Ao 3 Nro.

El Control de las Enfermedades Virales

L
as enfermedades virales afectan a todos los seres vivos y
sus efectos son conocidos desde hace siglos, aunque slo
han sido comprendidas desde la centuria pasada.
En la medicina veterinaria y en especial en la industria
avcola, histricamente y an en la actualidad, las infecciones
producidas por virus constituyen una permanente amenaza
para la salud de las aves, afectando seriamente la salud de stas
y a su vez causando serias bajas en la productividad, con las
consecuentes prdidas econmicas.
Generalmente las infecciones virales se presentan
abruptamente; en otros casos, tal vez los menos, causan un
dao progresivo de curso subclnico.
La importancia de los virus radica que para su control slo
existen dos herramientas: La induccin de inmunidad y la
vigilancia epidemiolgica.
La generacin de inmunidad es uno de los caminos seguros
para realizar el control de la enfermedad. Sin embargo, debido
a las caractersticas mutagnicas de los virus, la altsima
variedad de los mismos y las caractersticas de diseminacin de
la infeccin, hacen que actualmente sea extremadamente
difcil su control.
La generacin de inmunidad se ve afectada tambin ya que
existen muchos tipos de virus, que desde ya son
inmunosupresores y dan la apertura para superinfecciones.
La vigilancia epidemiolgica, al igual que la generacin de
inmunidad, trata de evitar el contagio y/o el ingreso de una Figura 1:
infeccin a una poblacin susceptible, utilizando para esto Corte transversal de una clula en donde se ilustra la
normas y polticas establecidas en funcin a las caractersticas reproduccin viral:
patognicas de la enfermedad. 1. Agregados de subunidades proticas e inicio de la
cscara protenica.
Estructura y Composicin 2. Formacin del cido nucleico y encapsulamiento
dentro de la cscara protenica
Las ms importantes infecciones causadas por virus en la 3. Cscara protenica completa encapsulando la
industria avcola, estn mundialmente distribuidas, la molcula viral del cido nucleico.
patogenicidad de las mismas estn en funcin a la virulencia Una partcula viral desnuda.
del serotipo; en este caso una cepa viral presente en una regin, 4. Partcula viral a travs de la membrana nuclear,
resulta extica cuando sta es trasladada a otra regin. germinando a travs de la membrana nuclear, por lo
Los efectos de una infeccin viral estn en funcin al tipo tanto encapsulndose con la envoltura el virus est
de clula blanca afectada; generalmente son especficas y sus completo.
efectos estn en funcin al grado de afeccin de la clula
afectada; esto en razn a que los virus utilizan
las clula hospederas para replicarse.
Luego de invadida la clula por el agente
viral, sta queda daada y tiene dos opciones:
morir o tener una proliferacin desordenada
(infecciones tumorales).
As, s un virus tiene predileccin por
clulas nerviosas, el dao y signos de la
infeccin estar dado por la observacin de Adenoviridae Parvoviridae
problemas nerviosos. Poxviridae Herpesviridae
Desde el punto de vista microbiolgico,
los virus slo pueden ser visualizados con
Figura 3:
ayuda de un microscopio electrnico;
Representacin grfica de los diferentes virus que afectan a las aves y
pudindose demostrar su presencia mediante
la proporcin de tamao entre ellos.
la serologa y con tcnicas para determinar su
peso molecular y su cido nucleico
correspondiente.
Los virus son microorganismos de
constitucin simple, careciendo de organelos
vitales para mantener un metabolismo, razn
por la que requieren la utilizacin de una Picornaviridae
Reoviridae
clula para cumplir sus funciones metablicas
y reproductivas.
Birnaviridae
Los virus pueden contener como material Paramyxoviridae
gentico, slo uno de los dos cidos nuclecos
necesarios para la transmisin gentica: el
dexoxirribonucleico (ADN) o el ribonucleco (ARN). siguen la ruta digestiva (ruta fecal-oral por ejemplo), por
Una vez infectada la clula, el virus utiliza los sistemas de inhalacin de aerosoles, inoculacin (insectos), por contacto
generacin de energa y sntesis proteca de la clula hospedera, venreo e incluso genticamente; con este criterio se han
con el fin bsico de reproducirce (Replicacin). agrupado en virus entricos, virus respiratorios y arbovirus.
Estructuralmente, los virus tienen como unidad el virin, el a) Dentro del grupo de los virus entricos estn aquellos virus
cual es una molcula de cido nucleico rodeada por una que primariamente se replican en las clulas del tracto
cubierta denominada cpside; el conjunto del cido nucleco y digestivo (reovirus, rotavirus, enterovirus por ejemplo).
su cpside constituyen el ncleocapside. b) En el grupo de virus respiratorios se incluyen aquellos en
En algunos virus complejos el cpside envuelve una protena que primariamente se replican en clulas del sistema
central, mientras que en otros est rodeado por una lipoprotena, respiratorio y luego se distribuyen a nivel sistmico.
estos son los denominados virus con cubierta.
c) Los arbovirus son virus que afectan a artrpodos; en los
El cpside se compone de unidades morfolgicas llamadas
hematfagos, por ejemplo, los virus primero se replican en
capsmeros, los cuales les da a los virus una geometra
el insecto y luego se transmite la infeccin, por picadura a
icosadrica, sta es una caracterstica estructural de los virus
los vertebrados susceptibles.
que causan las principales enfermedades que afectan a la
industria avcola. Tambin se clasifican mediante un criterio fsico qumico,
de acuerdo a sus propiedades biolgicas, as se consideran
Clasificacin familias, gneros, especies y variantes en base a su cido
nucleico y la estrategia de su replicacin.
La clasificacin de los virus, se realiza bajo varios criterios;
as, utilizando el criterio epidemiolgico, hay virus que La clasificacin fsica es por su morfologa, su tamao, la
simetra del ncleocapside y la presencia o ausencia de cubierta,
Figura 2: lo cual es determinado por microscopa electrnica.
Todos los virus que afectan a los animales tienen un nucleocpside En las familias (cepas) se individualizan gneros en base a
helicoidal, generalmente estn envueltas por cpside icosadrico.
diferencias antignicas, este aspecto es controversial y se
confronta la opinin de virlogos en relacin al comportamiento
Capsmero de los virus en las pruebas de neutralizacin, como materia de
clasificacin de especies o el serotipo.
Actualmente los anticuerpos monoclonales son de gran
valor en la diferenciacin de los virus y para poder determinar
Protena Matriz
tipos, subtipos y variantes.
Doble Capa
Cubierta El conocimiento profundo de los virus: comportamiento
Lipdica
Pepsmero epidemiolgico, reservorios, sus caractersticas inmunognicas,
as como las fsicas y bioqumicas de su resistencia, pemitirn
establecer en la prctica las estrategias de control para evitar
Nucleocpside
que afecten una poblacin.
La Desinfeccin como medio
de control
E
s ampliamente reconocido que dentro del proceso
productivo moderno, la desinfeccin es una de las Como primer paso para efectuar una buena
principales actividades que se realizan con el propsito
de aprovechar al mximo la potencialidad de la parvada, seleccin de la sustancia o frmula
ofreciendo a las aves las mejores condiciones para su crecimiento desinfectante es recomendable la
y rendimiento. Por esta razn adquiere una importancia vital la
correcta seleccin del producto a utilizar.
evaluacin de la actividad microbicida...
Como primer paso para efectuar una buena seleccin de la
sustancia o frmula desinfectante es recomendable la evaluacin
de la actividad microbicida la cual al ser objetiva y estar Virus analizados
apoyada en suficientes pruebas de laboratorio, califica la La investigacin fue llevada a cabo con los siguientes virus
potencia bactericida, viricida y fungicida del producto. patgenos, de importancia para la industria avcola:
Tan importante como lo anterior, es conocer y evaluar la * Reovirus Aviar, cepa UConn 1133
interaccin del desinfectante con la composicin bioqumica * Rotavirus Aviar, cepa AVR-1 (Nagaraja)
del dilutor y la superficie que se planea desinfectar con esta * Bronquitis infecciosa, cepa Beaudette, ATCC VR-22
solucin. Es obvio mencionar que en esta evaluacin se debe * Virus de Gumboro, cepa Lukert
considerar aspectos tales como factores fsicos, qumicos, * Influenza aviar, ATCC VR-799
biolgicos y estructurales, aparte de otras caractersticas como * Enfermedad de NewCastle, ATCC VR-109
fotosensibilidad y termoestabilidad de la frmula desinfectante.
Una vez elegido el desinfectante, su uso debe conducirse de Materiales y Mtodos
acuerdo a las recomendaciones hechas por el fabricante en Las pruebas se desarrollaron siguiendo la metodologa
cuanto a dosis y rendimiento de la solucin desinfectante; esto aprobada por la Agencia de Proteccin del Medio Ambiente de
permitir obtener los resultados previstos. los Estados Unidos de Amrica para determinar la eficacia
Los desinfectantes han demostrado permanentemente su viricida de desinfectantes aplicados sobre superficies secas
utilidad para el control de agentes infecciosos bacterianos y inanimadas (USEPA Pesticide Assessment Guideline,
micticos, por lo que son importante herramienta en los Subdivisin G:Product Performance, 1982. Section 91-30, pp
programas de bioseguridad. Los desafos de agentes virales, al 72-76)
igual que en el caso anterior, requieren ser cuidadosamente La suspensin de virus analizados fue preparada de acuerdo
cuantificados; para esto se utiliza una metodologa ms compleja a la caracterstica de cada uno de ellos. Las suspensiones
que la empleada para evaluar la capacidad bactericida concentradas de virus de NewCastle, Bronquitis Infecciosa e
antimictica. Influenza Aviar fueron elaboradas en fluido alantoideo
Si bien es cierto que la proteccin contra enfermedades proveniente de huevos embrionados obtenidos de SPAFAS,
virales se basa en la estimulacin del sistema inmunocompetente incubados a 37 C e inoculados al noveno da de incubacin.
del ave, un importante papel en el control de enfermedades Las suspensiones de virus de Gumboro, Rotavirus y de
asociadas a virus constituye la reduccin del desafo en el Reovirus fueron obtenidas de fibroblastos de embrin de pollo
ambiente a travs del establecimiento de barreras sanitarias. provenientes de SPAFAS y desarrollados en monocapas a 37o
Con ellas se evitar que el trnsito de los animales, vehculos C. Despus de la inoculacin los cultivos fueron mantenidos en
y desechos de la actividad productiva, constituyan una causa un medio conteniendo 2% de suero fetal bovino.
del aumento del riesgo para la actividad productiva.
Una serie de pruebas han sido desarrolladas con Ucarsan Tabla NO 1: Cantidad de Principio Activo y Dureza Total del agua
como frmula desinfectante, de uso muy extendido en nuestro utilizada para la dilucin.
medio, en virtud de su composicin a base de glutaraldehdo
estabilizado en un surfactante no inico. El presente documento
sintetiza los resultados obtenidos. Virus Examinados Principio Dureza Total
Activo de agua
Objetivo de los Estudios Reovirus Aviar 500 ppm 1,146.9
Determinar la eficacia viricida de una solucin de Ucarsan Rotavirus Aviar 500 ppm 1,146.9
obtenida al diluir el producto en agua para obtener 500 ppm o 500 ppm 1,228.0
Bronquitis infecciosa
1,000 ppm de sustancia activa.
Virus de Gumboro 1000 ppm 1,146.9
La eficacia viricida se determin midiendo la reduccin de
la recuperacin de la capacidad infectiva de una superficie Influenza aviar 1000 ppm 1,144.0
contaminada con virus previa exposicin a dicha solucin. Enfermedad de NewCastle 1000 ppm 1,423.0
 Tabla NO 2: Efectividad Viricida de Ucarsan en funcin de la
Concentracin y el Tiempo de Contacto.

Bajo las condiciones de Titulo del Virus

Tiempo de
investigacin y segn la Virus Examinados Contacto
Log10 DL50/ml

metodologa seguida, dosis Minutos Control Muestra tratada

de 500 ppm y 1,000 ppm de
10 6.9 No Detectado
glutaraldehdo, provedo Reovirus Aviar
Rotavirus Aviar 10 7.9 No Detectado
por el desinfectante, 10
Bronquitis infecciosa 7.5 No Detectado
Ucarsan tienen actividad Virus de Gumboro 5 7.3 No Detectado
viricida. Influenza aviar 5 6.7 No Detectado
Enfermedad de NewCastle 5 6.7 No Detectado

Para emular las ms adversas condiciones de campo, las
diluciones desinfectantes se prepararon con aguas extremada-
mente duras, el mismo da de la elaboracin de la prueba, si-
guiendo las recomendaciones del Official Methods of Analisis
of the Association of Official Analytical Chemists, Method
4.024, 14th. edition, 1984, pp 70-71. (Tabla 1).
En base a las caractersticas estructurales de cada virus se
establecieron los niveles mnimos de sustancia activa
desinfectante que podran tener accin viricida (Tabla 1).
Las pelculas virales fueron preparadas distribuyendo, en el
fondo de una placa Petri estril, 0.2 ml de la suspensin viral
concentrada. Las placas fueron mantenidas a temperatura
ambiente (23o C) hasta que se observ que la pelcula viral se
secara completamente (aproximadamente 45 minutos). A
continuacin fueron incubadas a 35o-37o C en un horno seco,
por 30 minutos, para eliminar la mayor cantidad de humedad
posible.
Posteriormente estas pelculas fueron tratadas a tempe-
ratura ambiente (23o C), con 2 ml de la solucin desinfectante.
A continuacin, del fondo de la placa se obtuvo una muestra
mediante un raspado con una esptula de caucho estril. Una
alicuota de esta mezcla virus-desinfectante fue suspendida en
una solucin de PBS (Salina Fosfatada Tamponada) e
inmediatamente aadida a una columna Sephadex (J.AOAC
53:1229-1236, 1970), separndose el virus del desinfectante
para su evaluacin en las pruebas de infectividad y citotoxicidad.
Tabla No 2.
Las pelculas virales control fueron elaboradas en forma
paralela, re-suspendiendo una pelcula viral no tratada con
desinfectante en 2 ml de PBS. Una alicuota de esta suspensin
fue aadida a la columna Sephadex a fin de separar el virus, el
cual fue utilizado para realizar la prueba de infectividad y
citotoxicidad.
Resultados
No se detect infectividad de la mezcla virus-desinfectante
a la dilucin no txica ms baja. La reduccin en el ttulo viral
de todos los virus evaluados fue al menos de tres logaritmos de
magnitud. En todos los casos no se detectaron partculas virales
viables.
Conclusiones
* Bajo las condiciones de investigacin y segn la metodologa
seguida, dosis de 500 ppm y 1,000 ppm de glutaraldehdo,
provedo por el desinfectante Ucarsan, tienen actividad
viricida.
* Virus sometidos a la accin de 500 ppm, fueron inactivados
en el doble del tiempo requerido por aquellos virus sometidos
a 1,000 ppm de principio activo.
Bibliografa
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