 3,0

OH (equivalentes)

CONSTANTES DE EQUILBRIO

Antes de encerrarmos este estudo de curvas de titulao de

aminocidos, devemos ainda fazer algumas anlises muito importantes.
Precisamos primeiro definir as constantes de equilbrio de
ionizao dos grupamentos dos aminocidos e seus pKs.

Relembrando...
Na Aula 7 foi definida a constante de equilbrio da dissociao de um cido
(Ka).Vimos que, quanto maior for o valor de Ka, mais forte o cido em
questo. Por outro lado, tambm aprendemos que pKa significa log Ka
(da mesma forma que pH = log [H+]). Antes de prosseguirmos, vamos
observar o seguinte exemplo:

cido forte o cido fosfrico

Ka = 7,25 x 103 M

cido fraco o cido carbnico

pKa = log 7,25 x 103 = 2,14

Ka = 4,47 x 107M
pKa = log 4,47 x 107 = 6,35

Logo, podemos inferir que quanto mais forte o cido, maior o Ka e menor o
pKa. Tendo isto em mente, vamos agora analisar os pKa dos aminocidos.

C E D E R J 205
Bioqumica I | Mais propriedades qumicas dos aminocidos

Em nossa analogia da rvore (Aula 9), o pK seria como uma

medida de quo amarela est a folha da rvore. Quanto menor o pK,
mais facilmente um grupo perde seu prton, ou seja, quanto menor o
pK, mais amarela seria a folha (e mais forte o cido).
Para voc entender mais facilmente o significado do pK dos
aminocidos, volte curva de titulao da glicina que foi discutida na
aula passada. Reveja, ento, as Figuras 9.8 e 9.9 da Aula 9.
A curva de titulao da glicina apresenta dois pKs, conhecidos
como pK1 e pK2. O seu pK1 2,34, e o pK2, 9,60 (os pKs de todos os
grupamentos ionizveis de todos os aminocidos esto na Tabela 10.1,
no final desta aula). O que significa isto? O que ocorre com a glicina
quando ela est em pH 2,34 e 9,6?
Significa que, quando o pH da soluo na qual se encontra a glicina
atingir o valor de 2,34, metade das glicinas tero suas carboxilas ainda
protonadas (COOH), como no comeo da curva de titulao, e metade
das glicinas tero suas carboxilas j desprotonadas (COO). Podemos
dizer que, se tirssemos um retrato da nossa soluo de glicina em
pH 2,34, iramos encontr-la assim:

50% estariam 50% estariam

assim e assim

Figura 10.7: Estado de protonao das glicinas em pH 2,34 o seu valor de pK1. Estas
duas formas coexistem em pH 2,34.

206 C E D E R J
 MDULO 1
Voltando ao que voc aprendeu na Aula 7, observe:

10
AULA
pH = pK + log (ionizado] / [no-ionizado])
pH = pK + log ([glicinaCOO] / [glicinaCOOH]).

Acabamos de comentar que em pH = 2,34 temos 50% das glicinas

com suas carboxilas protonadas e 50% desprotronadas. Logo:
[glicina COO] / [glicina COOH] = 1.

Aplicando esta informao na expresso anterior, temos:

pH = pK + log 1

Como o log de 1 igual a zero, a equao se reduz a:

pH = pK.

Portanto, o pK do grupamento de uma molcula equivale ao valor

de pH em que metade das molculas possuem este grupamento na forma
protonada e metade das molculas na forma desprotonada!
Observe por completo (e no dividido, como no final da Aula 9)
a curva da titulao da glicina:

Curva da titulao da glicina

13
12
pK2 = 9,60
11 Glicina
10
9
8
7
pH 6 pI1 = 5,97
5
4 pK1 = 2,34
3
2
1
0
0 0,5 1 1,5 2
OH (equivalentes)

Se voc pudesse observar a distribuio das molculas de glicina,

prxima ao final do primeiro plat (aproximadamente pH 3,34), como
voc imagina que seria?
Acertou se voc disse que as carboxilas estariam quase que
completamente na forma desprotonada!

C E D E R J 207
Bioqumica I | Mais propriedades qumicas dos aminocidos

Observe:
pH 1,34 2,34 3,34

99,9999...% das glicinas protonadas 50% das glicinas protonadas 0,00001...% das glicinas desprotonadas
0,000001...% das glicinas desprotonadas 50% das glicinas desprotonadas 99,9999...% das glicinas protonadas

gli = glicina prton = protonada desprton = desprotonada

Ou seja, a proporo entre as carboxilas protonadas e desprotonadas

vai se alterando em funo do pH.
E em pH 9,6, como estaria a distribuio das formas de glicina?
Neste pH, encontraremos as formas:

50% estariam 50% estariam

e
assim assim

Essas formas esto presentes na proporo 50% 50% em pH

9,6 porque este o segundo pK da glicina, ou seja, o valor de pH no
qual metade das molculas j teve seu grupamento amina dissociado e
a outra metade ainda no.
Agora, voc reparou que h um ponto assinalado bem no meio
da curva de titulao da glicina, no qual est escrito pI = 5,97? O que
isso significa voc vai aprender em seguida, logo depois de fazer a
Atividade 2!

ATIVIDADE

2. Interpretando pK 4

O cido asprtico um aminocido de carter cido, que pode sofrer

dissociao de trs grupamentos: a carboxila D, a amina D e a carboxila R
(aquela ligada cadeia lateral). Analise os quadros 1 e 2 a seguir:

208 C E D E R J
 MDULO 1
10
Curva de titulao do cido asprtico

AULA
1
14,0 14,0
pK2 = 9,8
12,0 12,0
10,0 10,0
8,0 pK2 = 3,9 8,0
pH
6,0 pK1 = 2,1 6,0
4,0 4,0
2,0 2,0

0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0

OH (equivalentes)

2 A B C D
COOH COOB yCOO
COO


COOD
A C

Completamente Completamente
protonado desprotonado

Agora, responda:
a. Em pH 2,1, quais so as formas da molcula de cido asprtico que
esto presentes e qual a proporo entre elas?
________________________________________________________________
________________________________________________________________
b. Em pH 3,9, quais so as formas da molcula de cido asprtico que
esto presentes e qual a proporo entre elas?
________________________________________________________________
________________________________________________________________
c. Em pH 9,8, quais so as formas da molcula de cido asprtico que esto
presentes e qual a proporo entre elas?
________________________________________________________________
________________________________________________________________

RESPOSTA COMENTADA
Esta atividade lhe permitiu monitorar se de fato voc entendeu o
significado do pK. O pK o valor de pH em que encontramos metade
das formas protonada e a outra metade desprotonada. o valor de pH
em que a concentrao de H+ tal que metade dos grupos dissociveis
naquela faixa j sofreu dissociao.

C E D E R J 209
Bioqumica I | Mais propriedades qumicas dos aminocidos

O cido asprtico, assim como o cido glutmico que voc

aprendeu a titular no incio da aula, um aminocido cido, com
trs grupamentos ionizveis: duas carboxilas e uma amina.
As carboxilas, como voc j sabe, tm menos afinidade pelos prtons
do que as aminas e, por isso, se dissociam em pHs mais baixos.
Assim, no primeiro plat da curva de titulao do cido asprtico,
o grupamento que se dissociou foi a carboxila D. Em seguida, se
dissociou a carboxila da cadeia lateral e, por ltimo, em pH bsico, a
amina ligada ao carbono D.
No grfico esto indicados os pKs de dissociao destes grupamentos.
No pK1, ou seja, em pH 2,1, metade das formas j dissociou o prton
da carboxila a e outra metade ainda no. Assim, neste pH, 50% esto
na forma A e os outros 50%, na forma B.
O segundo plat se refere dissociao da carboxila ligada cadeia
lateral. No valor de pH indicado como pK2, 3,9, 50% das molculas
esto na forma B e os outros 50% j se dissociaram, e esto na forma C.
O terceiro plat, em pH bsico, se refere dissociao da amina. Em pH
9,8, o pK3 dessa molcula, metade delas se encontram na forma C e a
outra metade, completamente desprotonada, ou seja, na forma D.
Entender o significado do pK dos aminocidos muito importante
para esta disciplina. Portanto, se ficou alguma dvida a respeito
desse assunto, no deixe de revisar o trecho da aula que no ficou
claro ou, se julgar necessrio, esclarec-lo com um tutor, quer por
telefone, pela plataforma ou presencialmente!

ATIVIDADE

3. Responda rpido!
2

Valina em pH cido

A titulao da valina com uma base forte, por exemplo, NaOH, resulta em
dois pKs. A reao de titulao que ocorre em torno do pK2 (pH = 9,62)
corresponde a:

210 C E D E R J
 MDULO 1
10
a. COOH + OH o COO + H2O
b. COOH + NH2 o COO + NH2+

AULA
c. NH3+ + OH o NH2+ H2O
d. NH2 + OH o NH + H2O

RESPOSTA COMENTADA
A valina um aminocido apolar que possui dois grupamentos
ionizveis apenas: a carboxila e a amina ligadas ao carbono D. No
segundo pK, o grupamento que se dissocia a amina, que estava
na forma protonada (NH3+) e fica na forma desprotonada (NH2).
Assim, a resposta correta a letra c.

O QUE PONTO ISOELTRICO?

Uma outra regio da curva de titulao tambm muito importante

o ponto isoeltrico ou pI. O pI o valor de pH onde o aminocido
titulado tem carga lquida igual a zero.
No caso da glicina, voc viu no grfico da titulao mostrado
anteriormente que o seu pI igual a 5,97. Isto significa que, em pH 5,97,
a glicina se encontra sem carga, ou seja, na forma:

Carga = 1

Carga = +1

Carga lquida = 0

Mas de onde veio esse valor 5,97? Ser que existe uma maneira
fcil de se conhecer o pI de cada aminocido? A resposta positiva e
nestes casos a Matemtica nos auxilia muito. No caso da glicina, para
saber seu pI sem precisar de fazer uma curva de titulao, basta usar a
frmula a seguir:

C E D E R J 211
Bioqumica I | Mais propriedades qumicas dos aminocidos

pI = (pK1 + pK2) = (2,34 + 9,6) = 5,97

2

Ou seja, o pI fica na metade do caminho entre o pK1 e o pK2.

J sei o que voc est pensando: E o que acontece quando o

aminocido possui 3 pKs?
Esta frmula que voc acabou de ver vlida somente para
os aminocidos que no apresentam grupamento R titulvel, isto ,
grupamentos capazes de perder ou ganhar prtons. Em outras palavras,
vale somente para os que possuem 2 pKs.
Antes de continuarmos, d uma olhadinha na Tabela 10.1, que
mostra os valores de pK1 e pK2 de todos os vinte aminocidos, bem como
os valores de pKR para os aminocidos com grupamentos R titulveis.

Tabela 10.1: Os aminocidos, seus valores de pK1, pK2, pKR e pI

pK1 pK2
Aminocido pKR pI
(COOH) (NH3+)

Grupo R no-polar, alifticos

Glicina 2,34 9,60 5,97

Alanina 2,34 9,69 6,01

Valina 2,32 9,62 5,97

Leucina 2,36 9,60 5,98

Isoleucina 2,36 9,68 6,02

Metionina 2,28 9,21 5,74

Grupos R aromticos

Fenilalanina 1,83 9,13 5,48

Tirosina 2,20 9,11 10,07 5,66

Triptofano 2,38 9,39 5,89

Grupos R polares, no-carregados

Serina 2,21 9,15 5,68

Prolina 1,99 10,96 6,48

Treonina 2,11 9,62 5,87

Cistena 1,96 10,28 8,18 5,07

Asparagina 2,02 8,80 5,41

212 C E D E R J
 MDULO 1
10
Glutamina 2,17 9,13 5,65

Grupos R carregados positivamente

AULA
Lisina 2,18 8,95 10,53 9,74

Histidina 1,82 9,17 6,00 7,59

Arginina 2,17 9,04 12,48 10,76

Grupos R carregados negativamente

Aspartato 1,88 9,60 3,65 2,77

Glutamato 2,19 9,67 4,25 3,22

Observe que os valores de pK1 variam um pouco, dependendo do

aminocido em questo, embora todos esses valores estejam relacionados
desprotonao da carboxila. Isto ocorre devido influncia dos outros
tomos da molcula do aminocido os quais podem facilitar ou dificultar
a sada do prton da carboxila. O mesmo ocorre com o pK2.
Voltando pergunta, como calcular o pI para aminocidos que
possuem um grupamento lateral R ionizvel (apresentam pKR)?
A resposta bem simples, tanto quanto o clculo que voc ter
que fazer. S necessrio saber qual o carter do aminocido.
Assim, para calcularmos os valores de pI dos aminocidos cidos,
devemos apenas considerar os pK1 e o pKR. No caso dos aminocidos
bsicos, consideramos o pK2 e o pKR, assim:

pK1 + pKR 2,19 + 4,25

pI do cido glutmico: = = 3,22
2 2
pK2 + pKR 8,95 + 10,53
pI da lisina: = = 9,74
2 2

ATIVIDADE

5
4. Sobre pI...
Pense e responda: os aminocidos com grupos R neutros, em qualquer
valor de pH abaixo do pI...
a. ... no apresentaro, em sua maioria, grupos carregados?
b. ... no apresentaro, em sua maioria, carga lquida?
c. ... tero, em sua maioria, uma carga lquida positiva?
d. ... tero, em sua maioria, carga positiva e negativa em concentrao
igual?
e. ... ter, em sua maioria, carga lquida negativa?

C E D E R J 213
Bioqumica I | Mais propriedades qumicas dos aminocidos

RESPOSTA COMENTADA
O ponto isoeltrico o ponto em que a carga lquida de um
aminocido nula. Para um aminocido que no apresente
grupamento lateral ionizvel, o pI significa que todas as molculas
esto com suas carboxilas na forma ionizada (COO ) e com as
aminas protonadas (NH3+). Abaixo do pI, ser possvel encontrar
carboxilas ainda protonadas (COOH carga = 0), fazendo com
que a carga lquida da molcula seja positiva. Portanto, a resposta
certa a c. S para complementar, usando a mesma lgica, qual
seria a carga lquida da valina acima do pI?

CONCLUSO

A partir da prxima aula, voc comear a aprender sobre as

protenas, suas estruturas e tcnicas utilizadas para estud-las. Assim
como as estruturas que as compem (os aminocidos), as protenas
tambm tm pI. Uma das tcnicas utilizadas para separao de protenas
(para que elas possam ser estudadas individualmente) de acordo com
seu ponto isoeltrico. Este conceito bastante importante para o estudo
das protenas!

ATIVIDADE FINAL
5

Aminocidos e cargas eltricas

Em uma aula prtica de bioqumica, o professor pediu que os alunos observassem a

migrao de um aminocido sob a ao de um campo eltrico com plos positivos
e negativos. Uma gota de uma soluo do aminocido alanina foi pingada em
um papel apropriado para este tipo de experimento. Em seguida, este papel foi
imerso em uma outra soluo, cujo pH era 6,01.

214 C E D E R J
 MDULO 1
Joo, um dos alunos, observou que a alanina no se movia na direo de nenhum

10
plo.

AULA
Se voc fosse o professor, como explicaria a seu aluno o fato observado? O que
aconteceria se o aluno utilizasse, em vez de pH 6,01, outro valor de pH como, por
exemplo, 10,0?

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RESPOSTA COMENTADA
J ouviu o ditado Os opostos se atraem? Esse ditado vem, na verdade,
do estudo da interao entre as cargas eltricas. tomos ou molculas
de cargas opostas tendem a se atrair. Assim, se uma molcula apresenta
carga positiva, tende a se aproximar de um plo negativo.
Com os aminocidos no diferente. Se aplicamos a um aminocido
um campo eltrico, ele se mover na direo do plo de carga oposta
sua. Um aminocido com carga negativa, por exemplo, migrar para
o plo positivo, assim como um aminocido de carga negativa migrar
para o plo positivo.
A carga de um aminocido varia de acordo com o pH da soluo em
que ele se encontra, pois isso que determina seu grau de protonao
e as cargas de seus grupamentos ionizveis. Quando um aminocido
que apresente dois grupamentos ionizveis, como a alanina, est com
suas carboxilas ionizadas (na forma COO , com carga 1) e suas
aminas protonadas (NH3+, com carga +1), sua carga lquida nula.
Neste valor de pH, ou seja, no seu ponto isoeltrico, esse aminocido
no migrar para nenhum dos plos.
Portanto, a alanina no migrou porque sua carga em pH 6,01
(equivalente a seu pI) nula. Em qualquer outro valor de pH, ela
apresentaria migrao. Se em pH < pI, possvel que ainda haja
carboxilas protonadas, fazendo com que a carga lquida de algumas
molculas seja +1 e que elas migrem para o plo negativo. J se pH >
pI, os grupamentos amina j estaro se dissociando, e a carga lquida
dessas molculas que j se dissociaram 1, fazendo com que elas
migrem para o plo positivo!

C E D E R J 215