UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA

AUTORES
Mara Teresa Griselda Fuentes Lara
Esperanza Jimnez Castaeda
Juana Rosado Prez
Estela Valencia Platas

COLABORADORES
Adrin Flores Barrera
Guadalupe Nlida Ortega Soto
Javier de Jess Pin Ortega
Karina de los Santos Mendoza

Sptimo semestre 2012

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A Manera de Prlogo

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 Generalmente esta parte la escribe una persona reconocida en el mbito a tratar en
el texto, pero a menudo a los lectores, y sobre todo a los estudiantes, esta persona nos
parece completamente lejana o ajena a nosotros y sus palabras no llegan a tener gran
influencia. Es por esto que decidimos aclarar que tambin somos o fuimos estudiantes de la
UNAM, tus compaeros de la FES Zaragoza, que cursamos la materia justo como ests a
punto de hacerlo t.

El Manual de Prcticas de Laboratorio de Evaluacin de Frmacos y

Medicamentos II que ahora tienes en tus manos contiene un acercamiento general a

lainformacin que como profesionista requerirs y es resultado de la exigencia de cientficos
mejor preparados pero con una conciencia ms responsable con el planeta

Hoy en da, los cientficos tenemos que estar al da en la legislacin nacional e

internacional y en esta se han dado grandes avances conforme al uso y manejo adecuado de
animales de experimentacin en donde destaca la Regla de las 3R (Remplazar, Reducir y
Refinar). Es por esto que en el presente manual encontrars nuevas tcnicas de
experimentacin como simuladores computacionales, manejo de organismos de rdenes
menores y lotes experimentales de menor tamao que hoy se emplean con mayor frecuencia
en la vida profesional.

En cada prctica encontrars una pequea introduccin cuya nica finalidad es

guiarte en la bsqueda de informacin. Es fundamental comprender que todo el tiempo
necesitars buscar profundizar en el tema lo mayor posible con la idea de que tu educacin
depende principalmente de ti y de lo que quieras lograr. De la misma manera
recomendamos que tus fuentes de informacin sean lo ms actuales posible ya que la ciencia
es un mundo en constante construccin y lo que es cierto hoy puede no serlo del todo
maana.

Uno de los objetivos primordiales de este manual es que realices toda esa bsqueda
de informacin antes de la actividad en el laboratorio para que no trabajes a ciegas, por lo
cual se proponen una serie de cuestionarios que junto con la introduccin te guiarn en la
informacin bsica que debes conocer del tema.

Con toda la nueva filosofa de trabajo y una serie de pensamientos de personajes

clebres al inicio de cada prctica se pretende que el estudiante genere una educacin
universal y responsable haciendo honor al lema de la UNAM de Jos Vasconcelos POR
MIRAZA HABLAR EL ESPRITU recordando que los estudiantes de hoy sern
losprofesionistas del maana que moldearn al pas y a la sociedad.

Sabemos que la carrera es pesada pero, aunque no lo creas, la humanidad depende de ti as que
no te rindas.

TUS COMPAEROS

FES Zaragoza, UNAM

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Introduccin

En la presente edicin del Manual de Prcticas de Laboratorio de

Evaluacin deFrmacos y Medicamentos II de la carrera de QUMICA
FARMACUTICO BIOLGICA, seha tratado de mantener los criterios que en un
inicio tuvieron los profesores del modulo, respetando su valioso trabajo, pero a
su vez, se implementaron algunos cambios que, a nuestro criterio, van de
acuerdo a la actualidad, sin que con ello el alumno se pierda en un mar de
informacin.
El principal objetivo de este manual, fue el crear una gua que
constituyera una herramienta eficaz para el aprendizaje, para lo cual, se tuvo el
cuidado de que en cada prctica se incluyeran los siguientes puntos:

Introduccin: Que sustenta los principios bsicos de cada prctica.

Objetivos: Proporcionan directrices a los estudiantes sobre lo que deberan
saberpara desarrollar adecuadamente las prcticas.
Metodologa: Clara y precisa que facilita las actividades a realizar.
Figuras, Esquemas y Tablas: Que dan un diseo ms didctico y sencillo.
Cuestionario: Cuya funcin es indicadora del grado de conocimiento
adquiridosprevios a la prctica.
Referencias: til como gua para la bsqueda de informacin adicional.
Anexos: Contienen suplementos de los simuladores computacionales as
como eltratamiento de los datos obtenidos.

Se ha procurado que todo el manual tenga el mismo formato para un mejor

uso del mismo, por todo lo anterior, desde nuestro punto de vista, el
manual cumple con su cometido, ser un texto bsico para estudiantes.

LOS AUTORES
FES Zaragoza, UNAM
Mxico 2012

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Prctica No. 1

Valoracin del Efecto Analgsico

Introduccin

Al considerar que el trmino Analgesia proviene de los vocablos griegos, An que

significa sin y LGESIS dolor, es fcil deducir que un analgsico es cualquier frmaco que
administrado de manera adecuada disminuye o calma la Sensacin de Dolor.

En general, los analgsicos se pueden dividir en dos grandes categoras, segn su

naturaleza qumica, los opioides y los no opioides (o no esteroideos). Los opioides son de
exclusiva prescripcin mdica y su uso es ms frecuente en el paciente hospitalizado, un
ejemplo es la morfina. El nico de stos que puede ser parte del botiqun es la codena. Dicha
sustancia es muy efectiva en dolores agudos de los huesos y las articulaciones, sobre todo
despus de una ciruga.

Los analgsicos no esteroideos comprenden una amplia lista de sustancias. Estos son
los calmantes adecuados para el botiqun por su utilidad en diversos tipos de dolor y la
seguridad con que pueden ser usados a las dosis recomendadas. El prototipo de stos es la
aspirina, este grupo tambin recibe el nombre de Analgsicos Antiinflamatorios No Esteroideos
(AINES).

Tabla 1.1 Ejemplos de AINES

Derivados de: Ejemplos

cido saliclico cido acetil saliclico (aspirina)
p-aminofenol Acetaminofn
cido actico Indometacina, ketorolaco y diclofenaco
cido propionico Ibuprofeno, naproxeno y oxaprozina
Fenamatos cido mefenmico y cido meclofnamico
cidos enlicos Piroxicam, fenilbutazona y dipirona
Alcanonas Nabumetona

La mayora de los AINES, son frmacos que tienen otras propiedades como
antiinflamatorios y/o antipirticos (reducen la fiebre).

Los analgsicos Opioides incluyen los derivados de los alcaloides, ya sean naturales o
sintticos. El prototipo de estos es la Morfina, obtenida a partir de la amapola, tambin se
encuentra la Metadona, Meperidina y Propoxifeno (analgsico dbil).

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Definicin del Dolor

Para poder entender cmo es que actan estos frmacos, es necesario tener una idea
de lo significa el Dolor, aunque es muy difcil hacerlo, pues es subjetivo.
La definicin ms comnmente aceptada del dolor es la proporcionada por la
Asociacin Internacional para el Estudio del Dolor (Internacional Association for the Study of
Pain, IASP):

"El dolor es una experiencia sensorial y emocional no placentera relacionada con dao
potencial o real del tejido, o descripta en trminos de tal dao. El dolor siempre es subjetivo".

La cuestin de que el dolor siempre es subjetivo es muy importante y enfatiza que el

dolor es una experiencia somatopsquica. Aristteles se refiri a esto cuando describi al dolor
como una "pasin del alma". Esto enfatiza que una variedad de factores diversos pueden
causar o agravar el dolor, lo cual debe considerarse en la evaluacin y tratamiento. Una
definicin clnica ms prctica es:

"El dolor es lo que el paciente dice que es. Es lo que el paciente describe y no lo que los
dems piensan que debe ser. Por lo que el dolor es una respuesta del organismo ante el dao,
leve o severo y se convierte as en un signo de alerta.

La sensacin se desencadena cuando, se producen ciertas sustancias llamadas

Prostaglandinas estas sustancias a su vez generan la accin de enzimas que actan sobre
otros componentes de las clulas. Una de las enzimas que favorece la produccin de
prostaglandinas es la llamada Ciclooxigenasa, de las cuales existe la I y la II. La primera se
encuentra en todos los tejidos mientras que la segunda solo est en el rin y en los sitios en
que ocurre inflamacin y dolor es a este nivel donde actan los AINES.

Accin de los Analgsicos

Los analgsicos bloquean la produccin de las prostaglandinas necesarias para desencadenar

la sensacin del dolor, gracias a que inhiben la accin de las enzimas denominadas
ciclooxigenasas Por eso mismo, los analgsicos tienen tambin propiedades antiinflamatorias y
antipirticas (controlan la fiebre). El Acetaminofn es el nico cuya forma de accin no afecta
las prostaglandinas.

El otro mecanismo de accin es mediante la fijacin a los receptores opiceos produciendo

analgesia; a nivel del SNC bloqueando y modulando las seales dolorosas a los cordones
espinales y cerebro, esta accin es caracterstica del el D-Propoxifeno (dextropropoxifeno).

Objetivo

Observar y valorar el efecto analgsico del Tramadol en ratn, administrado en dosis

variadas por va intraperitoneal (I.P.) valorando el efecto a diferentes tiempos.

Material, Equipo y Reactivos

MATERIAL BIOLGICO

Cinco ratones adultos (20-30gramos)

MATERIAL Y EQUIPO

Una pinza de mosco con mango de hule (tipo caimn)

Dos jeringas de 1 mL (tipo insulina)
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 Una balanza granataria con canastilla para pesar animales.
Un reloj

REACTIVOS

Analgsico (Tramadol)
Solucin salina

Metodologa
El mtodo que se utilizar, se basa en producir dolor experimentalmente en los animales de
laboratorio, y medir el tiempo en que tarda en aparecer una conducta o sntoma indicativo del
dolor. Este procedimiento se lleva a cabo en ausencia y en presencia del analgsico.
Los mecanismos para producir dolor son fsicos (se aplica una pinza sobre la cola del animal,
se coloca al animal sobre una placa caliente o bien se sumerge la cola en agua a 50 C), y
qumicos (se inyecta un agente qumico al animal).

Procedimiento 1
1. Colocar la pinza de mosco (o caimn) a 1 cm de la base de la cola del ratn.

2. La respuesta positiva al dolor se caracteriza por vocalizacin y/o movimientos para alcanzar
o morder la pinza, en un lapso de 10 segundos. En caso contrario, deseche al anormal y
tome otro.
3. Enseguida pese y numere a cada ratn.
4. Administre a cada ratn por I.P. la dosis del frmaco (asignada aleatoriamente) de acuerdo
a la siguiente tabla:

Tabla 1.2 Dosis de Administracin

Ratn Dosis (mg/Kg)

1 20
2 30
3 40
4 50
5 (control) 0.1ml solucin salina/10g

Preparar soluciones a partir de la solucin madre de 25 mg/ml

tomando en cuenta que 1mL de solucin tiene 100 unidades.

8
5. Una vez administrado el frmaco, mida el tiempo.
6. Aplique nuevamente la pinza arterial de la manera antes descrita, a los 50, 60, 70y 90y
evale la respuesta de cada ratn.
7. Si muerde la pinza (positivo al dolor) no existe analgesia.
8. Si no muerde la pinza (negativo al dolor) existe analgesia.
9. Anote sus resultados en la siguiente tabla:

Tabla 1.3 Resultados por Equipo

Ratn Dosis Valoracin del efecto

(mg/Kg) 50 60 70 90
1

10. Los resultados de todos los equipos se anotarn en la tabla 1.4

Tabla 1.4 Resultados por Grupo

DOSIS %
(mg/Kg) LOG Dosis Animales (sin dolor) RESPUESTA
Animales Probados

50' 60' 70' 90' 50' 60' 70' 90'

120

90

50

30

11. Con los resultados obtenidos construya una curva de tiempo vs efecto para cada dosis.
12. Si los resultados lo permiten, calcule la dosis efectiva media (DE50) con el tiempo de efecto
mximo.

Procedimiento 2
Existe una variante del mtodo 1, que consiste en lo siguiente:
1. Calentar aproximadamente 100 m de agua a 50 C.
2. Colocar un ratn dentro de un cono (o algo parecido), de tal manera que la cola salga
del mismo.
3. Introducir la mitad de la cola por 10 segundos en el agua.
4. La respuesta positiva al dolor se caracteriza por vocalizacin y/o movimientos bruscos
para extraer la cola
9
 del agua o salir del cono. En caso contrario,
deseche al animal y tome otro.
5. Enseguida pese y numere a cada ratn.
6. Administre a cada ratn por va I.P. la dosis
del frmaco (asignada aleatoriamente) de
acuerdo a la tabla 1.2.
7. Una vez administrado el frmaco, mida el tiempo.
8. Repita los pasos del 1 al 3 a los 15', 30', 60', y 90'.
Una vez administrado el frmaco, mida el tiempo.
9. Evale la respuesta de cada ratn.
10. Si su actitud no es agresiva, es decir, si no le afecta
el agua caliente, existe analgesia.
11. Anote sus resultados en la tabla 1.3.
12. Los resultados de todos los equipos
se anotarn en al tabla 1.4
13. Con los resultados obtenidos construya una curva
de tiempo vs efecto para cada dosis.
14. Si los resultados lo permiten, calcule la dosis
efectiva media (DE50) con el tiempo de efecto mximo.

Cuestionario

1. Describe el papel que juegan las prostaglandinas en el dolor.

2. Cul es el mecanismo de accin analgsica de la aspirina, naproxeno y piroxicam?
3. Cul es el mecanismo de los antiinflamatorios no esteroideos?
4. Cul es el mecanismo de accin del tramadol?
5. Qu funcin tienen las ciclooxigenasas 1 y 2, y cmo afectan al organismo?
6. Cules son las teoras del dolor y qu dice cada una de ellas?
7. Cul es la NOM que aborda el manejo y sacrificio correcto de los animales empleados
en el laboratorio?
8. Realice una gua de manejo y sacrificio para ratas, ratones, conejos y ranas.
9. Cules son los modelos para evaluar la analgesia?
10. Cul es el mecanismo de accin de los opioides?

Referencias

Goodman L.S.&Gilman A. 1996. ThePharmacologicalBasis of Therapeutics. 9a. edicin.

McGraw Hill. U.S.A.
Barastegui, AC, Esquemas y Prcticas de Farmacologa. Espaxs, Espaa 1976.
Bertrand G. Katzung, Farmacologa Bsica y Clnica, 8a ed. Manual Moderno, Mxico
2002.
NOM-062-Z00-1999 Especificaciones Tcnicas para la Produccin, Cuidado y Uso de
los Animales de Laboratorio.

10
 Prctica No. 2

Prctica No. 2
Bloqueadores de la Placa
Neuromuscular
Introduccin
Durante el siglo XVI los exploradores europeos encontraron que los nativos de la
cuenca del Amazonas usaban un veneno en la punta de sus flechas que produca la
muerte.
Despus de muchas investigaciones se encontr que el curare es el extracto crudo
activo de varias especies de plantas cuyo principio activo es la D-tubocurarina.
El msculo esqueltico voluntario est inervado por neuronas motoras cuyos
axones son capaces de conducir potenciales de accin a altas velocidades. Al rea del
msculo que yace junto a la terminacin axnica se le conoce como placa motora y a la
sinapsis qumica que existe entre ambas como unin neuromuscular.

Los frmacos que actan en la unin neuromuscular pertenecen a dos grupos:

PRESTNPTICOS:
Frmacos que inhiben la sntesis de acetilcolina por ejemplo hemicolinio.
Frmacos que inhiben et almacenamiento de la acetilcolina en las vesculas por
ejemplo el AH5183.
Frmacos que inhiben la liberacin de acetilcolina por ejemplo la estreptomicina.

POSTSINPTICOS
Frmacos no despolarizantes. Antagonistas competitivos de los
receptoresnicotnicos de la acetilcolina. Ejemplo la D-tubocurarina'
Frmacos despolarizantes. Activan los receptores nicotnicos produciendo
unadespolarizacin inicial, pero bloquean la accin subsecuente de los receptores.
Ejemplo la succinilcolina.

Estructura de la Succinilcolina

Objetivo
Demostrar experimentalmente el efecto de la succinilcolina en la unin neuromuscular
de ratones balb/c.

Material, Equipo y Reactivos.

MATERIAL BIOLGICO
4 ratones balb/c.

MATERIAL Y EQUIPO
2 cajas para ratones.
1 rejilla para caja de ratones
4 jeringas de 1mL
Vaso de precipitados de 1L
Mechero Bunsen con manguera
Tripi
Toalla o trapo absorbente
Balanza granataria con canastilla para pesar animales
Cronometro
12
REACTIVOS
Solucin de succinilcolina
Solucin salina

Metodologa
Prueba de escalada
1. Por equipo tomar 4 ratones balb/c en una caja
con tapa (reja)
2. Pesar cada uno de los ratones en una balanza
con canastilla y registrar los valores marcando
la cola de cada ratn para su posterior
identificacin (del 1 al 4)
3. Inclinar la tapa de la caja de los ratones para
que forme un ngulo de 80 con respecto a la
mesa y poner a escalar cada uno de los ratones.

Prueba de nado
4. En una segunda caja para ratones colocar
agua hasta la mitad.
5. Calentar agua con un mechero Bunsen en
un tripi y mezclar con el agua de la caja,
midiendo la temperatura hasta obtener un
valor entre 35C y 38C.
6. Tomar el ratn marcado con el nmero 1, que
previamente ya escal la reja, e introducirlo
con cuidado al agua para que nade 30
segundos aproximadamente.
7. Sacar de la caja y secar al ratn perfectamente
con una toalla, cuidando mantenerlo caliente
para evitar que muera de hipotermia.

Administracin del frmaco y pruebas

8. Por medio del peso del ratn y la
concentracin de la solucin de
succinilcolina hacer el ajuste para
administrar al ratn 1 una dosis
de 0.7 mg/Kg va intramuscular.
9. Inmediatamente despus de repetir
la prueba de escalada y registrar el
tiempo que tarda el ratn en caer
por no poderse sujetar correctamente.
10. Sucedido lo anterior repetir la prueba
de nado y registrar el tiempo que tarda
el ratn en no poder nadar ms.
11. Repetir la prueba de escalada y de
nado hasta que el efecto pase y registrar
el tiempo transcurrido.
12. Continuar de la misma forma con los ratones 2 a 4 uno tras otro (no realizar las
pruebas simultneamente) administrando dosis de 0.9mg/Kg y 1.1mg/Kg a los ratones
2 y 3. Al ratn 4 se le administra 0.1ml/g de peso de solucin salina (control)

13
 13. Reportar los resultados en la siguiente tabla:

Ratn Dosis (mg/kg) Tiempo de latencia Tiempo de duracin Tiempo de

del efecto recuperacin

Control

Cuestionario

1. Haga un esquema de la placa neuromuscular.

2. Cmo se clasifican los frmacos que actan en la unin neuromuscular? Indique cada
grupo.
3. Describa el mecanismo de accin d la succinilcolina.
4. Menciona el perfil farmacocintico de la succinilcolina.
5. Usos clnicos y efectos adversos de la succinilcolina.
6. nvestiga las interacciones farmacolgicas de la succinilcolina.
7. Qu pasa al estimular directamente el msculo?, Por qu?
8. Mencione un frmaco que revierta la accin de la succinilcolina y explique su mecanismo
de accin
9. En qu casos clnicos se hace uso de los bloqueadores neuromusculares?
10. Mencione 5 ejemplos de antagonistas nicotnicos de la acetilcolina, y dibuje sus
estructuras

Referencias

1. Goodman, L.S. &Gilman A. 1996. ThePharmacologicalBasis of Therapeutics. 9a. edition.

McGraw HiII. U.S.A.
2. Flores J. 2000. Farmacologa Humana. Masson Barcelona.
3. Rang H, Dale M. y Ritter J. 2000. Farmacologa. 4a. edicin., Harcourt. Espaa 4. Taylor
M. y Reide P. 1999. Harcourt. Espaa.
5. Velasc A. 2003. Farmacologa. McGraw Hill. Espaa.

14
Prctica No. 3
Anestsicos Locales
Introduccin.

Los anestsicos locales son frmacos que previenen o alivian el dolor al interrumpir
la conduccin nerviosa. Cuando se aplica de manera local en el tejido nervioso en
concentraciones apropiadas, actan en cualquier parte del sistema nervioso en cualquier
tipo de fibra nerviosa. Este grupo de frmacos no produce inconciencia y su sitio de accin
es la membrana celular de las clulas excitables, como la membrana nerviosa. El uso
efectivo y seguro de los anestsicos locales requiere no solo que los frmacos bloqueen la
conduccin de algunos nervios, sino tambin que esta accin sea rpida y totalmente
reversible y que no tenga efectos txico sistmicos mayores.
Mecanismo de accin: El aspecto singularmente ms importante de las acciones de
los anestsicos locales es la reduccin del aumento transitorio de la permeabilidad al sodio
asociada con la fase de ascenso es decir la despolarizacin- del potencial de accin. Esta
reduccin de la permeabilidad al sodio se debe a los efectos de los frmacos sobre los
canales de la membrana del sodio sensibles al voltaje.
Los anestsicos locales son aminas de pKa que vara entre 8 y 9. Por lo tanto puede
existir en solucin como la especie cargada (catinica) o no cargada, y el pH depender del
medio, Fig. 3.1. La lidocana (xilocana) y la procana (novocana) se consideran agentes
prototipo de los anestsicos locales. La lidocana introducida en 1948, actualmente es uno
de los anestsicos locales ms ampliamente utilizados. La estructura se muestra en la Fig.
3.1. se utiliza como anestsico local en procedimientos odontolgicos, en el tratamiento de
disritmias ventriculares (especialmente cuando estas se presentan ene le infarto de
miocardio o en ciruga cardiaca), atenuacin de la respuesta vaspresora (presin arterial
sistmica/presin intracraneana) en la intubacin y en la atenuacin de las fasciculaciones
provocadas por succinilcolina.

Figura 3.1

FARMACOCINETICA DE LA LIDOCANA: inicio, rpido: duracin, moderada (60-120 min);

T1/2 1.6 h; Vd de91 L; depuracin, 91 L/min; unin a protena del 65%. Efecto: antiarrtmico.
Sedacin, bloqueo nervioso; disminuye la conduccin de los canales de sodio. Su
eliminacin es por metabolismo heptico produciendo metabolitos activos y txicos;
eliminacin renal (10% sin metabolizar). Toxicidad: los efectos adversos de la lidocana que
se observan al aumentar la dosis consisten en vrtigo, convulsiones, desorientacin,
bloqueo cardiaco o hipotensin arterial. Concentracin srica teraputica = 1.5 mg/L

Objetivos
Por medio del uso de un programa de simulacin que el alumno aprenda el efecto de
los anestsicos locales al aplicar un estmulo nervioso.

16
 Demostrar el bloqueo del impulso nervioso por la accin de un anestsico local, al
aplicar un estmulo en una preparacin citico -gastrocnemio por medio del uso de un
programa de simulacin.
Que el alumno de manera prctica conozca el efecto de los anestsicos locales al
aplicar un estmulo nervioso (qumico, fsico o trmico).

PARTE1 (1 Sesin)

Material, Equipo y Reactivos.

MATERIAL BIOLGICO
NO
MATERIAL Y EQUIPO
Computadora personal con simulador instalado
REACTIVOS
NO

Metodologa
Mtodo 1: Uso del Simulador

1. DETERMINACION DEL ESTIMULO UMBRAL

1.1- Seleccionar Fisiologa del impulso nervioso.
1.2- Seleccionar en men EXPERIMENTO: Inhibir efecto nervioso.
1.3- Fijar el voltaje a 1.0 V.
1.4- Pulsar ESTIMULAR.
1.5- Aumentar el voltaje en 0.5 V hasta obtener respuesta.
1.6- Guardar el valor umbral.
2. INHIBICIN CON LIDOCAINA
2.1- Borrar grfica anterior.
2.2- Seleccionar gotero con lidocana.
2.3- Aplicar lidocana entre los electrodos.
2.4- Pulsar ESTIMULAR y guardar.
2.5- Presionar el botn LAVAR.
2.6- Presionar ESTIMULAR y guardar.

REPETIR EL MISMO PROCEDIMIENTO EN EL SIMULADOR CON EL CURARE Y EL ETHER, REGISTRAR Y

OBSERVAR LOS CAMBIOS QUE SE EFECTUAN AL ADICIONAR CADA
SOLUCION.

PARTE2 (2 Sesin)

MATERIAL BIOLGICO
Lombrices de tierra.
MATERIAL Y EQUIPO
Termmetro
Mechero
Tripi
Vaso de precipitados de 600 ml
Aguja
REACTIVOS
Lidocana 2%
Acido clorhdrico 0.1 N

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Mtodo 2: Uso de lombrices de tierra.

EFECTO DE LA LIDOCANA EN LOMBRIZ DE TIERRA.

3.1- ESTMULO QUIMICO.

3.1.1- Tomar tres lombrices y colocarlas en una caja Petri.
3.1.2- Colocarles tres gotas de HCL 1.0N en la cola de la lombriz (zona ms anillada),
observar la reaccin de la lombriz.
3.1.3- Despus de haber observado la reaccin de la lombriz colocarle unas gotas de
lidocana dejar reaccionar aproximadamente 5 min.
3.1.4- Pasados los 5 min de efecto de la lidocana adicionar nuevamente unas gotas de HCl
0.1 N observar y registrar los resultados.

3.2- ESTMULO TRMICO.

3.2.1- Calentar agua a 40C.
3.2.2- Colocar tres lombrices en una caja Petri.
3.2.3- Dejar caer de manera continua y con ayuda de una pipeta pasteur agua previamente
calentada a 40 C y observar si reaccionan, de no ser as intentarlo con otras lombrices
hasta ver que reaccionen.
3.2.4- Seguir calentando el agua hasta los 50 C.
3.2.5- Colocar unas gotas de lidocana e la cola de las lombrices dejar 5 min a que haga el
efecto anestsico.
3.2.6- Pasados los 5 min verter de manera contante un poco de agua previamente calentada
a 50 C.
3.2.7- Observar si reaccionan o no y registrarlo.

3.3- ESTMULO FSICO.

3.3.1- Colocar tres lombrices en una caja Petri.
3.3.2- Picar la cola de la lombriz (la zona ms anillada y mvil) con una aguja, observar la
reaccin de la lombriz.
3.3.3- Adicionar unas gotas de lidocana y dejar hacer efecto por un aproximado de 5 min.
3.3.4- Tras pasar los 5 min volver a picar la cola de la lombriz con la misma aguja observar y
registrar si hubo o no reaccin.

Cuestionario

1. Mencione brevemente el mecanismo de accin de un anestsico local.

2. La estructura qumica de un anestsico local consta de:
3. En la preparacin citico-gastrocnemio, menciona el sitio de accin del anestsico
local.
4. Que se observa al colocar los electrodos directamente en el msculo?
5. Usos clnicos de los anestsicos locales.
6. Por qu se tiene que descerebrar y desmedular a la rana en la preparacin citico-
gastrocnemio?
7. Defina Umbral de excitacion
8. Al aadir un vasoconstrictor, como la adrenalina a un anestsico local, la absorcin
aumenta o disminuye.
9. Cul es el efecto del pH en los anestsicos locales?
10. Qu modelos se usan para la evaluacin de anestsicos?

18
Referencias

1. William Catterall y Kenneth Mackie. Anestsicos locales. In Goodman and

Gilman, las bases farmacolgicas de la teraputica, 9th ed. (Ardian JUL, Limbird
LE, Molinoff PB, Rudon RW Eds). Ed. McGrawn-Hill. Inc., New York 1996.
2. Cedric M. Anestsia local y anestsicos locales. In farmacologa, 1. Ed. (Smith,
CM., Reynard, AM Eds). Buenso Aires, Argentina, 1993, pp. 219-230
3. Mary J, Myce, Sheldon B, Gertner, Maria Mena Perper. In farmacology,
Lippincotts illustrated Reviews. (Harvey RA., Champe PC Eds) J.B. Lippincott
Company, 1992.

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Prctica No.4

Anestsicos Generales
Introduccin

La definicin de anestesia general ha sufrido pocas modificaciones desde su

descubrimiento en 1845, con las experiencias de Wells con xido nitroso y de Morton en
1846 con ter. Clsicamente, se la ha definido como una depresin descendente y
controlada de las funciones del SNC inducidas farmacolgicamente. Otra forma ms
prctica de definir la anestesia general es en funcin de los objetivos que persigue, como
un estado reversible de depresin del SNC, caracterizado por prdida de la conciencia
(hipnosis), de la sensibilidad (analgesia), de la actividad refleja (proteccin
neurovegetativa) y de la motilidad (relajacin muscular).

En la actualidad se habla de estado anestsico, que se define como el resultado

de la accin combinada y dinmica de diversos efectos farmacolgicos que pueden
aparecer por la activacin de diversos grupos de receptores, dando lugar a hipnosis,
analgesia, bloqueo de la unin neuromuscular, amnesia y bloqueo de la respuesta
vegetativa al estrs. Dinamismo (cambio de las necesidades de efecto farmacolgico) y
sinergia (potenciacin de los efectos) son dos aspectos fundamentales en la combinacin
necesaria para mantener este estado anestsico.

Al obtener mayor informacin sobre el mecanismo de accin de los anestsicos

generales, se han diferenciando dos componentes fundamentales en la representacin
grfica del concepto de anestesia moderna. Un componente sera el cortical, que
integrara inconsciencia y amnesia, y el segundo o subcortical, que correspondera a la
antinocicepcin (analgesia) y la estabilidad motora y autnoma (relajacin muscular y pro-
teccin neuro vegetativa).

A pesar de las investigaciones realizadas, an no est claro el mecanismo de

accin de los anestsicos generales. Se ha considerado que los agentes
anestsicos generales eran frmacos de accin inespecfica que modificaban las
propiedades fisicoqumicas de la membrana neuronal.

Meyer y Overton postularon la teora de un lugar de accin lipofilo y relacionaron la

potencia del anestsico con su solubilidad lipdica.

En la actualidad se piensa que los anestsicos generales ejercen su efecto en la

transmisin sinptica y no en la conduccin axonal. Actuaran fundamentalmente
sobre protenas y no sobre lpidos, de forma que los estudios que se realizan en la
actualidad se dirigen a los mecanismos moleculares de la anestesia.

Una serie de receptores, canales de iones (Ca2+, K+) dependiente de voltaje,

canales de iones dependientes de ligando (GABA, NMDA) y neurotransmisores se
han considerado lugares especficos en los que actuaran los anestsicos gene-
rales.

Coeficiente de particin sangre/gas. El agente inhalatorio pasa desde el alvolo a la

sangre para luego llegar al cerebro. Este coeficiente informa de la solubilidad en sangre
(agua) del frmaco y es, por lo tanto, inversamente proporcional a la rapidez de su accin.

Coeficiente de particin aceite/gas. El tejido cerebral es rico en lpidos. Cuanto ms

liposoluble sea el agente, ms se retendr en el SNC. Por lo tanto, es un ndice
directamente proporcional a la potencia del agente anestsico.

21
Etapas de la anestesia

Perodo I: induccin-analgesia. Abarca desde el inicio de la anestesia hasta la

prdida de conciencia. Se comprueba la ausencia de respuesta a las rdenes verbales, no
hay prdida de respuesta al dolor, aunque el grado de analgesia depende del tipo de
anestsico empleado.
Perodo II: excitacin o delirio. La respiracin es irregular, hay retencin de la
respiracin, posibilidad de laringospasmo y secreciones. El ritmo cardaco aumenta e
incluso puede haber arritmias. La respuesta a estmulos fsicos est aumentada. Es el
periodo de mayor peligro para el paciente porque pueden aparecer complicaciones, como
obstruccin de las vas respiratorias superiores por relajacin de la musculatura de la
faringe, laringospasmo, regurgitacin o aspiracin del contenido gstrico, acumulacin
excesiva de secreciones e hipotensin secundaria a una depresin miocrdica o a
vasodilatacin perifrica.
Los dos primeros perodos constituyen la induccin, que se caracteriza por la
prdida rpida de la conciencia y el paso al plano superficial de la anestesia quirrgica.
Perodo III: anestesia quirrgica propiamente dicha: En este periodo, que incluye
cuatro planos, la respuesta somtica a los estmulos disminuye progresivamente hasta ser
nula en la anestesia profunda. Al principio, el ritmo cardaco y la frecuencia respiratoria son
regulares, pero sta va deprimindose hasta presentar apnea. La frecuencia cardaca se
mantiene estable en cuanto al ritmo, pero se inicia un ligero descenso de la presin arterial;
se produce relajacin muscular.
Perodo IV: parlisis bulbar. Se produce por depresin de los centros bulbares
hasta el paro respiratorio, coma y muerte. Esta situacin puede ocurrir por un accidente
anestsico al profundizar la anestesia.

Tipos de anestesia general

Segn el tipo de frmaco empleado para garantizar la hipnosis, se distinguen los siguientes
tipos de anestesia:

Monoanestesia. Se empleaba un solo frmaco. Este tipo era caracterstico en las

anestesias con ter y cloroformo.
Anestesia general balanceada. Generalmente se utiliza un inductor hipntico
intravenoso, se mantiene con un agente inhalatorio y se combinan con opioides y
relajantes musculares.
Anestesia intravenosa total. Se emplea propofol como inductor y en perfusin para
el mantenimiento de la hipnosis. Se prescinde por completo de los inhalatorios y se
emplean analgsicos y relajantes musculares.
Anestesia con induccin y mantenimiento inhalatorio total. Se emplea un agente
inhalatorio para la induccin anestsica (generalmente sevoflurano) y se mantiene
la hipnosis con l. No se utiliza propofol ni otros hipnticos intravenosos. Se
combina con analgsicos centrales y relajantes musculares.
Neuroleptoanestesia. Se empleaban neurolepticos (deshidrobenzoperidol)
asociados a opiceos. Mayor efecto antiemtico, despertar ms lento. En desuso.
Anestesia analgsica. Se basa en el efecto hipntico colateral de los opioides
cuando se emplean en dosis muy altas. Muy empleada en ciruga cardaca.
Anestesia disociativa. Se emplea ketanamina como hipntico. No tiene efecto
depresor cardiorrespiratorio y proporciona una analgesia eficaz.

22
Tabla 1. Contenido fsico y frmula de los agentes anestsicos

Objetivo
Demostrar la analgesia general en camarones, producida por frmacos o sustancias
con propiedades anestsicas.
Identificar las etapas de la anestesia general.
Identificar el tiempo en que produce su efecto el frmaco, y el tiempo de recuperacin
del camarn

Material, equipo y reactivos

MARERIAL BIOLGICO
Cuatro camarones de tamao mediano

MATERIAL Y EQUIPO
Dos peceras
Bomba para oxigenacin
Vaso de precipitados 500ml
Jeringas de 1ml

REACTIVOS
Halotano

Metodologa
1. Colocar los camarones en una pecera
con oxigenacin para observar su
comportamiento inicial, si es necesario,
inducir el movimiento con una varilla
de vidrio, picando en los costados del
camarn.
2. En otra pecera, colocar 0.25ml de halotano
en 500ml de agua.
3. Colocar uno de los camarones en la pecera
con halotano y picar de la misma forma
con la varilla de vidrio. Registrar el tiempo
de latencia.
4. Seguir registrando el tiempo de excitacin
(sobrerreaccin al estmulo), hipnosis
(movimiento pero no reaccin al estmulo)
y anestesia (se voltea completamente de
cabeza y se encorva).
5. Cambiar al camarn a la pecera con
oxigenacin y registrar el tiempo de

23
 recuperacin.
6. A la pecera con halotano agregar otros 0.25 ml de este ANESTESICO y colocar al otro
camarn.
7. Realizar el mismo procedimiento que con el primer camarn.
Video: https://www.youtube.com/watch?v=o_TPX0tZ1oM&feature=youtu.be

Cuestionario

1. Cul es el mecanismo de accin de los anestsicos generales?

2. Mencione las etapas de la anestesia general.
3. Qu otros frmacos adems del halotano existen como anestsicos generales?
4. Qu otras sustancias se administran en conjunto con los anestsicos generales y cmo
funcionan?
5. A qu se refiere el CAM de un anestsico general y que representa?
6. Qu es el coeficiente de particin?
7. Cmo se interpreta la velocidad con que surte efecto un frmaco, con respecto al
coeficiente de particin? Por qu?
8. Qu es la hipnosis y por qu se presenta en estos anestsicos?
9. Describa el principio de Fick y su relacin con el coeficiente de particin
10. Cul es la razn de preferir camarones en lugar de acociles en la prctica

Referencias

1. Goodman & Gillman's, Las bases Farmacolgicas de La teraputica, 10a ed., Me. Graw
Hill, Mxico 2003
2. BertrandG. Katzung, Farmacologa Bsica y Clnica, 8a ed., Manual Moderno, Mxico
2002
3. C. Barastegui Almagro. Esquemas y Prcticas de Farmacologa. Editorial Espax, 1976,
Barcelona, Espaa.

24
Prctica No. 5

Valoracin del Efecto Anticonvulsivante

Introduccin
El trmino epilepsia, es una enfermedad crnica que se refiere a un grupo de
sndromes del SNC, caracterizado por accesos de descargas neuronales sincrnicas
sostenidas, los cuales son sbitos, transitorios y recurrentes. Afectan los siguientes sistemas:
autonmico, psquico, sensitivo y motor, creando gran variedad de signos y sntomas. El
trmino convulsin se utiliza como sinnimo de epilepsia. La etiologa es multifactorial (causas
metablicas, defectos cerebrales congnitos, prenatales, perinatales (durante el parto),
postnatales y convulsiones provocadas por agentes qumicos).
Como ejemplos tenemos: hipoglucemia, hidrocefalia, infecciones, dao cerebral por
parto prolongado, cisticercosis y las provocadas por pentilentetrazol, etc. Son varios los
mecanismos neurofisiolgicos y bioqumicos que intervienen en la enfermedad: cambios
bioqumicos locales, isquemia, prdida de sistemas inhibitorios vulnerables, descargas
sincrnicas de otras clulas, etc.

Las crisis epilpticas se clasifican en:

1- Parciales (focales y locales)

Parciales simples
Parciales complejas
Parciales generalizadas de tipo secundario

2- Crisis Generalizadas Convulsivas o No Convulsivas

Crisis de ausencia
Crisis de ausencia atpicas
Mioclnicas
Clnicas
Tnicas
Tnico clnicas (Gran Mal) status epilptico
Atnicas

Por lo tanto, para tratar la epilepsia se debe descartar si hay un solo tipo de crisis o si
se presentan varios tipos ya que de eso depende un buen tratamiento.
Los anticonvulsivos se clasifican en varios grupos para tratar los diferentes tipos de
crisis:

1. Hidantoinas: hidantoina (Canales de Na+)

2. Iminoestilbenos: carbamazepina (Canales de Na+)
3. Barbitricos: fenobarbital (Mediadores GABA)
4. Desoxibarbitricos: primidona
5. Succimidas: etosuccimida (Canales de Ca2+)
6. Oxazolindionas: parametadiona (Canales de Na+)
7. Benzodiacepinas: diacepam (Mediadores GABA) 8- Otros grupos: cido valproico
(Canales de Na+)

Los ms utilizados para crisis generalizada son las hidantoinas y la carbamazepina y

para las ausencias la etosuccimida. Para el estado epilptico el ms recomendable es el
Diazepam

26
 El mecanismo de accin de los anticonvulsivos (del tipo benzodiacepinas) es disminuir
la entrada de calcio por bloqueo de los conductos de sodio (despolarizacin) y potenciar los
efectos inhibitorios debido a la estimulacin de vas GABAergicas por aumento de descargas
de abertura de los canales de cloro.
Para la valoracin de nuevos medicamentos, se utiliza el pentilentetrazol para crear
crisis convulsivas. Esto provoca hipoxia por espasmo vascular lo que ocasiona cambios
degenerativos en la corteza cerebral debido al antagonismo fisiolgico.

Objetivos

Demostrar el efecto anticonvulsivante del diazepam en las convulsiones producidas

por el pentilentetrazol,
Observar que tipo de convulsiones produce el pentilentetrazol.

Material, Equipo y Reactivos

MATERIAL BIOLGICO
Dos ratas Wistar
MATERIAL Y EQUIPO
Dos jeringas para insulina
REACTIVOS
Solucin de Pentilentetrazol de 65 mg/mL
Diazepam de 5 mg/ml

Metodologa

1. Pesar cada rata y marcarlas, una se usar para probar el efecto preventivo y en la otra
el efecto curativo del diazepam.
2. En la rata marcada como 1,administrar diazepam 2mg/kg va intraperitoneal
3. Esperar 20 minutos.
4. Aplicar una dosis de pentilentetrazol 64mg/kg va intraperitoneal.
5. Observar si se presenta algn tipo de convulsin.
6. En caso de que ocurra se anota la latencia del pentilentetrazol y tipo de convulsin.
7. Para observar el efecto curativo del diazepam, administrar a la rata marcada como 2,
una dosis de 64mg/kg de pentilentetrazol va intraperitoneal.
8. En cuanto aparezca la convulsin aplicar la dosis de diazepam 2mg/ kg va
intraperitoneal.
9. Tomar el tiempo de latencia para el inicio del efecto del diazepam.
10. Realizar el sacrificio de los animales con ayuda de cloroformo.
11. Anote sus resultados en las siguientes tablas

Tabla 1: Anlisis del efecto Preventivo

Equipo Tipo de latencia del Pentilentatrazol No convulsion
1

27
Tabla 1: Anlisis del efecto Anticovulsivo
Equipo Tipo de latencia del Diazepam No convulsion
1

NOTA: SLO SE LLEVAR A CABO UNA PRCTICA POR

GRUPO Y SE PASAR UN VIDEO DEMOSTRATIVO

Video: https://www.youtube.com/watch?v=Snf2fA_5AO8&feature=youtu.be

Cuestionario
1. Defina estado epilptico
2. Escriba la clasificacin de las crisis convulsivas
3. Escriba la clasificacin de los anticonvulsivos
4. Escriba y analice el mecanismo de accin de los anticonvulsivos
5. Cules son los efectos adversos generales de los anticonvulsivantes?
6. Cul es el mecanismo de accin que est presentando el Diazepam como
anticonvulsivante?
7. Describa la farmacocintica del Diazepam
8. Cules son los efectos adversos del Diazepam?
9. Cules son los usos clnicos del Diazepam y del Pentilentetrazol?
10. Cules son las interacciones del Diazepam?

Referencias
1. Hardman, J. Limbird L. Molinof P. Ruddon R. and Goodman A. 1996. Goodman &
Gilman. Las Bases Farmacolgicas de la Teraputica. 9 Edicin. Vol. 1. Ed. McGraw Hill
Interamericana. E.U.
2. Katzung, B. 2001. Farmacologa Bsica y Clnica. 8 Edicin. Ed. Manual Moderno,
Mxico.
3. Smith, C. Reynard A. 1993. Farmacologa. Ed. Mdica Panamericana. Argentina.

28
Prctica No. 6
Frmacos
Cardiotnicos
Introduccin
Los digitalicos son los cardiotnicos ms antiguos utilizados en el tratamiento de la
insuficiencia cardiaca congestiva (ICC). Son sustancias de origen natural, cuya fuente
importante de obtencin es la Digitalis purprea o Digitalis lanata y el prototipo es la
digoxina, medicamento compuesto por un ncleo esteroidado con un anillo lactona de cinco
miembros no saturados en posicicn 17 y una serie de azcares unidos al carbono 3 del
ncleo, cuya rekacin estructura-actividad le confiere las actividades farmacocineticas y
farmacodinmicas. Siendo el ncleo esteroide y la lactona responsables de su actividad
cardiotnica, los residuos glucosidicos influyen en la absorcin, la vida media y su
biotransformacin.

La digoxina tiene un margen de seguridad muy estrecho, lo que lleva a presentar

con facilidad efectos txicos. Su mecanismo de accin molecular lo ejerce inhibiendo la
Na+,K+ ATPasa lo que se manifiesta en mltiples efectos cardiovasculares tanto directos
como indirectos, as como modificacin del funcionamiento mecnico y elctrico del
corazn lo que se traduce en aumento de la fuerza de contraccin o inotropismo positivo
y una disminucin del automatismo y decremento en la velocidad de conduccin del
sistema de Purkinje o cronotropismo negativo. Los efectos txicos de estas sustancias
son en gran medida consecuencia de una manifestacin exagerada de su mecanismo de
accin como sera: bradicardia y paro sinusal, bigeminismo, bloqueo auriculo-ventricular
de segundo grado y otros tipos de arritmias cardacas, hasta llegar al paro cardaco.
Todas estas manifestaciones, tienden a ser compenadas o antagonizadas por el Sistema
Nervioso Autnomo del organismo como el sistema Simptico y Parasimptico.

Objetivo
Se alcanzar y demostrar el efecto txico de un glucsido cardiaco (digoxina)
aplicado al corazn de la pulga de agua

30
 Se demostrarn los efectos inotrpicos positivos y cronotrpico negativos de la
digoxina aplicada al corazn de la pulga de agua
Se compararan los efectos producidos de la digoxina con otras substancias
cardiotnicas administradas a la pulga de agua

Material, Equipo y Reactivos.

PARTE 1 (1 Sesin)

MATERIAL BIOLGICO
NO

MATERIAL Y EQUIPO
Computadora personal con simulador instalado

REACTIVOS
NO

PARTE 2 (2 Sesin)

MATERIAL BIOLGICO
Pulgas de agua (1 bolsa por grupo)

MATERIAL Y EQUIPO
Microscopio
Cronometro
Caja de Petri
Pipetas Pasteur
6 jeringas de 1 ml
2 Portaobjetos

REACTIVOS
Digoxina
Epinefrina
Atropina
Pilocarpina
Solucin de cloruro de sodio al 2% p/v
Solucin de cloruro de potasio al 2% p/v
Solucin de cloruro de calcio al 2% p/v

Metodologa

Mtodo 1: uso del simulador

Estimulacin electrica
1. Seleccionar el ejercicio de Fisiologa cardiovascular de rana en el men principal.
2. En la barra superior dar click a experimento y seleccionar Estimulacin elctrica.
3. Tomar el electrodo para la estimulacin directa y colocarlo en el soporte.
4. Observar el ritmo cardiaco basal y proceder a estimular el corazn. Ensayar para
estmulos simples y mltiples.
5. Una vez visualizados los efectos proseguir con la estimulacin del nervio vago
con el otro electrodo.
Modificadores de la frecuencia cardiaca

31
 1. Seleccionar el experimento de frecuencia cardiaca en la barra superior.
2. Observar la frecuencia cardiaca y guardar datos.
3. Seleccionar la solucin y aplicar sobre el corazn de la rana.
4. Dejar actuar y guardar datos hasta que el ritmo se marque como estable.
5. Enjuagar con la solucin Ringer a 23C.
6. Ensayar con otras soluciones y con el efecto de la temperatura.

Mtodo 2: uso de la pulga de agua

1. Coloque suficiente agua que contenga a la pulga de agua en una caja de Petri y
con una pipeta Pasteur tome una pulga de agua.
2. Deposite la pulga de agua sobre un
portaobjetos cuidando de no dejar
un excedente de agua.
3. Enfoque a la pulga de tal manera
que pueda observar claramente
los latidos del corazn.
4. Cuente los latidos durante quince
segundos y tmelo como una
medida basal; el conteo se
realiza entre dos personas, la
primera indicar el inicio y fin de los
15 segundos y la segunda persona
contar los latidos.
5. Aada una gota de una de las
sustancias a evaluar, deje que
acte por un minuto y proceda a
contar los latidos por 15 segundos.
6. Evale cada substancia con una pulga
diferente y registre el efecto presentado
en una tabla indicando si el efecto fue
positivo o negativo.

Sustancia efecto Inotropismo Cronotropismo

Digoxina
Epinefrina
Atropina
Pilocarpina
Calcio
Sodio
Poptasio

Cuestionario

1. Qu es un cardiotnico y que un glucsido cardioactivo, anotar ejemplos?

2. Cul es la relacin estructura -actividad de los glucsidos cardioactivos?
3. Qu diferencias farmacocinticas existen entre los digitlicos?
4. Qu parte de la estructura del digitlico le da las propiedades farmacocinticas?

32
 5. Cul es el mecanismo de accin de los glucsidos cardioactivos y como se
manifiesta en la funcin cardiaca?
6. Cules son los efectos txicos de los glucsidos cardioactvos?
7. Cules sern los usos o indicaciones de los glucsidos cardioactivos?
8. Haga un esquema de la anatoma de la pulga de agua, localice el corazn e
indique cuntos latidos realiza por minuto
9. Qu frmacos son agonistas directos de los receptores dopaminrgicos y con
acciones estimulantes sobre receptores y adrenrgicos?
10. Frmaco que aumentan la contractilidad cardaca y producen vasodilatacin
arteriovenosa y reduccin de las resistencias vasculares perifricas?

Referencias

1. Goodman & Gillman's, Las bases Farmacolgicas de La teraputica, 10"

ed., Mc. Graw Hill, Mxico 2003
2. Bertrand G. Katzung, Farmacologa Bsica y Clnica, 8a ed., Manual
Moderno, Mxico 2002
3. Barastegui, AC, Esquemas y prcticas de Farmacologa. Espaxs, Espaa 1976.

33
Introduccin

Los diurticos (o salurticos) son frmacos que incrementan la produccin de orina

(diuresis) y la excrecin de sodio (Na). Actan principalmente sobre el rin, inhibiendo la
reabsorcin de NaCI y agua, aumentando por tanto la excrecin urinaria de estas sustancias. Se
utilizan principalmente para el tratamiento del EDEMA.

Fisiologa De La Nefrona

Los riones controlan el volumen del fluido extracelular ajustando la excrecin de NaCI y
H20. Diariamente los riones filtran ms de 22 moles de Na+ , los cuales se reabsorben por los
tbulos renales, para mantener el equilibrio.
El cuerpo mantiene la presin sangunea a expensas del volumen del fluido extracelular.
Cuando la ingesta de NaCI es mayor que su eliminacin (p.ej. en falla congestiva cardiaca o falla
renal) se desarrolla edema.
La reabsorcin de sodio se debe primeramente a la adenosin trifosfatasa (ATPasa)
localizada en la parte lateral de la membrana de las clulas epiteliales del nefrn. La bomba de
Na+ /K+ necesita energa para intercambiar un Na+ por cada dos K + , manteniendo una baja
concentracin de Na+ y alta concentracin de K + en el interior de la clula. En el lado de la luz
tubular, existen vas pasivas para el movimiento del Na+ electroqumico del lumen a la clula.
Esas clulas son las bases fisiolgicas de la accin diurtica.

Farmacologa De Los Diurticos.

El primer acierto de los diurticos es la reduccin del edema por reduccin del volumen
del fluido extracelular, y para que esto ocurra, la secrecin de Na+ deber exceder a su ingesta.
En principio, los diurticos previenen la entrada de Na+ a las clulas tubulares. Una vez
que el diurtico entra al fluido tubular, el sitio de la nefrona donde acta determina su efecto. Es
decir, el sitio de accin determina tambin que otros electrolitos, adems del Na+, sern
afectados.
Todos los diurticos, excepto la ESPIRONOLACTONA, ejercen sus efectos en el lado
luminal de la nefrona. Por eso deben alcanzar el fluido tubular para tener efecto. Por ejemplo, el
manitol lo hace por filtracin en los glomrulos; los dems diurticos, como estn fuertemente
enlazados a las protenas, se filtran escasamente, llegando al lumen por secrecin a travs del
tbulo proximal (va secretoria de bases y cidos orgnicos).
El bajo flujo sanguneo renal o falla renal, disminuyen la eficacia de los diurticos, as
como drogas que compiten por la bomba secretoria como el PROBENECID para las drogas cidas,
o la CIMETIDINA para drogas bsicas. Diurticos Con Accin En El Tbulo Contorneado Proximal.
El tbulo proximal determina el grado de liberacin de Na+ y H20 a zonas ms lejanas de
la nefrona. Una amplia variedad de transportadores acoplan el paso del Na+ al interior de la
clula, al movimiento de aminocidos, glucosa, fosfato, y otros solutos, MANITOL: Es un diurtico
osmtico no metabolizable y es filtrado haca el espacio tubular incrementando la osmolalidad
del fluido tubular. Esto trae como consecuencia reabsorcin aumentada de fluido resultando en
excrecin aumentada de agua acompaada de un poco de Na+.

Inhibidores De La Anhidrasa Carbnica (Acetazolamida)

El bicarbonato se reabsorbe en el tbulo proximal. El in H+ es secretado al lumen
en donde se une con bicarbonato filtrado (HC03+) para formar H2C03 el cual es convertido

35
en H20 y C02 por accin de la anhidrasa carbnica. EL C02 difunde al tbulo proximal en
donde se combina con H20 para formar H2C03, el cual a su vez forma H+ y HC03+. Este
ltimo sale del tbulo hacia la sangre, mientras H+ es secretado nuevamente a la luz
tubular, resultando en reabsorcin de HC03+. Si la actividad de la anhidrasa carbnica se
reduce, la reabsorcin de HC03+ tambin disminuye y la sale al tbulo proximal en
cantidades mucho ms grandes. Aunque el Na+ es el principal catin que acompaa la
salida del HC03+ del tbulo proximal, se reabsorbe ampliamente en el tbulo distal el
intercambiado por K+. Por lo tanto, la ACETOLAMIDA causa principalmente un incremento
de HC03+\ K+ y H20 urinario.
Diurticos De Asa
Actan principalmente bloqueando el co-transportador de Na+/K+/Cr en la
membrana apical de la rama ascendente del asa de Henle. Como en este sitio se
concentra y diluye la orina, los diurticos de asa disminuyen al mximo la concentracin
y dilucin urinaria. En esta parte ascendente del asa se reabsorbe Ca++ y Mg++, proceso
dependiente de la reabsorcin normal de Na+ y CI-. Por lo tanto los diurticos de asa
incrementan la excrecin urinaria de agua, Na+, K+, Ca++ y Mg++. EJEMPLOS:
Furosemida, bumetanida y cido etacrinico.

Diurticos De Tbulo Contorneado Distal.

Tiazidas y drogas anlogas inhiben el transporte de Na+ y CI- a nivel de tbulo
distal. A comparacin de los diurticos de asa, poseen accin diurtica suave o
moderada debido a que en esta parte del glomrulo se reabsorbe menos Na+. Adems,
si los rangos de filtracin glomerular declinan, menos fluido llegar al tbulo distal y las
tiazidas tendrn un impacto mnimo sobre la excrecin de agua y Na+.
EL uso de la tiazidas incrementa la reabsorcin de fluidos y solutos en el tbulo
proximal. Se manifiesta un incremento de la absorcin de Ca++ y cido rico en el tbulo
proximal.

Diurticos de Tbulos Colectores.

ESPIRONOLACTONA: ES un antagonista competitivo de la aldosterona. Bloquea la
reabsorcin de Na estimulada por aldosterona y la excrecin de K+ y H+ en tbulos
distal y colector. Tambin reduce la amoniognesis estimulada por aldosterona a lo
largo del nefrn.
AMILORIDE Y TRIAMTERENE: Inhiben el canal de Na+ en la membranas apicales de
los tbulos distal y colector. Debido a que en esta zona de la neurona la secrecin de
K+ y H+ se explican principalmente por los gradientes electroqumicos generados por la
reabsorcin de Na+, se reduce el transporte de K+ e H+ haca la orina.
El estudio de estos frmacos generalmente se basa en la determinacin de la
diuresis y en los electrolitos eliminados al administrar estos frmacos en animales de
36
experimentacin. Para ello se recomienda usar ratas o perros debido a que su patrn de
excrecin urinaria es ms regular. Los mtodos que nicamente miden diuresis son
cualitativos, como el usado en esta prctica. Existen otros mtodos para estudiar
mecanismos y sitio de accin de estos medicamentos (mtodos de aclaracin renal,
mtodos de diuresis interrumpida, mtodos de micropuncin y mtodos de
microperfusin en segmentos de la nefrona).

Objetivo

Demostrar la diuresis en ratas producida por frmacos o sustancias con

propiedades diurticas.

Material, Equipo y Reactivos

MATERIAL BIOLGIO
1 Rata Wistar de 150-200 gramos de peso, de preferencia del mismo sexo y
edad.
MATERIAL Y EQUIPO
Jaula Metablica
Probeta Graduada
Balanza Granataria
Jeringas de 1 y 5 mL
REACTIVOS
Solucin fisiolgica (NaCI 0.9 %), que se utiliza como control negativo.
Furosemida (Control positivo)

Metodologa

1. Pesar e identificar a cada animal de experimentacin.

2. Al grupo control negativo (sin tratamiento) se administra 25 mL/kg de solucin
salina va I.P.
3. Al grupo control positivo (con tratamiento) se le administrar por va I.P. 25 mL/kg
de solucin salina ms una dosis de furosemida (20 mg/kg de peso).
4. Se colocan las ratas en jaulas metablicas durante 2.5 horas.
5. Se mide el pH y el volumen de orina excretada cada 15 minutos, durante las 2.5
horas.
6. Se determina la orina acumulada durante las 2.5 horas.
7. Terminado el experimento, se retiran los animales de las jaulas metablicas.
8. Determinar y tabular: pH, densidad y volumen de cada una de las muestras.

37
 CLCULOS:

Realizarlos siguientes clculos para cada animal de experimentacin:

1. Excrecin urinaria:

= 100

2. Accin Diurtica:

= 100

Cuestionario

1. El mtodo usado en este experimento permite determinar la diuresis de diferentes

frmacos, es suficiente para evaluar el efecto diurtico? Diga que otro tipo de
anlisis realizara y porqu.
2. Qu otros mtodos existen para investigar el mecanismo de accin de los
diurticos?
3. La eleccin de la rata como animal de experimentacin, es correcta?
Fundamente su respuesta.
4. Esquematice el mecanismo de accin de la furosemida.
5. Indica los factores fisicoqumicos involucrados en la accin de los diurticos en
general.

6. Complete la siguiente tabla de clasificacin de diurticos:

38
 Categora Ejemplo Mecanismo de accin Sitio de accin
Diurticos de asa
Tiacidas
Inhibidores de la
anhidrasa carbnica
Diurticos osmticos
Diurticos ahorradores
de potasio

7. Cul es la relacin del pH con el efecto de la furosemida?

8. Mencione un ejemplo de un frmaco antidiurtico y explique brevemente su mecanismo
de accin.
9. Qu nombre reciben los frmacos que actan a nivel de tbulo distal y cul es su
mecanismo de accin?
10. Dibuje un esquema de la nefrona indicando sus partes.

Referencias

1. FLISER D, SCHROTER M, NEUNECK M, RITZ E. Coadminis-tration of

thiazides increases the efficacy of loop diuretics even in patients with
advanced renal faiiure. Kidney int 199;446(2):482-8.
2. SUKI WN, STINEBAUGH BJ, FROMMER JP, EKNOYAN G. Physiology
of diuretic action. En: Seldin DN, Giebisch G. eds. The kidney:
physiology and pathophysiology. New York: Raven, 1985:2127-62.
3. BYERS J, GOSHORN J. How to manage diuretic therapy. Am J Nurs
1995;95(2):38-43.
4. MELILLO L. Diuretic plants in the paintings of Pompeili. Am J Nephrol
1994;14(4-6):423-1.
5. VAN MEYEL JJ. Comparison of the diuretic effect and absorption of a
single dose of furosemide and free and the fixed combinations of
furosemide and triamterene in hearthy male adults. EUR J CLIN
PHARMACOL 1990;39(6):595-7.
6. KANG MJ, YOON WA, KIM ON, LEE MG. Effects of water deprivation for
48 hours on the farmacodynamics of furosemide in rats. J Clin Pharm
Ther 1995;20(1): 13-21.
7. Goodman & Gillman's, Las bases Farmacolgicas de La teraputica, 10a
ed., Me. Graw Hill, Mxico 2003
8. BertrandG. Katzung, Farmacologa Basica y Clnica, 8a ed., Manual
Moderno, Mxico 2002
9. C. Barastegui Almagro. Esquemas y Prcticas de Farmacologa.
Editorial Espax, 1976, Barcelona, Espaa.
10. Cairo M., Fresneda M.V., Campos D. Determinacin del efecto diurtico
de Cymbopogon citratus (DC) Stapf (Caa Santa). Rev. Cubana Plant.
Med. 1(3): 13- 17, sept.-dic. 1996.
11. Nedi, T. ET AL Diuretic effect of the crude extraets of CARISSA EDULIS
in rats. Journal

39
Prctica No.8 Determinacin Espectrofotomtrica
de sodio en la orina

Servicio social.

Elabor: De Los Santos Mendoza Karina

Asesora: Jimnez Castaeda Esperanza
Introduccin

Los diurticos aumentan la excrecin urinaria de agua y electrolitos y se administran

para reducir el edema asociado a la insuficiencia cardaca, el sndrome nefrtico o la
cirrosis heptica. Algunos diurticos se administran a dosis ms bajas para reducir la
presin arterial elevada.
Los diurticos de asa, o diurticos de techo alto, como la furosemida, son los ms
potentes y rpidamente producen una diuresis intensa dependiente de la dosis de
duracin relativamente corta. La furosemida por va oral produce diuresis en los
30administracin, con el efecto diurtico mximo en 1-2 horas. La accin diurtica dura -
60 minutos de l4-a 6 horas. La furosemida intravenosa produce diuresis a los 5 minutos,
con el efecto diurtico mximo en 20-60 minutos y diuresis completa en 2 horas.
Los diurticos de asa inhiben la reabsorcin desde el asa ascendente de Henle en el
tbulo renal, y son tiles sobre todo en situaciones en las que es necesaria una diuresis
eficaz y rpida, como la reduccin del edema pulmonar agudo secundario a insuficiencia
ventricular izquierda. Tambin se utilizan para tratar el edema asociado a enfermedades
renales o hepticas y se administran a dosis altas en el tratamiento de la oliguria por
insuficiencia renal crnica. Los diurticos de asa pueden ser eficaces en pacientes que
no responden a los diurticos tiacdicos.

MECANISMO DE ACCION:

Los diurticos de asa provocan la excrecin del 20-25% del sodio (Na+)
filtrado por los riones, de ah que tambin se les conozca como diurticos de alto
techo. Actan fundamentalmente sobre la rama ascensodio (Na+) y cloruro (Cl-) desde el
tbulo dente del asa de Henlerenal hacia el tejido intersticial (reabsorcin, inhibiendo el
transporte de tubular). Esto tiene un efecto adicional, ya que al llegar ms electrlitos a la
parte distal de la nefrona, tambin se reduce la reabsorcin de agua, como consecuencia
del aumento de la presin osmtica de la orina. Los diurticos del asa inhiben el sistema
co-transporte sodio-potasio-cloruro, situado en la membrana luminal de las clulas del
asa gruesa ascendente, esencial para la reabsorcin fisiolgica de estos electrlitos. Los
diurticos del asa parecen ser responsables del desarrollo de una accin venodilatadora,
aunque se ignora si sta es de tipo directo o indirecto. Se debe a la liberacin de algn
factor renal (posiblemente, prostaglandinas). El efecto venodilatador podra contribuir
significativamente al efecto diurtico de estos frmacos.

Mecanismo de accin de los diurticos de asa Reduccin de la reabsorcin tubular

de sodio

41
El siguiente mtodo sirve para determinar sodio en orina mediante la precipitacin del
sodio del sobrenadante libre de protenas como triple sal. La disminucin resultante de
la absorbancia de la mezcla de reactivo de color -sobrenadante es proporcional al
contenido de sodio de la muestra, por lo cual al determinar el sodio excretado por una
rata a la que se le administre un diurtico de asa podremos de terminar el tiempo
mximo de la diuresis.

Objetivo:

Determinar el tiempo mximo de diuresis, cuantificar el sodio en orina y con

esto demostrar el mecanismo de accin de los diureticos de asa.

Material
Tres pipetas de 0.5ml
Una pipeta de 5ml
Doce tubos de ensayo
Gradilla.

Material biolgico

Orina de rata (Prctica 7: diurticos)

Equipo:
Espectrofotmetro
Centrifuga
Reactivos:
Reactivo de color:
Solucin de acetato de uranilo, 20g/100ml de agua y acetato de zinc
60g/100ml de agua con cido actico (4ml y 2ml respectivamente)
etanol (200ml).
Reactivo precipitante:
Solucin acuosa de cido tricloroactico (TCA) al 25%
Estndar de sodio:
Cloruro de sodio, 4,091g/L en solucin de cido tricloroactico. Equivalente a
140mmol/L.

Agua destilada.

Preparacin de los reactivos:

Reactivo de color (1L)
De acuerdo a las proporciones ya mencionadas pesar 50g de acetato de
uranilo y disolver en 20ml de agua en ebullicin con 0.8ml de cido
actico.
Por otra parte pesar y disolver 150g de acetato de zinc en 250ml de agua en
ebullicin con 0.4ml de cido actico.

42
 Una vez preparadas las dos disoluciones mezclar ambas y colocarlas a
ebullicin hasta que sea una disolucin transparente de color amarillo
homogneo.
Enfriar la mezcla y en caso de observar algn precipitado filtrar,
posteriormente la cantidad re sultante de esta medirla en una probeta y
adicionar una cantidad igual de etanol.

Nota: En caso de que das posteriores se observe un ligero precipitado filtrar o calentar
nuevamente hasta disolverlo.

Precaucin: No se almacene en refrigeracin ni se exponga a la luz.

Reactivo precipitante (100ml)
Pesar 25g de cido tricloroactico y disolver en 100ml de agua destilada.
Estndar de sodio (20ml)
Pesar con exactitud 0.08g de Cloruro de sodio grado analtico y disolver en un
matraz volumtrico de 20ml y afora r con agua destilada.

Metodologa:
Enjuagar todo el material con poca agua destilada y secar perfectamente con
papel limpio.
De la orina recolectada de la prctica de diurticos tomar 0,5ml de cada
tiempo con una pipeta y colocarla en un tubo de ensayo cada una teniendo
la precaucin de etiquetar correctamente, posteriormente con otra pipeta
agregar 0,5ml del reactivo precipitante y agitar vigorosamente, despus dejar
reposar por cinco minutos a temperatura ambiente. Transcurridos los cinco
minutos centrifugar por cinco minutos ms (Para precipitar protenas).

Por otra parte etiquetar 11 tubos con las siguientes leyendas, RB, S, U15, U30, U45,
U1h, U1h15, U1h30, U2h, U2h30 y UC- (Reactivo blanco, estndar, muestra al
minuto15..muestra a agua destilada, al S 0.5ml del estndar de sodio y a todos los
U 0,5ml de la muestra las 2 horas y media y muestra control negativo
respectivamente).
Al tubo RB adicionar 0.5mL de desproteinizada que le corresponde. Ya que cada tubo
tenga lo que corresponde adicionar sin excepcin a todos los tubos 2.5mL del reactivo
de color y agitar vigorosamente para temperatura ambiente y centrifugar a alta
velocidad por 5 minutos ms.

43
Para obtener la cantidad de sodio en orina es necesario ajustar el espectrofotmetro
con:

() ()
=
() ()

Homogenizarr (ver tabla de abajo), realizado todo esto dejar reposar por 10 minutos a
agua destilada a 0 de absorbancia con una longitud de onda de 420nm. Luego leer el
contenido de los tres tubos ajustando entre lectura y lectura con agua.

Los resultados registrados sustituirlos en la siguiente frmula: Mmol de Na x 140

De los resultados obtenidos graficar la cantidad de sodio en mmol excretados, por el

tiempo en el que se tom la muestra y analizar los resultados con respecto al control
negativo.

Ejemplo de cmo se deben organizar los resultados y como graficarlos:

Tiempo Abs Mmol Na

(minutos)
15 0.84 120.65
30 0.816 129.33
45 0.719 137.88 Abs
60 0.822 126.98 RB 1.183
90 0.836 122.06 S 0.785
120 0.837 121.7
150 0.837 121.7
Control 0.903 98.49
negativo

44
Cuestionario:

1.- Qu resultados se esperaran obtener al cuantificar el sodio despus de administrar

un diurtico de asa?
2.- Porqu con los diurticos de asa hay un incremento de sodio
en orina?
3.- Qu tipo de protenas se pueden encontrar en la orina?
4.- Aparte del sodio que otro tipo de electrolitos se encuentran en la orina de forma
cotidiana?
5. Qu es la orina y cul es su funcionamiento en el organismo? Mencione algunas
caractersticas principales.
6. Explique los tipos de diuresis y los problemas que pueden causar.

Bibliografa:
1. A Photometric Method For The Estimation Of Sodium And Its Application To
Serum Sodium Determinatione. C. Butterworth. J. Clin. Path, (1951), 4, 99.
2. C.Barastegui Almagro. Esquemas y Prcticas de Farmacologa. Editorial
Espax, 1976, Barcelona, Espaa.
3. http://ocw.uv.es/ciencias-de-la-salud/farmacologia-clinica-aplicada-a-la-
enfermeria/l eccion24.diureticos.pdf

45
Prctica No. 9
Efecto de los Frmacos
Hipoglucemiantes
Introduccin

Una de las enfermedades ms importantes a nivel mundial, que es un serio problema

de salud pblica y que ataca a toda sociedad sin importar su estado de desarrollo de la
DIABETES MELLITUS, el 8.2% de la poblacin entre los 20 y 69 aos de edad la
padecen y cerca del 30% de estos individuos afectados desconoce si es diabtico.
Adems ocupa el tercer lugar de la mortalidad.
En condiciones normales el control del metabolismo de los carbohidratos se da por un
antagonismo fisiolgico entre dos hormonas: la insulina, que disminuye la glucemia
mientras que el glucagn la aumenta. Ambas son secretadas por el pncreas en lugares
diferentes, la insulina en las clulas y el glucagn en las clulas de los islotes de
Langerhans.

La DIABETES MELLITUS TIPO I (Diabetes Juvenil), se desencadena por la

destruccin de las clulas produciendo carencia de insulina y por lo tanto
hiperglucemia, por lo que, quienes la padecen son candidatos a la administracin de
insulina como terapia de sustitucin. La Diabetes Mellitus tipo II se desencadena por
factores metablicos incluyendo una funcin deficiente de las clulas beta y la resistencia
a la insulina en musculo esqueltico, tejido adiposo e hgado, actualmente se sabe que
su origen es gentico. El tratamiento en este caso se sabe que es con el uso de
hipoglucemiantes orales con diferentes mecanismos de accin.

Secretagogos de insulina: nitaglenida, repaglinida y sulfonilureas (estimulan

a las clulas beta del pncreas para incrementar la liberacin de insulina)

Antihiperglucemiantes: inhibidores de alfa glucosidasas, (retrasan la

absorcin de los carbohidratos en la luz intestinal), las biguadinas y las
tiazolidinedionas (aumenta la sensibilidad de la insulina).

En el caso de la prctica nos enfocaremos a dar las caractersticas generales de la

insulina que es el frmaco a evaluar como hipoglucemiante.
La insulina es una protena sintetizada en las clulas beta en los islotes de Langerhans
en el pncreas y est formada por dos cadenas peptdicas (A con 21 aminocidos, B con
30) unidas por dos puentes disulfuro. Su funcin fisiolgica es promover la captacin de
glucosa por las clulas de todos lo rganos, pero los sitios especiales para el
almacenamiento de sta, es el hgado, tejido adiposo y musculo esqueltico.
Su mecanismo de accin se da cuando se une a un receptor en la membrana celular,
desencadenndose una seria de fosforilaciones incluyendo la del transporte de glucosa
que al estar fosforilado promueve la captacin de sta al interior de la celular.

47
Antiguamente se utilizaban insulinas de origen bovino y porcino que hasta ahora ya han
desaparecido del mercado. Hoy en dia todas las insulinas humanas sintetizadas por
ingeniera gentica (DNA recombinante) por lo que estn purificadas y solo contiene una
fraccin proteca de la insulina. El nico factor que las diferencia es la duracin de la
accin, razn por la cual se adquieren en preparaciones inyectables que retardan la
liberacin.

Dicho retardo se logra:

Mediante la unin a otras protenas (protamina)
Mediante una cristalizacin

Dependiendo de cada sistema de retardo de su accin las insulinas pueden ser

rpidas, intermedias y lentas.
La va de administracin adecuada para oacientes ambulatorios es la subcutnea,
solo en coma biabtico se usa la va intravenosa y es recomendable la accin rpida en
estos casos.
Como una alternativa a un futuro corto, se esta evaluando la admininistracin por
va inhalatoria; ya se estn realizando estudios donde se observa que la tendencia de
preferencia de los pacientes varia en un 10% con respecto a la va de administracin
convencional.

Objetivo.
Demostrar el efecto hipoglucemiante de la insulina en ratas hiperglucemicas,
determinando la conentracin de glucosa en sangre.

Material, Equipo y Reactivos.

MATERIAL BIOLGICO
1 rata

MATERIAL Y EQUIPO.
3 Jeringas de insulina
3 jeringas de 10 mL
Reloj
Bao maria

REACTIVOS.
Tiras reactivas para la medicin de glucosa en sangre

Metodologa

En este procedimiento la evaluacin del frmaco (insulina) se lleva acabo comparando

el efecto hipoglucmico en el animal experimental contra controles, un positivo
(previamente cargado de solucin glucosada) y un negativo manipulado igual que el de
experimentacin y C+, en vez de solucin glucosada se le administra el mismo volumen
de solucin salina. A ningn control se le administra insulina. Esto es con el fin de que se
vea el efecto del frmaco administrado exgenamente contra el efecto ms lento que se
observar de la insulina endgena previa estimulacin por la carga de glucosa (control
(+)) y el control (-) servir como referencia de la concentracin de glucosa normal y para

48
asegurar que la disminucin de glucosa en sangre del animal experimental se debe al
frmaco y no a la manipulacin.

1.- Marcar las ratas del 1 al 4. Tomar una muestra a tiempo cero antes de manipular al
animal, para obtener el valor basal de glucosa. La muestra se toma realizando una
incisin en la arteria caudal de la cola de la rata.

2.- La rata marcada ser utilizada segn la siguiente indicacin

Rata 1 (control -): Administrar por va intraperitoneal 7mL de solucin

salina.
Rata 2 (control +): Administrar por va intraperitoneal 7mL de solucin
glucosada.
Rata 3 (experimental): Administrar por va intraperitoneal 7mL de solucin
glucosada.
Rata 4 (experimental): Administrar por va intraperitoneal 7mL de solucin
glucosada.

3.- Tomar muestra cada 10 minutos hasta los treinta minutos.

4.- Para observar la absorcin de glucosa; despus de la ltima toma administrar el

volumen correspondiente de solucin salina, insulina o matarique, dependiendo del
nmero de rata:

Rata 1: Administrar el volumen correspondiente de solucin salina va

subcutnea.
Rata 2: Administrar el volumen correspondiente de solucin glucosada va
subcutnea.
Rata 3: Administrar 3 unidades de insulina va subcutnea.
Rata 4: Administrar el volumen correspondiente de la infusin de
matarique.

5.- Posterior a esta administracin tomar muestras cada 15 minutos hasta los 90
minutos o hasta alcanzar el nivel basal de glucosa.

6.- La determinacin de la concentracin de glucosa se realiza por medio de tiras

reactivas (ver las instrucciones para correcta lectura del resultado), la lectura la deber
realizar una sola persona. Con los resultados obtenidos construya una grfica de
concentracin de glucosa contra el tiempo.

NOTA: Conjuntar los resultados de todo el grupo parra sacar promedio y graficar
como se indica anteriormente.

Cuestionario.
1. Indica la clasificacin de la Diabetes Mellitus
2. Qu es la insulina?
3. Qu son los hipoglucemiantes orales?
4. Cules son las vas de administracin de la insulina?
5. Explique el mecanismo de accin de la insulina?
6. Por qu razn la insulina no se administra por va oral?

49
 7. A qu se refiere el trmino de antagonismo fisiolgico entre la insulina y el
glucagn?
8. Qu importancia tienen los controles utilizados en la prctica?
9. Cul es el mejor hipoglucemiante que se conoce?
10. Por qu la metformina es el frmaco de primera eleccin en todos los
pacientes con diabetes Mellitus tipo 2?

Referencias.

Tbar Mass F J y Escobar Jimnez F. Diabetes mellitus en la prctica clnica.

Argentina; panamericana. 2009.
Goodman Luis S y Gilman Alfres. Bases farmacolgicas de la teraputica. 5 ed.
Mxico; Interamericana. 1978. 1281-1285
Rang H P et al. Farmacologa 6 ed. Espaa: Elsevier. 2008 397-408

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Anexo prctica 3: Simulador

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Anexo prctica 3: Simulador

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Anexo prctica 3: Simulador

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Anexo prctica 3: Simulador

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Anexo prctica 3: Simulador

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Anexo prctica 3: Simulador

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Anexo prctica 3: Simulador

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Anexo prctica 3: Simulador

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Anexo prctica 3: Simulador

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Anexo prctica 6: Simulador

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Anexo prctica 6: Simulador

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Anexo prctica 6: Simulador

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Anexo prctica 6: Simulador

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Anexo prctica 6: Simulador

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Anexo prctica 6: Simulador

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Anexo prctica 6: Simulador

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Anexo prctica 6: Simulador

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Anexo prctica 8

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Anexo prctica 8

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